專利名稱：用作放射指示劑和顯象劑的吡啶基乙炔類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的吡啶基乙炔衍生物、它們的制備、它們作為放射指示劑/標記物的用途以及包含它們的組合物。
更具體地說，本發(fā)明提供了游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物 其中R為CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n為1、2、3或4。
優(yōu)選如下游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物，其中R為11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n為1、2、3或4。
在可能的立體異構(gòu)現(xiàn)象中，例如雙鍵的順/反異構(gòu)，化合物能以純立體異構(gòu)體或其混合物存在。
另一方面，本發(fā)明提供了生產(chǎn)式I化合物和其鹽的方法，其包括如下步驟a)對于式Ia化合物的生產(chǎn) 其中Ra分別為11CH3或(3H)3C，
將式II化合物在堿存在的條件下，分別與11CH3I或C(3H)3I反應， 或者b)對于式Ib化合物的生產(chǎn) 其中Rb分別為(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，將式III化合物分別與18F、123I或76Br反應， 其中n如上文所定義，X為OTs或OMs，或?qū)⑹絀I化合物與式IV化合物反應X-RbIV其中X和Rb如上文所定義，并回收所形成的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
這些反應可根據(jù)已知的方法，例如按照實施例中描述的那樣進行。
反應混合物的后處理以及所得到的化合物的純化可以根據(jù)已知的方法進行。
酸加成鹽可用已知的方法從游離堿制得，反之亦然。
式II、III和IV的起始原料是已知的，或可用與已知方法類似的方式獲得，如實施例中描述的那樣。
游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物(在下文中稱為本發(fā)明的物質(zhì))呈現(xiàn)可作為組織病理標記物、顯象劑和/或生物標記物(在下文中稱為“標記物”)的有價值的性質(zhì)，可用于選擇性地標記代謝型谷氨酸受體亞型5(mGlu5受體)。
更具體地說，本發(fā)明的物質(zhì)可在體外和體內(nèi)用作標記中樞和外周mGlu5受體的標記物(參閱實施例5-7)。
所以，本發(fā)明的物質(zhì)可用于確定作用于mGlu5受體的藥物的受體占據(jù)水平，或用于診斷由于mGlu5受體失調(diào)或功能異常而導致的疾病，以及用于監(jiān)察所述疾病的藥物治療有效性。
如上所述，本發(fā)明提供了用作神經(jīng)顯象標記物的本發(fā)明的物質(zhì)。
另一方面，本發(fā)明提供了用于在體內(nèi)和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的組合物，該組合物包含本發(fā)明的物質(zhì)。
另一方面，本發(fā)明還提供了用于在體內(nèi)或體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的方法，該方法包括用本發(fā)明的物質(zhì)接觸腦組織。
本發(fā)明的方法還可以包括確定是否本發(fā)明的物質(zhì)已標記靶結(jié)構(gòu)的步驟。所述步驟可通過使用正電子發(fā)射斷層成像術(shù)(PET)或單光子發(fā)射計算機斷層成像術(shù)(SPECT)或使用任何允許進行放射性輻射檢測的儀器觀察靶結(jié)構(gòu)來進行。
下面的實施例舉例說明了本發(fā)明。
實施例13-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟將[11C]-MeI與3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮肟的鈉鹽(1mg)在干燥的DMF(400μl)中反應以合成3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。[11C]-MeI是通過慢速的氦氣流引入的，加完后將反應混合物加熱至120℃，保持10分鐘。產(chǎn)物的純化是通過反相高效液相色譜法完成的，使用C-18 μ-Bondapak色譜柱(7.8×300mm)，流動相為CH3CN/0.1％ H3PO4(70/30)，流速為5ml/min。目標產(chǎn)物的保留時間在6分鐘至7分鐘之間。
在包含吐溫(2％)、乙醇(10％)和鹽水(0.9％)的溶液中配制3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。
LogD＝2.5(用經(jīng)典的搖瓶法測定)。
起始原料用下文描述的方法制備a)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮將2-乙炔基-6-甲基-吡啶(702mg，6mmol)、3-溴-環(huán)己-2-烯酮(1.26g，7.2mmol)、二-(三苯膦)-鈀-二氯化物(168mg，0.24mmol)、碘化亞銅(93mg、0.48mmol)、三乙胺(4.8ml，34.4mmol)在12ml DMF中的溶液加熱至55℃，保持1小時。然后將溶液用乙酸乙酯(500ml)稀釋，并用飽和NaHCO3水溶液(1×150ml)洗滌。水相用乙酸乙酯(1×150ml)萃取，合并的有機相用硫酸鈉干燥，過濾并減壓濃縮。殘余物(1.88g)用柱色譜法進行純化(硅膠，洗脫劑己烷/乙酸乙酯3∶1v/v)，收集包含目標化合物的級分，真空濃縮得到1.05g(收率為82％)淡黃色油狀的標題化合物。
b)3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮(422mg，2mmol)和羥基胺鹽酸鹽(278mg，4mmol)在吡啶(20ml)中的溶液在室溫下攪拌17小時。然后將溶劑真空蒸發(fā)。殘余物溶解在乙酸乙酯(300ml)中并用飽和NaHCO3(1×50ml)洗滌。水相用乙酸乙酯(1×50ml)萃取，合并的有機相用Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物(0.45g)用柱色譜法進行純化(硅膠，洗脫劑己烷/乙酸乙酯2∶1v/v)，收集包含目標化合物的級分，真空濃縮得到0.192g(收率為42％)淡黃色結(jié)晶狀的標題化合物，熔點為166-168℃。
實施例23-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[三(3H)-甲基]-肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮肟與[3H]-MeI(0.5當量)在K2CO3存在的條件下，在DMF中于100℃反應180分鐘，隨后用反相色譜法進行純化，制得標題化合物。
實施例33-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟將3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮肟的鈉鹽(2mg)在干燥的DMF(400μl)中與[18F]-2-氟-乙基甲苯磺酸酯(從乙烯二甲苯磺酸酯和[18F]-KF-Kryptofix絡(luò)合物獲得)在100℃下反應10分鐘。反應混合物用tC-18 Sep-Pak色譜柱進行純化，包含目標化合物的級分進一步用半制備反相HPLC法進行純化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流動相為CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速為4ml/min。含有產(chǎn)品的級分(保留時間在12分至13分之間)通過tC-18 Sep-Pak色譜柱，并用1ml乙醇進行洗脫。該醇溶液用0.15M的磷酸鹽緩沖液緩沖，無菌過濾后得到等滲和可注射的溶液。
實施例43-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基)-肟3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮的鈉鹽(2mg)在干燥的DMF(400μl)中，在100℃下與[18F]CH2OTf反應30分鐘。在將反應混合物通過tC-18 Sep-Pak色譜柱進行最初的純化后，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[18F-氟]-甲基-肟用半制備反相HPLC法進行最后的純化，使用C18 Bondclone柱(300×7.8mm)，流動相為CH3CN/0.01M H3PO4(70/30)，流速為4ml/min。產(chǎn)品用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-(2-[18F-氟]-乙基)-肟類似的方法進行配制(實施例3)。
實施例5Ki/IC50測定(結(jié)合試驗)在體外實驗中，使用Gasparini等人在Biorg.Med.Chem.Lett.2002，12，407-409中描述的放射配體置換技術(shù)測定與mGlu5受體的親和力。結(jié)果表明，對于從穩(wěn)定表達人mGlu5受體的L-tk細胞膜(Daggett等人，Neuropharm.1995，34871-886)置換[3H]-2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶而言，3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-甲基-肟的IC50為8nM(Hill系數(shù)為1.08；95％置信區(qū)間為6.0-10.0nM)。使用Cheng-Prusoff方程，通過計算得出Ki為4nM(試驗所用的放射配體濃度為2nM)。
實施例6器官和腦結(jié)構(gòu)分布用兩組體重為250-300g的雄性成年Sprague-Dawley大鼠進行生物分布研究。第一組(n＝3)作為對照組，第二組(n＝3)作為阻斷組。每只動物由一側(cè)尾靜脈接受250-300pmol(0.6-40MBq)的3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟。阻斷組共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶(1mg/kg)，而對照組(n＝3)只給予相應體積的0.9％NaCl。動物在注射后30分鐘處死。器官或腦部區(qū)域如海馬、紋狀體、皮質(zhì)、小腦被取出，并用γ計數(shù)器測量。組織分布以每克濕組織注射的劑量的百分數(shù)表示(％注射的劑量/克器官)。
實施例7用3-(6-甲基-吡啶-2-基乙炔基)-環(huán)己-2-烯酮O-[11C-甲基]-肟進行的腦分布研究的結(jié)果下表展示了歸一化的每克組織注射劑量的百分數(shù)。K1、K2、K3為對照動物的個體值。B1、B2、B3為共同注射2-甲基-6-((3-甲氧基苯基)乙炔基)-吡啶的動物的個體值。
權(quán)利要求
1.游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物 其中R為CH3、(CH2)nI、(CH2)nBr或(CH2)nF，n為1、2、3或4。
2.游離堿形式或酸加成鹽形式的權(quán)利要求1的化合物，其中R為11CH3、(3H)3C、(CH2)n123I、(CH2)n76Br或(CH2)n18F，n為1、2、3或4。
3.如權(quán)利要求1所定義的式I化合物或其鹽的生產(chǎn)方法，其包括如下步驟a) 對于式Ia化合物的生產(chǎn) 其中Ra分別為11CH3或(3H)3C，將式II化合物在堿存在的條件下，分別與11CH3I或C(3H)3I反應， 或者b)對于式Ib化合物的生產(chǎn) 其中Rb分別為(CH2)n18F、(CH2)n123I或(CH2)n76Br，將式III化合物分別與18F、123I或76Br反應， 其中n如權(quán)利要求1所定義，X為OTs或OMs，或?qū)⑹絀I化合物與式IV化合物反應X-RbIV其中X和Rb如上文所定義，并回收所形成的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
4.用作神經(jīng)顯象的標記物的如權(quán)利要求1所定義的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
5.用于在體內(nèi)和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的組合物，其包含如權(quán)利要求1所定義的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物。
6.在體內(nèi)和體外標記涉及mGlu5受體的腦和外周神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的方法，該方法包括將腦組織與權(quán)利要求1所定義的游離堿形式或酸加成鹽形式的式I化合物接觸。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的新的吡啶基乙炔衍生物，它們的制備，它們作為放射指示劑/標記物的用途，以及包含它們的組合物。
文檔編號A61K31/44GK1856468SQ200480027309
公開日2006年11月1日 申請日期2004年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月26日
發(fā)明者F·加斯帕里尼, Y·奧貝松, L·凱斯勒, S·M·阿梅塔梅 申請人:諾瓦提斯公司