專利名稱：用于治療疼痛性神經病的藥物組合物及其治療方法
技術領域：
本發(fā)明涉及用于治療疼痛性神經病的組合物和方法，其包括促紅細胞生成素(EPO)。
背景技術：
人免疫缺陷病毒(HIV)的一種癥狀是認知和運動機能失調綜合癥，稱為HIV伴隨的癡呆(HAD)。雖然在進行高活性的抗逆轉錄病毒的治療(HAART)的時候，更常見的是一種較輕微形式的神經機能失調，叫做輕微認知/運動失調(MCMD)，而不是明顯的癡呆。HAD和MCMD是獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)死亡的重要的獨立危險因素(Kaul，M.，et al.，Nature 410988-994(2001)，and Power，C.，et al.Can.J.Neurol.Sci.29.19-32，(2002))。盡管在外周病毒復制的控制和機會感染的治療上取得了進步，但HAART并不能為HAD的發(fā)生提供完全的保護。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及可抑制例如與傳染性疾病例如HIV-1感染相關的神經細胞死亡的組合物和方法。所述方法的實施是將暴露于HIV-1的神經細胞與可抑制細胞凋亡的量的EPO多肽接觸。所述EPO是在神經細胞暴露于HIV-1或gp120之前或之后給藥。所述EPO還可以在檢測到神經病癥狀之前或之后給藥。優(yōu)選在gp120誘導的細胞凋亡發(fā)生之前使神經細胞與EPO多肽接觸。與不存在EPO的情況相比，在存在EPO的情況下神經細胞的死亡減少。例如，與不存在EPO的情況相比，在存在EPO的情況下或者將所述細胞與EPO接觸以后，神經細胞的死亡減少了10％，50％，100％，200％，或更多。所述方法任選地包括將神經細胞或神經組織與EPO受體多肽接觸的步驟。
本發(fā)明還包括通過優(yōu)先使神經組織與可抑制細胞凋亡的量的EPO多肽接觸，從而抑制神經細胞死亡的方法。例如，將所述EPO進行鼻內或鞘內給藥，以使非神經組織盡可能少地暴露于所給予的EPO。任選地，可給予EPO受體多肽。
一種減少傳染病伴隨的神經病或慢性病伴隨的神經病(例如糖尿病伴隨的神經病)的神經系統(tǒng)疾病癥狀的方法，其是通過鑒別患有具有神經病癥狀的傳染性疾病(例如HIV-1)或慢性病的個體，然后給該個體施用治療有效量的促紅細胞生成素。在給予了EPO組合物之后，例如疼痛和認知機能失調如輕微或嚴重癡呆的癥狀減少。例如，患者是男性或是非哺乳期的女性。
EPO的治療有效量是能夠減少神經系統(tǒng)疾病癥狀的量。EPO優(yōu)選以能減少gp120誘導的神經細胞的細胞凋亡性死亡，CXCR4-活化，星狀細胞增多，巨噬細胞滲透，小神經膠質細胞數目增多，多核巨細胞，髓磷脂顏色灰白，樹突和突觸損傷，導致神經細胞明顯減少的細胞凋亡，巨噬細胞/小神經膠質細胞的積累，gp41-，gp160-，Tat-，Nef-，Rev-或Vpr-誘導的神經細胞的細胞凋亡性死亡，Ca2+過量，p38促細胞分裂劑激活的蛋白激酶(MAPK)的活化，細胞色素從線粒體的釋放，caspase活化，自由基形成，脂質過氧化作用，染色質凝聚的量給藥。例如，促紅細胞生成素的治療有效量是大約1U/kg/天到2000U/kg/天，可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量是大約1U/kg/天到2000U/kg/天。任選地，IGF-1與EPO同時給藥或者一起給藥(例如在EPO給藥前后數分鐘，1-12小時，或1-7天內)。胰島素樣生長因子-I的治療有效量是大約1U/kg/天到2000U/kg/天。所述組合物通過鼻內，鞘內，或靜脈內給藥?？扇苄源偌t細胞生成素受體與促紅細胞生成素一起給予患者的時候其量應當能夠增加促紅細胞生成素的穩(wěn)定性。
本發(fā)明還包括含有促紅細胞生成素，可溶性促紅細胞生成素受體，以及藥學可接受的載體的藥物組合物，以及含有置于一個或多個容器中的上述藥物組合物的試劑盒。本文所述的組合物是純化的。例如，在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中，或用其它重組方法表達重組蛋白，并用本領域公知的方法從培養(yǎng)的細胞中分離重組蛋白。通過純化和分離使所述組合物中所需要的蛋白或多肽的重量百分比(w/w)為85％。優(yōu)選地，所述組合物中所需要的蛋白或多肽的重量百分比(w/w)為至少90，95，98，99或100％。
發(fā)明詳述促紅細胞生成素(EPO)和或不和可溶性EPO受體(其能使EPO的短半衰期增長)同時給藥以治療HIV伴隨的癡呆(HAD)，輕微認知/運動失調(MCMD)，HAD伴隨的神經疼痛，或其它原因引起的神經疼痛。EPO保護神經細胞不會因暴露于HIV-1相關的毒素包括包膜糖蛋白gp120而受到損傷和產生細胞凋亡。
HIV-1包膜糖蛋白gp120可誘導神經細胞的損傷和細胞凋亡，這會導致HIV伴隨的癡呆(Kaul，et al.，Nature 410988-994(2001))。EPO是一種腦產生的神經保護細胞因子(Digicaylioglu& Lipton，Nature 412641-647(2001))，但是目前還沒有評價過它對gp120誘導的神經細胞損傷的效果。
促紅細胞生成素(EPO)是誘導紅系祖細胞的增殖和分化的主要的生長因子，也是包括白介素2到7，G-CSF，GM-CSF，TPO，生長激素和瘦素在內的細胞因子家族的成員(Koury andBondurant，Transfusion 30673-674(1992))。
EPO與其受體的結合可通過配體介導的受體在細胞表面的二聚化作用引起信號傳導。能向EPO受體的胞外域的近膜部分引入半胱氨酸殘基，并能導致細胞表面上形成二硫鍵連接的受體二聚體的點突變具有組成型活性。這種受體在缺乏激素的條件下可導致EPO依賴的細胞系的細胞增殖以及EPO的其它生物活性(Yoshimura et al.，Nature 348647-649(1990)；Watowich et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 892140-2144(1992)；and Watowich etal.，Mol.Cell.Biol.143539-3549(1994))。這些組成型EPO受體在小鼠中的表達通過未受調控的信號傳導途徑的激活導致白血病(Longmore and Lodish，Cell 671089-1102(1991)；Longmore etal.，Mol.Cell.Biol.142266-2277(1994))。EPO受體的激活是在連續(xù)的二聚化機制之后發(fā)生的，并在第二個受體與低親和力位點2結合之前與EPO上的一個高親和力位點1結合(Matthews et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 939471-9476(1996))。
這里所說的術語“促紅細胞生成素”與“EPO”同義，是指基本上具有天然的人EPO的氨基酸序列(SEQID NO1)或其同系物的多肽。可用于本發(fā)明的EPO包括人和其它靈長類EPO，哺乳動物EPO例如牛，豬，小鼠和大鼠同系物以及其它脊椎動物的同系物例如斑馬魚的同系物。因此，術語EPO包括種屬同系物，還包括剪接形式，同型和糖基化變體以及表1中所示的成熟人EPO序列(SEQ ID NO1)的前體。
表1.成熟人促紅細胞生成素的氨基酸序列APPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALRAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDR(SEQ ID NO1)EPO通常具有與天然的成熟人EPO(SEQ ID NO1)的序列至少大約80％氨基酸相同性的氨基酸序列，并且可以與SEQ IDNO1具有例如90％或95％或更高的氨基酸相同性。用NCBI網站上的BLASTP用標準參數確定序列相同性。
天然的促紅細胞生成素是高度糖基化的，用中國倉鼠卵巢(CHO)細胞制備的EPO具有三個N連接的和一個O連接的糖基化位點，其平均糖含量為大約40％。在天然EPO中，糖對于穩(wěn)定性，生物合成，頂端分泌和生物活性具有重要作用。特別是，糖基化看來似乎可以增強EPO的構象穩(wěn)定性和溶解性，而構象本身并不受影響。因此，EPO類似物可以是與天然人EPO相比超糖基化的EPO形式。這種類似物是本領域公知的達比波廷(Darbepoietin)，但是并不限于此。
具有不同糖基化模式的促紅細胞生成素的各種形式都是商業(yè)可獲得的，包括但不限于，EPOGEN(Amgen；Thousand Oaks，CA)；EPOGIN(Chugai Pharmaceuticals；Tokyo，Japan)；EPOMAX(E1anex；Bothell，WA)；EPREX(Janssen-Cilag；Beerse，Belgium)；NEORECORMON和RECORMON(Roche；Basel，Switzerland)和PROCRIT(Ortho Biotech；Raritan，NJ)?？梢垣@得EPO的各種形式，一般的例如EPOETIN ALFA，EPOETIN BETA和EPOETINOMEGA。因此，應當理解可用于本發(fā)明的EPO可以獲得其商品或者可以用各種公知的方法獲得，包括但不限于從天然來源中純化，重組表達，或肽或化學合成。本發(fā)明的方法可以，如果需要的話，用“EPO類似物”來實施。這里所說的術語“EPO類似物”是指能誘導或增強促紅細胞生成素受體的表達，活性或細胞內信號傳導，并且與胰島素樣生長因子一起對神經細胞產生協(xié)同性的急性神經保護作用的分子。這種類似物可以是，但不限于，蛋白質，肽，肽模擬物，小分子，核糖酶，核酸分子，寡核苷酸，寡糖，細胞，噬菌體或病毒，或其組合。如下所述的，可用于本發(fā)明的EPO類似物包括，但不限于促紅細胞生成素模擬肽(EMP)；環(huán)狀分子例如環(huán)肽或肽模擬物；二聚或寡聚EPO類似物；在血漿中半衰期增長的類似物；抗EPO受體的抗體；誘導EPO受體二聚化的小分子藥物；EPO的超糖基化形式；EPO編碼的核酸分子；和EPO受體的組成形式。應當理解術語EPO類似物包括EPO的活性片段，如上文所述。
可溶性EPO受體可以與EPO一起給患者施用以增加EPO在患者中的半衰期。EPO受體的氨基酸序列的實例如下述表2所示。
表2.人EPO受體的氨基酸序列1 mdqlrvarwp rvsplcllla gaawasspsl pdpkfeskaa llasrgseel lcftqrledl61 vcfweeaans gmgfnysfsy qlegesrksc rlhqaptvrg smrfwcslpt adtssfvple121 lqvteasgsp ryhriihine vvlldapagl larraeegsh vvlrwlpppg apmtthirye181 vdvsagnrag gtqrvevleg rtecvlsnlr ggtrytfavr armaepsfsg fwsawsepas241 lltasdldpl iltlslilvl isllltvlal lshrralrqk iwpgipspen efeglftthk301 gnfqlwllqr dgclwwspss pfpedppahl evlserrwgv tqagdagaed kgpllepvgs361 eraqdtylvl dewllprcpc senlsgpgds vdpatmdegs etsscpsdla skprpegtsp421 ssfeytildp sskllcpral ppelpptpph lkylylvvsd sgistdyssg gsqgvhgdss481 dgpyshpyen slvpdteplr psyvacs(SEQ ID NO2)重組人EPO在加熱的時候會形成二聚體，在半胱氨酸-7和-161之間形成分子間二硫鍵。因此促紅細胞生成素的寡聚形式，以及寡聚的EPO片段和其類似物都可用于本發(fā)明。參見，DePaoliset al.，J.Pharm.Sci.841280-1284(1995)，和Derby et al.，Int.J.Peptide Protein Res.47201-208(1996)。
可用于本發(fā)明的EPO或其活性片段或其類似物包括二聚體和三聚體以及更多的多聚體形式。EPO的寡聚體形式可以包括兩個或更多個，三個或更多個，四個或更多個，五個或更多個，六個或更多個，七個或更多個，八個或更多個，九個或更多個，十個或更多個，十五個或更多個，二十個或更多個，50個或更多個，100個或更多個，200個或更多個，500個或更多個，或1000個或更多個拷貝的EPO或其活性片段或其類似物。例如化學交聯(lián)的，合成肽化學的，噬菌體展示的和用鏈霉親和素進行生物素標簽結合的EPO都可用于產生寡聚EPO類似物。
二聚和三聚的EPO類似物可用異雙功能交聯(lián)試劑形成，例如對第一種促紅細胞生成素單聚體進行化學修飾使其含有自由的硫氫基殘基，然后將它與第二種含有馬來酰亞胺基的促紅細胞生成素單聚體混和；然后通過例如分子排阻HPLC純化寡聚EPO。
天然人促紅細胞生成素具有相對較短的血漿半衰期，大約4到13個小時，而具有較大分子尺寸的EPO類似物具有降低的清除率，并因此在血漿中的殘存率和體內生物活性增加。因此，較高分子量的EPO類似物包括EPO的寡聚形式，或其活性片段或其類似物，與天然單聚體人EPO相比在血漿中的半衰期增長(Sytkowski et-al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 951184-1188(1998))。EPO的寡聚體形式可以具有，例如至少15，18，21，24，48，72或96個小時的半衰期。本領域技術人員應當知道，可以用可溶性EPO受體增加天然促紅細胞生成素，或其活性片段或其類似物的半衰期，從而提高其治療價值。
促紅細胞生成素的許多形式，以及其活性片段和其類似物都可用于本發(fā)明的方法。神經細胞與EPO或其活性片段，例如與人EPO或其活性片段接觸。在另一個實施方案中，神經細胞與EPO類似物接觸，EPO類似物可以是但不限于肽，肽模擬物，小分子或核酸EPO類似物。優(yōu)選的EPO類似物包括下述氨基酸序列GGTYSCHEGPLTWVCKPQGG(SEQ ID NO3)；GGDYHCRMGPLTWVCKPLGG(SEQ ID NO4)；GGVYACRMGPITWVCSPLGG(SEQ ID NO5)；VGNYMCHFGPITWVCRPGGG(SEQ ID NO6)；GGLYLCRFGPVTWDCGYKGG(SEQ ID NO7)；或GGCRIGPITWVCGG(SEQ ID NO8)。
EPO，或其活性片段或其類似物，優(yōu)選與EPO受體的親和力比天然人EPO至少高10倍。EPO蛋白或其活性片段可以是寡聚體，例如二聚體。例如EPO的二聚體形式可以是一種二聚體，其每個單體都具有下述氨基酸序列GGTYSCHFGPLTWVCKPQGG(SEQ ID NO3)。
HIV感染的神經病理學HAD通常伴隨著特定的神經病理學結果，例如星狀細胞增多，巨噬細胞滲透，小神經膠質細胞的數目增多，多核巨細胞，髓磷脂顏色灰白，樹突和突觸損傷，導致神經細胞明顯減少的細胞凋亡。與HIV-1感染的HAD的嚴重程度相關的巨噬細胞/小神經膠質細胞或免疫刺激的巨噬細胞/小神經膠質細胞的積累可產生神經毒素。重要的是，神經細胞并不被HIV-1感染，星狀細胞很少被感染并且主要是發(fā)生在兒科病例中。
有趣的是，據報道甚至是在缺乏完整病毒的情況下，HIV蛋白gp120，gp41，gp160，Tat，Nef，Rev，和Vpr能引起神經細胞損傷，至少是在體外以及動物模型的某些體內情況下。在嚙齒動物中在體內給腦室內注射gp120會引起腦損傷，表達gp120的轉基因鼠模型具有多種與HAD患者死亡后腦樣品中觀察到的一樣的神經病理學特征。
HAD中的趨化因子受體HIV-1對巨噬細胞和淋巴細胞的感染是發(fā)生在病毒包膜蛋白gp120與和CD4結合的幾種可能的趨化因子受體中的一種結合以后。巨噬細胞和小神經膠質細胞主要是通過-趨化因子受體CCR5或CCR3被感染，但是也可以通過-趨化因子受體CXCR4。在其它趨化因子受體中，HIV共受體CCR5和CXCR4也存在于神經細胞和星狀細胞上。HIV相關的神經細胞損傷中直接涉及CXCR4，而CCR5另外起保護作用。
在腦皮層神經細胞和神經細胞系中，微微摩爾濃度的HIV-1gp120以及完整病毒可通過CXCR4誘導神經細胞死亡。在模擬完整大腦的細胞組分的神經細胞/神經膠質混和腦皮層培養(yǎng)物中，這種細胞凋亡性死亡主要是通過釋放小神經膠質毒素介導的，而非直接的神經細胞損傷。但是，納摩爾濃度的(基質細胞衍生因子)SDF-1與CXCR4的相互作用在沒有小神經膠質細胞的條件下可介導神經細胞的細胞凋亡性死亡，這表明可能存在與神經細胞的直接相互作用，也可能存在與星狀細胞的相互作用。與這些結果相反，稍高濃度的SDF-1可為X4-優(yōu)先的gp120誘導的分離的海馬趾神經細胞的損傷提供神經保護。但是，由分離的神經細胞得到的結果可能與神經細胞/神經膠質的混合培養(yǎng)物觀察到的結果不同，這是因為已知非神經元細胞可以改變相關的死亡途徑。
用大鼠和小鼠的神經細胞/神經膠質混和腦皮層培養(yǎng)物研究趨化因子受體對于gp120的神經毒性的作用。CXCR4(X4)-優(yōu)先的和CCR5(R5)-優(yōu)先的和雙嗜性的HIV-1株均能誘導神經細胞死亡。-趨化因子抑制蛋白(MIP)-1和RANTES可消除gp120的神經毒性。有趣的是，雖然一種X4-優(yōu)先株的HIV-1 gp120對于CXCR4-缺陷型的腦皮層培養(yǎng)物沒有神經毒性，但是另一種X4-類的株的gp120仍然具有某些殘存能力可以誘導神經細胞死亡，與雙嗜性的gp120SF2相同。令人驚訝的是，在CCR5敲除的培養(yǎng)物中的gp120SF2比野生型或CXCR4-缺陷型培養(yǎng)物顯示出更高的神經毒性。這些發(fā)現(xiàn)與gp120激活的CXCR4的主要神經毒性作用一致。相反，CCR5的活性至少是部分神經保護作用。盡管如此，R50優(yōu)先的HIV-1的gp120也可以誘導神經細胞死亡。但是，應當注意的是，HW-1分類為R5-或是X4-優(yōu)先的是依據病毒使用特定受體感染靶細胞的能力，而不是依據激活或誘導死亡信號傳導途徑。因此，這種分類只是對于引起感染的HIV包膜的相互作用是有效的。因此，為了了解HAD的機制，被分類為優(yōu)先通過特定的趨化因子受體感染的HIV-1的gp120可以重新依據其與其它能引起激活或下游細胞內信號傳導的受體相互作用的能力來分類。特別是，R5-優(yōu)先的巨噬細胞株的gp120需要檢測其通過CXCR4引起細胞信號傳導的能力。
由于小神經膠質細胞活化的抑制足以防止暴露于gp120后的神經細胞死亡，至少是在體外，在巨噬細胞/小神經膠質細胞中CXCR4的刺激是gp120的神經毒性的先決條件。相反，在星狀細胞和神經細胞中SDF-1可以直接激活CXCR4，引起神經細胞死亡，例如通過在星狀細胞中逆轉谷氨酸的吸收。
腦中的HIV-1和NMDA受體的激活AIDS患者的樣品分析以及體內和體外試驗表明HIV-1感染在CNS中可產生興奮毒性環(huán)境。巨噬細胞和小神經膠質具有重要作用，因為在腦中它們是最終被HIV-1感染的主要細胞。而且，HIV-1感染的或gp120-刺激的單核吞噬細胞能夠釋放神經毒素，其能直接刺激NMDA受體，包括喹啉酸，半胱氨酸，血小板活化因子(PAP)，和叫做NTox的低分子量化合物。
另外，HIV感染的或激活的巨噬細胞/小神經膠質細胞以及星狀細胞可產生炎性介質，包括腫瘤壞死因子(TNF)-，花生四烯酸代謝物，自由基(活性氧物質[ROS]和氧化氮[NO])和細胞外基質降解酶，例如基質金屬蛋白酶(MMP)，其可直接導致興奮毒性的神經細胞損傷。根據這些結果，發(fā)現(xiàn)gp120可通過由活化的巨噬細胞/小神經膠質釋放的花生四烯酸破壞星狀細胞對谷氨酸的吸收從而加劇興奮毒性狀況。SDF-1，TNF-，和前列腺素也能刺激星狀細胞Ca2+依賴性地釋放谷氨酸。
HIV-1感染及其伴隨的神經機能失調都涉及趨化因子受體和NMDA受體介導的興奮毒性。在不同的水平上都涉及到趨化因子受體，首先是在HIV的感染中，進一步是在對病毒感染所產生的趨化因子的反應中。例如，單核細胞趨化蛋白(MCP)-1，MIP-1，MIP-，RANTES，和SDF-1都可能直接和/或間接地干涉神經細胞，星狀細胞，和小神經膠質細胞的生理功能。NMDA受體對刺激性試劑，例如神經遞質和神經毒素具有反應，但是G蛋白偶聯(lián)的趨化因子受體也能影響它們的活性，反之亦然。一種-趨化因子，RANTES，可以消除由于過量的NMDA受體刺激誘導的神經細胞損傷。而興奮毒性的刺激能增加CCR5的表達。
NMDA受體的下游途徑如果NMDA受體受到過量刺激并且最初的興奮毒性損傷是急性的，細胞在喪失離子動態(tài)平衡之前就會死亡，這導致急性的膨脹和溶解(壞死)。如果損傷較輕微，如同HAD的情況那樣，神經細胞則進入程序性死亡途徑，稱作細胞凋亡。興奮毒性損傷后的神經細胞凋亡包括Ca2+過量，p38-有絲分裂素激活的蛋白激酶(MAPK)的活化，線粒體釋放細胞色素c，caspase活化，自由基形成，脂質過氧化，和染色質濃縮。p38 MAPK磷酸化并激活轉錄因子，包括肌細胞增強因子2(MEF2)。有趣的是，MEF2被caspase切割也可導致神經細胞凋亡。Caspase-3和-7產生截短的缺乏轉錄活性，但是仍然與DNA結合的MEF2分子。因此MEF2片段顯然要與未切割的MEF2競爭，因此會干擾神經細胞中的促進存活基因的轉錄。
抗體介導的TNF-的中和或其下游效應子caspase-8的抑制也能在培養(yǎng)的腦皮層神經細胞中防止HIV gp120的神經毒性。Caspase-8的激活能引發(fā)caspase-3的活性，導致細胞凋亡。至少是在體外，Bcl-2家族的蛋白能夠消除HIV-1感染之后的神經細胞損傷。神經細胞在對HIV感染產生的興奮毒性的反應中明顯不能上調Bcl-2或Bcl-xL可能導致神經細胞容易收到損傷。
支架蛋白PSD-95(突觸后致密物-95)將NMDA受體操作的離子通道與神經元一氧化氮合成酶(nNOS)，一種Ca2+活化酶連接起來，并且因此使得nNOS靠近Ca2+。過量的細胞內Ca2+過度刺激nNOS和蛋白激酶級聯(lián)，引起細胞毒性自由基的產生，包括ROS，NO，和過亞硝酸鹽(ONOO-)。ROS和NO可以形成高度細胞毒性的ONOO-。HIV患者的死后腦樣品研究的數據表明免疫NOS(iNOS)和gp41的表達與HAD的發(fā)生和嚴重程度有關。進一步，gp120的神經毒性效果，至少在體內，也是依賴于NOS(或者是nNOS和iNOS)的。
除了NO的細胞內效果，最近鑒別了由亞硝基化作用和后來的MMP-9的活化介導的神經細胞損傷的一條可能的細胞外蛋白水解途徑。蛋白水解激活的MMP-9刺激神經細胞死亡，這可能是通過破壞細胞粘附因子和細胞外基質之間的相互作用實現(xiàn)的。MMP的表達和活化，包括MMP-2和MMP-9在HIV感染的巨噬細胞中和在AIDS患者死后的腦樣品中與未感染的對照相比均有所增加。
MMP的激活可能伴隨著興奮毒性的腦損傷和NOS活性。例如，MMP-9的亞硝基化作用導致其活化。然后研究了NO激活的MMP-9在腦皮層培養(yǎng)物中對神經細胞的體外作用。在這些試驗中，重組的(R)-proMMP-9在加入到培養(yǎng)物中之前用內源NO供體S-亞硝基半胱氨酸(SNOC)預活化。18個小時后確定神經細胞的凋亡。由于培養(yǎng)物與激活的MMP一起培育的時候NO已經從SNOC中釋放出來，NO從SNOC中的直接釋放或者由于NO從SNOC中的釋放導致的過亞硝酸根的形成以及隨后的與超氧化物陰離子(O-2)的反應不會引起神經細胞死亡。但是，NO-激活的MMP-9顯著增加了神經細胞的凋亡，而用無活性的proMMP-9或MMP抑制劑GM6001處理可阻斷神經細胞的死亡。另外，許多神經細胞在暴露于NO-激活的MMP之后向上離開了培養(yǎng)皿。這些結果表明無活性的proMMP-9蛋白對于神經細胞沒有有害作用。但是，NO-引起的激活使MMP-9轉變?yōu)樯窠浂舅亍?br> 進行HAD治療的治療方法目前還有待研究真正有效的HAD的藥物療法。越來越多的有關HAD的發(fā)病機理的證據表明除了抗逆轉錄病毒(ARV)之外還可應用幾種可能的治療方案。可以使用的試劑中包括臨床耐受的NMDA受體拮抗劑memantine。其它試劑包括-趨化因子；趨化因子和細胞因子受體拮抗劑，例如能抵抗CXCR4和CCR5活化的；MMP抑制劑，p38 MAPK或caspase；和抗氧化劑。
趨化因子受體可介導HIV-1感染，特異的趨化因子可阻斷體內感染。此外，CSF中-趨化因子的濃度較高的HIV患者具有較好的神經心理學表現(xiàn)。
至于NMDA受體拮抗劑，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)memantine是一種與離子通道相關的NMDA受體的無競爭性的開放通道阻斷劑。Memantine僅在其在病理時期開放的時候阻斷NMDA受體操作的通道。相反，memantine在正常的神經傳遞期間幾乎沒有作用，這時NMDA受體依賴的通道活性較低。實際上，memantine在最近的II期臨床試驗中有望用于治療HAD，并且已證明在具有中度到重度癡呆的阿爾茨海默病患者的III期試驗中具有明顯有效的效果。
硝化甘油，可以產生與NO有關的亞硝基離子(NO+)，至少部分可以在NMDA受體/通道復合體上的氧化還原調節(jié)位點上發(fā)揮作用以減少受體活性和隨后的由于過量的Ca2+流造成的神經細胞損傷。
給藥方案本發(fā)明的組合物可以任何適當的方式給藥，以治療HIV伴隨的癡呆(HAD)，輕微認知/運動失調(MCMD)，HAD伴隨的神經性疼痛，或其它原因引起的神經性疼痛。
本發(fā)明提供了一種更有效的HAD的治療方法，以及可用于這種方法的治療HAD的藥物組合物。
本發(fā)明進一步涉及治療具有HAD的患者的試劑盒，包括治療有效量的EPO以治療該疾病或至少部分減輕該疾病的癥狀，及其使用說明。
本發(fā)明可用于減輕HAD癥狀。這些HAD癥狀包括HAD伴隨的或其引起的癥狀，包括神經性疼痛。
要評價患者是否從該(治療)獲益，應當以定量的方式對患者的癥狀進行檢查，例如檢查神經性疼痛的減少。在成功的治療中，患者的情況得到了改善(即神經性疼痛的癥狀減輕了)。
癡呆的癥狀包括喪失記憶，解決問題的能力，決策能力，判斷力，空間辨向能力，以及拼寫簡單句子并用詞語交流的能力。通常還伴隨著性格的改變。神經病的癥狀包括麻痹，疼痛，虛弱，和喪失位置感覺。
神經病是通過測定神經傳導速度(NCV)或肌動電流描記術(EMG)診斷的。神經傳導速度研究記錄了脈沖通過神經的速度并檢測了電反應。EMG記錄了肌肉組織的電活動，可用于將神經性疾病與肌肉疾病(肌病)區(qū)分開來。
癡呆是通過觀察到如下證據來診斷的(1)近期和遠期記憶的侵蝕和(2)一種或多種下述功能的損傷用詞錯誤或不能想起或正確使用詞語(即失語癥)；運動能力的損傷，即使身體的運動能力還完好無損(即運動不能)；辨認物體的能力的損傷，即使感覺功能還完好無損(即認識不能)；或者計劃能力，組織能力，抽象思維能力的損傷。
對于每種藥物，劑量都是治療成功和患者健康的重要的組成部分。在每個病例中，在特定的范圍內，醫(yī)師必須確定根據給定患者的性別，年齡，體重，病理狀態(tài)和其它參數確定其最佳劑量。
本發(fā)明的藥物組合物包括治療有效量的活性試劑。所述化合物的量取決于要治療的患者。確定正確的量要考慮到患者的體重，疾病的嚴重程度，給藥的方式，以及開處方醫(yī)師的判斷。EPO的治療有效量的確定在所屬領域技術人員的能力范圍之內。
在一些病例中，需要使用藥物包裝說明中記載的范圍以外的劑量治療患者。開處方的醫(yī)師明確知道這樣的病例。如果需要的話，醫(yī)師也知道根據特定患者的反應如何并且何時中斷，調整或停止治療。
配方和給藥本發(fā)明的化合物可以適當的配方劑量形式給藥?；衔锟梢运帉W可接受的鹽或者藥物組合物的形式給患者施用。以藥物組合物的形式給藥的化合物與適當的載體或賦形劑混合，以使組合物中的該化合物為治療有效量。術語“治療有效量”指獲得所希望的終點(例如減輕HAD伴隨的癥狀)所需要的化合物的量。
可用各種制劑配制含有EPO的藥物組合物，包括固體，半固體，液體和氣體形式。配制和給藥的技術可參見″RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy，TwentiethEdition，″LippincottWilliams & Wilkins，Philadelphia，PA。制劑的實例是片劑，膠囊，丸劑，粉末，顆粒劑，糖衣丸，凝膠，淤漿，油膏，溶液栓劑，注射劑，吸入劑和氣溶膠。這些制劑可以局部或系統(tǒng)的方式或以儲留或持續(xù)釋放的方式給藥。所述組合物的給藥可以各種不同的方式進行。在一個優(yōu)選的實施方案中，給藥的方式是鼻內或靜脈內。在其它的實施方案中，所述方式是口服，經頰，直腸，腸胃外，腹膜內，皮下，經皮，還可以使用氣管內的方式。本發(fā)明的組合物可以與多種藥物賦形劑組合施用，包括穩(wěn)定劑，載體和/或本文所述的封裝制劑。
根據本發(fā)明公開的內容，本領域技術人員應當知道如何制備藥物或藥理組合物。典型地，該組合物可以制成固體形式；如片劑或其它可用于口服給藥的固體；如緩釋膠囊。
對于人的給藥，制劑應當符合FDA的無菌CMC制造標準。
化合物的單獨給藥或組合治療可以用靜脈內或鼻內遞送(固體或液體)的方式。特別方便的本發(fā)明的化合物給藥頻率是每天一次或每天兩次。
治療劑的給藥方式應當與藥劑相容，其量應當是藥理學有效的。所述制劑容易以多種劑量形式給藥，例如所述的靜脈內或鼻內。在本文中，活性成分的量和要給藥的組合物的體積依賴于要治療的宿主動物。給藥所需的活性化合物的精確量取決于專業(yè)人員的判斷，為每個個體所特有。
通常應使用于分散活性化合物的組合物為最小體積。合適的給藥方案也是可變的，但是通常是首先給予所述化合物并監(jiān)測結果，然后在下一次時間間隔中進一步控制劑量。本發(fā)明的化合物和組合治療劑可以通過在水溶劑或非水溶劑中溶解，懸浮或乳化制備。非水溶劑的實例是植物油(例如芝麻油)或類似的油，合成的脂肪酸甘油酯，高級脂肪酸的酯和丙二醇。也可以使用水溶劑如Hank′s溶液，Ringer′s溶液或生理鹽緩沖液。
可以在水中制備活性化合物的自由基或藥學可接受的鹽的溶液并與表面活性劑如羥丙基纖維素混和。分散液也可在甘油，液體聚乙二醇，及其混合物和油中制備。在儲存和使用的一般條件下，這些制備物都要含有防腐劑以防止微生物的生長。
口服制劑可以通過與本領域公知的藥學可接受的載體結合來制備。所述載體使所述化合物可制成例如片劑，丸劑，膠囊，溶液，懸液，持續(xù)釋放制劑；粉末，液體或凝膠以便于患者口服吸收?？诜苿┛梢酝ㄟ^多種方式制得，包括將所述化合物與固體賦形劑混和，任選地研磨所得到的混合物，加入合適的助劑并對顆?；旌衔镞M行處理。下面的列表包括可用于口服制劑中的賦形劑的實例糖例如乳糖，蔗糖，甘露醇或山梨醇；纖維素制劑例如玉米淀粉，非谷蛋白的小麥淀粉，馬鈴薯淀粉，明膠，黃蓍膠，甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)?？诜苿┌ㄍǔＪ褂玫馁x形劑例如藥物級的甘露醇，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，糖精鈉，纖維素，碳酸鎂等。
在特定的實施方案中，口服的藥物組合物可含有惰性稀釋劑或可吸收的能食用的載體，或者它們可以封閉在硬殼或軟殼的明膠膠囊中，或者它們可以壓縮成片劑，或者它們可以直接與飲食中的食物混和在一起。對于口服治療給藥，活性化合物可與賦形劑混合在一起制成可吸收的片劑，含片，錠劑，膠囊，酏劑，懸液，淤漿，干膠片等。該組合物和制劑含有至少0.1％的活性化合物。所述組合物和制劑的百分含量可以變化，可以是單位重量的大約2到大約75％，或者優(yōu)選在25-60％之間。該可用于治療的組合物中活性化合物的量應能達到合適的劑量。
片劑，錠劑，丸劑，膠囊等還可以含有下述物質粘合劑，如黃蓍膠，阿拉伯膠，玉米淀粉，或明膠；賦形劑，如磷酸二鈣；崩解劑如玉米淀粉，馬鈴薯淀粉，褐藻酸等；潤滑劑，如硬脂酸鎂；還可加入甜味劑，如蔗糖，乳糖或糖精，或調味劑如薄荷，冬青油，或櫻桃調味料。如果劑量單位形式是膠囊，則除了上述類型的物質還可以含有液體載體。還可以含有其它各種物質作為包覆層或者用于改變劑量單位的物理形式。例如，片劑，丸劑，或膠囊可以包覆有蟲膠，糖或兩者皆有。酏劑的糖漿可以含有活性化合物，作為甜味劑的蔗糖，作為防腐劑的甲基和丙基parabensas，染色和調味劑，例如櫻桃或橙子調味劑。
本發(fā)明的組合物還可以用氣溶膠噴霧的方式遞送，從加壓容器，噴霧器或干粉吸入器中噴出?？捎糜趪婌F器中的合適的推進劑包括例如二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷和二氧化碳。在加壓氣溶膠中，所述劑量可以通過閥門確定，遞送規(guī)定量的所述化合物。
用于吸入或吹入的組合物包括用藥學可接受的水溶劑或有機溶劑或其混合物制備的溶液和懸液，以及粉末。液體或固體組合物可以含有如上所述的合適的藥學可接受的賦形劑。優(yōu)選所述組合物通過口服或者用鼻呼吸的方式給藥以達到局部或全身效果。用優(yōu)選的無菌的藥學可接受的溶劑制備的組合物可以用惰性氣體進行噴霧。噴霧溶液可以直接從噴霧裝置中呼吸，或者所述噴霧裝置可與面罩，帳篷或周期性的正壓呼吸機相連。溶液，懸液或粉末組合物可以用能以合適的方式遞送所述制劑的裝置給藥，優(yōu)選口服或經鼻。
適用于其它給藥方式的其它制劑包括直腸膠囊或栓劑。栓劑可以包括傳統(tǒng)的粘合劑和載體，例如聚亞烷基二醇或甘油三酸酯；該栓劑可由含有0.5％到10％，優(yōu)選1％-2％的活性成分的混合物制備。
用本發(fā)明的方法治療的患者是哺乳動物，更優(yōu)選是人。這些方法的下述性質或應用基本上是針對人的，雖然它們也可以應用于非人的哺乳動物，例如猿，猴，狗，鼠等。因此本發(fā)明也可用于獸醫(yī)領域。
本發(fā)明的藥物組合物可用于治療HAD。本發(fā)明的藥物組合物也可用于治療HAD引起的癥狀，HAD伴隨的或引起的癥狀，包括神經性疼痛。
EPO能減少gp120誘導的神經毒性的神經保護作用如下證明。
實施例實施例1設計/方法混和神經細胞/神經膠質皮層培養(yǎng)物使之含有30-40％的神經細胞。所述培養(yǎng)物是由胚胎第16-17天的鼠制備的，并于接種后17天使用。將培養(yǎng)物在存在或不存在EPO(10U/ml)的條件下暴露于200pM gp120達24小時。凋亡的神經細胞通過用MAP-2，一種神經細胞特異性標志物進行標記，并進行TUNEL染色加上形態(tài)學來識別。細胞內信號傳導途徑是通過Akt和GSK3的免疫雜交和免疫細胞化學識別。用腺病毒載體實現(xiàn)顯性抑制形式的Akt的轉導。
結果HIV/gp120與對照相比增加了神經細胞的凋亡(506％相對于114％)。與EPO預培育3小時可將細胞凋亡降低到387％。接下來研究了EPO抵抗gp120的神經保護作用中的細胞信號傳導。暴露于gp120會導致GSK3的去磷酸化。EPO的神經保護作用在很大程度上被Akt的抑制所阻斷，Akt的抑制是通過顯性抑制的Akt突變體的轉導達到的，同時防止了GSK3的磷酸化。
等同方式本領域技術人員無需過度的實驗就應當知道，或者應當能夠確定本文所述的特定步驟具有多種等同方式。這些等同方式應當視為在本發(fā)明的范圍之內，并且包括在后面的權利要求中。本發(fā)明可以進行各種替代，改變，和修改而不背離由權利要求所定義的本發(fā)明的精神和范圍。其它方面，優(yōu)點和修改也在本發(fā)明的范圍之內。本申請中的所有參考文獻，授權專利和公開的專利申請在此都引入其全文作為參考?？梢赃x擇那些專利，申請和其它文件的合適的成分，過程，和方法用于本發(fā)明及其實施方案。
序列表<110>紐熱莫勒丘樂有限公司<120>用于治療疼痛性神經病的藥物組合物及其治療方法<130>22531-509-061<140>尚未指定<141>2004-03-25<150>60/457,532<151>2003-03-25<160>8<170>PatentIn version 3.0<210>1<211>166<212>PRT<213>智人<400>1Ala Pro Pro Arg Leu Ile Cys Asp Ser Arg Val Leu Glu Arg Tyr Leu1 5 10 15Leu Glu Ala Lys Glu Ala Glu Asn Ile Thr Thr Gly Cys Ala Glu His20 25 30Cys Ser Leu Asn Glu Asn Ile Thr Val Pro Asp Thr Lys Val Asn Phe35 40 45Tyr Ala Trp Lys Arg Met Glu Val Gly Gln Gln Ala Val Glu Val Trp50 55 60Gln Gly Leu Ala Leu Leu Ser Glu Ala Val Leu Arg Gly Gln Ala Leu65 70 75 80Leu Val Asn Ser Ser Gln Pro Trp Glu Pro Leu Gln Leu His Val Asp85 90 95Lys Ala Val Ser Gly Leu Arg Ser Leu Thr Thr Leu Leu Arg Ala Leu100 105 110Arg Ala Gln Lys Glu Ala Ile Ser Pro pro Asp Ala Ala Ser Ala Ala115 120 125Pro Leu Arg Thr Ile Thr Ala Asp Thr Phe Arg Lys Leu Phe Arg Val130 135 140Tyr Ser Asn Phe Leu Arg Gly Lys Leu Lys Leu Tyr Thr Gly Glu Ala145 150 155 160Cys Arg Thr Gly Asp Arg165<210>2<211>507
<212>PRT<213>智人<400>2Met Asp Gln Leu Arg Val Ala Arg Trp Pro Arg Val Ser Pro Leu Cys1 5 10 15Leu Leu Leu Ala Gly Ala Ala Trp Ala Ser Ser Pro Ser Leu Pro Asp20 25 30Pro Lys Phe Glu Ser Lys Ala Ala Leu Leu Ala Ser Arg Gly Ser Glu35 40 45Glu Leu Leu Cys Phe Thr Gln Arg Leu Glu Asp Leu Val Cys Phe Trp50 55 60Glu Glu Ala Ala Asn Ser Gly Met Gly Phe Asn Tyr Ser Phe Ser Tyr65 70 75 80Gln Leu Glu Gly Glu Ser Arg Lys Ser Cys Arg Leu His Gln Ala Pro85 90 95Thr Val Arg Gly Ser Met Arg Phe Trp Cys Ser Leu Pro Thr Ala Asp100 105 110Thr Ser Ser Phe Val Pro Leu Glu Leu Gln Val Thr Glu Ala Ser Gly115 120 125Ser Pro Arg Tyr His Arg Ile Ile His Ile Asn Glu Val Val Leu Leu130 135 140Asp Ala Pro Ala Gly Leu Leu Ala Arg Arg Ala Glu Glu Gly Ser His145 150 155 160Val Val Leu Arg Trp Leu Pro Pro pro Gly Ala Pro Met Thr Thr His165 170 175Ile Arg Tyr Glu Val Asp Val Ser Ala Gly Asn Arg Ala Gly Gly Thr180 185 190Gln Arg Val Glu Val Leu Glu Gly Arg Thr Glu Cys Val Leu Ser Asn195 200 205Leu Arg Gly Gly Thr Arg Tyr Thr Phe Ala Val Arg Ala Arg Met Ala210 215 220Glu Pro Ser Phe Ser Gly Phe Trp Ser Ala Trp Ser Glu Pro Ala Ser225 230 235 240Leu Leu Thr Ala Ser Asp Leu Asp Pro Leu Ile Leu Thr Leu Ser Leu245 250 255Ile Leu Val Leu Ile Ser Leu Leu Leu Thr Val Leu Ala Leu Leu Ser260 265 270His Arg Arg Ala Leu Arg Gln Lys Ile Trp Pro Gly Ile Pro Ser Pro275 280 285Glu Asn Glu Phe Glu Gly Leu Phe Thr Thr His Lys Gly Asn Phe Gln290 295 300
Leu Trp Leu Leu Gln Arg Asp Gly Cys Leu Trp Trp Ser pro Ser Ser305 310 315 320Pro Phe Pro Glu Asp Pro Pro Ala His Leu Glu Val Leu Ser Glu Arg325 330 335Arg Trp Gly Val Thr Gln Ala Gly Asp Ala Gly Ala Glu Asp Lys Gly340 345 350Pro Leu Leu Glu Pro Val Gly Ser Glu Arg Ala Gln Asp Thr Tyr Leu355 360 365Val Leu Asp Glu Trp Leu Leu Pro Arg Cys pro Cys Ser Glu Asn Leu370 375 380Ser Gly Pro Gly Asp Ser Val Asp Pro Ala Thr Met Asp Glu Gly Ser385 390 395 400Glu Thr Ser Ser Cys Pro Ser Asp Leu Ala Ser Lys Pro Arg Pro Glu405 410 415Gly Thr Ser Pro Ser Ser Phe Glu Tyr Thr Ile Leu Asp Pro Ser Ser420 425 430Lys Leu Leu Cys Pro Arg Ala Leu Pro Pro Glu Leu Pro Pro Thr Pro435 440 445Pro His Leu Lys Tyr Leu Tyr Leu Val Val Ser Asp Ser Gly Ile Ser450 455 460Thr Asp Tyr Ser Ser Gly Gly Ser Gln Gly Val His Gly Asp Ser Ser465 470 475 480Asp Gly Pro Tyr Ser His Pro Tyr Glu Asn Ser Leu Val Pro Asp Thr485 490 495Glu Pro Leu Arg Pro Ser Tyr Val Ala Cys Ser500 505<210>3<211>20<212>PRT<213>智人<400>3Gly Gly Thr Tyr Ser Cys His Phe Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys1 5 10 15Pro Gln Gly Gly20<210>4<211>20<212>PRT<213>智人<400>4Gly Gly Asp Tyr His Cys Arg Met Gly Pro Leu Thr Trp Val Cys Lys
1 5 10 15Pro Leu Gly Gly20<210>5<211>20<212>PRT<213>智人<400>5Gly Gly Val Tyr Ala Cys Arg Met Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Ser1 5 10 15Pro Leu Gly Gly20<210>6<211>20<212>PRT<213>智人<400>6Val Gly Asn Tyr Met Cys His Phe Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Arg1 5 10 15Pro Gly Gly Gly20<210>7<211>20<212>PRT<213>智人<400>7Gly Gly Leu Tyr Leu Cys Arg Phe Gly Pro Val Thr Trp Asp Cys Gly1 5 10 15Tyr Lys Gly Gly20<210>8<211>14<212>PRT<213>智人<400>8Gly Gly Cys Arg Ile Gly Pro Ile Thr Trp Val Cys Gly Gly1 5 10
權利要求
1.一種抑制神經細胞死亡的方法，包括使暴露于HIV-1的神經細胞與能抑制細胞凋亡的量的促紅細胞生成素多肽接觸，所述神經細胞暴露于HIV-1病毒或其蛋白。
2.權利要求1的方法，其中神經組織中神經細胞的死亡在所述促紅細胞生成素存在的情況下的量與其不存在的情況相比有所減少。
3.權利要求2的方法，其中神經細胞的死亡在所述促紅細胞生成素存在的情況下與其不存在的情況相比減少10％。
4.權利要求2的方法，其中神經細胞的死亡在所述促紅細胞生成素存在的情況下與其不存在的情況相比減少50％。
5.權利要求2的方法，其中神經細胞的死亡在所述促紅細胞生成素存在的情況下與其不存在的情況相比減少100％。
6.權利要求2的方法，其中神經細胞的死亡在所述促紅細胞生成素存在的情況下與其不存在的情況相比減少200％。
7.權利要求1的方法，進一步包括使所述神經細胞與促紅細胞生成素受體多肽接觸。
8.一種抑制神經細胞死亡的方法，包括優(yōu)先使神經組織與能抑制細胞凋亡的量的促紅細胞生成素多肽接觸。
9.權利要求8的方法，其中所述促紅細胞生成素通過鼻內給藥。
10.權利要求8的方法，其中所述促紅細胞生成素通過鞘內給藥。
11.權利要求8的方法，進一步包括使所述神經組織與促紅細胞生成素受體多肽接觸。
12.一種減少神經系統(tǒng)紊亂的癥狀的方法，所述方法包括鑒別患有感染性疾病伴隨的神經病的個體，給所述個體施用治療有效量的促紅細胞生成素，其中所述感染性疾病是HIV-1感染。
13.權利要求12的方法，其中所述神經系統(tǒng)紊亂選自HIV伴隨的癡呆(HAD)，輕微認知/運動失調(MCMD)，HAD伴隨的神經性疼痛，或其它原因引起的神經性疼痛。
14.權利要求12的方法，其中所述個體是男性人類。
15.權利要求12的方法，其中所述個體是非哺乳期的女性人類。
16.權利要求12的方法，其中促紅細胞生成素的治療有效量在大約1U/kg/天到2000U/kg/天之間。
17.權利要求12的方法，其中可溶性促紅細胞生成素的治療有效量在大約100U/kg/天到1500U/kg/天之間。
18.權利要求12的方法，其中促紅細胞生成素的治療有效量在大約1000U/kg/天到1250U/kg/天之間。
19.權利要求12的方法，其中所述促紅細胞生成素通過鼻內給藥。
20.權利要求12的方法，其中所述促紅細胞生成素通過靜脈內給藥。
21.權利要求12的方法，進一步包括給所述個體施用治療有效量的可溶性促紅細胞生成素受體。
22.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約1U/kg/天到2000U/kg/天之間。
23.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約100U/kg/天到1500U/kg/天之間。
24.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約1000U/kg/天到1250U/kg/天之間。
25.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體通過鼻內給藥。
26.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體通過靜脈內給藥。
27.權利要求21的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體當與促紅細胞生成素一起給予患者的時候能增加促紅細胞生成素的穩(wěn)定性。
28.一種減少神經系統(tǒng)紊亂的癥狀的方法，所述方法包括鑒別患有慢性神經病的個體，給所述個體施用治療有效量的促紅細胞生成素。
29.權利要求28的方法，其中所述神經病是糖尿病伴隨的神經病或神經性疼痛。
30.權利要求28的方法，其中所述個體是男性人類。
31.權利要求28的方法，其中所述個體是非哺乳期的女性人類。
32.權利要求28的方法，其中促紅細胞生成素的治療有效量在大約1U/kg/天到2000U/kg/天之間。
33.權利要求28的方法，其中可溶性促紅細胞生成素的治療有效量在大約100U/kg/天到1500U/kg/天之間。
34.權利要求28的方法，其中促紅細胞生成素的治療有效量在大約1000U/kg/天到1250U/kg/天之間。
35.權利要求28的方法，其中所述促紅細胞生成素通過鼻內給藥。
36.權利要求28的方法，其中所述促紅細胞生成素通過靜脈內給藥。
37.權利要求28的方法，進一步包括給所述個體施用治療有效量的可溶性促紅細胞生成素受體。
38.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約1U/kg/天到2000U/kg/天之間。
39.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約100U/kg/天到1500U/kg/天之間。
40.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體的治療有效量在大約1000U/kg/天到1250U/kg/天之間。
41.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體通過鼻內給藥。
42.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體通過靜脈內給藥。
43.權利要求37的方法，其中所述可溶性促紅細胞生成素受體當與促紅細胞生成素一起給予患者的時候能增加促紅細胞生成素的穩(wěn)定性。
44.一種藥物組合物，含有促紅細胞生成素，可溶性促紅細胞生成素受體，和藥學可接受的載體。
45.一種試劑盒，含有置于一個或多個容器中的權利要求44的藥物組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于治療和預防HIV伴隨的癡呆(HAD)，輕微認知/運動失調(MCMD)，HAD伴隨的神經性疼痛，或其它原因引起的神經性疼痛的新的方法和組合物。
文檔編號A61K38/17GK1780633SQ200480011166
公開日2006年5月31日 申請日期2004年3月25日 優(yōu)先權日2003年3月25日
發(fā)明者斯圖爾特·利普頓, 莫瑞特·迪吉卡利奧格盧 申請人:紐熱莫勒丘樂有限公司