專利名稱：局部用l－肉毒堿組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種局部用組合物，該組合物包含在藥理學(xué)可接受的賦形劑中的下列組分(a)L-肉毒堿，及其鹽或混合物，和(b)一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑(skin lightening agents)，或其混合物，用來改善或防止有害皮膚癥狀(如，表皮脫落和失去皮膚彈性)，剝脫皮膚，加速皮膚更新，和/或使皮膚光亮。
背景技術(shù)：
美國專利4,839,159揭示用于改善或愈合皮膚病癥的局部L-肉毒堿組合物，皮膚癥狀包括皺紋，干燥或剝離皮膚，和灼傷(如，日光灼傷)，以及用于治愈和防止疤痕形成。
日本專利申請8291039揭示一種化妝品，它含有0.01-30重量％肉毒堿和/或氯化肉毒堿和0.01-3重量％的抗壞血酸衍生物。
因此，需要一種改善皮膚的改進的局部用組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及一種局部用組合物，該組合物包含在用于局部應(yīng)用的藥理學(xué)上可接受的賦形劑中的下面組分(a)L-肉毒堿，酰基L-肉毒堿，及其鹽或混合物，和(b)一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物?？山o予局部用組合物，以改善或防止皮膚的有害癥狀(如，表皮脫落和失去皮膚彈性)，剝脫皮膚，加速皮膚更新，和/或使皮膚光亮。例如，可給予該組合物來使水痘感染引起的疤痕形成最少，日光灼傷引起的干燥和剝離最小，并提高皮膚彈性。局部用組合物的pH較好在約3.5-8范圍，更好約6-6.5或7。根據(jù)一個實施方式，局部用組合物的pH在約3.5-6.5或7范圍。根據(jù)另一個實施方式，局部用組合物的pH在約6-8范圍，較好在約6.5-7.5范圍。根據(jù)一個實施方式，局部用組合物基本上不含D-肉毒堿，?；鵇-肉毒堿，及其鹽，更好的，所述組合物還基本上不含LD-肉毒堿，?；鵏D-肉毒堿及其鹽。
已發(fā)現(xiàn)，pH為7的局部用組合物與pH為4、5或6的類似組合物相比，L-肉毒堿能更有效更快剝脫皮膚。還發(fā)現(xiàn)，L-肉毒堿單獨或與木瓜酶組合，能比乙醇酸更快更有效地剝脫皮膚。最后，發(fā)現(xiàn)，L-肉毒堿比外消旋肉毒堿(即，DL-肉毒堿)能更有效快速剝脫皮膚。
另一個實施方式是一種局部用組合物，該組合物包含在藥理學(xué)可接受的賦形劑中的下面組分(或基本上由下面組分組成)(a)一種或多種添加劑，如一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物，和(b)有效量的L-肉毒堿，?；鵏-肉毒堿，及其鹽或混合物，以改善或防止皮膚的有害癥狀，剝脫皮膚，和/或加速皮膚更新。局部用組合物的pH約為6-8，較好約6.5-7。根據(jù)一個較好實施方式，局部用組合物包含最佳pH約為6-7的添加劑(即，添加劑能最有效達到其預(yù)期目的的pH約為6-7)。例如，添加劑可以是蛋白水解酶(如，木瓜酶)或皮膚光亮劑(如，葡糖氧化酶)，其最佳pH約為6-7。
不受任何具體理論的限制，申請人相信L-肉毒堿的內(nèi)鹽在改善或防止有害的皮膚癥狀，剝脫皮膚，加速皮膚更新，和/或使皮膚光亮方面比L-肉毒堿的酸形式具有更高的活性。在pH約為3.8，L-肉毒堿以50％酸和50％內(nèi)鹽存在。在更高pH時，L-肉毒堿主要以內(nèi)鹽存在。在本申請所述的所有實施方式中，以局部用組合物中L-肉毒堿總量為100％計，L-肉毒堿的內(nèi)鹽在局部用組合物中的濃度較好為至少80、85、90或95重量％。
另一個實施方式是一種治療干燥、剝離、疤痕或縮皺皮膚的方法，該方法是局部施用有效量的本發(fā)明局部用組合物。
又一個實施方式是一種剝脫皮膚的方法，該方法是局部施用有效量的本發(fā)明局部用組合物。用來剝脫皮膚的蛋白水解酶，如木瓜酶在使用大多數(shù)剝脫劑的pH下常常是無活性的，例如羥酸(如，乙醇酸，乳酸和水楊酸)通常在pH等于或低于4下使用。相反，本發(fā)明局部用組合物中的L-肉毒堿對這樣的蛋白水解酶沒有不利的作用，并發(fā)現(xiàn)，在對酶的最佳pH，即pH約為7(如，約6-7的pH)下最有效。
又一個實施方式是加速皮膚更新的方法，該方法是局部施用有效量的本發(fā)明局部用組合物。
又一個實施方式是使皮膚光亮的方法，該方法是局部施用有效量的本發(fā)明局部用組合物。
附圖簡述

圖1是顯示完全剝脫的參與者百分?jǐn)?shù)與用L-肉毒堿乳膏在4.0、5.0、6.0或7.0(實施例7)pH下剝脫天數(shù)的直方圖。
圖2是顯示完全剝脫的參與者百分?jǐn)?shù)與(a)沒有治療，(b)用乙醇酸乳膏在pH為4.0，(c)用L-肉毒堿乳膏在pH為4.0，(d)用L-肉毒堿乳膏在pH為7.0下剝脫天數(shù)的直方圖，如實施例8所述。
圖3是顯示完全剝脫的參與者百分?jǐn)?shù)與(a)沒有治療，(b)用5.6％L-肉毒堿乳膏，(c)用5.6％外消旋DL-肉毒堿乳膏，(d)用2.8％L-肉毒堿乳膏，和(e)用2.8％外消旋DL-肉毒堿乳膏剝脫天數(shù)的直方圖。
圖4是顯示完全剝脫的參與者百分?jǐn)?shù)與(a)沒有治療，(b)用6PU蛋白(水解單位)木瓜酶乳膏在pH為7.0，(c)用5.6％L-肉毒堿乳膏在pH為7.0，(d)用5.6％乙醇酸乳膏在pH為4.0，和(e)用6PU木瓜酶和5.6％L-肉毒堿乳膏在pH為7.0時剝脫天數(shù)的直方圖。
發(fā)明詳細(xì)說明本文中，術(shù)語“約”指在給定值的10％內(nèi)，較好5％內(nèi)，更好1％內(nèi)?；蛘?，術(shù)語“約”指在這類值的科學(xué)上可接受的誤差范圍內(nèi)，這取決于用可得到的工具進行的測定如何定性。
詞語“藥理學(xué)上可接受的”指添加劑或組合物，當(dāng)給藥予哺乳動物時，它們是藥理學(xué)上可容忍的，通常不會產(chǎn)生過敏或類似的不良反應(yīng)，如反胃，眩暈等。
合適的?；鵏-肉毒堿包括但不限于，其中的?；怯?-8個碳原子，較好有2-6個碳原子的直鏈或支鏈的烷?；哪切］^好的?；鵏-肉毒堿包括但不限于乙?；?、丙酰基、丁酰基、戊酰基和異戊?；鵏-肉毒堿。
L-肉毒堿的鹽包括但不限于L-肉毒堿的酒石酸鹽(如，L-肉毒堿L-酒石酸鹽)，L-肉毒堿檸檬酸鎂和L-肉毒堿乙醇酸鹽。其它L-肉毒堿鹽包括L-肉毒堿的酸加成鹽，并含有下列陰離子乙酸根，己酸根，藻酸根，天冬氨酸根，苯甲酸根，苯磺酸根，硫酸氫根，丁酸根，檸檬酸根，樟腦酸根，樟腦磺酸根，環(huán)戊烷丙酸根，digluconate，十二烷基硫酸根，乙磺酸根，富馬酸根，葡庚糖酸根，甘油磷酸根，半硫酸根(hemisulfate)，庚酸根，己酸根，氯化物，溴化物，碘化物，2-羥基乙烷-磺酸根，乳酸根，馬來酸根，甲磺酸根，2-萘磺酸根，煙酸根，草酸根，棕櫚酸根，果膠酸根(pectinate)，過硫酸根，3-苯基丙酸根，苦味酸根，三甲基乙酸根，丙酸根，琥珀酸根，酒石酸根，硫氰酸根，甲苯磺酸根，十一烷酸根等。
L-肉毒堿較好是高純度(即，含0.0％的D-肉毒堿)，由美國食品和藥品管理局對食品頒布的級別。L-肉毒堿可采用本領(lǐng)域已知的任何方法制備，包括Kulla，H.(1991)，Chemia 45:81中所述?？蓮膹腖onza Inc.of Fair Lawn，NJ，以L-肉毒堿結(jié)晶L-CARNIPURE和L-CARNIPURE PC獲得L-肉毒堿。L-肉毒堿可以結(jié)晶固體(如，純度＞99％)或以水溶液(如，50％水溶液，可從Lonza Inc.以L-CARNIPUREPC-50獲得的水溶液)配制到本發(fā)明的局部用組合物。在中性pH，L-肉毒堿以內(nèi)季鹽存在。在皮膚上，這種高吸濕材料顯示了增濕作用。在pH為4-7，L-肉毒堿顯示剝脫能力，并明顯縮短皮膚更新所需時間。
L-肉毒堿，?；鵏-肉毒堿，及其鹽或混合物(統(tǒng)稱“L-肉毒堿”)在局部用組合物中的濃度應(yīng)能充分獲得所需效果。通常L-肉毒堿存在量至少約0.1-20％w/w較好約1-10％w/w。L-肉毒堿在液體賦形劑中的濃度約為0.01-1.0g/ml，更常用約0.05-0.15g/ml，最常用約0.1g/ml。當(dāng)賦形劑是一種油膏，洗液或乳膏時，L-肉毒堿的存在量約為0.1-25％w/w，更常用約1-15％。
合適的羥酸包括但不限于，能剝脫皮膚和/或增強或加速皮膚更新的那些。羥酸可以是α-羥酸，β-羥酸，以及它們的混合物。α-羥酸和β-羥酸包括烷基羥基羧酸，如乙醇酸，乳酸，甲基乳酸，阿卓乳酸，檸檬酸，α-羥基丙酸丁酸，α-羥基異丁酸，蘋果酸，酒石酸，α-羥基戊酸(α-羥基異戊酸)，α-羥基己酸(α-羥基己酸)，α-羥基異己酸(α-羥基異己酸)，糖精酸，α-羥基庚酸，α-羥基辛酸(α-羥基辛酸)，α-羥基壬酸，α-羥基癸酸，葡萄糖單羧酸(葡糖庚酸)，半乳糖醛酸，葡糖醛酸，α-苯基羥基乙酸(扁桃酸)，四羥基己二酸(粘酸)，丙酮酸，β-苯基乳酸，β-苯基丙酮酸，3-羥基丁酸(β-羥基丁酸)，丙醇二酸，內(nèi)酯(如葡醛內(nèi)酯(glucoronolactone)和葡糖內(nèi)酯(gluconolactone))，這些化合物的酯和烷基和鏈烯基的衍生物，以及它們的混合物。優(yōu)選的羥酸包括但不限于，乙醇酸，乳酸，水楊酸，以及它們的混合物。通常，組合物包含約0.1-8重量％羥酸(不包括L-肉毒堿，其?；苌?，鹽和混合物)。通常，含羥酸的制劑能在pH為3.5-5下獲得最佳效果。然而，存在L-肉毒堿或其鹽，這樣的制劑在更高并對皮膚更溫和的pH系有效，如pH為約5.5-8。
合適的蛋白水解酶包括但不限于，木瓜酶，菠蘿蛋白酶，胃蛋白酶(pepsin)，肽酶，胰蛋白酶，腸激酶，α-胰凝乳蛋白酶，以及它們的混合物。通常，組合物包含約0.1-10PU(溶解蛋白單位)的蛋白水解酶。蛋白水解單位(PU)定義為每小時釋放1微克酪氨酸的等價物的酶的量。組合物一般包含0.1至約10個蛋白水解單位(PU)的蛋白水解酶。根據(jù)一個實施方式，所述組合物包含約1-6或8PU的蛋白水解酶，更好約2-6PU的蛋白水解酶。
合適的皮膚光亮劑包括但不限于，黑色素抑制劑，黑色素漂白劑，以及它們的混合物。黑色素抑制劑通常抑制酶酪氨酸酶或模仿氨基酸酪氨酸。黑色素抑制劑的非限制性例子有熊果苷，曲酸，典酸模提取物，以及它們的混合物。黑色素漂白劑的非限制性例子有過氧化物，氫醌，葡糖氧化酶，以及它們的混合物。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，局部用組合物不含抗壞血酸衍生物，如日本專利申請No.8291039中所述的那些，該專利申請參考結(jié)合于本文。通常，組合物包含0.01-2或3重量％的皮膚光亮劑。
局部用組合物通常包含藥理學(xué)可接受的賦形劑。含水溶液和非水溶液以及懸浮液都是合適的。賦形劑的性能各異，可以在寬范圍包含并且能用于所需局部或持久應(yīng)用中。乳膏，凝膠，洗液，油膏，懸浮液，和乳液基產(chǎn)品都是合適的。對大多數(shù)應(yīng)用優(yōu)選水包油乳劑。這樣的用途包括痤瘡治療，這種治療不需要在皮膚施涂另外的油。此外，不著色的水溶液可施用在衣服下面或施用到不希望水-油基組合物的其它部位。
局部用組合物的pH可以在下表列出的任一pH范圍。
不受任一具體理論的束縛，使用L-肉毒堿來加速皮膚更新可以縮短皮膚細(xì)胞將黑色素加入到其結(jié)構(gòu)中所能利用的時間，從而在皮膚上產(chǎn)生光亮效果。因此，使用L-肉毒堿與皮膚光亮劑將產(chǎn)生改善的性能，如，加快光亮。此外，由于L-肉毒堿在相對高的pH加速皮膚更新，所述局部用組合物能與一定pH的敏化光亮劑、劑相容，如在pH為6-6.5時最有效的葡糖氧化酶和在pH為6-7時最有效的剝脫酶如木瓜酶。
在皮膚上局部應(yīng)用的乳膏或油膏基料還宜經(jīng)常使用。在組合物用于干燥和剝脫的皮膚時以及需要增濕賦形劑時尤其如此。合適的基料包括羊毛脂，SILVADENETM(磺胺嘧啶銀)(Hoechst Marion Roussel，Kansas City，MO)，尤其對治療灼傷，AQUAPHORTM(Duke Laboratories，South Norwalk，Conn.)等基料。如果需要，可以在繃帶或其它創(chuàng)口敷料上加入水性或水-油基的組合物，向持續(xù)暴露的受到影響部位提供局部用組合物。發(fā)現(xiàn)也可以使用氣溶膠。
任選地，混合有效量的其它添加劑與本發(fā)明的局部用組合物。合適的添加劑包括但不限于，著色劑，香料，防腐劑，表面活性劑，顏料，抗氧化劑，增濕劑，保濕劑(或水合劑(如，十甘油(decaglycerol))，防曬劑，以及它們的混合物。例如，當(dāng)該組合物用來處理易于或涉及感染如創(chuàng)口或痤瘡的皮膚癥狀時，可加入一種抗菌劑。這類抗菌劑包括抗細(xì)菌劑，包括治療痤瘡的那些，以及抗真菌劑或其它抗菌劑。此外，L-肉毒堿可加入到防曬，遮光劑和曬黑后(post-tanning)制劑中；不含抗菌劑的痤瘡治療制劑中；化妝品制劑中；以及用于皮膚的其它目的的類似組合物中。局部用組合物中可包含抑菌劑，以防止細(xì)菌污染，因為肉毒堿組合物是細(xì)菌的良好培養(yǎng)基質(zhì)。所有組分都在由Cosmetic Toiletry Fragrance Association(ISBN1882621298)出版的International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook，第9版，2002中列出，其全部內(nèi)容參考結(jié)合于本文，這些組分可加入到本發(fā)明的局部用組合物中。例如，局部用組合物可包含潤膚劑(如，丙酸肉豆蔻基酯和辛酸/癸酸甘油三酸酯)。
根據(jù)較好的實施方式，局部用組合物包含保濕劑。較好的保濕劑是十甘油。十甘油提供(1)對皮膚保濕，(2)更美觀愉悅的產(chǎn)品，和(3)一種產(chǎn)品，施涂到皮膚上時，留給皮膚調(diào)理后的感覺。
組合物通常局部施用到皮膚的目標(biāo)部位。所述局部用組合物可每天施用，通常至少幾天施用。然而，還可以設(shè)想更經(jīng)常施用。例如，在治療受傷的組織如皮疹，痤瘡，或病原體-誘發(fā)的皮膚問題時，需要將治療用組合物在治療期間持續(xù)保持在受侵襲的部位，需要每天兩次至四次或更多次施用治療用組合物。還可在延長周期包括數(shù)年使用。
本發(fā)明除提供上述組合物外，還提供改善損害的皮膚癥狀的方法。所述方法包括在受侵襲部位施用局部用組合物。這種方法能促進治療，并使下面各種皮膚受傷的疤痕減至最小，如灼傷包括日光灼傷；痤瘡；接觸性皮炎；由于病原體，如細(xì)菌如金黃色葡萄球菌(Stapholoccocal aureus)，或病毒如水痘或單純皰疹的感染。
雖然局部用組合物和方法大多數(shù)多用于人和治療人的皮膚，設(shè)想也可用于治療其它哺乳動物的皮膚。例如，本發(fā)明的局部用組合物能治療導(dǎo)致剝脫或失去皮膚彈性的動物疾病，如獸疥癬。除用于人外，這種局部用組合物可給予動物皮膚，特別是家畜，如狗、貓、馬和牛。
濃縮物為制備含局部L-肉毒堿組合物的產(chǎn)品，一般首先制備局部L-肉毒堿組合物的濃縮物。本發(fā)明的局部L-肉毒堿組合物的制備可通過L-肉毒堿與水混合，以及任選的其它添加劑如上面所述的添加劑來進行。可加熱和/或攪拌該混合物來進行混合。
例如，濃縮物可以是液體形式，包含L-肉毒堿和水。根據(jù)一個優(yōu)選的實施方式，濃縮物還包含一種或多種保濕劑(如，十甘油)，一種或多種防腐劑，或它們的混合物。濃縮物的一個非限制性例子包含L-肉毒堿、水和保濕劑，如十甘油。
濃縮物的另一個非限制性例子包含L-肉毒堿、水和一種或多種防腐劑。濃縮物的又一個非限制性例子包含L-肉毒堿、水、一種或多種防腐劑和一種或多種保濕劑(如十甘油)。
濃縮物還可以包含一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物。換句話說，濃縮物包含(1)L-肉毒堿，(2)一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物，(3)水，和(4)任選地其它添加劑，如上述的那些。
以濃縮物總重量為100重量％為基準(zhǔn)，濃縮物可包含約0.01-100重量％L-肉毒堿，較好包含約5-80重量％L-肉毒堿。濃縮物更好地含有25-60重量％L-肉毒堿，最好約45-55重量％L-肉毒堿。
使用稀釋物使用前，濃縮物進行稀釋，較好用和濃縮物中使用的相同溶劑進行，和/或加入到一種產(chǎn)品中。
通常，產(chǎn)品含有剝脫有效量的局部L-肉毒堿組合物。使用的稀釋物一般含有約0.001重量％或約0.01-40重量％的濃縮物。根據(jù)一個優(yōu)選的實施方式，使用的稀釋物含有約1-20重量％的濃縮物。根據(jù)另一個實施方式，使用的稀釋物含有約5-15重量％的濃縮物。
下面的實施例說明本發(fā)明，但不構(gòu)成限制。所有的份數(shù)和百分?jǐn)?shù)都以重量給出，除非另外指出。
組分從Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ可獲得下面的組分LONZEST_143-S是丙酸肉豆蔻基酯(一種潤膚劑)。
ALDO_MCT是辛酸/癸酸甘油三酸酯(一種潤膚劑)。
LONZEST_MSA是硬脂酸甘油酯和PEG100硬脂酸酯的混合物(一種乳化劑)。
PEGOSPERSE_1750MS是PEG1750單硬脂酸酯(一種乳化劑)。
LONZEST_SMS是山梨醇單硬脂酸酯(一種乳化劑)。
LONZEST_GMS-C是單硬脂酸甘油酯(一種乳化劑)。
GLYCOMUL_L是山梨醇單月桂酸酯(一種乳化劑)。
ETHOSPERSE_LA-23是POE(23)月桂醇(一種乳化劑)。
GEOGARD_361是一種防腐劑。
NATRULON_H-10是84％十甘油和16％水。
下面組分可從指定的來源獲得。
POLYALDOL_10-1-O是單油酸十甘油酯，能從Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ獲得。
POLYALDOL_(6-2-S)是二硬脂酸六甘油酯，能從Lonza Inc.of Fair Lawn，NJ獲得。
二甲基環(huán)硅氧烷200TM可從Dow Corning of Midland，MI獲得。
TIOVEIL FINTM是苯甲酸C12-15烷基酯(和)二氧化鈦(和)氧化鋁(和)多羥基硬脂酸(和)二氧化硅，可從Uniqema of New Castle，DE獲得。
實施例1和2所示的制劑是剝脫/修補體系的例子，其中，組合使用L-肉毒堿與另一種羥酸，在實施例1和2中是乙醇酸。實施例3的制劑是含L-肉毒堿，與之組合有蛋白水解酶、木瓜酶和菠蘿蛋白酶的體系的例子。
實施例1按照下面所述制備有無機UV防曬劑的修補/剝脫乳膏(下面所示的制劑1)?；旌显贏相的組分，攪拌加熱至75-80℃。將B相組分加在一起，加熱至75-80℃，劇烈攪拌下將A向緩慢加入到B相。攪拌該混合物直到均勻，在繼續(xù)混合時開始冷卻。當(dāng)該批料冷卻到低于45℃時，加入C相。進行混合和冷卻至35℃，然后加入D相。進行混合，冷卻該混合物至25℃。該制劑通過了50℃兩個月的穩(wěn)定性測試。該制劑的pH為4.5。
制劑1組分重量％A相硬脂酸 3.00苯甲酸烷基酯中的二氧化鈦5.00礦物油 1.50鯨蠟醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA2.25PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS1.50B相脲 10.00丁二醇 3.00去離子水43.18C相乙醇酸(70％)6.57L-肉毒堿2.00氫氧化鈉(50％) 3.50
去離子水13.50D相GEOGARD_3610.25實施例2按照實施例1所述制備有UV防曬劑的修補/剝脫乳膏(下面所示的制劑2)。該制劑通過了50℃兩個月的穩(wěn)定性測試。該制劑的pH為4.5。
制劑2組分重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二芐基甲烷0.50對甲氧基肉桂酸辛酯 2.00礦物油 1.50鯨蠟醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA1.50PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS2.25B相脲 10.00丁二醇 3.00去離子水45.50C相乙醇酸(70％)6.57L-肉毒堿1.00氫氧化鈉(50％) 3.18
去離子水 15.00D相GEOGARD_361 0.25實施例3按照實施例1所述制備有蛋白水解酶的修補/剝脫乳膏(下面所示的制劑3)。該制劑通過了45℃兩個月的穩(wěn)定性測試。該制劑的pH為6.5。
制劑3組分 重量％A相硬脂酸3.00丁基甲氧基二芐基甲烷 0.50對甲氧基肉桂酸辛酯2.00礦物油1.50鯨蠟醇1.00LONZEST_143-S1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEGOSPERSE_1750MS0.75LONZEST_SMS 2.25B相脲3.00丁二醇3.00去離子水 50.00C相乙醇酸(70％) 2.00L-肉毒堿 1.00甘油 7.00
去離子水 16.25D相GEOGARD_361 0.25木瓜酶&菠蘿蛋白酶 2.00加速剝脫更新速率的一個結(jié)果是在基層生成的新的皮膚細(xì)胞在向表面移動時從黑色素細(xì)胞獲取黑色素的機會減少。結(jié)果，L-肉毒堿可以單獨使用或與其它組分(如，曲酸，熊果苷，典酸模提取物，或葡糖氧化酶)組合使用，使皮膚光亮(Hasunuma，K等“含肉毒堿和抗壞血酸的皮膚光亮化妝品”Jap.Patent 1996)。實施例4-6是皮膚光亮制劑。實施例4和5包含化學(xué)光亮劑，而實施例6包含一種酶光亮劑葡糖氧化酶。
實施例4按照下面所述制備有UV防曬劑的光亮乳膏(下面所示的制劑4)?；旌螦相的組分，加熱至約80℃。將B相組分加在一起，并且持續(xù)攪拌下加熱至約80℃。攪拌下將B相緩慢加入到A相。當(dāng)摻混物均勻時(15分鐘)開始冷卻。繼續(xù)混合該批料，直到溫度冷卻到低于40℃。加入C相。繼續(xù)混合，直到該摻混物冷卻到25℃時。制劑通過了45℃兩個月的穩(wěn)定性測試。制劑pH為6.5。
制劑4組分 重量％A相去離子水 41.0B相鯨蠟醇 4.0ALDO_MCT 3.0二甲基環(huán)硅氧烷(Dimethicone)2.0200液體凡士林 3.0醋酸生育酚(Tocopheryl acetate) 1.0
Tioveil FIN 4.0LONZEST_GMS-C3.0POLYALDOL_10-1-O 3.0GLYCOMUL_L 3.0C相去離子水 28.7L-肉毒堿 1.00熊果苷2.00氫氧化鈉(50％)0.8GEOGARD_361 0.5實施例5按照實施例4所述制備有熊果苷，酸模屬和肉毒堿的酸光亮劑膏(下面所示的制劑)。該制劑通過了45℃3個月的穩(wěn)定性試驗，制劑的pH為4.5。
制劑5組分 重量％A相去離子水 40.0甘油 4.0B相ALDO_MCT 5.0二甲基環(huán)硅氧烷200 1.7凡士林1.7鯨蠟醇3.4硬脂酸3.4醋酸生育酚0.9丁基甲氧基二芐基甲烷 1.7對甲氧基肉桂酸辛酯5.0POLYALDOL_(6-2-S)3.5
ETHOSPERSE_LA-23 2.5LONZEST_MSA 4.0C相去離子水 6.2典酸模(Rumex)(4％活性) 12.5L-肉毒堿 1.0熊果苷 1.0乙醇酸 1.0GEOGARD_3610.5氫氧化鈉(50％) 1.0實施例6按照下面所述制備有葡糖氧化酶的光亮劑膏(下面所示的制劑6)?；旌螦相組分混合并加熱至75-80℃。將B相組分加在一起，并加熱到75-80℃。劇烈攪拌下，將A相緩慢加入到B相。攪拌該摻混物直到均勻，開始冷卻，同時繼續(xù)攪拌。當(dāng)該批料冷卻至低于45℃時，加入C相?；旌喜⒗^續(xù)冷卻至35℃，然后加入D相。緩慢混合下冷卻該摻混物至25℃。調(diào)節(jié)摻混物的pH至6.5。制劑通過了45℃兩個月的穩(wěn)定性測試。
制劑6組分 重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二芐基甲烷 0.50對甲氧基肉桂酸辛酯 2.00礦物油 1.50鯨蠟醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEG0SPERSE_1750MS 0.75
LONZEST_SMS 2.25B相脲3.00丁二醇3.00去離子水 50.00C相L-肉毒堿 1.00甘油 7.00熊果苷1.00去離子水 17.25D相GEOGARD_36 10.25葡糖氧化酶2.00實施例7按照下面所述測定改變局部L-肉毒堿組合物的pH對剝脫作用的影響。按照實施例2所述制備有UV防曬劑的含L-肉毒堿的修補/剝脫乳膏，不同之處是(1)B相包含10.00％脲，3.0％Natrulon_H-10，和45.50％去離子水，(2)C相包含(a)5.6％L-肉毒堿，(b)將所述膏的pH調(diào)節(jié)至4、5、6或7的適量(q.s.)氫氧化鈉和鹽酸，和(c)20.1％去離子水。
各局部用組合物(乳膏)如下進行測試。在皮膚上每天施用兩次所述組合物(約0.2g/10cm2)，20天的周期，使用丹磺酰氯法測定剝脫。還測定不含L-肉毒堿(即，僅有賦形劑)的對照局部用組合物。
丹磺酰氯法是測定皮膚更新時間的一種方法。該方法涉及首先用熒光染料(即，丹磺酰氯)處理皮膚，然后用UV光，觀察熒光性隨時間的消失。當(dāng)該位置不再發(fā)出熒光時，可以認(rèn)為皮膚已經(jīng)轉(zhuǎn)變。
結(jié)果示于圖1。
實施例8按照實施例2上所述制備有UV防曬劑的修補/剝脫乳膏，不同之處是(1)B相包含10.00％脲，3.0％Natrulon_H-10，和45.55％去離子水，(2)C相包含(a)5.6％乙醇酸(100％活性)，(b)5.6％氫氧化鈉(50％)，和14.50％去離子水。該膏的pH為4.0。
比較乙醇酸乳膏的剝脫效果與按照實施例7所述方法在實施例7的L-肉毒堿膏在pH為4和為7使的剝脫效果。還測定不含L-肉毒堿或乙醇酸的對照局部用組合物。結(jié)果示于圖2。
實施例9采用實施例7所述的方法，測定含2.8％或5.6％L-肉毒堿或2.8％或5.6％外消旋(DL)肉毒堿的局部用組合物(pH都為7)的剝脫效果。測試的5.6％L-肉毒堿的組合物是實施例7中所述的。5.6％DL-肉毒堿組合物按照實施例7所述制備，只是5.6％L-肉毒堿被5.6％DL-肉毒堿替代。2.8％L-肉毒堿和2.8％DL-肉毒堿組合物按照實施例7所述制備，只是5.6％L-肉毒堿分別被(1)2.8％L-肉毒堿和2.8％DL-肉毒堿替代，以及(2)2.8％去離子水。DL-肉毒堿是一種含50％L-肉毒堿和50％D-肉毒堿的混合物。還測定不含L-肉毒堿或DL-肉毒堿的對照局部用組合物。
結(jié)果示于圖3。圖3顯示，在同樣濃度，L-肉毒堿比外消旋肉毒堿能更有效剝脫。
實施例10按照下面所述測定包含(1)木瓜酶，(2)5.6％L-肉毒堿，(3)5.6％乙醇酸，或(4)木瓜酶與5.6％L-肉毒堿的局部用組合物的剝脫效果。
分別按照實施例7和8所述，制備5.6％L-肉毒堿組合物(pH7)和5.6％乙醇酸組合物。
按照下面所述制備具有下面制劑的含木瓜酶的局部用組合物(含6蛋白水解單位(PU)的木瓜酶，整個pH為7.0)?；旌螦相的組分并加熱至75-80℃。將B相組分加在一起，加熱至75-80℃，劇烈攪拌下將A相緩慢加入到B相。攪拌該混合物直到均勻，開始快速冷卻，同時繼續(xù)混合。當(dāng)該批料冷卻至低于45℃時，加入C相。混合并繼續(xù)冷卻至35℃時，加入D相。
該混合物冷卻混合至25℃。按照需要用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。
有防曬劑和酶的修補/剝脫乳膏組分 重量％A相硬脂酸 3.00丁基甲氧基二芐基甲烷 0.50對甲氧基肉桂酸辛酯 2.00礦物油 1.50鯨蠟醇 1.00LONZEST_143-S 1.50ALDO_MCT 1.50LONZEST_MSA 1.50PEGOSPERSE_1750MS 0.75LONZEST_SMS 2.25B相脲 10.00Natrulon_H-10 3.00去離子水 45.55C相GEOGARD_361 0.25D相木瓜酶溶液(7克水，5克十甘油12.02和0.02克木瓜酶)NaOH(濃) 適量HCl(濃)適量去離子水 13.68按照制備木瓜酶組合物所述相同的方法，制備含5.6％L-肉毒堿和木瓜酶的組合物，除了D相包含(1)12.02％木瓜酶溶液，(2)5.6％L-肉毒堿，(3)適量氫氧化鈉(濃)和鹽酸(濃)，和(4)8.08％去離子水。
按照實施例7所述的方法測定所述組合物。還測試不含L-肉毒堿，木瓜酶或乙醇酸的對照局部用組合物。
結(jié)果示于圖4。圖4表明L-肉毒堿和酶木瓜酶在pH為7時的摻混物比它們單獨使用時更有效和作用更快。
實施例11按照下面所述測定含5％十甘油或5％甘油的組合物的增濕效果。
該組合物通過混合下面組分制備(1)10％油相組分，(2)5％十甘油或5％甘油，和(3)1％NovemerTMECS-1水溶液(從Noveon of Cleveland，Ohio獲得)(增稠劑/第二乳化劑)。
將各組合物每天兩次施用于皮膚(0.2g/10cm2)，10天的周期，用corneometer測定皮膚的水含量。還測定未處理的皮膚作為對照。結(jié)果示于下表1。
表1
實施例12主觀的評價小組投票，評價含4％(w/w)甘油和4％十甘油的組合物的皮膚性能。按照實施例11所述的方法制備組合物(即，有10％油相組分和1％NovemberTMECS-1)。將該組合物施涂在皮膚上，要求參與者根據(jù)特定標(biāo)準(zhǔn)列出組合物的性能。要求參與者以1-5的規(guī)格記下每個標(biāo)準(zhǔn)的分，1是最差，5是最好。結(jié)果列于下表2。
表2
在此列出的所有參考文獻都參考結(jié)合于本文。對本說明書和參考文獻間存在矛盾的內(nèi)容，揭示內(nèi)容的語言在此作為對照。
權(quán)利要求
1.一種用于改善或防止有害的皮膚癥狀，剝脫皮膚，加速皮膚更新或使皮膚光亮的局部用組合物，該局部用組合物包含在對局部應(yīng)用的藥理學(xué)可接受的賦形劑中的有效量的下面組分(a)L-肉毒堿，?；鵏-肉毒堿，及其鹽或它們的混合物，和(b)一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物。
2.如權(quán)利要求1所述的局部用組合物，其特征在于，局部用組合物的pH約為3.5-8。
3.如權(quán)利要求1所述的局部用組合物，其特征在于，局部用組合物的pH約為6-8。
4.前述權(quán)利要求中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，所述羥酸是乙醇酸，乳酸，水楊酸，或它們的混合物。
5.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，蛋白水解酶是木瓜酶，菠蘿蛋白酶，或它們的混合物。
6.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，皮膚光亮劑是黑色素抑制劑。
7.如權(quán)利要求6所述的局部用組合物，其特征在于，黑色素抑制劑是熊果苷，曲酸，典酸模提取物，或它們的混合物。
8.如權(quán)利要求1-3中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，皮膚光亮劑是黑色素漂白劑。
9.如權(quán)利要求8所述的局部用組合物，其特征在于，黑色素漂白劑是過氧化物，氫醌，酶葡糖氧化酶，或它們的混合物。
10.前述權(quán)利要求中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，局部用組合物選自油膏，洗劑，凝膠，懸浮液，乳劑和乳膏。
11.一種剝脫皮膚的方法，包括局部施用有效量的前述權(quán)利要求中任一項所述的局部用組合物。
12.一種加速皮膚更新的方法，包括局部施用有效量的權(quán)利要求1-10中任一項所述的局部用組合物。
13.一種使皮膚光亮的方法，包括局部施用有效量的權(quán)利要求1-10中任一項所述的局部用組合物。
14.一種局部用組合物，包含在藥理學(xué)可接受的賦形劑中的下面組分(a)一種或多種添加劑，和(b)有效量的L-肉毒堿，?；鵏-肉毒堿，及其鹽，或它們的混合物，以改善或防止有害的皮膚癥狀，剝脫皮膚，和/或加速皮膚更新，所述局部用組合物的pH在約6-8范圍。
15.如權(quán)利要求14所述的局部用組合物，其特征在于，局部用組合物的pH約為6.5-7。
16.如權(quán)利要求14或15所述的局部用組合物，其特征在于，添加劑的最佳pH為約6-7。
17.如權(quán)利要求14-16中任一項所述的局部用組合物，其特征在于，添加劑是蛋白水解酶或皮膚光亮劑。
18.如權(quán)利要求17所述的局部用組合物，其特征在于，蛋白水解酶是木瓜酶。
19.如權(quán)利要求17所述的局部用組合物，其特征在于，皮膚光亮劑是葡糖氧化酶。
全文摘要
本發(fā)明提供一種局部用組合物，該局部用組合物包含在對局部應(yīng)用的藥理學(xué)可接受的賦形劑中的有效量的下面組分(a)L－肉毒堿，?；鵏－肉毒堿，及其鹽或它們的混合物，和(b)一種或多種羥酸，蛋白水解酶，皮膚光亮劑，或它們的混合物。給予局部用組合物，以改善或防止有害的皮膚癥狀(表皮剝脫和失去皮膚彈性)，剝脫皮膚，加速皮膚更新和/或使皮膚光亮。例如，給予該組合物，來使水痘感染引起的疤痕形成最少，日光灼傷引起的干燥和剝離最小，并提高皮膚彈性。局部用組合物的pH較好在約3.5－8范圍。根據(jù)一個實施方式，局部用組合物的pH在約3.5－6.5或7范圍。根據(jù)另一個實施方式，局部用組合物的pH在約6－8范圍，較好在約6.5－7.5范圍。根據(jù)一個優(yōu)選實施方式，局部用組合物基本上不含D－肉毒堿，?；鵇－肉毒堿，及其鹽，更好的，所述組合物還基本上不含LD－肉毒堿，?；鵏D－肉毒堿及其鹽。
文檔編號A61K31/19GK1964695SQ200480008473
公開日2007年5月16日 申請日期2004年3月29日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月28日
發(fā)明者J·古斯, M·F·楚扎克, V·倫蒂納 申請人:隆薩股份有限公司