專利名稱：組織蛋白酶k抑制劑在嚴(yán)重骨損失疾病中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一般涉及組織蛋白酶K抑制劑和它們?cè)诠巧L(zhǎng)中的用途。特別地，本發(fā)明涉及組織蛋白酶K抑制劑在需要其的患者中刺激新骨形成的用途。
克隆了組織蛋白酶K并且發(fā)現(xiàn)其在破骨細(xì)胞中特異表達(dá)(Tezuka，K.等人，1994，J Biol Chem 2691106-1109；Shi，G.P.等人，1995，F(xiàn)EBS Lett357129-134；Bromme，D.和Okamoto.K.，1995，Biol Chem Hoppe Seyler376379-384-，Bromme，D.等人，1996，J Biol Chem2712126-2132；Drake，F(xiàn).H.等人，1996，J Biol Chem27112511-12516)。與克隆共同發(fā)生的是，將常染色體隱性疾病致密性成骨不全癥定位于組織蛋白酶K基因中存在的突變，致密性成骨不全癥的特征是石骨癥表型與骨吸收降低。迄今為止，已知在組織蛋白酶K基因中鑒定的所有突變都導(dǎo)致無(wú)活性蛋白質(zhì)(Gelb，B.D.等人，1996，Science 2731236-1213)8Johnson，M.R.等人，1996，GenomeRes 61050-1055)。組織蛋白酶K作為’37kDa前酶原合成，該前酶原定位于溶酶體隔室并且推測(cè)在溶酶體隔室中該前酶原在低pH下自體活化成成熟的27 kDa酶(McQueney，M.S.等人，1997，J Biol Chem 27213955-13960；Littlewood-Evans，A.等人，1997，Bone 2081-86)。組織蛋白酶K與組織蛋白酶S最接近，它們?cè)诎被崴缴暇哂?6％序列同一性。組織蛋白酶K的S2P2底物特異性與組織蛋白酶S的相似，在P1和P2位分別偏愛帶正電荷的殘基(如精氨酸)和疏水殘基(如苯丙氨酸或者亮氨酸)(Bromme，D.等人，1996，J Biol Chem2712126-2132；Bossard，M.J.等人，1996，J BiolChem 27112517-12524)。組織蛋白酶K在寬pH范圍內(nèi)具有活性，在pH 4-8具有顯著活性，從而允許在破骨細(xì)胞的吸收陷窩中具有良好的催化活性，其中在所述陷窩中pH為約4-5。骨中的主要膠原——人I型膠原是組織蛋白酶K的良好底物(Kafienah，W.，等人，1998，Biochem J 331727-732)。使用組織蛋白酶K的反義寡核苷酸進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)已經(jīng)表明體外減小的骨吸收可能是由于組織蛋白酶K mRNA的翻譯減少(Inui，T.，等人，1997，J BiolChem 2728109-8112)。已經(jīng)解析了組織蛋白酶K的晶體結(jié)構(gòu)(McGrath，M.E.，等人，1997，Nat Struct Biol 4105-109；Zhao，B.，等人，1997，Nat StructBiol 4109-11)并且已經(jīng)開發(fā)了組織蛋白酶K的基于肽的選擇性抑制劑(Bromme，D.，等人，1996，Biochem J 31585-89-，Thompson，S.K.，et al.，1997，Proc Natl Acad Sci USA 9414249-14254)和組織蛋白酶K的不基于肽的抑制劑(WO 03/020721)。骨吸收主要由多核巨大細(xì)胞——破骨細(xì)胞進(jìn)行。破骨細(xì)胞吸收骨的機(jī)制是通過(guò)最初細(xì)胞粘附到骨組織，然后形成細(xì)胞外隔室或者陷窩。該陷窩通過(guò)質(zhì)子-ATP泵保持在低pH。該酸化的環(huán)境允許骨的最初脫礦質(zhì)作用，然后骨蛋白質(zhì)或者膠原被蛋白酶如半胱氨酸蛋白酶降解(Delaisse，J.M.等人，1980，Biochem J 192365-368；Delaisse，J.等人，1984，Blochem Biophys Res Commun441-447；Delaisse，J.M.等人，1987，Bone 8305-313)。膠原組成骨的有機(jī)基質(zhì)的95％。因此，涉及膠原降解的蛋白酶如組織蛋白酶K是骨更新的基本組分。通過(guò)形成新骨的成骨細(xì)胞和分解或者吸收骨的破骨細(xì)胞之間的平衡不斷重塑骨骼。在一些疾病狀況和老年化中，骨形成和吸收之間的平衡被破壞；骨以較快的速率被除去。長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)吸收的此類長(zhǎng)期不平衡導(dǎo)致較衰弱的骨結(jié)構(gòu)和較高骨折危險(xiǎn)。
根據(jù)本發(fā)明，現(xiàn)在已經(jīng)令人驚奇地發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)動(dòng)物模型中，組織蛋白酶K抑制劑發(fā)揮骨形成效果(見實(shí)施例1)。例如，當(dāng)將組織蛋白酶K抑制劑經(jīng)口施用于卵巢切除的(OVX)獼猴，每天兩次持續(xù)18個(gè)月時(shí)，觀察到對(duì)某些骨的骨形成效應(yīng)，例如，增加的骨礦物質(zhì)密度(BMD)和增加的骨強(qiáng)度。
從而，組織蛋白酶K抑制劑可以尤其用于治療多種骨損失疾病的嚴(yán)重形式，包括例如，骨質(zhì)疏松、骨質(zhì)減少、腫瘤(特別是腫瘤侵入和骨轉(zhuǎn)移(BM))、腫瘤導(dǎo)致的高血鈣(TIH)和多發(fā)性骨髓瘤(MM)。
因此，本發(fā)明提供了治療需要此類治療的患者中嚴(yán)重形式的骨損失疾病的方法，其包括對(duì)所述患者施用有效量的組織蛋白酶K抑制劑。
本發(fā)明還提供了組織蛋白酶K抑制劑在制備治療哺乳動(dòng)物，例如人中嚴(yán)重形式的骨損失疾病的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了組織蛋白酶K抑制劑和其他活性劑的用途，用于治療骨損失疾病，治療哺乳動(dòng)物，例如人中的嚴(yán)重形式的骨損失疾病。
優(yōu)選地，本發(fā)明用于治療疾病和醫(yī)學(xué)病癥，其中用組織蛋白酶K抑制劑刺激骨生長(zhǎng)。例如，本發(fā)明可以用于治療疾病和病癥，其涉及例如，由于不適當(dāng)?shù)墓谴x導(dǎo)致的過(guò)量或者不適宜的骨損失。此類疾病和病癥的實(shí)例包括嚴(yán)重形式的良性疾病和病癥，如多種發(fā)生的骨質(zhì)疏松、牙周病；和特別是惡性疾病，如與多種癌癥相關(guān)的MM和TIH和BM，所述癌癥為例如乳腺癌、前列腺癌、肺癌、腎癌、卵巢癌或骨肉瘤。通常，本發(fā)明也可以用于治療其他情況中的嚴(yán)重骨損失疾病，其中可以使用組織蛋白酶K抑制劑，例如，當(dāng)組織蛋白酶K抑制劑用于骨折愈合、骨壞死或者治療假體松動(dòng)時(shí)。組織蛋白酶K抑制劑尤其可用于治療嚴(yán)重形式的骨代謝疾病，包括骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、和其他炎性關(guān)節(jié)炎，和一般的骨損失，包括年齡相關(guān)的骨損失，尤其牙周病。
此外，組織蛋白酶K抑制劑令人驚奇地提高骨強(qiáng)度，這不僅是由于它們的抗吸收效應(yīng)(這是從文獻(xiàn)預(yù)期的和已知的)，而且由于它們的令人驚奇的骨形成效應(yīng)。優(yōu)選地，組織蛋白酶K抑制劑增加脊骨和股骨礦物質(zhì)密度(BMD)和骨強(qiáng)度。
從而，本發(fā)明涉及組織蛋白酶K抑制劑的用途，用于生產(chǎn)減小哺乳動(dòng)物中，例如，人，更優(yōu)選有危險(xiǎn)患或者已經(jīng)患有骨質(zhì)疏松，例如，嚴(yán)重骨質(zhì)疏松的絕經(jīng)后婦女中骨折，優(yōu)選脊骨和股骨骨折的危險(xiǎn)的藥物。該藥物可以用于增加潛在創(chuàng)傷部位或者實(shí)際創(chuàng)傷部位處的勁度和/或韌性。創(chuàng)傷通常包括骨折、手術(shù)創(chuàng)傷、關(guān)節(jié)置換、矯形步驟，等等。增加骨韌性和/或勁度通常包括增加特定骨，例如，椎骨和長(zhǎng)骨的骨膜下部位處的骨的礦物質(zhì)密度，增加骨的強(qiáng)度，等等。減小骨折的發(fā)生通常包括與未治療的對(duì)照群體相比減小受試者骨折的可能性或者實(shí)際發(fā)生率。此外，股骨礦物質(zhì)密度可以預(yù)測(cè)通常骨折的長(zhǎng)期危險(xiǎn)性(Melton等人，J.of Bone和Miner Res，2003；18(2)312-318)。
本發(fā)明的用途和方法代表對(duì)骨損失疾病的現(xiàn)有療法的改進(jìn)，其中，例如，二膦酸鹽用于預(yù)防或者抑制發(fā)生骨轉(zhuǎn)移或者過(guò)量骨吸收，也用于治療炎性疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎，以及所有形式的骨質(zhì)疏松和骨質(zhì)減少。
從而，在本說(shuō)明書中，術(shù)語(yǔ)“治療”指治療性或者預(yù)防性治療以及治愈或者治療嚴(yán)重骨損失疾病，尤其治療嚴(yán)重骨質(zhì)疏松。
從而，在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療需要此類治療的患者中嚴(yán)重形式的骨損失疾病的方法，其包括對(duì)該患者施用有效量的組織蛋白酶K抑制劑；組織蛋白酶K抑制劑在制備用于治療一種或多種嚴(yán)重形式的骨損失疾病的藥物中的用途；或者組織蛋白酶K抑制劑作為治療一種或多種嚴(yán)重形式的骨損失疾病的治療劑的用途。
對(duì)于這些適應(yīng)癥，適宜的劑量將當(dāng)然取決于例如，將使用的特定組織蛋白酶K抑制劑、施用方式和正治療的病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性而變。然而，通常，指出在約1到約300mg/kg動(dòng)物體重的日劑量下在動(dòng)物中得到滿意的結(jié)果。在更大的哺乳動(dòng)物，例如，人中，所指征的日劑量為約0.01到約2g根據(jù)本發(fā)明的化合物的范圍內(nèi)，方便地例如以分份劑量施用，最多每天四次。組織蛋白酶K抑制劑可以以任意常規(guī)方式，例如，經(jīng)口，例如以片劑或者膠囊劑的形式，或者腸胃外，例如，以注射液或者溶液劑的形式施用。
本發(fā)明還提供了用于治療嚴(yán)重形式的骨損失疾病的藥物組合物，其包括組織蛋白酶K抑制劑結(jié)合至少一種藥物載體或者稀釋劑?？梢砸猿Ｒ?guī)方式生產(chǎn)此類組合物。單位劑型可以含有例如約2.5mg到約1000mg組織蛋白酶K抑制劑。
另一方面，本發(fā)明提供了特定組織蛋白酶K抑制劑的劑量范圍，所述組織蛋白酶K抑制劑即N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺(化合物A)，其是有效且良好耐受的，即對(duì)于患者服用是安全的。優(yōu)選1到50mg化合物A或者其可藥用鹽，其中對(duì)于成年人，即20歲以上的人，化合物A的堿的量為每天1到50mg。更優(yōu)選低于50.1mg化合物A或者其可藥用鹽的劑量，其中化合物A的堿的量小于50.1mg，例如，1mg、5mg、10mg、25mg、50mg；甚至更優(yōu)選1到50mg，例如1mg、5mg、10mg、25mg、50mg；甚至更優(yōu)選5到50mg，例如5mg、10mg、25mg、50mg；甚至更優(yōu)選5到25mg，例如5mg、10mg、25mg；或者其他優(yōu)選的劑量為1、5、10、25或50mg化合物A或者其可藥用鹽，其中化合物A的堿的量為1、5、10、25或50mg?；衔顰的優(yōu)選的鹽為馬來(lái)酸鹽。例如，優(yōu)選的范圍為1到64.1mg化合物A的馬來(lái)酸鹽，例如，小于64.2mg。
用于本發(fā)明的組織蛋白酶K抑制劑通常為形成骨，尤其在骨膜下部位，即在椎骨和長(zhǎng)骨處刺激皮質(zhì)骨形成的那些組織蛋白酶K抑制劑。優(yōu)選地，用于本發(fā)明的藥物組合物和治療方法的組織蛋白酶K抑制劑通常包含組織蛋白酶K抑制劑，例如，在WO 9523222、WO 9630353、WO 9640737、WO 9716433、WO 9801133、WO 9805336、WO 9808802、WO 9846582、WO 9848799、WO 9849152、WO 9850342、WO 9850533、WO 9850534、WO 9911637、WO 9924460、WO 9948911、WO 9959526、WO 9959570、WO 9964399、WO 9966925、WO 0029408、WO 0038687、WO 0039115、WO 0048993、WO 0049011、WO 0054769、WO 0055124、WO 0055125、WO 0055126、WO 0055144、WO 0058296、WO 0059881、WO 0109110、WO 0109169、WO 0119808、WO 0119816、WO 0134153、WO 0134154、WO 0134155、WO 0134156、WO 0134157、WO 0134158、WO 0320721、WO 0320278、WO 0313518、WO 02100849、WO 0298406、WO 0296892、WO 0292563、WO 0288106、WO 0280920、WO 0270519、WO 0270517、WO 0269992、WO 0269901、WO 0257270、WO 0257249、WO 0257248、WO 0257246、WO 0158886、WO 0155123中公開的組織蛋白酶K抑制劑或者式V的化合物，或者其生理學(xué)上可接受的或者可切割的酯或者鹽， 其中
R1是任選取代的(芳基、芳基-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)炔基、雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級(jí)烷基)；R2和R3一起代表低級(jí)亞烷基，其任選被O，S或NR6中斷，從而與它們所連接的碳原子形成環(huán)，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；R4和R5獨(dú)立地是H，或任選取代的(低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)，-C(O)OR7，或-C(O)NR7R8，其中R7是任選取代的(低級(jí)烷基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、環(huán)烷基、二環(huán)烷基、二環(huán)烷基或雜環(huán)基)，R8是H，或任選取代的(低級(jí)烷基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、環(huán)烷基、二環(huán)烷基、二環(huán)烷基或雜環(huán)基)；或R4和R5一起代表低級(jí)亞烷基，任選被O，S或NR6中斷，從而與它們所連接的碳原子形成環(huán)，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；或R4是H或任選取代的低級(jí)烷基，R5是式-X2-(Y1)n-(Ar)p-Q-Z的取代基其中Y1是O、S、SO、SO2、N(R6)SO2、N-R6、SO2NR6、CONR6或NR6CO；N是0或者1；P是0或者1；X2是低級(jí)亞烷基或當(dāng)n是0時(shí)，X2也是被O、S、SO、SO2、NR6、SO2NR6、CONR6或NR6CO中斷的C2-C7-亞烷基，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；Ar是亞芳基；Z是羥基、酰氧基、羧基、酯化的羧基、酰胺化的羧基、氨基磺?；?、(低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)氨基磺?；?低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)磺?；被驶换騔是四唑基、三唑基或咪唑基；Q是直接鍵、低級(jí)亞烷基、Y1-低級(jí)亞烷基或被Y1中斷的C2-C7-亞烷基；X1是-C(O)-、-C(S)-、-S(O)-、-S(O)2-，或-P(O)(OR6)-，R6如上面定義；Y是氧或者硫；L是任選取代的-Het-、-Het-CH2-或-CH2-Het-，Het是選自O(shè)，N或S的雜原子；并且X是0或1；并且上面定義中的芳基代表碳環(huán)芳基或者雜環(huán)芳基。
式V的特定化合物為這樣的化合物，其中R1為取代的苯基，例如而該取代基為任選取代的含氮雜環(huán)取代基(＝HetIV)。該取代基可以在苯環(huán)的2-或者3-位，然而優(yōu)選在4-位。HetIV表示一種雜環(huán)環(huán)系統(tǒng)，其含有至少一個(gè)氮原子，2到10，優(yōu)選3到7，最優(yōu)選4或5個(gè)碳原子，和任選地選自O(shè)、S或者優(yōu)選N的一種或多種額外的雜原子。
HetIV可以包含不飽和的，例如，芳族含氮雜環(huán)；然而優(yōu)選包含飽和的含氮雜環(huán)。尤其優(yōu)選的飽和的含氮雜環(huán)是哌嗪基，優(yōu)選哌嗪-1-基，或者哌啶基，優(yōu)選哌啶-4-基。
HetIV可以被一個(gè)或多個(gè)取代基，例如高達(dá)5個(gè)取代基取代，所述取代基獨(dú)立地選自鹵素、羥基、氨基、硝基，任選取代的C1-4烷基(例如，被羥基、烷氧基、氨基，任選取代的烷基氨基、任選取代的二烷基氨基、芳基或者雜環(huán)基取代的烷基)，C1-4烷氧基。優(yōu)選地，HetIV在氮原子上被取代，最優(yōu)選地在氮原子上被單取代。HetIV的優(yōu)選取代基是C1-C7低級(jí)烷基、C1-C7低級(jí)烷氧基-C1-C7低級(jí)烷基、C5-C10芳基-C1-C7低級(jí)烷基，或C3-C8環(huán)烷基。
本發(fā)明的尤其優(yōu)選的實(shí)施方案提供了式VI的化合物或者其可藥用鹽或者其中X是CH或N，
R9是H、C1-C7低級(jí)烷基、C1-C7低級(jí)烷氧基-C1-C7低級(jí)烷基、C5-C10芳基-C1-C7低級(jí)烷基，或C3-C8環(huán)烷基。
從而R9作為C1-C7低級(jí)烷基的特定實(shí)例是甲基、乙基、正丙基或者異丙基。R作為C1-C7低級(jí)烷氧基-C1-C7低級(jí)烷基的特定實(shí)例是甲氧基乙基。R作為C5-C10芳基-C1-C7低級(jí)烷基的特定實(shí)例是芐基。R作為C3-C8環(huán)烷基的特定實(shí)例是環(huán)戊基。式VI的特定化合物的實(shí)例是N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-(哌嗪-1-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-乙基-哌-1-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-[4-(1-丙基)-哌嗪-1-基]-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-(4-芐基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-(1-丙基-哌啶-4-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-[1-(2-甲氧基-乙基)-哌啶-4-基]-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(1-異丙基-哌啶-4-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-(1-環(huán)戊基-哌啶-4-基)-苯甲酰胺；N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(1-甲基-哌啶-4-基)-苯甲酰胺，和N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(哌啶-4-基)-苯甲酰胺。
用于本發(fā)明的最優(yōu)選的組織蛋白酶K抑制劑是N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-[4-(1-丙基)-哌嗪-1-基]-苯甲酰胺或者其生理學(xué)上可接受的鹽。
上面提到的所有組織蛋白酶K抑制劑都是從文獻(xiàn)已知的。這包括它們的生產(chǎn)(見，例如US 6,353,017B1，pp.15-17)。
用于本發(fā)明的組織蛋白酶K抑制劑的備選類別包含式VII的化合物，或者其生理學(xué)上可接受的鹽或者可切割的酯或者鹽
其中R10是H、-R14、-OR14或NR13R14，其中R13是H、低級(jí)烷基或C3到C10環(huán)烷基，R14是低級(jí)烷基或C3到C10環(huán)烷基，并且其中R13和R14獨(dú)立地任選被鹵、羥基、低級(jí)烷氧基、CN、NO2、或任選單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基取代；R11是-CO-NR15R16、-NH-CO-R15、-CH2-NH-C(O)-R15、-CO-R15、-S(O)-R15、-S(O)2-R15，-CH2-CO-R15或-CH2-NR15R16，其中R15是芳基、芳基-低級(jí)烷基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基-低級(jí)烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級(jí)烷基，R16是H、芳基、芳基-低級(jí)烷基、芳基-低級(jí)-烯基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基-低級(jí)烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級(jí)烷基，或其中R15和R16與它們連接的氮原子一起形成N-雜環(huán)基，其中N-雜環(huán)基表示飽和的、部分不飽和的或者芳族含氮雜環(huán)部分，其通過(guò)其氮原子連接，所述部分具有3到8個(gè)環(huán)原子，任選還含有1、2或3個(gè)雜原子，其選自N、NR17、O、S、S(O)或S(O)2，其中R17是H或任選取代的(低級(jí)烷基，羧基，?；?包括低級(jí)烷基?；?，例如甲?；?，乙?；蛘弑；?，或者芳基?；?，例如苯甲?；?，酰氨基，芳基，S(O)或S(O)2)，并且其中N-雜環(huán)基任選以二環(huán)結(jié)構(gòu)稠合，例如與苯或者吡啶環(huán)稠合，其中N-雜環(huán)基任選以螺旋結(jié)構(gòu)與3到8元環(huán)烷基或者雜環(huán)環(huán)連接，其中雜環(huán)環(huán)具有3到10個(gè)環(huán)原子數(shù)，并且含有1到3個(gè)雜原子，該雜原子選自N、NR16、O、S、S(O)或S(O)2，其中R16如上面定義，并且其中雜環(huán)基表示具有3到10個(gè)環(huán)原子數(shù)并且含有1到3個(gè)雜原子的環(huán)，所述雜原子選自N、NR17、O、S、S(O)或S(O)2其中R17如上文定義)，并且其中R15和R16獨(dú)立地任選被一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)，例如，1-3個(gè)基團(tuán)取代，所述基團(tuán)選自鹵、羥基、氧代、低級(jí)烷氧基、CN或NO2，或任選取代的(任選單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基、低級(jí)-烷氧基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、N-雜環(huán)基或N-雜環(huán)基-低級(jí)烷基(其中任選取代包含1到3個(gè)取代基，其選自鹵、羥基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基-低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基-羰基、CN、NO2、N-雜環(huán)基或N-雜環(huán)基-低級(jí)烷基，或任選單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基；R12獨(dú)立地是H，或任選取代的(低級(jí)烷基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、C3-C10環(huán)烷基、C3-C10環(huán)烷基-低級(jí)烷基、雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級(jí)烷基)，并且其中R2任選被鹵、羥基、氧代、低級(jí)烷氧基、CN、NO2，或任選單-或二-低級(jí)烷基取代的氨基取代。
鹵或鹵素表示I、Br、Cl或F。
術(shù)語(yǔ)“低級(jí)”在上文或者下文中與有機(jī)基團(tuán)或者化合物有關(guān)時(shí)分別定義了如分枝的或者不分枝的，具有多達(dá)并且包括7個(gè)，優(yōu)選多達(dá)并且包括5個(gè)，有利地1、2或3個(gè)碳原子。
低級(jí)烷基是分枝的或者不分枝的并且含有1到7個(gè)碳原子，優(yōu)選1-5個(gè)碳原子。低級(jí)烷基代表例如，甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、異丁基、叔丁基或新戊基(2，2-二甲基丙基)。
鹵-取代的低級(jí)烷基是被多達(dá)6個(gè)鹵原子取代的C1-C7低級(jí)烷基。
低級(jí)烷氧基是分枝的或者不分枝的并且含有1到7個(gè)碳原子，優(yōu)選1-4個(gè)碳原子。低級(jí)烷氧基代表例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、異丙氧基、異丁氧基或叔丁氧基。
低級(jí)烯、烯基或者烯氧基是分枝或不分枝的并且含有2到7個(gè)碳原子，優(yōu)選2-4個(gè)碳原子并且含有至少一個(gè)碳-碳雙鍵。低級(jí)烯、低級(jí)烯基或者低級(jí)烯氧基代表例如乙烯基、丙-1-烯基、烯丙基、丁烯基、異丙烯基或者異丁烯基和其氧化等價(jià)物。
低級(jí)炔、炔基或者炔氧基是分枝或不分枝的并且含有2到7個(gè)碳原子，優(yōu)選2-4個(gè)碳原子并且含有至少一個(gè)碳-碳三鍵。低級(jí)炔或炔基代表例如，乙炔基、丙-1-炔基、炔丙基、丁炔基、異丙炔基或者異丁炔基和其氧化等價(jià)物。
在本說(shuō)明書中，含有氧的取代基，例如，烷氧基、烯氧基、炔氧基、羰基等等包括它們的含硫同系物，例如，硫代烷氧基、硫代烯氧基、硫代炔氧基、硫代羰基、砜、亞砜等等。
芳基代表碳環(huán)和雜環(huán)芳基。
碳環(huán)芳基代表單環(huán)、二環(huán)或者三環(huán)芳基，例如，苯基或者被1、2或3個(gè)基團(tuán)單-、二-或三-取代的苯基，所述基團(tuán)選自低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、芳基、羥基、鹵素、氰基、三氟甲基、低級(jí)亞烷基二氧基和氧化-C2-C3-亞烷基和其他取代基，例如，實(shí)施例中描述的取代基；或者1-或2-萘基；或1-或2-菲基。低級(jí)亞烷基二氧基是連接到苯基的兩個(gè)相鄰碳原子的二價(jià)取代基，例如，亞甲二氧基或者亞乙二氧基。氧化-C2-C3-亞烷基也是連接到苯基的兩個(gè)相鄰碳原子的二價(jià)取代基，例如，氧化乙烯基或者氧化丙烯基。氧化-C2-C3-亞烷基-苯基的實(shí)例是2，3-二氫苯并呋喃-5-基。
作為碳環(huán)芳基優(yōu)選的是萘基、苯基或者任選取代的苯基，例如，實(shí)施例中描述的苯基，例如，被低級(jí)烷氧基、苯基、鹵素、低級(jí)烷基或三氟甲基單取代或者二取代的苯基。
雜環(huán)芳基代表單環(huán)或者二環(huán)雜芳基，例如，吡啶基、吲哚基、喹喔啉基、喹啉基、異喹啉基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并硫代吡喃基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、唑基、異唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基和取代的，特別是如上述定義的單取代或二取代的任意所述基團(tuán)。
優(yōu)選地，雜環(huán)芳基是吡啶基、吲哚基、喹啉基、吡咯基、噻唑基、異唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基和取代的，特別是如上述定義的單取代或二取代的任意所述基團(tuán)。
環(huán)烷基代表飽和的環(huán)烴，其任選被含有3到10個(gè)環(huán)原子的低級(jí)烷基取代并且有利地是任選被低級(jí)烷基取代的環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、或者環(huán)辛基。
N-雜環(huán)基如上定義。優(yōu)選的N-雜環(huán)取代基是任選取代的吡咯烷、吡咯、二唑、三唑、四唑、咪唑、唑、噻唑、吡啶、嘧啶、三嗪、哌啶、哌嗪、嗎啉、鄰苯二甲酰亞胺、乙內(nèi)酰脲、唑烷酮或者2，6-二-哌嗪，例如，如下文實(shí)施例中描述。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了式VIII的化合物，或者其可藥用鹽或者酯 其中R12如上定義并且R15和R16分別如上面關(guān)于R15和R16定義的。
R12優(yōu)選為R12’，其是低級(jí)烷基，例如直鏈或者更優(yōu)選地支鏈C1-C6烷基，例如特別是2-乙基丁基、異丁基、或2，2-二甲基丙基；或C3-C6環(huán)烷基，特別是環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
R15和R16可以為使得R15和R16與它們連接的氮原子一起形成N-雜環(huán)基。R15優(yōu)選為任選取代的(芳基-低級(jí)-烷基、雜環(huán)基-芳基、N-雜環(huán)基-芳基或芳基-N-雜環(huán)基(其中N-雜環(huán)基如上定義)。R15優(yōu)選被1-4個(gè)取代基任選取代，所述取代基選自鹵、羥基、硝基、氰基、低級(jí)-烷基、低級(jí)-烷氧基或低級(jí)-烷氧基-低級(jí)-烷基。例如，R15為4-甲氧基-芐基、3-甲氧基-芐基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-芐基、4-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-芐基、1-甲基-1-苯基-乙基、2-(4-甲氧基-苯基)-1，1-二甲基-乙基、2-(4-氟-苯基)-1，1-二甲基-乙基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙基、2-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-1，1-二甲基-乙基、2-{4-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-1，1-二甲基-乙基、2-{3-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-1，1-二甲基-乙基、2-[3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基]-1，1-二甲基-乙基、2-[3-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-1，1-二甲基-乙基、1，1-二甲基-2-(3-吡咯烷-1-基-苯基)-乙基、2-{3-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-1，1-二甲基-乙基、2-(4-甲氧基-苯基)-乙基、2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙基、2-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙基、2-{4-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-乙基、2-(3-甲氧基-苯基)-乙基、2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙基、2-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙基、2-吡咯-1-基-乙基、3-哌啶-1-基-丙基、2-(4-甲氧基-苯基)-2-甲基-丙基、2-甲基-2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙基、2-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-2-甲基-丙基、2-{4-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-2-甲基-丙基、2-{4-[嘧啶-1-基]-苯基}-2-甲基-丙基、4-(3-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基-甲基、4-(4-甲氧基-苯基)-哌嗪-1-基-甲基、1-甲基-1-(1-苯基-環(huán)丙基)-乙基。例如，R15和R16與它們連接的氮原子一起形成的N-雜環(huán)基是4-(2-吡啶-4-基-乙基)-哌嗪-1-基、[4-(2-吡啶-2-基-乙基)-哌嗪-1-基、4-吡啶-4-基甲基-哌嗪-1-基、4-(2-哌啶-1-基-乙基)-哌嗪-1-基、4-(2-吡咯烷-1-基-乙基)-哌嗪-1-基、4-(2-二乙基氨基-乙基)-哌嗪-1-基、4-(3-二乙基氨基-丙基)-哌嗪-1-基、4-(1-甲基-哌啶-4-基)-哌嗪-1-基、4-吡咯烷-1-基-哌啶-1-基、4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基。
在優(yōu)選實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了式IX的化合物或者其可藥用鹽或者酯的根據(jù)本發(fā)明的用途 其中R12如上定義并且R15’如上面關(guān)于R15定義。
R12優(yōu)選為R12’，其是低級(jí)烷基，例如直鏈或更優(yōu)選地支鏈C1-C6烷基，例如特別是2-乙基丁基、異丁基、或2，2-二甲基丙基；或C3-C6環(huán)烷基，特別是環(huán)丙基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
R15’優(yōu)選為任選取代的(芳基-低級(jí)-烷基、雜環(huán)基-芳基、N-雜環(huán)基-芳基或芳基-N-雜環(huán)基(其中N-雜環(huán)基如上定義)。R15’優(yōu)選被1-4個(gè)取代基取代，所述取代基選自鹵、羥基、硝基、氰基、低級(jí)-烷基、低級(jí)-烷氧基、低級(jí)-烷氧基-羰基或低級(jí)-烷氧基-低級(jí)-烷基。例如，R15’為4-甲氧基-苯基、4-(1-丙基-哌啶-4-基)-苯基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基、4-[1-(2-甲氧基-乙基)-哌啶-4-基]-苯基、4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯基、3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙?；?、3-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙?；?、4-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基、4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基、4-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基、4-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基、4-哌嗪-1-基-苯基、4-[4-(羧酸叔-丁基酯)哌嗪-1-基-]-苯基、3-[4-(羧基酸叔-丁基酯)哌嗪-1-基-]-苯基、3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基、3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基、3-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基、3-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基、3-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基、3-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基、3-(2-二甲基氨基-乙氧基)-4-甲氧基-苯基、4-二甲基氨基甲基-苯基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯基、4-[1-(2-甲氧基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-苯基、4-甲氧基-3-(2-哌啶-1-基-乙氧基)-苯基、3-[4-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基]-2，2-二甲基-丙?；?、3-[4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙?；?、3-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-丙?；?、3-[3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基]-2，2-二甲基-丙?；?、3-{3-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-2，2-二甲基-丙?；?、3-{3-[4-(2-乙氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-苯基}-2，2-二甲基-丙?；?、3-(3-吡咯烷-1-基-苯基)-丙酰基、2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-異丁基、2-(4-甲氧基-苯基)-乙?；?-(3-甲氧基-苯基)-乙酰基、2-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙酰基、2-[4-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙?；?-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-苯基]-乙?；?-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-乙?；?、2-[4-(2-二乙基氨基-乙基氨基)-苯基]-異丁基、2-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-異丁基。
尤其優(yōu)選的化合物是如在WO 03/020278A1，pp.17-52中公開的實(shí)例。
作為用于本發(fā)明的組織蛋白酶K化合物的備選類別的上述所有組織蛋白酶K抑制劑從文獻(xiàn)已知。這包括它們的生產(chǎn)(見例如WO 03/020278A1，pp.9-12)。
組織蛋白酶K抑制劑可以作為唯一活性成分或者例如，作為輔劑與另一種治療劑(其他活性劑)結(jié)合施用。其他活性劑的實(shí)例包括，但不限于，用于治療或者預(yù)防骨吸收疾病、瘤性疾病、關(guān)節(jié)炎、高組織蛋白酶K活性的存在加劇的疾病或者組織蛋白酶K抑制劑的存在改善的疾病；激活骨細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制癌細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制細(xì)胞中組織蛋白酶K的表達(dá)；和抑制瘤性細(xì)胞的生長(zhǎng)的活性劑。其他活性劑可以在組織蛋白酶K抑制劑之前、之后或者與組織蛋白酶K抑制劑同時(shí)施用。在這些實(shí)施方案中，組織蛋白酶K抑制劑發(fā)揮它們對(duì)患者的治療效果的時(shí)間與所述其他活性劑發(fā)揮對(duì)該患者的治療效果的時(shí)間重疊。
在一個(gè)實(shí)施方案中，其他活性劑用于治療或預(yù)防骨損失疾病(例如，骨質(zhì)疏松)。用于治療或預(yù)防骨損失疾病的其他活性劑包括，但不限于，不同于第一種組織蛋白酶K抑制劑的其他組織蛋白酶K抑制劑(實(shí)例見下文)、二膦酸鹽(例如，eitodronate、氨羥二磷酸二鈉、阿侖特羅、利塞膦酸鈉、唑來(lái)膦酸(zoledronic acid)、伊班膦酸鹽(ibandronate)、氯屈膦酸二鈉或替魯膦酸鈉)，選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(SERMs)，如他莫昔芬、雷洛昔芬、甲羥孕酮、甲硝唑和孕三烯酮、甲狀旁腺激素(“PTH”)或其片段或類似物，釋放內(nèi)源PTH的化合物(即，PTH釋放化合物)和降鈣素和其片段或類似物。
在另一實(shí)施方案中，所述其他活性劑用于治療或者預(yù)防瘤性疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述其他治療劑用于治療或預(yù)防癌癥(例如，乳腺、卵巢、子宮、前列腺或者下丘腦的癌癥)。用于治療或預(yù)防癌癥或瘤性疾病的其他治療劑包括，但不限于，烷化劑(例如，亞硝基脲)、抗代謝物(例如，甲氨蝶呤或者羥基脲)、依托泊苷、喜樹堿、博來(lái)霉素、多柔比星、柔紅霉素、秋水仙素、伊立替康、喜樹堿、環(huán)磷酰胺、5-氟尿嘧啶、順鉑、卡鉑、甲氨蝶呤、曲美沙特、erbitux、沙立度胺、紫杉醇、長(zhǎng)春花生物堿(例如，長(zhǎng)春堿或長(zhǎng)春新堿)或者微管穩(wěn)定劑(例如，埃坡霉素)。
用于治療或預(yù)防癌癥的其他活性劑的其他闡明性實(shí)例包括，但不限于異唑醋酸；阿柔比星；鹽酸阿可達(dá)唑；阿克羅寧；阿多來(lái)新；阿地白介素；六甲密胺；安波霉素；阿美坦醌；氨魯米特；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；天冬酰胺酶；曲林菌素；氮雜胞苷；氮替哌；阿佐霉素；巴馬司他；芐替哌；比卡魯胺；鹽酸必?？ぃ欢谆撬犭p奈法德；比折來(lái)新；硫酸博來(lái)霉素；布喹那鈉；溴匹利明；白消安；放線菌素C；卡魯睪酮；卡拉酰胺；卡貝替姆；卡鉑；卡莫司??；鹽酸卡柔比星；卡折來(lái)新；西地芬戈；苯丁酸氮芥；西羅里霉素；順鉑；克拉屈濱；甲磺酸克雷斯托；環(huán)磷酰胺；阿糖胞苷；達(dá)卡巴嗪；放線菌素D；鹽酸柔紅霉素；脫氧氮雜胞苷；右奧馬鉑；地扎胍寧；甲磺酸地扎胍寧；地吖醌；多西他賽；阿霉素；鹽酸阿霉素；屈洛昔芬；檸檬酸屈洛昔芬；丙酸甲雄烷酮；偶氮霉素；依達(dá)曲沙；鹽酸艾佛鳥氨酸；依沙蘆星；恩絡(luò)鉑；恩普氨酯；依匹哌啶；鹽酸表柔比星；厄布洛唑；鹽酸依索比星；雌莫司??；雌氮芥磷酸鈉；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺；鹽酸法羅唑啉；法扎拉濱；維甲酰酚胺；氟尿苷；磷酸氟達(dá)拉濱；氟尿嘧啶；氟環(huán)胞苷；磷喹酮；佛司曲辛鈉；吉西他濱；鹽酸吉西他濱；羥基脲；鹽酸伊達(dá)比星；異環(huán)磷酰胺；伊莫佛新；ImiDs；白介素II(包括重組白介素II，或rIL2)，干擾素-2a；α干擾素-2b；α干擾素-n1；α干擾素-n3；β干擾素-Ia；γ-干擾素-Ib；異丙鉑；鹽酸依立替康；生長(zhǎng)妥林；來(lái)曲唑；醋酸亮丙瑞林；鹽酸利阿唑；洛美曲索鈉；羅氮芥；鹽酸洛索蒽醌；馬丙考；美登素；鹽酸氮芥；醋酸甲地孕酮；醋酸美侖孕酮；美法侖；美洛格瑞；巰嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤鈉；氯苯氨啶；四甲尿烷亞胺；米汀多酰胺；mitocarcin；絲裂紅素；絲裂吉菌素；絲裂馬菌素；絲裂霉素；絲裂帕菌素；米托坦；鹽酸米托蒽醌；麥考酚酸；洛可達(dá)唑；諾加拉霉素；奧馬鉑；亞磺酰吡啶；紫杉醇；天門冬酰胺酶；培利霉素；戊氮芥；硫酸培來(lái)霉素；哌磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；鹽酸必散特?。黄湛顾?；普洛美坦；卟吩姆鈉；泊非霉素；松龍苯芥；鹽酸甲基芐肼；嘌呤霉素；鹽酸嘌呤霉素；吡唑霉素；利波腺苷；洛太米特；沙芬戈；鹽酸沙芬戈；SelCid；司莫司??；雙曲秦；斯帕磷酸鈉；稀疏霉素；鹽酸鍺螺胺；螺旋氮芥；順螺鉑；鏈黑霉素；鏈脲霉素；磺氯苯脲；他利霉素；替可加蘭鈉；喃氟啶；鹽酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；臺(tái)羅西隆；睪內(nèi)酯；硫咪嘌呤；硫鳥嘌呤；替莫唑胺；替莫唑胺；噻替哌；噻唑呋林；替拉扎明；枸櫞酸托瑞米芬；甲基諾龍；磷酸曲西瑞賓；曲美沙特；三甲曲沙；曲普瑞林；鹽酸妥布氯唑；尿嘧啶氮芥；烏瑞替哌；伐普肽；維替泊芬；硫酸長(zhǎng)春堿；硫酸長(zhǎng)春新堿；長(zhǎng)春地辛；硫酸長(zhǎng)春地辛；硫酸長(zhǎng)春匹定；硫酸長(zhǎng)春苷酯；硫酸環(huán)氧長(zhǎng)春堿；長(zhǎng)春瑞濱；硫酸異長(zhǎng)春堿；硫酸長(zhǎng)春氮芥；伏羅唑；折尼拉??；新制癌菌素；鹽酸佐柔比星。
用于治療或者預(yù)防癌癥的其他活性劑包括，但不限于20-表-1，25二羥基維生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龍；阿柔比星；acylfulvene；adecypenol；阿多來(lái)新；阿地白介素；ALL-TK拮抗劑；六甲密胺；安巴司丁；amidox；阿米斯?。话被阴１?；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心蓮內(nèi)酯；血管生成抑制劑；拮抗劑D；拮抗劑G；安雷利克斯；抗背部化形態(tài)發(fā)生蛋白質(zhì)-1(anti-dorsalizing morphogenetic protein-1)；抗雄激素物質(zhì)，前列腺癌；抗雌激素藥；抗瘤酮；甘氨酸艾菲地可寧；程序性細(xì)胞死亡基因調(diào)節(jié)劑；程序性細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)物；脫嘌呤核酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脫氨酶；asulacrine；阿他美坦；阿曲氮芥；axinastatin 1；axinastatin 2；axinastatin 3；阿扎司瓊；阿扎毒素；重氮酪氨酸；漿果赤霉素III衍生物；balanol；巴馬司他；BCR/ABL拮抗劑；benzochlorins；苯并吡喃酮，苯甲?；宙邏A(benzoylstaurosporine)；β內(nèi)酰胺衍生物；β-alethine；betaclamycin B；betulinic acid；bFGF抑制劑；比卡魯胺；必桑郡；bisaziridinylspermine；雙奈法德；bistratene A；比折來(lái)新；breflate；溴匹利明；布朵替坦；buthionine sulfoximine；鈣泊三醇；calphostin C；喜樹堿衍生物；金絲雀痘IL-2；卡培他濱；carboxamide-氨基-三唑；羧基酰氨基三唑；CaRest M3；CARN 700；軟骨衍生的抑制劑；卡折來(lái)新；酪蛋白激酶抑制劑(ICOS)；細(xì)胞周期抑制劑(例如，flavopiridolA，tryprostatin B，p19ink4D)；細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(例如，roscovitine，olomucine和嘌呤類似物)；MAP激酶抑制劑(CNI-1493)；澳粟精胺；天蠶抗菌肽B；西曲瑞克；chlorlns；chloroquinoxalinesulfonamide；西卡前列素；順式-卟啉；克拉屈濱；氯米芬類似物；克霉唑；collismycin A；collismycin B；考布他汀A4；考布他汀類似物；conagenin；crambescidin 816；克雷斯托；cryptophycin 8；cryptophycin A衍生物；curacin A；cyclopentanthraquinones；cycloplatam；cypemycin；cytarabineocfosfate；細(xì)胞溶解性因子；磷酸己烷雌酚；達(dá)昔單抗；脫氧氮雜胞苷；dehydrodidemnin B；地洛瑞林；地塞米松；dexifosfamide；右丙亞胺；右維拉帕米；地吖醌；代代寧B；didox；diethylnorspermine；二氫-5-氮雜胞苷；二氫紫杉醇，9-；dioxamycin；二苯基螺旋氮芥；多西他賽；二十二醇；多拉司瓊；脫氧氟尿苷；著洛西芬；屈大麻酚；duocarmycin SA；依布硒；依考莫司??；依地福新；依決洛單抗；艾佛鳥氨酸；欖烯；乙嘧替氟；表柔比星；依立雄胺；雌莫司汀類似物；雌激素激動(dòng)劑；雌激素拮抗劑；依他硝唑；磷酸依托泊苷；依西美坦；法曲唑；法扎拉濱；維甲酰酚胺；非格司亭；非那雄胺；flavopiridol；氟卓斯??；fluasterone；氟達(dá)拉濱；fluorodaunorunicin hydrochloride；伏芬尼美司；福美司坦；佛司曲辛；福替目丁；gadolinium texaphyrin；硝酸鎵；加洛他濱；加尼瑞克；明膠酶抑制劑；吉西他濱；谷胱甘肽抑制劑；hepsulfam；heregulin；hexamethylenebisacetamide；金絲桃素；伊班膦酸；伊達(dá)比星；艾多昔芬；伊決孟酮；伊莫佛新；伊洛馬司他；imidazoacridones；咪喹莫特；免疫刺激肽；胰島素樣生長(zhǎng)因子-1受體抑制劑；干擾素激動(dòng)劑；干擾素；白介素；碘芐胍；碘阿霉素；甘薯黑疤霉醇，4-；伊羅普拉；伊索格拉定；isobengazole；isohomohalicondrin B；伊他司瓊；jasplakinolide；kahalalide F；lamellarin-N triacetate；生長(zhǎng)妥林；leinamycin；來(lái)格司亭；硫酸香菇多糖；leptolstatin；來(lái)曲唑；白血病抑制因子；白細(xì)胞α干擾素；醋酸亮丙瑞林+雌激素+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；線性多胺類似物；親脂性二糖肽；親脂性鉑化合物；lissoclinamide 7；洛巴鉑；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼達(dá)明；洛索蒽醌；洛伐他汀；羅唑利賓；勒托替康；lutetiumtexaphyrin；lysofylline；溶解肽；美登素；mannostatin A；馬馬司他；馬丙考；脈絲平；基質(zhì)溶解因子抑制劑；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑；美洛格瑞；merbarone；美替瑞林；甲硫氨酸酶；甲氧氯普安；MIF抑制劑；米非司酮；米替福星；米立司亭；錯(cuò)配的雙鏈RNA；丙米腙；二溴衛(wèi)矛醇；絲裂霉素類似物；胺硝萘酞胺；mitotoxin成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-皂草素；米托蒽醌；莫法羅??；莫格拉司替姆；單克隆抗體，人絨毛膜促性腺激素；單磷酰類脂A+分枝桿菌細(xì)胞壁sk；單哌潘生??；多藥物抗性基因抑制劑；基于多腫瘤抑制劑1的治療；芥子抗癌劑；mycaperoxide B；分枝桿菌細(xì)胞壁提取物；myriaporone；N-乙酰基地那林；N-取代的苯甲酰胺；奈法瑞林；nagrestip；納洛酮+噴他佐辛；napavin；naphterpin；納妥格拉斯?。荒芜_(dá)鉑；奈莫柔比星；奈立膦酸；中性內(nèi)肽酶；尼魯米特；nisamycin；氧化一氮調(diào)節(jié)劑；一氧化二氮抗氧化劑；nitrullyn；O6-芐基鳥嘌呤；奧曲肽；okicenone；寡核苷酸；奧那斯酮；昂丹司瓊；昂丹司瓊；oracin；口服細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑；奧馬鉑；奧沙特隆；奧沙利鉑；oxaunomycin；紫杉醇；紫杉醇類似物；紫杉醇衍生物；palauamine；palmitoylrhizoxin；帕米膦酸；panaxytriol；巴洛米芬；三羥水楊胺；泊澤尼普定；天門冬酰胺酶；培得星；木聚硫鈉；噴司他??；pentrozole；全氟溴烷；哌磷酰胺；紫蘇子醇；phenazinomycin；乙酸苯基酯；磷酸酶抑制劑；溶血鏈球菌Su；鹽酸毛果蕓香堿；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A；placetin B；纖溶酶原激活物抑制劑；鉑絡(luò)合物；鉑化合物；鉑-三胺絡(luò)合物；卟吩姆鈉；泊非霉素；潑尼松；丙基雙-吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶體抑制劑；基于蛋白A的免疫調(diào)節(jié)劑；蛋白激酶C抑制劑；蛋白激酶C抑制劑，microalgal；蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶抑制劑；嘌呤核苷磷酸化酶抑制劑；紫紅素；吡唑啉吖啶；pyridoxylated血紅蛋白聚氧乙烯綴合物；raf拮抗劑；雷替曲塞；雷莫司瓊；視黃酸(例如，9-順式RA)；組蛋白脫乙?；敢种苿?例如，丁酸鈉，suberoylanilide hydroxamic acid)；TRAIL；ras法呢基蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移酶抑制劑；ras抑制劑；ras-GAP抑制劑；脫甲基化雷替尼卜定；羥乙磷酸錸Re 186；根霉素；核酶；RII retinamide；洛太米特；rohitukine；胞壁酰基二肽；羅喹美克；rubiginone B1；ruboxyl；沙芬戈；saintopin；SarCNU；sarcophytol A；沙格司亭；Sdi 1模擬物；司莫司??；衰老衍生的抑制劑1；有義寡核苷酸；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)劑；單鏈抗原結(jié)合蛋白；西作非蘭；索布佐山；sodium borocaptate；苯乙酸鈉；solverol；生長(zhǎng)調(diào)節(jié)素結(jié)合蛋白；索納明；斯帕磷酸；spicamycin D；螺旋氮芥；斯耐潘定；spongistatin 1；角鯊胺；干細(xì)胞抑制劑；干細(xì)胞分裂抑制劑；stipiamide；溶基質(zhì)蛋白酶抑制劑；sulfinosine；超活性血管活性腸肽拮抗劑；suradista；蘇拉明；苦馬豆堿；合成的葡萄糖胺聚糖；他莫司?。凰舴襪ethiodide；塔羅氮芥；他佐羅??；替可加蘭鈉；喃氟啶；tellurapyrylium；端粒末端轉(zhuǎn)移酶抑制劑；替莫泊芬；替莫唑胺；替尼泊苷；tetrachlorodecaoxide；tetrazomine；thaliblastine；噻可拉林；血小板生成素；血小板生成素模擬物；胸腺法新；胸腺生成素受體激動(dòng)劑；胸腺曲南；促甲狀腺激素；本紫紅素乙酯錫(tin ethyl etiopurpurin)；替拉扎明；二氯環(huán)戊二烯鈦；topsentin；托瑞米芬；全能干細(xì)胞因子；翻譯抑制劑；維甲酸；三乙酰基尿苷；曲西瑞賓；曲美沙特；曲普瑞林；托烷司瓊；妥羅雄脲；酪氨酸激酶抑制劑；tyrphostins；UBC抑制劑；烏苯美司；尿殖竇衍生的生長(zhǎng)抑制劑因子；尿激酶受體拮抗劑；伐普肽；variolin B；載體系統(tǒng)，紅細(xì)胞基因療法；維拉雷瑣；藜蘆明；verdins；維替泊芬；長(zhǎng)春烯堿；vinxaltine；vitaxin；伏羅唑；扎諾特隆；折尼拉??；zilascorb；和凈司他丁替馬拉美。優(yōu)選的額外抗癌藥物是5-氟尿嘧啶和亞葉酸。
根據(jù)前面的內(nèi)容，本發(fā)明在再一方面提供了如上定義的方法，其包括共同施用，例如，相伴或者順序施用治療有效量的組織蛋白酶K抑制劑，和至少第二種藥品，所述第二種藥品是針對(duì)例如，如上指出的骨損失疾病的治療劑。
或者，治療組合，例如，藥盒(＝包裝)，其包含治療有效量的a)組織蛋白酶K抑制劑，和b)至少第二種物質(zhì)，其選自針對(duì)例如，如上面指出的骨損失疾病的治療劑。所述藥盒可以包含其施用說(shuō)明書。
當(dāng)組織蛋白酶K抑制劑結(jié)合針對(duì)骨損失疾病的其他治療劑施用時(shí)，共同施用的組合化合物的劑量將當(dāng)然根據(jù)所用的共同藥物的類型，例如，它是否二膦酸鹽、SERM、降鈣素、PTH、PTH片段或者PTH類似物或者其他的藥物，取決于所用的特定藥物，和正治療的病癥等等而變?？梢砸猿Ｒ?guī)方式生產(chǎn)包含組織蛋白酶K抑制劑和第二種藥品的藥物組合物。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以通過(guò)任意常規(guī)途徑施用，例如，腸胃外地，例如，以可注射溶液(例如，對(duì)于唑來(lái)膦酸)或者混懸液的形式，或者經(jīng)腸地，優(yōu)選經(jīng)口(例如，對(duì)于化合物A，見實(shí)施例1)，例如，以片劑或者膠囊劑施用。
“組織蛋白酶K抑制劑”是結(jié)合并抑制一種和多種細(xì)胞或組織中組織蛋白酶K功能的化合物。組織蛋白酶K例如公開在Tetzuka等人，1994，JBiol Chem 2691106-1109并且包括它的同種型或者突變，和與組織蛋白酶K具有至少95％同源性的蛋白質(zhì)。
與組織蛋白酶K抑制劑相關(guān)的術(shù)語(yǔ)“有效量”指能夠治療骨損失疾病，尤其嚴(yán)重骨損失疾病，優(yōu)選嚴(yán)重骨質(zhì)疏松，優(yōu)選絕經(jīng)后婦女中嚴(yán)重骨質(zhì)疏松、瘤性疾病、關(guān)節(jié)炎、由于組織蛋白酶K活性的存在加重的疾病或者由于組織蛋白酶K抑制劑的存在改善的疾??；活化骨細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制癌細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制細(xì)胞中組織蛋白酶K的表達(dá)；或者抑制瘤性細(xì)胞的生長(zhǎng)的量。
與另一種治療劑相關(guān)的術(shù)語(yǔ)“有效量”指能夠治療或預(yù)防骨損失疾病，尤其嚴(yán)重骨損失疾病，優(yōu)選嚴(yán)重骨質(zhì)疏松，優(yōu)選絕經(jīng)后婦女中嚴(yán)重骨質(zhì)疏松、瘤性疾病、關(guān)節(jié)炎、由于雌激素的存在加重的疾病或者由于組織蛋白酶K抑制劑的存在改善的疾病；活化骨細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制癌細(xì)胞中組織蛋白酶K的功能；抑制細(xì)胞中組織蛋白酶K的表達(dá)；或者抑制瘤性細(xì)胞的生長(zhǎng)的量，而組織蛋白酶K抑制劑發(fā)揮其治療或者預(yù)防效果。
術(shù)語(yǔ)“嚴(yán)重形式的骨損失疾病”指如上定義的一種嚴(yán)重形式的骨損失疾病或者可以指幾種嚴(yán)重形式的骨損失疾病。
術(shù)語(yǔ)“嚴(yán)重骨質(zhì)疏松”將根據(jù)WHO理解，即當(dāng)骨礦物質(zhì)含量的值低于年輕成年人的平均值2.5SDs以下并且有至少一種所稱作的脆性骨折(認(rèn)為與骨質(zhì)疏松有關(guān)的骨折，因?yàn)樗捎谳p微創(chuàng)傷而發(fā)生)時(shí)，認(rèn)為存在嚴(yán)重骨質(zhì)疏松。
術(shù)語(yǔ)“骨礦物質(zhì)密度”或者BMD指測(cè)量骨的特定面積中礦物質(zhì)的量。礦物質(zhì)越多，骨密度越大。以克測(cè)量礦物質(zhì)；以平方厘米測(cè)量面積，并且將BMD描述為克每平方厘米。
術(shù)語(yǔ)“T-得分”比較骨密度與35歲健康年輕成年婦女的平均骨密度。T-得分是基于稱作標(biāo)準(zhǔn)差(SD)的統(tǒng)計(jì)測(cè)量，其反映了與平均得分的差異。
“患者”是動(dòng)物，包括，但不限于，動(dòng)物，諸如奶牛、猴子、馬、綿羊、豬、雞、火雞、鵪鶉、貓、狗、小鼠、大鼠、兔，和豚鼠，在一個(gè)實(shí)施方案中，患者是哺乳動(dòng)物，在另一實(shí)施方案中，患者是人。
通過(guò)下面實(shí)施例中的闡明進(jìn)一步描述本發(fā)明。
實(shí)施例實(shí)施例1在卵巢切除(OVX)的獼猴中每天經(jīng)口治療18個(gè)月后N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺(化合物A)對(duì)骨礦物質(zhì)密度(BMD)的陽(yáng)性影響和生物力學(xué)進(jìn)行該18個(gè)月的研究以便評(píng)估在骨質(zhì)疏松的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型中化合物A對(duì)骨的影響。選擇OVX獼猴是因?yàn)樗呀?jīng)表現(xiàn)出在一些研究中顯示出骨質(zhì)減少和降低的骨強(qiáng)度(Jermoe CP，Peterson PE(2001)Bone；29(1)1-6)。
方法將100只目的-飼養(yǎng)的雌性獼猴(Macaca fascicularis)(12-13歲，具有閉合的生長(zhǎng)板)用于按照GLP進(jìn)行的該研究中。80只動(dòng)物經(jīng)歷兩側(cè)卵巢切除術(shù)并且將獼猴分配到假組(S)，其經(jīng)歷假手術(shù)。對(duì)它們通過(guò)經(jīng)口管飼法用載體(蒸餾水)或者化合物A馬來(lái)酸鹽(化合物A-AF)每天兩次給藥，持續(xù)18個(gè)月(表1)。
表1治療組
在治療前對(duì)腰脊柱和骨骼進(jìn)行兩次DXA(雙能量X射線吸收光度法，Dual Energy X-ray Absorptiometry)并且在治療期間以三個(gè)月間隔進(jìn)行DXA。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)步驟進(jìn)行第三腰椎的推擠試驗(yàn)和對(duì)中軸股骨進(jìn)行三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)。簡(jiǎn)言之，切斷每個(gè)錐體的顱端和尾端以得到具有兩個(gè)平行表面和約7mm高度的錐體樣品。將每個(gè)樣品置于兩板之間并以6mm/分鐘的恒定替換速率應(yīng)用負(fù)荷直到Instron Mechanical Testing Machine失效。將股骨置于三點(diǎn)彎曲定位器的下面支持器上，前邊朝向Instron Mechanical TestingMachine的下方。以12mm/分鐘的恒定替換速率應(yīng)用負(fù)荷直到失效。
首先檢查所有組數(shù)據(jù)以確保它們滿足參數(shù)分析的假定(正態(tài)性，參數(shù)的均勻性)。如果需要，轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)以盡可能近地滿足所述假定。使用所轉(zhuǎn)化數(shù)據(jù)的結(jié)果用于解釋。通常，對(duì)于在研究的治療期僅評(píng)估一次的變量，通過(guò)單向方差分析法(單向ANOVA)分析數(shù)據(jù)。對(duì)于在治療期期間重復(fù)評(píng)估的變量，使用雙向(組，時(shí)間)協(xié)方差分析(ANCOVA)，其使用隨時(shí)間的重復(fù)測(cè)量。對(duì)于每個(gè)ANCOVA評(píng)估，個(gè)體動(dòng)物的平均基線數(shù)據(jù)用作協(xié)變量。結(jié)果表示為平均值±SEM(平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤)。
結(jié)果化合物A通常被良好耐受。
腰椎(LV)1-4的基線骨礦物質(zhì)密度(BMD)在組之間無(wú)顯著差異。在組S中LV BMD增加直到6-9個(gè)月并且之后保持穩(wěn)定(

圖1)。相比，組O中LVBMD不改變并且從第3個(gè)月直到研究結(jié)束顯著低于組S中的水平。
化合物A的所有三種劑量都抑制OVX對(duì)腰脊柱LV1-4BMD的影響。組H功效較低，這可以通過(guò)它對(duì)食物消耗和體重增加的影響來(lái)解釋。
見圖1腰脊柱BMD(百分?jǐn)?shù)改變)，從腰椎1-4BMD的基線改變百分?jǐn)?shù)；平均值±SEM，n＝19-20；p＜0.05相對(duì)于通過(guò)重復(fù)測(cè)量分析得到的所有組的OVX。
與椎骨相比，在組S動(dòng)物中股骨的BMD不隨時(shí)間增加(圖2)并且OVX導(dǎo)致顯著減少?；衔顰的所有三種劑量水平都導(dǎo)致在整個(gè)18個(gè)月期間內(nèi)與組O相比完整股骨BMD中顯著增加(圖2)。這對(duì)于股骨近端和遠(yuǎn)端最顯著(未顯示)，但是在中軸股骨中也見到。
化合物A處理組的完整股骨BMD值在多數(shù)時(shí)間點(diǎn)甚至高于假手術(shù)值，并且絕對(duì)值的差異對(duì)于組L和H在第9個(gè)月時(shí)顯著，對(duì)于M組在第18個(gè)月時(shí)顯著。組L和H中股骨中軸的前-后直徑傾向于大于組S和O中的(表3)。
見圖2完整股骨BMD(百分?jǐn)?shù)改變)從完整骨骼BMD的基線的百分?jǐn)?shù)改變；平均值±SEM，n＝19-20；p＜0.05相對(duì)于所有組和除了組Sham在12個(gè)月時(shí)的時(shí)間點(diǎn)。
腰椎3(LV3)的生物力學(xué)測(cè)試表明與組O比較時(shí)組S的最大負(fù)荷的更高值，但是差異不是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(圖3)。所有化合物A處理的組增加最大負(fù)荷并且該效果對(duì)于組H是顯著的。對(duì)于該組，最大負(fù)荷甚至增加到高于組S的水平。對(duì)于所有組，得到了BMD和最大負(fù)荷之間的高度顯著相關(guān)性(圖4)。
對(duì)于左股骨中軸的3點(diǎn)彎曲試驗(yàn)，對(duì)于組S和組O得到相似結(jié)果，表明卵巢切除術(shù)對(duì)于力學(xué)性質(zhì)沒(méi)有顯著影響(表2)。組L、M和H的值高于組O的，盡管對(duì)于組L和H，僅僅能量和韌性是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。對(duì)于所有組，最大負(fù)荷和BMD是高度顯著相關(guān)的(圖5)。
見圖3腰椎最大負(fù)荷-LV3壓迫試驗(yàn)中的最大負(fù)荷；平均值±SEM，n＝19-20；**p＜0.01相對(duì)于OVX，#p＜0.05相對(duì)于Sham。
見圖4腰椎BMD相對(duì)于最大負(fù)荷-在18個(gè)月時(shí)LV3最大負(fù)荷與LV3BMD的相關(guān)性；對(duì)于所有組p＜0.01。
表2中軸股骨生物力學(xué)
中軸股骨的3點(diǎn)彎曲試驗(yàn)；平均值±SEM，n＝19-20；*和斜體＝p＜0.05相對(duì)于OVX見圖5中軸股骨BMD相對(duì)于最大負(fù)荷-中軸股骨最大負(fù)荷與中軸股骨BMD的相關(guān)性，如在18個(gè)月時(shí)通過(guò)體內(nèi)DXA測(cè)量的；對(duì)于所有組p＜0.01。
見圖6礦物質(zhì)沉積率(MAR)礦物質(zhì)沉積率(MAR)是骨形成的指征，中等劑量和高劑量減小了股骨頸的松質(zhì)骨(圖6)，這與骨周轉(zhuǎn)抑制劑的作用一致。然而，出乎意料地，在股骨頸的骨膜邊，MAR非常顯著地增加，甚至低劑量在該部位也是有活性的(關(guān)于MAR的測(cè)量見Parfitt AM等人，J.Bone Miner Res 1987；2595-610)。
總結(jié)對(duì)卵巢切除的(OVX)獼猴用3，10，或50/30mg/kg化合物A馬來(lái)酸鹽經(jīng)口處理，每天兩次(bid)，持續(xù)18個(gè)月?；衔锾幚碓?和10mg/kg bid被良好耐受。50mg/kg bid劑量導(dǎo)致食物攝取減少和體重減輕，從而一個(gè)月后將劑量減少到30mg/kg bid。體重增加恢復(fù)但是保持明顯較低直到研究結(jié)束，其可能已經(jīng)影響了骨參數(shù)。
如18個(gè)月后通過(guò)DXA測(cè)量的，OVX動(dòng)物在腰椎LV1-4(-7％)和完整股骨(-7.7％)比假手術(shù)動(dòng)物具有顯著較低的BMD。盡管OVX導(dǎo)致股骨BMD從基線降低，但是它防止了在假手術(shù)動(dòng)物中看到的椎骨中BMD的增加。骨強(qiáng)度與BMD平行地減少，盡管在腰椎(推擠試驗(yàn))和股骨中軸(3點(diǎn)彎曲試驗(yàn))中都沒(méi)有看到顯著差異。
化合物A的所有三種劑量組在抑制OVX對(duì)LV1-4BMD的影響中都是有效的。它們還導(dǎo)致在整個(gè)18個(gè)月期間內(nèi)與OVX組相比完整股骨BMD的顯著增加。這對(duì)于股骨近端和遠(yuǎn)端是最顯著的，但是在股骨中軸也看到了。出乎意料地，化合物A處理的組的完整股骨BMD值甚至在多數(shù)時(shí)間點(diǎn)高于假手術(shù)組。骨礦物質(zhì)含量的改變與BMD的平行。與OVX對(duì)照相比，化合物A處理增加腰椎和股骨中軸的骨強(qiáng)度，盡管不是所有生物力學(xué)參數(shù)的差異都達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。然而，在對(duì)照以及化合物A處理的組的個(gè)體動(dòng)物中，在所有三種劑量水平下椎骨和股骨BMD和強(qiáng)度(最大負(fù)荷)是高度顯著相關(guān)的。
總之，化合物A防止了OVX對(duì)脊柱和股骨BMD和骨強(qiáng)度的不利影響。在后一部位，它甚至導(dǎo)致BMD增加到高于假手術(shù)動(dòng)物。BMD與骨強(qiáng)度顯著相關(guān)，表明化合物A處理的動(dòng)物中的正常骨質(zhì)量。骨形成在骨膜部位增加，而在松質(zhì)骨減少。
實(shí)施例2化合物A對(duì)骨吸收標(biāo)記(sCTX1)具有強(qiáng)烈和快速的作用a)包含安慰劑組分和化合物A的硬明膠膠囊(mg)
(1)對(duì)應(yīng)于5mg游離堿(2)對(duì)應(yīng)于25mg游離堿(3)對(duì)應(yīng)于50mg游離堿在12周的治療中，使用化合物A在絕經(jīng)后婦女中進(jìn)行了多中心、雙盲、隨機(jī)化、安慰劑對(duì)照的、平行組、劑量范圍化(ranging)、安全性、耐受性和功效試驗(yàn)，以及3周的隨訪。該研究的主要目的是評(píng)估化合物A對(duì)骨吸收和骨形成的生物化學(xué)標(biāo)記的影響，和評(píng)價(jià)它的安全性和耐受性分布圖。次要目的是評(píng)估治療結(jié)束后生物化學(xué)標(biāo)記中的改變，和研究12周治療期間和之后化合物A和其代謝物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。受試者群體是正常健康絕經(jīng)后婦女。不研究骨質(zhì)減少婦女的理由如下研究的功效終點(diǎn)是骨周轉(zhuǎn)的生物化學(xué)標(biāo)記。這些變量不直接與男人中BMD相關(guān)。因此，我們不必評(píng)估BMD并且可以包括正常絕經(jīng)后婦女。她們絕經(jīng)后至少5年，主要是因?yàn)轭A(yù)期在這些婦女中生物標(biāo)記的波動(dòng)小于更年期婦女中生物標(biāo)記的波動(dòng)。因?yàn)樵撛囼?yàn)中包括的受試者將無(wú)論如何不具有任何益處，并且因?yàn)樵撛囼?yàn)相當(dāng)苛刻，進(jìn)行大量評(píng)估，包括大便潛血和PK。測(cè)試了4種劑量5，10，25，和50mg od。研究的持續(xù)時(shí)間是12周，接著是三周的隨訪。12周治療允許評(píng)估骨吸收和骨形成的生物標(biāo)記的時(shí)程和確定實(shí)現(xiàn)了生物標(biāo)記中的穩(wěn)態(tài)。
結(jié)果見圖7化合物A對(duì)骨吸收標(biāo)記(sCTX1)具有有效和快速的作用，對(duì)骨形成標(biāo)記沒(méi)有很大影響。
140名絕經(jīng)后婦女(所有組中都是28名受試者) 雙盲、安慰劑對(duì)照的IIA期研究 所有劑量(除了5mg外)都顯示出在所有時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于安慰劑的顯著差異(p＜0.001)(5mg和25mg的數(shù)據(jù)未顯示) 所有時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于安慰劑的劑量反應(yīng)關(guān)系 來(lái)自其他吸收生物標(biāo)記(血清NTX，尿NTX)的結(jié)果指出用血清CTX看到的結(jié)果 對(duì)于隨時(shí)間的骨形成標(biāo)記(血清骨鈣蛋白，BSAP)，抑制的降低小于用骨吸收標(biāo)記看到的 總結(jié)結(jié)果表明防止了骨吸收并且不影響骨生長(zhǎng)
權(quán)利要求
1.治療需要此類治療的患者中嚴(yán)重形式的骨損失疾病的方法，該方法包括對(duì)所述患者施用有效量的組織蛋白酶K抑制劑。
2.組織蛋白酶K抑制劑的用途，用于制備治療嚴(yán)重形式的骨損失疾病的藥物。
3.藥物組合物，其摻入作為活性劑的組織蛋白酶K抑制劑，所述藥物組合物用于治療嚴(yán)重形式的骨損失疾病。
4.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中組織蛋白酶K抑制劑用于刺激需要此類治療的患者中的骨生長(zhǎng)。
6.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中所述疾病是嚴(yán)重形式的骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎和骨轉(zhuǎn)移。
7.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中所述疾病是嚴(yán)重骨質(zhì)疏松。
8.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中所述疾病是絕經(jīng)后婦女中的嚴(yán)重骨質(zhì)疏松。
9.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中組織蛋白酶K抑制劑選自下面式V的化合物或者其可藥用鹽或者其任意水合物 其中R1是任選取代的(芳基、芳基-低級(jí)烷基、低級(jí)烯基、低級(jí)炔基、雜環(huán)基或雜環(huán)基-低級(jí)烷基)；R2和R3一起代表低級(jí)亞烷基，其任選被O、S或NR6中斷，從而與它們所連接的碳原子形成環(huán)，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；R4和R5獨(dú)立地是H，或任選取代的(低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)、-C(O)OR7、或-C(O)NR7R8，其中R7是任選取代的(低級(jí)烷基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、環(huán)烷基、二環(huán)烷基、二環(huán)烷基或雜環(huán)基)，R8是H，或任選取代的(低級(jí)烷基、芳基、芳基-低級(jí)烷基、環(huán)烷基、二環(huán)烷基、二環(huán)烷基或雜環(huán)基)；或R4和R5一起代表低級(jí)亞烷基，其任選被O、S或NR6中斷，從而與它們所連接的碳原子形成環(huán)，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；或R4是H或任選取代的低級(jí)烷基，R5是式-X2-(Y1)n-(Ar)p-Q-Z的取代基，其中Y1是O、S、SO、SO2、N(R6)SO2、N-R6、SO2NR6、CONR6或NR6CO；N是0或者1；P是0或者1；X2是低級(jí)亞烷基或當(dāng)n是0時(shí)，X2也是被O、S、SO、SO2、NR6、SO2NR6、CONR6或NR6CO中斷的C2-C7-亞烷基，R6是氫、低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基；Ar是亞芳基；Z是羥基、酰氧基、羧基、酯化的羧基、酰胺化的羧基、氨基磺?；?、(低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)氨基磺?；?低級(jí)烷基或芳基-低級(jí)烷基)磺?；被驶?；或Z是四唑基、三唑基或咪唑基；Q是直接鍵、低級(jí)亞烷基、Y1-低級(jí)亞烷基或被Y1中斷的C2-C7-亞烷基；X1是-C(O)-、-C(S)-、-S(O)-、-S(O)2-，或-P(O)(OR6)-，并且R6如上面定義；Y是氧或者硫；L是任選取代的-Het-、-Het-CH2-或-CH2-Het-，Het是選自O(shè)、N或S的雜原子；并且X是0或1；并且上面定義中的芳基代表碳環(huán)芳基或者雜環(huán)芳基。
10.根據(jù)前面權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法、用途或者組合物，其中組織蛋白酶K抑制劑是N-[1-(氰基甲基-氨基甲酰基)-環(huán)己基]-4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺，或者其可藥用鹽，例如，馬來(lái)酸鹽形式，或者其任意水合物。
11.藥物組合物，其包含小于50.1mg N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺或者其可藥用鹽，其中堿形式的量小于50.1mg。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的藥物組合物，其包含小于64.2mg N-[1-(氰基甲基-氨基甲?；?-環(huán)己基]-4-(4-丙基-哌嗪-1-基)-苯甲酰胺馬來(lái)酸鹽。
13.特別參考實(shí)施例基本如前面描述的所有新的化合物、方法、藥物組合物、方法和用途。
全文摘要
本發(fā)明一般涉及組織蛋白酶K抑制劑和它們?cè)诠巧L(zhǎng)中的用途。特別地，本發(fā)明涉及組織蛋白酶K抑制劑用于刺激需要其的患者中新骨形成的用途。
文檔編號(hào)A61P19/08GK1882343SQ200480033754
公開日2006年12月20日 申請(qǐng)日期2004年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月19日
發(fā)明者M·米斯巴赫, R·蓋姆斯, U·特雷赫塞勒 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司