專利名稱：用于治療傷口的蒼蠅幼蟲制劑的制備方法以及用此方法制備的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種根據(jù)權(quán)利要求1的概念用于治療傷口的制劑的制備方法，一種根據(jù)權(quán)利要求6的概念用于治療傷口的制劑以及一種根據(jù)權(quán)利要求9的概念用于治療傷口的方法。
已知，蒼蠅的幼蟲，特別是蠅科綠蠅屬的幼蟲具有促進傷口愈合的效果。由活的幼蟲所分泌的分泌物刺激組織增生，通過蛋白質(zhì)水解作用將壞死的組織和創(chuàng)面被苔液化，并且分泌物對確定的病菌種類具有殺菌作用，例如鏈球菌和葡萄球菌。例如在DE19901134A1中描述了活幼蟲在傷口治療中的用途。
另外，在DE19925996A1中公開了這樣簡化幼蟲的制備和應(yīng)用，即將蠅卵或早期發(fā)育階段的幼蟲置于中斷其發(fā)育周期的周圍環(huán)境中。用此方法，幼蟲的培養(yǎng)在工業(yè)生產(chǎn)中以無菌方式進行。卵或早期發(fā)育階段的幼蟲，在使用其活性階段之前，將其置于抑制發(fā)育的環(huán)境中并在此抑制發(fā)育的條件下包裝。卵或者幼蟲能夠在此狀態(tài)下運送到使用者手中，在制造商或使用者手中，這些卵或幼蟲在此狀態(tài)下將被儲存較長時間。然后，在應(yīng)用之前，將這些卵或幼蟲置于繼續(xù)發(fā)育周期的環(huán)境，從而獲得活性階段的幼蟲，幼蟲能夠在此階段被用在傷口上。
本發(fā)明的任務(wù)在于，改進使用幼蟲治療傷口的功效。
本發(fā)明的任務(wù)通過根據(jù)權(quán)利要求1的用于治療傷口的制劑的制備方法，通過根據(jù)權(quán)利要求6的治療傷口的制劑和根據(jù)權(quán)利要求9的治療傷口的方法來解決。
本發(fā)明有利的實施方式在反引的從屬權(quán)利要求中給出。
本發(fā)明的基本宗旨是通過施用噬菌體促進幼蟲治療法。
噬菌體，也稱為抗菌素，是病毒，其宿主細(xì)胞是細(xì)菌?？咕厍秩爰?xì)菌并且在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)部繁殖。由此，有節(jié)制的噬菌體在細(xì)菌中造成溶原態(tài)，在此狀態(tài)下細(xì)菌可以存活。劇毒的或溶菌性抗菌素在細(xì)菌中極快地繁殖并將其破壞，從而以緊接著的溶解態(tài)釋放。已知，溶菌性抗菌素用于治療細(xì)菌感染。因此，所必需的是，針對目標(biāo)細(xì)菌，要使用盡可能高毒性的抗菌素?？咕靥貏e適合于治療感染，因為相對于頻繁使用的廣譜抗生素，基于該抗菌素高的特異性，其幾乎沒有副作用。特別地，抗菌素也能夠殺滅對抗生素具有多重抗性的病菌?？咕氐膬?yōu)點在于其能夠極快地呈指數(shù)地繁殖，直到耗盡營養(yǎng)儲備，即不再有目標(biāo)細(xì)菌存在。在病毒的典型方式中，其之后轉(zhuǎn)變?yōu)闊o生命的靜止態(tài)(病毒粒子)，在此狀態(tài)下，保持到再次與特定目標(biāo)細(xì)菌接觸而重新進行繁殖。
本發(fā)明基于幼蟲和噬菌體之間的協(xié)同相互作用。
幼蟲能夠移動，并且根據(jù)本發(fā)明其可用作抗菌素的運輸物和載體，其將不能移動的抗菌素帶至待治療的傷口部位。在此重要的是，幼蟲最好在傷口部位保持活力，在此部位中存在壞死的組織并因而形成高的感染風(fēng)險。因此，借助幼蟲，抗菌素的局部目標(biāo)的應(yīng)用是可能的。除此之外，幼蟲沾染抗菌素的其他優(yōu)點是，抗菌素不會被傷口液體沖洗掉，從而改進了其功效。
抗菌素不能去除和穿透創(chuàng)面被苔或壞死和感染組織周圍的其他障礙。在此，產(chǎn)生的本發(fā)明的優(yōu)點是，用其鋒利嘴鉤和刺環(huán)的幼蟲及其壞死組織溶解性分泌物腐蝕并去除這些創(chuàng)面被苔和障礙，從而抗菌素能夠高效作用。
對于抗菌素的繁殖和功效而言，需要盡可能精確地維持環(huán)境溫度為37℃，并且優(yōu)選為堿性環(huán)境。在此，根據(jù)本發(fā)明，產(chǎn)生了有利的相互作用，即幼蟲以其分泌物產(chǎn)生堿性傷口環(huán)境，通過其物質(zhì)代謝，在傷口表面引起溫度升高。由此，幼蟲產(chǎn)生了抗菌素繁殖的最佳環(huán)境條件。
幼蟲分泌物的抗菌作用受限于確定的病原體，特別是鏈球菌和葡萄球菌。因此，在較長時間的幼蟲治療中，由于堿性傷口環(huán)境有利于具有革蘭氏陰性病原體的傷口的重復(fù)感染，如假單胞菌和變形菌。這種純幼蟲療法的問題可以通過將幼蟲與經(jīng)過選擇的抗生素沾染而消除或者至少大大減少。幼蟲分泌物的防腐和抗生作用范圍通過抗菌素的附加應(yīng)用而大大擴展。
為了達到最佳的傷口感染預(yù)防與治療，有意義的是，提供特異性抗菌素的寬范圍，其能夠相應(yīng)于所防治細(xì)菌選擇出不同種類抗菌素。因此，其還可能使針對抗菌素的抗藥性進展變得困難。
對于抗菌素的目的性施用重要的是，要盡可能無菌地培養(yǎng)蒼蠅，從而優(yōu)選能獲得最大限度無菌的蠅卵。在無菌條件下從卵階段培養(yǎng)幼蟲。所選的抗菌素源的沾染可以在卵階段或者也可以在緊接著的幼蟲階段進行。因為抗菌素保持在無生命的病毒粒子靜止態(tài)，只要不存在目標(biāo)細(xì)菌，在早期沾染的情形下，例如在卵階段，幼蟲的孵化也是可能的。
根據(jù)發(fā)明目的，在制造工廠內(nèi)將蠅卵或極早期發(fā)育態(tài)的幼蟲置于周圍環(huán)境中，在此環(huán)境中中止其發(fā)育周期。這樣的環(huán)境例如是降溫環(huán)境、真空或保護氣氛環(huán)境或者除濕環(huán)境。在此狀態(tài)下，用噬菌體沾染的卵或幼蟲在制造工廠內(nèi)儲存并運送到使用者手中。在使用者手中更長時間的儲存也是可能的，直到將幼蟲用于治療傷口。在所計劃的應(yīng)用之前，將卵或早期發(fā)育態(tài)的幼蟲從抑制發(fā)育環(huán)境轉(zhuǎn)移到可繼續(xù)幼蟲的發(fā)育周期的環(huán)境，從而幼蟲能夠在短期內(nèi)發(fā)育，直到其活性階段，在此階段將其應(yīng)用于傷口。在儲存和運送過程中，還要保證維持幼蟲產(chǎn)品的無菌性，這對于治療應(yīng)用是必需的。
幼蟲分泌物和噬菌體的協(xié)同作用，也可以以此充分利用，即將幼蟲分泌物和抗菌素共同置于傷口敷料上，然后應(yīng)用在傷口表面。幼蟲分泌物可以由活幼蟲分泌至傷口敷料上，可以通過沖洗幼蟲得到或者從幼蟲中提取。由此，幼蟲分泌物的壞死組織溶解作用、妨礙抗菌素效果的障礙的降解以及傷口環(huán)境的堿性影響在此都起了作用。
權(quán)利要求
1.制備用于傷口治療的制劑的方法，其中從蠅卵培養(yǎng)為幼蟲，其可應(yīng)用于待治療傷口，其特征在于，用噬菌體以此沾染幼蟲，即可應(yīng)用的幼蟲是噬菌體的載體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于，至少在無菌或低菌條件下由卵階段培養(yǎng)蠅幼蟲。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，在卵階段用噬菌體進行沾染。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其特征在于，在其用于傷口治療的活性出現(xiàn)之前，在幼蟲發(fā)育階段用噬菌體進行沾染。
5.根據(jù)權(quán)利要求1到4之一的方法，其特征在于，用噬菌體沾染卵或早期幼蟲階段的幼蟲，將用于儲存和/或運輸?shù)穆鸦蚱湓缙诎l(fā)育階段的幼蟲置于使其發(fā)育周期進入靜止態(tài)的周圍環(huán)境中。
6.用于傷口治療的制劑，其包含在待治療傷口中可應(yīng)用的活的蠅幼蟲，其特征在于，用噬菌體沾染幼蟲。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的制劑，其特征在于，在用噬菌體沾染之前，幼蟲是無菌的。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的制劑，其特征在于，用噬菌體沾染的卵階段或早期幼蟲階段的幼蟲被封閉在抑制其發(fā)育周期的周圍環(huán)境中。
9.用蠅幼蟲治療傷口的方法，特別是用綠蠅科幼蟲，其中將幼蟲以活體形式應(yīng)用在傷口中，其特征在于，用噬菌體沾染幼蟲，并且將噬菌體轉(zhuǎn)移到傷口中。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其特征在于，幼蟲在傷口中產(chǎn)生了有利于噬菌體發(fā)育的堿性傷口環(huán)境以及升高的溫度。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10的方法，其特征在于，幼蟲通過其分泌物和必要時通過其嘴鉤分解創(chuàng)面被苔和遮蓋細(xì)菌的保護層。
12.制備用于傷口治療的制劑的方法，其中將蠅幼蟲的分泌物施用在傷口敷料上，其特征在于，在傷口敷料上施用噬菌體。
13.具有用蠅幼蟲分泌物浸透的傷口敷料的傷口治療制劑，其特征在于，傷口敷料含有噬菌體。
14.用蠅幼蟲分泌物治療傷口的方法，其特征在于，將噬菌體混入分泌物中。
全文摘要
用蒼蠅幼蟲進行的傷口治療的改進，用抗菌素沾染該幼蟲。
文檔編號A61K35/76GK1849129SQ200480026170
公開日2006年10月18日 申請日期2004年8月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月10日
發(fā)明者威廉·弗萊施曼 申請人:威廉·弗萊施曼