專利名稱：：用于誘導(dǎo)治療應(yīng)答的組合物的制作方法用于誘導(dǎo)治療應(yīng)答的組合物發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及組合物，其用于將特定細(xì)胞吸引到體內(nèi)某一部位并用于刺激被吸引的細(xì)胞和局部的常住細(xì)胞以達(dá)到期望的治療。更具體地，本發(fā)明涉及組合物，其用于(l)使體內(nèi)受損或受傷的組織部位的細(xì)胞和組織再生，或者(2)誘導(dǎo)對癌的細(xì)胞免疫應(yīng)答。將該組合物沉積在受損的組織部位或腫瘤部位可有效地吸引必需的細(xì)胞，在組織修復(fù)的情況下，使細(xì)胞和組織再生，從而在受損的組織區(qū)域內(nèi)促進(jìn)準(zhǔn)正常功能和血液流動，或者，在癌癥免疫療法的情況下，影響腫瘤組織的破壞。本發(fā)明也提供了一種用于將組合物沉積到體內(nèi)一預(yù)期部位的設(shè)備。發(fā)明背景惡化、壞死及繼發(fā)的功能損失或纖維化，例如，本文通稱為"組織損害"或"組織損傷"，可能由疾病或傷害引起。例如，心肌壞死和成纖維細(xì)胞增殖可能由冠狀動脈閉塞造成的局部缺血引起。此外，中風(fēng)造成的局部缺血可引起大腦惡化和壞死。組織損傷也可以是多種疾病的一部分，包括糖尿病、多發(fā)性硬化、硬化、腎衰竭等。損傷也可以由外科手術(shù)或機(jī)體傷害造成的組織中斷引起。機(jī)體提供了組織修復(fù)機(jī)理，涉及到凝血過程和免疫系統(tǒng)的成分之間的相互作用。組織修復(fù)過程通常分為三階段:(l)發(fā)炎；(2)增殖；和(3)重塑。盡管這些階段被定義為不同的事件，但是它們作為一個連續(xù)統(tǒng)一體出現(xiàn)，并且從一個階段移到另一階段的組織修復(fù)點(diǎn)是人為的。然而，內(nèi)源性組織修復(fù)機(jī)理在一些組織損害中不存在或不足以影響組織的完全恢復(fù)。例如，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中對軸突的傷害引起永久性損害，其中，用于恢復(fù)組織功能的神經(jīng)元不能再生。I型糖尿病、肝硬化、充血性心力衰竭、骨骼肌萎縮、帕金森病、脊髓損傷為可引起組織功能損失的其它實(shí)例。來自疾病傷害或遺傳缺陷的要害器官組織的死亡可導(dǎo)致器官功能全部或局部喪失，并且功能喪失經(jīng)常是不可修復(fù)和不可逆的。局部缺血事件為相當(dāng)多的組織損害的另一原因。導(dǎo)致組織損害的局部缺血事件引起心肌梗塞、中風(fēng)、骨骼肌梗塞和其它病癥。當(dāng)前的治療方法均不能治愈這些癥狀或促進(jìn)受傷的，例如，壞死的、喪失的或纖維化的非功能組織再生。因此，強(qiáng)烈需要可促進(jìn)組織再生的機(jī)理。特別是希望提供可重建組織的組合物和方法，其可與未受損的組織結(jié)合以促進(jìn)在受損的組織區(qū)域內(nèi)或附近的血液流動，并許可組織的準(zhǔn)正常功能。也需要用于治療癌癥的改進(jìn)的組合物和方法。癌癥可以出現(xiàn)在機(jī)體的許多組織和器官中，并通常涉及原發(fā)性腫瘤，其可以釋放通過血管或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移性的細(xì)胞。當(dāng)腫瘤一旦形成時，除去腫瘤需要在不殺害患者的前提下破壞或移走所有的惡性細(xì)胞。當(dāng)前，典型地通過手術(shù)切除、化療、放療或免疫療法來治療原發(fā)性腫瘤和轉(zhuǎn)移。手術(shù)治療經(jīng)常由于不易接近器官內(nèi)的一些腫瘤塊而受阻，如腦、肝、肺和胰腺。也很難根除每個癌細(xì)胞，這是由于外科手術(shù)不能移走每個轉(zhuǎn)移，并且可殺死癌細(xì)胞的治療對正常細(xì)胞也是有害的。如果少數(shù)癌細(xì)胞殘留的話，它們可以增殖使疾病復(fù)發(fā)(resergence)，并且不象正常細(xì)胞，它們可能對用于對抗它們的治療劑發(fā)生抗藥性。因此，外科手術(shù)、化療或放療都不能對疾病復(fù)發(fā)提供持久的免疫性。刺激免疫系統(tǒng)以識別和破壞癌細(xì)胞提供了一種損傷性較小但更有效長期的癌癥治療方法。動物實(shí)驗(yàn)提供了對腫瘤的免疫應(yīng)答證據(jù)，并已表明T淋巴細(xì)胞為腫瘤免疫性的介體。基于對免疫應(yīng)答更好的理解，對抗原表達(dá)和T細(xì)胞活化所涉及的分子的理解進(jìn)展已提供了新的免疫治療策略。盡管在許多動物腫瘤系統(tǒng)中癌的免疫療法已顯示了具有前景的結(jié)果，但免疫療法的臨床試驗(yàn)的成功結(jié)果不一至夂(Janeway，C.eta/.,Immunobiology:7T^7m畫"e/wi/eaMZ)^ose，5thEdition,GarlandSciencePublishing,2001)。腫瘤浸潤的淋巴細(xì)胞(TIL)通常被視為免疫活性宿主對提呈可識別的腫瘤抗原的腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性劑。然而，腫瘤細(xì)胞已發(fā)展了許多策略以預(yù)防宿主的免疫識別。因此，需要一種機(jī)理，其可在原發(fā)性惡性腫瘤或轉(zhuǎn)移部位促進(jìn)腫瘤抗原識別，并形成對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性應(yīng)答。也需要促進(jìn)細(xì)胞毒性細(xì)胞對腫瘤的滲透。特別是需要促進(jìn)不能通過外科手術(shù)或放療治療的遠(yuǎn)處腫瘤塊的這些現(xiàn)象。發(fā)明概述一方面，本發(fā)明包括用于誘導(dǎo)細(xì)胞應(yīng)答的組合物，其包括可有效地將一個或多個預(yù)期的細(xì)胞吸引到組織部位的第一試劑；可有效地刺激所述細(xì)胞的活性的第二試劑；以及可有效地影響所述細(xì)胞的存活的第三試劑。在一種實(shí)施例中，組合物用于促進(jìn)細(xì)胞和/或組織再生，并且所述第一試劑可有效地將一個或多個干細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞(accessorycells)吸引到組織部位。在另一種實(shí)施例中，所述組合物用于誘導(dǎo)對腫瘤的免疫應(yīng)答，并且所述第一試劑可有效地吸引一個或多個選自T-淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、分葉核白細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的細(xì)胞。在一種實(shí)施例中，所述第二試劑可有效地刺激選自增殖和分化的活性。在多種實(shí)施例中，用于誘導(dǎo)治療應(yīng)答的組織為骨骼肌、肝、胰腺、腦、心肌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)或腫瘤組織。在一種實(shí)施例中，所述組織為心肌組織(cardiactissue),所述第一試劑可吸引選自循環(huán)血單核細(xì)胞、循環(huán)血管生成細(xì)胞或循環(huán)動脈生成細(xì)胞的細(xì)胞；所述第二試劑可刺激從所述細(xì)胞中釋放因子，以促進(jìn)血管生成和/或動脈生成;所述第三試劑可影響位于心肌組織中的循環(huán)血單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞的存活。在一種實(shí)施例中，所述第一試劑選自巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5、活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子(Fraktalkines)、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a、MIP-l-卩、N-法呢基肽(N-famesylpeptides).補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子(3(TGF-p)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群刺激因子-l(CSF-l)或巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF)。在另一種實(shí)施例中，所述第二試劑選自巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5、腫瘤壞死因子(TNF)-a、TNF-p、活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-ouMIP-l-(3、N-法呢基肽(N-farnesylpeptides)補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子|3(TGF-p)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群剌激因子(G-CSF)、集群刺激因子-l(CSF-1)、巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF)和脂多糖。在其它實(shí)施例中，所述第三試劑選自GM-CSF、G畫CSF、CSF-1和M-CSF。在另一種實(shí)施例中，所述組合物設(shè)計(jì)成可誘導(dǎo)腫瘤的治療應(yīng)答。在該實(shí)施例中，所述第一試劑選自IL-8、MIG、IL-12、MCP-1、-2、-3、-4、-5、MIP-la、MIP-1J3、MIP-1y禾qRANTES。所述第二試劑選自GM-CSF和IL-12。所述第三試劑選自MIG、血小板因子4、MCP-1、-2、-3和MIP-ly。這些試劑從該組合物中同時釋放，或者在另一種實(shí)施例中連續(xù)釋放。含有多種試劑的儲藥庫可以由聚合物形成，包括可生物降解的和非生物降解的。在其它實(shí)施例中，該儲藥庫含有一個耙向配體，如與儲藥庫的外表面連接的細(xì)胞粘附分子。所述儲藥庫組合物可以被制成一種例如選自乳劑、凝膠、糊狀或液體的劑型。在另一方面，本發(fā)明含有一種用于在特定的組織部位誘導(dǎo)治療應(yīng)答的方法，其通過在所選的組織部位內(nèi)或附近沉積如上所述的包括一個或多個儲藥庫的組合物，該儲藥庫含有一種或多種可有效地誘導(dǎo)預(yù)期應(yīng)答的治療劑。簡言之，所述儲藥庫包含一種或多種試劑，該試劑可有效地(i)將一個或多個選自祖細(xì)胞、輔佐細(xì)胞、T-淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、分葉核白細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞的干細(xì)胞吸引到組織部位；(ii)刺激被吸引的一個或多個細(xì)胞，使其具有一種選自增殖和分化的活性;(iii)影響組織中被吸引的一個或多個細(xì)胞的存活。在一種實(shí)施例中，所述組織為心肌組織，并且所述沉積可有效地促進(jìn)動脈生成和/或血管生成。在另一種實(shí)施例中，所述組織為腫瘤塊，所述沉積可有效地將細(xì)胞毒性細(xì)胞吸引到腫瘤。另一方面，本發(fā)明包括一種用于促進(jìn)細(xì)胞和/或組織再生的方法。該方法包括在所選的組織部位內(nèi)或附近沉積含有一種或多種治療劑的一個或多個儲藥庫，該治療劑可有效地(i)將一個或多個干細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞吸引到組織部位；(ii)直接刺激局部和被吸引的細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)成分,從局部和被吸引的細(xì)胞中釋放可促進(jìn)細(xì)胞和/或組織再生的生物試劑；以及(iii)影響所述組織中被吸引的和局部再生細(xì)胞的存活。在一種實(shí)施例中,在組織部位沉積的儲藥庫含有一種或多種生物試劑。在另一種實(shí)施例中，給藥組合物以再生受損的實(shí)質(zhì)組織。組織的一種實(shí)例為心肌組織,例如，在那里促進(jìn)動脈生成和/或血管生成。在一種用于再生心肌的實(shí)施例中，在儲藥庫中包含的生物試劑包括(i)第一試劑，可有效地吸引選自循環(huán)血單核細(xì)胞、循環(huán)血管生成細(xì)胞和循環(huán)動脈生成細(xì)胞的細(xì)胞；(ii)第二試劑，可有效地剌激釋放促進(jìn)血管生成和/或動脈生成的因子；以及(iii)第三試劑，可有效地影響在心肌組織中存在的循環(huán)血單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞的存活。在一種實(shí)施例中，所述第一試劑為肽，可有效地吸引祖細(xì)胞、干細(xì)胞，并優(yōu)選輔佐細(xì)胞。所述第一試劑可以為巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5、活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a、MIP-1-P、N-法呢基肽(N-famesylpeptides)補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子(3(TGF-卩)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群剌激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群剌激因子-l(CSF-l)或巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF),及其功能相當(dāng)?shù)钠?。在一種實(shí)施例中，所述第二試劑可有效地刺激被吸引的細(xì)胞和/或局部再生細(xì)胞。第二試劑的實(shí)例包含巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5、腫瘤壞死因子(TNF)-a、TNF-卩、活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a、MIP-l-p、N-法呢基肽(N-farnesylpeptides)C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子卩(TGF-P)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群剌激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群刺激因子-l(CSF-l)、巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF)、脂多糖，及其功能相當(dāng)?shù)钠?。在一種實(shí)施例中，所述第三生物試劑選自GM-CSF、G-CSF、CSF-1、M-CSF，及其功能相當(dāng)?shù)钠?。在儲藥庫中包含的生物試劑的其它?shí)例包括成纖維細(xì)胞生長因子(FGF、FGF-1、FGF-2)、TGF-a、類胰島素生長因子(IGF-1)、血管生成素-1、血管生成素-2、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、VEGF構(gòu)成物如VEGF-2、VEGF165禾nVEGF121、血小板衍生生長因子(PDGF)-A、PDGF-B、PDGF-BB、內(nèi)皮促有絲分裂生長因子，及其功能相當(dāng)?shù)钠?。預(yù)期采用該方法治療的組織包括，例如，骨骼肌、肝、胰腺、腦、心肌和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。在一種實(shí)施例中，所述儲藥庫具有連接到該儲藥庫外表面的生物配體。配體的實(shí)例包含細(xì)胞粘附分子。在另一種實(shí)施例中，所述儲藥庫由可生物降解的聚合物或非生物降解的聚合物制成。在另一種實(shí)施例中，所述儲藥庫包括成泡類脂，或者被制成一種選自乳劑、凝膠、糊狀和液體的劑型。在一些實(shí)施例中，所述儲藥庫可以沉積到組織間隙,它們在那里具有可動性。在另一方面，本發(fā)明包含一種用于促進(jìn)細(xì)胞和/或組織再生的組合物，其包括可有效地將一個或多個干細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞吸引到所述組織的第一試劑；；可有效地刺激所述細(xì)胞和/或局部再生的細(xì)胞的活性的第二試劑；以及可有效地影響所述細(xì)胞的存活的第三試劑。在一種實(shí)施例中,試劑從組合物中同時釋放。在另一種實(shí)施例中,試劑從組合物中連續(xù)釋放在另一實(shí)施例中,試劑被包裹在球形儲藥庫中。在一些實(shí)施例中，所述儲藥庫可以具有一個附著于外表面的生物配體。配體的實(shí)例為細(xì)胞粘附分子。在另一方面，本發(fā)明包含有一種用于將免疫細(xì)胞吸引到一個部位以促進(jìn)破壞癌細(xì)胞的組合物。該方法包括在所選的部位內(nèi)或附近沉積含有一種或多種治療劑的一個或多個儲藥庫，該治療劑可有效地(i)將一個或多個淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞(包括樹突狀細(xì)胞)、炎性細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞吸引到組織部位；(ii)直接刺激局部和被吸引的細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)成分，并從所述局部和被吸引的細(xì)胞中釋放可促進(jìn)對癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性的生物試劑；以及(iii)影響所述組織中被吸引的和局部再生細(xì)胞的存活，并促進(jìn)對癌細(xì)胞的免疫原應(yīng)答。在一種實(shí)施例中，儲藥庫含有的生物試劑可實(shí)現(xiàn)以下功能(i)將淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞(包括樹突狀細(xì)胞)和炎性細(xì)胞，包括來自血流、淋巴管和附近組織的多形核(polymoronuclear)白細(xì)胞化學(xué)吸引進(jìn)入腫瘤塊的中央?yún)^(qū)域；(ii)通過抗原提呈細(xì)胞刺激腫瘤抗原提呈到淋巴細(xì)胞，以形成直接對抗機(jī)體內(nèi)所有腫瘤細(xì)胞的系統(tǒng)性細(xì)胞免疫應(yīng)答(以細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的形式)，包括存在于接收到組合物的腫瘤細(xì)胞以及機(jī)體的其它腫瘤塊中的腫瘤細(xì)胞；以及(iii)增強(qiáng)被吸引的和局部原有的細(xì)胞的存活，以促進(jìn)對癌細(xì)胞的免役原應(yīng)答，包括促使細(xì)胞毒性和自然殺傷TIL運(yùn)輸?shù)侥[瘤塊，從而引起腫瘤細(xì)胞破壞。在一種實(shí)施例中，通過在儲藥庫中包含的一種或多種化學(xué)吸引劑實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞的化學(xué)吸引，化學(xué)吸引劑選自IL-8、MIG、IL-12、MCP-1、-2、隱3、隱4、-5、MIP-la、MIP-ip、MIP-ly和RANTES。在另一種實(shí)施例中，所述儲藥庫包括一種選自GM-CSF或IL-12的刺激劑。在另一實(shí)施例中，在所述儲藥庫中用于促進(jìn)被吸引細(xì)胞的存活并用于促進(jìn)對腫瘤的免役治療應(yīng)答的第三試劑為選自MIG、血小板因子4、MCP-1、-2、-3或MIP-lY的一種或多種試劑。另一方面，本發(fā)明也包括一種用于傳送組合物的設(shè)備，特別是傳遞如上所述的組合物。所述設(shè)備包括一個導(dǎo)管軸，其具有從中延伸并終止于端口處的內(nèi)腔；一個至少局部柔性的遠(yuǎn)端域，一個至少局部堅(jiān)硬的近端；一個單軌部分，其設(shè)置成靠近導(dǎo)管軸遠(yuǎn)端并具有導(dǎo)絲接合部;一個用戶界面，具有的遠(yuǎn)端和近端，在界面遠(yuǎn)端被剛性連接到導(dǎo)管軸近端；以及一個外殼，其被連接到界面的近端，用于容納可移動的活塞。在一種實(shí)施例中，所述設(shè)備還可以包括一個針，其至少部分設(shè)置在未展開狀態(tài)的導(dǎo)管軸中，并可以從展開狀態(tài)的導(dǎo)管軸展開。所述針可以為直的或彎曲的。在另一種實(shí)施例中，導(dǎo)絲接合部還包括一個腔內(nèi)鋪砌(endoluminalpaving)設(shè)備，用于沿管壁或體腔沉積組合物。在該實(shí)施例中，腔內(nèi)鋪砌設(shè)備具有伸長的柔性杯，其具有的中心腔用于從導(dǎo)管軸端口接收組合物。此外，在該實(shí)施例中，導(dǎo)管軸端口設(shè)置成鄰近腔內(nèi)鋪砌設(shè)備并將組合物傳送到腔內(nèi)鋪砌設(shè)備。腔內(nèi)鋪砌設(shè)備可以包含至少一個上孔和一個下孔，用于將導(dǎo)絲通過杯引入。優(yōu)選地，該腔內(nèi)鋪砌設(shè)備使用螺旋形導(dǎo)絲。所述設(shè)備也可以包括一個組分管，至少部分延伸通過軸遠(yuǎn)端域。所述組分管可以包括一個熱塑性彈性體和金屬絲編織物。在一種實(shí)施例中，所述組分管與針的近端接觸。在另一種實(shí)施例中，所述組分管粘附到針的近端。導(dǎo)管軸近端還可以包括一個加固的軸部，與用戶界面遠(yuǎn)端的接觸。所述設(shè)備還可以包括至少一個附管，其至少部分通過軸近端區(qū)域延伸。在一種實(shí)施例中，所述設(shè)備含有至少兩個附管，以賦予導(dǎo)管軸的近端區(qū)域結(jié)構(gòu)支撐或穩(wěn)定性。所述遠(yuǎn)端域和近端區(qū)域可以在過渡區(qū)連在一起。在一種實(shí)施例中，該過渡區(qū)由熔化的加熱成型的熱塑性彈性體形成，橫跨近和遠(yuǎn)端域。在另一種實(shí)施例中，過渡區(qū)含有一個接頭，連接在所述組分管的遠(yuǎn)端和至少一個附管的近端。所述藥物傳送設(shè)備還可以包括至少一個氣球，設(shè)置在單軌部分的遠(yuǎn)端上。在一種實(shí)施例中，至少一個氣球包括至少兩個設(shè)置在單軌部分的相對側(cè)上的氣球。在另一種實(shí)施例中，至少一個所述至少一個氣球當(dāng)膨脹時具有雙錐形。所述設(shè)備還可以在導(dǎo)管軸中包括一個或多個通道，其用于引入并除去流體，尤其是來往于氣球的流體。在另一方面，本發(fā)明含有一種用于傳送組合物的傳送設(shè)備，其包括(i)導(dǎo)管軸，其具有從中延伸到端口的內(nèi)腔，一個至少局部柔性的遠(yuǎn)端域,至少局部剛性的近端，其設(shè)置在末端和近區(qū)域之間的過渡區(qū)，以及在近端的加固軸部，(ii)一個單軌部分，設(shè)置成鄰近導(dǎo)管軸的遠(yuǎn)端并具有導(dǎo)絲接合部,(iii)一個用戶界面，其具有遠(yuǎn)端和近端，并在界面遠(yuǎn)端被剛性連接到導(dǎo)管軸近端，以及(iv)—個用于容納可移動的活塞的連接到界面近端的外殼。所述設(shè)備含有一個至少部分延伸通過近軸區(qū)域并在過渡區(qū)終止的組分管。所述設(shè)備含有至少一個附管，其至少部分延伸通過導(dǎo)管軸的近端區(qū)域。結(jié)合附圖，通過閱讀本發(fā)明的下述詳細(xì)說明，將會更加充分地理解本發(fā)明的這些和其它目的和特征。圖1為由于沉積根據(jù)本發(fā)明的組合物而引起細(xì)胞水平上的組織再生過程的全景圖；圖2為在組合物中使用的一種可效仿的儲藥庫的表面和橫截面斜視詳圖；圖3為一種可效仿的儲藥庫沉積設(shè)備的平面圖；圖4為圖3中設(shè)備的導(dǎo)管軸的平面詳圖；圖5A-5C為導(dǎo)管軸遠(yuǎn)端部分的詳圖，顯示了單軌部分中的導(dǎo)絲接合(圖5A)和用于穿透組織的針尖(圖5B、5C);圖6A-6B為通過圖5C中的線6A-6A和6B-6B的橫向橫截面圖；圖7A-7B顯示了氣球形導(dǎo)管的實(shí)施例，其具有雙錐形氣球外形(圖7A)和兩個球形氣球(圖7B);圖7C-7D為氣球形導(dǎo)管的實(shí)施例圖，顯示了提供血管中穿透組織的針的雙錐形氣球(圖7C)和兩個球形氣球(圖7D)的位置；圖8A-8B為圖4中A區(qū)域的針被縮回(圖8A)以及從導(dǎo)管軸伸出(圖8B)的橫截面圖；圖9A為圖4中B區(qū)域的橫截面圖；圖9B為通過圖9A中線F-F的橫截面圖；圖9C-9D為類似于圖9B的橫截面圖，但設(shè)備中帶有雙錐形氣球(如圖7A所述)或帶有兩個球形氣球(如圖7B所述)；圖10為圖4中D區(qū)域的縱向橫截面；圖11為圖4中C區(qū)域的縱向橫截面；圖12為圖4中E區(qū)域的縱向橫截面；圖13說明了使用設(shè)備將儲藥庫制劑的大丸藥沉積到局部缺血部位處的心肌內(nèi)；圖14A-14C顯示了一種供選的實(shí)施例，其中，螺旋形導(dǎo)絲用于使設(shè)備前進(jìn)以及定位用于穿透組織的針；圖15為設(shè)備的用戶界面的頂視全圖；圖16A和16B為圖15所示的用戶界面的側(cè)視圖(圖16A)和斜視圖(圖16B);圖17A-17B為用戶界面的斜視圖，顯示了在其取出位置的近端(圖17A)和在其取出位置并旋轉(zhuǎn)9(T;以及圖18A-18D為用于沿體內(nèi)的管或腔壁沉積組合物的腔內(nèi)鋪砌設(shè)備的多種視圖。發(fā)明詳述I.定義本文所用的"組織"指體內(nèi)或體外的一個完整器官、一個器官碎片，或兩個或多個細(xì)胞。本文所用的"實(shí)質(zhì)組織"指特定的功能組織，其不同于特定的器官。例如，心臟的實(shí)質(zhì)組織為心肌，由心肌纖維及其血管系統(tǒng)組成。此外,肝的實(shí)質(zhì)組織主要由肝細(xì)胞組成。"惡化"指細(xì)胞和組織中響應(yīng)于多種損傷的可逆變化。這些損傷包含暴露到有害試劑(化學(xué)的和生物的)和包含壓力和極冷極熱的物理因素中。長時間地或強(qiáng)烈地暴露于上述損傷可引起細(xì)胞死亡和壞死。"壞死"指細(xì)胞死亡后細(xì)胞中的形態(tài)學(xué)變化。因此，"壞死的組織"包括形態(tài)學(xué)上壞死的細(xì)胞。本文所用的"組織損害"指多種損傷對組織的一種或多種影響；這些影響包含實(shí)質(zhì)組織細(xì)胞惡化、細(xì)胞死亡、壞死、組織缺失和成纖維細(xì)胞的或神經(jīng)膠質(zhì)的疤痕。本文所用的"干細(xì)胞"通常指一種特定的細(xì)胞類型，其具有自我更新并生成特定的細(xì)胞類型的特殊能力。盡管機(jī)體的大多數(shù)細(xì)胞，如心肌細(xì)胞或皮膚細(xì)胞，執(zhí)行特定功能，而干細(xì)胞直到接收到分化為特定細(xì)胞的信號才執(zhí)行功能。干細(xì)胞可以進(jìn)行自身復(fù)制，并且也可以演化成具有特征形態(tài)和特定功能的成熟細(xì)胞。典型地，干細(xì)胞在它們達(dá)到其完全分化之前產(chǎn)生中間的細(xì)胞類型。該中間細(xì)胞被稱為前體或祖細(xì)胞。干細(xì)胞可以通過有絲分裂自我更新，并且也可以(通過有絲分裂)生成能夠分化為成年個體中的準(zhǔn)功能組織細(xì)胞成分的祖細(xì)胞。本文所用的干細(xì)胞包含成年干細(xì)胞，其為未分化的細(xì)胞，遍及成年個體的機(jī)體分布在多種分化組織中，包括外圍血、血液和骨髓來源的造血的、基質(zhì)的和間質(zhì)的干細(xì)胞。例如，存在于成年骨髓中的造血干細(xì)胞可以以高度分化的浦肯野細(xì)胞神經(jīng)元填充大腦皮層，其對于正常的皮層神經(jīng)線路功能是重要的(附《era"a/"5We"ce，297:2256(2002))。如本文所用的，"祖細(xì)胞"指能夠參與健康組織再生過程的細(xì)胞。"祖細(xì)胞"為來自干細(xì)胞有絲分裂的子細(xì)胞。這些細(xì)胞通過在分化過程(被多種試劑刺激)中承擔(dān)不同任務(wù)而不同于干細(xì)胞，其產(chǎn)生細(xì)胞系的部分分化家族。這些細(xì)胞系最后再生出完全分化的并具有通常所述組織的實(shí)質(zhì)中的特定表現(xiàn)型的特定細(xì)胞。例如，心肌細(xì)胞、骨骼成肌細(xì)胞、胰腺的a、J3、y細(xì)胞、肝細(xì)胞、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元、大神經(jīng)膠質(zhì)、少突神經(jīng)膠質(zhì)，和小膠質(zhì)細(xì)胞都可以來自于骨髓干細(xì)胞和局部組織來源的成年干細(xì)胞，并保留在特定器官的分化組織中。所述列表僅為舉例性的，不作為限制，但是這些細(xì)胞中的每一種都具有啟動組織再生的能力。祖細(xì)胞的其它實(shí)例為成年腦中的局部分化細(xì)胞，其為位于特定區(qū)域(例如，海馬的齒狀回和亞室區(qū))中的神經(jīng)系統(tǒng)成年干細(xì)胞的子體。這些部分分化的細(xì)胞遷移到腦的邊遠(yuǎn)部位。在所述的邊遠(yuǎn)部位，這些細(xì)胞即可變?yōu)橥耆只纳窠?jīng)元也可變?yōu)槟z質(zhì)細(xì)胞的特定類型。神經(jīng)元在神經(jīng)回路路內(nèi)發(fā)揮正常的功能。膠質(zhì)細(xì)胞履行神經(jīng)膠質(zhì)類特有的分化功能。例如，少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞生成髓鞘，其為CNS中的一種基本的細(xì)胞外基質(zhì)成分，可電絕緣神經(jīng)元的軸突。衛(wèi)星細(xì)胞為骨骼肌纖維的組細(xì)胞，并且典型地位于分化的肌纖維表面附近。衛(wèi)星細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂并融合以組成分化的多核肌纖維。通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)吸引劑，祖細(xì)胞可以被吸引到所研究的特定組織區(qū)域，以開始健康組織的再生過程。本文所用的"輔佐細(xì)胞"指涉及實(shí)質(zhì)細(xì)胞再生的細(xì)胞，但其不是實(shí)質(zhì)細(xì)胞、干細(xì)胞或?qū)嵸|(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞；輔佐細(xì)胞合成并分泌可刺激干細(xì)胞和祖細(xì)胞生物因子，例如，骨髓基質(zhì)細(xì)胞，發(fā)揮輔佐細(xì)胞的功能，產(chǎn)生可預(yù)防神經(jīng)元凋亡的肝細(xì)胞生長因子(HGF)，以及神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)和腦衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，所有這些都刺激神經(jīng)元祖細(xì)胞的增殖和分化，并抑制分化的神經(jīng)元的凋亡；輔佐細(xì)胞合成并分泌對實(shí)質(zhì)組織的功能性構(gòu)架所必需的細(xì)胞外基質(zhì)成分；輔佐細(xì)胞合成并分泌可修飾和再塑細(xì)胞外基質(zhì)的生物試劑，以促進(jìn)受損的組織再生實(shí)質(zhì)；輔佐細(xì)胞的實(shí)例包括但不局限于以下(a)來自循環(huán)血單核細(xì)胞的組織巨噬細(xì)胞；(b)骨髓基質(zhì)細(xì)胞，其在再生組織中其可生成間質(zhì)細(xì)胞;(c)位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的小膠質(zhì)細(xì)胞。本文所用的"刺激"或刺激被吸引的細(xì)胞或局部再生細(xì)胞"指誘導(dǎo)多種與受刺激細(xì)胞有關(guān)的活性和現(xiàn)象。這些活性和現(xiàn)象包含(i)組織內(nèi)的運(yùn)動性增加；(ii)從一個組織到另一個組織的運(yùn)動性增加(例如，從骨髓釋放干細(xì)胞進(jìn)入血流并隨后進(jìn)入遠(yuǎn)處的組織)；(iii)將細(xì)胞粘附到其它細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞粘附配體;(iv)刺激DNA的復(fù)制和有絲分裂；(v)刺激細(xì)胞因子的合成和分泌；(vi)剌激趨化因子的合成和分泌；(vii)刺激細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成和分泌；(viii)抑制凋亡；(ix)預(yù)防變性試劑的影響(例如，抗氧化作用)；(x)刺激可降解細(xì)胞外基質(zhì)的因子的合成和分泌(例如，通過組織巨噬細(xì)胞刺激釋放基質(zhì)金屬蛋白酶，以便在細(xì)胞外基質(zhì)中生成空間，用于再生局部缺血損傷的細(xì)動脈以及用于細(xì)胞遷移)；(xi)誘導(dǎo)分化細(xì)胞間細(xì)胞連接構(gòu)架的可塑性；例如，己知基質(zhì)細(xì)胞衍生因子l-a(SDF-la)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)可直接作用于分化的CNS神經(jīng)元，以便在對神經(jīng)元毒性損害發(fā)生再生應(yīng)答時引起突觸連接重排；(xii)促進(jìn)祖細(xì)胞和干細(xì)胞分化為功能完全的實(shí)質(zhì)細(xì)胞；(xiii)調(diào)制和控制再生的實(shí)質(zhì)組織中多種不同細(xì)胞類型的分化；(xiv)從被吸引的細(xì)胞釋放可促進(jìn)血管生成和/或動脈生成的生物試劑；(xv)促進(jìn)干細(xì)胞、祖細(xì)胞、輔佐細(xì)胞或局部再生細(xì)胞的增殖；和/或(xvi)刺激因子、細(xì)胞因子的合成和分泌，所述因子可增加淋巴細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞和癌細(xì)胞的巨噬細(xì)胞的細(xì)胞毒性應(yīng)答。術(shù)語"放置在"和術(shù)語"沉積"與被"放置在"或"沉積"在特定的組織區(qū)域中的組合物一起使用，指在預(yù)期部位內(nèi)或附近引入所述組合物。該組合物可以直接被放置在組織中的靶部位,或者可以被放置在耙組織部位附近的體腔中。例如，放置于心臟的組織部位包括在心包腔(壁與包裹心臟的內(nèi)膜之間的空間)內(nèi)沉積組合物以及在心臟組織(心肌)內(nèi)或上沉積組合物。當(dāng)試劑不僅可以從細(xì)胞中刺激釋放有效物質(zhì)，并且也可以誘導(dǎo)祖細(xì)胞發(fā)生有絲分裂、祖細(xì)胞分化、協(xié)調(diào)不同細(xì)胞系的分化或改造細(xì)胞外基質(zhì)時，稱該試劑對細(xì)胞具有"直接"影響。本文所用的"血管生成"指可引起形成新毛細(xì)血管網(wǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞形成。本文所用的"動脈生成"指動脈的原位生長，其通過從先前存在的小動脈結(jié)締組織(connection)中增殖內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞將血供應(yīng)到局部缺血組織、腫瘤或發(fā)炎部位。"局部缺血組織"、"處于局部缺血的組織"指組織、腫瘤或發(fā)炎部位經(jīng)歷供血不足或處于供血不足。"局部缺血"或"局部缺血事件"指對特定的細(xì)胞、組織或器官供血不足。供血減少的結(jié)果是對器官或組織供氧不足(組織缺氧)。長期的組織缺氧可能引起對受影響的器官或組織的傷害。"缺氧癥"實(shí)際上指在器官或組織中完全不存在氧氣，如果是長時間的話，其可引起細(xì)胞、器官或組織死亡。"組織缺氧"或"含氧量低的條件"指在該條件下，細(xì)胞、器官或組織接受的供氧不充分。II.用于組織再生和癌免疫療法的組合物一方面，本發(fā)明含有一種組合物，其適合于體內(nèi)給藥到一個組織部位，該部位已持續(xù)細(xì)胞變性或細(xì)胞和組織死亡或壞死、組織缺失、或壞死后成纖維細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)的疤痕，或者所有的這些影響，或者處于這些影響中的任何一個、任何兩個或多個、或全部的危險中。更簡單地說，該組合物適用于損傷后或處于損傷中的組織。所述組合物包括第一試劑，可有效地將至少一個干細(xì)胞和祖細(xì)胞吸引到組織損傷區(qū)域;第二試劑，可有效地刺激被吸引細(xì)胞的活性；和第三試劑，可有效地影響被吸引細(xì)胞的存活，并優(yōu)選影響從被吸引細(xì)胞分化的細(xì)胞的存活。在一些實(shí)施例中，所述第一試劑還將吸引輔佐細(xì)胞。如以下將進(jìn)一步描述的，第一、第二和第三試劑取決于組織類型和被吸引到所述部位的干細(xì)胞或祖細(xì)胞，以及任選的輔佐細(xì)胞。以上提到的所有細(xì)胞為自體同源的。所有的細(xì)胞通過正常存在于機(jī)體中的管道轉(zhuǎn)移到被研究的組織部位中，其包括血液和淋巴管系統(tǒng)、腦脊髓液系統(tǒng)以及機(jī)體組織中的間隙。如上所示，組合物可廣泛地用于多種損傷后或處于損傷危險中的組織，并且下面提供了專用于特定組織的組合物實(shí)例。為了全面詳細(xì)地描述該組合物，結(jié)合圖1提供了沉積在腦組織部位的一種組合物實(shí)例。然而，如從以下公開中所明確的，在圖1中詳細(xì)描述的組合物和過程為腦組織中損傷的實(shí)例，并且一般的廣義概念可應(yīng)用于任何受損的組織。圖1說明了在腦組織部位中沉積要求保護(hù)的組合物后，一種細(xì)胞水平上的簡化的組織再生過程。受損的腦組織，一般以10表示，可以為局部缺血事件的結(jié)果，如中風(fēng)或紊亂，如阿莫氏(Alzheimer)疾病、多發(fā)性硬化、腦膜腦炎，或者是由于物理損傷。組合物沉積在組織部位10或該部位附近，以促進(jìn)受損的或死組織的再生。在該實(shí)施例中，組合物采用儲藥庫的形式，如儲藥庫12、14、16，其設(shè)計(jì)成含有并釋放所選的治療劑。如上面所指出的，所述儲藥庫含有第一治療劑，可有效地將干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞及任選地，輔佐細(xì)胞吸引到組織部位；第二治療劑，可有效地刺激被吸引細(xì)胞的活性；以及第三治療劑，可有效地影響被吸引的，任選地，再生的完全分化細(xì)胞的存活。在一些實(shí)施例中，如以下將進(jìn)一步描述的，同一試劑即可作為化學(xué)吸引劑，例如，作為第一治療劑，又可作為刺激劑和/或存活增強(qiáng)劑。即，在一些情況下,一種單一試劑可以提供第一、第二和第三試劑的一個或多個功能。在特定的說明中，所述儲藥庫12、14、16含有第一試劑，其作為干細(xì)胞的化學(xué)吸引劑，諸如循環(huán)骨髓來源的干細(xì)胞，如毛細(xì)管20附近的細(xì)胞18。作為對儲藥庫釋放的化學(xué)吸引劑而建立的趨化因子梯度的反應(yīng)，干細(xì)胞通過毛細(xì)管內(nèi)皮遷移進(jìn)入附近的組織，如細(xì)胞22所示。被吸引的細(xì)胞可以包含干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞，如單核細(xì)胞和其它能夠幫助組織再生的細(xì)胞。附近的輔佐細(xì)胞，如用巨噬細(xì)胞24所表示的巨噬細(xì)胞，被趨化因子梯度吸引到組織區(qū)域，如25所示。此外，附近組織中的干細(xì)胞或來自于特定干細(xì)胞來源部位的干細(xì)胞被該梯度作用遷移到組織部位。例如，對于腦，成年的神經(jīng)干細(xì)胞，如細(xì)胞26，來自于海馬的齒狀回或亞室區(qū)，被吸引到該區(qū)域。通過趨化因子將細(xì)胞吸引到所述儲藥庫中的整體結(jié)果是在儲藥庫附近沉積的干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞的濃度增加，在一些情況下，輔佐細(xì)胞的濃度增加，如圖1所示。在一些實(shí)施例中，組合物中的儲藥庫包含表面配體，其用于與被吸引的或存在于組織部位中的細(xì)胞發(fā)生相互作用。圖1說明了該特征，干細(xì)胞如細(xì)胞28、30吸引到儲藥庫14的細(xì)胞表面。表面連接的配體具有多種功能，并可為被吸引到受損組織部位的細(xì)胞提供連接部位，以便將刺激物生物因子以功能有效的方式提呈到細(xì)胞表面受體，和/或預(yù)防生物因子變性。根據(jù)被治療的組織和對被吸引細(xì)胞的需求而選擇配體。配體的實(shí)例包含細(xì)胞粘附分子、細(xì)胞外基質(zhì)成分，及其片斷。以下提供了用于特定組織的配體的其它實(shí)例。沉積在組織部位的組合物中的儲藥庫含有用于釋放可有效地刺激被吸引的細(xì)胞發(fā)生作用的試劑。圖1顯示了從儲藥庫16中釋放的細(xì)胞因子32，誘導(dǎo)干細(xì)胞34分化為神經(jīng)元錐體細(xì)胞36。連接到儲藥庫14的干細(xì)胞被儲藥庫14中的適當(dāng)剌激劑誘導(dǎo)分化為膠質(zhì)細(xì)胞38(星形細(xì)胞)。此外，刺激吸引到該區(qū)域的巨噬細(xì)胞以產(chǎn)生趨化因子和細(xì)胞因子，如巨噬細(xì)胞40產(chǎn)生細(xì)胞因子42。在剌激劑存在時，其它細(xì)胞被誘導(dǎo)增殖，例如，在細(xì)胞因子48的刺激下，神經(jīng)系統(tǒng)干細(xì)胞46增殖為子細(xì)胞50、52。子細(xì)胞可以進(jìn)一步分化，例如分化為神經(jīng)元錐體細(xì)胞，如箭頭54所示。盡管圖1中未示出，所述儲藥庫也包含一種試劑，其可有效地容許被吸引細(xì)胞的存活或延長被吸引的細(xì)胞和受損組織中再生的完全分化細(xì)胞的平均壽命。適當(dāng)?shù)脑噭?yīng)根據(jù)組織類型和被吸引的細(xì)胞而改變,并且下面給出了用于多種組織的實(shí)施例。根據(jù)所述組合物的另一特征，儲藥庫能夠從最初的沉積部位移動并分散在組織空間中。在圖1中說明了該特征，箭頭27指示儲藥庫12的移動。典型地，這種移動在組織中將以濃度分布、浮力和/或流體移動的結(jié)果出現(xiàn)。圖2為圖1中儲藥庫12內(nèi)A區(qū)域的詳圖。在該實(shí)施例中，儲藥庫12為多孔的，如孔60所示。如以下將進(jìn)一步描述的，預(yù)期組合物的其它實(shí)施例不包括用于容納治療劑的多孔儲藥庫。治療劑被包含在儲藥庫的孔內(nèi)，如細(xì)胞因子62在孔60中，但是也可以容納在孔間的區(qū)域內(nèi)，如儲藥庫的實(shí)心區(qū)域，例如，儲藥庫組合物的分子間的空間內(nèi)。為使被吸引的細(xì)胞保留在儲藥庫附近，細(xì)胞粘附配體，如細(xì)胞粘附肽68,能被并入儲藥庫基質(zhì)中，從而使這些肽中的一部分暴露在儲藥庫表面上，如66所示。預(yù)期的儲藥庫的其它實(shí)施例中，儲藥庫表面涂有包含細(xì)胞粘附肽的組合物，肽將被露出以結(jié)合到細(xì)胞表面受體?？傊?含有一種或多種治療劑的組合物的沉積可有效地(i)將干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞并有選擇的，將輔佐細(xì)胞吸引到損傷后或處于損傷中的組織區(qū)域，(ii)刺激被吸引的細(xì)胞，例如，干細(xì)胞、祖細(xì)胞和/或輔佐細(xì)胞，和/或局部再生的細(xì)胞，以啟動或參與一系列可引起組織再生的事件,以及(iii)促進(jìn)該區(qū)域內(nèi)被吸引的細(xì)胞和其它細(xì)胞的存活，以延長再生組織的活性和壽命。功能組織再生可容許組織的準(zhǔn)正常功能，并且在優(yōu)選的實(shí)施例中，再生的組織將與損傷區(qū)域附近的未受損的健康組織結(jié)合。所述組合物通過在瘢痕的和受損的組織區(qū)域注入活的健康組織細(xì)胞而促進(jìn)組織再生。如從以上內(nèi)容可理解的，所述組合物廣泛地用于受損組織的再生，并且尤其是受損的實(shí)質(zhì)組織?，F(xiàn)在將通過適于特定組織再生的特定組合物來進(jìn)一歩解釋本發(fā)明，這些特定組織由疾病或損傷受損所導(dǎo)致，包含心肌、骨骼肌、肝、胰腺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腎。A.在局部缺血后的組織或處于局部缺血的組織中用于促進(jìn)實(shí)質(zhì)組織再生的組合物在一種實(shí)施例中，組合物包括含有一個或多個被選擇的治療劑的儲藥庫，用于由局部缺血事件引起的受損組織再生。治療由局部缺血引起的病癥始終為一個積極探究的醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其是在西方國家，在那里，局部缺血性心臟病始終為引起死亡率的主導(dǎo)因素。心肌局部缺血由可導(dǎo)致心肌細(xì)胞死亡的主冠狀動脈突然阻塞和心臟供給區(qū)域內(nèi)的血管結(jié)構(gòu)突然阻塞引起。類似地，其它器官和組織的主血管阻塞會導(dǎo)致該組織的要害細(xì)胞死亡以及該組織維持其正常正確功能的能力嚴(yán)重變性。例如，大腦局部缺血，其中，流到腦部的動脈血受阻或下降到低于臨界水平，可引起短暫的局部缺血發(fā)作和中風(fēng)。盡管心肌缺血和大腦局部缺血為較常見的兩種局部缺血形式，它也損害其它的機(jī)體組織，如眼、腎、肝、體下肢、腸、皮膚以及排斥皮瓣等。用于控制局部缺血的最新方法包括試圖刺激新毛細(xì)血管網(wǎng)的生長以及側(cè)副管的發(fā)育，這通過血管和動脈生成實(shí)現(xiàn)。血管生成典型地是指形成組成毛細(xì)血管網(wǎng)的新內(nèi)皮線血管。動脈生成不同于血管生成，其指通過內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞的有絲分裂，將現(xiàn)存的側(cè)細(xì)動脈生長并改造為功能動脈，形成彈性薄層和連接組織的外膜層。血管平滑肌細(xì)胞層提供了血管舒縮控制以及結(jié)構(gòu)的強(qiáng)度和完整性。將細(xì)動脈與毛細(xì)血管網(wǎng)對照。毛細(xì)管床是組織中進(jìn)行營養(yǎng)和氣體交換所必需的。然而，由于其直徑較小，毛細(xì)管不能始終滿足組織對大量血流的需要。這種需求經(jīng)常僅由較大直徑的動脈滿足。用于刺激血管生成和動脈生成的策略集中于將必需的生物肽傳送到局部缺血組織的局部區(qū)域。例如，傳送基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)到受損的動脈產(chǎn)生變化，表明了血液流動的改善(LahamR.J.etal.,C7/".CaW/o/.22(Supp.1):16-19，(1999)。給藥血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)改善了心肌的血液流動并己經(jīng)被提議用于促進(jìn)血管組織修復(fù)(EP-A-506477)。其它被提議的用于促進(jìn)血管生成和/或動脈生成的生物因子包含胎盤生長因子(WO01/57181;WO01/56593)和集群刺激因子(WO99/17798)?，F(xiàn)有技術(shù)中也描述了一種方法，其涉及將治療劑裝入單核細(xì)胞以刺激動脈生成(WO00/60054)。此外，在具有局部缺血肢體(Isner,J.M."W.，Lancet,348:370-374,(1996))和心肌局部缺血的病人中引起血管生成的其它方法已采用了phVEGF的動脈基因轉(zhuǎn)移(Losorda，D.W."a/"a>Co"，98(25):2800-2804,(1996))。已表明通過移植心肌細(xì)胞或骨骼成肌細(xì)胞取代心臟和骨骼肌中壞死的瘢痕組織區(qū)域的策略在使部分移植細(xì)胞存活方面取得了一些成功(Leor,J."a/"C/腦/a"w,94(Supp.11):331-336，(1996);Murryea/.，C//"./"vew"98:2512-2523,(1996);Taylor&a/"MW.,4:929-933,(1998);Tomita&"/"Oc由/o",100(Supp.11):247-256，(1999);MenuscheWa/.，357:279,(2000))。然而，它們未能重組與活的健康組織共同執(zhí)行功能的健康的心肌或骨骼肌以及冠狀或外圍動脈。這些通過細(xì)胞移植和促進(jìn)血管生成和動脈生成的方法反映出在對局部缺血的治療方法方面的早期嘗試。盡管有一些令人鼓舞的發(fā)現(xiàn)，但是這些方法均不能將局部缺血區(qū)域的血液流動或細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性恢復(fù)到有意義的程度，以便在臨床上改善局部缺血區(qū)域的生理性能。因此，始終迫切需要將血管生成、動脈生成和實(shí)質(zhì)細(xì)胞恢復(fù)到可用于臨床的顯著程度。本文提供了用于促進(jìn)處于局部缺血中的組織或局部缺血后的組織或含氧量低的組織中的實(shí)質(zhì)組織恢復(fù)和血液循環(huán)的組合物和方法。作為治療學(xué)特征，描述的組合物可有效地刺激血管生成、動脈生成和心肌和骨骼肌纖維再生。1.用于促進(jìn)實(shí)質(zhì)細(xì)胞再生、血管再生和/或動脈再生的治療劑如上面所指出的，組合物含有一種或多種治療劑，可有效地吸引干細(xì)胞和/或祖細(xì)胞，并有選擇的吸引輔佐細(xì)胞，以刺激細(xì)胞發(fā)生作用,并影響細(xì)胞的存活。對于設(shè)計(jì)成用于治療局部缺血組織的組合物，治療劑更具體地選擇成(i)將循環(huán)血細(xì)胞，包括骨髓細(xì)胞、干細(xì)胞和祖細(xì)胞以及單核細(xì)胞(作為輔佐細(xì)胞)吸引到局部缺血部位或處于局部缺血的組織,(ii)刺激所述細(xì)胞中的多種現(xiàn)象，包括有絲分裂發(fā)生、運(yùn)動性、連接、分化、釋放可促進(jìn)血管生成、動脈生成的生物試劑，以及將骨髓和干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞和骨骼肌纖維，并(Ui)影響單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞、分化的肌細(xì)胞和肌纖維、肌細(xì)胞的祖細(xì)胞、成肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞以及組織中的內(nèi)皮細(xì)胞的存活。眾所周知，單核細(xì)胞來自于骨髓來源的骨髓祖細(xì)胞并屬于單核噬菌細(xì)胞系統(tǒng)。這些細(xì)胞為一類白細(xì)胞，在血液中循環(huán)并能夠從血流通過內(nèi)皮層遷移進(jìn)入組織空間，在那里它們成熟為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞吞噬和消化入侵的微生物和外來體以及受損的和衰老的細(xì)胞。這些細(xì)胞通過分泌蛋白酶也有助于將細(xì)動脈改造成動脈，其打開細(xì)胞外基質(zhì)中的通道以促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，以及容納改造的動脈。如本文所用的，"單核細(xì)胞"指單核細(xì)胞以及顯示與單核細(xì)胞相同或相似的生物作用的其它細(xì)胞。心肌細(xì)胞和骨骼成肌細(xì)胞來自于骨髓干細(xì)胞和保留在肌肉中的干細(xì)胞。它們從與成肌細(xì)胞類似并被稱為衛(wèi)星細(xì)胞的肌肉干細(xì)胞分化而來。衛(wèi)星細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂并且?guī)讉€融合在一起以形成分化肌纖維。這些細(xì)胞可以通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)吸引劑被吸引到所研究的組織區(qū)域，以開始局部缺血區(qū)域中和處于局部缺血區(qū)域中的健康肌肉組織的再生過程。因此，本發(fā)明組合物中包括的用于局部缺血組織的一類治療劑為生物試劑，可有效地將循環(huán)血單核細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、骨髓來源的生肌祖細(xì)胞、前體內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞吸引到處于危險中的組織。所述試劑可以為發(fā)信號分子，如化學(xué)吸引劑，可有效地將循環(huán)單核細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、骨髓和肌肉衍生的生肌祖細(xì)胞、前體內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞吸引到組織區(qū)域并從循環(huán)中遷移到組織區(qū)域。適用的化學(xué)吸引劑包括,但不局限于，趨化因子，如巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP-l、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5)、RANTES(活化的調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a和MIP-l-P、N-法呢基肽(N-famesylpeptides)補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、干細(xì)胞因子(SCF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、血小板衍生的生長因子AB和BB(PDGF-AB、BB)、白血病抑制因子(LIF)，以及這些化學(xué)吸引劑的功能相等片斷。也可預(yù)期作為吸引劑用于單核細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、骨髓和肌肉衍生的生肌袓細(xì)胞，前體內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞的是轉(zhuǎn)化生長因子P(TGF-P)、白細(xì)胞介素和集群刺激因子，如粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群剌激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(g-csf:k集群刺激因子-i(csf-l)和巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF),及其功能相當(dāng)?shù)钠巍３藛魏思?xì)胞、骨髓干細(xì)胞、骨髓和肌肉衍生的生肌祖細(xì)胞、前體內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞之外，還希望化學(xué)吸引劑可適合于吸引在血管生成和/或動脈生成過程中涉及的其它細(xì)胞，或者化學(xué)吸引劑可以專門選擇性地吸引這些其它細(xì)胞。循環(huán)細(xì)胞也涉及血管生成、動脈生成，并且肌肉細(xì)胞發(fā)育包含其它的白細(xì)胞、血小板、骨髓來源的白細(xì)胞前體、骨髓來源的干細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞祖細(xì)胞。血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)從多種前體分化，包括骨髓干細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和局部的組織間質(zhì)細(xì)胞。預(yù)期作為刺激物用于平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的為GM-CSF、G-CSF、M-CSF、SCF和血小板衍生生長因子(PDGF-BB)。表1總結(jié)了對心肌和骨骼肌細(xì)胞及其前體具有剌激作用的多種生長因子。這些因子適合作為化學(xué)吸引劑，或作為進(jìn)一步增殖和分化某些細(xì)胞的試劑。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>組合物中的另一治療劑為一種能夠刺激釋放可促進(jìn)血管生成和/或動脈生成的生物試劑的試劑，本文稱"刺激劑"。將要理解的是，該剌激劑與用于將單核細(xì)胞、干細(xì)胞和生肌祖細(xì)胞吸引到所研究組織的試劑可以為相同試劑，或不同試劑。刺激劑可有效地刺激單核細(xì)胞、干細(xì)胞或其它處于危險中的組織內(nèi)或附近的血管生成和動脈生成細(xì)胞，以釋放一個或多個參與血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生過程的生物化合物。除單核細(xì)胞之外，涉及血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生過程的細(xì)胞包含內(nèi)皮細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、骨髓來源的白細(xì)胞前體、骨髓來源的干細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞，及其前體。此外，希望剌激劑也可以通過直接作用于單核細(xì)胞、其它的輔佐細(xì)胞、干細(xì)胞以及直接作用于這些細(xì)胞的肌細(xì)胞祖細(xì)胞來影響動脈生成、血管生成和肌肉實(shí)質(zhì)組織再生。如表1所示，己知所述試劑中有許多可剌激心肌和骨骼肌細(xì)胞前體細(xì)胞的增殖和分化以組成再生的心肌和骨骼肌纖維，其通過直接作用于目標(biāo)物而實(shí)施其影響。在不刺激中間生物因子產(chǎn)生和分泌的前提下，可以再生肌肉實(shí)質(zhì)。類似地，許多可刺激血管生成和動脈生成的試劑通過直接作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞及其祖細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞及其前體而實(shí)施其影響。刺激劑可以為生物的或非生物的化合物，其刺激從巨噬細(xì)胞和其它血管由來的和動脈由來的細(xì)胞產(chǎn)生血管由來的和動脈由來的生物活性分子，或者其刺激干細(xì)胞分化和肌肉細(xì)胞的增殖以及存活和成肌細(xì)胞的融合。生物試劑的實(shí)例包括,但不局限于，趨化因子，如巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP-1、MCP-2，、MCP-3、MCP-4、MCP-5)、腫瘤壞死因子(TNF-a,TNF-p)、RANTES(活化的調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a和MIP-1-P,以及這些試劑的功能相等片斷。也預(yù)期用作刺激劑的為白細(xì)胞介素、集群刺激因子、如粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群剌激因子-l(CSF-l)和巨噬細(xì)胞集群剌激因子(M-CSF)、血小板衍生生長因子(PDGF-AB和PDGF-BB)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(b-FGF)，類胰島素生長因子(IGF-1)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NFG),以及任何這些試劑的功能相等片斷。脂多糖(LPS)為一些細(xì)菌細(xì)胞壁的衍生物，也適合于用作有效的刺激物，如缺少分子的有毒區(qū)域的LPS類似分子，其具有LPS的巨噬細(xì)胞刺激作用。也預(yù)期用作刺激劑的為血管生成素-1和-2(Ang-l和Ang-2)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、白三烯B4、補(bǔ)體活化產(chǎn)物C3a和C5a、白血病抑制因子(LIF)、促紅細(xì)胞生成素(Epo)、5-氮胞苷和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-卩)。除可有效地將循環(huán)單核細(xì)胞、骨髓干細(xì)胞、骨髓和肌肉來源的生肌祖細(xì)胞、前體內(nèi)皮和平滑肌細(xì)胞吸引到所研究的組織并通過直接作用或通過誘導(dǎo)分泌生物活性試劑刺激血管生成、動脈生成和肌肉實(shí)質(zhì)再生的試劑之外，組合物可以還包含一種試劑，其可有效地影響所關(guān)注的組織中的細(xì)胞存活，所述細(xì)胞參與了血管系統(tǒng)和肌肉實(shí)質(zhì)組織的再生。例如，延長來自被吸引到組織區(qū)域的單核細(xì)胞的巨噬細(xì)胞的存活以及延長組織區(qū)域中其它血管由來的和動脈由來的細(xì)胞的存活將促進(jìn)并延長釋放所需的涉及血管生成和/或動脈生成的試劑。組合物也可以包含一種試劑，其可有效地增加參與血管生成和動脈生成并可分化為心肌和骨骼肌細(xì)胞的循環(huán)干細(xì)胞的數(shù)目。能夠影響循環(huán)血單核細(xì)胞和位于組織中的單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞、及其它有助于血管生成和動脈生成并增加干細(xì)胞數(shù)目的細(xì)胞存活的生物試劑包含GM-CSF、G-CSF、CSF-1、M-CSF、IGF-1、Ang-l，及功能相等的試劑及其片段。組合物也可以包含一種或多種涉及血管生成和動脈生成過程的生物試劑。這些試劑典型地從巨噬細(xì)胞和局部缺血組織中的其它細(xì)胞釋放，但是也可以作為治療學(xué)組合物的一部分。涉及血管生成和/或動脈生成的因子包含成纖維細(xì)胞生長因子(FGF、FGF-1、FGF-2),TGF-a、類胰島素生長因子-l(IGF-l)、血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、其功能相等片段、VEGF構(gòu)成物如VEGF-2、VEGF165和VEGF121、血小板衍生生長因子-A(PDGF-A)和/或PDGF-B禾卩/或PDGF-BB、胎盤衍生生長因子(PIGF)以及其它內(nèi)皮有絲分裂生長因子，或其功能相等片段。組合物也可以包含一種有助于將循環(huán)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或其它細(xì)胞結(jié)合到組織區(qū)域的試劑。所述試劑也可以發(fā)揮作用以將巨噬細(xì)胞與所述儲藥庫結(jié)合或緊密連接，使巨噬細(xì)胞接近從儲藥庫釋放的試劑。在一種實(shí)施例中，組合物還包括細(xì)胞粘附分子，如ICAM、VCAM、PECAM;VE-粘附子(鈣粘蛋白)；纖維結(jié)合蛋白(fibronectin)片斷，如RGD和REDV;合成粘附肽，如VAPG禾口KQAGDV;細(xì)胞外基質(zhì)分子和膠原的異源混合物、纖維結(jié)合蛋白、肝素、右旋糖苷、海蘭、層粘連蛋白和來自動物來源的經(jīng)處理的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。如下所述，所述試劑以多種方式與所述儲藥庫連接，包括將所述試劑夾入或裝入儲藥庫，涂敷表面或?qū)⒃噭┻B接到儲藥庫外表面。2.心肌再生如從以上討論可理解的，通過采用本文描述的組合物，可以實(shí)現(xiàn)治療處于局部缺血危險中或局部缺血后的心肌組織。除由于梗塞或中風(fēng)引起的局部缺血之外，心肌組織容易受到來自其它癥狀的損害，如發(fā)炎的、有毒的、新陳代謝的和天生的病原學(xué)的心肌癥，以及充血性心力衰竭。如上所述的適合于局部缺血心肌組織的組合物的實(shí)例也可以用于治療除局部缺血之外的癥狀所引起的心肌組織受損。此外，用于治療受損心肌的組合物可以根據(jù)以下討論設(shè)計(jì)。如上面所指出的，本發(fā)明的組合物需要具有三種功能的生物因子,化學(xué)吸引干細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞，刺激所述細(xì)胞以及增強(qiáng)所述細(xì)胞和再生心肌的分化細(xì)胞的存活。專用于治療心肌組織的組合物將包括吸引祖細(xì)胞，其包括心肌成肌細(xì)胞(心肌細(xì)胞:i、骨髓干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、存在的心肌細(xì)胞干細(xì)胞。在組織修復(fù)過程中也涉及內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞及其前體。因此，組合物將包含作為一個或多個所述祖細(xì)胞的化學(xué)吸引劑的至少一種因子。以上給出了化學(xué)吸引劑的許多實(shí)例。組合物還將包含至少一種用于刺激祖細(xì)胞發(fā)生作用,例如，分化和/或增殖的因子。適當(dāng)?shù)拇碳ひ蜃影痪窒抻诟杉?xì)胞因子、類胰島素生長因子-和-2(IGF-l、IGF-2)、轉(zhuǎn)化生長因子-a、-卩(TGF-a、TGF-卩)、肝素結(jié)合表皮生長因子類生長因子(HB-EGF)和5-氮胞苷。組合物也將包含至少一種因子，其發(fā)生作用以促進(jìn)祖細(xì)胞及其分化后代的存活，刺激劑的實(shí)例包括但不局限于GM-CSF、G-CSF、CSF-1、M-CS禾口IGF-1。組合物也將包含細(xì)胞粘附分子配體，其結(jié)合到干細(xì)胞(特別是VLA4)和祖細(xì)胞上的細(xì)胞表面粘合素。配體的實(shí)例為血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)。由該配體粘附確保了將干細(xì)胞定位到受損組織中的組合物沉積部位。3.骨骼肌再生在另一種實(shí)施例中,組合物設(shè)計(jì)成通過生成肌纖維而修復(fù)骨骼肌。組合物適用于受損的骨骼肌再生，例如，由于熱傷害、杜興(Duchenne，s)肌肉營養(yǎng)不良、物理擠壓傷害、梗阻性外周疾病和其它損傷引起。涉及修復(fù)過程的祖細(xì)胞包含骨髓干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞、成肌細(xì)胞、外周血細(xì)胞和肌肉祖細(xì)胞。將這些細(xì)胞吸引到骨骼肌損害部位是通過引入含有化學(xué)吸引劑的組合物而實(shí)現(xiàn)。吸引劑的實(shí)例包含生長因子，如基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-3(TGF-P)、血小板衍生生長因子(PDGF)、血小板衍生生長因子-AB(PDGF-AB)、血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白三烯B4、纖維結(jié)合蛋白(Fn)片斷、補(bǔ)體活化產(chǎn)物C3a和C5a、白血病抑制因子(LIF)以及活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)。組合物也將包含至少一種剌激被吸引的細(xì)胞發(fā)生作用的因子。適合的因子包括，但不局限于，類胰島素生長因子-I(IGF-I)、類胰島素生長因子-II(IGF-II)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、血小板衍生生長因子(PDGF)、血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)、轉(zhuǎn)化生長因子卩(TGF-P)、促紅細(xì)胞生成素(EPo)、人白血病抑制因子(hLIF)和5-氮胞苷。組合物也將包含可延長祖細(xì)胞和再生實(shí)質(zhì)組織的分化細(xì)胞存活的一個或多個因子?？裳娱L骨骼肌組織中的細(xì)胞存活的因子包括，類胰島素生長因子-I(IGF-I)、類胰島素生長因子-II(IGF-II)、血小板衍生生長因子-BB(PDGF-BB)和促紅細(xì)胞生成素(EPO)。組合物也將包含細(xì)胞粘附分子配體，其結(jié)合到干細(xì)胞和祖細(xì)胞上的細(xì)胞表面粘合素。配體的實(shí)例包含血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)、基底膜和纖維結(jié)合蛋白片斷(Fn)。由該配體粘附確保了將干細(xì)胞定位到受損組織中的組合物沉積部位。也已知基底膜可穩(wěn)定并保持如上預(yù)期的作為刺激物因子的多種細(xì)胞因子的活性，并發(fā)生作用以將這些細(xì)胞因子配體提呈到干細(xì)胞上的受體以及祖細(xì)胞的表面，以產(chǎn)生最適宜的4.肝中的組織再生肝為許多疾病攻擊的靶。這些疾病包含易傳染的、自身免疫性的和不易傳染的過程，如化學(xué)毒性。傳染性疾病的實(shí)例包含(i)病毒性肝炎，例如，肝炎A、B、C、D和G，以及(ii)寄生性肝炎，例如，曼氏血吸蟲、埃及血吸蟲和日本血吸蟲。(Harrison'sPrinciplesoflntemalMedicine,Faucietal.eds.,1998,pgs1660-1725)。影響肝的非傳染性疾病實(shí)例，包含自身免疫性疾病，如(i)自身免疫性肝炎和(ii)原發(fā)性膽硬化。(Harrison'sPrinciplesofInternalMedicine,Faucietal.eds.，1998，pgs1701-1709)。不論對肝的攻擊為易傳染的、自身免疫性的或不易傳染的，如果保留對肝的損害不治療，將引起瘢痕或纖維化。纖維化末期為硬化。從病理學(xué)上講，硬化被定義為肝中大范圍的纖維化，其與形成再生結(jié)有關(guān)。對于許多類型的，如果不是全部的慢性肝損害，硬化為最終的常見途徑，并且典型地是累積性的。盡管在許多情況下，肝臟具有巨大的自我再生能力，可是肝損害可以抑制或廢除這種再生能力。因此，本發(fā)明預(yù)期沉積組合物以影響肝組織的再生。涉及肝再生的干細(xì)胞和祖細(xì)胞包含肝細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、肝前體細(xì)胞干細(xì)胞、肝成年干細(xì)胞、肝上皮管細(xì)胞和卵細(xì)胞。通過引入含有化學(xué)吸引劑的組合物而將這些細(xì)胞吸引到組織損傷部位。吸引劑的實(shí)例包含粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF-1)、千細(xì)胞因子(SCF)、硫酸多聚糖如flucoidan和以上提到的用于心肌、骨骼肌的用于吸引干細(xì)胞和祖細(xì)胞以促進(jìn)血管生成和/或動脈生成的所有化學(xué)吸引劑。組合物也將包含至少一種刺激被吸引的細(xì)胞發(fā)生作用的因子。適合的因子包括，但不局限于，類胰島素生長因子-l(IGF-I)、類胰島素生長因子-11(IGF-II)、表皮生長因子(EGF)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、角化細(xì)胞生長因子(KGF)、激活素-B、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF)、脂多聚糖(LPS)、轉(zhuǎn)化生長因子-a(TGF-a)、轉(zhuǎn)錄因子包含用于B細(xì)胞kappa鏈的核因子(NFKB)、STAT3、AP-1、C/EBP和肝刺激物(HSS)。組合物也將包含可延長祖細(xì)胞和再生的肝實(shí)質(zhì)組織的分化細(xì)胞的存活的一個或多個因子?？裳娱L肝組織中細(xì)胞存活的因子包括白細(xì)胞介素-6(IL-6)和腫瘤壞死因子(TNF)。5.胰腺中的組織再生人胰腺為一種包括外分泌和內(nèi)分泌組織的腺，外分泌組織涉及消化酶的分泌并且內(nèi)分泌組織涉及產(chǎn)生胰島素、胰高血糖素、生長抑素和胰多肽。胰島素和胰高血糖素一起發(fā)生作用以控制葡萄糖的產(chǎn)生和新陳代謝。內(nèi)分泌胰腺包括Langerhans胰島，其為多肽激素的集合體，產(chǎn)生廣泛遍布腺組織的細(xì)胞并且在胰腺尾部為最多的。典型地，全部胰島組織僅占胰質(zhì)量的約1或2個百分比。胰島組織包含至少三種功能不同的細(xì)胞類型A(或"a")細(xì)胞可以制造胰高血糖氣B(或"(3")細(xì)胞制造胰島素,和D(或"S")細(xì)胞可以制造第三島激素、生長抑素和分泌胰多肽的PP細(xì)胞。B細(xì)胞是三種類型的島細(xì)胞中最為豐富的。胰島素促進(jìn)細(xì)胞尤其是肌肉細(xì)胞對葡萄糖的吸收，并預(yù)防儲存在肝和肌肉中的糖原被過度損壞。糖尿病影響全世界人口的4-5%，并為最常見的新陳代謝紊亂。診斷患有糖尿病的個體數(shù)量快速增加，尤其是在發(fā)達(dá)國家，并且紊亂經(jīng)常導(dǎo)致次要的并發(fā)癥，如視網(wǎng)膜病、腎病、神經(jīng)病和心血管疾病。II型(與胰島素?zé)o關(guān)的)糖尿病為最常見的糖尿病形式，診斷的病例多于90%，并由胰島素抗性、胰腺(3細(xì)胞功能紊亂或二者的共同引起。P細(xì)胞功能紊亂部分是由于對胰島素的需求增加而(3細(xì)胞不能相應(yīng)于產(chǎn)生和分泌足量的活性胰島素引起。I型(胰島素相關(guān)的)糖尿病由產(chǎn)生(3細(xì)胞的胰島素的自身免疫性破壞引起，導(dǎo)致胰島素缺乏。對于兩種類型的糖尿病，現(xiàn)有的治療方案可能需要每天給藥胰島素。這些治療方案是不令人滿的，這是由于它們不能治愈，并且大多數(shù)不足以預(yù)防其次的與糖尿病有關(guān)的并發(fā)癥。取代可產(chǎn)生胰島素的胰腺(3細(xì)胞的策略集中于異源的胰島細(xì)胞和干細(xì)胞移植。來自于不同于受體的供體的所有移植需要長期給藥免疫抑制劑藥物，以預(yù)防移植組織排斥的移植宿主疾病，為傳染性細(xì)菌和病毒感染篩選移植物供體，并對其它虛弱疾病的易患體質(zhì)進(jìn)行基因篩選。胰腺組織的損害可能由糖尿病引起。因此，本發(fā)明預(yù)期沉積組合物來影響胰腺組織的再生或修復(fù)。涉及受損胰腺組織再生的細(xì)胞包含卩細(xì)胞、島干細(xì)胞、島祖細(xì)胞和胰腺管干細(xì)胞。通過引入含有化學(xué)吸引劑的組合物而將這些細(xì)胞吸引到組織損害部位。吸引劑的實(shí)例包含血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、基質(zhì)的細(xì)胞衍生因子-l(SDF-l)、干細(xì)胞因子(SCF)、flucoidan和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)。組合物也將包含至少一種可刺激被吸引的細(xì)胞發(fā)生作用的因子。適合的因子包括,但不局限于，神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、類胰島素生長因子-I(IGF-I)、類胰島素生長因子-II(IGF-II)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、血小板衍生生長因子(PDGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-P(TGF-卩)、表皮生長因子(EGF)、角化細(xì)胞生長因子(KGF)、激活素-A、extendin-4、生長激素、泌乳刺激素、胎盤催乳激素、煙堿、P動物纖維素(BTC)、白血病抑制因子(LIF)、巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)、胰島因子-1(Isl-1)、胰腺十二指腸同源框-l(Pdx-l)、胰腺十二指腸同源框-4(Pdx-4)、胰腺十二指腸同源框-6(Pdx-6)、cdx-2、Nkx-6和肝細(xì)胞核因子(HNF-la)。組合物也將包括可延長干細(xì)胞、祖細(xì)胞、再生組織的分化細(xì)胞的存活的一種或多種因子。可延長胰腺組織中細(xì)胞存活的因子實(shí)例為類胰島素生長因子-l(IGF1)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)。組合物也可以包括可以結(jié)合到干細(xì)胞和祖細(xì)胞表面的配體。這些配體預(yù)期通過增加靠近作為組合物的一部分的刺激因子的細(xì)胞數(shù)而增加再生功效。已知結(jié)合干細(xì)胞和祖細(xì)胞到細(xì)胞外基質(zhì)的細(xì)胞粘附部分可促進(jìn)有絲分裂發(fā)生和分化。適當(dāng)?shù)呐潴w包括N、R、E-鈣粘蛋白和其它細(xì)胞粘附分子(CAM)，包括神經(jīng)細(xì)胞粘附分子(NCAM)。6中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的組織再生腦和脊髓組織損傷也可以由多種情形和狀況引起，包括感染(如各種細(xì)菌和病毒性腦膜炎)、血管疾病(如出血性的和局部缺血性中風(fēng))、變性疾病(如多發(fā)性硬化、帕金森氏病、阿莫氏病)和物理損傷，包括腦震蕩、腦裂傷以及對脊髓的壓力和擠壓損傷。因此，在一種實(shí)施例中，本發(fā)明預(yù)期利用該組合物再生損傷后或處于損傷中的腦和脊髓組織。特別是，該組合物將包括可有效地吸引重要細(xì)胞的第一試劑，包括但不局限于小膠質(zhì)細(xì)胞、少突神經(jīng)膠質(zhì)、神經(jīng)系統(tǒng)成年干細(xì)胞、神經(jīng)元、骨髓(BM)細(xì)胞、輔佐細(xì)胞(AC)、平滑肌細(xì)胞(SMC)、骨髓stromal細(xì)胞(mSC)、骨髓造血干細(xì)胞(hSC)和星形膠質(zhì)細(xì)胞。這些細(xì)胞中的一些可以遷移通過血腦屏障(BBB)和/或存在于腦組織中。已知吸引輔佐細(xì)胞對響應(yīng)腦損傷為基本的。已知骨髓基質(zhì)細(xì)胞(mSC)、骨髓造血細(xì)胞(hSC)、其它骨髓(BM)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞進(jìn)入損傷的組織區(qū)域并作為輔佐細(xì)胞(AC),生成多種細(xì)胞因子和其它生物因子，此因子直接誘導(dǎo)干細(xì)胞和祖細(xì)胞的有絲分裂發(fā)生，并將祖細(xì)胞分化為功能性的神經(jīng)膠質(zhì)和神經(jīng)元。試劑可有效地吸引一個或多個上述細(xì)胞，包含肝細(xì)胞生長因子(HGF)、巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引劑蛋白質(zhì)1-1(MCP-1)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-la(SDF-la)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-13(SDF-l(3)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、表皮生長因子(EGF)、白細(xì)胞介素-l(IL-l)和血小板衍生生長因子-AB(PDGF-AB)。包含在組合物中的第二試劑可刺激被吸引細(xì)胞中的多種現(xiàn)象，其包含(I)增殖干細(xì)胞和祖細(xì)胞，(ii)分化為功能性的實(shí)質(zhì)細(xì)胞，以及(iii)產(chǎn)生多種可刺激增殖、分化并調(diào)節(jié)和協(xié)調(diào)再生神經(jīng)膠質(zhì)和神經(jīng)元之間的分化的細(xì)胞因子和其它生物試劑。刺激劑的實(shí)例包括，但不局限于神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)、腦衍生神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、表皮生長因子(EGF)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、Nogo蛋白質(zhì)的NEPl-40抑制劑、神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)、P-巰基乙醇(e-ME)、人白血病抑制因子(hLIF)、視黃酸(RA)、白細(xì)胞介素-l(IL-l)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、血小板衍生生長因子-AB(PDGF-AB)、轉(zhuǎn)化生長因子-a(TGF-a)、干細(xì)胞因子(SCF)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、胰島素、毛喉素、丙戊酸、肝素、類肝素、糖基化的細(xì)胞抑制劑-C和佛波醇肉豆蔻酸醋酸鹽(TPA)。此外，也預(yù)期組合物包含直接作用于組織細(xì)胞外基質(zhì)和血液-腦屏障上，以允許再生的神經(jīng)系統(tǒng)實(shí)質(zhì)組織的完全發(fā)育的試劑。這些試劑可以實(shí)現(xiàn)神經(jīng)元的可塑性,其中，不同于受損組織中的那些，其通過重新連接結(jié)構(gòu)中的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)而實(shí)現(xiàn)實(shí)質(zhì)組織再生。實(shí)現(xiàn)這些成分再生的試劑實(shí)例包含神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3)、軟骨素ABC(chABC)、Nogo蛋白質(zhì)結(jié)合的NEP1-40抑制劑和血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)。組合物也將包含一個或多個可延長干細(xì)胞、祖細(xì)胞和/或分化的細(xì)胞存活的因子。可延長腦組織中細(xì)胞存活的因子包括，腦衍生神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子(NGF)、基本成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、表皮生長因子(EGF)、血小板衍生生長因子-AB(PDGF-AB)、糖基化的細(xì)胞抑制劑-C、(3-巰基乙醇(P-ME)、丁基化的羥基苯甲醚(BHA)、二甲亞砜(DMSO)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、神經(jīng)細(xì)胞生長因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)、丁基化的羥基甲苯(BHT)和人白血病抑制因子(hLIF)。組合物也可以包含可結(jié)合到干細(xì)胞、袓細(xì)胞和其它細(xì)胞表面的配體。預(yù)期這些配體可通過增加組合物的組成部分的鄰近的刺激因子的細(xì)胞數(shù)目來增加再生功效。已知干細(xì)胞和祖細(xì)胞結(jié)合到細(xì)胞外基質(zhì)的細(xì)胞粘附部可促進(jìn)有絲分裂發(fā)生和分化。適當(dāng)?shù)呐潴w包含層粘連蛋白和血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1)。7.腎臟的組織再生在另一種實(shí)施例中，本發(fā)明包括腎臟的組織再生。多種疾病可引起對腎實(shí)質(zhì)組織的損害，如動脈粥樣硬化疾病、腎靜脈血栓癥、腎動脈栓塞、血栓癥、糖尿病性腎病、多種病原引起的血管球星性腎炎、毒性腎病和腎盂腎炎。作為損害的結(jié)果，由急性或慢性腎功能下降引起的腎衰竭為一種嚴(yán)重癥狀，其可引起腎的過濾、再吸收、內(nèi)分泌和自我平衡功能大幅度或完全喪失。因此，沉積含有治療劑的組合物可有效地吸引那些能夠分化或增殖為細(xì)胞的細(xì)胞，能夠提供由腎提供的部分或全部功能，并且能夠產(chǎn)生功能性的腎細(xì)胞或再生功能性的腎,預(yù)期全部或部分如此。腎臟的干細(xì)胞能夠?qū)π纬赡I小管細(xì)胞起作用。己知骨髓基質(zhì)的細(xì)胞(mSC)可以通過外周血從骨髓移動到由血管球性腎炎引起的損害部位并提供間質(zhì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，在再生腎時，其對于完整的腎單元功能是所需的(腎的基本功能單元)。造血干細(xì)胞可以分化為腎小球膜細(xì)胞。通過試劑如白細(xì)胞介素-ll(IL-ll)和青灰因子(steelfactor)促進(jìn)分化和增殖。沉積含有化學(xué)吸引劑、同時具有可促進(jìn)細(xì)胞分化和增殖的試劑，以及一種可增強(qiáng)干細(xì)胞、祖細(xì)胞存活的試劑的組合物吸引能夠分化為形成腎組織細(xì)胞的干細(xì)胞或祖細(xì)胞，分化的細(xì)胞將引起受損的腎組織修復(fù)，tDy,例如，再生多種腎細(xì)胞，如腎小球膜細(xì)胞、足細(xì)胞、上皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞。8.組織再生組合物和干細(xì)胞移植干細(xì)胞移植作為一種治療方法被廣泛研究，其可用于治療多種疾病，如白血病和多發(fā)性骨髓瘤。在本發(fā)明的另一種實(shí)施例中，期望與干細(xì)胞移植一起，沉積含有用于干細(xì)胞和祖細(xì)胞的化學(xué)吸引劑、刺激細(xì)胞分化或增殖的因子、以及增強(qiáng)所述細(xì)胞存活的因子的組合物。在該實(shí)施例中,根據(jù)疾病和/或被治療的組織選擇因子。適合的因子選擇可根據(jù)以上描述中提供的指導(dǎo)而確定。B.用于將免疫細(xì)胞吸引到腫瘤部位的組合物另一方面，本發(fā)明提供了組合物，其在原發(fā)性腫瘤和/或轉(zhuǎn)移瘤內(nèi)通過腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)促進(jìn)對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。所述組合物，當(dāng)沉積在原發(fā)性腫瘤或轉(zhuǎn)移部位時，促進(jìn)腫瘤變性并且最終引起腫瘤破壞。組合物可通過其它的自然宿主有效地刺激細(xì)胞毒性的全身免疫應(yīng)答，剌激的應(yīng)答被指向原發(fā)性腫瘤或轉(zhuǎn)移瘤中的腫瘤抗原。該組合物含有一個或多個儲藥庫，適用于沉積在腫瘤部位，所述儲藥庫含有(i)用于T淋巴細(xì)胞的化學(xué)吸引劑，包括細(xì)胞毒性和輔助T細(xì)胞、樹枝狀的和天然的殺傷細(xì)胞、它們的祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞，如嗜曙紅細(xì)胞和破壞瘤的巨噬細(xì)胞；(ii)可刺激細(xì)胞活化以及分化和增殖的試劑；以及(iii)可有效地增強(qiáng)細(xì)胞存活并提供免疫性的試劑。更具體地，組合物含有一種或多種治療劑，可有效地(i)吸引淋巴細(xì)胞(包括天然T淋巴細(xì)胞和天然殺傷淋巴細(xì)胞的所有子集)、巨噬細(xì)胞、分葉核白細(xì)胞和抗原提呈細(xì)胞(包括樹突狀細(xì)胞)以滲透腫瘤塊以及直接進(jìn)入活的和壞死的腫瘤細(xì)胞；(ii)刺激腫瘤塊內(nèi)的炎性應(yīng)答，其將腫瘤抗原提呈至淋巴細(xì)胞，并終止于一般在機(jī)體內(nèi)可用于腫瘤發(fā)作的細(xì)胞毒性和天然殺傷(NK)淋巴細(xì)胞的增殖；以及(iii)促進(jìn)被吸引細(xì)胞的存活,允許將免疫宿主內(nèi)的細(xì)胞毒性和天然殺傷淋巴細(xì)胞放行入腫瘤塊，用于直接接近并殺死腫瘤細(xì)胞。在一種實(shí)施例中,可有效地吸引一個或多個細(xì)胞到腫瘤部位的一種或多種試劑包含GM-CSF、白細(xì)胞介素-12(IL-12)、次級淋巴組織趨化因子(SLC)、單核細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)、由INFy(MIG)腫瘤壞死因子(TNF)誘導(dǎo)的單核因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(M1P)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-la(SDF-la)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-ip(SDF-lp)、RANTES和白細(xì)胞介素-1(IL-1)。優(yōu)選的化學(xué)吸引試劑為包括IL-8、MIG、IL-12、MCP-1、-2、-3、-4、-5、MIP-la、MIP-1|3、MIP-ly和RANTES的化學(xué)吸引試劑。所述的第二試劑能夠在被吸引的細(xì)胞中刺激多種現(xiàn)象，其包含(i).增殖T淋巴細(xì)胞，包括細(xì)胞毒性和輔助T細(xì)胞、樹枝狀的和自然殺傷細(xì)胞、淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞，它們的祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞，如嗜曙紅細(xì)胞和破壞瘤的巨噬細(xì)胞及其祖細(xì)胞；(ii)分化為有功能的活化的免疫和輔佐細(xì)胞；并(iii)產(chǎn)生多種細(xì)胞因子和其它生物試劑，其刺激增殖、分化并調(diào)節(jié)和協(xié)調(diào)免疫系統(tǒng)祖細(xì)胞之間的分化，促進(jìn)免疫和附屬的細(xì)胞的存活以及增強(qiáng)免疫細(xì)胞的細(xì)胞毒性殺傷能力。刺激劑的實(shí)例包括，但不局限于，白細(xì)胞介素-l(IL-l)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-7(IL-7)、白細(xì)胞介素-12(IL-12)和GM-CSF。組合物中用于癌免疫療法的所述第三試劑為一種能夠促進(jìn)被吸引的和局部細(xì)胞存活，以增強(qiáng)細(xì)胞毒性和天然殺傷淋巴細(xì)胞移動進(jìn)入腫瘤塊的試劑。對于該特征，適當(dāng)?shù)脑噭┌琈IG、血小板因子4、MCP-1、-2、-3禾卩MIP-ly。C.儲藥庫如上所述的一種或多種試劑，以含有預(yù)期試劑的儲藥庫形式，沉積在所研究的組織區(qū)域。儲藥庫含有并釋放出治療劑，以促進(jìn)干細(xì)胞、祖細(xì)胞并優(yōu)選輔佐細(xì)胞的吸引和激活，以及輔佐細(xì)胞、祖細(xì)胞和完全分化組織實(shí)質(zhì)細(xì)胞的存活。如將要描述的，儲藥庫可以被設(shè)計(jì)和合成為以所需的動力學(xué)方式釋放相關(guān)試劑。第一種可效仿的儲藥庫為一種大孔儲藥庫，包括具有互連孔的生物和化學(xué)惰性微粒。孔到微粒表面為敞著開的，用于微粒外部和內(nèi)部的孔空間連通。用于形成這種大孔儲藥庫的微粒實(shí)例例如描述在U.S.專利5，135,740中，其作為參考并入本文。這些微粒典型地在液液系統(tǒng)中以懸浮液聚合的形成存在。大體上,含有單體和聚合物催化劑的溶液與水不混溶。與溶液混溶但與水不混融的惰性溶劑包含在溶液中。溶液隨后懸浮在水溶液中，其通常包含添加劑如表面活性劑和分散劑以促進(jìn)形成懸浮液或乳劑。一旦懸浮液被確定為具有預(yù)期尺寸的離散液滴，聚合物將典型地通過采用增加溫度或輻射使反應(yīng)物活化而被影響。一旦完成聚合,從懸浮液中回收產(chǎn)生的固態(tài)微粒。微粒為固態(tài)的球形多孔結(jié)構(gòu)，聚合物圍繞惰性液體形成，從而形成孔網(wǎng)絡(luò)。惰性溶劑，其作為生孔的或成孔的試劑，占據(jù)微粒的孔。生孔試劑被移走后并且內(nèi)孔可用于填充治療藥，如以下描述的。大孔微粒也可以從可生物降解的或非生物降解的聚合物通過溶劑蒸發(fā)制備。對于溶劑蒸發(fā)過程，將預(yù)期的聚合物溶解在有機(jī)溶劑中并且溶液隨后灌入一層具有預(yù)期微粒尺寸的氯化鈉晶體(Mooney,etal.,J.Biomed.Mater.Res.37:413-420，(1997))。通常采用蒸發(fā)去除溶劑，并將生成的固態(tài)聚合物浸入水中，以濾去氯化鈉，生成多孔的聚合物儲藥庫。可供選擇地，氯化鈉晶體可以通過攪拌分散在聚合物溶液中，以獲得氯化鈉晶體的均勻分散。隨后，分散物逐滴擠壓到聚合物的非溶劑中，同時進(jìn)行攪拌以圍繞氯化鈉晶體沉淀聚合物液滴。通過過濾或離心收集固態(tài)的聚合物微粒并隨后浸入水中以濾去氯化鈉，得到多孔的聚合物儲藥庫。可以理解氯化鈉的替代物包含任何無毒的水溶性鹽或低分子量的水溶性聚合物，其可以被過濾以產(chǎn)生預(yù)期的孔隙率。在為支持本發(fā)明而進(jìn)行的研究中,如在實(shí)施例1中所描述的，制備了聚合物儲藥庫。從甲基丙烯酸丁酯、乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯和聚乙烯醇形成平均尺寸20um的微粒。微?？紫堵蕿?0%。實(shí)施例3A詳細(xì)描述了另一種實(shí)施例，其中，制備了可生物腐蝕的聚合物的固態(tài)球形微粒，其并含有GM-CSF。微粒可以在尺寸上有很大變化，直徑為約0.0001微米-約100微米:優(yōu)選約0.001微米-約40微米。微粒內(nèi)的孔尺寸也可以有很大變化，最終的尺寸取決于所使用的聚合物的化學(xué)特性。典型的總孔體積為約0.01-約10cc/g，優(yōu)選約0.1-約6cc/g;平均孔直徑為約0.000001微米-約3.0微米，優(yōu)選約0.000001微米-約1.0微米。微粒裝有如上所述的一個或多個治療劑，例如通過將所述試劑溶解在水溶液中(必要的話，緩沖到適當(dāng)?shù)膒H),并通過攪拌微粒和水溶液進(jìn)行混合直到所有的液體被微粒吸收以生成自由流動的粉末。微粒可以隨后被冷凍干燥以移走微粒中的水相，在孔微粒中殘存凍干形式的治療劑。實(shí)施例2描述了一種研究，其中，通過將微粒和生物試劑溶液混合而將單一的生物試劑裝入多孔的聚合物微粒中。溶液吸收后，微粒被凍干以移走水相，使生物試劑留在微粒孔中。實(shí)施例2也描述了制備含有生物試劑組合的儲藥庫。實(shí)施例3描述了另一研究，其中，制備了含有一種或多種生物試劑的可生物腐蝕的聚合物球體。該可生物腐蝕的微粒由DL-丙交酯共乙交酯形成并含有一種單一試劑GM-CSF，或試劑G-CSF和RANTES的組合?？梢岳斫猓趯?shí)施例2和3中描述的制備技術(shù)可用于將任何預(yù)期的單一試劑或試劑組合物夾在多孔的或固態(tài)的微粒中。一種供選的在微粒中夾帶治療劑的過程為，首先，在將所述試劑夾入大孔微粒前，將治療劑加入到聚合物溶液中，如聚乙烯氧化物-聚丙烯氧化物-聚乙烯氧化物的共聚物(Pluronic),其它的水溶性聚合物,如聚乙烯吡咯垸酮(polyvinylpyrilidone)、聚乙烯醇或其它任何無毒的水溶性聚合物，包括生物聚合物，如膠原、纖維素、透明質(zhì)酸鹽等。治療藥-聚合物的水溶液隨后留在如上所述的多孔微粒中。這種供選過程提供了圍繞凍干的治療劑涂聚合物，其可用于當(dāng)被傳送時預(yù)防夾雜的試劑受到酶的攻擊，并允許進(jìn)一步控制從多孔微粒中釋放試劑。如可被理解的，這種通過選擇涂敷治療藥的聚合物可以增強(qiáng)對試劑釋放的控制?？刂扑鲈噭┑尼尫乓餐ㄟ^選擇多孔微粒尺寸、孔尺寸以及在微粒中裝入試劑來實(shí)現(xiàn)。此外，也可以理解留在多孔微粒中的幾種試劑之一可以涂有聚合物,以減慢該種試劑的釋放。也可以理解，在夾入多孔微粒之前，多孔微粒中的一種或多種試劑可以涂有一個或多個不同的涂敷聚合物，以產(chǎn)生從微粒中的每一試劑的不同釋放。用于本發(fā)明組合物的另一儲藥庫為微膠囊和微粒，其中含有或分散有預(yù)期的治療劑。微膠囊和微粒在制藥和藥物傳送工業(yè)為公知的(例如參見Baker,R.W.,CONTROLLEDRELEASEOFBIOLOGICALLYACTIVEAGENTS,JohnWiley&Sons,NY,1987;RanadeV.andHollinger，M.,DRUGDELIVERYSYSTEMS,CRCPress,1996)。微膠囊典型地指活性試劑的儲藥庫，其被聚合物膜外殼圍繞。微粒典型地指整個系統(tǒng)，其中，治療劑遍及微粒。然而，有許多制劑介于這兩種定義之間，如微膠囊塊，并且這種制劑也適用于本文。微膠囊和微?？梢詮目缮锝到獾幕蚍巧锝到獾木酆衔镏苽?。微膠囊可以很容易地采用多種方法形成，包括凝聚、界面聚合、溶劑蒸發(fā)和物理的封裝方法(，Baker,R.W.,CONTROLLEDRELEASEOFBIOLOGICALLYACTIVEAGENTS,JohnWiley&Sons,NY,1987)。采用本領(lǐng)域公知的許多技術(shù)制備微粒，一種簡單方式就是僅將含有分散的治療劑的聚合物薄膜碾碎為適當(dāng)?shù)某叽?。從聚合物溶液中噴霧干燥的特定治療劑為另一種方法。用于封裝生物活性試劑的特定步驟公開在U.S.專利4,675，189和U.S.專利申請No.20010033868中，其作為參考并入本文。用于本組合物的另一傳送載體為聚合物凝膠制劑。一種尤其適用于這種凝膠制劑的聚合物為聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物(Pluronic)。這些共聚物顯示出相反的熱凝膠行為，具有良好的藥物釋放特性，并具有低毒性。共聚物凝膠作為溫度和聚合物濃度的函數(shù)，其中，當(dāng)溶液受熱時水溶液凝膠。凝膠具有室溫下(25X:)低粘性，但在體溫(37'C)時粘性增加。為形成組合物，所需的治療劑與聚合物在液體中結(jié)合，優(yōu)選水溶液。溶液可以通過適當(dāng)?shù)膫魉驮O(shè)備，如以下描述的導(dǎo)管給藥到靶部位。當(dāng)傳送至較溫暖的環(huán)境時，出現(xiàn)膠凝局部化并在預(yù)期部位沉積治療劑。用于制備傳送儲藥庫的其它適當(dāng)?shù)木酆衔锇?但不局限于膠原(Pieper，J.S.etal.,Biomaterials,21:1689-1699(2000));纖維素(Grassl,E.D.et.al"J.Biomed.Mater.Res.，60:607-612(2002));代茶冬青凝膠(Ramamurthi，A.etal"J.Biomed.Mater.Res.，60:196-205(2002));衍生的右旋糖苷(Letourneur,D.etal.,J.Biomed.Mater.Res.,60:94-100(2002)):肝素藻酸鹽(Laham,R.etal"C/腦/加,。"，100:1865-1871(1999));藻酸鹽(US專利6，238，705;6,096，344);和chochleates(US專利6,403,056)。含有所需治療劑的儲藥庫由這些材料制備，例如，通過制備所述試劑和聚合物的水溶液并隨后采用凍干除去溶劑以產(chǎn)生一種儲藥庫中生物試劑的凍干形式。凍干粉可以直接給藥，或再次懸浮在任何適當(dāng)?shù)囊后w中，如低粘性流體、粘性凝膠或藥膏或油包水或水包油乳劑。懸浮劑可以是水或非水的并根據(jù)多種因子選擇，例如，在載體上制成所述儲藥庫經(jīng)過的時間以及傳送到組織的時間和預(yù)期的生物試劑釋放動力學(xué)。然而，另一種適當(dāng)?shù)膬λ帋鞛橹|(zhì)體。脂質(zhì)體為球形的脂質(zhì)載體，尺寸介于0.01和10微米之間，并由將含水空間裝入膠囊的一個或多個脂雙分子層組成。多種兩性脂質(zhì)被用于組成雙分子層，如磷脂(例如參見U.S.專利5,013，556)。脂質(zhì)分子排布成將其極性頭基朝向水相并且將疏水烴尾部鄰近雙分子層中另一個，因此形成密布的分開含水間隔的同中心雙分子脂質(zhì)小葉。治療劑可以夾在脂質(zhì)體的含水間隙空間內(nèi)，或脂質(zhì)雙分子層內(nèi),取決于所述試劑和脂質(zhì)雙分子層組合物的物化性質(zhì)。從脂質(zhì)體釋放所述試劑可以根據(jù)脂雙分子層成分的選擇而量身定做。在本發(fā)明的一種實(shí)施例中，含有的治療劑的所述儲藥庫具有與所述儲藥庫外表面連接的生物試劑。例如，在脂質(zhì)體的儲藥庫中，脂質(zhì)體外表面包含組成脂質(zhì)雙分子層的磷脂的極性頭基。磷脂的極性頭基部分在脂質(zhì)體形成前后可以衍生化，以包含生物試劑，如細(xì)胞粘附分子。生物試劑可以直接連接到脂質(zhì)頭基，或通過聚合物臂連接。兩種方法,即脂質(zhì)體的表面連接的分子和通過空間臂連接的分子,在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)進(jìn)行了描述(例如參見U.S.專利5,013,556;Zalipsky,S.,polyethyleneglycol-lipidconjugatesinLasic,D.andMartin,F.,Eds.STEALTHLIPOSOMS,CRCPress,1995;WO98/16202;W094/21281)。可以理解生物試劑也可以很容易地連接到如上所述的儲藥庫的外表面。例如，微膠囊或微粒的外部聚合物外殼可以被處理，以提供某些活性聚合物部分，用于隨后的反應(yīng)及連接所需的治療劑到表面?？晒┻x擇地，治療劑可以在微膠囊或微粒的表面被涂敷。在這種方式下,一旦組合物沉積在靶組織上，治療劑則馬上露出。也將理解，制作所述儲藥庫的生物的或合成的聚合物可以根據(jù)其化學(xué)組成被選擇，或者其可以被衍生以允許儲藥庫和生物試劑參與某種類型的物理吸引，以將治療劑保持到表面上。在這種方式下，一旦組合物沉積在靶組織上，治療劑則馬上露出。如上所述，所述儲藥庫含有一種或多種治療劑，如化學(xué)吸引劑、刺激劑和/或存活增強(qiáng)劑。釋放一種或多種試劑可以通過選擇所述儲藥庫和制備組合物而量身定做。例如，在實(shí)施例中，其中，兩種試劑留在所述儲藥庫中，所述試劑可以被制成用于同時或連續(xù)釋放。如果夾于其中的治療劑對形成膠囊外涂層的聚合物或?qū)π纬晌⒘；|(zhì)的聚合物具有明顯不同的滲透性，則從微膠囊或微粒的釋放將會是連續(xù)的。來自微粒和微膠囊的連續(xù)釋放也可以例如，通過制備含有不同聚合物的薄層,一種或多種治療劑分散在多種薄層中或夾在每一薄層之間來實(shí)現(xiàn)。連續(xù)釋放的實(shí)施例公開在例如U.S.專利5,472,708、5，260,069中。實(shí)現(xiàn)連續(xù)釋放的另一方法為給藥兩種或多種儲藥庫群體，其中，第一群體設(shè)計(jì)成以某速率釋放第一試劑，并且第二和后面的群體設(shè)計(jì)成以不同的速率釋放第二和后面的試劑。在聚合物儲藥庫的情況下，通過改變聚合物組合物、聚合物厚度、微粒尺寸；或者，在脂質(zhì)體儲藥庫的情況下，通過脂質(zhì)選擇和載體尺寸，很容易獲得不同的釋放率。實(shí)施例4描述了體外從儲藥庫中釋放IL-12,該儲藥庫包含有可生物降解的聚合物、DL-丙交酯共乙交酯。簡言之，含有IL-12的儲藥庫被放在含有緩沖鹽的容器中并且釋放IL-12到該鹽中作為時間的函數(shù)被測定。11天后，釋放出60%的IL-12。如以下將進(jìn)一步描述的，在使用時，如上所述的任何儲藥庫，例如,作為小的大丸藥，沉積入、在或所需的組織部位上(參見實(shí)施例5和6)。例如，儲藥庫的大丸藥可以從放置沉積導(dǎo)管的管壁沉積入心肌幾毫米。所描述的儲藥庫能夠在組織中通過間隙自由移動。每一儲藥庫主要用于血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生，并當(dāng)其在組織中移動時，可以促進(jìn)這些過程在不同位置重復(fù)。以這種方式，采用最低限度地?fù)p傷，可以獲得一種相對廣泛的治療學(xué)效果。也如以下描述的，對于在心肌中使用，用于傳送所述儲藥庫的一種選擇是通過將小直徑針刺破冠狀動脈壁。另一種選擇就是在手術(shù)過程中從包心方面直接注射入心肌。用于直接注射入心肌的一種供選途徑為經(jīng)皮地(通過橫血管路徑)通過心臟腔的心內(nèi)膜。在骨骼肌中，儲藥庫可以通過小直徑的經(jīng)皮針刺破被傳送。所述儲藥庫也可以在PTCA、支架或?qū)Ч苤委?artherectomy)過程期間，或通過單獨(dú)用于放置所述儲藥庫的經(jīng)皮步驟中被經(jīng)皮傳送。在一些情況下，經(jīng)皮放置所述儲藥庫是有利的，這是因?yàn)橥瑫r使用血管成像技術(shù)使定位更加精確。本發(fā)明儲藥庫提供的另一特征為在沉積到治療部位后的可移動性。至少部分通過制成具有的重力小于間隙體液的儲藥庫來實(shí)現(xiàn)其可動性。這將允許所述儲藥庫在組織流體中漂浮并與流體一起移動。III.使用組合物的方法A.促進(jìn)組織再生的方法在另一方面，本發(fā)明含有一種方法，其用于在損傷后或處于壞死和損害的組織中促進(jìn)組織再生。該方法預(yù)期用作一種主要的治療方式，即，不聯(lián)合其它藥物、手術(shù)或干預(yù)性的治療方案。然而，該方法可以和其它治療方式一起使用。例如,包括儲藥庫中的組合物含有一種或多種治療劑，如上所述，在支架放置和氣球血管成形術(shù)后可以被沉積，以增強(qiáng)血液灌注到圍繞被治療的狹窄區(qū)域的局部缺血組織。組合物也可以與在治療冠狀動脈疾病中使用的其它治療劑聯(lián)合傳送，如抗血栓形成試劑。也預(yù)期在外科手術(shù)時或在任何最低限度地?fù)p傷過程或在所研究的組織內(nèi)或附近期間沉積所述儲藥庫。在一種實(shí)施例中，通過沉積在選定的組織部位含有一種或多種治療劑的一個或多個儲藥庫促進(jìn)組織修復(fù)、血管生成和/或動脈生成來實(shí)現(xiàn)組織再生，該儲藥庫可有效地(i)吸引循環(huán)血單核細(xì)胞、有助于血管生成和動脈生成的其它細(xì)胞，或干細(xì)胞及其分化組織的后代細(xì)胞；(ii)刺激釋放生物試劑，其促進(jìn)血管生成、動脈生成，并滲透完全分化心肌或骨骼肌纖維(肌肉細(xì)胞再生)；以及通過直接作用于單核細(xì)胞、干細(xì)胞、祖細(xì)胞和有助于血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生的其它細(xì)胞實(shí)現(xiàn)這些現(xiàn)象；以及(iii)在這種組織中影響循環(huán)血單核細(xì)胞，衍生的巨噬細(xì)胞、其它有助于血管生成和動脈生成的細(xì)胞，干細(xì)胞及其分化后代細(xì)胞的存活。例如，含有化學(xué)吸引劑如MCP-1和GM-CSF的儲藥庫,沉積在處于局部缺血的部位或局部缺血后部位，延長了循環(huán)血單核細(xì)胞和衍生的巨噬細(xì)胞的存活,。MCP-1用于吸引循環(huán)血單核細(xì)胞到組織區(qū)域并刺激被吸引的單核細(xì)胞/衍生的巨噬細(xì)胞釋放涉及血管生成和/或動脈生成的因子。吸引和剌激用于使組織巨噬細(xì)胞成熟的外周單核細(xì)胞，以及單核細(xì)胞隨后遷移進(jìn)入間隙空間，啟動釋放其直接影響形成毛細(xì)管和改造細(xì)動脈為動脈的信號因子。GM-CSF的存在增強(qiáng)了巨噬細(xì)胞的存活時間，延長了從恢復(fù)的巨噬細(xì)胞釋放生物因子的周期。以這種方式，在圍繞靶部位的組織中促進(jìn)血管生成和/或動脈生成。例如，儲藥庫含有的化學(xué)吸引劑，如干細(xì)胞因子(SCF)，其吸引循環(huán)干細(xì)胞到組織中，或G其具有增加循環(huán)干細(xì)胞數(shù)目的能力的M-CSF:沉積在處于危險中的局部缺血部位或局部缺血后部位。SCF用于吸引循環(huán)和常住干細(xì)胞到組織區(qū)域，并且GM-CSF用于增加進(jìn)入?yún)^(qū)域的干細(xì)胞數(shù)目。生長因子促進(jìn)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞，其融合以再生心肌和骨骼肌組織。以這種方式，促進(jìn)組織中圍繞耙部位的肌肉細(xì)胞再生。實(shí)施例5描述了使用含有GM-CSF、MCP-1和RANTES的儲藥庫，用于在兔局部缺血事件之后的細(xì)胞和組織再生，例如M-CSF，MCP-1和RANTES具有作為化學(xué)吸引劑的活性，用于涉及細(xì)胞再生的細(xì)胞并作為剌激物，用于分化和增殖這些細(xì)胞。作為另一實(shí)施例，所述儲藥庫也可以被制成包含細(xì)胞粘附分子，如ICAM，以促進(jìn)單核細(xì)胞或其它血管由來的和動脈由來的細(xì)胞粘附到組織區(qū)域。細(xì)胞粘附分子可以連結(jié)到一個或多個儲藥庫的外表面，或包含在所述儲藥庫內(nèi)用于釋放。粘附分子作為用于粘合素及相似物種的配體出現(xiàn)在巨噬細(xì)胞、纖維原細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的質(zhì)膜上。粘附分子也吸引巨噬細(xì)胞到所述儲藥庫并能夠物理結(jié)合到所述儲藥庫以確保巨噬細(xì)胞在所需的區(qū)域內(nèi)并使巨噬細(xì)胞最大程度地暴露于從所述儲藥庫釋放的分子發(fā)信號因子。除了化學(xué)吸引劑、刺激劑和存活促進(jìn)劑，儲藥庫可以任選地含有其它涉及血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生過程的試劑。例如，預(yù)期在儲藥庫中包含生長因子或細(xì)胞因子，以參與一系列血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生過程，或者刺激或改變該過程中的某些事件。如上面所指出的，一個或多個被夾入的治療劑的釋放動力學(xué)可以通過選擇和制備所述儲藥庫來控制。所述儲藥庫用于吸引、保留、刺激和增強(qiáng)存活、增殖和分化祖細(xì)胞，包括但不局限于外周單核細(xì)胞，心肌細(xì)胞和骨骼成肌細(xì)胞，這些細(xì)胞隨后釋放多種涉及組織再生的發(fā)信號因子，這些因子可以包含或不包含血管生成和/或動脈生成。因?yàn)樗鰞λ帋煸谑芸氐臅r間內(nèi)釋放生物試劑，可維持所述試劑的局部濃度被，以使靶組織應(yīng)答。同樣，多種生物試劑具有不同的耙細(xì)胞應(yīng)答，其可以不同的動力學(xué)方式被釋放，在組織應(yīng)答期間可達(dá)到所需試劑的有效濃度。以這種方式，涉及血管生成、動脈生成和肌肉細(xì)胞再生的多種細(xì)胞群體可以被調(diào)整和協(xié)調(diào)，以促進(jìn)在處于危險的組織中形成功能性的新脈管系統(tǒng)、心肌和外周肌肉。例如，刺激增殖排列在新細(xì)動脈或小動脈內(nèi)腔的血管內(nèi)皮細(xì)胞，可以與刺激血管平滑肌細(xì)胞的增殖和運(yùn)動性協(xié)調(diào)，以形成肌層，覆蓋血管內(nèi)皮細(xì)胞.在本發(fā)明的一種實(shí)施例中,被沉積的儲藥庫用于吸引、剌激和促進(jìn)單核細(xì)胞的存活，當(dāng)刺激時，單核細(xì)胞在血管生成和/或動脈生成過程中的適當(dāng)時間釋放適當(dāng)?shù)囊蜃?。在另一種實(shí)施例中，所述儲藥庫還含有試劑，其補(bǔ)充了從恢復(fù)的單核細(xì)胞中釋放的因子濃度，用于參與和增強(qiáng)新細(xì)動脈的形成。在另一種實(shí)施例中，本發(fā)明預(yù)期了一種在再生肌肉組織期間再生神經(jīng)的方法，沉積裝有適當(dāng)?shù)闹委煂W(xué)的和生物試劑的儲藥庫，希望在局部缺血后區(qū)域刺激神經(jīng)生長。在治療方法中，所述儲藥庫可以通過多種技術(shù)沉積在組織部位。例如，采用注入針，所述儲藥庫可以直接注入組織中或鄰近靶組織的腔體內(nèi)。儲藥庫可以單獨(dú)或與醫(yī)療設(shè)備如支架一起被手術(shù)植入。所述儲藥庫也可以通過使含有所述儲藥庫的粘性糊狀、水凝膠或其它聚合物載體基質(zhì)的薄層到腔內(nèi)壁鄰近靶部位，或其它體腔鄰近靶組織，如圍繞心臟的心外膜表面的圍心囊被沉積到組織部位。形成糊狀或凝膠的聚合物載體可以為可生物降解的和/或作為釋放生物試劑時的臨時壁部分。腔內(nèi)鋪砌系統(tǒng)在例如U.S.專利No.5,328,471中被描述。以下描述了設(shè)計(jì)成用于本組合物的腔內(nèi)鋪砌設(shè)備的特定實(shí)施例。作為實(shí)施例,被制成糊狀的儲藥庫可以沉積在圍心膜中或腦脊髓液空間屮，用于在腦梗塞或局部缺血區(qū)域誘導(dǎo)血管生成和動脈生成。由所述儲藥庫建立的濃度梯度將吸引血管由來的和動脈由來的細(xì)胞從血流進(jìn)入組織?？晒┻x擇地，糊狀或凝膠可以應(yīng)用到接近管限制區(qū)(阻塞)或健康管區(qū)域內(nèi)的管壁，以實(shí)現(xiàn)經(jīng)管壁輸送到實(shí)際的或潛在的局部缺血部位所述儲藥庫也可以采用導(dǎo)管被沉積，如以下更加詳細(xì)地描述的那樣。導(dǎo)管通常為本領(lǐng)域公知的，如能夠直接灌輸藥物的導(dǎo)管和具有給藥治療藥能力的氣球?qū)Ч転楹线m的。在優(yōu)選的實(shí)施例中，使用了具有可刺入組織或管壁用于在間隙空間內(nèi)放置所述儲藥庫的結(jié)構(gòu)的導(dǎo)管。例如，一種具有用于傳送血管由來的因子的小針的設(shè)備描述在US6，152，141中，作為參考并入本文。以下描述了另一實(shí)例的設(shè)備。在本發(fā)明方法中使用的儲藥庫也可以結(jié)合常規(guī)的藥學(xué)組合物，用于透壁傳輸。在連續(xù)的導(dǎo)管傳輸?shù)那闆r下，儲藥庫將與可接受的流體載體結(jié)合,例如，與無菌水、等壓鹽、葡萄糖溶液等一起制備。該制劑可以含有藥學(xué)可接受的輔助物質(zhì)，如在藥學(xué)制劑中常用的，包括緩沖劑、張力調(diào)整劑，如乙酸鈉、乳酸鈉、氯化鈉，氯化鉀和氯化鈣等。用于制備這些藥學(xué)制劑的常用方法描述在Remington'sPHARMACEUTICALSCIENCES中(MackPublishingCo"Philadelphia,Pa.,1985)。組合物傳送一段時間，足以達(dá)到所需的生理效應(yīng),即，促進(jìn)圍繞靶部位的組織的血管生長和重新生成肌肉細(xì)胞。一般地，被傳送的生物因子總量將根據(jù)組織狀況、患者特性和所需的效果而改變。對于特定的患者，由主治醫(yī)師決定適當(dāng)?shù)膭┝糠楹玫摹Ｓ捎谡_的劑量因人而異，取決于年齡和一般的健康狀況,醫(yī)師常規(guī)使用"劑量-滴定"法；即，開始時給患者服用的劑量低于產(chǎn)生預(yù)期的應(yīng)答所需的水平，并逐漸增加劑量直到達(dá)到所需效果。也將理解，除所選的生物因子之外，含有所述儲藥庫的制劑可以包含其它試劑。例如，制劑可以包含抗凝血劑和抗血栓形成劑，如肝素,低分子量的肝素等。B.可促進(jìn)細(xì)胞免疫應(yīng)答的治療癌癥的方法另一方面，本發(fā)明包括一種用于促進(jìn)對患者癌細(xì)胞的細(xì)胞免疫應(yīng)答的方法。所述方法包括在原發(fā)性腫瘤或轉(zhuǎn)移內(nèi)或附近沉積含有一種或多種試劑的組合物，可有效地(i)吸引一個或多個淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞到組織部位；(ii)刺激直接作用于局部和被吸引的細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)成分，并從所述局部和被吸引的細(xì)胞釋放可促進(jìn)對癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性的生物試劑；以及(iii)影響該組織內(nèi)被吸引的和局部再生細(xì)胞的存活，以促進(jìn)對癌細(xì)胞的長期免疫應(yīng)答。如上所述，包括含有一種或多種治療劑的儲藥庫的組合物通過直接注射入原發(fā)性腫瘤或通過導(dǎo)管進(jìn)入被腫瘤細(xì)胞感染的偏遠(yuǎn)部位被沉積。組合物可以與其它用于治療癌的化學(xué)治療劑一起被傳送。也預(yù)期在外科手術(shù)時或任何最低限度地?fù)p傷過程中，將所述儲藥庫沉積在所研究的組織內(nèi)或附近。如上所述的制劑也同樣適合于該方面。實(shí)施例6描述了組合物的用途。該組合物包括可生物降解的聚合物儲藥庫，其含有用于使鼠中腫瘤變性的IL-12。如上所述，IL-12作為淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞(包括樹突狀細(xì)胞)和炎性細(xì)胞的化學(xué)吸引劑。IL-12也作為這些細(xì)胞的刺激物，以促進(jìn)增殖、分化、和/或抗原表達(dá)。這些活動引起最終可導(dǎo)致腫瘤變性的應(yīng)答。IV.用于給藥實(shí)例組合物的設(shè)備另一方面，本發(fā)明提供了用于在所選的組織部位沉積儲藥庫的設(shè)備。結(jié)合圖3-18描述了設(shè)備的多種實(shí)施例。圖3為一種可效仿設(shè)備的平面圖，用于沉積如上所述的儲藥庫。設(shè)備110包括一個導(dǎo)管軸112、一個用戶界面114和一個用于存儲活塞116的外殼。圖4詳細(xì)地顯示了導(dǎo)管軸112,其中，該軸在遠(yuǎn)端118和軸加固部120之間延伸。軸加固部鄰近用戶界面14(圖3)并設(shè)計(jì)成預(yù)防軸在使用期間扭折，如后所述。導(dǎo)管軸還包括一個單軌導(dǎo)絲接合部122，其具有鄰近的導(dǎo)絲口124，用于將導(dǎo)絲引入部分122。末梢的柔性軸部126可在彎曲管中運(yùn)行，具有更強(qiáng)剛性的近軸部128，以允許推動和扭轉(zhuǎn)末梢軸部。圖5A顯示了導(dǎo)管軸112末梢部分的詳圖。顯示出導(dǎo)管軸末梢的柔性軸部126和單軌導(dǎo)絲接合部122。導(dǎo)管軸通過僅在單軌部分接合而騎在導(dǎo)絲130上。導(dǎo)絲和軸之間的有限接合通過在小口徑的容器中扭轉(zhuǎn)最大程度地操縱遠(yuǎn)端。軸終止于用于在組織部位中沉積儲藥庫的針132處。在一種實(shí)施例中，如圖5B和5C所示，針剌破組織在間隙空間內(nèi)沉積。圖5B顯示了位于主體管134內(nèi)的末梢柔性的導(dǎo)管軸部126。軸在單軌導(dǎo)絲部分122處與導(dǎo)絲130接合。針132終止于能夠刺破管壁的斜針尖136處，以進(jìn)入間隙空間并放置儲藥庫。圖5C顯示了位于管134中的相同設(shè)備，但在圖5B顯示的另一位置旋轉(zhuǎn)斜針132以刺破管壁。圖6A-6B為通過圖5C中的線6A-6A和6B-6B，顯示了單軌部分122(圖6A)和緊靠單軌部分的區(qū)域(圖6B)的橫向橫截面圖。在圖6A中，單軌部分122設(shè)在管134中。導(dǎo)絲130與單軌部分接合并位于導(dǎo)絲內(nèi)腔138中?？梢钥吹綄?dǎo)管軸的軸內(nèi)腔140，并在軸內(nèi)腔140中設(shè)有限定了針內(nèi)腔142的針132，用于傳送儲藥庫。在圖6B中顯示了靠近單軌導(dǎo)絲部分的區(qū)域，其中，可以看到限定軸內(nèi)腔140的末梢軸部126。針132設(shè)在軸內(nèi)腔140中并限定針內(nèi)腔142。在設(shè)備中處于該位置的導(dǎo)絲130不與導(dǎo)管軸接合連結(jié)。圖7A-7B說明了設(shè)備的另一實(shí)施例，其中，末梢的氣球用于定位導(dǎo)管尖，以直穿針的形式穿透組織。圖7A顯示出導(dǎo)絲130與位于設(shè)備的柔性軸部126末梢處的單軌部分122接合。氣球144安裝在單軌部分的末梢部，膨脹時為雙錐形(如所示)。如可理解的，對氣球充氣使導(dǎo)管遠(yuǎn)端以銳角放置到管壁，允許直穿針146刺破管壁，以便在附近的組織空間內(nèi)沉積儲藥庫。圖7B顯示了一種供選的實(shí)施例，其中，兩個球形氣球148、150設(shè)在單軌部分122的相對側(cè)。以膨脹狀態(tài)顯示的氣球?qū)?dǎo)管遠(yuǎn)端以銳角放置到管壁，允許直穿針146刺破管壁。圖7C和7D顯示了分別具有設(shè)在血管中的雙錐形和雙球形氣球的以上兩種實(shí)施例。在圖7C中可以理解，管壁134對氣球144有限制作用，從而使針146以角a刺破管壁。圖7D顯示出兩個球形氣球148、150被管壁限制，從而使針146以角a刺破管壁。圖8A為圖4中區(qū)域A的橫截面圖。單軌部分122包括導(dǎo)絲內(nèi)腔138和軸內(nèi)腔142。具有斜端46a的針146位于軸內(nèi)腔142內(nèi)。導(dǎo)絲130設(shè)在內(nèi)腔138中。圖8B顯示了相同的橫截面圖，但針146從導(dǎo)管軸中伸至遠(yuǎn)端118，用于在所需的組織部位放置儲藥庫。該針以具有角a的展開狀態(tài)顯示?？梢岳斫?，該角度可以在很大范圍內(nèi)變化，取決于針本身的預(yù)制曲率以及通過設(shè)備部件如氣球?qū)崿F(xiàn)的展開角,如在圖7A-7D中所討論的。圖9A為圖4中區(qū)域B的橫截面圖。末梢的柔性導(dǎo)管軸部126限定了其中安裝有針146的軸內(nèi)腔140。組分管152靠近針146，其含有熱塑性彈性體154和金屬絲編織物156。組分管和針之間的界面158作為兩元件的接觸點(diǎn)，并且可以在界面設(shè)置粘接材料或其它的連接部件。圖9B為通過圖9A中線F-F的橫截面圖，其中，可以看到針146設(shè)在導(dǎo)管軸126的內(nèi)腔140中。圖9C和9D為在具有雙錐形氣球(圖7A)或具有兩個球形氣球(圖7B)的設(shè)備中同一位置的橫截面。含有一個或多個氣球的設(shè)備將具有一個或多個通道，如圖9C中的通道158或圖9D中的通道160、162，用于將流體典型地為血管造影術(shù)的對照介質(zhì)引入氣球用于充氣，以及去除流體用于放氣。圖10為圖4中區(qū)域D的縱向橫截面圖，在從導(dǎo)管的末梢柔性軸部126到更強(qiáng)剛性的近軸部128的過渡區(qū)164上。過渡區(qū)164由熔化的加熱成型熱塑性彈性體形成，橫跨位于柔性末梢軸和剛性近軸之間的區(qū)域。位于柔性軸內(nèi)腔中的組分管152與優(yōu)選由金屬如不銹鋼組成的接頭166連接。所述組分管和第一末端166a處的連接件在界面168處通過任何適當(dāng)?shù)牟考B接，如粘接結(jié)合、焊接、焊接。例如，通過沿形成近軸128的彈性管壁170的內(nèi)壁加入加固附管169而實(shí)現(xiàn)近軸區(qū)域128內(nèi)的硬性。大體上，采用粘結(jié)或其它任何適當(dāng)?shù)牟考?，通過在附管上熱形成熱塑性的彈性體部件而將附管169和近軸部連接并固定在界面167處，允許彈性體-附管部件結(jié)構(gòu)物具有彈性。附管172鄰接第二末端166b處的接頭。附管172設(shè)于由附管169限定的內(nèi)腔中，并作為注射器的儲存桶發(fā)揮作用，其填充有將被沉積到組織部位的儲藥庫制劑。例如，附管可以填充有凍干的儲藥庫原料或液體儲藥庫懸浮液，用于通過活塞而移動通過組分管進(jìn)入針內(nèi)腔并最終進(jìn)入預(yù)期的組織。圖11更加詳細(xì)地說明了設(shè)備的這一方面。圖11為圖4中區(qū)域C的縱向橫截面，顯示了可在附管172內(nèi)移動的活塞176的位置。如以下的圖15-17所述，活塞176可通過用戶界面中的機(jī)械機(jī)構(gòu)移動，并作為可通過附管滑動的連續(xù)金屬心軸。活塞176可以由不銹鋼形成，并在遠(yuǎn)端涂有聚四氟乙烯，作為潤滑劑以允許活塞自由滑動。活塞通過附管滑動，并優(yōu)選產(chǎn)生不透液密封，以實(shí)現(xiàn)移動儲藥庫制劑。聚四氟乙烯涂層也作為從屬套管確保不透液密封。圖12為圖4中區(qū)域E的縱向橫截面，顯示出剛好位于用戶界面114(圖3)末梢的軸加固部120(圖4)。突出的管件178定位在用戶界面中，并用于使軸變硬以更好地控制設(shè)備的定位和安放。特別是，由部件178提供的加固和變硬消除了軸在該區(qū)域由于扭轉(zhuǎn)和屈曲導(dǎo)致的扭折。在詳細(xì)描述用戶界面之前，圖13中提供了一種可效仿的設(shè)備，用于將儲藥庫沉積到例如，產(chǎn)生局部缺血的動脈粥樣硬化閉塞末梢的局部缺血部位的心肌。從圖中可以看到，設(shè)備110的末梢柔性軸部分126位于左前方的下垂冠狀動脈180中。設(shè)備通過位于左側(cè)主要冠狀動脈184中的冠狀動脈導(dǎo)向管182進(jìn)入。主動脈弓、內(nèi)部的腔靜脈和左側(cè)的主要冠狀動脈孔分別顯示為186、188、190。設(shè)備由冠狀導(dǎo)絲130引導(dǎo)通過動脈粥樣化閉塞192到達(dá)局部缺血部位或處于局部缺血危險中的部位194。針132從設(shè)備展開并將儲藥庫制劑的大丸藥196沉積到局部缺血部位。在如上所述的設(shè)備實(shí)施例中，一個常規(guī)的直導(dǎo)絲(元件130)被用于將設(shè)備引導(dǎo)到所需的組織部位。在一種供選的實(shí)施例中，如圖中14A-14C所示，螺旋形導(dǎo)絲被用于使設(shè)備前進(jìn)并定位針以穿透組織。圖14A顯示了置于容器內(nèi)腔中的管200和螺旋形導(dǎo)絲202。根據(jù)本發(fā)明這一方面，導(dǎo)管設(shè)備通過跟隨螺旋形導(dǎo)絲而插入容器，如圖14B所示。為便于觀察，圖MC省略了容器，顯示了導(dǎo)管設(shè)備在其柔性遠(yuǎn)端通過螺旋形導(dǎo)絲202接合連接在單軌部分122。直穿針146從導(dǎo)管軸遠(yuǎn)端118延伸，如圖14B所示，借助于螺旋形導(dǎo)絲具有一定角度以穿過管壁?？梢岳斫猓梢愿淖兟菪螌?dǎo)絲中的扭轉(zhuǎn)角以改變穿過管壁的角度?，F(xiàn)在將參照圖15-17描述圖4所示的用戶界面120。圖15顯示了優(yōu)選實(shí)施例的用戶界面120的整體頂視圖。該界面包括末梢部分220，其在突出的管件178處剛性連結(jié)到導(dǎo)管軸(圖12)。在用戶界面的相對端為近部分222，其剛性連接到附管內(nèi)部(圖10中的元件172)，組分管(圖9A中的元件152)和針總稱為"針組件"可允許用戶控制針，包括從導(dǎo)管軸展開或延長、將所縮回軸內(nèi)的收縮位置以及針的旋轉(zhuǎn)。近部分222也可允許通過使滑動活塞前進(jìn)而控制傳送所述儲藥庫制劑(圖11的元件76)。索環(huán)224連結(jié)到用戶界面的近部分，其為活塞外殼116提供了應(yīng)變消除(也描述在圖4中)。分別位于用戶界面的近和末梢部分的有槽把手區(qū)域226、228可由用戶轉(zhuǎn)動以控制設(shè)備。特別是，旋轉(zhuǎn)把手區(qū)域228可允許將扭轉(zhuǎn)應(yīng)用到導(dǎo)管。移動把手區(qū)域226可控制針組件和旋轉(zhuǎn)針。圖16A和16B為圖15所示用戶界面的側(cè)視圖(圖16A)和斜視圖(圖16B)。設(shè)置在用戶界面近部分222的沉積用致動器按紐230為用戶可移動的，以使活塞176前進(jìn)(在圖中為不可見的，指圖11中的元件76)。下壓沉積用致動器按紐與一對輥?zhàn)踊蚧瑒訆A頭接合，以使活塞前進(jìn)并分配儲藥庫制劑的可重復(fù)沉積物。位于用戶界面末梢部分上的針組件鎖定致動器按紐232為用戶可移動的。下壓按紐232放開近部分222，可使其相應(yīng)于所述針的旋轉(zhuǎn)、前進(jìn)或縮回而旋轉(zhuǎn)、前進(jìn)或縮回。處于其完全伸開位置的按紐232，例如，當(dāng)未被下壓時，將近部分和針組件鎖定到與末梢部分和導(dǎo)管軸相應(yīng)的位置。針組件鎖定致動器按紐232坐落于凹陷234處，以預(yù)防由于疏忽而打開組件。指針式指示器236a、236b設(shè)在末梢和近部分上，以顯示針的相對旋轉(zhuǎn)程度以及傾斜的末梢針部分相對于導(dǎo)管軸的方向。圖17A-17B為圖15-16中用戶界面的斜視圖，顯示出位于取出位置(圖17A)和在其取出位置旋轉(zhuǎn)90。(圖17B)的近部分。位于取出位置的近部分相應(yīng)于針完全縮回導(dǎo)管軸的末梢部。在上面的圖中，顯示的用戶界面處于針組件被伸出的位置，針被展開以便在組織部位沉積儲藥庫制劑。針本體組件238剛性連接到近部分并在末梢部分內(nèi)可滑動式地移動和旋轉(zhuǎn)。如圖17B中所示，近部分的旋轉(zhuǎn)相應(yīng)于針的旋轉(zhuǎn)。旋轉(zhuǎn)程度可采用指針式指示器236a、236b觀看。圖18A-18D說明了一種腔內(nèi)鋪砌設(shè)備，用于沿管壁或體腔沉積組合物。該設(shè)備含有稍微伸長的柔性杯350，具有中心腔體，用于通過供應(yīng)管352接收組合物。供應(yīng)管優(yōu)選與柔性杯一體形成，并在孔354處終止，如圖18A中所示，組合物通過該孔從供應(yīng)管進(jìn)入柔性杯。杯具有打開的表面，用于沿管壁沉積組合物以及關(guān)閉后部分(參見圖18C)和側(cè)壁以確保沿壁沉積。在杯中設(shè)有附加孔356、358，用于將導(dǎo)絲360引入和引出杯。在圖18B(前視圖)、18C(后視圖)禾卩18D(插入到容器)中可以看到螺旋形導(dǎo)絲360插入杯的上孔356和下孔358。如果需要的話，可以在導(dǎo)絲孔356、358的交叉處設(shè)置適當(dāng)?shù)拿芊鈾C(jī)構(gòu)，以消除或降低在交叉處的組合物缺失。如圖18D中所示，螺旋形導(dǎo)絲與血管內(nèi)壁362剛性接觸。在使用時，柔性杯作為單軌部，由用戶或在近端自動控制而沿螺旋形導(dǎo)絲物理移動。當(dāng)杯沿單軌移動時，組合物被引入與內(nèi)管壁接觸的開口杯中。移動杯將一層組合物灑在管壁上，從本質(zhì)上講，是用組合物"鋪砌"管壁。采用活塞移動前述儲藥庫制劑可實(shí)現(xiàn)對用于鋪砌的儲藥庫組合物的供應(yīng)。通過將儲藥庫制劑持續(xù)移動并推入杯中而完成鋪砌設(shè)備沿其路徑的移動。從以上說明中可以看出如何實(shí)現(xiàn)本發(fā)明多種目的和特征。在儲藥庫中包含的組合物被沉積在需要治療學(xué)效果的特定組織空間中。所述儲藥庫能夠自由移動通過組織腔，以釋放可將多種要害細(xì)胞吸入耙組織腔的生物試劑。為了用于組織修復(fù)和再生，儲藥庫被設(shè)計(jì)成釋放可引起干細(xì)胞、輔佐細(xì)胞和/或祖細(xì)胞歸向組織腔的吸引劑，祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞取決于特定的組織類型。通過儲藥庫沉積，一些干細(xì)胞(包括骨髓造血的和間質(zhì)細(xì)胞)可以是并非不加選擇地吸引到多種不同的組織中,例如，肝、骨骼肌和腦。祖細(xì)胞的實(shí)例包含來自局部血管的內(nèi)皮細(xì)胞,包括毛細(xì)管和大動脈以及靜脈，來自骨髓的內(nèi)皮細(xì)胞祖細(xì)胞，來自局部組織的平滑肌細(xì)胞，循環(huán)平滑肌細(xì)胞祖細(xì)胞,來自局部組織或血液的成纖維細(xì)胞祖細(xì)胞,來自附近肌纖維的衛(wèi)星細(xì)胞，來自大腦皮層特定區(qū)域的神經(jīng)系統(tǒng)成年干細(xì)胞，鄰近的成肌細(xì)胞和其它細(xì)胞。輔佐細(xì)胞，包括單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞，從外周血中被吸引。類似的對特定組織罕見的噬菌細(xì)胞輔佐細(xì)胞可以從局部來源被吸引，例如，來自肝的Kupffer細(xì)胞和來自腦的小膠質(zhì)細(xì)胞。為了用于腫瘤變性，所述儲藥庫設(shè)計(jì)成釋放引起淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，分葉核白細(xì)胞，抗原提呈細(xì)胞和/或自然殺傷細(xì)胞還原的吸引劑。在腫瘤中存在這些細(xì)胞觸發(fā)了一系列可最后導(dǎo)致腫瘤變性的事件。此外，所述儲藥庫含有用于釋放的生物試劑，其刺激被吸引的細(xì)胞做多種基本事情，包括引起增殖細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)原料，如膠原和彈性蛋白，以引起變性和改造ECM,合成細(xì)胞粘附介體,合成細(xì)胞間的發(fā)信號分子，分化為具有特定功能的細(xì)胞(例如，收縮性和管理肌細(xì)胞祖細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的收縮性、為內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元和橫紋肌纖維組成特定類型的細(xì)胞連接的能力)。通過定相、多模式地釋放不同的生物試劑，儲藥庫可以通過不同的細(xì)胞群來協(xié)調(diào)合成、分化活動的連續(xù)階段。儲藥庫還另外釋放出可在臨界的細(xì)胞群中影響分化模式、功能、靜止和/或凋亡的生物試劑。由儲藥庫釋放適當(dāng)?shù)脑噭┛稍趯乃赖幕驂乃篮蟮睦w維化區(qū)域恢復(fù)到準(zhǔn)正常功能的基本事件中促進(jìn)基于細(xì)胞的控制和協(xié)調(diào)。V.實(shí)施例以下實(shí)施例說明了本文所述組合物的制備和用途，并絕非是用于限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1制備聚合儲藥庫將以下成分引入反應(yīng)器將12克甲基丙烯酸丁酯、8克乙烯基乙二醇二甲基丙烯酸酯、0.2克過氧化苯甲酰溶解在80克甲苯中，并將16克聚乙烯醇溶解在400克蒸餾水中。采用機(jī)械攪拌器攪拌容器中的物質(zhì)，以便在水相中形成有機(jī)相懸浮物。增大攪拌速度以達(dá)到平均液滴尺寸為約20pm。然后，將混合物加熱到70。C并維持該溫度3小時，以完成聚合過程并形成固態(tài)的微孔儲藥庫微粒。通過過濾收集固態(tài)微粒，并用熱水清洗數(shù)次以移走懸浮劑。將微孔微粒再次懸浮在水中，并向懸浮物中注入蒸汽以從微粒中除去甲苯。除去所有的甲苯后，用水清洗微粒，過濾并干燥。分析固態(tài)微孔聚合物微球微粒的微粒尺寸和孔隙率。微孔儲藥庫的平均微粒尺寸為25pm，且平均微?？紫堵蕿?0%。制備具有生物試劑的組合物將以下細(xì)胞因子和生長因子裝入根據(jù)實(shí)施例1中描述的方法所制備的聚合儲藥庫中。將凍干的白細(xì)胞介素-12(IL-12)、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、干擾素-Y(IFN-力、活性調(diào)節(jié)的正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的(RANTES)、次級淋巴組織趨化因子(SLC)、腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、粒細(xì)胞集群刺激因子(GCSF)和巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白-l(MCP-l)裝入微粒中，作為含有一種單一細(xì)胞因子或生長因子的微粒，或者作為含有至少一種細(xì)胞因子或細(xì)胞因子和生長因子組合物的微粒儲藥庫。按如下方式將預(yù)期試劑或試劑組合裝入微粒中。用無水異丙醇清洗lmg儲藥庫微粒，過濾并真空干燥。將100嗎凍干的細(xì)胞因子或生長因子溶解在緩沖鹽溶液中，并用0.2pm的過濾器過濾該溶液。濾液與經(jīng)清洗過濾的儲藥庫微?；旌?，并攪拌至溶液被微粒吸附。將微粒凍干以除去水相，使凍干的細(xì)胞因子或生長因子留在儲藥庫微粒中。為了裝載細(xì)胞因子組合、生長因子組合或細(xì)胞因子組合和生長因子，采用了類似的步驟。例如，將IOO嗎凍干的IL-12和100嗎凍干的GM-CSF溶解在緩沖鹽溶液中。將溶液過濾并與經(jīng)清洗干燥的聚合儲藥庫混合，直到溶液被吸附。凍干微粒，使凍干的IL-12和GM-CSF留在微孔微粒中。實(shí)施例3制備裝有GM-CSF和G-CSF以及RANTES的儲藥庫A.具有GM-CSF的微粒將100(ig凍干的GM-CSF超聲分散在lcc4%的50/50共聚物(DL-丙交酯共乙交酯)的二氯甲垸溶液中。細(xì)胞因子均勻分散后，將含有分散的細(xì)胞因子的聚合物溶液倒入過量沉淀溶劑中，如石油醚。含有分散的GM-CSF的聚合物溶液的球形液滴沉淀為含有GM-CSF的固態(tài)球形聚合物微粒。通過過濾收集固態(tài)微粒并凍干以除去殘留的溶劑。B.具有G-CSF和RANTES的微粒按以下方法制備含有細(xì)胞因子組合、生長因子組合或細(xì)胞因子和生長因子組合的可生物腐蝕微球。將100昭凍干的G-CSF和100嗎凍干的RANTES超聲分散在4%的50/50共聚物(DL-丙交酯共乙交酯)的二氯甲垸溶液中。細(xì)胞因子均勻分散后，將含有分散的細(xì)胞因子的聚合物溶液倒入過量的沉淀溶劑中，如石油醚。含有分散的G-CSF和RANTES的聚合物溶液的球形液滴被沉淀為含有G-CSF禾QRANTES的固態(tài)球形聚合物微粒。通過過濾收集固態(tài)微粒并凍干以除去殘留的溶劑。從儲藥庫組合物中體外釋放IL-12根據(jù)實(shí)施例2中描述的步驟將IL-12裝入儲藥庫微粒。測定從可生物降解的儲藥庫中釋放的IL-12,采用了在緩沖鹽溶液中培育微粒并采用了專用于IL-12的酶聯(lián)免疫吸附分析法分析釋放的IL-12。IL-12的釋放動力學(xué)顯示出在ll天內(nèi)釋放出60%的IL-12。實(shí)施例5用于細(xì)胞和組織再生的組合物將來自新西蘭白兔左前方下垂的冠狀動脈的一個主要分支結(jié)扎，由于動脈末梢到動脈阻塞引起心肌梗塞。梗塞2周后，微孔儲藥庫大丸藥和含有GM-CSF、MCP-1和RANTES的可生物降解微球，如按照實(shí)施例3B所述制備的，經(jīng)股動脈傳送到內(nèi)折區(qū)域外周。采用圖3和13中描述的儲藥庫沉積設(shè)備將微孔儲藥庫大丸藥和可生物降解微球傳送到內(nèi)折區(qū)域。一組動物接受含有GM-CSF、MCP-l禾nRANTES的儲藥庫。另一組動物作為控制組，僅接受不含細(xì)胞因子或生長因子的空白儲藥庫。作為時間的函數(shù)，通過監(jiān)測死尸的血管造影照片上側(cè)動脈尺寸和數(shù)目的增加以及血管舒張期間最大血流的增加來測定動脈應(yīng)答程度。采用從被治療的動物分離出的細(xì)胞來評價單核細(xì)胞滲入儲藥庫區(qū)域的程度以及被吸引細(xì)胞的凋亡(存活)。此外，采用組織評價了存在從骨髓經(jīng)循環(huán)進(jìn)入儲藥庫區(qū)域的多能單核細(xì)胞干細(xì)胞。實(shí)施例6從用于腫瘤變性的儲藥庫組合物中體內(nèi)釋放IL-12對每只雄性和雌性BALB/c鼠皮下注射lxl0"活的CT-26細(xì)胞,一種結(jié)腸腫瘤細(xì)胞線。允許腫瘤細(xì)胞形成具有實(shí)性腫瘤形態(tài)學(xué)和微觀結(jié)構(gòu)的實(shí)體。每2天測定一次腫瘤體積。確定腫瘤塊14天后，將動物分成兩組。一組作為控制組，另一組接受單次腫瘤內(nèi)注射150嗎含有IL-12的儲藥庫。每4天測定一次控制組和接受IL-12填充的儲藥庫治療的一組的腫瘤體積。在被治療的動物中觀察到腫瘤體積減小。盡管已根據(jù)特定實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了描述，對本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是在不偏離本發(fā)明的前提下，可以做各種改變和修改。權(quán)利要求1.一種用于誘導(dǎo)細(xì)胞應(yīng)答的組合物，其包括有效地將一個或多個預(yù)期細(xì)胞吸引到組織部位的第一試劑；有效地刺激這種細(xì)胞活性的第二試劑；以及有效地影響這種細(xì)胞存活的第三試劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中，所述組合物用于促進(jìn)細(xì)胞和/或組織再生，并且所述第一試劑有效地將一個或多個干細(xì)胞、祖細(xì)胞和輔佐細(xì)胞吸引到所述組織部位。3.根據(jù)權(quán)利要求l或2的組合物，其中，所述第二試劑有效地刺激增殖或分化的活性。4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中，所述組織選自骨骼肌、肝、胰腺、腦、心肌或中樞神經(jīng)系統(tǒng)。5.根據(jù)權(quán)利要求3的組合物，其中，所述組織為心肌組織，所述第一試劑吸引選自循環(huán)血單核細(xì)胞、循環(huán)血管生成細(xì)胞或循環(huán)動脈生成細(xì)胞的細(xì)胞；所述第二試劑刺激從所述細(xì)胞中釋放因子以促進(jìn)血管生成和/或動脈生成；所述第三試劑影響位于心肌組織中的循環(huán)血單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞的存活。6.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中，所述第一試劑選自巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5、活性調(diào)節(jié)的、正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a、MIP-1-P、N-法呢基肽、補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子P(TGF-P)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群刺激因子-l(CSF-l)或巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF)。7.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中，所述第二試劑選自巨噬細(xì)胞化學(xué)吸引蛋白(MCP)-1、MCP-2、IVICP-3、MCP-4、MCP-5、腫瘤壞死因子(TNF)-a、TNF-D、活性調(diào)節(jié)的、正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、弗氏因子、巨噬細(xì)胞炎性蛋白(MIP)-l-a、MIP-l-P、N-法呢基肽、補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5a、白三烯B4、血小板活化因子(PAF)、轉(zhuǎn)化生長因子P(TGF-beta)、白細(xì)胞介素、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集群刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集群刺激因子(G-CSF)、集群刺激因子-1(CSF-1)、巨噬細(xì)胞集群刺激因子(M-CSF)和脂多糖。8.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中，所述第三試劑選自GM-CSF、G-CSF、CSF-1或M-CSF。9.根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中，所述第一、第二或第三試劑中的一個或多個選自成纖維細(xì)胞生長因子(FGF、FGF-1、FGF-2)、TGF-a、類胰島素生長因子(IGF-1)、血管生成素-1、血管生成素-2、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、VEGF構(gòu)成物，如VEGF-2、VEGF165和VEGF121、血小板衍生生長因子(PDGF)-A、PDGF-B、PDGF-BB、胎盤衍生生長因子(PIGF)或內(nèi)皮有絲分裂生長因子。10.根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中，所述組合物用于誘導(dǎo)對腫瘤的免疫應(yīng)答，并且所述第一試劑可有效地吸引一個或多個選自T-淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、分葉核白細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞或自然殺傷細(xì)胞的細(xì)胞。11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中，所述第一試劑選自IL-8、MIG、IL-12、MCP-1、畫2、-3、隱4、-5、MIP-1a、MIP-1P、MIP-1Y或RANTES。12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的組合物，其中，所述第二試劑選自GM-CSF或IL-12。13.根據(jù)權(quán)利要求12的組合物，其中，所述第三試劑選自MIG、血小板因子4、MCP-1、-2、-3或MIP-lY。14.根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物，其中，所述試劑從組合物中同時釋放。15.根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物，其中，所述試劑從組合物中連續(xù)釋放。16.根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物，其中，所述試劑被包裹在由聚合物組成的球形儲藥庫中。17.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中，所述儲藥庫具有外表面，并且生物配體與所述外表面相連。18.根據(jù)權(quán)利要求17的組合物，其中，所述配體為細(xì)胞粘附分子。19.根據(jù)權(quán)利要求16的組合物，其中，所述組合物被包括在許多藥物儲藥庫中，制成選自乳劑、凝膠、糊狀或液體的劑型。20.—種用于在特定的組織部位誘導(dǎo)治療應(yīng)答的組合物，包括一個或多個含有根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物的儲藥。21.—種用于制備可在特定的組織部位誘導(dǎo)治療應(yīng)答的藥物的組合物，其包括一個或多個含有根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物的儲藥庫。22.—種藥物傳送設(shè)備，用于傳送根據(jù)權(quán)利要求1、2或10中任一項(xiàng)的組合物，其包括導(dǎo)管軸，其具有延伸至端口的內(nèi)腔，至少局部柔性的遠(yuǎn)端域，至少局部剛性的近端，以及在近端的加固軸部；至少一個附管，其至少部分延伸通過軸近端區(qū)域；單軌部分，其設(shè)置成鄰近導(dǎo)管軸的遠(yuǎn)端并具有導(dǎo)絲接合部；用戶界面，其具有遠(yuǎn)端和近端，并在界面遠(yuǎn)端被剛性連接到導(dǎo)管軸近端；連接到界面近端的外殼，用于容納一個可移動的活塞。23.根據(jù)權(quán)利要求22的藥物傳送設(shè)備，其還包括至少部分以未展開狀態(tài)位于導(dǎo)管軸遠(yuǎn)端域的針，其從導(dǎo)管軸以展開狀態(tài)展開。24.根據(jù)權(quán)利要求23的藥物傳送設(shè)備，其中，所述針選自直穿針或曲形針。25.根據(jù)權(quán)利要求22的藥物傳送設(shè)備，其中，所述導(dǎo)絲接合部還包括一個腔內(nèi)鋪砌設(shè)備，其用于沿管壁或體腔沉積組合物。26.根據(jù)權(quán)利要求25的藥物傳送設(shè)備，所述腔內(nèi)鋪砌設(shè)備具有一個帶有中心腔的伸長的柔性杯，其用于從導(dǎo)管軸端口接收組合物。27.根據(jù)權(quán)利要求26的藥物傳送設(shè)備，所述腔內(nèi)鋪砌設(shè)備具有至少一個上孔和一個下孔，其用于通過杯引入導(dǎo)絲。全文摘要本發(fā)明描述了用于吸引特定細(xì)胞到體內(nèi)某一部位并用于刺激被吸引的細(xì)胞和本地存在的細(xì)胞，以達(dá)到預(yù)期治療目的的組合物。在一種實(shí)施例中，描述了一種用于啟動并促進(jìn)組織修復(fù)和再生的組合物。在另一種實(shí)施例中，描述了一種用于誘導(dǎo)對腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性應(yīng)答的組合物。該組合物包括含有一種或多種治療劑的儲藥庫，其可有效地(1)將一個或多個預(yù)期細(xì)胞吸引到組織部位；(2)刺激例如增殖、分化的活性，和/或在被吸引的細(xì)胞中釋放可促進(jìn)預(yù)期活性的生物因子；以及(3)，延長被吸引的細(xì)胞，如果需要在本地的細(xì)胞內(nèi)的存活。本發(fā)明也描述了用于在預(yù)期部位組合物給藥的設(shè)備。文檔編號A61K38/00GK101123977SQ200480008003公開日2008年2月13日申請日期2004年3月25日優(yōu)先權(quán)日2003年3月25日發(fā)明者M(jìn)·弗羅伊克斯,W·布魯塞斯申請人:海里康公司