專利名稱：治療性脂質體的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及脂質體，該脂質體能夠矯正動物中的一種或多種實體的失調。
背景技術：
許多疾病和病況是由動物中的一種或多種實體的失調引起的，或導致動物中的一種或多種實體的失調。例如，高鈣血癥是常見的臨床代謝問題。其可作為很多障礙的表現(xiàn)而出現(xiàn)，所述障礙包括甲狀旁腺功能亢進癥、佩吉特病、維生素A和維生素D毒性、結核病、結節(jié)病，惡性腫瘤例如乳腺癌、小細胞肺癌、鱗狀細胞癌、多發(fā)性骨髓瘤和其它疾病。
高鈣血癥在10％-20％的患癌癥的人中出現(xiàn)，使其成為醫(yī)生面對的最常見醫(yī)學處理問題之一。此外，高鈣血癥是最常見的危及生命的代謝障礙，其與惡性腫瘤相關。治療與惡性腫瘤有關的急性高鈣血癥的最有效療法是除去或治療潛在的癌癥。在其完成以前，或如果其沒有被完成，抗高鈣血癥藥的使用可能是必需的。治療急性高鈣血癥的療法應該謹慎地選擇，對特定患者的目的是通過減少血清鈣濃度防止急性高鈣血癥的后果并防止抗高鈣血癥藥物治療的不良經歷。二膦酸鹽、降鈣素、呋塞米、硝酸鎵、糖皮質激素類，生理鹽水和普卡霉素已經用于治療惡性腫瘤的處理并取得一些成功，并在急性高鈣血癥的治療方面提供給臨床醫(yī)生一定范圍的治療選擇。然而，這些選擇都受限制。
治療高鈣血癥的一種方法包括與靜脈內生理鹽水(0.9％NaCl)水合作用，作為治療急性高鈣血癥的第一步。因為大多數(shù)患有急性高鈣血癥的患者是體積縮小的，所以給藥0.9％的NaCl是很重要的，因為其除了增加腎臟的鈣清除率之外，還擴展了細胞內體積。0.9％NaCl的最佳給藥速率由高鈣血癥的嚴重性、體積縮小的程度、患者耐受流體的能力以及患者的全部臨床狀態(tài)來決定。促進水合作用和利尿的0.9％NaCl的通常輸注速率是200-300mL/hr。
呋塞米，一種高上限(high-ceiling)的利尿劑，可以用于治療高鈣血癥，增加鈣排泄。呋塞米在治療急性高鈣血癥方面是重要的，因為它抑制腎的鈣重吸收而且保護不發(fā)生生理給予鹽水引起的體積過載。然而，呋塞米療法也有局限。在缺乏足夠的體積擴張時，呋塞米治療可以引起腎小球過濾率和鈣清除率的減小。因此，應僅在適當?shù)乃献饔煤蟛攀┯眠@種治療?？梢越o予每1-4小時至多100mg的靜脈內劑量。
NaCl 0.9％和呋塞米的方案使血清鈣濃度適度地降低。臨床試驗建議，生理鹽水和呋塞米的聯(lián)用在最初48小時內通常降低鈣濃度僅0.20-0.30mmol。因此，通過僅給藥NaCl 0.9％和呋塞米實現(xiàn)的水合和利尿的有效性，對于輕度至中度高鈣血癥的處理來說可能是足夠的，對重度高鈣血癥來說通常是不足夠的。在重度高鈣血癥的患者中，其他抗高鈣血癥藥的使用可能是有保證的。
鮭降鈣素主要抑制破骨細胞的骨吸收，并增加鈣的腎排泄?？焖倨鹱饔煤玩?zhèn)痛的性質有助于降鈣素在治療急性高鈣血癥方面的成功。通常，血清鈣濃度在幾個小時內降低了1-3mg/dL。在降鈣素給藥后24小時內通常達到最大的功效。
很多臨床試驗已證明與降鈣素有關的快速減敏。臨床研究也證明，降鈣素有短暫的作用持續(xù)時間，僅持續(xù)24小時。盡管有快速減敏和短暫的作用持續(xù)時間的報道，降鈣素是早期治療重度高鈣血癥的重要藥物。推薦的治療急性高鈣血癥的降鈣素的皮下或肌肉內起始劑量是每12小時給藥4lU/kg。降鈣素的重要副作用是面紅、胃腸紊亂和皮疹，其使降鈣素不受動物歡迎且導致差的患者順從性。
二膦酸鹽對破骨細胞有毒性，抑制破骨細胞前體，因此減少了破骨細胞功能。目前，口服和靜脈內劑型的依替膦酸鹽可從商業(yè)上購得，靜脈內劑型的帕米膦酸鹽可得到。
在急性高鈣血癥的情況下，靜脈內(IV)給予依替膦酸鹽。推薦的劑量是每日IV 7.5mg/kg，持續(xù)3-7天；每次劑量應該在2-4小時內輸注。通常，血清鈣濃度在兩天內開始下降。在開始治療后7天內出現(xiàn)最大功效。臨床試驗已證明大約40％-90％的患者在其接受依替膦酸鹽后，恢復正常血清鈣濃度。與依替膦酸鹽有關的不良反應包括血清磷濃度升高和腎機能不全。其他不良反應包括暫時發(fā)熱、皮疹、惡心和腎中毒性。在血清肌酐水平低于2.5mg/dL的患者中，腎中毒性的可能減少。
帕米膦酸鹽治療急性高鈣血癥的推薦劑量是靜脈內給藥60-90mg，2-24小時內輸注。雖然單次帕米膦酸鹽劑量在急性高鈣血癥的治療中可能有效，但在給予最后的劑量后7天，可以給予后續(xù)的劑量。血清鈣濃度可在三天內降低，直到給藥后7天也沒有記錄下最大效應。臨床試驗證明帕米膦酸鹽通常在約60％-100％的患者中使血清鈣濃度達到正常。與帕米膦酸鹽有關的一些不良事件包括暫時發(fā)熱、惡心、皮疹、腎中毒性、低血鈣癥和血栓性靜脈炎。
與依替膦酸鹽相似，在腎功能不全的患者或具有大于2.5mg/dL的升高的血清肌酐水平的患者中，不推薦使用帕米膦酸鹽。
Zolendranate作用更強，需要更少的IV輸注時間。對于轉移性的骨病的典型治療時間是每3-4周一次15分鐘的IV輸注。然而，因為zolendranate在腎功能不全中是禁忌的，所以其不是合適的替代藥。盡管據(jù)聲稱，二膦酸鹽減少轉移性疾病中的骨疼痛，但是在急性療法中對于這種作用沒有證據(jù)。
已經將糖皮質激素類與其他抗高鈣血癥藥如降鈣素聯(lián)合用于降低血清鈣濃度。當每日給予相當于氫化可的松200-300mg IV的劑量持續(xù)3-5天時，糖皮質激素類通過增加尿鈣排出和減少腸內鈣吸收來對抗高鈣血癥。通常，由淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤和肉芽腫瘤引起的高鈣血癥對糖皮質激素治療最有利地應答。常見的可能與糖皮質激素有關的不良反應包括高血糖癥和電解質紊亂如低鉀血。不常見的影響包括胃腸道出血、糖尿病和精神狀態(tài)的改變。
硝酸鎵通過抑制PTH-rp誘導的從骨中的鈣吸收，抑制骨吸收。硝酸鎵的推薦劑量是每日100-200mg/m2，連續(xù)5天或直到獲得期望鈣濃度。硝酸鎵應該以24小時連續(xù)輸注的方式被輸注。血清鈣濃度在48小時內降低。在首次硝酸鎵劑量后的10天內達到最大效應。已證明在使用硝酸鎵的8％-15％的患者中有腎中毒性。為了降低腎并發(fā)癥的危險，推薦所有的患者在接受該藥前充分地水合。此外，硝酸鎵應當避免用于腎功能不全的患者或血清肌酐量度大于2.5mg/dL的患者。此外，在使用該藥的患者中應當避免同時使用腎臟中害的藥。與硝酸鎵有關的其他不良反應包括低磷酸鹽血癥、胃腸不適、視覺和聽力損傷和心動過速。
普卡霉素通過抑制破骨細胞中的RNA合成而減少血清鈣濃度。普卡霉素靜脈內給藥，可以一次性推注或緩慢輸注。通過緩慢輸注給予普卡霉素時，可以減少局部刺激和其他不良反應的出現(xiàn)。推薦的劑量是4-6小時內25mcg/kg。普卡霉素開始后的12小時內血清鈣濃度降低。最大效應通常在96小時內出現(xiàn)。臨床試驗已證明給藥后48小時內，血清鈣濃度中值降低了1.4mg/dL。當必需時，在等待至少24小時后，可以給予普卡霉素的后續(xù)劑量。普卡霉素主要的副作用包括肝毒性、腎中毒性、血小板減少、骨髓抑制、惡心、嘔吐、低血鈣癥和凝固因子水平降低。
普卡霉素應當避免用于嚴重的肝或腎功能不全、血小板減少或任何的cagulopathy的患者，同時接受骨髓毒性的化學療法的患者和脫水的患者。普卡霉素通常留給對其他治療沒有反應的患者。
如上討論的，當前治療高鈣血癥的方法產生了很多不希望的副作用，所述副作用使治療變得困難，不受患者歡迎。此外，所述方法中的很多還需要相當長的時間周期(24-28小時或更長)來產生有益的效果。另外，所述方法必需選擇性地選擇用于治療，因為很多方法與其它藥物、疾病或動物的狀況不兼容。因此，目前需要可以用于從活系統(tǒng)中除去鈣的方法。
糖尿病是一種以絕對或相對胰島素缺乏為特征的病況，在更嚴重的情況中，它導致慢性高血糖癥。糖尿病的長期并發(fā)癥包括神經病、視網(wǎng)膜病變、腎病的發(fā)生，以及增加對傳染的易感性(Stedman′sMedical Dictionary，26 ed.，Williamw & Wilkins，Baltimore，Md.，1995)。目前需要另外的治療高血糖癥，包括由糖尿病產生的高血糖癥的方法。對于對含胰島素的方案不應答的高血糖癥來說，這是一種特殊情況。
過量的金屬離子也與多種疾病和病況有關。例如，過量的錳、鐵、汞、鋁和銅都與帕金森氏病有關。帕金森病涉及腦中特殊的神經中樞的衰退。據(jù)認為，這些過量的礦物質增加了自由基病狀并加速了細胞死亡。這些衰退改變了神經信號傳遞必需的兩個神經遞質的化學平衡。最后的結果是失去身體運動的控制。
另一種與血液中金屬的高水平有關的疾病是阿爾茨海默氏病。阿爾茨海默氏病是一種進行性的病況，其破壞腦細胞和結構。研究人員認為該疾病與血液和/或腦中過量的鋅、銅、鋁和/或鐵有關?；加邪柎暮Ｄ喜〉娜司徛貑适麄兊膶W習、記憶和活動的能力。
另一種與體內過量的金屬離子有關的疾病是威爾遜氏病。威爾遜氏病是由肝、腦和腎內過量銅的累積引起的。該疾病特征在于肝的發(fā)炎和硬化，及腦損傷。如果不治療，威爾遜氏病是致命的。腦內銅的蓄積也與包括克-雅病(CJD)在內的多種形式的傳染性海綿狀腦病(TSE)有關。
此外，對重金屬的暴露與發(fā)育遲緩、多種癌癥、腎損傷有聯(lián)系。例如，對汞、金和鉛的暴露與自身免疫的發(fā)生有關，自身免疫是一種免疫系統(tǒng)攻擊其自身細胞，把它們認為是外來入侵者的狀況。對重金屬如汞、鉛、鎘和鋁的暴露也認為與增加的對中樞神經系統(tǒng)的自由基損傷和多發(fā)性硬化有關。
當前需要適用于從動物系統(tǒng)和生物樣品中除去不需要的或有害的實體的方法。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了脂質體，其能夠矯正動物中的一種或多種實體的失調。相應地，本發(fā)明提供一種從動物中將實體結合到脂質體中的方法，該方法包括對需要這樣治療的動物給予能夠結合所述實體的脂質體。
本發(fā)明還提供了一種從生物樣品中將實體結合到脂質體中的方法，該方法包括使生物樣品與能夠結合所述實體的一種或多種脂質體接觸。
本發(fā)明還提供一種從動物血清中除去所述實體的方法，該方法包括將血清與能夠從血清中除去所述實體的一種或多種脂質體接觸。
本發(fā)明還提供一種用于從需要這樣治療的動物的腦脊髓液中除去所述實體的方法，該方法包括對所述動物給予(例如，鞘間)能夠結合所述實體的脂質體。
本發(fā)明還提供一種治療動物中阿爾茨海默氏病的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降低所述動物中Zn、Al、Fe或Cu，或它們的離子的濃度。
本發(fā)明還提供一種治療動物中帕金森氏病的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降低所述動物中Mn、Fe、Hg、Al或Cu，或它們的離子的濃度。
本發(fā)明還提供一種治療動物中糖尿病(例如，高血糖癥)的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降所述低動物中葡萄糖的水平。
本發(fā)明還提供一種減少需要這樣治療的動物中血清鈣負荷的方法，該方法包括給予有效的鈣減少量的一種或多種脂質體。
本發(fā)明還提供一種從活系統(tǒng)中除去鈣的方法和治療與高鈣離子濃度有關的疾病的方法。相應地，本發(fā)明提供一種從動物血清中除去鈣的方法，該方法包括將血清與從血清中除去鈣的脂質體接觸(體外或體內)。
本發(fā)明還提供能夠螯合鈣離子的脂質體以及治療由高鈣離子濃度引起的疾病的方法，該方法包括對需要這樣治療的動物給予治療有效量的含鈣離子接受體或螯合劑的脂質體。
本發(fā)明還提供如在本申請中所述的用于醫(yī)學治療中的脂質體。
本發(fā)明還提供如在本申請中描述的脂質體制備對治療動物中阿爾茨海默氏病有益的藥劑的用途。
本發(fā)明還提供如在本申請中描述的脂質體制備適用于治療動物中帕金森氏病的藥劑的用途。
本發(fā)明還提供如在本申請中描述的脂質體制備適用于治療動物中糖尿病(例如，高血糖癥)的藥劑的用途。
本發(fā)明還提供如在本申請中描述的脂質體制備適用于降低動物中血鈣負荷的藥劑的用途。
本發(fā)明還提供藥物組合物，它包含如在本申請中描述的脂質體和藥物可接受的賦形劑或載體。
本發(fā)明還提供如在本申請中描述的新脂質體以及如在本申請中描述的制備本發(fā)明的脂質體的合成方法。
附圖簡述附

圖1說明了不同制劑的鈣負荷的類脂轉變溫度依賴性。
附圖2說明了采用不同方法制備的三種制劑的鈣負荷。
附圖3說明了pH和NaCl對鈣負荷效率的影響。
附圖4說明了HSPC膽固醇制劑的鈣負荷。
附圖5說明了HSPC膽固醇制劑的負荷效率。
附圖6說明了DOPC膽固醇制劑的鈣負荷。
附圖7說明了DOPC膽固醇制劑的負荷效率。
附圖8說明了DEPC膽固醇制劑的鈣負荷。
附圖9說明了DEPC膽固醇制劑的負荷效率。
附圖10說明了DPPC膽固醇制劑的鈣負荷。
附圖11說明了DPPC膽固醇制劑的負荷效率。
本發(fā)明詳述定義如在本申請中所用的，術語“動物”是指哺乳類動物、鳥類、爬行類和魚類。
如在本申請中所用的術語“生物樣品”包括取自動物的組織、血清、血液、血漿、腦脊髓液、唾液、尿等樣品如在本申請中所用的術語“鈣”包括鈣和鈣離子。
如在本申請中所用的術語“通道/轉運蛋白”包括任何分子或分子組，其允許實體(例如，鈣)進入脂質體(例如，其可以有效地運送實體進入脂質體的內部)。
如在本申請中所用的術語“不溶”或“微溶”是指具有允許有效地從血清中除去實體(例如，鈣)的范圍中的溶解度常數(shù)(Ksp)的無機鹽(例如，鈣鹽)。
如在本申請中所用，術語“主要結合”是指螯合劑，其與實體(例如，鈣)共價或離子鍵合，優(yōu)選相對于環(huán)境內的一種或多種其他的離子。
如在本申請中所用，術語“螯合劑”或“接受體”是指能夠結合實體，從而從直接環(huán)境中除去該實體的化合物復合物、分子或原子。
實體本發(fā)明提供從動物或生物樣品中除去不需要的實體的方法。脂質體可以配制成結合廣泛多樣的實體。相應地，本發(fā)明的方法通常適用于從動物或生物樣品中除去廣泛多樣的物質。例如，本發(fā)明的方法可用于除去金屬或金屬離子例如堿金屬、堿土金屬、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或其離子。特別地，本發(fā)明的方法適用于從動物中除去Zn、Al、Fe或Cu，或它們的離子。在優(yōu)選的實施例中，所述方法適用于從動物中除去鈣。
所述方法還適用于從動物中除去不需要的分子(例如，肽、有機分子、治療劑、氧化亞氮或葡萄糖)。相應地，所述方法適用于治療(即，除去與病理狀態(tài)有關的肽或化合物)。所述方法還適用于治療與治療藥過度接觸(即，過劑量)或與毒性物質的過度接觸(即，中毒)。如在本申請中所用，術語有機化合物包括包含一個或多個碳原子任何化合物。通常，有機化合物具有小于約450原子質量單位(amu)的分子量。在一個優(yōu)選的實施方式中，有機化合物具有小于300amu的分子量。
與脂質體的接觸本發(fā)明的方法可以在體內或體外實現(xiàn)。例如，通過對動物給予脂質體，可以通常實現(xiàn)所述方法。在一些情況出，將生物樣品(例如，血清、腦脊髓液或組織)從動物體中取出，再在動物體外使樣品和脂質體接觸可能更方便。緊接著除去不需要的實體后，該樣品可以被返回進動物體內。本發(fā)明的方法適用于治療應用和診斷應用。
結合到脂質體中當用于結合金屬或金屬離子時，本發(fā)明方法中使用的脂質體通常包括離子通或穿梭(shuttle)，以促進金屬或離子的實體進入脂質體。例如，從CalBiochem(La Jolla，CA)或Fermentek Ltd(Jerusalem，Israel)購得的A23187可以用于轉運Ca+2或其他二價陽離子。然而，并不總是需要這樣的通道或穿梭。例如，兩親的實體可以負荷以響應化學勢梯度(例如，對抗pH梯度)。此外，當用于結合疏水性實體時，促進疏水性實體進入的通道可能是必需的或可能是非必需的。一些疏水性實體可以透過脂質體，但是進入后實體在脂質體內被捕獲或改性，以致其不能立刻穿出脂質體。
一旦結合到脂質體中，實體可以只是停留在脂質體內部的親水環(huán)境中和疏水雙分子層中，或者脂質體可以包括螯合劑，其與實體結合在一起(例如，通過氫鍵合或離子相互作用)并降低其穿出脂質體的能力。例如，脂質體可以包括螯合劑如多胺，多齒羧酸(例如，EDTA)、冠醚、內酰胺、無機化合物或其他產生化學梯度把實體吸引進脂質體的物質。脂質體還可以包括能夠與實體反應，使得減少實體穿出脂質體的能力的試劑或酶。例如，葡萄糖可以在脂質體內利用己糖激酶轉變?yōu)槠咸烟?6-磷酸。如果在脂質體內的反應需要能量源(例如，ATP)、輔因子、特定的pH值或特定的離子平衡才能進行，該脂質體可以制備使得包括這些特征。就體外應用而言，這樣的特征也可以從外源供給。
脂質體作用機制根據(jù)本發(fā)明的方法，脂質體可以多種方式減少動物中實體的適用濃度。例如，1)脂質體可以可逆的方式結合實體，然后隨時間釋放實體，使得在動物中適用的實體的最大量或濃度隨時間降低；2)脂質體可以結合實體，然后從動物體除去，借此從動物血清中除去實體；3)脂質體可以結合實體，在脂質體內可以掩蔽或改性實體，使其不能穿出脂質體；或4)結合實體后，脂質體可以再指向體內的其它定位(例如，被載入巨噬細胞中)，其中可以釋放實體或含實體的脂質體可以從體內被清除。上述1-4中一項或多項的組合也可以發(fā)生。
治療高鈣血癥的方法本發(fā)明包括治療患有高鈣血癥的動物的方法。所述方法包括給予需要這樣治療的動物以治療有效量的至少一種鈣螯合性脂質體，從而降低動物中的鈣離子濃度。通過對動物給予有效鈣減少量的至少一種含鈣螯合劑的脂質體，所述方法通常降低血清鈣濃度。
在一個實施方式中，所述方法包括對處于血鈣過高狀態(tài)的動物以有效降低動物中血清膽固醇水平的量給予至少一種鈣螯合性脂質體。此后，可以大約每4-6小時監(jiān)測動物的鈣離子血清濃度，持續(xù)幾天。一旦達到期望的鈣離子血清濃度即正常血鈣，就可以停止治療。任選地，與鈣離子濃度同時或連續(xù)地，可以監(jiān)測鎂離子、PTH和磷酸鹽的水平。
聯(lián)合治療脂質體的用途還可以與其他療法聯(lián)合用于治療特定的病況(例如，高血糖癥、阿爾茨海默氏病、威爾遜氏病、重金屬中毒或高鈣血癥)。例如，當本發(fā)明的方法用于治療高鈣血癥時，脂質體的給藥可以和適用于減少動物中鈣負荷的一種或多種治療藥的給藥聯(lián)用。另外的治療藥可以在本發(fā)明的脂質體給藥前、給藥期間或給藥后給藥。
在本發(fā)明的一個實施方式中，該脂質體可在其內部包含一個或多個另外的治療藥用于治療特定的病況(例如，高血糖癥、阿爾茨海默氏病、威爾遜氏病、重金屬中毒或高鈣血癥)。在治療高鈣血癥中預期使用的治療藥包括，但不限于呋塞米、降鈣素、二膦酸鹽、依替膦酸鹽、帕米膦酸鹽、zolendranate、糖皮質激素類、硝酸鎵、普卡霉素、光輝霉素(mithromycin)。
形成脂質體的類脂脂質體包含一些形成脂質體的類脂(例如，磷脂酰膽堿或鞘磷脂)。通常，所述類脂包括至少一種磷脂酰膽堿，其提供脂質體的主要包封/包埋/結構要素。通常，磷脂酰膽堿主要包含C16或更長的脂肪酸鏈。鏈長度既供給脂質體結構、完整性又供給其穩(wěn)定性。任選地，脂肪酸鏈之一具有至少一個雙鍵。
如在本申請中所用的，術語“磷脂酰膽堿”包括大豆磷脂酰膽堿、卵磷脂酰膽堿、二反油酰磷脂酰膽堿(DEPC)、二油酰磷脂酰膽堿(DOPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)，二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、1-棕櫚?；?2-油酰磷脂酰膽堿(POPC)、二(山萮酰)磷脂酰膽堿(DBPC)和二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)。
如在此所用的術語“大豆磷脂酰膽堿”是指包含多種的單-、雙-、三-不飽和和飽和的脂肪酸的磷脂酰膽堿組合物。通常，大豆磷脂酰膽堿包括以約12％-約33％重量的量存在的棕櫚酸；以約3％-約8％重量的量存在的硬脂酸；以約4％-約22％重量的量存在的油酸；以約60％-約66％重量的量存在的亞油酸；以約5％-約8％重量的量存在的亞麻酸。
如在本申請中所用的術語“卵磷脂酰膽堿”是指一種磷脂酰膽堿組合物，其包括，但不限于多種不飽和與飽和的脂肪酸。通常，卵磷脂酰膽堿包含以約34％重量的量存在的棕櫚酸；以約10％重量的量存在的硬脂酸；以約31％重量的量存在的油酸；以約18％重量的量存在的亞油酸。
膽固醇膽固醇通常提供給脂質體穩(wěn)定性。磷脂酰膽堿與膽固醇的比以摩爾比計通常是約5∶1至約4∶1。優(yōu)選地，磷脂酰膽堿與膽固醇的比以摩爾比計是約1∶1至約2∶1。更優(yōu)選地，磷脂酰膽堿與膽固醇的比以摩爾比計是約2∶1。
鈣螯合劑適合與本發(fā)明的脂質體使用的鈣螯合劑包括，但不限于，能夠成功地結合鈣離子足以從直接環(huán)境中除去鈣離子的化合物、復合物、離子、分子、試劑或其組合。鈣除去包括，但不限于在脂質體內形成鈣復合物或不溶或微溶的無機化合物，然后從血清中除去該脂質體。在本發(fā)明的一個實施方式中，鈣螯合劑優(yōu)選與鈣離子結合，然而鈣螯合劑可能結合其他離子。例如，鈣螯合劑可主要地結合鈣離子和/或除去其他離子如其他離子中的鎂離子。
通常的鈣螯合劑包括多胺、聚碳酸酯、多齒羧酸、冠醚、內酰胺、無機化合物、聚陰離子、蛋白質碎片和肽。特別地，鈣螯合劑包括，但不限于乙二胺四乙酸(EDTA)、亞乙基雙(氧乙烯基次氮基)四乙酸(EGTA)和降鈣素。
脂質體中鈣螯合劑的量可以根據(jù)期望的鈣螯合劑的類型、減少高血鈣的時間，以及動物的狀況而變化。通常，鈣螯合劑的量應該在給藥脂質體起數(shù)分鐘和幾小時內足夠引起鈣離子濃度的減少。選擇性地，如果不想得到高血鈣的快速減少，可以選擇鈣螯合劑提供鈣離子隨時間穩(wěn)定和延長的減少，例如一天或幾天。通常，與動物血清接觸前，鈣螯合劑的濃度是約至少50mM。優(yōu)選地，與動物血清接觸前，鈣螯合劑的濃度是約至少100mM，更優(yōu)選地是約至少200mM。在一個實施方式中，鈣螯合劑能夠除去動物血清中鈣離子濃度的約10％-約30％，其還可以使動物EKG正?；?。
脂質體的制備脂質體通常包含磷脂的類脂層和膽固醇。通常，磷脂和膽固醇的比足夠形成脂質體，一旦對動物給藥后，脂質體將不會溶解或崩解。類脂和膽固醇溶解于適宜的溶劑或含適合量實電解質的溶劑混合物。在適合量的時間之后，用真空干燥或噴霧干燥除去溶劑。所得的固體物質可以儲藏或立即使用。
隨后，在合適的溫度下，所得的固體物質在水溶液中水合得到多室囊泡(MLV)，所述水溶液任選地含螯合劑(例如，鈣螯合劑如EDTA)或任選地含另一種治療藥。含MLV的溶液通過均化作用減少尺寸形成小單室囊泡(SUV)。在過程中，鈣螯合劑的一部分包封在SUV的水性隔室里。未包封的螯合劑通過適合的方法如透析、脫鹽柱和交叉過濾除去。過濾所得的脂質體溶液，備用。
緩沖劑中負荷的鈣螯合劑是制劑依賴性的。在有關的因素中是類脂成份的相轉變溫度(Tm)。附圖1說明了不同制劑的鈣負荷的類脂轉變溫度的依賴性。緩沖液中的負荷可能直接或可能不直接地與體外(血清、血漿或血液)或體外的負荷有關。血清蛋白質或其它元素可以影響(正面或負面)轉運蛋白通道的功能?？偟闹|體性能將部分由體內負荷以及脂質體的生物分布、藥物動力學和/或藥效學得到。
制劑本發(fā)明的基于類脂的分散體還可以配制成胃腸外給藥。而且，基于類脂的分散體可以配制成通過輸注或注射用于皮下、肌內、靜脈內、腹膜內給藥。這些制劑還可以適合的量包含預防微生物的生長的防腐劑，緩沖劑或抗氧劑。
組合物和制劑通常將含至少0.1％的螯合劑。當然，組合物和制劑的百分比可以是變化的，并且可以便利地介于特定的單位劑型重量的約2％-約60％之間。在這樣治療適用的組合物中有效的螯合劑的量是將得到有效劑量水平的量。
脂質體還可以包含生理學上可接受的鹽以維持與動物血清的等滲性。實現(xiàn)與動物等滲性的任何藥學上可接受的鹽是可接受的，例如NaCl。
治療中使用所需制劑的量將不但隨特定的藥劑而變化，而且隨給藥的途徑、要治療的病況的性質和動物的年齡和狀態(tài)而變化；所需的量將最終由主治醫(yī)生或臨床醫(yī)生決定。
期望的制劑的量可方便地以單次劑量或以合適的間隔給予的分劑量存在，例如，以每天2、3、4或更多的亞劑量形式。亞劑量本身可以進一步被分成，例如多個分離的松散間隔的給藥。任選地，脂質體和/或制劑可以包含至少一種抗氧劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑或藥物可接受的賦形劑。
具體和優(yōu)選的實施方式具體和優(yōu)選的值如下所示；它們不排除其它定義的值或其它在定義范圍的值。
在本發(fā)明的一個具體的實施方式中，接觸在體內發(fā)生。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，接觸在體外發(fā)生。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是金屬或金屬離子。在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是堿性金屬、堿土金屬、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或它們的離子。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是Zn、Al、Fe或Cu，或其離子。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是鈣或鈣離子。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是肽。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體有機分子。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體是治療藥。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體葡萄糖。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，動物是哺乳動物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，動物是人。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含一種或多種形成脂質體的類脂和膽固醇，其中類脂和膽固醇的摩爾比是約0.5∶1至約4∶1。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含磷脂酰膽堿和膽固醇。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體中磷脂酰膽堿與膽固醇的摩爾比是約0.5∶1至約4∶1。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體中磷脂酰膽堿與膽固醇的摩爾比是約1∶1至約2∶1。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體中磷脂酰膽堿與膽固醇的摩爾比是約2∶1。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿選自大豆磷脂酰膽、卵磷脂酰膽堿、DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿選自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、POPC、DBPC、DPPC和其混合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿選自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿選自DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、DPPC和其混合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿選自DOPC、DSPC、HSPC、DPPC和其混合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，磷脂酰膽堿是DPPC。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含促進實體結合脂質體中的通道和穿梭。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，通道是離子通道。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體內部的pH值在給藥之前或與生物樣品或血清接觸之前是小于約8。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體是SUV或MLV。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體在脂質體內部和螯合劑結合形成不能穿出脂質體的復合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，鈣在脂質體內部和螯合劑結合形成不能穿出脂質體的鈣復合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含一種或多種鈣螯合劑。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含形成脂質體的類脂和允許鈣進入脂質體的轉運蛋白/通道。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，螯合劑是多胺、多齒羧酸、冠醚、內酰胺或無機化合物。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，螯合劑是EDTA。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約10mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約20mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約25mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約50mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約80mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約100mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在給藥或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度是至少約200mM。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，與鋅、硒或銅相比螯合劑至少是兩倍選擇鈣結合。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在脂質體內部實體和試劑反應形成反應的實體。在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，反應的實體不能夠穿出脂質體。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，在脂質體內部實體和酶反應。在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，實體和酶的反應需要ATP。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含離子通道A23187。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含離子通道，與鋅、硒或銅相比該離子通道至少是兩倍選擇鈣進入脂質體。
在另一個具體實施方式
中，本發(fā)明的方法利用脂質體，該脂質體能夠從動物的循環(huán)中除去鈣。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含能與鈣離子結合的鈣螯合劑或接受體。
在本發(fā)明的另一個具體實施方式
中，脂質體包含一類脂層，該類脂層含有形成脂質體的類脂、膽固醇和通道/轉運蛋白，以及能夠和一個或多個鈣離子結合的鈣螯合劑或接受體。
附圖附圖1說明了不同脂質體制劑在緩沖液中的鈣負荷的類脂轉變溫度的依賴性。顯示了五種不同的2∶1的磷脂-膽固醇制劑的配方。五種磷脂是HSPC(55℃)、DPPC(41℃)、DMPC(23℃)、DEPC(12℃)和DOPC(-20℃)。所有樣品在pH4.5用200mM的EDTA配制。在DSPC-膽固醇制劑中，兩種另外的制劑用包封或未包封的和在外部緩沖液中的硫酸銨制得。
附圖2說明了用四種不同方式制備的三種制劑的鈣負荷。所述制劑在pH4.5下有或沒有140mM的NaCl或在pH7.5下有或沒有140mM的NaCl條件下，用2∶1的HSPC∶膽固醇制得(制劑2A)；用1∶1.25∶1.5的HSPC∶膽固醇∶DOPC制得(制劑2B)；以及用2∶1的DPPC∶膽固醇制得(制劑2C)。平均以四個不同制備方式制得的各個磷脂∶膽固醇制劑以得到呈現(xiàn)的負荷曲線附圖3說明了鈣負荷效率的體外的pH和NaCl依賴性。制備了四種制劑。2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用140mM的NaCl和200 EDTA在pH4.5下制得(制劑3A)和第二個在pH7.5下制得(制劑3B)。然后，2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用200 EDTA在pH4.5下制得(制劑3C)和第二個在pH7.5下制得(制劑3D)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。曲線圖表明在pH4.5下制備的制劑含有最高的EDTA％飽和度。
附圖4說明了四種HSPC∶膽固醇制劑的鈣負荷。特別地，2∶1的HSPC∶膽固醇制劑用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑4A)和第二個在pH7.5下制得(制劑4B)。然后，2∶1的HSPC∶膽固醇制劑用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑4D)和第二個在pH7.5下制得(制劑4D)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。曲線圖表明用140mM的NaCl和200EDTA在pH4.5下制得的制劑含有最高的血清飽和度。
附圖5說明了四種HSPC∶膽固醇制劑的負荷效率。2∶1的HSPC∶膽固醇制劑用140mM的NaC和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑5A)和第二個在pH7.5下制得(制劑5B)。然后，2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑5D)和第二個在pH7.5下制得(制劑5C)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。曲線圖表明由200mM的EDTA在pH4.5下并未加入NaCl制得的制劑含有最高的鈣離子濃度。
附圖6說明了七種HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑的鈣負荷。四種1∶1.25∶1.5的HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑6B)，第二個在pH7.5下制得(制劑6C)，第三個不加NaCl在pH7.5下制得(制劑6A)，第四個不加NaCl在pH4.5下制得(制劑6D)。制得三種HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑。第一個是1∶0.14∶0.25的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑6E)，第二個是1∶0.12∶0.05的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑6F)，第三個是1∶0.17∶0.5的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑6G)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。
附圖7說明了七種HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑的負荷效率。制備了四種1∶1.25∶1.5的HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑，一種用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑7B)，第二個在pH7.5下制得(制劑7C)，第三個不加NaCl在pH7.5下制得(制劑7A)，第四個不加NaCl在pH4.5下制得(制劑7D)。制得三種HSPC∶膽固醇∶DOPC制劑。第一個是1∶0.17∶0.5的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑7E)，第二個是1∶0.14∶0.25的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑7F)，第三個是1∶0.12∶0.05的HSPC∶膽固醇∶DOPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑7G)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。
附圖8說明了三種HSPC∶膽固醇∶DEPC制劑的鈣負荷。制備三種HSPC∶膽固醇∶DEPC的制劑。第一個是1∶0.14∶0.25的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5時制得(制劑8A)，第二個是1∶0.12∶0.05的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑8B)，第三個是1∶0.17∶0.5的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑8C)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。
附圖9說明了三種HSPC∶膽固醇∶DEPC制劑的負荷效率。制備三種HSPC∶膽固醇∶DEPC的制劑。第一個是1∶0.17∶0.5的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑9A)，第二個是1∶0.14∶0.25的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑9B)，第三個是1∶0.12∶0.05的HSPC∶膽固醇∶DEPC，用200mM的EDTA在pH7.5下制得(制劑9C)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。
附圖10說明了四種DPPC∶膽固醇制劑的鈣負荷。特別地，2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用140mM的NaCl和200EDTA在pH4.5下制得(制劑10D)，第二個在pH7.5下制得(制劑10C)。然后，2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用200EDTA在pH4.5下制得(制劑10B)，第二個在pH7.5下制得(制劑10A)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。曲線圖表明用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH7.5時制得的制劑含有最高的鈣離子濃度。
附圖11說明了四種DPPC∶膽固醇制劑的負荷效率。2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用140mM的NaCl和200的EDTA在pH4.5下制得(制劑11D)，第二個在pH7.5下制得(制劑11C)。然后，2∶1的DPPC∶膽固醇制劑用200mM的EDTA在pH4.5下制得(制劑11B)，第二個在pH7.5下制得(制劑11A)。在0分、30分、60分、120分和240分時進行測量。曲線圖表明用140mM的NaCl和200mM的EDTA在pH4.5下制得的制劑含有最高的鈣離子濃度。
通過參考以下的實施例進一步定義了本發(fā)明，所述實施例描述了脂質體的制備和應用該脂質體治療高鈣血癥的方法。在未脫離本發(fā)明的目的和利益下，可以對材料和方法進行許多修飾，這對本領域技術人員來講是顯而易見的。
通過在緩沖液和生物媒介(例如，血清)中稀釋脂質體并培養(yǎng)(例如，在37℃)，在體外研究鈣的負荷。在培養(yǎng)結束后，用小直徑的截止(＜100kDa)微孔過濾裝置微孔過濾樣品。用高效液相色譜法測定濾液的總鈣濃度。這些濾液濃度表示了媒介中發(fā)現(xiàn)的游離鈣的量。因此，濾液中鈣的減少被認為是脂質體從媒介中攝取鈣的結果。
實施例實施例1一般的脂質體制備將磷脂和膽固醇以約2∶1的比例，分別溶解于合適的溶劑中或含適合量的實電解度的溶劑混合物中。隨后通過真空干燥或噴霧干燥除去溶劑。得到的固體物質可以儲藏或立即使用。
隨后，在合適的溫度下，將所得的固體物質在含EDTA的水性溶液中水合得到多室囊泡(MLV)。含MLV的溶液通過均化作用減少尺寸形成小單室囊泡(SUV)。在制備過程中，將EDTA的一部分包封在SUV的水性隔室內。用適合的方法如透析、脫鹽柱或交叉過濾除去未包封的EDTA。過濾所得的脂質體溶液，備用。
所有的公開物、專利和專利文獻在此引入作為參考，如同每件獨自地引入作為參考。
權利要求
1.一種從動物中將實體結合到脂質體中的方法，該方法包括對需要這樣治療的動物給予能夠結合該實體的脂質體。
2.一種從生物樣品中將實體結合到脂質體中的方法，該方法包括將所述生物樣品和一種或多種能夠結合該實體的脂質體接觸。
3.一種從動物血清中除去實體的方法，該方法包括將所述血清和一種或多種能夠從血清中除去該實體的脂質體接觸。
4.權利要求3所述的方法，它進一步包括從血清中分離所述脂質體。
5.權利要求2-4任一項所述的方法，其中所述接觸發(fā)生在體內。
6.權利要求2-4任一項所述的方法，其中所述接觸發(fā)生在體外。
7.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是金屬或金屬離子。
8.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是堿金屬、堿土金屬、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn或Pb，或它們的離子。
9.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是Zn、Al、Fe或Cu，或它們的離子。
10.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是鈣或鈣離子。
11.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是肽。
12.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是有機分子。
13.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是治療藥。
14.權利要求1-6任一項所述的方法，其中所述實體是葡萄糖。
15.一種治療動物中帕金森氏病的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降低所述動物腦內Mn、Fe、Hg、Al或Cu，或它們的離子的水平。
16.一種治療動物中阿爾茨海默氏病的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降低所述動物腦內Zn、Al、Fe或Cu，或它們的離子的水平。
17.一種治療動物中糖尿病的方法，該方法包括對所述動物給予適量的脂質體，所述量有效降低所述動物血清中葡萄糖的水平。
18.一種從需要這樣治療的動物的腦脊髓液中除去實體的方法，該方法包括對所述動物鞘間給予能夠結合該實體的脂質體。
19.權利要求18所述的方法，其中實體是金屬或金屬離子。
20.一種減少需要所述治療的動物中血清鈣載荷的方法，該方法包括對所述動物給予有效鈣減少量的一種或多種脂質體。
21.權利要求1和3-20任一項所述的方法，其中所述動物是哺乳動物。
22.權利要求1和3-20任一項所述的方法，其中所述動物是人。
23.權利要求1-22任一項所述的方法，其中所述脂質體包含一種或多種形成脂質體的類脂和膽固醇，其中類脂和膽固醇的摩爾比是約0.5∶1至約4∶1。
24.權利要求1-22任一項所述的方法，其中所述脂質體包含磷脂酰膽堿和膽固醇。
25.權利要求24所述的方法，其中磷脂酰膽堿和膽固醇的摩爾比是約0.5∶1至約4∶1。
26.權利要求24所述的方法，其中磷脂酰膽堿和膽固醇的摩爾比是約1∶1至約2∶1。
27.權利要求24所述的方法，其中磷脂酰膽堿和膽固醇的摩爾比是約2∶1。
28.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿選自大豆磷脂酰膽堿、卵磷脂酰膽堿、DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
29.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿選自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC、POPC、DBPC和DPPC及其混合物。
30.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿選自DEPC、DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
31.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿選自DOPC、DSPC、HSPC、DMPC和DPPC及其混合物。
32.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿選自DOPC、DSPC、HSPC和DPPC及其混合物。
33.權利要求24-27任一項所述的方法，其中磷脂酰膽堿是DPPC。
34.權利要求1-33任一項所述的方法，其中所述脂質體包含促進實體結合到脂質體中的通道或穿梭。
35.權利要求34所述的方法，其中所述通道是離子通道。
36.權利要求1-35任一項所述的方法，其中所述脂質體內部的pH在給予之前或接觸生物樣品之前小于約8。
37.權利要求1-35任一項所述的方法，其中所述脂質體是SUV或MLV。
38.權利要求1-35任一項所述的方法，其中所述實體在脂質體內部和螯合劑結合形成不能穿出脂質體的復合物。
39.權利要求10或20所述的方法，其中鈣在脂質體內部和螯合劑結合形成不能穿出脂質體的鈣復合物。
40.權利要求10或20所述的方法，其中所述脂質體包含一種或多種鈣螯合劑。
41.權利要求10或20所述的方法，其中所述脂質體包含形成脂質體的類脂和允許鈣進入脂質體的轉運蛋白/通道。
42.權利要求38-40任一項所述的方法，其中所述螯合劑是多胺、多齒羧酸、冠醚、內酰胺或無機化合物。
43.權利要求42所述的方法，其中所述螯合劑是EDTA。
44.權利要求43所述的方法，其中在給予或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度為至少約10mM。
45.權利要求43所述的方法，其中在給予或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度為至少約20mM。
46.權利要求43所述的方法，其中在給予或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度為至少約50mM。
47.權利要求43所述的方法，其中在給予或接觸之前脂質體中的EDTA的濃度為至少約100mM。
48.權利要求40所述的方法，其中與鋅、硒或銅相比螯合劑至少是兩倍選擇和鈣結合。
49.權利要求1-37任一項所述的方法，其中在脂質體內部實體和試劑反應形成已反應的實體。
50.權利要求49所述的方法，其中已反應的實體不能穿出脂質體。
51.權利要求1-37任一項所述的方法，其中在脂質體內部實體和酶反應。
52.權利要求51所述的方法，其中所述實體和酶之間的反應需要ATP。
53.權利要求41所述的方法，其中所述脂質體包含離子通道A23187。
54.權利要求40或48所述的方法，其中所述脂質體包含離子通道，與鋅、硒或銅相比該離子通道至少是兩倍選擇鈣進入脂質體。
55.權利要求1和15-20任一項所述的方法，它進一步包括對動物給予另一種治療藥。
56.權利要求10或20所述的方法，它進一步包括對動物給予適用于減少鈣載荷的治療藥。
57.權利要求56所述的方法，其中所述治療藥是帕米膦酸鹽、呋塞米、二磷酸化合物、硝酸鎵、糖皮質激素類、zolendranate、依替膦酸鹽或降鈣素。
58.權利要求56或57所述的方法，其中所述脂質體包含治療藥。
59.能夠結合實體的脂質體在醫(yī)學治療中的用途。
60.能夠結合鈣或鈣離子的脂質體在制備適用于減少動物中血清鈣載荷的藥物中的用途。
61.能夠結合Zn、Al、Fe、Cu或其離子的脂質體在制備適用于治療動物中阿爾茨海默氏病的藥物中的用途。
62.能夠結合葡萄糖的脂質體在制備適用于治療動物中糖尿病的藥物中的用途。
63.能夠結合Mn、Fe、Hg、Al、Cu或它們的離子的脂質體在制備適用于治療動物中帕金森氏病的藥物中的用途。
64.能夠結合實體的脂質體在制備適用于從動物的腦脊髓液中除去實體的藥物中的用途。
65.權利要求64所述的用途，其中所述實體是金屬或金屬離子。
66.如本申請中所述的脂質體。
67.一種藥物組合物，其包含藥物可接受的賦形劑或載體，以及如在本申請中所述的能夠結合實體的脂質體。
68.權利要求59所述的脂質體，其中所述實體是金屬、金屬離子、肽、有機分子、毒性物質、氧化亞氮或葡萄糖。
69.權利要求59所述的脂質體，其中所述實體是Ca、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn、Pb，或它們的離子。
70.權利要求67所述的組合物，其中所述實體是金屬、金屬離子、肽、有機分子、毒性物質、氧化亞氮或葡萄糖。
71.權利要求67所述的組合物，其中所述實體是Ca、Fe、Os、Co、Ni、Pd、Cu、Ag、Au、Zn、Al、Cd、Hg、Sn、Pb，或它們的離子。
全文摘要
本發(fā)明提供矯正哺乳動物中的一種或多種實體失調的方法，以及與該類方法使用的治療性脂質體和組合物。
文檔編號A61K33/30GK1849112SQ200480025886
公開日2006年10月18日 申請日期2004年9月9日 優(yōu)先權日2003年9月9日
發(fā)明者G·M·詹森, 胡寧, D·派特拉塞克 申請人:吉里德科學公司