專利名稱：自乳化組合物及其應用以及制備方法
技術領域：
在一具體實施例中，本發(fā)明涉及納米技術和自乳化組合物，包括眼用組合物及其制備方法和應用方法。這些乳狀液(乳劑)采用分子自組裝來產生納米(毫微米)級和亞微米級的油滴結構。
背景技術：
水包油型乳狀液的典型制備涉及將水溶性成分溶解于水相以及將油溶性成分溶解于油相。該油相在每分鐘轉速為數(shù)千(r.p.m)的情況下劇烈分散數(shù)分鐘至數(shù)小時，以便混合入水相中。采用這類方法的生產過程涉及對基本設備的大量投資、費時，并且不能很容易地按比例擴大到較大的批量生產規(guī)模。此外，一般難以在不加入增粘劑的情況下將通過這些類型的方法制備的水包油型乳狀液穩(wěn)定到商業(yè)上所希望的兩年的貯存期。然而，通常不希望眼用溶液是高粘度的，而對于隱形眼鏡(角膜接觸鏡)的護理液則幾乎完全不能接受高粘度。如果冷藏乳狀液，則有時可以達到兩年的貯存期。然而，利用冷藏會限制產品的商業(yè)分發(fā)。
對于許多水包油型乳狀液來說，滅菌是基本的，這些水包油型乳狀液容易維持細菌的生長，而細菌的生長會導致組合物的污染。通過標準方法制備的乳狀液所遇到的一個問題是它們不能很容易地利用過濾技術來滅菌(除菌)。對于包括水包油型乳狀液的眼用組合物而言，過濾滅菌優(yōu)于加熱滅菌，這是因為加熱滅菌伴隨如制備的復雜性和成本的問題。此外，在利用加熱的滅菌過程中可能會發(fā)生組合物成分的沉降和/或失活。
另外，經過傳統(tǒng)方法制備的水包油型乳狀液一般需要較高的表面活性劑與油(脂)的比率。與那些具有較高的表面活性劑與油的比率的水包油型乳狀液相比，具有較低的表面活性劑與油的比率的水包油型乳狀液通常會產生更高的眼睛舒適度。對于如滴眼劑和隱形眼鏡多用途溶液的產品的商業(yè)成功，眼睛的舒適是非常重要的。
另外，通過傳統(tǒng)方法制備的水包油型乳狀液一般需要兩種或兩種以上的表面活性劑，這導致了較高的表面活性劑與油的比率。這樣的水包油型乳狀液在于2003年1月22日提交的美國申請第10/349,466號中進行了描述，其以引用方式結合于本文中作為參考。隨著較低毒性的實現(xiàn)以及組合物復雜性的增加，這會導致一些問題。
鑒于對通過標準技術制備的水包油型乳狀液的這些和其它限制，具有容易制備和滅菌以及可穩(wěn)定貯存的水包油型乳狀液將是有利的。本發(fā)明的一個目的是提供這樣的組合物以及制備這類組合物的方法。這些眼用組合物具有較低的表面活性劑與油的比率，應用于需要高度舒適的場合，并且采用更少的表面活性劑來完成乳化作用。這些組合物采用分子自組裝方法來產生納米級的大分子油滴結構，因而是納米技術的實例。

發(fā)明內容
本發(fā)明描述了自乳化水包油型乳狀液組合物、其應用以及制備方法。在一優(yōu)選具體實施例中，描述了自乳化眼用組合物、及其應用以及制備方法。在一具體實施例中，描述了一種自乳化組合物，該組合物包括分散在水相中的平均尺寸小于1微米的油珠。所述油珠包括含有一種或兩種表面活性劑的表面活性劑成分；以及具有極性的油成分。對表面活性劑成分和油成分進行選擇，以便在沒有機械均化作用下混合時進行自乳化。應當注意到，表面活性劑成分可以含有并不有助于自乳化作用的其它表面活性劑。
在一個具體實施例中，本文所描述的自乳化組合物的表面活性劑成分具有疏水部分，該疏水部分包括靠近水相取向(定向)的第一部分，該第一部分大于朝向油珠內部取向的表面活性劑成分的疏水部分的第二部分。在一優(yōu)選具體實施例中，該表面活性劑成分含有一種表面活性劑，并且該表面活性劑的疏水部分的第一部分含有比該表面活性劑的疏水部分的第二部分更多的原子。
在一另外的優(yōu)選具體實施例中，表面活性劑成分含有兩種表面活性劑。第一表面活性劑具有第一疏水部分而第二表面活性劑具有第二疏水部分。第一表面活性劑的第一疏水部分具有比第二表面活性劑的第二疏水部分更長的鏈長度。
在某些具體實施例中，自乳化組合物可以包括不干擾自乳化作用的額外的表面活性劑。
在優(yōu)選的具體實施例中，自乳化組合物的油成分可以包括蓖麻油或其它天然油。
在優(yōu)選的具體實施例中，表面活性劑成分選自具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪醇鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的酯以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪酸鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚、酯或酰胺以及至少一個維生素或維生素衍生物的化合物；以及其包括不多于兩種表面活性劑的組合。
在一特別優(yōu)選的具體實施例中，表面活性劑成分是LumulseGRH-40。在一另外的優(yōu)選具體實施例中，表面活性劑成分是TGPS。
優(yōu)選地，油珠具有小于0.25微米的平均尺寸，更優(yōu)選地，具有小于0.15微米的平均尺寸。
自乳化組合物可以用于治療性組合物，該治療性組合物包括本文所描述的自乳化組合物以及治療性藥物。在一優(yōu)選具體實施例中，治療性藥物可以是環(huán)胞菌素、前列腺素、溴莫尼定或溴莫尼定鹽。在一優(yōu)選具體實施例中，油是天然油如蓖麻油。在一最優(yōu)選的具體實施例中，治療性組合物含有單一表面活性劑LumulseGRH-40。
包含本文所描述的自乳化組合物的眼用組合物是特別優(yōu)選的，并且包括上述的自乳化組合物以及藥物，當給予眼睛時該藥物是治療性的。在一優(yōu)選具體實施例中，油(脂)是天然油，如蓖麻油。在一最優(yōu)選的具體實施例中，眼用組合物含有單一表面活性劑Lumulse GRH-40。
本發(fā)明的另一方面涉及本文所描述的自乳化組合物的制備方法，其包括以下步驟制備油相，該油相包括具有極性的油和包含一種或兩種表面活性劑的表面活性劑成分，其中在油相中的具有極性的油和表面活性劑成分處于液態(tài)；
在允許自乳化作用的溫度下制備水相；以及將油相和水相混合，以便在沒有機械均化作用的條件下形成乳狀液。
在一優(yōu)選具體實施例中，該方法包括在油相和部分水相之間形成糊劑、以及將糊劑與其余水相混合以形成乳狀液的步驟。
在一個具體實施例中，描述了自乳化組合物，這些自乳化組合物可以通過以下步驟制備首先，制備油相，該油相包括具有極性的油和包含一種或兩種表面活性劑的表面活性劑成分，其中在油相中的具有極性的油和表面活性劑成分處于液態(tài)；其次，在允許自乳化作用的溫度下制備水相；最后，使油相和水相混合，以便在沒有機械均化作用的條件下形成乳狀液。
在一個具體實施例中，通過本文所描述的方法制備的自乳化組合物包括表面活性劑成分，該表面活性劑成分是單一表面活性劑。在優(yōu)選的具體實施例中，油是天然油，優(yōu)選為蓖麻油。在優(yōu)選的具體實施例中，表面活性劑成分可以是具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪醇鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的酯以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪酸鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚、酯或酰胺以及至少一個維生素或維生素衍生物的化合物；以及其包括不多于兩種表面活性劑的組合。
在一最優(yōu)選的具體實施例中，表面活性劑成分是LumulseGRH-40。在一另外的優(yōu)選具體實施例中，表面活性劑成分是TGPS。
本發(fā)明還包括治療性組合物，該治療性組合物包括通過本文所描述的方法制備的自乳化組合物以及治療性藥物。在優(yōu)選的具體實施例中，治療性化合物選自環(huán)胞菌素、前列腺素、溴莫尼定以及溴莫尼定鹽。在一優(yōu)選的具體實施例中，油是天然油如蓖麻油。在一最優(yōu)選的具體實施例中，治療性組合物含有單一表面活性劑Lumulse GRH-40。
本發(fā)明還包括眼用組合物，該眼用組合物包含通過本文所描述的方法制備的自乳化組合物以及藥物，當給予眼睛時該藥物是治療性的。在一優(yōu)選具體實施例中，油是天然油如蓖麻油。在一最優(yōu)選的具體實施例中，眼用組合物含有單一表面活性劑LumulseGRH-40。
在某些具體實施例中，本發(fā)明涉及眼用溶液，該眼用溶液包括分散在水相中的平均尺寸小于1微米的油珠，其中油珠包括表面活性劑成分(其為一種或兩種表面活性劑)、具有極性的油成分、以及亞氯酸鹽防腐劑成分。優(yōu)選地，對表面活性劑成分和油成分進行選擇，以便在沒有機械均化作用的條件下混合時進行自乳化。更優(yōu)選地，該眼用溶液還包括陽離子抗微生物劑，該陽離子抗微生物劑是聚[二甲基亞氨基-ω-丁烯-1，4-二基]氯化物、α-[4-三(2-羥乙基)銨]]-二氯化物(聚季銨鹽1)、聚(乙氧基(二甲基亞氨基)亞乙基二甲基亞氨基)亞乙基二氯化物(poly(oxyethyl(dimethyliminio)ethylene dimethyliminio)ethylene dichloride，WSCP)、聚六亞甲基雙胍(PHMB)、聚氨丙基雙胍(PAPB)、苯扎鹵化銨、阿來西定鹽、阿來西定游離堿、氯己定鹽、?？颂驵ぁ⑼榛?、烷基二胺和烷基三胺、氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)、六亞甲基雙胍或其聚合物、抗微生物多肽、或其混合物。優(yōu)選地，亞氯酸鹽防腐劑成分是經穩(wěn)定的二氧化氯(SCD)、金屬亞氯酸鹽、或其混合物。在優(yōu)選的具體實施例中，眼用溶液是一種用于隱形眼鏡(角膜接觸鏡)的多用途溶液。在優(yōu)選的具體實施例中，自乳化組合物包括Lumulse GRH-40和蓖麻油。
本發(fā)明的某些具體實施例涉及使隱形眼鏡去污的方法，該方法包括將隱形眼鏡浸泡在油珠的組合物中，而油珠具有小于1微米的平均尺寸并分散在水相中，其中油珠包括表面活性劑成分(其為一種或兩種表面活性劑)；以及具有極性的油成分，其中對表面活性劑成分和油成分進行選擇以便在沒有機械均化作用的條件下混合時進行自乳化。更優(yōu)選地，該方法還包括制備組合物，以及在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前將組合物的抗微生物活性至少提高到(對隱形眼鏡的)養(yǎng)護(regimen)消毒標準。更優(yōu)選地，在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前，通過存貯至少兩周，最優(yōu)選地，通過存貯至少一個月，來提高抗微生物活性。優(yōu)選地，在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前，將該溶液在室溫下存貯2-4周。
某些具體實施例涉及使隱形眼鏡去污的方法，該方法包括將隱形眼鏡浸泡在組合物中，該組合物是自乳化組合物，其可以通過以下步驟制備制備油相，該油相包括具有極性的油和表面活性劑成分(其是一種或兩種表面活性劑)，其中在油相中的具有極性的油和表面活性劑成分處于液態(tài)；在允許自乳化作用的溫度下制備水相；以及將油相和水相混合，以便在沒有機械均化作用的條件下形成乳狀液。更優(yōu)選地，該方法還包括制備組合物，以及在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前將組合物的抗微生物活性至少提高到(對隱形眼鏡的)養(yǎng)護消毒標準。更優(yōu)選地，在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前，通過存貯至少兩周，最優(yōu)選地，通過貯存至少一個月，來提高抗微生物活性。優(yōu)選地，在將隱形眼鏡浸泡在組合物中之前，將該溶液在室溫下存貯2-4周。
根據(jù)下述的優(yōu)選具體實施例的詳細描述，本發(fā)明的另外的方面、特點和優(yōu)點將變得顯而易見。


現(xiàn)將參照優(yōu)選具體實施例的附圖來描述本發(fā)明的這些和其它特點，其中優(yōu)選具體實施例是用來說明而不是限制本發(fā)明的。
圖1示出了用于制備本文所描述的眼用自乳化組合物的流程圖。
圖2示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm(-●-)、29BB(-▲-)、30U(-*-)、83A(-■-)、51C(-△-)、82B(-□-)、Endura(-○-)、34AA 35A(-◇-)。
圖3示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm (-●-)、44A(-▲-)、48B(-*-)、47A(-■-)、98C(-△-)、52A(-□-)、Endura(-○-)、83A 53B(-◇-)。
圖4示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm(-●-)、57A(-▲-)、57D(-*-)、58B(-■-)、58E(-△-)、59C(-□-)、59F(-○-)、60A 59G(-◇-)。
圖5示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm (-●-)、76A(-▲-)、76B(-*-)、76C(-■-)、76D(-△-)、75A(-□-)、Endura(-○-)。
圖6示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm(-●-)、75A(-▲-)、75B(-*-)、75C(-■-)、73D(-△-)、73E(-□-)、Endura(-○-)。
圖7示出了對試樣配方(方劑)的細胞毒性研究結果。BAK 200ppm(-●-)、73F(-▲-)、73G(-*-)、73H(-■-)、73I(-△-)、75A(-□-)、Endura(-○-)。
圖8示出了微生物水平的6小時對數(shù)下降，其作為在1×WSCP/亞氯酸鹽(-◆-)、1/8×WSCP/亞氯酸鹽(-■-)、1×CPT-C堿(-▲-)、以及1/8×CPT-C堿(-●-)中的貯存時間的函數(shù)。
圖9示出了微生物水平的6小時對數(shù)下降，其作為在9481X(1×)(-◆-)、1/2(-■-)、1/4(-▲-)、1/8(-●-)、0(-*-)、以及全部的C堿(-○-)中的貯存時間的函數(shù)。
圖10示出了微生物計數(shù)的對數(shù)下降之和，其是在將實施例29-33的制劑貯存2個月之后進行的，作為乳狀液濃度的函數(shù)。
具體實施例方式
已經發(fā)現(xiàn)，包括水包油型乳狀液、優(yōu)選為自乳化的水包油型乳狀液的新型的增強的眼用組合物，制備或生產這類組合物的方法以及應用這類組合物的方法，其在本領域具有意想不到的改進的效果。包含乳狀液的本組合物的制備相對容易和直接，并且貯存穩(wěn)定，例如，在約室溫下具有至少約1年或約2年或更長時間的貯存期。此外，有利的是，本組合物容易滅菌(除菌)，例如，利用過濾除菌技術滅菌，并且當組合物受到污染時，可消除、或至少顯著降低微生物生長的可能或風險。
本組合物優(yōu)選包括自乳化乳狀液。也就是說，本水包油型乳狀液優(yōu)選可以用減少量的在剪切速率下混合的分散體形成，更優(yōu)選用基本上沒有在剪切速率下混合的分散體形成。在剪切速度下的分散體混合也稱作機械均化作用。形成乳狀液的機械均化作用通常發(fā)生在大于每分鐘1000轉(1000r.p.m.)的剪切速度下，更為通常發(fā)生在每分鐘數(shù)千轉，以及甚至在每分鐘10,000轉或更大的剪切速度下。換言之，本自乳化乳狀液優(yōu)選可以利用減少量的剪切來形成，并且更優(yōu)選為基本上不利用剪切來形成。另外，本乳狀液具有相對較低的乳化成分或表面活性劑成分與油或油性成分的重量比，因而，對于局部眼應用來說，是更為安全和舒適的。與具有較高的表面活性劑與油的比率的水包油型乳狀液相比，這樣具有較低的表面活性劑與油的比率的水包油型乳狀液可以更容易通過自乳化作用來制備。
本組合物的局部眼應用形式包括但不限于用于干眼病治療以及用于其它治療的滴眼劑、用于將藥物或治療性成分遞送進入眼睛中的形式以及用于護理隱形眼鏡的形式。本組合物對于治療干眼病和類似的疾病、以及其它的眼部疾病非常有用。此外，本組合物可用于藥物遞送或作為藥物遞送的載體或賦形劑，例如，用于遞送治療性成分進入或通過眼睛的載體或賦形劑。
本組合物的隱形眼鏡(角膜接觸鏡)護理應用包括但不限于可用于清潔、沖洗、消毒、貯存、浸泡、潤滑、再濕潤以及用其他方法處理隱形眼鏡的組合物，包括有效進行一種以上這類功能的組合物，即所謂的多用途隱形眼鏡護理組合物，其它與隱形眼鏡護理相關的組合物以及類似物。包括本乳狀液的隱形眼鏡護理組合物還包括給予隱形眼鏡佩戴者的眼用組合物，例如，在隱形眼鏡佩戴之前、期間和/或之后的眼用組合物。
將乳狀液結合到隱形眼鏡護理組合物中，如多用途、再濕潤和其它隱形眼鏡護理組合物，可增加額外的預防干眼病的效用或益處，并且通過只有乳狀液可以提供的機制對隱形眼鏡和/或眼睛提供潤滑作用。由結合在隱形眼鏡護理組合物中的乳狀液提供的額外的效用或益處可以包括但不限于增強的隱形眼鏡的清潔、防止隱形眼鏡失水、抑制蛋白質沉積在隱形眼鏡上等等。
本發(fā)明提供眼用組合物，這些眼用組合物包括水包油型乳狀液，優(yōu)選包括自乳化水包油型乳狀液。這些水包油型乳狀液包括油成分，例如，但不限于，蓖麻油；以及含水成分，該含水成分包括兩種或更少的乳化劑或表面活性劑。僅利用一種或兩種乳化劑導致乳化成分與油成分的低重量比以及更少的化學毒性，產生比采用兩種以上乳化劑的乳狀液具有更高的舒適性和安全性的優(yōu)點。
油性成分和表面活性劑成分或表面活性劑的有利之處在于其是化學結構相容的，以便于乳狀液的自乳化作用。在本發(fā)明的范圍內，表面活性劑成分是指一種或兩種表面活性劑，該表面活性劑存在于自乳化組合物中并有助于自乳化作用。所述一種或兩種表面活性劑必須對所選擇的油或多種油具有親和力，是基于表面活性劑和油的疏水結構之間的非共價結合的相互作用，以使可以完成自乳化作用。在一個方面，親和力與和表面活性劑具有相同極性的具有極性的油的使用有關。當在本文中使用這些術語時，具有極性的油是指該油在分子的疏水部分含有雜原子如氧、氮和硫。在一優(yōu)選具體實施例中，所述的自乳化乳狀液包含至少一種具有極性的油。
另外，所述一種或兩種表面活性劑必須能夠形成楔形或扇形(pie section-shaped)的化學結構，其中楔形結構的較大末端更靠近表面活性劑結構的親水部分。也就是說，表面活性劑的較大部分朝向水相取向，并且比表面活性劑中朝向油相取向的部分含有更多的原子。當表面活性劑成分包括兩種表面活性劑時，第一表面活性劑的疏水部分可以比第二表面活性劑的疏水部分具有更長的鏈長度，以促進楔形的形成。
在本發(fā)明中，可用于形成表面活性劑成分的表面活性劑在于當其單獨或作為混合物使用時有利的是水溶性的。這些表面活性劑優(yōu)選為非離子的。存在的表面活性劑成分的量可以在較大范圍內變化，該變化取決于若干因素，例如，在組合物或類似物中的其它成分等等。表面活性劑成分的總量通常在約0.01至約10.0w/w％的范圍內。應當注意到，如果額外的表面活性劑以一定濃度存在，使得它們并不干擾自乳化作用，那么額外的表面活性劑可以存在于自乳化組合物中，并且仍然落入本發(fā)明的范圍內。
對于比率(例如，在本水包油型乳狀液中表面活性劑成分與油性成分的重量比)進行選擇，以便提供可接受的乳狀液穩(wěn)定性和性能，并且優(yōu)選提供自乳化水包油型乳狀液。當然，表面活性劑成分與油性成分的比率會隨以下因素發(fā)生變化所使用的特定的表面活性劑和油或多種油、最終的水包油型乳狀液所期望的特定穩(wěn)定性和性能、最終的水包油型乳狀液的特定應用或用途、以及類似因素。例如，表面活性劑成分與油性成分的重量比可以在約0.05至約20的范圍內。
這類表面活性劑如本文所述發(fā)揮作用，提供有效和有用的眼用組合物，并且對用本組合物處理的隱形眼鏡、對這類隱形眼鏡的佩戴者或對被給予這類組合物的人或動物并不具有任何實質或顯著的有害影響。
眼用組合物包括油性成分，該油性成分可以包括但不限于蓖麻油和類似物。用一種或多種油或油性物質來形成本組合物?？梢圆捎萌魏芜m宜的油或油性物質或者油或油性物質的組合，只要這類油和/或油性物質在本組合物中是有效的，并且并不對被給予該組合物的人或動物、或對正被處理的隱形眼鏡、或經處理的隱形眼鏡的佩戴、或對經處理的隱形眼鏡的佩戴者產生任何實質或顯著的有害影響。油性成分可以是，例如，但不限于，本質上和天然的極性或者合成衍生的極性。天然油(脂)可以獲自植物或植物的成分，如種子，或者它們也可以獲自動物來源，如抹香鯨油、魚肝油和類似物。該油(脂)可以是脂肪酸的單甘油酯、甘油二酯、甘油三酯，或甘油酯的混合物，如蓖麻油、椰子油、魚肝油、玉米油、橄欖油、花生油、紅花油、大豆油和葵花油。該油(脂)也可以由直鏈單乙烯酸和醇所組成的酯的形式，如西蒙得木油和抹香鯨油。該油(脂)可以是合成的，如硅油。該油(脂)也可以由不溶于水的非揮發(fā)性液態(tài)有機化合物組成，例如，維生素E乙酸酯異構體的外消旋混合物。也可以使用上述油(脂)類型的混合物。
具有下述特性的油是優(yōu)選的天然、安全、優(yōu)先作為眼用或其它藥用、幾乎沒有顏色、老化后不易變色、容易形成擴散膜以及潤滑表面而沒有粘性。蓖麻油是優(yōu)選的油(脂)。
在一個具體實施例中，本發(fā)明涉及自乳化水包油型乳狀液的眼用組合物，以及涉及這類眼用組合物的制備方法和應用方法。這些組合物可用于眼睛和隱形眼鏡護理。這些乳狀液采用分子自組裝方法來產生納米級和亞微米級的大分子油滴結構，因而是納米技術的實例。借助于分子自組裝可以在幾毫秒至幾分鐘內容易地制備這些乳狀液。這些乳狀液可以經過濾除菌，并且是貯存穩(wěn)定的。這些乳狀液僅采用一種或兩種表面活性劑的乳化劑來獲得較低的表面活性劑與油的比率。這些組合物對于眼睛而言是舒適和無毒的。
對于本發(fā)明的乳狀液的局部眼應用包括用于干眼病治療的滴眼劑、用于將藥物遞送到眼睛和經過眼睛的組合物、以及隱形眼鏡護理液。隱形眼鏡護理液的應用包括多用途清潔液、沖洗液、消毒和貯存溶液以及用于眼睛的再濕潤液、眼內清潔液和其它溶液。
通過在空氣-眼淚界面、或當存在隱形眼鏡時另外在隱形眼鏡-眼淚界面提供油層，將水包油型乳狀液結合到用于干眼病治療的滴眼劑、隱形眼鏡再濕潤和多用途溶液中，可以增加額外的防止干眼病和隱形眼鏡失水的效用。這種油層通過阻止水蒸發(fā)、因而阻止失水來防止干眼病或隱形眼鏡失水。在隱形眼鏡表面的油層也可以提供耐久潤滑層，尤其對于剛性可透氣隱形眼鏡。在隱形眼鏡表面的油層也可以抑制隱形眼鏡的蛋白質沉積。
本發(fā)明的自乳化水包油型乳狀液具有兩種一般類型。第一種類型是一種表面活性劑的體系。第二種類型是兩種表面活性劑的體系。在兩種情況下都需要(1)表面活性劑必須對所選擇的油(脂)或多種油(脂)具有親和力，該親和力是基于表面活性劑和油(脂)的疏水結構之間的非共價結合相互作用，使得當同時滿足要求(2)時可以完成自乳化作用；以及(2)表面活性劑必須具有楔形或扇形的化學結構，其中楔形結構的較大末端更靠近表面活性劑結構的親水部分。這種楔形被認為可以在水-油界面誘導球形油滴彎曲，這是由于在水-油界面相鄰表面活性劑的楔形物的分子自組裝。因此，楔形表面活性劑分子的幾何形狀與油滴彎曲緊密相關。水相中相鄰表面活性劑分子的親水部分之間的空間排斥對此有促進作用。優(yōu)選地，這些親水部分包括適當長度的聚環(huán)氧乙烷鏈。優(yōu)選地，這些聚環(huán)氧乙烷鏈的長度為7-20環(huán)氧乙烷單位。當滿足對于表面活性劑和油(脂)對的上述兩個結構要求時，進行自乳化作用的實驗檢測，同時改變表面活性劑和油(脂)成分的濃度。自乳化作用的實驗檢測使用本文所描述的制備自乳化乳狀液的方法來進行。當用眼觀察時乳狀液看起來是均勻的，沒有出現(xiàn)絮凝、水相和油相之間的乳狀分層或相分離，并且當乳狀液的油滴尺寸分布也滿足對于乳狀液穩(wěn)定性的特定產品標準時，則認為乳狀液是可接受的。
事實上，如果表面活性劑能夠形成尺寸范圍為0.05至1微米、優(yōu)選為0.05至0.25微米的微滴，那么該表面活性劑是本文所描述的自乳化水包油型乳狀液的良好備選物。
一種成分的表面活性劑體系的實例包括聚乙氧基化油(脂)，如PEG蓖麻油。聚乙氧基化蓖麻油衍生物是通過蓖麻油或氫化蓖麻油與環(huán)氧乙烷的乙氧基化而形成的。蓖麻油通常由約87％的蓖麻油酸、7％的油酸、3％的亞油酸、2％的棕櫚酸以及1％的硬脂酸組成。不同摩爾比率的環(huán)氧乙烷與蓖麻油的反應產生PEG蓖麻油的不同化學產物。PEG蓖麻油的一個實例是Lumulse GRH-40，其由Lambent技術公司(Skokie，IL)生產。單一表面活性劑和油(脂)對的優(yōu)選實例是表面活性劑Lumulse GRH-40和蓖麻油。
Lumulse GRH-40是一種氫化蓖麻油的40摩爾的乙氧基化物。Lumulse GRH-40是通過在三個蓖麻油酸甘油酯鏈的9-碳位置的蓖麻油的催化氫化作用、接著用每組約13個乙氧基基團將12-羥基硬脂酸甘油酯的三個12-羥基基團乙氧基化來制備的。認為蓖麻油與Lumulse GRH-40會發(fā)生自乳化作用，這是由于乙氧基化的12-羥基基團遠端的6-碳烷基鏈對著硬脂酸酯基團的其余的10-碳烷基鏈段向內折疊，以便形成該分子的楔形疏水部分，乙氧基基團向外定向地進入水相，該分子的楔形疏水部分定向地進入蓖麻油相(楔形結構的狹窄部分面朝內離開水相)，并且該分子的楔形疏水部分對蓖麻油具有親和力。
與蓖麻油結合使用的Lumulse GRH-40的最佳量為對于1.0w/w％的蓖麻油約0.8w/w％的Lumulse GRH-40。然而，與蓖麻油結合使用時，可以使用更高或更低的量，其取決于最終乳狀液所期望的性能。通常，Lumulse GRH-40與蓖麻油的重量比是在0.6至0.8的范圍內，優(yōu)選為約0.8。
Lumulse GRH-40可以與其它表面活性劑如聚山梨醇酯-80(吐溫-80，聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯)結合，用以產生包括兩種表面活性劑的自乳化乳狀液。在這樣的組合物中，認為自乳化作用主要由Lumulse GRH-40驅動。第二表面活性劑(例如，聚山梨醇酯-80)并不干擾GRH-40的乳化作用，這是由于聚山梨醇酯-80的疏水鏈(油酸酯鏈)和蓖麻油的疏水鏈(12-羥基油酸酯鏈)以及Lumulse GRH-40的疏水鏈(硬脂酸酯鏈)具有類似的化學結構。非干擾性的第二表面活性劑以較低濃度存在。也就是說，非干擾性表面活性劑的濃度足夠低，使得它并不干擾自乳化作用。
就表面活性劑形成自乳化水包油型乳狀液的能力而言，也可以選擇兩種表面活性劑以便匹配特定的油(脂)或多種油。兩種表面活性劑都必須滿足兩種化學結構的要求，以便完成自乳化作用(1)每種表面活性劑必須對所選擇的油或多種油具有親和力，該親和力是基于表面活性劑和油的疏水結構之間的非共價結合相互作用，以便當同時滿足要求(2)時可以完成自乳化作用；以及(2)表面活性劑對必須能夠形成楔形或扇形的化學結構，其中楔形結構的較大末端更靠近表面活性劑結構的親水部分。與油相容的表面活性劑對的優(yōu)選實例是表面活性劑原料Cremophor RH-40，其包括兩種表面活性劑、以及蓖麻油。來自Parsippany N.J.的BASF公司的Cremophor RH-40包括75-78％的兩種表面活性劑聚乙氧基化的甘油的三羥基硬脂酸酯和混合的聚乙二醇的羥基硬脂酸(二)酯，以及22-25％的游離聚乙二醇。因而Cremophor RH-40原料具有兩種表面活性劑，這兩種表面活性劑在結構上彼此相關，并且在結構上與蓖麻油相關。認為具有三個酯鏈的表面活性劑與具有兩個酯鏈的表面活性劑的結合，其中所有鏈彼此之間都具有親和力，使得在有蓖麻油存在的情況下能夠形成楔形結構，其中這兩種表面活性劑交替存在于油滴界面。同樣來自BASF的Cremophor RH-60是另一種包括兩種表面活性劑的表面活性劑原料的實例。Cremophor RH-60和Cremophor RH-40一樣，不同之處在于，和RH-40相比，RH-60與聚乙二醇具有更高的衍生作用。
可以加入額外的表面活性劑，該表面活性劑可以參與或可以不參與乳狀液的形成。
一種成分體系的另一個實例利用表面活性劑如生育酚聚乙二醇-琥珀酸酯(TPGS，可獲自Eastman化學制品公司，Kingsport，TN)。TPGS可以與生育酚在狹窄部分形成楔形物，在外部的PEG和琥珀酸酯在它們之間形成共價結合(attachment)。
可以用于本發(fā)明的表面活性劑的類型的更一般的描述包括選自下述組的表面活性劑，該組包括(a)至少一個形成自1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚以及至少一個具有12至22個碳原子的脂肪醇鏈；(b)至少一個形成自1至100個環(huán)氧乙烷單位的酯以及至少一個具有12至22個碳原子的脂肪酸鏈；(c)至少一個形成自1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚、酯或酰胺以及至少一個維生素或維生素衍生物；以及(d)上述由不多于兩種表面活性劑組成的混合物。
本發(fā)明的水包油型乳狀液的制備通常如下。為水溶性成分的非乳化劑溶解于水相，而包括乳化劑的油溶性成分溶解于油相。分別加熱兩相(油和水)至適當?shù)臏囟取．敼腆w或半固體油或乳化劑在油相中的情況下，通常高于最高熔化成分的熔點幾度到5至10度時，兩相中此溫度是相同的。當油相在室溫下為液體時，適宜溫度是通過對水相中最高熔化成分的熔點的常規(guī)實驗來確定的。在油相或水相的所有成分在室溫下都可溶于它們的相應相的情況下，可以無需加熱。溫度必須高到足以使所有成分都處于液態(tài)，但不應高到危及成分穩(wěn)定性的程度。工作溫度范圍通常為約20℃至約70℃。為了產生水包油型乳狀液，將最終油相溫和地混合入中間體、優(yōu)選為去離子水相，或最終水相，以便形成適當?shù)姆稚Ⅲw，然后在攪拌或沒有攪拌的情況下使產物冷卻。在將最終油相初步溫和地混合入中間水相的情況下，此乳狀液濃縮物其后以適當比率與最終水相進行混合。在這樣的情況下，乳狀液濃縮物和最終水相無需處于相同溫度或加熱到室溫以上，因為此時乳狀液已經形成。
如果在一種乳化劑中的環(huán)氧乙烷單位的數(shù)量太大，則在自乳化過程中可以形成半固體。通常，如果表面活性劑或多種表面活性劑在其結構中具有10個以上的環(huán)氧乙烷單位，那么該表面活性劑和油相與構成組合物的總水量中的少量，例如約0.1-10％，進行混合以便初步形成糊劑，其后該糊劑與其余的水結合。然后可能需要溫和地混合直到水合的乳化劑完全被溶解，以便形成乳狀液。
在一個具體實施例中，首先將表面活性劑和油進行混合和加熱。然后將少量水相加入油相中，以便形成糊劑。在本文中糊劑被定義為不流動的半固體制劑。加入的水相的量可以是0.1-10％，優(yōu)選為0.5至5％，最優(yōu)選為1-2％。糊劑形成后，在如上所述的相同溫度下，將額外的水加入到該糊劑中。在某些具體實施例中，加入的水量是5-20％。然后溫和地混合乳狀液。在某些具體實施例中，混合可以進行30分鐘至3小時。
在一優(yōu)選的具體實施例中，隨后測定顆粒的大小。為此目的，可以按照制造商的說明書使用Horiba LA-920粒度分析儀。在一優(yōu)選具體實施例中，在轉到下一步驟之前，顆粒大小在0.08和0.18微米之間。
在接下來的步驟中，所述顆?？梢耘c其它含水成分如水和緩沖液(優(yōu)選為堿化的硼酸)混合。可選地，可以加入電解質，如氯化鈣二水合物、氯化鎂六水合物、氯化鉀和氯化鈉、以及Kollidon 17NF。雖然電解質并不是形成乳狀液所必需的，但它們通過維持眼中的電解質平衡而非常有助于維持眼組織的完整性(不受損害，integrity)。同樣，緩沖液并不是關鍵性的，但硼酸/硼酸鈉體系是優(yōu)選的，因為堿化的磷酸鹽緩沖體系會與優(yōu)選的電解質沉淀。
將pH調節(jié)到6.8-8.0，優(yōu)選為約7.3至7.7。這種pH范圍對于組織養(yǎng)護和避免眼部刺激是最佳的。隨后可以加入防腐劑。在優(yōu)選具體實施例中，加入Purogene材料作為防腐劑。(PUROGENE是美國俄克拉荷馬州諾曼市的BioCide國際公司的商標，并且也可以作為Purite獲得，其是Allergan公司的商標)。
本發(fā)明的水包油型乳狀液可以在制備以后利用高壓蒸氣滅菌法加以滅菌，或者可以通過本領域已知的任何方式進行過濾除菌，如利用0.22微米的除菌過濾器。當乳狀液液滴(或小珠或顆粒)大小和特性允許時，可以采用除菌過濾器來滅菌。乳狀液的液滴大小分布無需完全低于要進行過濾除菌的除菌過濾膜的顆粒大小限制。在乳狀液的液滴大小分布高于除菌過濾膜的顆粒大小限制的情況下，在穿過過濾膜時乳狀液需要能夠變形或可以進行接受的變化，然后在穿過以后還原。通過對過濾前后組合物中的乳狀液液滴大小分布和總油量百分比的常規(guī)檢測，就可以很容易確定這種性能?？蛇x的，損失少量較大尺寸的液滴材料是可以接受的。
本發(fā)明的乳狀液通常在過濾滅菌前通過凈化過濾器進行非滅菌性過濾，或在高壓蒸氣滅菌以后進行無菌凈化過濾。在一優(yōu)選具體實施例中，利用0.22微米的過濾器對乳狀液進行過濾除菌。優(yōu)選地，98-99％的乳狀液應穿過0.22微米的過濾器。注意，通過暫時改變形狀，大于0.22微米的顆粒也可以穿過。在一優(yōu)選具體實施例中，隨后對材料進行檢測以證實滅菌步驟的有效性。優(yōu)選在25℃以下進行貯存以便保持穩(wěn)定性。其后，將乳狀液無菌注入適當?shù)娜萜鳌?br> 本發(fā)明提供了如在本文其它部分所描述的本發(fā)明眼用組合物的使用方法。在一個具體實施例中，本方法包括將本發(fā)明的組合物以可以有效地為眼睛提供至少一種益處的數(shù)量和條件用于目標對象(例如，人或動物)的眼睛。在此具體實施例中，本組合物可以使用該組合物的至少一部分，例如，治療性成分和類似物，該成分可以用于治療疾病，例如干眼病和/或眼睛的一種或多種其它疾病。
在一非常有用的具體實施例中，本方法包括將本發(fā)明的組合物以可以有效地對隱形眼鏡和/或隱形眼鏡的佩戴者提供至少一種益處的數(shù)量和條件接觸隱形眼鏡。在此具體實施例中，本組合物用作隱形眼鏡護理組合物的至少一部分。
當本組合物包括治療性成分時，這類組合物可以用在一些方法中，這些方法包括將有效數(shù)量的該組合物用于目標對象(即，人或動物)的眼睛，以便為目標對象提供所希望的治療效應。這樣的治療效應可以是眼部治療效應和/或針對目標對象身體的一個或多個其它部位或針對目標對象全身的治療效應。在此具體實施例中，本發(fā)明的水包油型乳狀液用作組合物的至少一部分，該乳狀液可以用作治療性成分的載體或賦形劑。
對根據(jù)本發(fā)明使用的水相或者含水成分以及油相和含油成分進行選擇，以使其在本組合物中是有效的，并且使其，例如，對該組合物、對該組合物的應用、對被處理的隱形眼鏡、對經處理的隱形眼鏡的佩戴者、或者對將本組合物置于其眼中的人或動物沒有重大或顯著的有害效應。
本組合物的液態(tài)含水介質或含水成分優(yōu)選包括緩沖成分，該緩沖成分以有效量存在，以便將該介質或含水成分的pH維持在所希望的范圍內。本組合物優(yōu)選包括有效量的滲透壓調節(jié)成分，以便向組合物提供所希望的滲透壓。
本組合物中的水相或含水成分可以具有與預期用途相容的pH，該pH通常在約4至約10的范圍內?？梢允褂酶鞣N常規(guī)的緩沖劑，如磷酸鹽、硼酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、組氨酸、三羥甲基氨基甲烷、雙(三羥甲基氨基甲烷)等，以及其混合物。硼酸鹽緩沖劑包括硼酸及其鹽，如硼酸鈉或硼酸鉀。也可以使用四硼酸鉀或者偏硼酸鉀，它們在溶液中產生硼酸或硼酸鹽。也可以使用水合鹽，如硼酸鈉十水合物。磷酸鹽緩沖劑包括磷酸及其鹽，例如，M2HPO4和MH2PO4，其中M是堿金屬如鈉和鉀。也可以使用水合鹽。在本發(fā)明的一個具體實施例中，將Na2HPO4·7H2O和NaH2PO4·H2O用作緩沖劑。術語磷酸鹽還包括在溶液中產生磷酸或磷酸鹽的化合物。另外，也可以使用用于上述緩沖劑的有機抗衡離子(相反離子)。緩沖劑的濃度通常在約0.01到2.5w/v％之間變化，并且更優(yōu)選在約0.05到約0.5w/v％之間變化。
對緩沖劑的類型和數(shù)量進行選擇，以便使配方(方劑)滿足組合物的功能性性能標準，如表面活性劑和貯存期穩(wěn)定性、抗微生物效力、緩沖容量以及類似因素。還對緩沖劑進行選擇用以提供一pH，其與要使用組合物的眼睛和任何隱形眼鏡相容。通常，接近人眼淚的pH，如約7.45的pH，是非常有用的，雖然更寬的pH范圍約6至約9、更優(yōu)選約6.5至約8.5，進一步優(yōu)選約6.8至約8.0，也是可接受的。在一個具體實施例中，本組合物具有約7.0的pH。
可以用滲透性試劑將本組合物的摩爾滲透壓濃度調節(jié)到與組合物的預期用途相容的值。例如，可以將組合物的摩爾滲透壓濃度調節(jié)到接近正常淚液的滲透壓，該滲透壓相當于在水中約0.9w/v％的氯化鈉。適宜的滲透壓調節(jié)劑的實例包括但不限于氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣和氯化鎂；右旋糖；甘油；丙二醇；甘露醇；山梨醇等，以及其混合物。在一個具體實施例中，用氯化鈉和氯化鉀的組合來調節(jié)組合物的滲透壓。
滲透性試劑的通常使用量在約0.001至2.5w/v％的范圍內。已發(fā)現(xiàn)，這些量可用于提供足夠的滲透性來維持眼組織免受損害。優(yōu)選地，將使用一定量的滲透性試劑以便提供150至450mOsm/kg的最終滲透值，該滲透值更優(yōu)選在約250至約330mOsm/kg之間，最優(yōu)選在約270至約310mOsm/kg之間。本組合物的含水成分更優(yōu)選基本上是等滲的或低滲的(例如稍微低滲的，例如約240mOsm/kg)和/或是眼用可以接受的。在一個具體實施例中，這些組合物含有約0.14w/v％的氯化鉀以及各自均為0.006w/v％的氯化鈣和/或氯化鎂。
除滲透性成分和緩沖成分以外，本組合物可以包括一種或多種其它材料，例如，如在本文其它部分描述的，對于所希望的目的有效量的材料，所述目的例如，處理隱形眼鏡和/或眼組織，例如，為與這類組合物接觸的隱形眼鏡和/或眼組織提供一種或多種有益的性能。
在一個具體實施例中，本發(fā)明的組合物可以，例如，用作載體或賦形劑，用于遞送治療性制劑到達或通過眼睛。在本組合物中可以包括任何適宜的治療性成分，只要這樣的治療性成分，與組合物的殘余部分相容、不過分地干擾組合物的殘余部分的功能和性能、當在本組合物中被遞送時是有效的，例如，有效地提供所希望的治療效應、以及當被用于眼睛或通過眼睛時是有效的。例如，在一非常有用的具體實施例中，可以完成疏水的治療性成分或藥物到達或通過眼睛的遞送。不希望將本發(fā)明限制于任何特定理論或操作機制，據(jù)認為油性成分和表面活性劑成分的疏水組分可促進疏水性的治療性成分在本組合物中保持可溶的、穩(wěn)定的和有效的狀態(tài)。
根據(jù)本發(fā)明的這個方面，有效量所希望的治療性藥劑或成分優(yōu)選與本發(fā)明的組合物的其它成分物理性結合或混合，用以形成在本發(fā)明范圍內的含有治療性成分的組合物。
雖然用于將治療性制劑遞送到達或通過眼睛的組合物是一優(yōu)選的具體實施例，但本文所描述的自乳化組合物還可用于通過其它方式來遞送治療性藥劑，這些方式包括但不限于通過口服、直腸、陰道、胃腸道外、肌內、腹腔內、動脈內、鞘內、支氣管內、皮下、皮內、靜脈內、鼻、口腔和舌下遞送。
所使用的治療性藥劑或多種藥劑的類型將主要取決于所希望的治療效應，例如，要治療的疾病或病癥或病變。這些治療性藥劑或成分包括一系列藥物或物質，其在當前或預期內，以局部方式或其他方式被遞送到達或通過眼睛。有用的治療性成分的實例包括，但不限于(1)抗感染和抗微生物物質，包括喹諾酮類，如氧氟沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、加替沙星以及類似物；β-內酰胺類抗生素，如頭孢西丁、正甲酰氨基-沙納霉素、其它沙納霉素衍生物、四環(huán)素、氯霉素、新霉素、羧芐西林、多粘菌素E、青霉素G、多粘菌素B、萬古霉素、頭孢唑林、頭孢噻啶、利福霉素SV鈉、短桿菌肽、桿菌肽磺胺類藥以及類似物；氨基糖苷類抗生素，如慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、西索米星、妥布霉素以及類似物；萘啶酮酸(naladixic acid)及其類似物等；抗微生物結合物，如fluealanine/戊胺唑酮等；呋喃西林；及類似物以及它們的混合物；(2)抗變態(tài)反應藥劑，抗組胺藥，抗高血壓藥和減充血藥，如吡拉明、氯苯那敏、鹽酸去氧腎上腺素、鹽酸四氫唑啉(tetrahydrazoline hydrochloride)、鹽酸萘唑啉、羥甲唑啉、安他唑啉、及類似物以及它們的混合物；(3)消炎藥，如可的松、氫化可的松、醋酸氫化可的松、倍他米松(betamethansone)、地塞米松、地塞米松磷酸鈉、潑尼松、甲潑尼松、甲羥松、氟米龍、氟可龍、潑尼松龍、潑尼松龍磷酸鈉、曲安西龍、舒林酸、其鹽和相應的硫化物、及類似物以及它們的混合物；(4)非甾類抗炎藥(NSAID)成分，如那些包括或不包括羧基(-COOH)基團或部分、或羧基衍生基團或部分的成分；NSAID成分，其選擇性或非選擇性抑制環(huán)氧合酶，該環(huán)氧合酶具有兩種同種型，稱作COX-1和COX-2；苯基鏈烷酸(phenylalkoanoic acid)、如雙氯芬酸、氟比洛芬、酮咯酸、吡羅昔康(piroximcam)、舒洛芬及類似物；吲哚類，如吲哚美辛及類似物；二芳基吡唑類，如塞來考昔及類似物；吡咯并吡咯類；以及其它抑制前列腺素合成的藥劑及類似物以及它們的混合物；(5)縮瞳藥和抗膽堿能藥，如乙膦硫膽堿、匹魯卡品、水楊酸毒扁豆堿、異氟磷、腎上腺素、雙特戊酰腎上腺素、新斯的明、碘乙膦硫膽堿、地美溴銨、卡巴膽堿、醋甲膽堿、貝膽堿、及類似物以及它們的混合物；(6)散瞳藥，如阿托品、后馬托品、東莨菪堿、羥苯丙胺、麻黃堿、可卡因、托吡卡胺、去氧腎上腺素、環(huán)噴托酯、奧芬溴銨、尤卡托品、及類似物以及它們的混合物；(7)抗青光眼藥物，例如，前列腺素，如那些在美國專利第6,395,787號和第6,294,563號所描述的前列腺素，將上述專利以引用方式全部結合于本文中作為參考，腎上腺素能激動藥如喹喔啉和喹喔啉衍生物，如(2-咪唑啉-2-基氨基)喹喔啉、5-鹵代-6-(2-咪唑啉-2-基氨基)喹喔啉，例如，5-溴-6-(2-咪唑啉-2-基氨基)喹喔啉和溴莫尼定及其衍生物，如那些在美國專利第6,294,563號中所描述的溴莫尼定及其衍生物，將該專利以引用方式全部結合于本文中作為參考，以及類似物，噻嗎洛爾，尤其作為馬來酸鹽和R-噻嗎洛爾和噻嗎洛爾衍生物以及噻嗎洛爾或R-噻嗎洛爾與匹魯卡品的結合(物)以及類似物；腎上腺素和腎上腺素復合物或前藥，如酒石酸氫鹽(酯)、硼酸鹽(酯)、鹽酸鹽和雙特戊酰腎上腺素衍生物以及類似物；高滲和雙特戊酰腎上腺素衍生物以及類似物；倍他洛爾，高滲藥劑，如甘油、甘露醇、尿素及類似物以及它們的混合物；(8)抗寄生蟲化合物和/或抗原生動物化合物，如伊維菌素；乙胺嘧啶、三磺嘧啶復方制劑、克林霉素和皮質甾類制劑及類似物以及它們的混合物；
(9)抗病毒化合物，如無環(huán)鳥苷、5-碘-2′-脫氧尿苷(IDU)、腺苷阿拉伯糖苷(Ara-A)、三氟胸苷、干擾素和干擾素誘導劑，如多聚肌苷酸∶胞苷酸(Poly I∶C)及類似物以及它們的混合物；(10)碳酸酐酶抑制劑，如乙酰唑胺、雙氯非那胺、2-(對羥基苯基)硫代-5-噻吩氨磺酰、6-羥基-2-苯并噻唑-氨磺酰、6-新戊酰氧代-2-苯并噻唑氨磺酰及類似物以及它們的混合物；(11)抗真菌藥，如兩性霉素B、制霉菌素、氟胞嘧啶、納他霉素、咪康唑及類似物以及它們的混合物；(12)疼痛緩解劑和麻醉劑，如依替卡因、可卡因、丁氧普魯卡因、鹽酸地布卡因、鹽酸達克羅寧、納依卡因、鹽酸非那卡因、哌羅卡因、鹽酸丙對卡因、鹽酸丁卡因、?？丝ㄒ颉⒉歼量ㄒ?、利多卡因、甲哌卡因、丙胺卡因及類似物以及它們的混合物；(13)眼診斷藥劑，如(a)那些用來檢查視網膜的藥劑，如氯化鈉熒光素和類似物以及其混合物；(b)那些用來檢查結膜、角膜和淚腺結構的藥劑，如熒光素、玫瑰紅和類似物以及其混合物；以及(c)那些用來檢查異常瞳孔反應的藥劑，如醋甲膽堿、可卡因、腎上腺素、阿托品、羥苯丙胺和匹魯卡品和類似物以及其混合物；(14)在外科手術中用作添加劑的眼用藥劑，如α-糜蛋白酶、和透明質酸酶以及類似物；粘彈性的藥劑，如透明質酸酯(鹽)和類似物以及其混合物；
(15)螯合劑，如乙二胺四乙酸鹽(EDTA)和去鐵胺和類似物；以及其混合物；(16)免疫抑制劑和抗代謝藥，如甲氨蝶呤、環(huán)磷酰胺、6-巰基嘌呤、環(huán)胞菌素類如環(huán)胞菌素A至I和硫唑嘌呤和類似物；以及其混合物；(17)血管生長抑制劑(angiostatic agents)；(18)促粘液分泌劑；(19)蛋白質和生長因子，如表皮生長因子；(20)維生素和維生素衍生物，如維生素A、維生素B 12、維生素C、維生素D、維生素E、葉酸以及其衍生物；(21)上述藥劑的結合，如抗生素/消炎藥，如硫酸新霉素-地塞米松磷酸鈉、喹諾酮-NSAID和類似物；以及相伴隨的抗青光眼治療，如馬來酸噻嗎洛爾-醋克利定和類似物。
當在本發(fā)明的組合物中存在治療成分時，組合物中這樣的治療成分的量優(yōu)選為可有效地向被給予該組合物的人或動物提供所希望的治療效應。
典型地，當存在治療成分時，包括本發(fā)明的水包油型乳狀液的組合物，含有重量比為至少約0.001％(w/w)的治療成分，例如約0.01％至約5％(w/v)的治療成分(如藥劑或藥物)。因此，例如，從一滴含有約25mg組合物的液態(tài)組合物，可以獲得約0.0025mg至約1.25mg的治療成分。
在本發(fā)明的藥物組合物中使用的特定治療成分，例如藥物或藥劑，是這樣的類型即，患有或要免受或正在遭受疾病的患者需要或得益于用于治療(例如藥理治療)的藥物或藥劑類型。例如，如果患者正患有青光眼，那么選擇的藥物可以是噻嗎洛爾和/或一種或多種其它抗青光眼成分。
確定要加入本發(fā)明的組合物中治療成分(例如藥物)的正確的量，以便保證有效遞送所要求的治療成分對于本領域技術人員而言是已知的。
本發(fā)明的另一方面是利用本文所描述的包含水包油型乳狀液的組合物來治療干眼病。對于這種用途，患者將被給予由本領域技術人員所確定的需要的組合物。例如眼用緩和藥(潤劑)，如羧甲基纖維素、其它的纖維素聚合物、右旋糖酐70、明膠、甘油、聚乙二醇(例如，PEG 300和PEG 400)、聚山梨醇酯80、丙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮和類似物、以及其混合物，可以用在本發(fā)明的眼用組合物中，例如，用在治療干眼病的組合物中。
在另一具體實施例中，本組合物可以用作多用途護理組合物、硬(剛)質可透氣(隱形眼睛的)浸泡和調節(jié)溶液、再濕潤組合物和清潔組合物，例如，眼內清潔劑，用于隱形眼鏡護理。
利用本發(fā)明的組合物可以護理所有類型的隱形眼鏡。例如，這些隱形眼鏡可以是軟質隱形眼鏡、硬(剛)質和軟質或柔質可透氣隱形眼鏡、硅酮水凝膠(質地的)隱形眼鏡、硅非水凝膠(質地的)隱形眼鏡以及傳統(tǒng)的硬質隱形眼鏡。
如本文所使用的多用途組合物可用于完成至少兩種功能，諸如當隱形眼鏡在眼睛之外時，對隱形眼鏡進行清潔、沖洗、消毒、再濕潤、潤滑、調節(jié)、浸泡、貯存和其它處理。當隱形眼鏡在眼睛內時，這樣的多用途組合物優(yōu)選還可用于對隱形眼鏡進行再濕潤和清潔。當隱形眼鏡在眼睛內時，用于再濕潤和清潔隱形眼鏡的產品通常稱作再濕潤劑或“眼內”清潔劑。如在本文中所使用的，術語“清潔”包括用或不用手指操作以及用或不用可以攪動組合物的附加裝置將隱形眼鏡松動和/或從中除去沉積物以及其它污染物。如在本文中所使用的，術語“再濕潤”是指至少對隱形眼鏡靠近眼睛(anterior)表面的部分，例如至少是重要的部分，添加水。
雖然本組合物作為多用途隱形眼鏡護理組合物是非常有效的，但可以將具有適宜化學組成的本組合物配制成用以提供單一的隱形眼鏡的處理物。這樣的單一處理隱形眼鏡的護理組合物、以及多用途隱形眼鏡護理組合物均包括在本發(fā)明的范圍內。
利用本文描述的組合物來處理隱形眼鏡的方法也包括在本發(fā)明的范圍內。通常，這樣的方法包括在在有效的條件下將隱形眼鏡與這樣的組合物接觸，以便為隱形眼鏡提供所希望的處理。
可以通過將隱形眼鏡浸沒在組合物中的方式，將通常為液態(tài)含水介質形式的組合物與隱形眼鏡接觸。至少在部分接觸期間，可以攪動包含隱形眼鏡的組合物(例如通過搖動含有組合物和隱形眼鏡的容器)以便至少促進隱形眼鏡的處理，例如除去隱形眼鏡中的沉積物。在這樣的接觸步驟之前或之后，在清潔隱形眼鏡時，可以人工擦洗隱形眼鏡以便進一步除去隱形眼鏡中的沉積物。該清潔方法還可以包括在接觸步驟之前或之后沖洗隱形眼鏡和/或在將隱形眼鏡放回到佩戴者眼睛里之前沖洗基本上沒有組合物的隱形眼鏡。
此外，例如在外科手術過程之前、期間和/或之后，施加或給予人工淚液以便沖洗眼睛和灌洗眼組織的方法也包括在本發(fā)明的范圍內。如在本文的其它部分所描述的，本組合物可用作人工淚液、洗眼劑和灌洗組合物，其可以(例如)用來再裝滿/補充天然淚液膜，用來在暴露于異物(如化學物質或異體或異物)之后對眼睛進行洗滌、浸泡、沖刷或沖洗，或用來灌洗經歷外科手術過程的眼組織。在本文中，異物包括但不限于下述的一種或多種花粉、灰塵、豚草以及其它外來抗原，這些異物可引起不良反應，如眼睛中的變態(tài)反應、充血、瘙癢、灼燒、刺激以及類似癥狀。
具有適宜化學組成的本組合物可用于這些和其它眼內應用中的每一種。這些組合物可以以傳統(tǒng)和熟知的方式用于眼內應用。換言之，根據(jù)本發(fā)明的組合物可以用于眼內應用，其應用方式基本上與傳統(tǒng)組合物在類似應用中的方式相類似。如在本文的其它部分所討論的，本組合物的一種或多種益處可以通過這樣的眼內應用來提供。
清潔成分可以包括在用于清潔隱形眼鏡的本組合物中。當該清潔成分存在時，其應以有效量存在，以便至少促進從隱形眼鏡中除去、并優(yōu)選有效除去碎屑或沉積物。
在一個具體實施例中，使用了清潔性表面活性劑?？梢蕴峁┯行Я康那鍧嵆煞郑员阒辽俅龠M從隱形眼鏡中除去沉積物。可以沉積在隱形眼鏡上的沉積物或碎屑的類型包括蛋白質、脂質、以及基于碳水化合物或基于粘蛋白的碎屑。在給定的隱形眼鏡上可以存在一種或多種類型的碎屑。
所使用的清潔性表面活性劑成分可以選自傳統(tǒng)用于清潔隱形眼鏡的表面活性劑。優(yōu)選的表面活性劑包括非離子表面活性劑，如Pluronic和Tetronic系列表面活性劑，兩者都是環(huán)氧丙烷和環(huán)氧乙烷的嵌段共聚物(可獲自BASF公司、Performance Chemicals公司、Mount Olive公司、NJ公司)，以及類似物，例如一種或多種維生素衍生成分，如維生素E TPGS(D-α-生育酚基聚乙二醇1000琥珀酸酯)。
在一個具體實施例中，根據(jù)本發(fā)明的含有這樣的清潔性表面活性劑成分的組合物具有約0.01至1.00w/v％之間的表面活性劑濃度。然而，可以使用更高或更低的量。
本組合物可以進一步包括一種或多種抗微生物藥劑(即防腐劑或消毒劑)，以便使該組合物免受微生物污染和/或對隱形眼鏡進行消毒。在液態(tài)含水介質中存在的消毒劑成分的量是有效的，以便對與該組合物接觸的隱形眼鏡進行消毒。
在一個具體實施例中，例如，當需要多用途隱形眼鏡組合物時，消毒劑成分包括但不限于在眼應用中所使用的季銨鹽，如聚[二甲基亞氨基-ω-丁烯-1，4-二基]氯化物、α-[4-三(2-羥乙基)銨]-二氯化物(化學品登記號75345-27-6，可獲自Onyx公司，商標為聚季銨鹽1)、聚(乙氧基(二甲基亞氨基)亞乙基二甲基亞氨基)亞乙基二氯化物(由Memphis，TN的Buckman laboratories公司出售，商標為WSCP)、苯扎鹵化銨、阿來西定鹽、阿來西定游離堿、氯己定鹽、?？颂驵?、烷基胺、烷基二胺和烷基三胺、氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)、六亞甲基雙胍及其聚合物、抗微生物多肽、類似物以及其混合物。特別有用的消毒劑成分選自下述的一種或多種(混合物)聚六亞甲基雙胍(PHMB)、聚季銨鹽-1、及其眼用可接受的鹽、類似物以及其混合物。
阿來西定和氯己定的鹽可以是有機鹽或無機鹽，并且通常是滅菌的葡糖酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、鹵化物和類似物。通常，六亞甲基雙胍聚合物(也稱作聚氨丙基雙胍(PAPB))具有高達約100,000的分子量。這樣的化合物是已知的，并披露在美國專利第4,758,595號中，將其全部內容以引用方式結合于本文中作為參考。
可用于本發(fā)明的消毒劑成分優(yōu)選以約0.00001％至約2％(w/v)的濃度存在于本組合物中。
更優(yōu)選地，該消毒劑成分以眼用可接受的或安全的濃度存在于本組合物中，以便使使用者可以從組合物中取出經消毒的隱形眼鏡，并在其后直接將隱形眼鏡放置在眼睛中以獲得安全和舒適的佩戴。
當希望用消毒劑成分對隱形眼鏡進行消毒時，則使用可有效對隱形眼鏡消毒的消毒劑的量。優(yōu)選地，這樣的有效量的消毒劑可以在3小時內使隱形眼鏡上的微生物負荷降低一個對數(shù)級。更優(yōu)選地，有效量的消毒劑可以在1小時內使微生物負荷降低一個對數(shù)級。
優(yōu)選在本組合物中提供消毒劑成分，更優(yōu)選地，提供的消毒劑成分可溶于本組合物的含水成分中。
本組合物可以包括有效量的防腐劑成分?？梢允褂萌魏芜m宜的防腐劑或多種防腐劑的組合。適宜的防腐劑的實例包括但不限于Purogene、聚六亞甲基雙胍(PHMB)、聚季銨鹽-1、其眼用可接受的鹽、類似物以及其混合物、苯扎氯銨、對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸乙酯、海克替啶、類似物以及其混合物。包括在本組合物中的防腐劑成分的量可以有效地保存組合物，并且可以基于所使用的特定防腐劑成分、所涉及的特定組合物、所涉及的特定應用、以及類似因素來加以變化。雖然某些防腐劑可以使用其它濃度，但防腐劑濃度通常在組合物的約0.00001％至約0.05％或約0.1％(w/v)范圍內。
在本發(fā)明中，非常有用的防腐劑成分的實例包括但不限于亞氯酸鹽成分。根據(jù)本發(fā)明，可用作防腐劑的亞氯酸鹽成分的特定實例包括經穩(wěn)定的二氧化氯(SCD)、金屬亞氯酸鹽、類似物以及其混合物。工業(yè)級(或USP級)亞氯酸鈉是一種非常有用的防腐劑成分。許多亞氯酸鹽成分(例如SCD)的準確的化學組成還沒有被完全了解。某些亞氯酸鹽成分的制備或生產在McNicholas的美國專利第3,278,447號中進行了描述，將其全部內容以引用方式結合于本文中作為參考。有用的SCD產品的特定實例包括由Rio LindaChemical公司以Dura Klor商標出售的SCD產品、由InternationalDioxide公司(North Kingstown，RI)以Anthium Dioxide商標出售的SCD產品、由International Dioxide公司以Carnebon 200商標出售的SCD、由Advanced Medical Optics公司(Santa Ana，CA)以OcuPure商標出售的SCD產品、以及由BioCide International公司(Norman，OK)以Purogene商標出售的SCD產品(也稱作Purite，可獲自Allergan公司)。
其它有用的防腐劑包括抗微生物肽。在可以使用的抗微生物肽中包括但不限于防御素、與防御素有關的肽、殺菌肽、與殺菌肽有關的肽、馬加寧和與馬加寧有關的肽，以及其它具有抗細菌、抗真菌和/或抗病毒活性的氨基酸聚合物。抗微生物肽的混合物或抗微生物肽與其它防腐劑的混合物也包括在本發(fā)明的范圍內。
本發(fā)明的組合物可以包括粘度調節(jié)劑或成分，如纖維素聚合物，包括羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥乙基纖維素(HEC)、乙基羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素和羧甲基纖維素；卡波姆(例如卡巴普.RTM)；聚乙烯醇；聚乙烯基吡咯烷酮；藻酸鹽；角叉菜膠；以及瓜爾膠、刺梧桐樹膠、瓊脂糖膠、槐豆膠、黃芪膠和黃原膠。如果存在的話，使用有效量的這樣的粘度調節(jié)成分，以便向本組合物提供所希望的粘度。雖然某些粘度調節(jié)成分可以使用其它濃度，但這樣的粘度調節(jié)劑的濃度通常在組合物總量的約0.01至約5％(w/v)之間變化。
在某些情況下，希望在本組合物中包括有效量的螯合劑或螯合成分，以便結合金屬離子，否則這些金屬離子可能會，例如穩(wěn)定微生物的細胞膜，因而干擾最佳的消毒活性。可選的，在某些情況下，希望結合金屬離子以防止它們與組合物中的其它物質相互作用。如果存在的話，包括有效量的螯合劑以便結合所存在的金屬離子的至少一部分，例如，至少為所存在的金屬離子的大部分。所存在的這樣的螯合成分的量通常在約0.01至約0.2w/v％的范圍內。有用的螯合成分的實例包括但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)及其鉀鹽或鈉鹽、以及低分子量的有機酸(如檸檬酸和酒石酸)及其鹽(如鈉鹽)。
本組合物可以包括有效量的一種或多種額外的成分。例如，可以包括一種或多種調節(jié)成分或一種或多種隱形眼鏡濕潤劑、類似物以及其混合物。在本發(fā)明的組合物中這些和其它額外成分的可接受濃度或有效濃度對于本領域技術人員而言是顯而易見的。
每種成分可以存在于本組合物的固態(tài)或液態(tài)形式中。當額外的一種或多種成分作為固體存在時，它們可以直接混合在如散劑或壓制片劑中，或它們可以基本上是分開的(雖然在相同的顆粒中)，如在膠囊化小球或片劑中。額外的一種或多種成分可以是固體形式，直到需要使用時，可以隨之將它們溶解或分散在本組合物的含水成分中，以便(例如)有效地接觸隱形眼鏡的表面。
當包括任何成分時，在典型的使用和貯存條件下，它優(yōu)選與組合物中的其它成分是相容的。
在某些具體實施例中，本文描述的眼用組合物的抗微生物活性在制備以后會增加。制備后處理可以包括將組合物貯存達1周至數(shù)月，優(yōu)選為兩周至六周，而最優(yōu)選至少為制備后約一個月。也可以通過加熱、加壓或氧化處理來強化抗微生物活性的提高?？梢允褂脭?shù)種處理方式的結合。例如，可以將組合物貯存在30-50℃的溫度下，更優(yōu)選為約40℃，時間至少為約兩周，最優(yōu)選為一個月。
本領域技術人員應當明了，在不偏離本發(fā)明的精神的條件下可以進行許多和不同的改進。因此，應當清楚地明白，以下實施例僅是用來舉例說明，而不是用來限制本發(fā)明的保護范圍的。
實施例實施例1制備眼用溶液的方法下述實施例將針對一種成分的表面活性劑體系來加以描述。在本實施例中，以PEG-40氫化蓖麻油(一種氫化蓖麻油的40摩爾乙氧基化衍生物)作為實例來加以說明。參照圖1和表1。圖1示出了該方法的流程圖。表1示出了用于本實施例的各種成分的量。
加熱PEG-40氫化蓖麻油(Lumulse GRH-40，LambentTechnologies公司，Skokie，IL)和蓖麻油。溫度必須高到足以使所有的成分處于液態(tài)，但不應高于以致危及成分的穩(wěn)定性的溫度。在本實施例中，所使用的溫度為60+/-2℃。
在60+/-2℃下加入少量的總水(1％)，以形成透明的白色糊劑?；旌显摵齽┲钡交旌衔镒兊镁鶆颉Ｔ谛纬珊齽┮院?，在50-62℃之間，將更多的水加入到糊劑中。在本實施例中，加入7％的總水，并在200-1000rpm下混合1小時直到混合物變得均勻。在此階段，形成了乳狀液濃縮物。
然后利用Horiba LA-920粒度分析儀、并根據(jù)制造商的說明書來測定顆粒(小滴)的大小。優(yōu)選地，在轉到下一步驟之前，顆粒大小是在0.08至0.18微米之間。
將乳狀液濃縮物與分開制備的剩余水、緩沖劑、電解質(氯化鈣二水合物、氯化鎂六水合物、氯化鉀和氯化鈉)以及Kollidon 17NF的溶液(參見表1)混合約30分鐘。雖然電解質并不是形成乳狀液所必需的，但通過維持眼中的電解質平衡它們非常有助于維持眼組織的完整性(維持眼組織不受損害)。同樣，緩沖劑對于形成乳狀液也不是至關重要的，但對于適當維持與眼相容的pH則是必要的。硼酸/硼酸鈉緩沖體系是優(yōu)選的，因為基于磷酸鹽的緩沖體系會使電解質沉淀。
必要時，用10N的NaOH將pH調節(jié)到7.35至7.55。注意，對于組織維持和避免眼刺激，這種pH范圍是最佳的。對于加入的作為防腐劑的Purogene的穩(wěn)定性而言，這也是最佳的pH范圍。然后按照在圖1中示出的計算結果加入Purogene。其后，檢查pH并在必要時用10N的NaOH將pH調節(jié)到7.5+/-0.2。注意，pH僅可以在加入Purogene以后用堿(如10N的NaOH)來加以調節(jié)，因為在酸性pH調節(jié)期間形成的在局部溶液中的高濃度的酸會破壞Purogene。
在接下來的步驟中，將該乳狀液覆蓋，并在低于25℃下貯存在暗處直至過濾除菌。最長的貯存時間為72小時。
然后利用0.22微米的過濾器對組合物進行過濾除菌。優(yōu)選地，98-99％的乳狀液應當穿過該0.22微米的過濾器。注意，通過暫時改變它們的形狀，大于0.22微米的顆粒也可以穿過。然后對該物質進行檢測以證實除菌步驟的有效性。然后將該物質裝入瓶中并貯存。用于本實施例的灌裝前釋放(pre-fill release)的規(guī)格是pH為7.3-7.7，平均顆粒大小為0.09-0.17微米，并且物理外觀為乳白色溶液。灌裝后釋放(post-fill release)規(guī)格是pH為7.3-7.7，潛在的二氧化氯為60-70ppm，蓖麻油為1.1-1.4％(w/w)，Kollidon 17NF為0.2-0.4％(w/w)，摩爾滲透壓濃度為250-280mOsm/kg，以及無菌度為USP級。
表1.用于實施例1的乳狀液配方(方劑)

1Purogene的計算要加入的原料量必須在原料批次的定量分析的基礎上來進行計算。

每1000g所需要的Purogene(g)/1000g×批量(g)＝需要的Purogene(g)/批量2每1000g的水量計算要加入的水量必須基于要加入的Purogene原料量來進行計算。
水(g)/1000g＝963.13-每1000g需要的Purogene(g)
實施例2用于評估眼用乳狀液的細胞毒性的中性紅保留測定溶液的細胞毒性是用標準中性紅保留測定來加以評估的。中性紅保留細胞毒性測定的相關性是基于已確定的觀察結果某些可以在體內刺激或損害組織(如眼組織)的材料在體外對某些細胞類型是具有細胞毒性的，而且刺激或損害的程度與細胞毒性的水平相關。在健康和有活力的細胞中，中性紅染料被合并入并貯存在細胞的溶酶體中。在細胞膜受損以后，中性紅染料從溶酶體釋放出。膜損害水平與仍然由細胞保留的中性紅的量反向相關。在暴露于檢測試劑后，從細胞提取染料可以評估細胞膜的完整性以及經誘導的細胞毒性的程度。
在該測定中使用了Madin-Darby犬腎(MDCK)細胞。以在200微升完全培養(yǎng)基中1×104細胞/孔將細胞加入到96孔平底組織培養(yǎng)板的每個孔中。完全培養(yǎng)基是具有10％胎牛血清的Dulbecco改進的Eagle培養(yǎng)基(DMEM)的完全生長培養(yǎng)基。在37℃/5％CO2下在3-4天內將細胞孵育至融合。輕輕倒出培養(yǎng)基并吸去板孔中的培養(yǎng)基。將在完全培養(yǎng)基中最終濃度為50μg/ml的中性紅(200μl)加入到每個孔中，然后在37℃/5％CO2下孵育3小時。輕輕倒出中性紅溶液并吸去板孔中的中性紅溶液。用100μl/孔的具有Ca++和Mg++的Dulbecco磷酸緩沖鹽水(DPBS)洗滌板孔一次。輕輕倒出和吸去DPBS，然后在孔中加入100μl的檢測或對照溶液。將每種溶液加入到單行中的至少6個孔中，其中在每個板上的外側的孔僅接受DPBS作為對照。各個獨立的板被指定用于每個接觸時間點。在37℃/5％CO2下按指定的接觸時間對板進行孵育。通常試驗的時間點為15、30、60、90、120和180分鐘。在每個時間點將板從孵育器中取出，輕輕倒出和吸去(溶液)，然后用100μl/孔的DPBS洗滌1次，并將DPBS輕輕倒出和吸去。接著，加入100μl/孔的中性紅“洗滌/固定”溶液，并使其在室溫和環(huán)境條件下保持5分鐘。中性紅“洗滌/固定”溶液是1％福爾馬林、1％CaCl2(w/v)和98％蒸餾水。輕輕倒出和吸去固定液，然后加入100μl/孔的有溶解力的(溶劑)溶液。該有溶解力的溶液是1％醋酸、50％乙醇和49％蒸餾水。在室溫和環(huán)境條件下、在板振蕩器(低速)上，用該有溶解力的溶液對板提取10分鐘。其后，用微升板分光光度計在540nm處對板進行讀數(shù)。將用于每個試樣或對照的所有孔的吸光度讀數(shù)進行平均并進行結果計算，這些結果是與DPBS對照相比所保留的中性紅的百分數(shù)((試樣的平均O.D./對照的平均O.D.)×100＝對照的％)。對檢測結果作圖并用圖表表示，其中中性紅保留(對照的％)為Y軸，暴露時間(分鐘)為X軸。
實施例3用于細胞毒性研究的配方(方劑)基本上如在實施例1中所述，制備示于表2的配方(方劑)。將具有洗滌劑吐溫80的方劑29BB、51C、82B、34AA和35A與沒有用吐溫80制備的方劑30U和83U進行比較。如通過圖2的數(shù)據(jù)可以看到的，存在或不存在吐溫80洗滌劑并不顯著影響細胞毒性。沒有用Purogene制備的方劑29BB和34AA，與聚乙氧基化氫化蓖麻油、GRH-40的量也只有稍微的變化而沒有較大的影響。方劑29BB和51C的差別僅在于Purogene濃度，而在120分鐘時仍然具有基本上相同的中性紅保留，分別為79和82％。
方劑30U和82B與表2中其它方劑的差別在于它們含有甘油并且不含有NaCl。EnduraTM方劑也含有甘油。如在圖2中可以看到的，含有甘油的方劑是最具細胞毒性的。
pH是在7.19到7.75之間變化。方劑51C和35A的差別僅在于pH，其中51C的pH為7.39，而35A的pH為7.75。在120分鐘時它們各自的中性紅保留值分別是82％和45％，表明由7.75的pH值引起的顯著的細胞毒性效應。同滲質量摩爾濃度(同滲重摩)的范圍是在230-286。顆粒大小相當恒定。將所有配方(方劑)與EnduraTM進行比較。
用于實施例3的表2

除Purogene以外的所有成分的w/w％和51C(w/)相同注意 除Purogene之外的51C(w/) 29BB pH為7.75*Endura(TM)額外含有另一種非離子性滲透壓溶解質(osmolyte)并且含有聚合物以調節(jié)粘度。
EnduraTM的粒子大小顯著大于0.15微米并小于1.0微米。
實施例4用于細胞毒性研究的配方(方劑)基本上如在實施例1中所述，制備示于表3的配方(方劑)。圖3示出了表3配方的細胞毒性數(shù)據(jù)。具體地說，檢測了同滲質量摩爾濃度、吐溫80和pH的影響。分別含有聚乙烯基吡咯烷酮、PEG300和CMC的溶液48B、52A和53B各自具有163-167mOsm/kg的同滲質量摩爾濃度，其顯然是產生所觀察到的細胞毒性的原因，因為這些聚合物都被認為是非細胞毒性的。溶液44A和47A的差別僅在于吐溫80。在120分鐘時它們各自的中性紅保留值是59％和63％。溶液44A和83A的差別僅在于pH，分別為7.35和7.68。在120分鐘時它們各自的中性紅保留值是59％和64％，表明在此實驗中pH為7.68沒有影響。
對于實施例4的表3在細胞毒性學實驗中使用的配方除非另有說明，給出的量為w/w％。

實施例5用于細胞毒性研究的配方(方劑)基本上如在實施例1中所述，制備示于表4的配方(方劑)。圖4示出了表4配方的細胞毒性數(shù)據(jù)。對于表4，除非另有說明，給出的量為g/1000g。對于所有溶液細胞，其毒性是類似的。據(jù)認為同滲質量摩爾濃度差異可以說明觀察到的差異，其中較大的細胞毒性伴隨較低的同滲質量摩爾濃度。
表4.用于實施例5的配方

除非另有說明，組分是g/1000g。對于所有配方(方劑)，平均顆粒大小是0.120微米。累積的(99％)粒子大小是0.264微米。
實施例6用于細胞毒性研究的配方(方劑)CMC、聚乙烯基吡咯烷酮、以及PEG-300的影響基本上如在實施例1中所述，制備示于表5的配方(方劑)。對于表5，除非另有說明，給出的量為g/1000g。
圖5-圖7示出了表5配方(方劑)的細胞毒性數(shù)據(jù)。配方(方劑)76A-D是用CMC制備的(圖5)。配方(方劑)75B和C以及73D和E是用聚乙烯基吡咯烷酮制備的(圖6)。配方(方劑)73F、G、H、以及I是用PEG-300制備的(圖7)。除75A以外所有配方(方劑)含有額外的防腐劑WSCP。這些變化之中沒有一個顯著影響細胞毒性。
表5.配方(方劑)

CMC＝羧甲基纖維素；WSCP＝水溶性陽離子聚合物對于表5，所有配方(方劑)的平均粒子大小是0.111微米，并且對于所有配方(方劑)99％的累積是0.213微米。
實施例7細胞毒性研究的結果歸納圖2-圖7中的結果表明含有甘油的配方(方劑)30U(pH為7.19)、82B(pH為7.68)和EnduraTM(pH為7.33)都具有顯著的細胞毒性。在這些配方(方劑)中的細胞毒性也是由較低和較高的pH值引起的。同預料的一樣，這些結果更清楚地表明，pH從7.39(51C)到7.75(35A)的變化使溶液更具細胞毒性。然而，較小的pH變化是完全容許的。在51C中Purogene的存在并不增加無Purogene的等效配方(方劑)29BB和34AA的細胞毒性。具有低同滲質量摩爾濃度(163-167mOsm/kg)的配方(方劑)具有細胞毒性。然而，較小的溶液同滲質量摩爾濃度變化并不產生細胞毒性的大的變化。同樣，單獨或有聚山梨醇酯80存在條件下的GRH-40并不顯著影響細胞毒性。眼用潤滑性聚合物如CMC、聚乙烯基吡咯烷酮和PEG的存在并不對細胞毒性產生影響?？偟恼f來，這些結果證實自乳化水包油型乳狀液可以由一種或兩種表面活性劑構成，使得這些溶液比目前銷售的水包油型眼用乳狀液EnduraTM具有更小的細胞毒性，其中EnduraTM是利用現(xiàn)有技術的表面活性劑和基于粘度的乳狀液穩(wěn)定作用并經過傳統(tǒng)乳化方法所制備的。
實施例8-21額外的配方(方劑)實施例實施例8-21(表6-11)表示根據(jù)本發(fā)明制備的額外的配方(方劑)。實施例8特定舉例說明作為表面活性劑/乳化劑的Cremophor RH-60，其是通過氫化蓖麻油的乙氧基化過程制備的。實施例9舉例說明作為表面活性劑/乳化劑的Cremophor RH-40，其是通過氫化蓖麻油的乙氧基化過程制備的。實施例21舉例說明TPGS。
表6

表7

表8

表9

表10

表11

*溴莫尼定＝(5-溴-N-(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)-6-喹喔啉胺)
實施例25-28配方(方劑)穩(wěn)定性微生物生長表12示出了一些配方，用于研究它們對于典型微生物生長的影響。除非另有說明，所有濃度均為wt％。在實施例25和26中，基質是“WSCP/亞氯酸鹽”，其包括硼酸(0.6)、硼酸鈉十水合物(0.035)、NaCl(0.35)、氯化鈣二水合物(0.006)、氯化鎂六水合物(0.006)、KCl(0.14)、亞氯酸鈉(65ppm)以及WSCP，60％w/w(3ppm)。按照實施例25和26中所指定的濃度將蓖麻油、LumulseGRH-40和Kollidon 17NF(PVP)加入到WSCP/亞氯酸鹽基質中。在實施例26中，所使用的蓖麻油和Lumulse GRH-40為1/8濃度。注意，僅稀釋乳狀液而Lumulse GRH-40/蓖麻油的比率保持恒定為0.8。WSCP/亞氯酸鹽基質成分的濃度和Kollidon 17NF(PVP)的濃度保持恒定。
在實施例27和28中，使用了不同的基質溶液，其稱為“完全-C”或“CPT-C”。這種基質包括NaCl(0.55)、磷酸氫二鈉七水合物(0.12)、磷酸二氫鈉一水合物(0.01)、KCl(0.14)、?；撬?0.05)、EDTA(0.01)和PHMB(1ppm)。按照實施例27和28所指定的濃度將蓖麻油、Lumulse GRH-40和Kollidon 17 NF(PVP)加入到CPT-C基質中。對于實施例28，僅將乳狀液稀釋成1/8稀釋物(即，蓖麻油和Lumulse GRH-40)。注意，Lumulse GRH-40/蓖麻油的比率保持恒定為0.8。
表12

表14示出對表12中的配方(方劑)在時間為0時用5種不同微生物測得的6小時對數(shù)下降。這5種微生物相應于5種FDA/ISO中規(guī)定的檢測性生物，其列于下面粘質沙雷氏菌，ATCC 13880金黃色葡萄球菌，ATCC 6538銅綠假單胞菌，ATCC 9027
白色念珠菌，ATCC 10231腐皮鐮孢菌，ATCC 36031(用于隱形眼鏡護理產品的FDA上市銷售前的通告(510k)指導性文件，附錄B，1997年4月1日以及ISO/FDIS 14729眼用光學隱形眼鏡護理產品-產品的微生物學要求和檢測方法以及用于隱形眼鏡衛(wèi)生處理的養(yǎng)護(regimens for hygienic management)，2001年1月)。當隱形眼鏡消毒劑用于沖洗、清潔、消毒、貯存和再濕潤隱形眼鏡時，它們也被稱為隱形眼鏡多用途溶液。
FDA和ISO指南規(guī)定了兩種消毒效力標準，在下面的表13中對其進行說明表13

以下描述了用于確定表12中所述的配方(方劑)是否滿足單獨出臺的或與養(yǎng)護相關的消毒標準的測定。該方法涉及接種具有表13的檢測性生物的已知數(shù)目的活性細胞的檢測產品等分試樣，以及在不同時間間隔測定殘存生物。結果用來計算在各浸泡時間的對數(shù)下降。對于此處描述的配方(方劑)，浸泡時間是6小時并在6小時后進行殘存生物的測定。
通過0.22微米的滅菌過濾器將表12(實施例25-28)中的抗微生物溶液的試樣無菌濾入滅菌的高密度聚乙烯塑料瓶或塑料燒瓶中。將試樣的10ml等分試樣無菌轉移到無菌聚苯乙烯塑料試管中。將具有0.05w/v％聚山梨醇酯80(SS+TWEEN)的無菌鹽水(0.90w/v％NaCl)轉移到分開的對照管。在整個檢測期間，所有試樣和對照(樣)在20-25℃下貯存。將每個試樣和對照(樣)都接種以50μl接種物，該接種物含有約1至2×108CFU(菌落形成單位)/μl的白色念珠菌，ATCC 10231。在分開的管中對表13中的四種其它生物的每一種重復此過程。白色念珠菌，ATCC 10231和其它生物的檢測性培養(yǎng)物是用傳統(tǒng)方式制備的。短暫旋轉每個試樣和對照管以分散接種物。對于這些檢測的接觸時間間隔是6小時。
執(zhí)行需氧型板的計數(shù)方法以便量化試樣的殘存生物水平。在適當?shù)臏y定時間，從試樣管中移出0.5ml旋轉完全的等分試樣并加入到含有4.5ml Letheen的中和肉湯培養(yǎng)基(Becton，Dickinson andCompany，Sparks，Maryland)的玻璃試管中。在經預先確定、驗證的中和時間以后，利用含有4.5ml Letheen中和肉湯培養(yǎng)基的玻璃試管并通過兩次連續(xù)稀釋將這些試樣稀釋10倍。從每個稀釋管中移出0.1ml等分試樣，然后經涂抹(spread-plate)施加于含有薩布羅葡萄糖瓊脂(SAB)(Becton，Dickinson and Company，Sparks，Maryland)的瓊脂板。量化101至104CFU/mL的殘存生物水平。僅在時間＝0時利用3次連續(xù)10倍稀釋物對SS+TWEEN對照試樣進行量化，以便確定最初存在于每ml試樣(最初接種物)中的對抗(challenge)生物的實際水平。在20-25℃下將再生的瓊脂板培養(yǎng)3-5天。
對于每個可計數(shù)的瓊脂板的菌落形成單位(CFU)的數(shù)目進行計數(shù)(對于念珠菌板通常在8-80個菌落/板之間)。在每個時間間隔的殘存生物總數(shù)是在每個時間間隔通過對含有最大數(shù)目CFU的瓊脂板的連續(xù)10倍稀釋的瓊脂板進行計數(shù)來確定的。在每個時間間隔確定每個試樣的CFU/mL對數(shù)下降，具體做法是將在每個時間間隔的殘存生物總數(shù)轉化成以10為底的對數(shù)并從SS+TWEEN對照的最初接種物的以10為底的對數(shù)等效值中減去此對數(shù)。
在40℃下，在時間為0時、以及在貯存一個月和兩個月以后進行測定。結果示于表13、14和15以及圖8中?！翱偤汀北硎舅斜粰z測的微生物的對數(shù)下降的總和。對照(樣)是如上所述的完全C基質與丙二醇(0.5％)和HPMC(0.15％)的組合。
表14時間＝0

表15在40℃下，時間＝一個月

表16在40℃下，時間＝兩個月

結果圖示于圖8中。意想不到地，當在40℃下將配方(方劑)貯存一個月(表15)或兩個月(表16)之后引入時，實施例25的配方(方劑)實際上提供了微生物的更大對數(shù)下降。雖然水平較低，但實施例25(實施例26)的1/8稀釋物還顯示了貯存后增強的微生物對數(shù)下降，這表明該效應是由Lumulse GRH-40/蓖麻油乳狀液引起的而不是由配方(方劑)的其它成分引起的。然而，在任何其它配方(方劑)(實施例27-28)或對照中均未觀察到此效應。
實施例29-33在具有較低乳狀液水平的方劑中的方劑穩(wěn)定性和微生物生長為了進一步分析以上所討論的實施例25的方劑，進行了第二次研究。實施例29(表17)是和以上實施例25(表12)相同的配方(方劑)。在實施例30-32(表17)的配方(方劑)中，LumulseGRH-40與蓖麻油的比率保持恒定為0.8，但如表17所示，LumulseGRH-40與蓖麻油兩者的量通過稀釋而減少。實施例33是對照，該對照含有如上所述的完全C基質以及丙二醇(0.5％)和HPMC(0.15％)的組合。對實施例25-28進行如上所述的測定。
表17

表18時間＝0

表19在25℃下，時間＝一個月

表20在25℃下，時間＝兩個月

如可以從表17-19和圖9所看到的，意想不到地，按照實施例25或29制備的乳狀液在老化后比其它配方具有更好的穩(wěn)定性和更高的對微生物的抗性。此外，可以在實施例25和29(實施例30-32)的配方(方劑)被稀釋的情況下觀察到這種效應，其中LumulseGRH-40與蓖麻油的比率保持在0.8。在對照(實施例33)中未觀察到這種效應。該殺生物效應顯然依賴于如圖10所示的乳狀液，該圖顯示在25℃下貯存兩個月以后，作為乳狀液濃度的函數(shù)的對數(shù)下降總和線性增加。數(shù)據(jù)取自表20。此研究證實，這些配方的有用的殺生物效應是由乳狀液本身而不是由配方中的其它成分引起的。
本領域技術人員應該明白，在不偏離本發(fā)明精神的前提下可以進行多種和不同的改進。因此，應清楚地明白，本發(fā)明的各種形式僅是說明性的而不用來限制本發(fā)明的保護范圍。
權利要求
1.一種自乳化組合物，包括分散在水相中的平均尺寸小于1微米的油珠，所述油珠包括(a)基本上包含一種或兩種表面活性劑的表面活性劑成分；以及(b)一種具有極性的油成分，所述表面活性劑成分和所述油成分經過選擇，以便在沒有機械均化作用下混合時進行自乳化。
2.根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分具有疏水部分，所述疏水部分包括靠近所述水相取向的第一部分，所述第一部分大于朝向所述油珠內部取向的所述表面活性劑成分的疏水部分的第二部分。
3.根據(jù)權利要求2所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分基本上包括一種表面活性劑，其中所述表面活性劑的疏水部分的第一部分含有比所述表面活性劑的疏水部分的第二部分更多的原子。
4.根據(jù)權利要求2所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分基本上包括兩種表面活性劑，所述表面活性劑中的第一種包括第一疏水部分而所述表面活性劑中的第二種包括第二疏水部分，所述第一疏水部分具有比所述第二疏水部分更長的鏈長度。
5.根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物，進一步包括額外的表面活性劑，所述額外的表面活性劑并不干擾自乳化作用。
6.根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物，其中所述油成分包括蓖麻油或天然油。
7.根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物，其中所述油珠具有小于0.25微米的平均尺寸。
8.根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物，其中所述油珠具有小于0.15微米的平均尺寸。
9.一種制備根據(jù)權利要求1所述的自乳化組合物的方法，包括制備油相，所述油相包括一種具有極性的油和一種表面活性劑成分，所述表面活性劑成分基本上包含一種或兩種表面活性劑，其中在所述油相中的所述具有極性的油和表面活性劑成分處于液態(tài)；在允許進行自乳化作用的溫度下制備水相；以及將所述油相和所述水相混合，以便在沒有機械均化作用的條件下形成乳狀液。
10.根據(jù)權利要求9所述的制備自乳化組合物的方法，進一步包括在所述油相和部分所述水相之間形成糊劑以及將所述糊劑與所述水相的其余部分混合以形成乳狀液。
11.一種可以通過以下步驟制備的自乳化組合物制備油相，所述油相包括一種具有極性的油和一種表面活性劑成分，所述表面活性劑成分基本上包含一種或兩種表面活性劑，其中在所述油相中的所述具有極性的油和所述表面活性劑成分處于液態(tài)；在允許進行自乳化作用的溫度下制備水相；以及將所述油相和所述水相混合，以便在沒有機械均化作用的條件下形成乳狀液。
12.根據(jù)權利要求11所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分包括單一表面活性劑。
13.根據(jù)權利要求11所述的自乳化組合物，其中所述油相包括天然油或蓖麻油。
14.根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分選自具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪醇鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的酯以及至少一個具有至少約12至22個碳原子的脂肪酸鏈的化合物；具有至少一個形成自至少約1至100個環(huán)氧乙烷單位的醚、酯或酰胺以及至少一個維生素或維生素衍生物的化合物；以及包括不多于兩種所述表面活性劑的組合。
15.根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分包括一種表面活性劑，所述表面活性劑是LumulseGRH-40。
16.根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物，其中所述表面活性劑成分包括一種表面活性劑，所述表面活性劑是TGPS。
17.一種治療性組合物，包括根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物以及一種治療性藥物。
18.一種眼用組合物，包括根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物以及一種藥物，所述藥物在向眼施用時是治療性的。
19.根據(jù)權利要求17所述的治療性組合物，包括一種治療性化合物，所述治療性化合物選自環(huán)胞菌素、前列腺素、溴莫尼定、以及溴莫尼定鹽。
20.一種治療性組合物，包括根據(jù)權利要求15所述的自乳化組合物以及一種治療性藥物。
21.一種眼用組合物，包括根據(jù)權利要求15所述的自乳化組合物以及一種藥物，所述藥物在向眼施用時是治療性的。
22.根據(jù)權利要求20所述的治療性組合物，包括一種治療性化合物，所述治療性化合物選自環(huán)胞菌素、前列腺素、溴莫尼定、以及溴莫尼定鹽。
23.一種治療性組合物，包括根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物以及一種治療性藥物，其中所述具有極性的油是蓖麻油或天然油。
24.一種眼用溶液，包括根據(jù)權利要求1或11所述的自乳化組合物；以及一種亞氯酸鹽防腐劑成分。
25.根據(jù)權利要求24所述的眼用溶液，進一步包括一種陽離子抗微生物藥，所述陽離子抗微生物藥選自聚[二甲基亞氨基-ω-丁烯-1，4-二基]氯化物、α-[4-三(2-羥乙基)銨]-二氯化物(聚季銨鹽1)、聚(乙氧基(二甲基亞氨基)亞乙基二甲基亞氨基)亞乙基二氯化物(WSCP)、聚六亞甲基雙胍(PHMB)、聚氨丙基雙胍(PAPB)、苯扎鹵化銨、阿來西定鹽、阿來西定游離堿、氯己定鹽、?？颂驵ぁ⑼榛?、烷基二胺和烷基三胺、氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇)、六亞甲基雙胍及其聚合物、抗微生物多肽、以及其混合物。
26.根據(jù)權利要求24所述的眼用溶液，其中所述亞氯酸鹽防腐劑成分選自經穩(wěn)定的二氧化氯(SCD)、金屬亞氯酸鹽、以及其混合物。
27.根據(jù)權利要求24所述的眼用溶液，其是用于隱形眼鏡的多用途溶液。
28.根據(jù)權利要求24所述的眼用溶液，其中所述自乳化組合物包括Lumulse GRH-40和蓖麻油。
29.一種使隱形眼鏡去污的方法，包括將所述隱形眼鏡浸泡在根據(jù)權利要求1或11所述的組合物中。
30.根據(jù)權利要求29所述的方法，進一步包括制備所述組合物以及在將所述隱形眼鏡浸泡在所述組合物中之前將所述組合物的抗微生物活性至少提高到養(yǎng)護消毒標準。
31.根據(jù)權利要求30所述的方法，其中，在將所述隱形眼鏡浸泡在所述組合物中之前，通過存貯至少一個月來提高所述抗微生物活性。
全文摘要
本發(fā)明描述了自乳化組合物的制備，這些組合物是在沒有機械均化作用的情況下制備的。這些自乳化組合物是利用一種或兩種表面活性劑制備的。這提供了乳化成分與油成分的低重量比以及更少的化學毒性的優(yōu)點，使得比采用兩種以上乳化劑的乳狀液具有更舒適和安全的優(yōu)點。因此，所描述的自乳化組合物可理想地適用于眼科應用，包括對眼睛進行治療。本發(fā)明還描述了通過所披露的方法制備的自乳化組合物。
文檔編號A61K6/00GK1791383SQ200480013422
公開日2006年6月21日 申請日期2004年3月17日 優(yōu)先權日2003年3月18日
發(fā)明者俞致健, 斯坦利·W·胡思, 勞倫·L·克勞福德, 詹姆斯·N·庫克 申請人:眼力健有限公司