專利名稱：用于治療阿爾茨海默病的N－烷基苯基甲酰胺β分泌酶抑制劑的制作方法
相關(guān)申請(qǐng)的交叉參考本申請(qǐng)根據(jù)35U.S.C.§119(e)要求對(duì)2003年6月30日提交的臨時(shí)申請(qǐng)NO.60/483,992的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默病的特征是淀粉樣蛋白在腦中以胞外斑塊和胞內(nèi)神經(jīng)元纖維纏結(jié)的形式異常沉積。淀粉樣蛋白的積累速度是形成、聚集和從腦中排出速度的組合。一般認(rèn)為淀粉樣蛋白斑塊的主要成分是4KD淀粉樣蛋白(βA4，也稱作Aβ、β蛋白和βAP)，它是尺寸大得多的一種前體蛋白的蛋白酶解產(chǎn)物。該淀粉樣前體蛋白(APP或AβPP)具有受體樣結(jié)構(gòu)，有一個(gè)大的胞外結(jié)構(gòu)域，一個(gè)跨膜區(qū)和一個(gè)短的胞質(zhì)尾區(qū)。Aβ結(jié)構(gòu)域包括了APP的胞外和跨膜結(jié)構(gòu)域部分，因此它的釋放意味著產(chǎn)生其氨基端和羧基端的兩個(gè)不同的蛋白酶解活動(dòng)的存在。至少存在兩種從膜中釋放出APP并產(chǎn)生可溶性羧基截短形式APP的機(jī)制。從膜中釋放出APP及其片段的蛋白酶被稱作“分泌酶”。大多數(shù)APP是由推定的α-分泌酶釋放的，它在Aβ蛋白內(nèi)切割，釋放出α-APP并阻止完整的Aβ的釋放。一小部分APP是由β-分泌酶釋放的，它在靠近Aβ的氨基端處切割并產(chǎn)生含有完整的Aβ結(jié)構(gòu)域的羧基端片斷(CTF)。
因此，β-分泌酶或β-位淀粉樣前體蛋白切割酶(“BACE”)的活性導(dǎo)致APP的反常切割，產(chǎn)生Aβ和β淀粉樣蛋白斑塊在腦中的積累，這是阿爾茨海默病的特征(見R.N.Rosenberg，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1367-1368；H.Fukumoto et al，Arch.Neurol.，vol.59，Sep 2002，pp.1381-1389；J.T.Huse et al，J.Biol.Chem.，vol 277，No.18，issue of May 3，2002，pp.16278-16284；K.C.Chen and W.J.Howe，Biochem.Biophys.Res.Comm，vol.292，pp 702-708，2002)。因此，能抑制β-分泌酶或BACE的治療藥物可用于治療阿爾茨海默病。
本發(fā)明化合物可用來通過抑制β分泌酶或BACE的活性，從而防止不溶性Aβ的形成和抑制Aβ的產(chǎn)生，治療阿爾茨海默病。
發(fā)明概要本發(fā)明涉及作為β分泌酶和BACE的抑制劑的化合物，它們可用于治療與β分泌酶有關(guān)的疾病，例如阿爾茨海默病。本發(fā)明還涉及含有這些化合物的藥物組合物以及這些化合物和組合物在預(yù)防或治療與β分泌酶有關(guān)的疾病中的應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及式I化合物及其可藥用的鹽 其中R1選自(1)未被取代的或被-OR5或-S(O)2-C1-6烷基取代的C1-C6烷基，(2)氫，(3)苯基，和(4)芐基；R2選自(1)氫，(2)R4-S(O)P-，其中R4獨(dú)立地選自(a)未被取代的或被1-6個(gè)氟原子取代的C1-6烷基，(b)苯基，和(c)芐基，(3)R4-S(O)PN(R5)-，其中R5獨(dú)立地選自(a)氫，(b)未被取代的或被1-6個(gè)氟原子取代的-C1-6烷基，
(c)未被取代的或被甲基取代的-C3-6環(huán)烷基，(d)未被取代的或者被鹵素或甲氧基取代的苯基，和(e)芐基，(4)-CN，(5)-C1-6烷基-CN(6)鹵素 其中R8a和R8b獨(dú)立地選自(a)氫，(b)-CN(c)鹵素，(d)-C1-6烷基，(e)-O-R5，(f)-S-R5，(g)-CO2R5，和(h)四唑基， 其中n是1、2、3或4；R3選自 R6a、R6b和R6c獨(dú)立地選自
(1)氫，(2)鹵素(3)-OR5，(4)-SR5，和(5)-C1-6烷基；R7選自一個(gè)鍵，-CH＝CH-，-O-，-S-和-NH-；R9和R10獨(dú)立地選自(1)氫，(2)未被取代的或者被-CN或1-4個(gè)鹵原子取代的C1-6烷基，(3)-C3-6環(huán)烷基，(4)未被取代的或者被鹵素或甲氧基取代的苯基，和(5)芐基，或者R9和R10可以合起來形成一個(gè)未被取代的或者被芐基、-OR5或1-4個(gè)鹵原子取代的吡咯烷或哌啶環(huán)；m得立地是0、1或2；p得立地是0、1或2。
本發(fā)明的一項(xiàng)實(shí)施方案包括其中R1是C1-6烷基的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括其中R1是甲基的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括其中R1是乙基的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括的化合物中，R2是R4-S(O)2-NR5-，而且R4是選自(1)C1-6烷基，(2)苯基，和(3)芐基；R5選自(1)C1-6烷基，(2)苯基，和(3)芐基，和(4)氫。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括的化合物中，R3是
其中R5是甲基，R6a是H或F，R6b和R6c是氫。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括的化合物中，R3是 本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括其中R9是氫的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括其中R10是C1-6烷基的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括其中R10是異丁基的化合物。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括選自以下實(shí)施例標(biāo)題化合物及其可藥用鹽的一種化合物。
本發(fā)明化合物有至少一個(gè)不對(duì)稱中心?？梢源嬖诹硗獾牟粚?duì)稱中心，這取決于分子中各取代基的本性。具有不對(duì)稱中心的化合物形成對(duì)映體(旋光異構(gòu)體)，非對(duì)映體(構(gòu)型異構(gòu)體)或者二者均形成，這些混合物形式及純的或部分純化的化合物形式的所有可能的對(duì)映體及非對(duì)映體均包括在本發(fā)明范圍之內(nèi)。本發(fā)明意在包括這些化合物的所有各種異構(gòu)形式。
對(duì)映富集或非對(duì)映富集的化合物的獨(dú)立合成，或其色譜分離，可以如本領(lǐng)域已知地通過適當(dāng)修改這里所公開的方法來實(shí)現(xiàn)。它們的絕對(duì)立體化學(xué)結(jié)構(gòu)可以利用晶態(tài)產(chǎn)物或其衍生的晶態(tài)中間體的X-射線晶體學(xué)方法確定，如果需要，使用含已知絕對(duì)構(gòu)型的不對(duì)稱中心的試劑。
需要時(shí)可以將化合物的外消旋混合物分離，從而分離出各個(gè)對(duì)映體。這種分離可以用本領(lǐng)域熟知的方法進(jìn)行，例如將化合物的外消旋混合物與一種對(duì)映純化合物偶合，形成非對(duì)映體混合物，隨后用標(biāo)準(zhǔn)方法例如分級(jí)結(jié)晶法或色譜法，分離各個(gè)非對(duì)映異構(gòu)體。該偶合反應(yīng)常常是用對(duì)映純的酸或堿形成鹽。然后通過裂解掉加入的手性殘基將非對(duì)映體衍生物轉(zhuǎn)化成純的對(duì)映體。化合物的外消旋混合物也可以利用本領(lǐng)域熟知的色譜方法，使用手性的固定相直接分離。
或者是，化合物的任何對(duì)映體均可利用本領(lǐng)域熟知的方法，用已知構(gòu)型的旋光純的起始物或試劑通過立體選擇性合成得到。
本發(fā)明化合物用方案1中概述的方法制備。
方案I 參看方案1，N-Boc保護(hù)的氨基酸(1-A)與伯胺或伸胺在偶合劑如BOP試劑和胺堿存在下反應(yīng)，得到N-保護(hù)的氨基酰胺(1-B)。在酸性條件例如在乙酸乙酯中用HCl氣，除掉該BOC基團(tuán)。形成的氨基酸酰胺鹽(1-C)用Boc保護(hù)的苯丙胺醛和還原劑(如氰基硼氫化鈉)在甲醇中還原性胺化。產(chǎn)物(1-D)用強(qiáng)酸如HCl氣或三氟乙酸處理以除去叔丁氧羰基保護(hù)基，得到中間本二胺鹽(1-E)?；衔?-E用標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合步驟，例如利用Bop試劑和一種三烷基胺堿，與苯甲酸衍生物偶合，得到最終化合物(1)。
方案2 方案2示例說明了合成抑制劑(I)的另一種方法。用標(biāo)準(zhǔn)方法將Boc-Phe還原得到相應(yīng)的醇(2-B)。形成的醇通過用甲磺酰氯和胺堿(如三乙胺)處理而被活化，用于疊氮化物置換。通過甲磺酸酯(2-C)與過量的疊氮化鈉在極性非質(zhì)子溶劑如DMF中在高溫下反應(yīng)，形成疊氮化物。產(chǎn)物(2-D)用強(qiáng)酸如HCl氣處理以除去叔丁氧羰基保護(hù)基，得到氨基疊氮化物鹽2-E。胺2-E與苯甲酸衍生物的標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合形成2-F。用膦試劑將疊氮官能基還原，得到2-G，然后用適當(dāng)取代的溴乙酸酯和堿(例如碳酸鉀)烷基化。酯2-H隨后用堿例如氫氧化鋰皂化，得到相應(yīng)的羧酸。利用標(biāo)準(zhǔn)的酰胺偶合步驟，例如BOP試劑和一種三烷基胺堿，使化合物2-I與苯甲酸衍生物偶合，得到最終化合物I。
很多種苯甲酸可用于方案1和2，包括其中R2是磺酰胺、砜、酰胺、腈、烷基腈、鹵素、苯基和氰基環(huán)烷基的實(shí)例。方案1和2的苯甲酸的R3一般選自羧基氨基芐基，取代的烯烴，O或N-烷基環(huán)丙基，或者烷基醚、烷基硫醚或仲胺。
“基本上純”一詞意味著分離的物質(zhì)用本領(lǐng)域已知的分析技術(shù)分析的純度至少為90％，優(yōu)選95％，更優(yōu)選99％。“可藥用的鹽”是指由可藥用的無毒的堿或酸，包括無機(jī)或有機(jī)堿和無機(jī)或有機(jī)酸，制得的鹽。由無機(jī)堿衍生的鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵、亞鐵、鋰、鎂、三價(jià)錳、二價(jià)錳、鉀、鈉、鋅鹽等。特別優(yōu)選的是銨、鈣、鎂、鉀和鈉鹽。固體形式的鹽可以存在一種以上的晶體結(jié)構(gòu)，并且可以是水合物形式。由可藥用的無毒的有機(jī)堿衍的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代胺)、環(huán)形胺和堿性離子交換樹脂衍生的鹽，例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N’-二芐基乙二胺、二乙基胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、組氨酸、羧胺、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等衍生的鹽。當(dāng)本發(fā)明化合物是堿性時(shí)，可以由可藥用的無毒的酸，包括無機(jī)酸和有機(jī)酸，制備鹽。這些酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙基磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對(duì)甲苯磺酸等。特別優(yōu)選的是檸檬酸、氫溴酸、鹽酸、馬來酸、磷酸、硫酸、富馬酸和酒石酸。
本發(fā)明涉及所公開的化合物作為β-分泌酶活性或β位淀粉樣前體蛋白切割酶(BACE”)活性的抑制劑在需要這種抑制的患者或?qū)ο?如哺乳動(dòng)物)中的應(yīng)用，包括施用有效數(shù)量的該化合物。術(shù)語“β分泌酶”、“β位淀粉樣前體蛋白切割酶”和“BACE”在本說明書中可互換地使用。除人類之外，許多其它哺乳動(dòng)物可以按照本發(fā)明的方法治療。
本發(fā)明還涉及一種制造用于抑制人和動(dòng)物中β分泌酶活性的藥物或組合物的方法，包括將本發(fā)明的化合物與可藥用的載體或稀釋劑組合。
本發(fā)明化合物可用于治療、預(yù)防、緩解、控制或減小阿爾茨海默病，受淀粉樣前體蛋白(也稱作SAP)的反常切割介導(dǎo)的其它疾病，以及可以通過抑制β分泌酶治療或預(yù)防的其它病癥的危險(xiǎn)。這些病癥包括輕度認(rèn)知損傷、第21對(duì)染色體三體性綜合癥(唐氏綜合癥)、大腦淀粉樣血管病、變性病癡呆、荷蘭型伴有淀粉樣變性的遺傳性大腦出血(HCHWA-D)，克羅伊費(fèi)爾特-雅各布綜合癥，朊病毒病，肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化，進(jìn)行性核上性麻庳，頭創(chuàng)傷，中風(fēng)，唐氏綜合癥，胰腺炎，包涵體肌炎，其它外周性淀粉樣變性，糖尿病和動(dòng)脈粥樣硬化。
本發(fā)明化合物施用的對(duì)象或患者一般是需要抑制β分泌酶的男性或女性的人類，但也可以包括需要抑制β分泌酶活性或治療上述疾病的其它哺乳動(dòng)物，例如，狗、貓、小鼠、大鼠、牛、馬、羊、兔、猴、黑猩猩或其它的猿或靈長(zhǎng)目動(dòng)物。
本發(fā)明化合物可以與一種或多種其它藥物聯(lián)合使用，用于本發(fā)明化合物有效力的疾病或癥狀危險(xiǎn)的治療、預(yù)防、控制、緩解或減小其中該藥物聯(lián)合比任何一種單獨(dú)的藥物都更安全或更有效。另外，本發(fā)明化合物可以和一種或多種能治療、防止、控制、緩解或減輕本發(fā)明化合物的副作用或毒性的危險(xiǎn)的其它藥物聯(lián)合使用。這些其它藥物可以以通常采用的途徑和用量，與本發(fā)明化合物同時(shí)或順序地給藥。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括除本發(fā)明化合物外還含有一種或多種其它活性成分的那些組合物。該聯(lián)合藥物可以作為單位劑型聯(lián)合產(chǎn)物的一部分服用，或者是以套藥或者治療方案的形式實(shí)施，其中一種或多種另外的藥物作為治療方案的一部分以分離的劑型服用。
本發(fā)明化合物與其它藥物以單位劑量或套藥形式聯(lián)合的實(shí)例包括與以下藥物聯(lián)合抗阿爾茨海默病藥物，例如其它的β分泌酶抑制劑或γ分泌酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；NSAID，包括布洛芬；維生素E；抗淀粉樣蛋白抗體；CB-1受體拮抗劑或CB-1受體逆激動(dòng)劑；抗生素例如多西環(huán)素和利福平；N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑，例如美金剛；膽堿酯酶抑制劑，例如加蘭他敏、利凡斯的明、多奈哌齊和他克林；或者對(duì)于增加本發(fā)明化合物的效力、安全、方便性，或降低不良副作用或毒性的受體或酶有影響的其它藥物。以上的組合名單只是示例說明，不以任何方式構(gòu)成限制。
這里使用的“組合物”一詞打算包括含有預(yù)定數(shù)量或比例的特定成分的產(chǎn)物，以及由于該特定成分按照特定數(shù)量組合而直接或間接形成的任何產(chǎn)物。與藥物組合物有關(guān)的這一名詞意在包括一種含一種或多種活性組分及任選存在的含惰性成分的一種載體的產(chǎn)物，以及由于任何兩種或多種該組分的組合、復(fù)合或聚集而直接或間接形成的任何產(chǎn)物。一般來說，藥物組合物的制備方法是，將活性組分與液體載體或細(xì)分的固體載體或者二者一起均勻和緊密混合，隨后若有必要，將產(chǎn)物成型，制成所要的制劑。在藥物組合物中，活性目標(biāo)化合物的含量足以對(duì)疾病過程或癥狀產(chǎn)生預(yù)期的效果。
計(jì)劃口服的藥物組合物可以按照本領(lǐng)域已知的制造藥物組合物的任何方法制備，而且這些組合物可以含有選自甜味劑、風(fēng)味劑、著色劑和防腐劑的一種或多種試劑，以形成藥學(xué)上優(yōu)美可口的制劑。片劑中含有與適合制造片劑的無毒性的可藥用賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑、成粒劑和崩解劑、粘合劑和潤(rùn)滑劑。片劑可以是未包衣的，也可以用已知技術(shù)包衣以延緩在胃腸道內(nèi)的崩解和吸收，從而提供在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的持續(xù)作用。
口服使用的組合物還可以是其中活性組分與一種惰性固體稀釋劑混合的明膠硬膠囊形式，或是其中活性成分與水和油介質(zhì)混合的軟明膠膠囊形式。
水基混懸劑包含著與適合制造水基混懸劑的賦形劑混合的活性物質(zhì)。這些賦形劑包括懸浮劑和分散劑或潤(rùn)濕劑。水基混懸劑還可以含有一種或多種防腐劑、著色劑、風(fēng)味劑和甜味劑。
油基混懸劑可以通過將活性組分懸浮在植物油或礦物油中來配制。油基混懸劑可含有增稠劑?？梢约尤胩鹞秳┖惋L(fēng)味劑以得到可口的口服制劑。這些組合物可以通過加入抗氧化劑來保存。
適合通過加水制成水基混懸劑的可分散的粉劑和粒劑提供了與分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性組分。也可以存在另外的賦形劑，例如甜味劑、風(fēng)味劑和著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以是油/水乳狀液的形式，它也可以含有諸如甜味劑和風(fēng)味劑等賦形劑。
藥物組合物還可以是按照已知技術(shù)配制的無菌的水基或油基的可注射的混懸劑的形式，也可以是用于直腸給藥的栓劑形式。
本發(fā)明化合物也可以利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的吸入裝置以及吸入方式施用，或是以透皮貼劑的方式施用。
“可藥用的”意味著載體、稀釋劑或賦形劑必須與制劑的其它成分相容，而且對(duì)其接受者無害。
術(shù)語“施用”或“服用”一種化合物，應(yīng)理解為向需要治療的個(gè)體以能向個(gè)體體內(nèi)引入治療有效形式和治療有效數(shù)量的形式提供一種本發(fā)明化合物，包括但不限于口服劑型，例如片劑、膠囊劑、糖漿劑、混懸劑等；可注射的劑型，例如IV、IM或IP等；透皮劑型，包括乳膏、膠凍劑、粉劑或貼劑；口腔含化劑型；吸入粉劑、噴霧劑、混懸劑等；以及直腸栓劑。
術(shù)語“有效數(shù)量”或“治療有效量”是指所研究的化合物能引發(fā)組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人產(chǎn)生研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師所期望的生物或醫(yī)學(xué)響應(yīng)的數(shù)量。這里所說的“治療”是指治療和預(yù)防或是醫(yī)學(xué)癥狀的預(yù)防性治療，特別是對(duì)容易患有這些疾病或障礙的患者。
這里所說的“治療”是指本發(fā)明化合物的任何施用，包括(1)抑制經(jīng)受或顯示患病病理或癥狀的動(dòng)物的疾病(即，阻止病理和/或癥狀的進(jìn)一步發(fā)展)，或(2)緩解經(jīng)受或顯示患病病理或癥狀的動(dòng)物的疾病(即，逆轉(zhuǎn)該病理和/或癥狀)。術(shù)語“控制”包括阻止、治療、根除、緩解或減輕所控制的癥狀的嚴(yán)重程度。
含本發(fā)明化合物的組合物可以方便地以單位劑型形式存在，并且可以用藥學(xué)領(lǐng)域中公知的任何方法制備。術(shù)語“單位劑型”意味著單個(gè)劑量，其中所有的活性和非活性組分都結(jié)合在合適的體系中，使得患者或向患者施用該藥物者可以打開其中包含整個(gè)劑量的單個(gè)容器或包裝，而無需將來自兩個(gè)或多個(gè)容器或包裝的任何組分混合。單位劑型的典型實(shí)例是用于口服的片劑或膠囊劑，用于注射的單劑量小瓶，或用于直腸給藥的栓劑。單位劑型的這個(gè)名單不意味著以任何方式構(gòu)成限制，而只代表單位劑型藥學(xué)工藝中的典型例子。
含本發(fā)明化合物的組合物可以方便地制成套藥形式，其中提供兩種或多種組分，它們可以是活性或非活性成分、載體、稀釋劑等，并配有供患者或向患者施藥者制備實(shí)際劑型的使用說明。這種套藥可以提供其中含有的所有必需的材料和組分，也可以包含必須由患者或向患者施藥者獨(dú)立得到的材料或組分的使用或制備說明。
在治療、預(yù)防、控制、緩解或減輕阿爾茨海默病或本發(fā)明化合物化合物適應(yīng)的其它疾病的危險(xiǎn)時(shí)，通常在本發(fā)明化合物以每kg動(dòng)物體重約0.1-100mg的日劑量服用時(shí)得到令人滿意的效果，優(yōu)選以單次日劑量或每日2-6次分劑量給藥，或以緩釋形式給藥?？?cè)談┝繛槊縦g體重約1.0-2000mg，優(yōu)選約0.1-20mg。在70kg的成年人的情形，總?cè)談┝恳话銥榧s7mg至約1400mg。這一用藥方案可以調(diào)整以提供最佳的治療效果?；衔锟梢园疵刻?-4次、優(yōu)選1次或2次的方案服用。
本發(fā)明化合物或其可藥用鹽的具體給藥劑量包括1mg、5mg、10mg、30mg、80mg、100mg、150mg、300mg和500mg。本發(fā)明的藥物組合物可以是其中含約0.5-1000mg，更優(yōu)選含約0.5-500mg，或者0.5-250mg，或1-100mg活性組分的制劑形式。
但是應(yīng)該理解，對(duì)于任何特定的患者，具體的劑量水平和用藥頻率可以變化，這將取決于許多因素，包括所用的具體化合物的活性，該化合物的代謝穩(wěn)定性和作用時(shí)間長(zhǎng)短，年齡，體重，一般健康狀況，性別，飲食習(xí)慣，給藥方式和時(shí)間，排泄速度，藥物聯(lián)合，具體病癥的嚴(yán)重程度和進(jìn)行治療的宿主。
本發(fā)明化合物作為β分泌酶活性抑制劑的適用性可以用本領(lǐng)域已知的方法證實(shí)。酶抑制作用測(cè)定如下FRET試驗(yàn)采用均相終點(diǎn)熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)試驗(yàn)，底物([TAMRA-5-CO-EEISEVNLDAEF-NHQSY]QFRET)用BACE 1切割以便從TAMRA中釋放出熒光。底物的Km由于溶解度的限制而來測(cè)定。典型的反應(yīng)在100μl總反應(yīng)體積中含有約30nM酶，1.25μM底物和緩沖劑(50mM NaOAc，pH4.5，0.1mg/mL BSA，0.2％CHAPS，15mM EDTA和1mM去鐵銨)。反應(yīng)進(jìn)行30分，使用530nm的激發(fā)波長(zhǎng)和580nm的發(fā)射波長(zhǎng)在96孔板LJL Analyst AD中測(cè)定TAMRA片斷的釋放。在這些條件下，被BACE 1加工的底物少于10％。這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)體系中產(chǎn)生的可溶性(排除了跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)突出端)人蛋白。為測(cè)定化合物的抑制效力，將抑制劑在DMSO中的溶液(配制了四種濃度的抑制劑1mM、100μM、10μM、1μM)于反應(yīng)混合物中(最終DMSO濃度為0.8％)培養(yǎng)。所有的實(shí)驗(yàn)均在室溫下利用上述的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為確定化合物的IC50，使用部分性公式Vo/Vi＝1+[I]/[IC50]來預(yù)測(cè)化合物的抑制效力。解離常數(shù)的重復(fù)誤差一般小于2倍。
HPLC分析使用被BACE 1切割釋放出附著香豆素的N-端片斷的底物(香豆素-CO-REVNFEVEFR)進(jìn)行均相終點(diǎn)HPLC分析。底物的KM大于100μM，由于底物溶解度的限制無法確定。典型的反應(yīng)包括約2nM酶，1.0μM底物，和緩沖劑(50mM NaoAc，pH 4.5，0.1mg/ml BSA，0.2％CHAPS，15mM EDTA和1mM去鐵銨)，總反應(yīng)體積為100μl。反應(yīng)進(jìn)行30分鐘，加入25μl的1M Tris-HCl，pH8.0停止反應(yīng)。將形成的反應(yīng)混合物裝在HPLC上，用5分鐘線性梯度使產(chǎn)物與底物分離。在這些條件下，被BACE 1加工的底物小于10％。在這些研究中使用的酶是在桿狀病毒表達(dá)體系中產(chǎn)生的可溶性(排除跨膜結(jié)構(gòu)域和胞質(zhì)突出端)人蛋白。為測(cè)定化合物的抑制效力，將抑制劑在DMSO中的溶液(配制12個(gè)濃度的抑制劑，其濃度范圍取決于FRET所預(yù)測(cè)的效力)在反應(yīng)混合物中培養(yǎng)(最終DMSO濃度為10％)。所有實(shí)驗(yàn)均在室溫下采用上述的標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件進(jìn)行。為確定化合物的IC50，用四參數(shù)方程進(jìn)行曲線擬合。解離常數(shù)的重復(fù)誤差一般小于2倍。
具體地說，以下實(shí)施例的化合物在上述試驗(yàn)中具有抑制β分泌酶的活性，其IC50一般為約1nM至1μM。這樣的結(jié)果是化合物作為β分泌酶活性的抑制劑使用的內(nèi)在活性的指示。
在以下的方案和實(shí)施例中示例說明了制備本發(fā)明化合物的幾種方法。起始物按照本領(lǐng)域已知的或這里示例說明的步驟制備。提供以下實(shí)施例以便更全面地了解本發(fā)明。這些實(shí)施例只供示例說明，不應(yīng)該認(rèn)為是以任何方式限制本發(fā)明。
中間體I 步驟A向含有2.0g(10.0mmol)(S)-N-Boc-氨基丁酸在50ml DCM中的溶液中加入730mg(10.0mmol)異丁胺、4.42(10.0mmol)BOP試劑和4.2ml(24.0mmol)Hunig堿。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘，然后用10％檸檬酸(10ml)、水(10ml)、飽和NaHCO3(10ml)和鹽水(10ml)萃取。有機(jī)相用MgSO4干燥，濃縮后色譜分離(1∶1 EtOAc/己烷)，得到2.4g所要的酰胺。
1H NMRδ6.11(bs，1H)，4.96(bs，1H)，3.97(m，1H)，3.O8(m，2H)，1.88(m，1H)，1.80(m，1H)，1.66(m，1H)，1.45(s，9H)，0.95(m，9H).LCMS(M+H)＝259.27步驟B將含有溶在40ml EtOAc和4ml MeOH中的1.58g(6.10mmol)Boc酰胺A的0℃溶液用HCl氣飽和10分鐘。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，然后濃縮成半固態(tài)。該殘余物用50ml乙醚研制，得到1.10g胺HCl鹽，為極具吸濕性的固體。
1H NMR(CD3OD)δ3.78(t，J＝7.8Hz，1H)，3.18(m，2H)，1.85(m，3H)，1.01(t，J＝7.8Hz，3H)，0.87(d，6H).LCMS(M+H)＝159.31步驟C向含200mg(0.76mmol)(S)-N-Boc-Phe-CHO的5ml甲醇溶液中加入746mg(3.81mmol，5當(dāng)量)胺B和47.0mg(0.76mmol)NaBH3CN。將形成的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)。除去溶劑，殘余物溶在25ml DCM中，用NaHCO3(10ml)和鹽水(10ml)洗。蒸發(fā)溶劑，色譜分離(EtOAc)得到245mg所要的產(chǎn)物，將其直接用于下一反應(yīng)。1H NMR(CDCl3)δ7.4-7.1(m，5H)，4.84(d，J＝2.4Hz，1H)，4.11(bs，1H)，3.60(bs，1H)，3.11(m，4H)，2.82(m，4H)，1.81(m，4H)，1.43(s，9H)，0.99(t，J＝7.8Hz，3H)，0.82(d，J＝7.7Hz，6H).
步驟D將含有溶在25ml EtOAc中的得自步驟C的201mg(0.5mmol)Boc胺的0℃溶液，用HCl氣飽和5分鐘。將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，濃縮，用乙醚研制，得到185mg白色固體的化合物I。
1H NMR(CD3OD)δ7.44-7.15(m，5H)，3.83(m，1H)，3.33(m，1H)，3.18(m，1H)，3.06(m，4H)，2.00(m，2H)，1.77(m，1H)，1.01(t，J＝7.8Hz，3H)，0.88(d，J＝7.8Hz，6H).
中間體II 與中間體I相似地制備，但是在步驟A中用(S)-N-Boc-氨基戊酸作為胺。
1H NMR(CD3OD)δ8.55(bt，1H)，7.41-7.26(m，5H)，3.92(t，J＝6.8Hz，2H)，3.77(dd，2H)，3.30(d，J＝1.7Hz，1H)，3.08(dd，J＝13.5，1.7Hz，1H)，3.03-2.95(m，4H)，1.88(m，2H)，1.77(m，1H)，1.41(m，2H)，0.94(t，J＝7.4Hz，3H)，0.90(d，J＝6.8Hz，6H)中間體III 與中間體I相類似地制備，但是用(S)-N-Boc-甲硫氨酸砜作為步驟A中的銨。
1H NMR(CD3OD)δ8.42(bs，1H)，7.44-7.25(m，5H)，4.02(m，1H)，3.83(m，1H)，3.38-3.05(m，7H)，3.00(s，3H)，2.39(bd，2H)，1.77(m，1H)，0.92(d，J＝6.7Hz，6H).
中間體IV
與中間體I相似地制備，但是用(S)-N-Boc-丙氨酸作為步驟A中的胺。
1H NMR(CD3OD)δ8.41(bt，1H)，7.41-7.26(m，5H)，4.02(m，1H)，3.81(m，2H)，3.40-3.00(m，5H)1.80(m，2H)，1.61(d，J＝6.7Hz，3H)，0.97(d，J＝6.8Hz，6H)中間體V 與中間體I相似地制備，但是用(S)-N-Boc-高絲氨酸作為步驟A中的胺。
1HNMR(CD3OD)δ7.37-7.27(m，5H)，4.13(m，1H)，3.99(m，1H)，3.86-3.75(m，2H)，3.38-3.25(m，2H)，3.03(m，2H)，2.89(m 1H)，2.76(d，J＝7.14Hz，2H)，2.14(m，1H)，1.99(m，1H)，1.01(d，J＝6.68Hz，6H).LCMS(M+H)＝308.1實(shí)施例1
步驟A在0℃下向5-氨基間苯二甲酸二甲酯(5.0g，23.90mmol)在100ml CH2Cl2/吡啶(3∶1)中的攪動(dòng)的漿體加入甲磺酰氯(1.85ml，23.90mmol)。將形成的混合物在室溫下攪拌4小時(shí)。減壓除去溶劑，加入乙酸乙酯(100ml)，結(jié)果形成沉淀。過濾收集產(chǎn)物，得到5.14g磺酰胺，為白色固體。
1H NMR(DMSO d6)δ8.15(s，1H)，8.02(s，2H)，3.89(s，6H)，3.02(s，3H).LCMS[M-OCH3]+＝256.16步驟B向氫化鈉(0.153g，3.83mmol，60％油分散體)在10ml DMF中的溶液加入步驟A中的磺酰胺(1.0g，3.48mmol)，隨后加入甲基碘(0.43ml，6.97mmol)。1小時(shí)后用水(100ml)猝滅反應(yīng)，用EtOAc(3×50ml)萃取。有機(jī)萃取液用MgSO4干燥并蒸發(fā)，得到1.03g N-甲基磺酰胺。
1H NMR(DMSO d6)δ8.40(s，1H)，8.19(s，2H)，3.91(s，6H)，3.34(s，3H)，3.01(s，3H).LCMS[M+H]＝302.15步驟C將步驟B的二酯(1.03g，3.38mmol)溶在50ml THF∶MeOH(1∶1)中，冷卻至0℃。加入1N NaOH(3.38ml，3.38mmol)，將反應(yīng)混合物在8小時(shí)內(nèi)溫?zé)嶂潦覝亍Ｓ?N HCl(30ml)將溶液酸化，用EtOAc(3×50ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水洗，用MgSO4干燥，過濾并減壓濃縮。在硅膠上純化(含1％，HOAc的5％MeOH/CHCl3)，得到795mg(82％)一元酸。
1H NMR(DMSO d6)δ8.30(s，1H)，8.10(s，2H)，3.84(s，3H)，3.27(s，3H)，2.94(s，3H).LCMS(M+H)＝288.16步驟D將含有133mg(0.46mmol)步驟C的一元酸在5ml CH2Cl2、BOP試劑(0.235g，0.55mmol)、(R)-(+)-4-氟甲基芐胺(76mg，0.55mmol)和二異丙基乙胺(0.24ml，1.39mmol)中的溶液于室溫下攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑并在硅膠上用柱色譜法分離(90％乙酸乙酯/己烷)，得到71mg芐基酰胺。LCMS(M+H)＝409.27。
步驟E向179mg(0.438mmol)步驟D的芐基酰胺在10ml THF∶MeOH(1∶1)中的溶液加入2N NaOH(0.66ml，1.32mmol)。將該溶液加熱至50℃1小時(shí)。冷卻后加入1N HCl(20ml)將溶液酸化，用EtOAc(3×30ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，過濾減壓濃縮，得到173g所要的羧酸。
1H NMR(CDCl3)δ8.22(t，1H)，8.11(m，1H)，8.06(m，1H)，7.34(m，5H)，6.47(d，J＝7.1Hz，1H)，5.33(m，1H)，3.37(s，3H)，2.87(s，3H)，1.64(d，J＝7.0Hz，3H).LCMS(M+H)＝395.2步驟F向在5ml DCM中含39.5mg(0.10mmol)步驟E的羧酸的溶液加入中間體胺二鹽酸鹽IV(35.7mg，0.10mmol)、44.2mg(0.10mmol)BOP試劑和0.076ml(0.44mmol)二異丙基乙基胺。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，在后用2×1ml 1N HCl、2×1ml水和1ml鹽水萃取。有機(jī)相用MgSO4干燥，進(jìn)行反相色譜分離，得到57.7mg所要的產(chǎn)物，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ9.03(d，J＝7.69Hz，1H)，8.90(bs，1H)，8.61(d，J＝8.42Hz，1H)，8.45(m，1H)，8.23(s，1H)，8.03(s，1H)，7.92(s，1H)，7.44(m，2H)，7.29-7.14(m，7H)，5.19(m，1H)，4.51(bs，1H)，3.86(m，1H)，3.30(s，3H)，3.10(bs，1H)，3.00(s，3H)，2.99-2.87(m，4H)，1.68(m，1H)，1.50(d，J＝7.15Hz，3H)，1.40(d，J＝6.77Hz，3H).LCMS(M+H)＝654.28.
實(shí)施例2 步驟A向在100ml甲醇中的3-氨基-5-硝基苯甲酸(3.60g，19.78mmol)加入亞硫酰二氯(2.59g，21.76mmol)。將該溶液在65℃加熱12小時(shí)。減壓濃縮，得到4.57g甲酯鹽酸鹽。
1H NMR(CD3OD)δ8.62(s，1H)，8.28(s，1H)，8.19(s，1H)，3.99(s，3H).
步驟B向3.53g(18.0mmol)步驟A中的氨基酯在100ml CH2Cl2/吡啶(3∶1)中的溶液加入甲磺酰氯(2.07g，18.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，隨后蒸發(fā)溶劑。將膠質(zhì)殘余物置于EtOAc(100ml)中，用1N HCl(100ml)酸化，用EtOAc(3×100ml)萃取)。合并的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，過濾和減壓濃縮，得到3.97g磺酰胺，為灰白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ8.46(s，1H)，8.30(s，1H)，8.18(s，1H)，3.97(s，3H)，3.09(s，3H).
步驟C將氫化鈉(0.26g，6.55mmol，60％油分散體)懸浮在10mlDMF中，向其中依次加入在10ml DMF中的1.5g(5.45mmol)步驟B的磺酰胺和0.93g(6.55ml)甲基磺。將該溶液于室溫下攪拌3小時(shí)。用水(250ml)猝滅反應(yīng)，用EtOAc(3×200ml)萃取，用MgSO4干燥，過濾并減壓濃縮。用硅膠色譜法純化，得到1.43g N-甲基磺酰胺。LCMS(M-H2O)＝272.2。
步驟D將步驟C中的硝基磺酰胺(2.7g，mmol)和0.15g 10％Pd/C在50ml乙醇(含2ml HOAc)中的溶液在室溫和氫氣氛下攪拌12小時(shí)。將混合物經(jīng)硅藻土墊過濾，濃縮，在硅膠上純化(100％EtOAc)，得到2.05g所要的苯胺。
1H NMR(CD3OD)δ7.29(s，1H)，7.26(s，1H)，6.95(s，1H)，3.87(s，3H)，3.27(sm 3H)，2.89(s，3H).LCMS(M+H)＝258.2步驟E將含有0.32g(1.3mmol)步驟D的苯胺、0.33g(2.7mmol)1-溴-2-丁炔和0.35g(2.5mmol)K2CO3的乙腈(12.5ml)溶液加熱回流4小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，用60ml水稀釋。該混合物用EtOAc(3×60ml)萃取。合并的有機(jī)物用鹽水(60ml)洗，然后干燥(MgSO4)。減壓除去溶劑，用硅膠色譜法純化(20％-50％EtOAc∶Hex)，得到160.0mg炔基苯胺。LCMS(M+H)＝311.2。
步驟F將含有83mg(0.27mmol)步驟E的炔基苯胺的3ml MeOH溶液用催化數(shù)量的Lindlar催化劑處理，在室溫于氫氣氛下攪拌10分鐘。反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠塞過濾，減壓除去溶劑。用反相HPLC純化，得到38mg Z-烯基苯胺。LCMS(M+H)＝313.2。
步驟G將含有38mg(0.12mmol)步驟F的Z-烯基苯胺的2.5mlEtOAc溶液在0℃用58mg(1.3mmol)新鮮制備的重氮甲烷和催化數(shù)量的乙酸鈀處理，并在0℃攪拌15分鐘。反應(yīng)混合物經(jīng)硅膠塞過濾。蒸發(fā)溶劑，得到34.0mg甲基環(huán)丙基甲基苯胺。LCMS(M+H)＝327.2。
步驟H向在5ml THF∶MeOH(1∶1)中的34mg(0.10mmol)步驟G的甲基環(huán)丙基甲基苯胺加入2N NaOH(0.15ml，0.30mmol)。將溶液加熱至50℃1小時(shí)。冷卻后用1N HCl(20ml)將溶液酸化，用EtOAc(3×30ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，過濾，減壓濃縮，得到0.020g所要的羧酸。LCMS(M+H)＝313.2。
步驟I將含有31.3mg(0.10mmol)步驟H的羧酸、37.6mg(0.1mmol)中間體二胺II、44.4mg(0.1mmol)BOP試劑和0.076ml(0.44mmol)Hunig堿的5ml DCM溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘余物用反相色譜法純化，得到35mg標(biāo)題化合物，為白色固體。
1H NMR(CD3OD)δ7.32-6.98(m，8H)，4.59(m，1H)，4.14-4.07(m，1H)，3.84(m 1H)，3.36(s，3H)，3.33(m，2H)，3.31(s，3H)，3.24-3.07(m，2H)，3.01(m，2H)，2.92(m，3H)，2.03(m，2H)，1.87-1.63(m，4H)，1.25(m，1H)，1.07(m，2H)，0.97(m，3H)，0.92(d，J＝6.6Hz，6H)，0.83-0.76(m，1H).LCMS(M+H)＝600.32實(shí)施例3 步驟A在0℃下向3-硝基苯甲酸酯(35.3g，195mmol)的三氟甲磺酸(100ml)溶液分10批加入NIS(43.8g，195mmol)。撤除冰浴并攪拌48小時(shí)。該反應(yīng)通常完成50％。這時(shí)可再加入NIS，或冷卻至0℃并通過小心地滴加水猝滅反應(yīng)。該混合物用EtOAc(250ml)萃取3次，合并的萃取液用10％NaHSO3溶液洗，然后用水洗。有機(jī)層用NaSO4干燥，濃縮，在硅膠上純化(10％EtOAc/已烷)，得到24.1g。
步驟B將氯化錫(88.6g，392mmol)在乙醇(50ml)中回流，逐滴加入步驟A中的硝基苯甲酸酯(24.1g，78.4mmol)在1∶1的THF∶EtOH(100ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物回流30分鐘，然后冷卻至0℃。用Na2CO3水溶液將形成的溶液堿化至pH8-9。水層用EtOAc(700ml)萃取3次，合并的萃取液用飽和NaHCO3，然后用鹽水洗。有機(jī)層用Na2SO4干燥并濃縮，得到21.7g粗制的苯胺，使用前不再純化。
步驟C在0℃向步驟B的苯胺(21.7，78.3mmol)在3∶1 CH2Cl2∶吡啶(75ml)中的溶液加入甲磺酰氯(6.36ml，82.2mmol)。15分鐘后除去冰溶，將溶液在室溫下攪拌過液。反應(yīng)混合物用1N HCl萃取幾次。將有機(jī)相干燥，濃縮，色譜分離(1∶1 EtOAc∶己烷)，得到25.2g所要的橫酰胺，為白色固體。
步驟D將步驟C中的磺酰胺(23.6g，66.5mmol)在0℃于DMF(75ml)中用60％NaH(2.92g，73.1mmol)處理。將溶液攪拌30分鐘，然后加入MeI(4.55ml，73.1mmol)。撤除冰浴，將溶液在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。用NH4Cl飽和溶液猝滅反應(yīng)，用EtOAc(150ml)萃取3次。合并的有機(jī)層用水(5×50ml)洗，干燥，濃縮得到25.3g所要的甲基化苯胺，使用前不進(jìn)一步純化。
步驟E向PCC(28g，130mmol)的CH2Cl2(225ml)溶液加入反-2-甲基環(huán)丙烷甲醇(7.0g，81mmol)。該溶液變黑，在室溫下攪拌3小時(shí)。用乙醚(250ml)稀釋反應(yīng)混合物并且傾析之。將溶液經(jīng)4英寸的Florisil柱過濾，經(jīng)Vigreux柱蒸餾除去溶劑，得到10g所要的醛。
步驟F向pph3(12.4g，47.5mmol)在CH2Cl2(100ml)中的0℃溶液加入CBr4(7.88g，23.7mmol)。將反應(yīng)混合物攪拌10分鐘，然后用步驟E的甲醛(1.0g，12mmol)處理。將該溶液于0℃攪拌30分鐘，室溫下攪拌1小時(shí)。加入己烷，濾出固體，將濾液濃縮，得到4.4g二溴化物。
步驟G將步驟F的二溴化物(15.4g，64.1mmol)在60ml環(huán)己烷中于-78℃下用2.0M正丁基鋰/環(huán)己烷(64.1ml，128mmol)處理。形成的反應(yīng)混合物在-78℃攪拌1小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝兀谑覝叵聰嚢?小時(shí)。用水猝滅反應(yīng)，用環(huán)己烷(3×25ml)萃取。產(chǎn)物用蒸餾法純化(bP＝69-72℃)。
步驟H在一只100ml的3口園底燒瓶中裝入InCl3(0.829g，10.4mmol)，用熱風(fēng)器真空干燥2分鐘。在氮?dú)庀录尤隩HF(16ml)，將燒瓶浸入-78℃冰溶中。然后逐滴加入DIBAL-H(12.4mL，1M已烷溶液)，形成的溶液在-78℃攪拌30分鐘。此后依次加入步驟G的乙炔(10.4mmol)和1.0M Et3B(1.6ml，1M已烷溶液)。在-78℃攪拌反應(yīng)混合物2.5小時(shí)，然后溫?zé)嶂潦覝亍Ｒ来渭尤隓MI(12ml)和步驟D的芳基碘(1.47g，4.0mmol)及鈀三呋喃基膦絡(luò)合物[由Pd2(DBA)3·CHCl3(20mg)和三呋喃基膦(28mg)在THF(6ml)中制備]。將形成的反應(yīng)混合物在60℃加熱2小時(shí)，用水猝滅反應(yīng)，用乙醚(3×50ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取液干燥，濃縮，產(chǎn)物在手性O(shè)J柱(60∶40己烷w/0.1％TFA∶EtOH)上純化。收集頭一個(gè)峰，得到276mg所要的非對(duì)映體。
步驟I向276mg(0.853mmol)步驟H的酯在10ml THF∶MeOH∶水(3∶1∶1)中的溶液加入2N NaOH(0.64ml，1.28mmol)。將該溶液于室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮并用2N HCl(10ml)酸化，用CHCl3(3×20ml)萃取。合并的有機(jī)萃取液用MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到253mg所要的羧酸。LCMS(M+H)＝310.12。
步驟J將含有8.0mg(0.026mmol)步驟I的羧酸、10.6mg(0.031mmol)中間體二胺IV，11.4mg(0.026mmol)BOP試劑和0.026ml(0.11mmol)Hunig堿的3ml DCM溶液于室溫下攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘余物用反相色譜法純化，得到17.6mg標(biāo)題化合物，為白色固體。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(bd，H)，7.62-7.57(m，3H)，7.33-7.22(m，4H)，6.74(s，1H)，6.21(d，1H)，5.15(dt，1H)，4.66(m，1H)，3.96(bd，1H)，3.48-3.39(m，4H)，3.09-2.95(m，5H)，2.86(s，1H)，1.56-1.44(m，5H)，1.(m，2H)，1.12-1.11(d，3H)，0.92-0.84(m，7H)，0.66-0.62(m，2H).LCMS(M+H)＝569.2以下化合物按照與上述實(shí)施例標(biāo)題化合物相似的方式用合適的起始物和試劑制備。




本發(fā)明已參照一些具體的實(shí)施方案作了描述和說明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以對(duì)步驟和方案作出各式各樣的適應(yīng)性改動(dòng)、變化、修正、替代、刪除或添加。因此，認(rèn)定本發(fā)明是被后面的權(quán)利要求的范圍限定，而且這些權(quán)利要求要在合理的廣義上理解。
權(quán)利要求
1.一種式I化合物及其可藥用的鹽 其中R1選自(1)未被取代的或被-OR5或-S(O)2-C1-6烷基取代的C1-C6烷基，(2)氫，(3)苯基，和(4)芐基；R2選自(1)氫，(2)R4-S(O)P-，其中R4獨(dú)立地選自(a)未被取代的或被1-6個(gè)氟原子取代的C1-6烷基，(b)苯基，和(c)芐基，(3)R4-S(O)PN(R5)-，其中R5獨(dú)立地選自(a)氫，(b)未被取代的或被1-6個(gè)氟原子取代的-C1-6烷基，(c)未被取代的或被甲基取代的-C3-6環(huán)烷基，(d)未被取代的或者被鹵素或甲氧基取代的苯基，和(e)芐基，(4)-CN，(5)-C1-6烷基-CN(6)鹵素(7) 其中R8a和R8b獨(dú)立地選自(a)氫，(b)-CN(c)鹵素，(d)-C1-6烷基，(e)-O-R5，(f)-S-R5，(g)-CO2R5，和(h)四唑基，(8) 其中n是1、2、3或4；R3選自 R6a、R6b和R6c獨(dú)立地選自(1)氫，(2)鹵素(3)-OR5，(4)-SR5，和(5)-C1-6烷基；R7選自一個(gè)鍵，-CH＝CH-，-O-，-S-和-NH-；R9和R10獨(dú)立地選自(1)氫，(2)未被取代的或者被-CN或1-4個(gè)鹵原子取代的C1-6烷基，(3)-C3-6環(huán)烷基，(4)未被取代的或者被鹵素或甲氧基取代的苯基，和(5)芐基，或者R9和R10可以合起來形成一個(gè)未被取代的或者被芐基、-OR5或1-4個(gè)鹵原子取代的吡咯烷或哌啶環(huán)；m得立地是0、1或2；p得立地是0、1或2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是C1-6烷基。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是甲基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是乙基。
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R2是R4-S(O)2-NR5-，而且其中R4選自(4)C1-6烷基(5)苯基，和(6)芐基；R5選自(5)C1-6烷基(6)苯基；(7)芐基，和(8)氫。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是 而且其中R5是甲基，R6a是H或F，R6b和R6c是氫。
7.權(quán)利要求1的化合物，其中R3是
8.權(quán)利要求1的化合物，其中R9是氫。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中R10是C1-6烷基。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中R10是異丁基。
11.一種化合物，該化合物選自 以及它們的可藥用的鹽。
12.一種藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1化合物和一種可藥用的載體。
13.一種抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)β分泌酶活性的方法，包括向有需要的哺乳動(dòng)物施用有效數(shù)量的權(quán)利要求1化合物或其可藥用的鹽。
14.一種治療患者中的阿爾茨海默病的方法，包括向該患者施用治療有效量的權(quán)利要求1化合物或其可藥用的鹽。
15.一種防止、控制、緩解或減小患者的阿爾茨海默病危險(xiǎn)的方法，包括向該患者施用治療有效量的權(quán)利要求1化合物或其可藥用的鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及作為β分泌酶抑制劑并可用于治療或預(yù)防與β分泌酶有關(guān)的疾病(例如阿爾茨海默病)的化合物。本發(fā)明還涉及含有這些化合物的藥物組合物以及這些化合物和組合物在治療與β分泌酶有關(guān)的這些疾病中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/275GK1812963SQ200480018501
公開日2006年8月2日 申請(qǐng)日期2004年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月30日
發(fā)明者C·A·科布恩, S·J·斯塔徹, J·P·瓦卡 申請(qǐng)人:麥克公司