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文冠果的提取物和從提取物分離出的化合物的組成,功能和應用,以及它們的制備方法

文檔序號:1093565閱讀:1673來源:國知局
專利名稱:文冠果的提取物和從提取物分離出的化合物的組成,功能和應用,以及它們的制備方法
技術領域
本發(fā)明涉及文冠果的提取物的用途,其特征在于所述的提取物可治療夜尿,遺尿,失禁,尿頻。文冠果的提取物治療夜尿,遺尿,失禁,尿頻的功能不僅和它可以改善膀胱功能相關,而且和它可改善人的腦功能關系重大。
本發(fā)明專利還公開了一類組合物(composition),其特征在于所述組合物它可以改善大腦中樞系統(tǒng)的功能和泌尿系統(tǒng)信息的傳遞過程,使傳遞到大腦的信號不斷增強,改善了睡眠警覺系統(tǒng),防止深度睡眠的發(fā)生,使大腦發(fā)出信號叫醒睡覺的人去撒尿,避免遺尿的發(fā)生。
本發(fā)明專利還公開了一類組合物(composition),其特征在于所述組合物有助于松弛膀胱,提高儲尿量,從而避免遺尿的發(fā)生。
本發(fā)明專利公開的文冠果的提取物有助于消除由于精神緊張,壓力,衰老,活動過度,反射亢進和不穩(wěn)定而引起的避免逼尿肌不穩(wěn)定和膀胱的緊張,從而防止尿急和尿頻。文冠果提取物可松弛由乙酰膽堿(Ach)引起的膀胱的緊張。
文冠果提取物抑制乙酰膽堿酶(AchE)的合成,調解制尿賀爾蒙(ADH)的釋放,從而控制膀胱產生過多的尿量,抗炎,從而避免遺尿的發(fā)生。
本發(fā)明公開文冠果的提取物,其特征在于所述文冠果的提取物為文冠果的果果殼和/或果柄,種仁,種殼,枝干,樹皮和根的提取物。
本發(fā)明公開文冠果的提取物,其特征在于所述文冠果的提取物主要是醇等有機溶劑提取物,粗皂甙提取物,黃酮類提取物,生物堿提取物,香豆素提取物,芳香有機酸提取物,糖類提取物和單寧提取物。
本發(fā)明公開文冠果的醇等有機溶劑提取物,其特征在于所述文冠果的醇等有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的醇等有機溶劑提取物。
本發(fā)明公開文冠果的粗皂甙提取物,其特征在于所述文冠果的粗皂甙提取物主要含有粗皂甙化合物等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的粗皂甙提取物。
本發(fā)明公開文冠果的黃酮類提取物,其特征在于所述文冠果黃酮類提取物主要含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的黃酮類提取物。
本發(fā)明公開文冠果的的生物堿提取物,其特征在于所述文冠果的生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的生物堿提取物。
本發(fā)明公開文冠果的香豆素提取物,其特征在于所述文冠果的香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的香豆素提取物。
本發(fā)明公開文冠果的芳香有機酸提取物,其特征在于所述文冠果的芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的芳香有機酸提取物。
本發(fā)明公開文冠果的糖類提取物,其特征在于所述文冠果的多糖類提取物主要含有多糖,糖苷,其它糖類,皂甙和單寧等化合物。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的糖類提取物。
本發(fā)明公開文冠果的單寧提取物,其特征在于所述文冠果的單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。本發(fā)明還公開了一種組合物,其特征在于所述組合物含有文冠果的單寧提取物。
本發(fā)明公開文冠果的提取物的制備方法,其特征在于所述文冠果的提取物的制備方法主要是醇等有機溶劑提取物,粗皂甙提取物,黃酮類提取物,生物堿提取物,香豆素提取物,芳香有機酸提取物,糖類提取物和單寧提取物的制備方法。其中,單寧提取物的制備方法有二1)用95%乙醇提取;2)用丙酮/水提取。
本發(fā)明公開文冠果的提取物的用途,其特征在于所述文冠果提取物的用途有如下方面促進膀胱生長,改善膀胱功能;改善睡眠警覺系統(tǒng);調節(jié)制尿荷爾蒙(ADH)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)促腎上腺皮質的荷爾蒙(ACTH)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)5-羥色胺(5-HT)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解乙酰膽堿(Ach)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)腎上腺素(AD)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解去甲腎上腺素(NE)的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)神經肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的功能;防止進入睡眠麻痹的狀態(tài);治療遺尿。治療癌癥,如卵巢癌,膀胱癌,骨癌,乳腺癌,白血病,肝癌,前列腺癌和腦癌,但又不限于上癌癥。以及改善肺的功能。
本發(fā)明專利還公開了一種化合物,其特征在于所述化合物含有糖鏈,三萜皂甙原或其它皂甙原,和在碳21和22位上的側鏈或當歸酰胺,糖鏈含一個或一個以上的糖或糖的衍生物,這些基團有機(operatively)組成了具生物活性的化合物。
本發(fā)明專利公開了一種化合物,其特征在于所述化化合物中具有如下的化學結構
本發(fā)明專利還公開了一類鹽類,其特征在于所述鹽類是由上述化合物衍生而來的鹽類。
本發(fā)明專利還公開了一類組合物(composition),其特征在于所述組合物(composition)是由上述化合物或其鹽類和適當載體形成的組合物(composition)。
本發(fā)明專利還公開了一類藥物組合物,其特征在于所述組藥物合物是由上述化合物或其鹽類和適當藥物載體所組成。
上述化合物或其鹽類,以及組合物都具有生物活性。
本發(fā)明公開了從文冠果制備上述提取物的工藝方法,其特征在于所述工藝方法如下 ·采收文冠果樣品,清選,干燥; ·粉碎文冠果樣品,得文冠果樣品粉; ·用適量的一種或幾種有機溶劑浸提文冠果樣品粉(適當?shù)拇螖?shù)和時間),得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(適當?shù)拇螖?shù)),得第二次提取物; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥和滅菌流浸膏,得粉狀文冠果提取物。
本發(fā)明專利公開了一種三萜皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有三個糖和一個或一個以上的雙當歸酰胺,它們連在皂甙原的母環(huán)上。
本發(fā)明專利公開了一種三萜皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有兩個糖和一個或一個以上的雙當歸酰胺,它們連在皂甙原的母環(huán)上。
本發(fā)明專利公開了一種三萜皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有四個糖和一個或一個以上的當歸酰胺,它們連在皂甙原的母環(huán)上。
本發(fā)明專利公開了一種三萜皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有三個糖和一個當歸酰胺,它們連在皂甙原的母環(huán)上。
本發(fā)明專利還公開了從文冠果提取物中分離和提純化合物的方法,其特征在于所述方法如下 ·采收文冠果樣品,清選,干燥; ·粉碎文冠果樣品,得文冠果樣品粉; ·用適量的一種或幾種有機溶劑浸提文冠果樣品粉(適當?shù)拇螖?shù)和時間),得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(適當?shù)拇螖?shù)),得第二次提取物; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥和滅菌流浸膏,得粉狀文冠果提取物; ·把上述從從文冠果提出的粉狀取物分離成一至多個成分; ·檢測出上述成分中的具有生物活性的成分; ·用速效液相色譜(FPLC)分離和提純上述具有生物活性的成分; ·再用高效液相色譜(HPLC)分離出具有生物活性的化合物。
本發(fā)明專利還公開了用上述方法分離出的化合物,其特征在于所述化合物的二維HMQC核磁共振譜的化學位移的數(shù)據(jù)見表2和二維HMBC核磁共振譜的化學位移的數(shù)據(jù)見表3。
本發(fā)明專利還公開了具有抗癌作用的上述從文冠果的提取物分離出的化合物,3-0-[β-D-半乳糖吡喃?;?1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖吡喃?;?21,22-O-二黨歸酰基-3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基-12-烯五環(huán)三萜皂甙,其分子式為C57H88O23(C57H88023)或其衍生物的抗癌通路(pathways),其特征在于所述抗癌通路可調節(jié)G蛋白細胞和其受體,F(xiàn)as蛋白細胞和其受體,賴氨酸激酶和其受體,分裂素和其受體等的代謝活動。
正常的干細胞產生的子細胞具有有限的增殖能力,當子細胞分裂產生了非分裂細胞,細胞分裂停止,進入終分化期。如果干細胞分裂是不能產生非干子細胞,它就會增殖形成腫瘤。同時,如果子細胞不能正常地增殖,這些細胞就會增殖形成腫瘤。
正常的細胞當成熟時,進入終分化期形成特化細胞,停止分裂。一旦細胞群體倍增數(shù)次,就會停止增值,進入衰退期。如果細胞分裂不能終止,不進入衰退和分化期,就會產生癌癥。這些細胞在遺傳上是不穩(wěn)定的,并不理會內外調節(jié)細胞增值的信號。它們可以侵入其它組織,增值造成更多的腫瘤。
許多生物通路的活動不正常,引起細胞分裂無法終止,就會導致癌變。例如,轉化生長因子α(TGF-alpha)和轉化生長因子β(TGF-beta),轉化生長因子β信號途徑和SMAD編譯調節(jié)基因,Ras-MAP激酶鏈信號途徑,基因調控蛋白Myc等通路的生化環(huán)節(jié)或其受體被不適當?shù)鼗罨騽舆^分活躍,會引起癌細胞的生成和增殖。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物,可調節(jié)這些生物通路活動的生化環(huán)節(jié)或其受體,防止癌變。由于基因突變癌細胞的殺死細胞的信號被阻斷了。因而,癌細胞就不斷的分裂,導致了癌變。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物,可疏通阻滯癌細胞“自殺”信號傳遞的通路,使癌細胞“自殺”。
圖的詳細說明

圖1(a)和(b).文冠果提取物X和Y給藥9天后對小鼠學習記憶的改善作用(水迷宮法)。
圖2(a)and(b).文冠果提取物X和Y對給戊巴比妥納3天所至小鼠的記憶功障礙的影響(水迷宮法)。
圖3.文冠果提取物X和Y給藥10天對小鼠尿量的影響。
圖4.人典型的睡覺周期。
圖5.文冠果果殼提取物的高效液相色譜圖譜。
圖6.文冠果提取物對乳腺癌(IC50為65μg/ml,IC0為105μg/ml)和白血病癌細胞(IC50為35μg/ml,IC0為50μg/ml)的抑制作用的比較。
圖7.文冠果提取物在低濃度可促進膀胱細胞的生長,在濃度10μg/ml時,膀胱細胞的生長增加25%。文冠果提取物在高濃度時抑制膀胱癌細胞的生長(IC50為45μg/ml,IC0為60μg/ml)。同時,文冠果提取物抑制卵巢癌細胞的生長(IC50為15μg/ml,IC0為20μg/ml)。
圖8.文冠果提取物在濃度低于40μg/ml時,對腦細胞的生長無作用或有輕微刺激作用,在濃度10μg/ml時,膀胱細胞的生長增加8%。。文冠果提取物對前列腺(IC50為50μg/ml,IC0為70μg/ml)和腦癌細胞的生長有抑制作用(IC50為70μg/ml,IC0為100μg/ml)。
圖9.在培養(yǎng)基RPMI-1640中,文冠果提取物在濃度10ug/ml時,肺細胞可生長,50ug/ml時,生長增加20%。膀胱細胞在含有10μg/ml文冠果提取物的RPMI-1640培養(yǎng)液中生長增加25%但是文冠果提取物在高濃度時抑制膀胱癌細胞的生長IC50為45ug/ml,IC0為60μg/ml。文冠果提取物抑制肝癌細胞的生長,IC50為68μg/ml,IC0為95μg/ml。
圖10.文冠果提取物對卵巢癌和宮頸癌細胞的生長的抑制作用不同。文冠果提取物對卵巢癌的醫(yī)療前景十分可觀,對宮頸癌細胞的生長的抑制作用較弱。
圖11.骨細胞在低濃度(如10μg/ml)含有文冠果提取物的RPMI-1640培養(yǎng)液中生長增加20%,在高濃度時,抑制骨癌細胞的生長,IC50為40μg/ml。
圖21.用高效液相色譜(HPLC)在μbondapak C18柱上分離文冠果提取物的圖譜。
圖21A-M.用快速液相色譜(FPLC)從文冠果提取物中分離化合物Y。圖21A-B是快速液相色譜的代表性洗脫圖譜。圖21C-K是從快速液相色譜獲得的組分的HPLC圖譜。圖21L原物質;圖21M薄層色譜(TLC)。從快速液相色譜選擇的組分,用碳水化合物染色,在TLC上分析。
圖22.文冠果提取物的吸收光譜。
橫坐標波長nm 縱坐標光強度 文冠果提取物在207nm,278nm和500nm有3個吸收高峰。
圖23A-23E.MTT法檢測文冠果提取物影響細胞生長的曲線。各種細胞對文冠果提取物的敏感性排列如下 圖23A極敏感卵巢細胞; 圖23B敏感膀胱和骨細胞; 圖23C中等敏感白細胞和肝細胞; 圖23D稍敏感前列腺,乳腺和腦細胞; 圖23E欠敏感結腸,宮頸和肺細胞。
橫坐標濃度(μl/ml) 縱坐標細胞生長(%) 圖24.文冠果提取物在快速液相色譜(FPLC)上梯度(10-80%)洗脫譜。
橫坐標洗脫物體積(5ml/組分) 縱坐標光強度(245nm) 圖25.從快速液相色譜(FPLC)獲得的文冠果提取物的各組分對膀胱細胞生長的影響(根據(jù)MTT檢測)。圖25A.從快速液相色譜(FPLC)獲得的文冠果提取物組分。圖25B.組分5962(Y)抑制細胞生長;組分610 and 1116稍刺激細胞生長。
橫坐標濃度(μl/ml) 縱坐標細胞生長(%) 圖26.文冠果提取物組分5962的64%乙晴等梯度洗脫圖譜。在FPLC上兩個主要組分X和Y被分離出來。
橫坐標光強度(254nm) 縱坐標組分編號(1ml/組分). 圖27.文冠果提取物的組分X(2021)和Y(2728)對膀胱細胞生長的影響僅Y抑制膀胱細胞生長。
圖28.文冠果提取物組分Y的高效液相色譜(HPLC)35%乙晴等梯度洗脫圖譜,顯示Y(2728)組分含有4-5化合物Y0,Y1,Y2,Y3和Y4。
圖29.文冠果提取物組分Y的高效液相色譜(HPLC)45%乙晴等梯度洗脫圖譜,顯示Y3和Y4的峰迭合在一起,Y1和Y2清晰地和Y3和Y4分離開來。
圖30.文冠果提取物組分Y的高效液相色譜(HPLC)45%乙晴在C18柱(Delta PakC18)上的等梯度洗脫圖譜。Y1和Y2清晰地分離開來。
圖31.比較文冠果提取物組分Y3和Y4Y峰的上行(曲線上半部)部分和下行曲線下半部)部分的質子核磁共振圖譜。顯示它們無差別。
圖32.顯示組分Y的純度(從高效液相色譜Delta Pak C18柱上的45%乙晴梯度洗脫圖譜上收集的)。
圖33.顯示提純的化合物Y在抑制卵巢癌(OCAR-3)方面的潛力圖。
33A點標度圖(Point scale)。
33B線標度圖(Linear scale)。
橫坐標濃度(μg/ml),縱坐標細胞生長(%)(根據(jù)MTT檢測),IC50約1μg/ml。
圖34.比較化合物Y對卵巢和宮頸癌細胞生長的影響卵巢癌細胞對化合物Y敏感,而宮頸癌細胞不敏感。卵巢癌細胞的IC50約1μg/ml,說明卵巢癌細胞對提純的化合物Y很敏感。
圖35.化合物Y的質子核磁共振(NMR)的化學位移圖譜。
圖36.化合物Y的二維NMR(HMQC)圖譜(同時請看表10.2的化學位移數(shù)據(jù))。
圖37.化合物Y的HMBC圖譜。A水平1,B水平2。同時請見表23的化學位移數(shù)據(jù)。
圖38.化合物Y的質譜。(A)MALDI-TOP圖譜。A-1圖譜之一Y+Matrix(CHCA)+Angiotensin 1“two point calibration”。A-2圖譜之二Y+Matrix (CHCA)+Angiotensin“one point calibration”。38A-3圖譜之三Y+Matrix(CHCA)。8A-4圖譜之四Matrix(CHCA)only。A-5圖譜之五Angiotensin 1+Matrix(CHCA)。(B)ESI-MS圖譜。
圖39.化合物Y的化學結構和名稱3-0-[β-D-吡喃半乳糖酰基(1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3-β-D-吡喃葡萄糖?;?21,22-O-二黨歸?;?3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。
圖40.化合物Y1質子核磁共振(NMR)圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表24。
圖41.化合物Y1二維核磁共振(HMQC)圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表25。
圖42.化合物Y2質子核磁共振圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表26。
圖43.化合物Y2二維核磁共振(HMQC)圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表27。
圖44.化合物Y5質子核磁共振圖譜。化學位移數(shù)據(jù)見表28。
圖45.化合物Y5二維核磁共振(HMQC)圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表29。
圖46.化合物Y1質子COSY-NMR圖譜?;瘜W位移數(shù)據(jù)見表30。
圖47.化合物Y1三個可能的化學結構 47A化學結構Y1-1; 47B化學結構Y1-2; 47C化學結構Y1-3。
表24.化合物Y1的質子核磁共振譜數(shù)據(jù) DU=C:/Bruker/XWIN-NMR,USER=guest,NAME=chan,EXPNO=8,PROCNO=1 F1=0.000ppm,F(xiàn)2=0.000ppm,MI=0.05cm,MAXI=10000.00cm,PC=1.000 # 區(qū)域 頻率 強度 [Hz][PPM] 1 5803.6 5312.007 8.8510 1.05 17 13503.5 3623.905 6.0382 0.38 2 6201.8 5224.701 8.7055 180.00 18 13617.2 3598.988 5.9967 0.08 3 6517.2 5155.558 8.5903 0.09 19 13649.9 3591.811 5.9848 0.19 4 6612.7 5134.626 8.5554 1.05 20 13679.2 3585.404 5.9741 0.18 5 8992.9 4612.799 7.6859 0.41 21 13712.9 3577.998 5.9617 0.08 6 9356.8 4533.029 7.5530 62.6022 13886.8 3539.884 5.8982 0.09 7 9733.1 4450.514 7.4155 0.40 23 13920.0 3532.594 5.8861 0.19 8 9952.7 4402.383 7.3353 0.13 24 13952.5 3525.479 5.8742 0.17 9 9996.2 4392.832 7.3194 0.90 25 13983.6 3518.658 5.8629 0.06 10 10361.5 4312.746 7.1860 134.51 26 14413.7 3424.364 5.7058 0.36 11 10641.7 4251.327 7.0837 0.05 27 14428.7 3421.080 5.7003 0.36 12 10739.1 4229.980 7.0481 0.87 28 14720.0 3357.206 5.5939 0.19 13 12483.6 3847.521 6.4108 0.10 29 14735.6 3353.801 5.5882 0.18 14 12504.0 3843.034 6.4033 0.10 30 14766.4 3347.042 5.5769 0.20 15 13117.1 3708.630 6.1794 0.31 31 14781.9 3343.652 5.5713 0.17 16 13161.7 3698.843 6.1631 0.31 32 15028.7 3289.533 5.4811 0.05 33 15343.4 3220.543 5.3661 0.3399 23693.5 1389.916 2.3159 2.02 34 15404.6 3207.131 5.3438 0.25100 24231.4 1271.971 2.1194 0.22 35 15439.6 3199.461 5.3310 0.25101 24282.2 1260.831 2.1008 0.22 36 16193.8 3034.111 5.0555 0.14102 24341.3 1247.878 2.0792 0.16 37 16238.8 3024.240 5.0391 0.15103 24413.6 1232.024 2.0528 0.15 38 16381.2 2993.014 4.9870 0.17104 24464.0 1220.989 2.0344 0.83 39 16518.3 2962.967 4.9370 0.12105 24468.7 1219.963 2.0327 0.83 40 16553.7 2955.209 4.9240 0.12106 24496.7 1213.827 2.0225 0.82 41 16599.3 2945.198 4.9074 0.08107 24540.5 1204.212 2.0065 0.24 42 16633.5 2937.700 4.8949 0.08108 24614.2 1188.066 1.9796 0.24 43 16843.2 2891.736 4.8183 0.18109 24658.3 1178.391 1.9635 0.88 44 16905.3 2878.117 4.7956 0.17110 24686.0 1172.311 1.9533 0.86 45 16927.0 2873.370 4.7877 0.19111 24690.9 1171.249 1.9516 0.85 46 17523.6 2742.566 4.5697 0.33112 24774.5 1152.908 1.9210 1.65 47 17586.3 2728.818 4.5468 0.18113 24824.7 1141.905 1.9027 0.22 48 17617.6 2721.965 4.5354 0.23114 24966.5 1110.815 1.8509 2.07 49 17635.4 2718.066 4.5289 0.31115 25021.9 1098.679 1.8306 2.09 50 17665.9 2711.371 4.5177 0.32116 25154.1 1069.689 1.7823 0.22 51 17716.2 2700.349 4.4994 0.21117 25213.5 1056.676 1.7607 0.20 52 17760.5 2690.632 4.4832 0.20118 25280.4 1042.010 1.7362 0.33 53 17810.9 2679.588 4.4648 0.55119 25347.2 1027.363 1.7118 0.24 54 17835.7 2674.141 4.4557 0.72120 25396.2 1016.604 1.6939 0.38 55 17857.9 2669.267 4.4476 0.54121 25591.3 973.839 1.6226 0.16 56 18007.8 2636.409 4.3928 0.17122 25626.4 966.149 1.6098 0.22 57 18046.2 2627.986 4.3788 0.26123 25673.7 955.785 1.5926 0.16 58 18083.2 2619.886 4.3653 0.19124 25759.1 937.061 1.5614 0.45 59 18189.9 2596.493 4.3263 0.11125 25837.0 919.968 1.5329 0.32 60 18233.6 2586.912 4.3104 0.27126 25932.6 899.023 1.4980 0.22 61 18277.8 2577.209 4.2942 0.31127 25995.9 885.130 1.4748 0.28 62 18331.5 2565.443 4.2746 0.21128 26142.6 852.967 1.4212 1.52 63 18367.6 2557.542 4.2614 0.23129 26284.2 821.936 1.3695 1.99 64 18412.4 2547.721 4.2451 0.19130 26355.3 806.354 1.3436 0.49 65 18458.8 2537.540 4.2281 0.10131 26405.2 795.414 1.3253 0.53 66 18491.9 2530.283 4.2160 0.21132 26437.0 788.423 1.3 137 0.61 67 18532.6 2521.359 4.2011 0.28133 26495.4 775.620 1.2924 1.83 68 18567.2 2513.770 4.1885 0.14134 26547.6 764.186 1.2733 0.62 69 18645.4 2496.625 4.1599 0.25135 26578.6 757.400 1.2620 0.75 70 18666.5 2491.997 4.1522 0.25136 26635.0 745.018 1.2414 0.66 71 18699.9 2484.686 4.1400 0.24137 26710.2 728.529 1.2139 0.35 72 18721.5 2479.943 4.1321 0.19138 26742.2 721.515 1.2022 0.34 73 18778.7 2467.413 4.1113 0.20139 26774.1 714.532 1.1906 0.38 74 18792.8 2464.305 4.1061 0.20140 26818.0 704.909 1.1745 1.47 75 18821.9 2457.939 4.0955 0.19141 26852.6 697.329 1.1619 2.39 76 18835.7 2454.909 4.0904 0.18142 26939.0 678.382 1.1303 0.28 77 19186.2 2378.063 3.9624 0.17143 26967.1 672.226 1.1201 0.28 78 19213.7 2372.029 3.9523 0.29144 26987.0 667.851 1.1128 0.31 79 19239.6 2366.350 3.9429 0.16145 27035.8 657.144 1.0949 0.25 80 19338.7 2344.635 3.9067 0.08146 27059.9 651.863 1.0861 0.21 81 19366.7 2338.490 3.8964 0.22147 27091.3 644.992 1.0747 0.18 82 19396.9 2331.872 3.8854 0.21148 27116.3 639.514 1.0656 0.13 83 19428.2 2325.007 3.8740 0.06149 27306.1 597.891 0.9962 0.21 84 20015.2 2196.324 3.6596 0.05150 27331.8 592.271 0.9869 0.20 85 20048.6 2188.994 3.6474 0.08151 27362.1 585.622 0.9758 0.18 86 20131.1 2170.900 3.6172 0.13152 27426.7 571.457 0.9522 0.07 87 20161.7 2164.211 3.6061 0.28153 27465.2 563.025 0.9381 0.12 88 20208.1 2154.040 3.5891 0.31154 27550.1 544.395 0.9071 0.06 89 20679.1 2050.765 3.4170 0.24155 27604.4 532.507 0.8873 0.09 90 20727.6 2040.135 3.3993 0.23156 27723.7 506.347 0.8437 0.23 91 20782.4 2028.119 3.3793 0.08157 27778.4 494.349 0.8237 0.48 92 21179.2 1941.123 3.2343 0.14158 27825.7 483.975 0.8064 1.88 93 21213.6 1933.579 3.2218 0.13159 27892.5 469.335 0.7820 1.79 94 21586.4 1851.862 3.0856 0.07160 27999.1 445.968 0.7431 0.28 95 21649.4 1838.049 3.0626 0.09161 28054.1 433.917 0.7230 0.23 96 21715.8 1823.490 3.0383 0.67162 28134.1 416.375 0.6938 0.08 97 21747.5 1816.527 3.0267 0.23163 28228.5 395.678 0.6593 0.07 98 23153.9 1508.199 2.5130 0.06164 28262.5 388.209 0.6468 0.09 表25.化合物Y1的二維質子(HMQC)核磁共振譜數(shù)據(jù) DU=C:/Bruker/XWIN-NMR,USER=guest,NAME=chan,EXPNO=18,PROCNO=1 F1PLO=116.085ppm,F(xiàn)1PHI=10.797ppm,F(xiàn)2PLO=6.538ppm,F(xiàn)2PHI=0.368ppm MI=1.00cm,MAXI=10000.00cm,PC=2.000# 區(qū)域 頻率強度 row [Hz]F1[PPM]F1 col [Hz]F2[PPM]F2 1 315 16740.193 110.9281539 2665.365 4.441114.42 375 3624.445 6.0391 30.72 21 720 7193.972 47.6705 2 352 15855.943 105.0686682 1821.991 3.035810.83 490 2950.420 4.9161 20.34 22 725 7055.427 46.7524 3 450 13537.575 89.7061 820 1015.280 1.69178.84 490 2950.420 4.9161 20.34 23 770 5994.782 39.7241 4 479 12863.844 85.2416 682 1822.241 3.036321.78 476 3032.063 5.0521 12.42 24 778 5810.328 38.5019 5 479 12863.844 85.2416 682 1822.241 3.036321.78 500 2892.360 4.8193 17.76 25 803 5229.784 34.6549 6 491 12577.806 83.3462 836 918.974 1.53129.20 487 2969.087 4.9472 25.72 26 813 4978.483 32.9897 7 522 11857.070 78.5703 866 743.550 1.23899.04 545 2627.024 4.3772 13.55 27 833 4517.225 29.9332 8 529 11685.553 77.4337 847 852.860 1.421164.24 504 2870.087 4.7822 16.93 28 847 4185.850 27.7373 9 535 11537.104 76.4500 861 773.411.288774.68 589 2370.150 3.9492 15.06 29 850 4113.891 27.2605 10 550 11191.633 74.1608 806 1096.582 1.827180.21 421 3355.320 5.5907 12.94 30 850 4113.891 27.2605 11 550 11191.633 74.1608 861 773.392 1.288631.46 423 3342.807 5.5699 15.14 31 885 3291.884 21.8135 12 569 10733.316 71.1238 756 1389.088 2.3145100.00 410 3421.295 5.7006 24.93 32 893 3110.641 20.6125 13 579 10497.793 69.5631 796 1153.093 1.921389.09 526 2740.480 4.5662 26.50 33 893 3110.641 20.6125 14 586 10332.951 68.4708 803 1110.425 1.850250.66 537 2674.056 4.4556 14.53 34 897 2998.505 19.8694 15 586 10332.951 68.4708 803 1111.101 1.851345.64 596 2330.159 3.8826 11.00 35 897 2998.505 19.8694 16 617 9621.364 63.7555 853 820.195 1.366678.07 643 2051.886 3.4189 12.23 36 919 2497.783 16.5514 17 630 9299.908 61.6254 874 699.217 1.165172.04 529 2718.381 4.5294 13.25 37 919 2497.783 16.5514 18 630 9299.908 61.6254 910 483.491 0.805637.18 539 2665.365 4.4411 14.42 38 926 2336.725 15.4842 19 669 8391.979 55.6090 794 1165.059 1.941217.70 529 2718.3814.5294 13.25 39 926 2336.725 15.4842 910 484.392 0.807131.53 20 669 8391.97955.6090 表26.化合物Y2的質子核磁共振譜數(shù)據(jù) DU=C:/Bruker/XWIN-NMR,USER=guest,NAME=chan,EXPNO=10,PROCNO=1 F1=10.000ppm,F(xiàn)2=0.000ppm,MI=0.05cm,MAXI=10000.00cm,PC=1.000 #區(qū)域 頻率 強度 [Hz] [PPM] 15810.0 5312.575 8.8519 1.1060 18959.7 2429.692 4.0484 0.21 26208.2 5225.282 8.7065 180.00 61 18999.0 2421.074 4.0340 0.10 36521.4 5156.628.5921 0.0862 19242.9 2367.603 3.9450 0.12 46618.9 5135.231 8.5564 1.0663 19783.6 2249.061 3.7474 0.21 58991.6 4615.051 7.6897 0.4864 19832.2 2238.424 3.7297 0.23 69355.8 4535.208 7.5567 72.14 65 20066.8 2186.983 3.6440 0.20 79732.2 4452.690 7.4192 0.4766 20108.3 2177.874 3.6288 0.22 89953.1 4404.253 7.3385 0.1267 20209.5 2155.707 3.5919 0.07 99995.8 4394.912 7.3229 1.0768 20452.9 2102.343 3.5030 0.22 10 10361.4 4314.740 7.1893 154.22 69 20501.2 2091.755 3.4853 0.21 11 10739.1 4231.938 7.0514 1.0170 20699.2 2048.331 3.4130 0.16 12 11670.5 4027.748 6.7111 0.2771 20750.3 2037.137 3.3943 0.14 13 11716.8 4017.596 6.6942 0.2872 20777.5 2031.179 3.3844 0.10 14 12142.6 3924.242 6.5387 0.0973 20994.3 1983.637 3.3052 0.13 15 12191.6 3913.516.5208 0.0874 21033.2 1975.112 3.2910 0.13 16 12720.2 3797.616.3277 0.2975 21183.1 1942.257 3.2362 0.07 17 12767.0 3787.357 6.3106 0.2776 21464.1 1880.637 3.1336 0.61 18 13474.1 3632.344 6.0523 0.3877 21493.2 1874.264 3.1229 1.18 19 13691.6 3584.643 5.9728 0.1878 21522.4 1867.862 3.1123 0.63 20 13724.3 3577.480 5.9609 0.1779 21602.1 1850.400 3.0832 0.27 21 13894.9 3540.074 5.8986 0.0880 21648.8 1840.141 3.0661 0.63 22 13926.6 3533.142 5.8870 0.0781 21709.2 1826.899 3.0440 0.14 23 14192.8 3474.762 5.7897 0.1582 23167.5 1507.197 2.5113 0.05 24 14224.4 3467.833 5.7782 0.1583 23193.4 1501.524 2.5019 0.06 25 14849.8 3330.724 5.5497 0.1084 23228.5 1493.830 2.4891 0.05 26 15031.1 3290.991 5.4835 0.5685 23464.1 1442.173 2.4030 0.12 27 15462.8 3196.344 5.3258 0.1086 23673.4 1396.297 2.3265 0.10 28 15495.0 3189.283 5.3141 0.0787 23717.4 1386.638 2.3104 0.12 29 16285.8 3015.906 5.0252 0.2088 23813.9 1365.486 2.2752 0.14 30 16380.7 2995.102 4.9905 0.3589 23867.3 1353.767 2.2557 0.15 31 16656.9 2934.562 4.8896 0.1290 24076.0 1308.020 2.1795 0.06 32 16691.7 2926.933 4.8769 0.0991 24237.2 1272.687 2.1206 0.37 33 16808.4 2901.328 4.8343 0.2092 24315.0 1255.625 2.0922 0.94 34 16918.3 2877.252 4.7941 0.2393 24347.2 1248.573 2.0804 0.87 35 17364.1 2779.505 4.6313 0.0994 24412.7 1234.206 2.0565 0.43 36 17545.5 2739.737 4.5650 0.3295 24444.9 1227.149 2.0447 0.44 37 17580.6 2732.048 4.5522 0.3596 24477.4 1220.016 2.0328 0.35 38 17621.8 2723.010 4.5371 0.3397 24546.3 1204.918 2.0077 1.65 39 17671.0 2712.235 4.5192 0.2298 24630.5 1186.456 1.9769 0.83 40 17720.0 2701.484 4.5013 0.2599 24667.0 1178.457 1.9636 0.98 41 17766.6 2691.267 4.4842 0.25100 24698.9 1171.464 1.9519 0.94 42 17830.7 2677.212 4.4608 0.49101 24776.1 1154.543 1.9237 0.24 43 17883.7 2665.595 4.4415 0.54102 24829.9 1142.750 1.9041 0.47 44 18046.4 2629.914 4.3820 0.15103 24905.2 1126.225 1.8765 0.36 45 18079.4 2622.681 4.3700 0.17104 25001.0 1105.220 1.8415 2.25 46 18118.5 2614.108 4.3557 0.12105 25283.4 1043.323 1.7384 1.76 47 18193.9 2597.588 4.3282 0.49106 25374.5 1023.343 1.7051 0.44 48 18246.1 2586.136 4.3091 0.56107 25400.9 1017.554 1.6955 0.44 49 18295.9 2575.231 4.2909 0.51108 25497.2 996.442 1.6603 0.18 50 18344.7 2564.538 4.2731 0.44109 25543.0 986.402 1.6436 0.30 51 18441.6 2543.273 4.2377 0.40110 25569.3 980.631 1.6340 0.30 52 18564.0 2516.452 4.1930 0.41111 25684.4 955.412 1.5919 0.33 53 18616.9 2504.857 4.1736 0.29112 25758.5 939.160 1.5648 0.50 54 18642.0 2499.356 4.1645 0.32113 25933.0 900.905 1.5011 0.13 55 18692.3 2488.315 4.1461 0.81114 26000.7 886.055 1.4764 0.17 56 18721.0 2482.035 4.1356 1.28115 26171.3 848.668 1.4141 0.59 57 18749.9 2475.688 4.1250 0.66116 26211.0 839.946 1.3995 0.50 58 18812.7 2461.931 4.1021 0.12117 26300.6 820.314 1.3668 0.36 59 18923.7 2437.591 4.0616 0.14118 26336.4 812.459 1.3537 0.33 119 26431.5791.6141.31902.36134 27392.2580.9970.96810.17 120 26483.1780.3041.30022.02135 27468.0564.3690.94041.46 121 26582.9758.4221.26370.85136 27583.9538.9580.89800.30 122 26636.1746.7591.24430.53137 27639.5526.7830.87770.31 123 26687.2735.5521.22560.39138 27696.4514.3000.85690.23 124 26747.9722.2381.20340.27139 27755.5501.3560.83540.72 125 26849.0700.0841.16650.61140 27809.8489.4500.81550.51 126 26891.3690.8171.15110.87141 27898.0470.1000.78330.39 127 26942.7679.5371.13230.75142 27949.8458.7590.76440.23 128 26970.8673.3821.12200.64143 28010.2445.5010.74230.23 129 27001.4666.6801.11080.79144 28179.5408.3880.68050.09 130 27042.5657.6601.09581.81145 28270.7388.3870.64711.43 131 27092.2646.7591.07760.57146 29248.3174.0740.29000.33 132 27315.3597.8600.99620.29147 29267.3169.9100.28310.57 133 27367.3586.4580.97720.16148 29290.2164.8910.27470.30 表27.化合物Y2的二維質子(HMQC)核磁共振譜數(shù)據(jù) Assignment w1w2 Data Height 1C-H 111.010 6.048 1882619034C-H 28.5401.291 8016292 2C-H 104.414 4.887 1432497535C-H 27.9161.263 19194828 3C-H 103.805 5.490 9309093 36C-H 27.3961.832 8506404 4C-H 86.1644.245 7318077 37C-H 21.9841.296 49758680 5C-H 85.3214.832 1146391638C-H 20.8002.003 46698880 6C-H 83.4854.980 1327237039C-H 20.4141.738 53046288 7C-H 82.3121.199 6422175 40C-H 19.9731.315 70912128 8C-H 78.3644.297 7384251 41C-H 18.6641.117 9230194 9C-H 78.3674.216 7043049 42C-H 18.6541.087 8675350 10C-H77.9574.239 6649256 43C-H 17.5090.991 9315817 11C-H77.2644.786 1257352944C-H 17.1430.947 25886530 12C-H75.4514.045 7102450 45C-H 16.9531.156 19760612 13C-H75.2514.029 6339352 46C-H 15.5342.104 10787224 14C-H73.2286.323 8991836 47C-H 15.6422.069 13369578 15C-H73.3054.426 1625736148C-H 15.5720.671 16296111 16C-H72.9916.302 9674724 49C-H 15.5230.643 7321235 17C-H72.4914.457 9585418 50C-H 15.4031.986 9376028 18C-H69.2934.561 1038818051C-H 15.4841.971 11124703 19C-H67.3624.192 1380171552C-H 15.4621.931 8888843 20C-H64.9344.334 9238968 53C-H 15.3690.848 9251849 21C-H63.2433.727 6145056 54C-H 15.5010.817 10315735 22C-H62.9353.477 6603994 55C-H 15.4720.621 13161576 23C-H62.6084.290 1141708856C-H 125.103 5.484 12492876 24C-H62.0994.309 1451844157C-H 137.121 5.955 6751365 25C-H61.9174.329 1229450358C-H 136.141 5.784 6797706 26C-H61.6184.456 1102908859C-H 136.290 2.613 6207858 27C-H61.2714.519 7515041 60C-H 77.8774.270 7046906 28C-H60.7624.130 3913118461C-H 20.9151.839 56088448 29C-H47.0471.417 7894303 30C-H42.6003.119 34316564 31C-H40.7193.066 1237412462C-H 20.7391.976 14307166 32C-H29.5981.127 2014354063C-H 17.1640.932 17254234 33C-H29.3101.094 5819153264C-H 1.101 0.314 7575608 表28.化合物Y5的質子核磁共振譜數(shù)據(jù) DU=C:/Bruker/XWIN-NMR,USER=guest,NAME=chan,EXPNO=12,PROCNO=1 F1=10.000ppm,F(xiàn)2=0.000ppm,MI=0.05cm,MAXI=10000.00cm,PC=1.000 # 區(qū)域頻率 強度[Hz] [PPM] 1 5893.1 53 12.116 8.8512 1.1279807.9 4453.850 7.4211 0.51 2 6291.4 5224.804 8.7057 180.00 810072.9 4395.768 7.3243 1.16 3 6594.0 5158.458 8.5951 0.09910438.5 4315.603 7.1908 167.89 4 6702.5 5134.662 8.5555 1.0710 10816.0 4232.842 7.0529 1.07 5 9068.0 4616.059 7.6914 0.5311 11735.2 4031.320 6.7171 0.14 6 9431.9 4536.298 7.5585 79.05 12 11783.3 4020.770 6.6995 0.15 13 11907.4 3993.5616.6542 0.4480 18926.1 2454.821 4.0903 0.38 14 11953.6 3983.4506.6373 0.4581 18967.8 2445.677 4.0750 0.17 15 12000.0 3973.2606.6203 0.0782 19005.7 2437.367 4.0612 0.19 16 12045.6 3963.2706.6037 0.0783 19038.6 2430.166 4.0492 0.09 17 12788.6 3800.3796.3323 0.1684 19310.2 2370.607 3.9500 0.58 18 12837.0 3789.7766.3146 0.1585 19335.4 2365.098 3.9408 0.35 19 13063.5 3740.1046.2318 0.5086 19850.6 2252.132 3.7526 0.46 20 13110.2 3729.8786.2148 0.4687 19898.8 2241.578 3.7350 0.41 21 13430.2 3659.7256.0979 0.1888 20201.0 2175.321 3.6246 0.07 22 13511.5 3641.8916.0682 0.3289 20292.2 2155.333 3.5913 0.05 23 13544.5 3634.6616.0562 0.3690 20490.7 2111.804 3.5187 0.08 24 13586.3 3625.5026.0409 0.9291 20538.0 2101.428 3.5014 0.13 25 13773.4 3584.4715.9725 0.1092 20609.1 2085.842 3.4755 0.43 26 13805.1 3577.5165.9609 0.1093 20658.9 2074.941 3.4573 0.33 27 13959.1 3543.7575.9047 0.1194 20839.1 2035.427 3.3915 0.09 28 13991.4 3536.6815.8929 0.1195 21056.9 1987.677 3.3119 0.05 29 14274.1 3474.6955.7896 0.1096 21197.3 1956.892 3.2606 0.29 30 14308.1 3467.2525.7772 0.1097 21229.3 1949.889 3.2489 0.30 31 14488.2 3427.7705.7114 0.0698 21594.6 1869.799 3.1155 0.07 32 14940.9 3328.5275.5461 0.0699 21655.8 1856.367 3.0931 0.25 33 15103.6 3292.8395.4866 0.65100 21715.6 1843.269 3.0713 0.64 34 15159.3 3280.6385.4663 0.15101 21772.0 1830.901 3.0507 1.02 35 15507.7 3204.2575.3390 0.44102 21849.2 1813.977 3.0225 0.08 36 15544.4 3196.2175.3256 0.50103 23658.9 1417.218 2.3614 0.05 37 15767.1 3147.3915.2443 0.09104 23691.6 1410.063 2.3495 0.07 38 15801.5 3139.8475.2317 0.10105 23774.7 1391.839 2.3191 0.06 39 16228.5 3046.2285.0757 0.38106 23807.6 1384.614 2.3071 0.08 40 16379.8 3013.0705.0204 0.43107 23861.8 1372.739 2.2873 0.06 41 16567.9 2971.8224.9517 0.21108 23899.4 1364.507 2.2736 0.08 42 16675.3 2948.2874.9125 0.25109 23967.4 1349.586 2.2487 0.10 43 16709.1 2940.8704.9001 0.28110 24059.8 1329.333 2.2150 0.06 44 16911.3 2896.5484.8263 0.43111 24092.5 1322.171 2.2030 0.08 45 16994.9 2878.2134.7957 0.46112 24199.4 1298.736 2.1640 1.43 46 17015.0 2873.8034.7884 0.54113 24231.9 1291.603 2.1521 1.72 47 17141.0 2846.1764.7424 0.07114 24297.2 1277.290 2.1282 0.77 48 17169.3 2839.9834.7320 0.09115 24331.2 1269.833 2.1158 0.74 49 17250.9 2822.0874.7022 0.11116 24371.3 1261.042 2.1012 0.72 50 17471.4 2773.7414.6217 0.21117 24397.1 1255.385 2.0918 1.01 51 17511.3 2764.9974.6071 0.17118 24428.7 1248.456 2.0802 0.90 52 17545.5 2757.4914.5946 0.18119 24562.6 1219.101 2.0313 3.01 53 17627.9 2739.4334.5645 0.76120 24626.7 1205.046 2.0079 1.13 54 17705.3 2722.4644.5362 0.55121 24740.0 1180.214 1.9665 1.08 55 17738.6 2715.1674.5241 0.76122 24774.4 1172.657 1.9539 0.88 56 17779.9 2706.1024.5090 0.86123 24818.3 1163.034 1.9379 0.34 57 17841.2 2692.6784.4866 0.25124 24866.1 1152.568 1.9204 0.60 58 17904.3 2678.8444.4636 1.02125 24935.7 1137.315 1.8950 0.62 59 17946.6 2669.5574.4481 1.11126 25030.0 1116.623 1.8605 1.74 60 17977.6 2662.7644.4368 0.79127 25069.5 1107.960 1.8461 2.53 61 18052.7 2646.2994.4093 0.75128 25078.2 1106.053 1.8429 2.42 62 18074.7 2641.4814.4013 0.79129 25095.8 1102.210 1.8365 3.31 63 18117.9 2632.0044.3855 0.77130 25172.0 1085.489 1.8087 0.65 64 18157.7 2623.2914.3710 0.55131 25231.6 1072.434 1.7869 0.82 65 18195.2 2615.0724.3573 0.36132 25346.1 1047.339 1.7451 0.88 66 18282.0 2596.0304.3256 0.27133 25469.2 1020.352 1.7001 0.91 67 18317.3 2588.3014.3127 0.65134 25541.3 1004.545 1.6738 0.44 68 18370.2 2576.6974.2934 0.70135 25577.7 996.5481.6605 0.34 69 18420.2 2565.7274.2751 0.25136 25610.0 989.4801.6487 0.42 70 18465.5 2555.8114.2585 0.30137 25640.6 982.7681.6375 0.40 71 18522.0 2543.4244.2379 0.33138 25673.0 975.6691.6257 0.37 72 18578.7 2530.9894.2172 0.73139 25707.6 968.0871.6130 0.31 73 18616.7 2522.6474.2033 0.99140 25760.8 956.4041.5936 0.46 74 18651.8 2514.9514.1905 0.49141 25838.3 939.4241.5653 0.62 75 18726.0 2498.6964.1634 0.52142 25922.2 921.0351.5346 0.25 76 18745.7 2494.3734.156 0.53143 26005.2 902.8391.5043 0.45 77 18784.8 2485.7904.1419 0.47144 26091.6 883.8811.4727 0.13 78 18800.9 2482.2604.1360 0.44145 26262.9 846.3451.4102 0.86 79 18889.5 2462.8384.1036 0.44146 26302.6 837.6271.3957 1.02 147 26356.2825.8871.37610.83166 27579.0557.7980.92940.44 148 26497.9794.8061.32432.23167 27785.2512.6000.85411.24 149 26575.4777.8221.29604.15168 27863.5495.4310.82553.69 150 26638.6763.9751.27303.13169 27956.4475.0490.79150.72 151 26725.6744.8961.24121.14170 28020.7460.9630.76810.40 152 26768.1735.5851.22560.88171 28053.2453.8400.75621.00 153 26797.9729.0381.21470.78172 28088.5446.0980.74331.57 154 26834.4721.0461.20140.73173 28120.7439.0350.73150.75 155 26864.9714.3611.19031.15174 28191.0423.6210.70580.21 156 26917.1702.9211.17122.99175 28213.8418.6230.69750.21 157 27005.1683.6101.13901.01176 28292.3401.4190.66890.25 158 27056.4672.3831.12031.36177 28332.4392.6280.65420.08 159 27114.0659.7341.09931.89178 28707.6310.3630.51710.27 160 27148.4652.2091.08673.35179 29201.2202.1450.33680.66 161 27218.7636.7951.06100.24180 29348.7169.8240.28300.09 162 27370.2603.5801.00572.80181 29371.2164.8960.27480.08 163 27473.2580.9880.96811.66182 29508.2134.8530.22470.23 164 27504.9574.0380.95651.53183 29515.5133.2490.22200.23 165 27560.3561.8950.93620.36 表29.化合物Y5的二維質子(HMQC)核磁共振譜數(shù)據(jù) Assignment w1w2 Data Height 1C-H110.828 6.039 3287106444C-H 40.6863.055 16128080 2C-H104.811 4.907 1846295645C-H 38.6711.399 11442703 3C-H104.435 5.323 1828127446C-H 38.9111.369 10235437 4C-H89.6033.249 1066981447C-H 36.6702.153 7764437 5C-H85.9764.204 1343093548C-H 36.7362.126 11053384 6C-H85.3244.826 2461315649C-H 36.2732.035 8030852 7C-H83.3194.948 2624089250C-H 36.2512.105 6380644 8C-H78.3306.628 1527954051C-H 29.5921.503 9087281 9C-H78.4194.384 1624320452C-H 29.3921.125 20473486 10C-H 78.1156.650 1257069953C-H 29.2181.086 101716464 11C-H 77.4054.786 2223230054C-H 28.9101.245 20696460 12C-H 77.3684.523 1206134255C-H 27.9101.290 25058176 13C-H 76.9444.503 1164935456C-H 27.7331.271 74552184 14C-H 76.5204.056 7629366 57C-H 27.5441.189 22585824 15C-H 76.5063.946 1593851858C-H 26.3922.140 7917283 16C-H 74.9574.105 1232518559C-H 26.1582.099 7990846 17C-H 75.0134.081 1358847360C-H 23.3251.897 8840327 18C-H 73.5596.311 8198774 61C-H 22.1060.934 8955543 19C-H 73.0176.229 1596214962C-H 20.8641.835 101372936 20C-H 73.1696.206 1334268463C-H 20.7772.030 78173752 21C-H 72.9534.452 1711570264C-H 20.6382.003 28732000 22C-H 72.6404.436 1890925665C-H 20.7401.969 14511319 23C-H 72.6794.405 1942164866C-H 20.5671.896 14135887 24C-H 69.4924.560 3032554867C-H 20.2741.916 13118710 25C-H 67.3974.206 2094822268C-H 20.3571.746 24009208 26C-H 63.0323.477 1493798969C-H 19.9031.295 99321544 27C-H 63.0513.457 1227829770C-H 19.8261.323 50143204 28C-H 62.9193.749 1220712171C-H 18.4961.561 8101399 29C-H 62.9873.732 1171509072C-H 17.1891.004 55368712 30C-H 62.2004.311 1617989373C-H 16.5221.160 42240788 31C-H 62.2134.287 1704940274C-H 16.7071.123 30339692 32C-H 62.2514.161 1131971875C-H 16.4671.077 8532124 33C-H 61.9094.527 1710407276C-H 16.6340.968 28629992 34C-H 61.8124.447 1791573877C-H 15.8352.168 18934808 35C-H 62.0564.132 1251921078C-H 15.8422.140 16524686 36C-H 55.6120.809 1591605279C-H 15.9972.023 7905412 37C-H 55.4670.788 1537645980℃-H 15.3702.098 8024050 38C-H 46.8823.065 1057851481C-H 15.4272.063 10964208 39C-H 46.9311.687 1532454982C-H 15.3151.980 12438770 40C-H 46.8461.394 1127489283C-H 15.5181.942 11693569 41C-H 46.4713.098 6714280 84C-H 15.4300.848 39529776 42C-H 46.5853.046 1226328085C-H 15.4460.800 33285778 43C-H 46.6641.410 1233694486C-H 11.5850.756 13874767 87C-H 11.5080.739 1255993992C-H 138.5176.066 7569417 88C-H 11.4800.706 7741734 93C-H 138.2366.051 7116376 89C-H 1.189 0.375 1067411394C-H 138.2185.891 6987830 90C-H 1.210 0.357 1152533695C-H 125.2085.490 26284080 91C-H 1.054 0.312 11948607 表30.化合物Y1的COSY二維質子核磁共振譜數(shù)據(jù) Assignment w1 w2 Data Height 1H-H6.7046.322 9224233 57H-H 4.3794.204 34462264 2H-H6.6786.372 9898637 58H-H 4.3804.195 34413552 3H-H6.4194.456 2001577659H-H 4.3024.823 16076232 4H-H6.3686.681 1133365260H-H 4.3024.148 221634448 5H-H6.3206.706 1130741161H-H 4.2625.582 80620088 6H-H6.1715.044 134583264 62H-H 4.2614.930 59383108 7H-H6.0434.952 1293487663H-H 4.2034.900 12911051 8H-H5.9802.030 8053109664H-H 4.2044.433 20195584 9H-H5.9802.021 105609248 65H-H 4.1504.832 17371252 10H-H 5.8811.963 8135000066H-H 4.1534.819 18323128 11H-H 5.8811.952 7588151267H-H 4.1494.305 216562864 12H-H 5.7015.700 215204304 68H-H 4.0995.337 25030224 13H-H 5.7005.590 1834075069H-H 4.1004.571 36121208 14H-H 5.6995.575 1525162570H-H 4.1014.472 68659520 15H-H 5.5825.701 2488249271H-H 4.0954.460 36864516 16H-H 5.5834.930 3220060472H-H 4.0284.468 7964866 17H-H 5.5834.269 5416686073H-H 4.0284.458 8388422 18H-H 5.5824.260 100437000 74H-H 3.9614.463 41897776 19H-H 5.5824.251 5090408475H-H 3.9534.539 34935532 20H-H 5.3354.478 5490811676H-H 3.9524.523 50083884 21H-H 5.3354.462 4800028477H-H 3.9534.447 24637258 22H-H 5.3344.100 2076831878H-H 3.8931.162 59572844 23H-H 5.0486.174 8916179279H-H 3.8871.175 95668312 24H-H 4.9494.792 1176627280H-H 3.7663.516 11119055 25H-H 4.9504.782 9033592 81H-H 3.7443.494 6884830 26H-H 4.9305.583 1714776882H-H 3.5983.413 146852352 27H-H 4.9294.269 3051772083H-H 3.5983.404 128194976 28H-H 4.9274.251 2897524084H-H 3.5173.767 10865892 29H-H 4.9014.390 2780644885H-H 3.5083.759 9535602 30H-H 4.9004.373 3407710886H-H 3.4803.741 8054603 31H-H 4.8314.790 9984920087H-H 3.4753.734 6268863 32H-H 4.8204.310 7275091 88H-H 3.4093.599 107289744 33H-H 4.8194.296 7797132 89H-H 3.4063.592 110786000 34H-H 4.8224.157 1385712290H-H 3.2292.109 12003553 35H-H 4.8214.138 1821146891H-H 2.1101.838 8593652 36H-H 4.7944.953 3063057892H-H 2.1071.822 11474128 37H-H 4.7874.827 8672227293H-H 2.1071.811 10279236 38H-H 4.5684.109 1753598294H-H 2.1051.794 8116300 39H-H 4.5674.093 1565384795H-H 2.0295.992 47626580 40H-H 4.5424.466 3223943896H-H 2.0275.984 47768532 41H-H 4.5224.453 145233152 97H-H 2.0265.972 51874608 42H-H 4.5174.205 7769614 98H-H 2.0302.118 7536440 43H-H 4.5233.952 7357240099H-H 2.0271.919 89540200 44H-H 4.5074.436 11835048100H-H 2.0245.964 415803 16 45H-H 4.4685.337 79724560101H-H 1.9595.891 49355596 46H-H 4.4684.099 83781344102H-H 1.9555.882 46234528 47H-H 4.4613.954 44029948103H-H 1.9565.870 51174608 48H-H 4.4546.528 9453154 104H-H 1.9541.848 77092128 49H-H 4.4546.418 79266688105H-H 1.9232.030 54674196 50H-H 4.4504.381 13566321106H-H 1.9172.020 54160620 51H-H 4.4494.321 8581714 107H-H 1.8481.958 62600468 52H-H 4.4444.214 29697092108H-H 1.8341.756 16637570 53H-H 4.4454.205 23505830109H-H 1.8291.732 26336268 54H-H 4.4434.195 23169768110H-H 1.8281.711 15651960 55H-H 4.3824.902 75968808111H-H 1.8351.677 25025304 56H-H 4.3804.214 34194940112H-H 1.8301.553 106561752 113H-H 1.8281.536 92597192 114H-H 1.8203.231 15325426 115H-H 1.8193.220 13169861 116H-H 1.8182.114 14925469 117H-H 1.8182.106 16020545 118H-H 1.7421.848 24286072 119H-H 1.7451.827 35995 120 120H-H 1.6691.827 14851102 121H-H 1.5461.834 96039856 122H-H 1.5431.819 72780528 123H-H 1.5451.270 7218780 124H-H 1.5461.255 36723868 125H-H 1.5441.241 22604678 126H-H 1.4761.271 6846019 127H-H 1.4771.255 10952480 128H-H 1.4711.242 8182750 129H-H 1.4740.727 7531610 130H-H 1.3480.812 23199942 131H-H 1.3480.796 27081584 132H-H 1.3440.784 22663138 133H-H 1.2601.540 12084268 134H-H 1.2631.489 14416738 135H-H 1.2631.474 17048864 136H-H 1.2670.736 16594936 137H-H 1.2660.719 16949332 138H-H 1.2521.558 13171360 139H-H 1.2501.525 19080828 140H-H 1.2370.837 11506187 141H-H 1.1673.901 86146744 142H-H 1.1673.877 80709560 143H-H 0.8401.234 8462904 144H-H 0.7981.351 39178912 145H-H 0.7981.342 32789168 146H-H 0.7301.482 11378742 147H-H 0.7311.270 11791943 148H-H 0.7291.255 15935769 149H-H 4.4604.531 92968608 150H-H 4.2034.382 45014720 151H-H 4.2034.373 32816148 152H-H 1.7951.675 4628933 專利申請的詳細說明 當人睡眠時,要進入一個睡眠周期,這個睡眠周期包括相互交替的4-5個階段,有的階段是深度睡眠階段,有的階段是輕度睡眠階段(圖4)。而且,這些階段的交替是沒有一定順序的。當進入輕度睡眠階段時,睡眠人比較容易被叫醒。但是,當進入深度睡眠階段時,叫醒就比較困難。健康的人在睡眠時,當膀胱漲滿時,如果處于輕度睡,就比較容易醒來去撒尿;如果處于深度睡眠,就比較不容易醒來去撒尿,就可能會發(fā)生遺尿。遺尿,尿頻和尿急等病癥雖不至于之人于死命,但是,給患者帶來的痛楚和不便確實一言難盡的。而且,孩童,成人,男女人都會患這類病癥。本發(fā)明涉及一種植物提取物,包括文冠果的植物的提取物,可用于防止遺尿。
文冠果是無患子科(Sapindaceae)文冠果屬(Xanthoceras)的植物,拉丁文名Xanthoceras sorbifolia Bunge,俗名又叫文冠花,文光果,文冠樹,文官果,崖木瓜和西拉森登等,英文名叫叫“黃角樹”(Goldenhorn,Yellowhorn)。落葉灌木或小喬木,可達8米高;奇數(shù)羽狀復葉;總狀花序,花白色,雜性;蒴果初為綠色,果殼厚,木質,成熟黑褐色,卵球形,多數(shù)原產于中國,主要分布于中國北部,野生或栽培,種子含油脂可達50%以上,可食用,莖葉可入藥,治風濕,種仁在民間用于治遺尿癥。種子,花和葉可食,可用于救荒。
本發(fā)明進一步說明文冠果的提取物的應用和制備方法。本發(fā)明提供的文冠果的提取物可改善大腦的功能,使傳遞信號順暢或加強,及時叫醒睡覺的人,防止遺尿發(fā)生。當膀胱漲滿尿時,膀胱的平滑肌會擴張,當膀胱的平滑肌擴張同時,它會通過盆骨和骶骨脊髓神經發(fā)出信號給大腦皮層和小腦。大腦皮層和小腦接到信號后,使膀胱持續(xù)收縮,而使括約肌放松。這時尿液就會排出。當人在睡眠尿進入膀胱時,逼尿肌伸展使膀胱擴大。當尿在膀胱不斷積累時,會刺激膀胱的伸展接收器(stretch receptor)不斷產生信號給大腦。信號的強弱取決于膀胱中尿量積累的多少。當膀胱中尿量積累足夠多時,傳遞到大腦的信號不斷增強,就使大腦發(fā)出信號叫醒睡覺的人去撒尿。但是,如果由于大腦或膀胱功能缺陷,傳遞信號因而受阻斷或不足夠強,致使不能叫醒睡覺的人,就會發(fā)生遺尿。本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于改善大腦或膀胱功能,使傳遞信號順暢或加強,及時叫醒睡覺的人,防止遺尿發(fā)生。
膀胱壁有敏感膀胱伸展接收器(stretch receptor),它感知膀胱中尿量積累的多少,不斷產生信號給神經中樞。本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于神經中樞感知這產生的信號,防止遺尿發(fā)生。
同時,其它因素,如各種壓力,精神緊張,膀胱都會收縮變小,而使儲尿的能力降低和逼尿肌不穩(wěn)定,提前被迫收縮,急于排尿,發(fā)生尿頻。本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于松弛膀胱,提高儲尿量和減少排尿次數(shù)。
由于年齡增長,甚至中年人,膀胱都會收縮變小,而使儲尿的能力降低和逼尿肌不穩(wěn)定,活動過度,反射亢進,致使在膀胱儲尿未滿時,提前被迫收縮,急于排尿。本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于松弛膀胱逼尿肌,提高儲尿量和減少排尿次數(shù)。
病人由于逼尿肌不穩(wěn)定,活動過度,反射亢進,致使在膀胱儲尿未滿時,提前被迫收縮,急于排尿,發(fā)生尿頻和尿急。本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于松弛膀胱逼尿肌,提高儲尿量。
膀胱平滑肌有兩種功能,當它放松時,膀胱儲尿;當它收縮時,膀胱排尿。膀胱壁中有伸縮感應接收器,可感應膀胱中尿量的多少,并把這一信息通過脊髓丘腦束傳遞給脊髓神經系統(tǒng)。當需要逼尿肌放松時,大腦發(fā)出抑制信號。當需要逼尿肌收縮時,大腦發(fā)出興奮信號。乙酰膽堿酶(AchE)可抑制乙酰膽堿(Ach)的合成,乙酰膽堿的不足會影響上述信息的傳遞過程,從而引起遺尿。本發(fā)明提供的文冠果提取物可抑制乙酰膽堿酶(AchE)的合成,從而有助于乙酰膽堿的生成,防止遺尿發(fā)生。
在腦垂體后葉腺中有一種制尿賀爾蒙(ADH),它通過腎臟調節(jié)人體內水分的狀況。從而影響腎臟產尿的多少。制尿賀爾蒙的釋放受滲透壓受體和壓力受體控制。滲透壓受體是下丘腦的一種特化的細胞,它們對血液中顆粒的濃度很敏感。當血液中的顆粒的濃度高時,垂體就會釋放更多的制尿賀爾蒙,反之,被垂體釋放的制尿賀爾蒙就會減少。壓力受體的位置非常接近于右心房,大靜脈和頸脈竇,對血流量和血壓很敏感。當血壓低時,心臟會發(fā)出信號給下丘腦和垂體,釋放更多的制尿賀爾蒙,反之,釋放的制尿賀爾蒙就減少。本發(fā)明提供的文冠果提取物可調節(jié)制尿賀爾蒙(ADH)的合成,以減少腎臟產尿量,防止遺尿發(fā)生。
本發(fā)明目提供文冠果提取物,其特征在于所述文冠果提取物為文冠果的果殼和/或果柄,種仁,種殼,枝干,樹皮和根的提取物。
其中之一為文冠果果殼和/或果柄的黃酮粗提取物。制備工藝依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎文冠果果殼和/或果柄; · 用乙醇浸提果殼和/或果柄粉3-4次,得乙醇浸提液; ·回收乙醇得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
該黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之二為文冠果的葉的黃酮粗提取物。文冠果葉粗黃酮提取物包擴水溶性和非水溶性黃酮。制備工藝依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉得文冠果葉粉; ·用乙醇浸提文冠果葉粉3次,得乙醇浸提液; ·濃縮乙醇浸提液; ·用熱水浸濃縮了的乙醇浸提液,得水溶性浸提物和非水溶性浸提物; · 干燥,滅菌所得水溶性和非水溶性黃酮提取物,得水溶性和非水溶性黃色粉末狀黃酮提取物。
該兩種黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之三為文冠果的枝干的黃酮粗提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干得文冠果枝干粉; ·用乙醇浸提文冠果枝干粉4次,得乙醇浸提液; ·回收乙醇得流浸膏; · 干燥,滅菌,得黃色粉末狀黃酮提取物。
該黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之四為文冠果種仁的黃酮粗提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅,得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁霜; ·用乙醇提取種仁霜3-4次; ·回收乙醇,得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏,得黃色粉末狀黃酮提取物。
該黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之五為文冠果根的黃酮粗提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根得文冠果根粉; ·用乙醇浸提文冠果根粉3-4次,得乙醇浸提液; ·回收乙醇得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
該黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之六為文冠果樹皮的黃酮粗提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮得文冠果樹皮粉; ·用乙醇浸提文冠果樹皮粉3-4次,得乙醇浸提液; ·回收乙醇得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
該黃酮提取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
其中之七為文冠果的果殼和/或果柄的有機熔劑(conbined)提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; · 粉碎文冠果果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇和其它有機溶劑)浸提文冠果果殼和/或果柄粉,得有機熔劑提取物; ·回收溶劑,濃縮得流浸膏; ·干燥,滅菌得果殼和/或果柄有機溶劑提取物。
該果殼和/或果柄有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之八為文冠果的葉的有機溶劑提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果葉粉,得機溶劑浸提液; ·回收有機溶劑,得流浸膏; ·用乙醇和水浸提流浸膏,得二次流浸膏; ·用正丁醇浸提二次流浸膏,得正丁醇浸提物; ·回收正丁醇,得三次流浸膏; ·干燥,滅菌所得三次流浸,得葉有機溶劑提取物。
該葉有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之九為文冠果枝干的有機溶劑提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得枝干粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果枝干粉,得有機溶劑浸提液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏,得枝干有機溶劑提取物。
該枝干有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之十為文冠果種仁的有機溶劑提取物。
制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉,得去油種仁霜; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提種仁霜,得有機溶劑浸提液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏得種仁有機溶劑提取物。
該種仁有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之十一為文冠果根的有機溶劑提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根,得根粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果根粉,得有機溶劑浸提液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏,得根有機溶劑提取物。
該根有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之十二為文冠果樹皮的有機溶劑提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得樹皮粉; · 用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果樹皮粉,得有機溶劑浸提液; · 回收有機溶劑得流浸膏; ·干燥,滅菌流浸膏,得樹皮的有機溶劑提取物。
該樹皮的有機溶劑提取物主要含有皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之十三為文冠果的果殼和/包括果柄的粗皂甙提取物,其制備工藝過程如下 ·采收文冠果,清選果殼,干燥; ·粉碎文冠果果殼; ·醇類等有機溶劑浸提文冠果果殼粉,按有機溶劑∶果殼粉2∶1的比例,在室溫下,浸提4-5次,每次20-35小時; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·脫去溶劑,得流浸膏; ·干燥,滅菌,得乙醇提取物; ·流浸膏再用水溶解,正丁醇萃取; ·正丁醇萃取物經色譜分離得粗皂甙。
該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十四為文冠果的葉的粗皂甙提取物甙。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉得文冠果葉粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果葉粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·溶解流浸膏于水中,得水浸提液; ·用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物; ·用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十五為文冠果枝干的粗皂甙提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果枝干粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·溶解流浸膏于水中,得水浸提液; ·用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物; ·用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十六為文冠果種仁的粗皂甙提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁霜; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提種仁霜,(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提液; · 收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·溶解流浸膏于水中,得水浸提液; ·用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物; ·用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十七為文冠果根的粗皂甙提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根,得文冠果根粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果根粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·溶解流浸膏于水中,得水浸提液; ·用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物; ·用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十八為文冠果樹皮的粗皂甙提取物。制備方法工藝過程如下 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果樹皮粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑得流浸膏; ·溶解流浸膏于水中,得水浸提液; ·用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物; ·用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物. 該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
其中之十九為文冠果果殼和/或果柄的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提果殼和/或果柄粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提果殼和/或果柄粉水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十為文冠果葉的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果果葉,得文冠果葉粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提文冠果葉粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提文冠果葉水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十一為文冠果枝干的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果果枝干,得文冠果枝干粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提文冠果枝干粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提文冠果葉水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十二為文冠果種仁的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提文冠果種仁粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提文冠果種仁粉水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十三為文冠果根的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果果根,得文冠果根粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提文冠果根粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提文冠果根水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十四為文冠果樹皮的香豆素提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用0.5%NaOH溶液浸提文冠果樹皮粉,得水浸提物; ·用乙醚浸提文冠果樹皮水浸提物,得乙醚浸提物; ·用HCl中和乙醚浸提物; ·濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物。
該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
其中之二十五為文冠果果殼和/或果柄的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉; ·用水在室溫下浸提果殼和/或果柄粉24小時,得水浸提物; ·再在60-70°℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之二十六為文冠果葉的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉; ·用水在室溫下浸提文冠果葉粉24小時,得水浸提物; ·再在60-70°℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之二十七為文冠果枝干的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用水在室溫下浸提文冠果枝干粉24小時,得水浸提物; · 再在60-70°℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之二十八為文冠果種仁的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁粉; ·用水在室溫下浸提文冠果種仁粉24小時,得水浸提物; ·再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之二十九為文冠果根的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉,得文冠果根粉; ·用水在室溫下浸提文冠果根粉24小時,得水浸提物; ·再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之三十為文冠果樹皮的糖類提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用水在室溫下浸提文冠果樹皮粉24小時,得水浸提物; ·再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物; ·過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏。
該流浸膏主要含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
其中之三十一為文冠果果殼和/或果柄的生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉; ·用水浸提果殼和/或果柄粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物; ·用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十二為文冠果葉的生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果果葉,得文冠果葉粉; ·用水浸提文冠果葉粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物; ·用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十三為文冠果枝干的生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用水浸提文冠果枝干粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物; ·用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十四為文冠果種仁的生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉,得去油種仁粉; ·用水浸提文冠果種仁粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物; · 用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十五為文冠果根生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果果根,得文冠果根粉; ·用水浸提文冠果葉根(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物; ·用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十六為文冠果樹皮的生物堿提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用水浸提文冠果樹皮粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物; ·收集合并水浸提物; ·用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到1 0-12,得堿化浸提物; ·用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物; ·使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液; ·減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物。
該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十七為文冠果果殼和/或果柄的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉; ·用10%的鹽酸浸果殼和/或果柄粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十八為文冠果葉的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉; ·用10%的鹽酸浸提文冠果葉粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
其中之三十九為文冠果枝干的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用10%的鹽酸浸提文冠果枝干粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
其中之四十為文冠果種仁的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁粉; ·用10%的鹽酸浸提文冠果種仁粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
其中之四十一為文冠果根的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根,得文冠果根粉; ·用10%的鹽酸浸提文冠果根粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等 其中之四十二種為文冠果樹皮的有機酸提取物。制備的方法依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用10%的鹽酸浸提文冠果樹皮粉,得酸浸提液; ·用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物; ·用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物; ·酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑; ·回收機溶劑,得粗有機酸提取物。
該粗有機酸提取物主要含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
其中之四十三為文冠果果殼和/或果柄的單寧提取物,制備方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和或果柄粉; ·用95%的乙醇浸提果殼和/或果柄粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物; 方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果,清選果殼和或果柄,干燥; ·粉碎果殼和/或果柄,得果殼和或果柄粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提果殼和/或果柄粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物; ·在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
其中之四十四為文冠果葉的單寧提取物,制備的方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉; ·用95%的乙醇浸提文冠果葉粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物; 方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果葉,清選,干燥; ·粉碎文冠果果葉,得文冠果葉粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果葉粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物; ·在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
其中之四十五為文冠果枝干單寧提取物,制備方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用95%的乙醇浸提文冠果枝干粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物。
方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果枝干,清選,干燥; ·粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果枝干粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物; ·在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
其中之四十六為文冠果種仁單寧提取物,制備方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁粉; ·用95%的乙醇浸提文冠果種仁粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物。
方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果,清選種子,干燥; ·剝殼得到種仁; ·壓軋種仁去油得種仁餅; ·干燥,粉碎種仁餅得種仁粉; ·用正己烷提取種仁粉進一步去油; ·回收正己烷; ·干燥,磨粉得去油種仁粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果種仁粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物; ·在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
其中之四十七為文冠果根單寧提取物,制備方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根,得文冠果根粉; ·用95%的乙醇浸提文冠果根粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物。
方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果根,清選,干燥; ·粉碎文冠果根,得文冠果根粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果根粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物; ·在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
其中之四十八為文冠果樹皮根單寧提取物,制備方法有二。方法一工藝依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用95%的乙醇浸提文冠果樹皮粉,得乙醇浸提液; ·減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物。
方法二工藝依下列步驟 ·采收文冠果樹皮,清選,干燥; ·粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉; ·用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果樹皮粉2-7天,得丙酮的水溶液提物; ·在50°℃回收丙酮,得濃縮的浸提物; ·過濾濃縮的浸提物; ·用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物; ·用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物; ·回收乙酸乙酯,得單寧提取物。
該單寧提取物主要含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
本發(fā)明還提供了防治和醫(yī)療下列病癥的方法,其特征在于所述方法可防治腦老化和腦血管病,增進記憶和開發(fā)智力,治療夜尿,遺尿,失禁,尿頻和弱智,老年癡呆,柏金遜癥等由于腦功能不健全或障礙所引起的病癥,并可防治風濕,關節(jié)炎,血管硬化癥,血液循環(huán)病,雷諾氏綜合癥,心絞痛、心臟功能紊亂、冠心病、頭痛、眩暈和腎臟功能紊亂;改善肺功能;治陽萎和早瀉等癥 本發(fā)明還提供了由上述這些文冠果提取物制成的藥物或保健品,其特征在于所述這些文冠果提取物制成的藥物或保健品分別可和維生素B,D,K,葡萄籽提取物或其它抗氧化劑,冬蟲夏草及其提取物,銀杏及其提取物,人參和西洋參及其提取物,聚果菊及其提取物,小金絲桃及其提取物,葛根及其提取物,天麻及其提取物,蜜環(huán)菌及其提取物,丹參及其提取物,三七及其提取物,紅曲,黃芪及其提取物,地黃及其提取物,當歸及其提取物,遠志及其提取物,靈芝及其提取物,茯苓及其提取物,甘草及其提取物,石松堿A,敵百蟲,拉西汀(Lacithin),腦洗泰來(Nocetile),葉酸,氨基酸,肌酸激酶和纖維添加劑等配伍一起制成各種造新藥物和保健食品。例如,文冠果的果殼和/或果柄提取物和人參或提取物,或冬蟲夏草或其提取物配伍可制成新的治療的遺尿,尿頻,尿失禁的藥物。
本發(fā)明還提供了由上述這些文冠果提取物制成的藥物或保健品,其特征在于所述這些文冠果提取物制成的藥物或保健品可抑制5-羥色氨(5HT)的吸收。5-羥色氨的存在可維持和加強人的深度睡眠。文冠果提取物抑制5羥色氨的吸收,從而打破深度睡眠,使人在膀胱尿滿時可以驚醒,避免尿床。
本發(fā)明提供的文冠果提取物可增加dopamine的活力,從而改善神經中樞系統(tǒng)的能力。
本發(fā)明提供的文冠果提取物可調節(jié)制尿賀爾蒙(ADH)的合成,以減少腎臟產尿量,防止遺尿發(fā)生。
本發(fā)明提供的文冠果提取物抑制乙酰膽堿酶(AchE)的合成,調解乙酰膽堿(Ach)的釋放,吸收和分解,從而改善大腦中樞系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)信息的傳遞過程,避免由5-羥色氨(5HT)造成的深度睡眠發(fā)生,而增加輕度睡眠。
本發(fā)明提供的文冠果提取物有助防止睡眠麻痹的(sleep paralysis)的發(fā)生。
本發(fā)明提供的文冠果提取物可改善睡眠警覺系統(tǒng)。
本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于膀胱和括約肌的生長發(fā)育,從而避免遺尿的發(fā)生。發(fā)育不良的膀胱和括約肌不能控制排尿過程。
本發(fā)明提供的文冠果提取物有助于消除精神緊張,延緩衰老,改善膀胱功能,避免逼尿肌不穩(wěn)定,活動過度反射亢進,從而防止尿急和尿頻。
本發(fā)明還提供的文冠果提取物,其特征在于所述文冠果提取物可抗癌,可抗膀胱癌,宮頸癌,卵巢癌,前列腺癌,肺癌,乳腺癌,結腸癌,肝癌和腦癌,以及其它癌癥。
本發(fā)明公開了新的皂甙化合物,其特征在于所述皂甙化合物皂甙原為三萜類化合物,碳21和22位有當歸?;蚱渌鼈孺湥恢炼鄠€糖鏈。
本發(fā)明公開了的皂甙化合物,其特征在于所述皂甙化合化學結構如下
皂甙化合物Y的名稱3-0-[β-D-半乳糖吡喃?;?1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖吡喃?;?21,22-O-二黨歸?;?3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。分子式 C57H88O23。即Xanifolia Y。
所述另外幾種化合物化學結構如下 化學結構1
化學結構2
化學結構3

其中R1,R2和R3=A或B或C;A=當歸?;?;B=乙?;?;C=H。
和化學結構4

其中R1,R2和R3=A或B或C;A=當歸?;?;B=乙酰基;C=H。
本發(fā)明還提供了上述新化合物形成的鹽類。
本發(fā)明還提供了組合物,其特征所述組合物上述新化合物和適當載體構成。
本發(fā)明還提供了由上述新化合物或其鹽類制成藥物,其特征所述藥物由適當濃度的上述新化合物或其鹽類和適當載體構成。
本發(fā)明還提供了檢測文冠果提取物的細胞特異性毒性反應的方法,其特征在于所述方法是MTT檢測法。
材料和方法 細胞下列人體癌細胞是從美國模式菌種保藏中心(American Type Culture Collection)獲得HTB-9(膀胱),HeLa-S3(宮頸),DU145(前列腺),H460(肺),MCF-7(乳腺),k562(白細胞),HCT116(結腸),HepG2(肝),U20S(骨),T98G(腦),和OVCAR-3(卵巢)。
培養(yǎng)HeLa-S3(宮頸),DU145(前列腺),MCF-7(乳腺),HepG2(肝)和T98G(腦)細胞培養(yǎng)在MEN(Earle鹽)培養(yǎng)基上。HTB-9(膀胱),H460(肺),562(白細胞)和OVCAR-3(卵巢)培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基上,其它細胞在McCoy-5A培養(yǎng)基上。這些培養(yǎng)基都要添加10%的牛胎兒血清,谷氨酰胺和抗菌素。在CO2濃度為5%的培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。
MTT檢測 檢測方法基本按照Carmicheal et al.1987的方法,僅個別地方小有改動。這些細胞培養(yǎng)在有96個小穴的培養(yǎng)皿的小穴中24小時;每穴1萬HTB-9(膀胱),HeLa-S3(宮頸),H460(肺),HCT116(結腸),T98G(腦),和OVCAR-3(卵巢)的細胞;每穴1.5萬DU145(前列腺),MCF-7(乳腺),HepG2(肝)和U20S(骨)的細胞;每穴4萬k562(白細胞)。然后,將文冠果提取物的試樣放入穴中,再培養(yǎng)48小時(肝和骨癌細胞72小時,乳腺癌細胞96小時。然后,MTT(0.5mg/ml)加入每個穴中,培養(yǎng)1小時。產生的formazan溶于DMSO,然后用ELISA讀數(shù)器(Dynatech,Model R700)測它的O.D.值(TD)。加入試樣前的MTTO.D.值(TO)也要測出。每種細胞生長的百分數(shù)(%G)可按下面公式求出 %G=(TD-TO/TC-TO)×100 (TC是對照細胞組的O.D.值) 當TO<TD時,則細胞特異性毒性反應(LC)值為 %LC=(TD-TO/TO)×100 分離和分析0.5克粉狀提取物在200毫升水和200毫升正丁醇中分離,溶于正丁醇部分冷凍干燥后,三分之二用MeCN預濕后在5克RPC18IST柱上先用5毫升MeCN∶水,然后用5毫升水洗展開。得的組分用硅膠TLC分析,組分4,5和6用水∶MeCN(80∶20)和(50∶50)洗脫,在Rf0.11左右的TLC點含皂甙。
這些組分再氫核磁共振譜上在3-4ppm有典型糖甙的信號,0.82-2ppm有典型的皂甙的糖甙配基信號。
組分4氫核磁共振譜上在5.8-7.8ppm也有信號,但是可能是香豆素和黃酮類化合物引起。組分5和6非常近似。組分4,5和6含皂甙化合物。外觀和核磁共振譜說明這一點。
TLC按如下步驟從RPC18IST柱上得到的組分按標準濃度制備(10mg/ml),點在硅膠(Merk Keiselgel 60 F254)板上,用CHCl3∶MeOH∶H2O(35∶65∶40)展開。展開的點用酸性香草醛(2g香草醛溶于100 ml乙醇,加1 ml硫酸)浸泡紫外光觀看。
本專利申請的另一種抑制癌細胞生長的方法(pathways),其特征是所述方法是與下述從文冠果提取物的化合物有關,它們可從文冠果中提取,也可人工合成。
其中之一是化合物3-0-[β-D-半乳糖吡喃?;?1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃酰基(1→3)-β-D-葡萄糖吡喃?;?21,22-O-二黨歸?;?3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙,分子式 C57H88O23,及其衍生物。

其它化合物化學結構如下 化學結構1
化學結構2
化學結構3

其中R1,R2和R3=A或B或C;A=當歸酰基;B=乙?;籆=H。
和化學結構4

其中R1,R2和R3=A或B或C;A=當歸酰基;B=乙酰基;C=H。
本發(fā)明提供的文冠果提取物的皂甙化合物及其衍生物Wnt信號途徑中的生化環(huán)節(jié)或其受體,Wnt信號系統(tǒng)(Wnt signaling pathway)調控胚胎發(fā)育和細胞的增殖,死亡和形態(tài)發(fā)育,同時在癌細胞的發(fā)生方面也起著重要作用。發(fā)現(xiàn)一些癌癥發(fā)生是和Wnt信號系統(tǒng)被不適當?shù)鼗罨嘘P。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控Wnt信號途徑中的生化環(huán)節(jié)或其受體,避免Wnt信號系統(tǒng)的不適當?shù)鼗罨瑥亩乐怪瓢┘毎纳珊驮鲋场?br> 細胞有絲分裂和Ras-MAP激酶鏈信號途徑有關,如果Ras-MAP激酶鏈的活動過分活躍,會導致基因調控蛋白Myc的生成,Myc會加快一些基因的復制,如果這一活動過分活躍,會導致癌細胞的生成和增殖。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控Ras-MAP激酶鏈的活動,使Ras-MAP激酶途徑的活動不能過分活躍,從而不會引起癌細胞的生成和增殖。
有時Ras信號途徑中的氨基酸發(fā)生突變,引起含有這一氨基酸的蛋白永久性的過分活躍,導致從屬的Ras信號途徑在沒有有絲分裂的刺激的情況下也過分活躍。同樣,氨基酸發(fā)生突變也會引起Myc信號途徑活動過分活躍。這都會導致細胞異常生長,而引起癌細胞的生成。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控氨基酸發(fā)生突變從屬的Ras信號途徑和Myc信號途徑,使它們不能過分活躍,從而不會引起細胞異常生長而導致癌變。
本發(fā)明提供的文冠果提取物的皂甙化合物及其衍生物可啟動不正常細胞內的監(jiān)控點(checkpoint)機制,細胞內有一種監(jiān)控點(checkpoint)機制,監(jiān)控畸形有絲分裂和引起不正常過分活躍的細胞的死亡。癌細胞的監(jiān)控點機制由于編譯監(jiān)控點機制的基因突變而不能活動,造成癌細胞無限制的生長和增殖。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可啟動細胞內的監(jiān)控點機制,及時制止不正常的有分裂活動發(fā)生和制止癌細胞的生長和增殖。
本發(fā)明提供的文冠果提取物的皂甙化合物及其衍生物可調控胞外生長信號途徑。刺激細胞生長的胞外生長因子可通過細胞表面的受體啟動胞內信號途徑,激活PI3激酶促進蛋白質的合成,至少通過激活激酶eif4e和s6增加mRNA的擴增,從而刺激細胞的生長。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控胞外生長信號途徑的環(huán)節(jié)或其受體,從而影響胞內生長信號途徑,抑制細胞過分增殖,防止癌細胞的產生。
細胞分裂也要受到細胞核內的Myc蛋白的控制。Myc蛋白過多會引起細胞的過分增殖,癌細胞形成。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,控制細胞內Myc蛋白的過量產生,從而防止細胞過分增殖,導致腫瘤形成。
轉化生長因子α(TGF-alpha)可誘導鼠和雞的不成熟的先期造血細胞(例如BFU-E)的長期增值,還可誘導BFU-EDE細胞轉化成紅血球。轉化生長因子α還可刺激培養(yǎng)的內皮細胞的增殖。它在腫瘤組織的血管化方面起重要作用。轉化生長因子α是由keratimcyte,巨噬細胞,肝細胞和血小板等產生的,病毒感染可刺激轉化生長因子α的合成。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控轉化生長因子α信號途徑的環(huán)節(jié)或其受體,從而抑制卵巢和膀胱癌細胞的生長。
轉化生長因子β(TGF-beta)可調控細胞的增長,阻止許多細胞的生長。它有兩種受體受體1受體2。它們是絲氨酸-蘇氨酸激酶,通過SMAD編譯調節(jié)基因家族傳遞信號。轉化生長因子β信號途徑和SMAD編譯調節(jié)基因的突變和癌變有關。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控轉化生長因子β信號途徑的環(huán)節(jié)或其受體,從而抑制卵巢和膀胱癌細胞的生長。
DAN腫瘤病毒可通過干擾細胞循環(huán)控制蛋白E6和蛋白p53引起癌變。蛋白p53基因的突變使癌細胞在DAN損傷的情況下繼續(xù)生存和增長。乳頭瘤病毒利用蛋白E6和E7去分別使蛋白p53和Rb排序,這一過程會啟動突變的細胞,使他們生存,分裂和增長。損傷細胞的增長會導致癌變。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調控蛋白E6和E7和釋放蛋白p53和Rb,而抑制畸形細胞的分裂生長。同時,還可以控制或者與這些蛋白質發(fā)生反應,引起癌細胞死亡。
蛋白p53可以幫助多細胞有機體在DAN損傷和其它不利的情況下安全的自我復制,并在危險的情況下停止細胞分裂和增長。癌細胞往往含有大量突變的蛋白p53,表明在不利的情況下遺傳上的突變或者生長受到壓抑會啟動蛋白p53。因而,失去蛋白p53的活性是很危險的,因為它會使突變的細胞繼續(xù)完成它的生長周期,避免死亡。所以,如果DAN受到損傷,一些細胞會死亡,那些沒有修復損傷而生存下來并能繼續(xù)增長的細胞,可能攜帶一組敗壞的基因組,在基因擴增的過程中,導致失去抑制癌的基因,而啟動致癌基因。同時,基因擴增也可能使細胞發(fā)展抗藥性。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可調蛋白質53信號途徑的環(huán)節(jié)或其受體,從而抑制癌細胞增殖。
所有細胞的細胞核內都有各種休眠的procaspase,等待命令去殺死細胞。procaspase是一種休眠的酶原,由自殺蛋白酶形成。它可通過蛋白酶的裂解被另外caspase酶組啟動。兩個裂解的碎片結合在一起組成了caspase的有活性的部分。一個有活性的酶都被認為是這兩個部分之一的四分體。每一啟動了的caspase分子可裂解成多個procaspase分子,它們反過來又啟動更多的caspase分子。通過這一鏈式反應,導致大量procaspase分子的爆炸式的活動。一些啟動了的procaspase裂解成多個關鍵的蛋白質,包括細胞液蛋白和nuclear-lamins,控制細胞的死亡。啟動細胞外的死亡受體也能啟動procaspase。但是,由于基因突變癌細胞的殺死細胞的信號被阻斷了。因而,癌細胞就不斷的分裂,導致了癌變。本發(fā)明提供的文冠果提取物和新皂甙化合物或其組合物,可疏通阻滯癌細胞“自殺”信號傳遞的通路,使癌細胞“自殺”。
本專利申請的一種抑制癌細胞生長的方法,其特征是所述方法是使一定量的具有下述化學結構的化合物和適當?shù)乃幬镙d體所組成的藥物去接觸所述癌細胞,并調整其用量和藥物載體
其中R1=R2=R3=R4=CH3,R5=OH。
化學結構1
化學結構2
化學結構3

其中R1,R2和R3=A或B或C;R4=OH或H。
和化學結構4

其中R1,R2和R3=A或B或C;R4=OH或H。
本專利還公開了一種抑制癌細胞生長的方法,其特征是所述方法是使一定量的具有下述化學結構的化合物和適當?shù)乃幬镙d體所組成的藥物去接觸所述癌細胞,并調整其用量和藥物載體
該化合物含有糖鏈,萜類化合物或其它化合物的皂甙元,在碳21或C22位有一側鏈或當歸?;鶊F,這些基團有機地(operatively)連接在一起即形成這一化合物。其中R1,R2,R3,R4是短的脂族側鏈,R5=OH。
化學結構1
化學結構2
化學結構3

其中R1,R2和R3=A或B或C;R4=OH或H。
和化學結構4

其中R1,R2和R3=A或B或C;R4=OH或H。
本專利還公開了一種抑制癌細胞生長的方法,其特征是所述方法是使一定量的具有下述化學結構的化合物和適當?shù)乃幬镙d體所組成的藥物去接觸所述癌細胞,并調整其用量和藥物載體,這化合物含糖,萜類化合物皂甙原或其它皂甙原,碳21和22位是當歸?;蚱渌鼈孺湣?br> 下面通過實施例進一步說明本專利公開的文冠果提取物,它的組成,功能和應用,以及他們的制備方法。
實施例之一 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y對小鼠的促智作用。
文冠果提取物X和Y對老齡小鼠記憶功能的影響(水迷宮法) 實驗用雄性老齡小鼠,16個月小鼠,體重35-55g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%;水迷宮自動儀測試,水高11厘米,水溫25±1℃,水迷宮由起點,四個盲點,終點臺階和相應通路等結構組成。實驗前,將小鼠進行訓練,計算出每次訓練小鼠達到終點所需時間和所犯錯誤次數(shù)。共訓練三次,選擇2分鐘可達終點的小鼠作為本試驗的動物。然后將合格小鼠隨機分成9組,每組1只1)空白對照組,等量NC;2)陽性組,喜恩開0.9g/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥3天、6天和9天進行水迷宮訓練,計算每次訓練小鼠在給藥后對學習記憶的改善作用,數(shù)據(jù)用t檢驗。
結果 實驗結果顯示給藥3天后,Y藥500mg/kg劑量組可明顯縮短小鼠到達終點的時間,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)。其余各給藥組均可減少錯誤次數(shù),縮短到達終點的時間(見表1.1)。
表1.1,給藥3天后對小鼠學習記憶的改善作用
與生理鹽水組比較P<0.05* 給藥6天后,X和Y藥各劑量組均可減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。Y藥500mg/kg劑量組可明顯縮短小鼠到達終點的時間(P<0.05)。其余各給藥組也均可減少縮短到達終點的時間(見表1.2)。
表1.2給藥6天后對小鼠學習記憶的改善作用
與生理鹽水組比較P<0.05* P<0.01** 給藥9天后,X和Y藥各劑量組均可減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)。X藥400mg/kg劑量組,Y藥250mg/kg和500mg/kg劑量組可明顯縮短小鼠到達終點的時間,具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)(見表1.3)。
表1.3給藥9天后對小鼠學習記憶的改善作用
與生理鹽水組比較P<0.05* P<0.01** 上述實驗結果顯示,文冠果提取物X和Y對老齡小鼠記憶功能有明顯的改善作用,而且,隨著給藥時間的延長,對小鼠學習記憶的改善作用也更加明顯。
實施例之二 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y對戊巴比妥所致老齡小鼠記憶功能障礙的恢復具有明顯的改善作用(水迷宮法) 將細節(jié)描述(一,1)中的各組小鼠第十天給藥后注入戊巴比妥納1 5mg/kg,30分鐘后進行水迷宮試驗,計算出每次訓練小鼠達到終點所需時間和2分鐘所犯錯誤次數(shù)。連續(xù)注入戊巴比妥納3天,觀察各給藥組對戊巴比妥所致老齡小鼠的記憶功能障礙的影響。
結果 實驗結果顯示文冠果提取物X和Y對給戊巴比妥納所致老齡小鼠的記憶功障礙,注入1天,X藥100mg/kg劑量組,Y藥三個劑量組都明顯縮短小鼠到達終點的時間,具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。Y藥500mg/kg劑量組可減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)(見表2.1)。
表2.1文冠果提取物X和Y對戊巴比妥納導致小鼠的記憶功障礙的影響(1天)
與生理鹽水組比較P<0.05* P<0.01** 注入2天,X藥和Y藥各個劑量組都明顯縮短小鼠到達終點的時間,并均可減少錯誤次數(shù),具有顯著性差異(P<0.05)(見表2.2)。
表2.2文冠果提取物X和Y對戊巴比妥納導致小鼠的記憶功障礙的影響(2天)
與生理鹽水組比較P<0.05* P<0.01** 注入3天,X藥和Y藥各個劑量組都明顯縮短小鼠到達終點的時間P<0.05),Y藥250mg/kg和500mg/kg劑量組均可減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)(圖2(a)和(b)(見表2.3)。
表2.3文冠果提取物X和Y對戊巴比妥納導致小鼠的記憶功障礙的影響(13天)

與生理鹽水組比較P<0.05* 上述試驗表明,文冠果提取物X和Y對戊巴比妥納造成小鼠的記憶功能障礙的恢復具有明顯的改善作用。
實施例之三 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y對東莨菪堿所致老齡小鼠記憶功能障礙的影響(跳臺法) 取ICR小鼠進行跳臺訓練。將小鼠輕放在跳臺上,記錄小鼠在跳臺上停留的潛伏期(SDL)。小鼠自跳臺跳下,四肢接觸銅刪時,立即給與36伏特電刺激,記錄小鼠逃避至跳臺上的潛伏期(EL)。選取SDL和EL在2-60秒的小鼠作為該實驗的動物。將小鼠隨機分成9組,每組10只,雌雄各半,體重16-20g。各組給藥劑量同實施例之九,均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg。給藥后,和9天各進行跳臺訓練一次,記錄SDL,EL,和5分鐘內從自跳臺跳下觸電的次數(shù)(錯誤次數(shù))。第10天給藥后,腹腔注入東莨菪堿3ml/kg。30分鐘后,進行跳臺訓練。第11天重復一次,觀察文冠果提取物X和Y對東莨菪堿所致老齡小鼠記憶功能障礙的影響。
結果 1),文冠果提取物X和Y各劑量組給藥3天后可縮短小鼠EL和延長DL;6和9天后,可明顯減少錯誤次數(shù),但是無統(tǒng)計學意義(見表3.1)。
表3.1文冠果提取物X和Y對小鼠的記憶功能的影響(跳臺法,給藥后9天)
2),第10天給藥后,腹腔注入東莨菪堿造成小鼠記憶障礙,進行跳臺訓練,實驗結果顯示文冠果提取物X 400mg/kg劑量組,Y 250mg/kg和500mg/kg劑量組可明顯減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)(見表3.2)。
表3.2文冠果提取物X和Y對東莨菪堿造成小鼠的記憶功能障礙的影響(跳臺法,給藥后10天)
與生理鹽水組比較 *p<0.05 **p<0.01 3),第11天給藥后,腹腔注入東莨菪堿造成小鼠記憶障礙,進行跳臺訓練,實驗結果顯示文冠果提取物X和Y各劑量組均可明顯減少錯誤次數(shù)P<0.05),Y 250mg/kg劑量組可延長SDL時間,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)(見表3.3)。
表3.3文冠果提取物X和Y對東莨菪堿造成小鼠的記憶功能障礙的影響(跳臺法)
與生理鹽水組比較 *p<0.05 上述小鼠跳臺法試驗表明,文冠果提取物X和Y對東莨菪堿造成小鼠的記憶功能障礙的恢復具有明顯的改善作用。
實施例之四 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y對亞硝酸鈉所致小鼠記憶功能障礙的影響(水迷宮法) 實驗用雄性ICR小鼠,體重16-19g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%;水迷宮自動儀測試,水高11厘米,水溫25±1℃,水迷宮由起點,四個盲點,終點臺階和相應通路等結構組成。實驗前,將小鼠進行訓練,計算出每次訓練小鼠達到終點所需時間和所犯錯誤次數(shù)。共訓練兩次,選擇2分鐘可達終點的小鼠作為本試驗的動物。然后將合格小鼠隨機分成9組,每組11只1)空白對照組,等量NC;2)陽性組,喜恩開0.9g/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,分別與給藥3天、6天和9天進行水迷宮訓練,計算每次訓練小鼠在給藥后對學習記憶的改善作用。第10天每組動物皮下注射亞硝酸鈉120mg/kg,24小時后進行水迷宮測試,觀察各給藥組對亞硝酸鈉所致小鼠腦內缺氧造成的記憶功能障礙的影響。資料用t檢驗。
結果 1),水迷宮法小鼠在給藥后對學習記憶實驗結果顯示給藥3天后,X和Y藥各劑量組均可減少錯誤次數(shù)和縮短到達終點的時間(見表4.1)。
表4.1給藥3天后對小鼠學習記憶的改善作用(水迷宮法)
與生理鹽水組比較 *P<0.05 **P<0.01 給藥6天后,X 400mg/kg和Y藥500mg/kg劑量組均可減少錯誤次數(shù),與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.01)(見表4.2)。
表4.2給藥6天后對小鼠學習記憶的改善作用(水迷宮法)
與生理鹽水組比較 *P<0.05 **P<0.01, 給藥9天后,X藥250mg/kg劑量組,Y藥250mg/kg和500mg/kg劑量組可明顯縮短小鼠到達終點的時間,具有顯著性差異(P<0.05)(見表4.3和圖1(a)和(b))。
表4.3給藥9天后對小鼠學習記憶的改善作用(水迷宮法)

與生理鹽水組比較 *P<0.05, 給藥10天后,Y藥250mg/kg和500mg/kg劑量組可明顯減少錯誤次數(shù)。Y藥500mg/kg劑量組可縮短小鼠到達終點的時間,具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)(見表4.4)。
表4.4給藥10天后對小鼠學習記憶的改善作用(水迷宮法)
與生理鹽水組比較 *P<0.05 **P<0.01 2),對亞硝酸鈉所至小鼠腦內缺氧造成的記憶功能障礙實驗顯示,X藥100mg/kg,200mg/kg劑量組,Y藥三個劑量組可明顯可使小鼠減少錯誤次數(shù),與模型組比較,具有顯著性差異(P<0.05)(見表4.5)。
表4.5文冠果提取物X和Y對亞硝酸鈉導致小鼠的記憶功能障礙的影響
與生理鹽水組比較 *P<0.05 **P<0.01 上述小鼠水迷宮法試驗表明,文冠果提取物X和Y對亞硝酸鈉造成小鼠的記憶功能障礙的恢復具有明顯的改善作用。
綜合上述所有對小鼠學習記憶實驗表明,文冠果提取物X和Y有明顯的促智作用。
實施例之五 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y取物對小鼠尿量的調節(jié)作用。
1,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥3天) 實驗用雄性ICR小鼠112只,體重18-22g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%。將小鼠隨機分成9組,每組14只1)空白對照組,等量NC;2)雙氫氯噻嗪組,400 mg/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥3天,每天3次。末次給藥后,將各組小鼠放在事先墊有濾紙的500ml燒杯中。分別于30分鐘,60分鐘,120分鐘,180分鐘,240分鐘,300分鐘和360分鐘將濾紙取出,用電子分析天平稱重,用減重法計算尿量,比較各時間段內文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影。據(jù)用t檢驗。
實驗結果顯示X藥400mg/kg劑量組給藥30分鐘后,尿量明顯減少。Y藥500mg/kg劑量組給藥60分鐘后,尿量明顯減少,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.01)。X藥200mg/kg劑量組,Y藥125mg/kg和500mg/kg劑量組給藥180分鐘后,尿量明顯減少,與生理鹽水組比較具有顯著性差異P<0.01)(見表5.1)。
表5.1文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥3天,X±S)
(續(xù)表5.1)
與生理鹽水組比較P<0.05*and P<0.01** 2,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥5天) 實驗用雄性ICR小鼠112只,體重18-22g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%。將小鼠隨機分成9組,每組14只1)空白對照組,等量NC;2)雙氫氯噻嗪組,400 mg/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥天,每天1次。末次給藥后,將各組小鼠放在事先墊有濾紙的500ml燒杯中。分別于30分鐘,60分鐘,120分鐘,180分鐘,240分鐘,300分鐘和360分鐘將濾紙取出,用電子分析天平稱重,用減重法計算尿量,比較各時間段內文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影。資料用t檢驗。
實驗結果顯示X藥400mg/kg劑量組和Y藥三個劑量組給藥240分鐘后,尿量明顯增加,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.01,P<0.05)。X藥400mg/kg劑量組,Y藥500mg/kg劑量組給藥30分鐘后,尿量有減少趨勢(見表5.2)。
表5.2文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥5天,X±S)
(續(xù)表5.2)
與生理鹽水組比較P<0.05* and P<0.01** 3,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥7天) 實驗用雄性ICR小鼠112只,體重18-22g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%。將小鼠隨機分成9組,每組14只1)空白對照組,等量NC;2)雙氫氯噻嗪組,400 mg/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥7天,每天1次。末次給藥后,將各組小鼠放在事先墊有濾紙的500ml燒杯中。分別于30分鐘,60分鐘,120分鐘,180分鐘,240分鐘,300分鐘和360分鐘將濾紙取出,用電子分析天平稱重,用減重法計算尿量,比較各時間段內文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影。據(jù)用t檢驗。
實驗結果顯示X藥200mg/kg,400mg/kg劑量組和Y藥250mg/kg,500mg/kg劑量組給藥120分鐘后,尿量明顯減少,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05);于300分鐘后,尿量明顯增加(P<0.05)(見表5.3)。
表5.3文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥7天,X±S)
(續(xù)表5.3)
與生理鹽水組比較P<0.05* and P<0.01** 4,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥10天) 實驗用雄性ICR小鼠112只,體重18-22g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%。將小鼠隨機分成9組,每組14只1)空白對照組,等量NC;2)雙氫氯噻嗪組,400 mg/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)X藥III組400mg/kg;6)Y藥I組125mg/kg;7)Y藥II組250mg/kg;8)Y藥III組500mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥10天,每天1次。末次給藥后,將各組小鼠放在事先墊有濾紙的500ml燒杯中。分別于30分鐘,60分鐘,120分鐘,180分鐘,240分鐘,300分鐘和360分鐘將濾紙取出,用電子分析天平稱重,用減重法計算尿量,比較各時間段內文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影。據(jù)用t檢驗。
實驗結果顯示X藥200mG/kg,400mg/kg劑量組和Y藥250mg/kg,500mg/kg劑量組給藥120分鐘后,尿量明顯減少,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05)(見表5.4和圖3)。
表5.4文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥10天,X±S)
(續(xù)表5.4)
與生理鹽水組比較P<0.05* and P<0.01** 5,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響(給藥20天) 實驗用雄性ICR小鼠84只,體重18-22g,分籠飼養(yǎng),全價顆粒飼料,自由飲水,室溫20±2℃,濕度55-66%。將小鼠隨機分成6組,每組14只1)空白對照組,等量NC;2)雙氫氯噻嗪組,33.4mg/kg;3)X藥I組100mg/kg;4)X藥II組200mg/kg;5)Y藥I組125mg/kg;6)Y藥II組250mg/kg。以上各組動物均灌胃給藥,給藥容量20ml/kg,分別給藥20天,每天1次。末次給藥后,將各組小鼠放在事先墊有濾紙的500ml燒杯中。分別于30分鐘,60分鐘,120分鐘,1 80分鐘,240分鐘,300分鐘和360分鐘將濾紙取出,用電子分析天平稱重,用減重法計算尿量,比較各時間段內文冠果提取物X和Y對小鼠尿量的影響。據(jù)用t檢驗。
實驗結果顯示X藥100mg/kg,200mg/kg劑量組和Y藥125mg/kg,250mg/kg劑量組給藥30分鐘后,尿量明顯減少。X藥200mg/kg和Y藥250mg/kg劑量組給藥60分鐘后,尿量明顯減少,與生理鹽水組比較具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。
綜上所有實驗結果表明,文冠果提取物X和Y對小鼠尿量有明顯的調節(jié)作用。
實施例之五A 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物X和Y對小鼠的制尿作用(標準代謝籠法) 目的用標準代謝籠法研究文冠果提取物FS(X)對小鼠的制尿作用 試藥文冠果取物FS(X)和FS(Y)。
實驗用動物實驗用雄性SD小鼠100只,體重150-200g,分籠200(20×30×45cm)飼養(yǎng),每籠5只。鼠籠底部用拋光的木板襯墊,平均每兩天換一次,干燥后使用。鼠籠用前要消毒。全價顆粒飼料(動物實驗中心自制),自由飲水,室溫23±2℃,濕度40-70%,空調,自動排氣和通風,自然光源,12小時光照,12小時黑暗。
小鼠訓練將小鼠放進籠內適應性訓練兩天,每天6-10小時。進籠前,擠壓小鼠腹部下部,排除存尿。然后注射蒸餾水入胃內(38℃),25ml/kg。注射后,每兩小時收集排在籠內的尿,并小心擠壓小鼠腹部下部,采集余尿。尿量超過注射水量的40%的小鼠將用作試驗。
實驗用設備標準代謝籠,自動尿液分析儀(Miditron JuniorII),尿壓測定器,尿離子測定器(EL-ISE,Beckman)。
方法 將小鼠隨機分成6組,每組10只1)空白對照組,灌胃給藥,羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)0.5%懸浮液,每天10ml/kg;2)陽性對照組,小鼠放入籠前注射后葉素(pituitrin)入小鼠腹部空腔,0.25u/kg;3)FS(X)藥I組100mg/kg;4)FS(X)藥II組200mg/kg;5)FS(X)藥III組400mg/kg;6)FS(Y)藥組400mg/kg;分別給藥25天,每天1次,入籠后30分給試藥。
收集尿量和觀察入籠后18小時后開始收集尿樣。擠壓小鼠腹部下部,排除存尿。然后注射蒸餾水入胃內(38℃),50ml/kg。注射后小鼠放入籠內,在0.25小時,0.5小時,1小時,2小時,3小時,4小時,5小時和6小時時收集尿量。第6小時收集尿量后,擠壓小鼠腹部下部,收集膀胱中存尿。
檢測尿的常規(guī)指標pH,紅血球,白血球,蛋白等;測定Na+,K+,Cl-離子的濃度和尿滲透壓。
數(shù)據(jù)處理試藥組的排尿速率,相對尿量,Na+,K+,Cl-離子的濃度和對照組比較據(jù)用t檢驗。
結果 1),對尿量的影響試藥組FS(X)的制尿作用與用藥劑量相關,藥II組200mg/kg;FS(X)藥III組400mg/kg有明顯的制尿作用(0.25小時至6小時)(表5A-1,見圖53;圖57)。FS(Y)和FS(X)400mg/kg藥劑量組對排尿速率的影響最為明顯(表5A-2,見圖54;圖58),可制尿2小時。試藥FS(X)400mg/kg劑量組可明顯減少尿量,但是,對總尿量的影響與用藥劑量無關。陽性對照組不能減少總尿量,但是,可制尿2小時。
2),對尿中Na+,K+,Cl-離子的影響因為試藥可減少尿量,因而在不同程度上,增加了尿中離子的濃度,但是,與用藥劑量無關。對Na+和Cl-離子的濃度幾乎無影響,有促進K+排泄的作用。陽性對照組所有尿中離子的濃度和排出量都有明顯的促進作用(表5A-4,見圖56)。
3),對pH和尿滲透壓的影響試藥FS(X)和FS(Y)對pH和尿滲透壓的沒有顯著的影響,對尿比重有輕微的影響(表5A-3,見圖55)。
實施例之六 本實例進一步說明本專利公開的文冠果提取物的制備方法。
概括如下 ·采收文冠果樣品果殼和/或果柄,種子(種仁,種殼),枝干,葉,樹皮或根; ·清選,干燥; ·粉碎文冠果樣品,得樣品粉(種仁要預先去油); ·用有機溶劑浸提文冠果樣品粉(2∶1),4-5次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提液; ·收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次; ·收集合并提取液; ·回收有機溶劑,得流浸膏; ·干燥,滅菌,得文冠果提取物。
實施例之七 本實例進一步說明本專利公開的文冠果生物活性物質的分離,鑒定和提純方法。用高壓液相色譜(HPLC)分離提純文冠果提取物。
方法和材料 色譜柱采用C18逆相μbondapak柱(Water P/N 27324),乙睛(10%), 三氟乙酰酸(TFA,0.005%)為流動相。
進樣樣品溶入10%的乙睛-TFA(0.005%)中,濃度為1mg/ml; 進樣20μg。
洗脫用乙睛逐梯度洗脫,在70分鐘內,濃度由10%升到80%; 流速0.5ml/分。然后,在濃度80%時再保持10分鐘(70-80分)。然后,乙睛濃度降到10%(80-85分),并保持25分鐘(85-110分)。
檢測吸收波長207nm。
記錄紙速度0.25cm/分。
光密度(OD)滿程,0.128。
所用儀器Waters Model 510溶劑傳送系統(tǒng);Waters 484吸收率可調探測器;Waters745/745B數(shù)據(jù)模型。
光譜吸收分析用分光光度計(SpectronicIns.Model Gene Sys2)檢測文冠果提取物。
文冠果提取物溶在10%乙睛-TFA中,檢測波長200-700nm。
結果 HPLC圖譜顯示,有60-70個峰。其中有4個為主要的峰,10個中等的峰,余者為小峰(見圖5)。其中27個主要的峰按乙睛洗脫液的濃度遞增的順序編號為a-z(見圖21)。三個被檢測到的最大吸收波長207nm,278nm,和500nm(見圖22)。
實施例之八 本實例進一步說明本專利公開的MTT檢測文冠果提取物的細胞特異性毒性反應的方法 方法和材料 細胞下列人體癌細胞是從美國模式菌種保藏中心(American Type Culture Collection)獲得HTB-9(膀胱),HeLa-S3(宮頸),DU145(前列腺),H460(肺),MCF-7(乳腺),k562(白細胞),HCT116(結腸),HepG2(肝),U20S(骨),T98G(腦),和OVCAR-3(卵巢)。
培養(yǎng)HeLa-S3(宮頸),DU145(前列腺),MCF-7(乳腺),HepG2(肝)和T98G(腦)細胞培養(yǎng)在MEN(Earle鹽)培養(yǎng)基上。HTB-9(膀胱),H460(肺),562(白細胞)和OVCAR-3(卵巢)培養(yǎng)在RPMI-1640培養(yǎng)基上,其它細胞在McCoy-5A培養(yǎng)基上。這些培養(yǎng)基都要添加10%的牛胎兒血清,谷氨酰胺和抗菌素。在CO2濃度為5%的培養(yǎng)箱內培養(yǎng)。
MTT檢測 檢測方法基本按照Carmicheal et al.1987的方法,僅個別地方小有改動。這些細胞培養(yǎng)在有96個小穴的培養(yǎng)皿的小穴中24小時;每穴1萬HTB-9(膀胱),HeLa-S3(宮頸),H460(肺),HCT116(結腸),T98G(腦),和OVCAR-3(卵巢)的細胞;每穴1.5萬DU145(前列腺),MCF-7(乳腺),HepG2(肝)和U20S(骨)的細胞;每穴4萬k562(白細胞)。然后,將文冠果提取物的試樣放入穴中,再培養(yǎng)48小時(肝和骨癌細胞72小時,乳腺癌細胞96小時。然后,MTT(0.5mg/ml)加入每個穴中,培養(yǎng)1小時。產生的formazan溶于DMSO,然后用ELISA讀數(shù)器(Dynatech,Model R700)測它的O.D.值(TD)。加入試樣前的MTTO.D.值(TO)也要測出。每種細胞生長的百分數(shù)(%G)可按下面公式求出 %G=(TD-TO/TC-TO)×100 (TC是對照細胞組的O.D.值) 當TO<TD時,則細胞特異性毒性反應(LC)值為 %LC=(TD-TO/TO)×100 結果 在這10種癌細胞中,可根據(jù)對文冠果提取物的敏感程度分為4組最敏感的是卵巢癌細胞;第二敏感的是膀胱,骨,前列腺和白血病癌細胞;有點敏感的是肝,乳房和腦癌細胞;不太敏感的是結腸,宮頸和肺癌細胞(圖6,10,11和23A-E)。它們的LC50值見(見表8-1)。
表8-1 文冠果提取物MTT的檢測結果 同時發(fā)現(xiàn),低濃度的文冠果提取物可刺激膀胱,骨,和肺細胞的生長(圖7,9和11)。純的文冠果提取物Y組分失去了刺激膀胱,骨,和肺細胞的生長的能力,但是,仍然保持抑制癌細胞的能力(比較圖23A和25B,27)。并初步查明,文冠果生物活性物質在FPLC的組分610和1116中(圖25B)。
實施例之九 本實例進一步說明本專利公開的提純分離文冠果的提取物的方法 1,用快速液相色譜(FPLC)分離文冠果的提取物的方法 方法 色譜柱采用octadecyl活化的硅膠柱,2cmX28cm,用乙睛(10%)-TFA(0.005%)為流動相。
進樣樣品溶入10%的乙睛-TFA(0.005%),濃度為100mg/ml; 進樣體積1-2ml。
梯度洗脫用10-80%的乙睛(總共500ml)梯度洗脫。
檢測吸收波長254nm。
收集分離組分從10%-72%的乙睛洗脫液中共得到90個組分,每組分5ml。
所用儀器AKTA-FPLC;泵P920;檢測器UPC-900;Frac-900。
結果 FPLC洗脫圖譜顯示,有4-5大的組分(見圖4)。這些組分進一步用高效液相色譜(HPLC)分析,其中一些在圖21L按a-z編號的特別的小峰(成分)再在FPLC的組分圖譜上定位。
經FPLC分離的組分被分為7組,并用于膀胱細胞生長的MTT檢測。結果表明,至少有一組(#5692)對膀胱細胞生長有抑制作用(圖5)。
2,用快速液相色譜(FPLC)進一步分離文冠果生物活性物質組分#5692。
方法 色譜柱采用octadecyl活化的硅膠,50ml,2cmX28cm,用乙睛(64%)-TFA(0.005%)為流動相。
進樣樣品溶入65%的乙睛-TFA,濃度為1-2mg/ml; 進樣體積1-2ml。
洗脫用64%乙睛等梯度洗脫。
檢測吸收波長254nm。
收集分離組分從洗脫液中收集前90個組分,每組分1 ml。
所用儀器AKTA-FPLC;泵P920;檢測器UPC-900;Frac-900。
結果 組分#5692用開式ODS-C18分流柱和64%的isocratic乙睛洗脫進一步分離和純化,得到兩個主要組分X和Y(圖26)。但是,MTT檢測結果顯示,僅組分Y癌細胞有抑制反應(圖27)。
3,高壓液相色譜(HPLC)分離文冠果生物活性物質組分Y 方法 色譜柱采用Waters μbondapak C1 8(3.9mm×300cm)。
洗脫35%或45%的等梯度洗脫。
流動速率0.5ml/分,207nm;稀釋0.128; 檢測O.D.標度0.128;記錄紙速度0.25cm/分。
結果 用35%等梯度洗脫,組分Y分離出4-5成份(Y0,Y1,Y2,Y3,Y4)。其中Y3和Y4是主成分。Y1和Y2可為一組,Y3和Y4為一組(圖28)。用45%等梯度洗脫,組分Y1和Y2聚合成一個峰,Y3和Y4聚合成一個峰(圖29)。在峰Y3和Y4后還有成分Y5。
4,用HPLC把組分Y中的生物活性成分分離提純出來 方法 色譜柱采用Waters Delta Pak C18-300A。
洗脫45%的等梯度洗脫。
流動速率1.0ml/分。
檢測吸收波長207nm。
收集有峰的組分,并真空冷凍干燥。
結果 Y1和Y2被很好地分離出來,并分別予以收集。但是,Y3,Y4和Y5沒有分離開(圖30)。
用質子NMR譜對Y3和Y4聚合成一個峰的組分的上行和下行部分進一步分析,結果顯示,Y3和Y4是同一成分(圖31)。這一組分稱為“Y組分”。對收集到的Y組分在HPLC上用C18柱反相色譜重新分析,結果顯示也是一個峰(圖32)。
最終提純的Y組分外觀呈不定型的白色粉末狀??扇苡谒贾?甲醇和乙醇),50%的乙睛和100%的吡啶中。
Y組分MTT檢測結果顯示,它有很強的抑制卵巢癌細胞(OSCAR-3)生長的活性,IC50值僅為1μg/ml,比它的粗提物活性高10-15倍(圖33a和b)。而且,它有選擇性抑制癌細胞的性能,如抑制卵巢癌細胞而不太抑制宮頸癌細胞(HeLa)(圖34)。
實施例之十 本實例進一步說明本專利公開的文冠果生物活性物質的化學結構的測定方法文冠果生物活性物質Y組分的化學結構的測定 方法 A),核磁共振(NMR) 純的文冠果提取物Y組分樣品溶在含有0.05%TMS的吡啶-d5(pydine-D5)中,用帶有QXI探頭(1H/13C/15N/31P)的Bruker Avance 600 MHz核磁共振儀,獲得所有樣品的298k核磁共振譜。一維1H的核磁共振譜的掃描次數(shù)(16-128)取決于樣品的濃度。二維HMQC核磁共振譜,譜寬6000×24000Hz,t1和t2維的資料點分別為2024×256,掃描次數(shù)為4-128。二維HMBC核磁共振譜,譜寬6000×30000 Hz,t1和t2維的資料點分別為2024×256,掃描次數(shù)為64。這些二維數(shù)據(jù)通過數(shù)學演算和運用XWIN-NMR軟件進行Fourier變換,最后得到的二維HMQC和HMBC核磁共振譜的矩陣的規(guī)模分別是2048×256和2048×512(data points,F(xiàn)2×F1)。
B),質譜 文冠果提取物樣品的質量通過MALDI-TOF和ESL-MS質譜測定法來測定。
1)ALDI-TOF測定法 首先將樣品溶于乙睛中,然和CHCA母液混合(α-氰-4-羥基肉硅酸10mg/ml,溶于50∶50水/乙睛和0.1%TFA中)。分子量通過高分辨率的質譜儀測定。
2)SI-MS測定法 樣品通過LCQ DECAXP和Thermo Finningan制造的質譜儀來測定。樣品用電噴霧電離(ESI),溶劑是乙睛。
結果 組分Y的質子核磁共振譜見圖35。組分Y的質子的化學位移數(shù)據(jù)見表10-1。
表10.1.文冠果組分Y核磁共振的質子的化學位移[Hz][PPM] # 區(qū)域 頻率 強度[Hz][PPM] 1 5031 95309.524 8.8468 0.46 4 8204.9 4613.901 7.6878 0.26 2 5430.05222.264 8.7015 134.66 5 8568.1 4534.263 7.5551 88.28 3 5840.95132.173 8.5513 0.48 6 8943.7 4451.919 7.4179 0.33 7 9209.7 4393.602 7.3207 0.80 46 17308.8 2618.001 4.3622 2.85 8 9575.2 4313.488 7.1872 180.0047 17401.8 2597.607 4.3282 0.83 9 9952.1 4230.846 7.0495 0.87 48 17459.1 2585.043 4.3073 3.41 10 10277.2 4159.585 6.9308 1.02 49 17512.6 2573.328 4.2877 4.04 11 10886.8 4025.922 6.7081 5.68 50 17596.4 2554.947 4.2571 0.89 12 10933.6 4015.677 6.6910 6.19 51 17628.2 2547.968 4.2455 0.80 13 11939.8 3795.084 6.3235 6.26 52 17666.8 2539.518 4.2314 1.30 14 11986.7 3784.803 6.3063 5.85 53 17723.0 2527.184 4.2109 6.71 15 12576.0 3655.587 6.0910 1.47 54 17745.9 2522.172 4.2025 7.98 16 12728.0 3622.280 6.0355 6.92 55 17791.2 2512 248 4.1860 2.28 17 12880.5 3588.844 5.9798 1.87 56 17874.1 2494.071 4.1557 2.90 18 12914.2 3581.450 5.9675 4.48 57 17895.0 2489.477 4.1480 3.09 19 12946.5 3574.366 5.9557 4.59 58 17927.1 2482.454 4.1363 2.64 20 12979.5 3567.130 5.9436 2.00 59 17948.8 2477.683 4.1284 2.51 21 13382.6 3478.754 5.7964 2.41 60 18034.1 2458.993 4.0972 3.27 22 13415.6 3471.539 5.7844 5.03 61 18064.6 2452.313 4.0861 2.96 23 13447.3 3464.568 5.7727 5.15 62 18076.5 2449.702 4.0817 2.96 24 13479.1 3457.598 5.7611 2.66 63 18118.3 2440.538 4.0665 0.72 25 14218.8 3295.432 5.4909 14.00 64 18156.4 2432.180 4.0526 0.89 26 14655.9 3199.603 5.3312 28.97 65 18196 3 2423.432 4.0380 0.44 27 14691.2 3191.875 5.3184 27.63 66 18432.1 2371.735 3.9518 2.34 28 15715.3 2967.359 4.9443 5.64 67 18459.7 2365.684 3.9418 4.30 29 15826.3 2943.028 4.9037 4.82 68 18487.4 2359.600 3.9316 2.24 30 15860.6 2935.504 4.8912 5.15 69 18962.4 2255.466 3.7581 3.86 31 16047.0 2894.632 4.8231 4.20 70 19011.0 2244.816 3.7404 4.38 32 16149.6 2872.131 4.7856 3.79 71 19669.3 2100.485 3.4999 4.39 33 16171.9 2867.242 4.7775 4.42 72 19717.6 2089.898 3.4822 4.16 34 16774 0 2735.249 4.5575 5.92 73 20365.2 1947.920 3.2457 2.42 35 16856.4 2717.187 4.5274 4.26 74 20401.1 1940.054 3.2326 2.35 36 16883.5 2711.235 4.5175 4.56 75 20418.9 1936.161 3.2261 2.38 37 16903.5 2706.854 4.5102 5.89 76 20751.3 1863.290 3.1047 0.70 38 16930.6 2700.914 4.5003 4.68 77 20815.8 1849.152 3.0811 3.20 39 17021.2 2681.046 4.4672 2.99 78 20857.9 1839.919 3.0657 11.24 40 17056.9 2673.228 4.4542 8.41 79 20924.8 1825.236 3.0412 1.13 41 17099.1 2663.974 4.4388 8.87 80 23431.3 1275.730 2.1257 3.95 42 17135.6 2655.976 4.4254 8.11 81 23491.3 1262.573 2.1037 5.36 43 17200.4 2641.771 4.4018 1.88 82 23538.7 1252.187 2.0864 15.56 44 17232.6 2634.706 4.3900 2.90 83 23570.5 1245.203 2.0748 15.89 45 17271.0 2626.288 4.3760 4.33 84 23696.1 1217.673 2.0289 2.98 85 23770.1 1201 463 2.0019 27.17 86 23827.6 1188 849 1.9809 1.36 87 23887.4 1175.734 1.9590 15.22 88 23919.5 1168.700 1.9473 15.28 89 24010.2 1148.811 1.9142 0.49 90 24104.2 1128.207 1.8798 1.77 91 24197.7 1107.716 1.8457 28.22 92 24263.8 1093 228 1.8216 3.27 93 24321.8 1080.503 1.8004 2.93 94 24373.5 1069.166 1.7815 2.83 95 24497.0 1042.094 1.7364 26.10 96 24598.4 1019.871 1.6993 3.17 97 24626.1 1013.793 1.6892 3.14 98 24676.1 1002.826 1.6709 1.84 99 24931.2 946.900 1.5777 2.14 100 24983.0 935.533 1.5588 3.02 101 25226.8 882.103 1.4698 0.25 102 25370.4 850.608 1.4173 4.11 103 25412.0 841.492 1.4021 4.88 104 25499.7 822.270 1.3701 4.07 105 25556.8 809.746 1.3492 2.62 106 25639.9 791.527 1.3189 31.95 107 25717.9 774.418 1.2904 2.84 108 25790.4 758.539 1.2639 22.85 109 26011.7 710.018 1.1830 4.66 110 26070.7 697.082 1.1615 24.95 111 26249.2 657.953 1.0963 31.39 112 26536.4 594.981 0.9914 25.26 113 26610.9 578.657 0.9642 0.97 114 26914.0 512.196 0.8534 2.04 115 27012 2 490.676 0.8176 25.88 116 27118.1 467 463 0.7789 3.69 117 27226.4 443.715 0.7393 1.07 118 28513.4 161.554 0.2692 0.89 119 28539.8 155.777 0.2596 1.54 組分Y的二維HMQC核磁共振譜的數(shù)據(jù)見圖36和圖37A和B。化學位移的數(shù)據(jù)見表10-2(HMQC-峰移)和表10.3(HMBC-峰移)。
表10.2.組分Y核磁共振的質子的化學位移數(shù)據(jù)HMQC-峰移 EXPNO=5,PROCNO=1,F(xiàn)1PLO=144.360ppm,F(xiàn)1PHI=1 0.797ppm,F(xiàn)2PLO=7.966ppm, F2PHI=0.417ppm,MI=1.00cm,MAXI=10000.00cm,PC=1.400 # 區(qū)域 頻率 強度 #區(qū)域 頻率 強度 Row[Hz]F1[PPM]F1row[Hz]F1[PPM]F1 Col[Hz]F2[PPM]F2 col[Hz]F2[PPM]F2 40 6708349.676 55.3287 1 148 20698.986 137.1608 911480.283 0.8003 2.14 384 3574.3775.95572 41 6708349.676 55.3287 2 152 20564.195 136.2676 913465.738 0.776 2.18 401 3471.3375.784 2.67 42 7267038.86 46.6427 3 157 20465.209 135.6117 6791839.659 3.0653 2.51 220 4533.7797.554345.24 43 7267038.86 46.6427 4 223 18893.424 125.1963 8191016.627 1.6939 1.42 431 3295.2615.49066.22 44 7267038.86 46.6427 5 234 18649.311 123.5787 848848.511 1.4138 2.49 258 4311.82 7.1845100 45 7646151.769 40.7644 6 315 16736.119 110.9011 6791841.145 3.0678 6.4 376 3620.2896.03227.49 46 7646151.769 40.7644 7 353 15834.069 104.9237 6821821.592 3.0352 1.04 493 2934.55 4.88963.98 47 7775836.727 38.6768 8 355 15778.398 104.5548 850837.869 1.3961 2.15 449 3192.3875.31922.99 48 7775836.727 38.6768 9 355 15778.398 104.5548 853818.861 1.3644 2.05 492 2936.4144.89271.18 49 7775836.727 38.6768 10 451 13524.78889.6213 907500.256 0.8335 1.64 6601951.827 3.25222.41 507915512.02236.5251 1145113524.78889.6213 7751277.34 2.12832.38 6631934.401 3.22312.6 517915512.02236.5251 1247312994.27486.1059 7781258.9292.09771.38 5632520.987 4.20051.93 527915512.02236.5251 1347912861.93385.2297851218.8922.03091.38 5002891.933 4.81863.96 537915512.02236.5251 1449112583.00883.3807 7881201.8472.00251.09 4872967.012 4.94376.95 548374417.03829.2693 1552311826.20478.3658 881655.973 1.093 23.74 3074025.464 6.70733.92 558484174.67927.6633 1652311826.20478.3658 864757.206 1.261720.53 3094011.801 6.68464.78 568484174.67927.6633 1752311826.20478.3658 872709.06 1.18153.17 5452627.492 4.378 1.99 578563984.14926.4008 1852911690.02 77.4633 7741281.3392.135 1.66 5042866.164 4.77574.6 588563984.14926.4008 1953211624.01677.0267781259.7512.099 1.59 5302713.96 4.52212.32 598563984.14926.4008 2053211624.01677.0268041107.0621.84461.02 5322703.563 4.50472.51 608563984.14926.4008 2153511536.33976.4458071089.2191.81491.21 5902363.678 3.93843.34 618733578.06823.7099 2254511299.47574.8754 7991138.1371.89641.68 5732461.387 4.10122.35 628733578.06823.7099 2354511299.47574.8754 8141046.1851.74321.26 5762447.1794.07752.1 63891 3142.83720.8259 2455511063.554 73.3121 788 1200.6552.000613.95 5412653.6934.42166.62 64891 3142.83720.8259 2556710795.113 71.5333 804 1107.0461.844628.24 5372673.0424.45391.84 65894 3086.14720.4502 2656710795.113 71.5333 788 1200.2751.99993.08 5392662.6834.43662.82 668943086.147 20.4502 2756710795.113 71.5333 8041106.803 1.84421.17 5412650.9334.417 1.72 678943086.147 20.4502 2857910495.725 69.5494 8151041.758 1.735827.19 5272734.0374.55555.06 688943086.147 20.4502 2959410156.363 67.3006 858789.8041.316 1.16 5632523.6514.205 7.18 698973015.337 19.981 306229486.03762.8588 858790.2921.316833.47 6082256.69 3.76012.91 709062802.854 18.573 316229486.03762.8588 830953.6521.589 1.35 6112241.3363.73462.67 719062802.854 18.573 326229486.03762.8588 834931.2081.55161.89 6352100.1993.49942.96 729142613.995 17.3215 336229486.03762.8588 892592.6630.987512.71 6372086.7563.477 3.42 739192490.082 16.5004 346279381.43962.1656 875693.4451.15548.9 5522586.9674.31053.58 749192490.082 16.5004 356279381.43962.1656 880660.3431.10031.76 5552568.3344.27943.42 759252342.8415.5247 366279381.43962.1656 7781258.345 2.09675.45 568 2494.546 4.1 5652.54 76925 2342.8415.5247 37627 9381.439 62.1656 782 1237.122 2.0613 5.31 571 2474.559 4.1232 2.51 77925 2342.8415.5247 38630 9297.809 61.6115 791 1183.411.9718 2.33 531 2709.734 4.515 2.61 78925 2342.8415.5247 39630 9297.809 61.6115 795 1159.732 1.9324 2.38 539 2660.734 4.4334 2.66 79925 2342.8415.5247907 503.26 0.8385 6.27 80925 2342.8415.5247912 474.6990.791 7.15 表10.3. 組分Y二維核磁共振(HMBC)的化學位移 EXPNO=6,PROCNO=1 F1PLO=178.339ppm,F(xiàn)1PHI=10.721ppm,F(xiàn)2PLO=6.881ppm,F(xiàn)2PHI=0.573ppm MI=1.00cm,MAXI=10000.00cm.PC=1.400 # 區(qū)域 頻率 強度 # 區(qū)域 頻率 強度 Row[Hz/F1] [PPM/F1] Row[Hz/F1][PPM/F1] Col[Hz/F2] [PPM/F2] Col[Hz/F2][PPM/F2] 112326590.75176.2058 181814 6218.377 41.2066895573.276 0.95523.11 880 659.0721.09821.66 214525939.373 171.8894 182814 6218.377 41.20665312710.6864.51662.92 891 594.2870.990249.75 314525939.373 171.8894 183814 6218.377 41.20665392662.0334.43552.54 895 572.7240.95432.16 416625312.006 167.7321 184814 6218.377 41.20663084016.4376.69233.45 909 489.8110.81611.62 5166253 12.006 167.7321 185823 5950.42139 4313463793.8476.321414.9 6621940.8053.23381.07 616625312.006 167.7321 1868235950.42139.4313483785.3226.307212.47 7761271.0112.11781.62 716625312.006 167.73213853564.4435.93921.471878235950.42139.4318041107.5871.84552.29 816625312.006 167.73214003477.9485.795 4.161888235950.42139.431831947.726 1.57911.04 916625312.006 167.73214033458.5525.76273.961898235950.42139.43 1858790.52 1.31721.45 10 16625312.006 167.73217811243.9832.07281.171908235950.42139.431864757.09 1.261554.14 11 16625312.006 167.73217881200.4472.000210.44 1918235950.42139.43 1874696.048 1.159872.55 12 16625312.006 167.73217931171.9921.95283.351928235950.42139.431880658.503 1.09729.62 13 16625312.006 167.73218151041.3361.735133.24 1938235950.42139.431891594.53 0.99062.75 14 29021640.068 143.39976791839.97 3.06585.671948235950.42139.431911479.432 0.79887.32 15 29021640.068 143.39977881199.6091.99881.031958235950.42139.431913465.776 0.77617.03 16 29021640.068 143.39978041107.2221.844933.91968275834.79738.66488041106.6871.844 2.69 17 29021640.068 143.39978131053.9181.75612.3 1978275834.79738.66488191017.8031.69591.66 18 29021640.068 143.3997 848848.155 1.41321.25 198 8275834.797 38.6648 8221001.708 1.66911.68 19 32220697.354137.1527 7801246.505 2.077 31.46199 8275834.797 38.6648 841889.9851.48291.01 20 32220697.354137.1527 7881200.075 1.999644.6 200 8275834.797 38.6648 858789.6211.31571.33 21 32220697.354137.1527 7931170.377 1.95013.79 201 8275834.797 38.6648 864758.1641.26333.94 22 32220697.354137.1527 8151040.86 1.73434.31 202 8275834.797 38.6648 874696.1371.15996.09 23 32720566.367136.2847 7801246.629 2.07723.06 203 8275834.797 38.6648 881656.9051.09452.43 24 32720566.367136.2847 7881201.192 2.00155.78 204 8275834.797 38.6648 892593.6060.98911.9 25 32720566.3671 36.2847 7931170.748 1.950747.25205 8275834.797 38.6648 909489.2450.815251.13 26 32720566.3671 36.2847 8151041.067 1.734658.19206 8305743.329 38.0586 8041108.031 1.84621.4 27 36519434.006128.7811 7801245.861 2.075916.02207 8305743.329 38.0586 858790.5511.31721.95 28 36519434.006128.7811 7881200.442 2.000233.73208 8305743.329 38.0586 864757.0911.26152.85 29 36519434.006128.7811 7931171.204 1.951546.7 209 8305743.329 38.0586 874696.0521.15983.54 30 36519434.006128.7811 8151040.94 1.734480.6 210 8305743.329 38.0586 881655.62 1.09242.41 31 38418893.113125.1968 6791839.5473.06519.8 211 8305743.329 38.0586 891594.7620.991 3.06 32 38418893.113 125.1968 7881200.7292.00072.34212 8305743.329 38.0586 909489.4740.815610.76 33 38418893.113 125.1968 8011124.9421.87441.93213 8345623.896 37.2672 8041107.433 1.84521.25 34 38418893.113 125.1968 80311 13.961.85611.36214 8345623.896 37.2672 8221002.039 1.66961.43 35 38418893.113 125.1968 8091077.5561.79543.32215 8345623.896 37.2672 833939.62 1.56561.01 36 38418893.113 125.1968 8131051.6941.75243.14216 8345623.896 37.2672 858790.6031.3 173 4.03 37 38418893.113 125.1968 848847.499 1.41211.45217 8345623.896 37.2672 864756.7681.26091.89 38 45716738.236 110.9173 3613707.3316.17726.44218 8345623.896 37.2672 874696.4441.16042.15 39 45716738.236 110.9173 3903534.1695.88876.75219 8345623.896 37.2672 881656.0111.09314.39 40 45716738.236 110.9173 4862972.8034.95341.24220 8345623.896 37.2672 891594.7760.991 4.19 41 45716738.236 110.9173 4882962.2234.93571.4 221 8345623.896 37.2672 909489.2720.815210.53 42 45716738.236 110.9173 5632520.5594.199812.21 222 8375533.835 36.6704 7771268.681 2.11391.72 43 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2899173174.63221.037 5302715.37 4.52441.73 864757.267 1.26181.67 11066810496.01569.5527 2909173174.63221.037 5332699.76 4.49841.85 869727.306 1.21191.8 11166810496.01569.5527 2919173174.63221.037 5402658.708 4.43 3.19 881656.407 1.09376.11 11266810496.01569.5527 2929223013.42719.9687 5902363.392 3.93794.52 3094014.7436.689513.55 11366810496.01569.5527 2939223013.42719.9687 8041107.602 1.84551 4013472.3745.78572.11 11466810496.01569.5527 2949223013.42719.9687 881656.508 1.09391.01 6791841.8753.069 7.26 11568010155.36467.2954 2959223013.42719.9687 5412651.054 4.41722.15 7771263.9522.106 1.96 11668010155.36467.2954 2969223013.42719.9687 8041107.228 1.844932.23 7941165.7251.94241.57 11768010155.36467.2954 2979223013.42719.9687 881656.545 1.09391 7991137.94 1.89612.13 1187039486.47 62.8629 2989223013.42719.9687 3463793.169 6.32039.48041104.4561.84033.32 1197039486.47 62.8629 2999223013.42719.9687 3483784.896 6.30659.63 8151043.07 1.738 1.92 1207039486.47 62.8629 3009223013.42719.9687 6791839.346 3.06483.08 826975.688 1.62573.29 1217039486.47 62.8629 3019223013.42719.9687 863758.265 1.26341.07 847852.676 1.420719.79 1227069376.976 62.1373 3029223013.42719.9687 3473790.7486.31621.61 863759.5531.26563.39 1237069376.97662.1373 3039223013.427 19.9687 5052862.4564.76952.79 869726.6471.210819.23 1247069376.97662.1373 3049223013.427 19.9687 881655.399 1.092 1.01 881656.1581.093372.09 1257099296.04261.601 3059292803.1918.5756 5902363.6843.93847.53 3084021.188 6.70021.12 1267418346.30755.3075 3069292803.1918.5756 7771264.8022.10743.77 823997.1551.66151.03 1277418346.30755.3075 3079292803.1918.5756 852825.908 1.37613.3 847852.4091.42032.46 1287418346.30755.3075 3089292803.1918.5756 864757.401 1.262 35.15864756.4171.26042.78 1297418346.30755.3075 3099292803.1918.5756 874696.341 1.160325.71869728.7271.21422.15 1307418346.30755.3075 3109292803.1918.5756 881658.199 1.09673.92 881657.3451.09535.08 1317418346.30755.3075 3119292803.1918.5756 891595.647 0.99251.15 902531.5830.88571.25 1327418346.30755.3075 3129292803.1918.5756 909489.518 0.815623.33911478.0220.79654.88 1337817163.19147.4675 3139292803.1918.5756 3463793.1816.32031.69 913466.4940.77735.42 1347817163.19147.4675 3149362611.793 17.3073 4313294.4775.48935.3 7771266.005 2.10941.92 1357817163.19147.4675 3159362611.793 17.3073 5392661.4764.4346 3.1 7831228.4912.04692.67 1367817163.19147.46753169362611.79317.3073 5412647.9664.4121 3.42 7861211.7852.01912.98 1377817163.19147.46753179362611.79317.3073 5642517.9844.1955 1.14 8191018.3011.69675.9 1387817163.19147.46753189362611.79317.3073 6791839.4423.0649 3.64 8221001.86 1.66937.01 1397817163.19147.46753199362611.79317.3073 8041107.1641.8448 37.94864757.418 1.262 6.44 1407817163.19147.46753209362611.79317.3073 8221002.0931.6697 1.62 869725.753 1.20931.48 1417817163.19147.4675 849845.058 140812.98 3219362611.79317.3073 872707.264 1.17851.56 1427817163.19147.4675 858790.203 1.3167 4.12 3229362611.79317.3073 881654.782 1.091 17.83 1437817163.19147.4675 874695.441 1.1588 1.07 3239362611.79317.3073 902531.793 0.886119.86 1447817163.19147.4675 881656.256 1.0935 6.01 324936261 1.793 17.3073 909490.194 0.81682.94 1457817163.19147.4675 891594.695 0.9909 39.6 3259362611.79317.3073 920427.649 0.7 126 1.52 1467817163.19147.4675 909489.613 0.8158 3.9 3269402489.58616.4974 6621941.8193.23552.46 1477867041.05146.6581 4323290.7625.4831 2.39 3279402489.58616.4974 6641929.1723.21441.76 1487867041.05146.6581 6691898.1913.16281.21 3289402489.58616.49748221001.01 1.66791.2 1497867041.05146.6581 6771850.6533.08362.37 3299402489.58616.4974864757.021 1.261466 1507867041.05146.6581 6801 835.948 3.05912.84 3309402489.58616.4974871712.622 1.187410.06 1517867041.05146.6581 6821821.5183.03512.66 3319402489.58616.4974880660.618 1.10072.75 1527867041.05146.6581 6891782.4322.96992.02 3329402489.58616.4974885632.387 1.053718.76 1537867041.05146.6581 7761274.2142.12312.05 3339402489.58616.4974891594.244 0.99013.19 1547867041.05146.6581 8001129.5761.88211.51 3349402489.58616.4974899548.142 0.91331.83 1557867041.05146.6581 80411 06.939 1.84446.33 3359402489.58616.4974911478.615 0.79758.03 1567867041.05146.6581 8081082.7871.80423.27 3369402489.58616.4974913466.429 0.777210.1 1577867041.05146.6581 8111065.1781.77483.51 3379402489.58616.4974920426.462 0.71061.57 1587867041.05146.6581 829959.508 1.59883.1 3389452348.37415.56173833576.6125.95942.25 1597867041.05146.6581 838906.837 1.511 1.42 3399452348.37415.56174023464.8395.77321.77 1607867041.05146.6581 848847.28 1.41181.15 3409452348.37415.56177691311.1562.18479.92 1617867041.05146.6581 858790.53 1.317249.82 3419452348.37415.5617783 1233.2082.05484.9 1627867041.05146.6581 874696.77 1.161 1.14 3429452348.37415.5617 7911184.0391.97298.41 1637867041.05146.6581 881656.443 1.093870.13 3439452348.37415.5617 8041106.4291.84365.06 1647867041.05146.6581 891594.532 0.990618.99 3449452348.37415.5617 8191018.3651.69683.91 1657867041.05146.6581 909489.363 0.815421.1 3459452348.37415.5617 8221001.8341.66935.15 1668146218.37741.2066 4313293.8855.48831.45 3469452348.37415.5617 864756.741 1.26096.6 1678146218.37741.2066 561253 1.5744.2182 3.03 3479452348.37415.5617 872710.417 1.18371.2 1688146218.37741.2066 5642517.8674.19533.26 3489452348.37415.5617 881655.039 1.09142.79 1698146218.37741.2066 6352096.9443.494 2.64 3499452348.37415.5617 885632.486 1.05392.24 1708146218.37741.2066 6781846.0793.076 2.51 3509452348.37415.5617 899550.147 0.916719.61 1718146218.37741.2066 7761274.4842.12361.75 3519452348.37415.5617 906510.518 0.85063.78 1728146218.37741.2066 7831228.1442.04641.41 3529452348.37415.5617 911480.301 0.80038.74 1738146218.37741.2066 7861211.7262.019 1.51 3539452348.37415.5617 914464.362 0.77378.49 1748146218.37741.2066 7991136.1421.89311.43 354 9452348.37415.5617 920426.538 0.710718.76 175 8146218.37741.2066 8041107.2041.844867.13 176 8146218.37741.2066 8191018.3011.69674.37 177 8146218.37741.2066 8221001.4891.66874.96 178 8146218.37741.2066 833939.695 1.56573.66 179 8146218.37741.2066 864756.271 1.26012.02 180 8146218.37741.2066 874695.963 1.15962.98 表10-4(化合物Y的化學結構和二維核磁共振的化學位移的數(shù)據(jù))表明從文冠果化合物Y的13C和質子的化學位移的數(shù)據(jù)而確定的化學功能基團。
根據(jù)這些資料和分析,文冠果組分(化合物)Y分子式C57H88O23。文冠果組分(化合物)Y的化學結構如下圖所示
根據(jù)圖40,41,47,表24,25,30中的這些資料和分析,文冠果組分(化合物)Y1化學結構如下 化學結構2
其它化學結構如下 化學結構1
化學結構3

其中R1,R2和R3=A or B or C;A=黨歸?;?;B=乙?;?;C=H。
化學結構4

其中R1,R2和R3=A or B or C;A=黨歸?;?;B=乙酰基;C=H。
化合物Y化學名稱為3-0-[β-D-半乳糖吡喃酰基(1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖吡喃酰基-21,22-O-二黨歸?;?3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。它屬于三萜皂甙,皂甙元是五環(huán)三萜類化合物,有一個糖鏈和兩個二黨歸酰基。
表10.4.文冠果化合物Y的13C和1H的化學位移的數(shù)據(jù)(溶在吡啶-d5中)a a功能集團根據(jù)HMQC和HMBC的關連數(shù)據(jù)確定(The data were assigned based onHMQC and HMBC correlations.) 圖38是化合物Y的質譜圖譜(MALDT-TOF和ESI-MS測試技術)。
結語 從文冠果分離提出的具有生物活性的化合物是一種三萜皂甙化合物Y,含有有三個糖的糖鏈和雙黨歸?;?,分子式C57H88O23,名稱3-0-[β-D-半乳糖吡喃酰基(1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖吡喃酰基-21,22-O-二黨歸?;?3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。
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權利要求書(按照條約第19條的修改)
1. 一種化合物,其特征在于所述化合物選自具有下列化學結構的化合物,
它的鹽類,酯類,及其衍生物,或代謝產物。
2. 一種化合物,其特征在于所述化合物選自下列化學結構的化合物,
它的鹽類,酯類,及其衍生物或代謝產物,其中R1,R2,R3和R4由短脂肪組鏈組成;R5和R6由一個烴氧基組成。
3. 按權利要求2所述化合物,其中R1,R2,R3和R4=CH3;R5=OH;R6=OH或H;碳23,24,25,26,27,29和30位由CH3或CH2OH或COOH組成。
4. 一種化合物,其特征在于所述化合物選自下列化學結構的化合物,
它的鹽類,酯類,及其衍生物或代謝產物,
其中R1和R2=A或B或C;R2=A或B或C;R3=A或B或C;R4=OH或H;A=當歸?;?;B=乙?;?;C=H;碳23,24,25,26,27,29和30位由CH3或CH2OH或COOH組成;

其中R1和R2=A或B或C;R2=A或B或C;R3=A或B或C;R4=OH或H;A=當歸酰基;B=乙酰基;C=H;碳23,24,25,26,27,29和30位由CH3或CH2OH或COOH組成。
5. 一種化合物,其特征在于所述化合物具有表10.1,10.2,10.3,10.4,24,25,26,27,28,29,或30所示的核磁共振數(shù)據(jù)。
6. 一種化合物,其特征在于所述化合物的化學名稱如下3-0-[β-D-半乳糖吡喃?;?1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖醛酸吡喃?;?21,22-0-雙當歸酰基-3β,15α,16α,21β,22α,28-六羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。
7. 一種化合物,其特征在于所述化合物的化學名稱如下3-0-[β-D-半乳糖吡喃酰基(1→2)]-α-L-阿拉伯糖呋喃?;?1→3)-β-D-葡萄糖醛酸吡喃?;?22-0-(3,4-雙當歸?;?-α-L-鼠李糖吡喃酰基-22-0-乙?;?3β,16α,21β,22α,28-五羥基齊墩果-12-烯五環(huán)三萜皂甙。
8. 一種化合物,其特征在于所述化合物含有
a.糖鏈;
b.三萜類化合物或其它化合物的皂甙元;
c.在碳21或C22位有一側鏈或當歸?;鶊F;
這些基團有機地連接在一起即形成這一化合物。
9. 一種化合物,其特征在于所述化合物含有
a.三萜類化合物或其它化合物的皂甙元;
b.糖鏈連接在三萜類化合物或其它化合物的皂甙元上;
c.這種三萜類化合物或其它化合物皂甙元的碳21或22位上有一側鏈。
10. 按權利9要求所述化合物,其特征在于所述化合物中的側鏈為當歸?;蛴珊挟敋w?;奶擎溄M成。
11. 按權利8或9之一要求所述化合物,其特征在于所述化合物含有一個或一個以上糖鏈和一個或一個以上當歸酰基基團。
12. 一種三萜類皂甙化合物,其特征在于所述化合物有一個含有三個糖或其衍生物的糖鏈和兩個當歸?;鶊F,這個糖鏈和兩個當歸?;瘓F連接在三萜類皂甙元上。
13. 一種三萜類皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有兩個糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F,這兩個糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F連接在三萜類皂甙元上。
14. 一種三萜類皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有四個糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F,這四個糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F連接在三萜類皂甙元上。
15. 一種三萜類皂甙化合物,其特征在于所述化合物含有一個或一個以糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F,這一個或一個以糖鏈和一個或一個以上當歸?;鶊F連接在三萜類皂甙元上。
16. 一種鹽類化合物,其特征在于所述鹽類化合物是如權力要求1-15中的任一化合物衍生而來的鹽。
17. 按權利1-15要求所述化合物,其特征在于所述化合物從天然資源中提出得到或人工合成而來。
18. 一種能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述組合物含有效量的如權利要求1-15項中的化合物中的任一化合物。
19. 按權利18要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是卵巢癌。
20. 按權利18要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是乳腺癌,白血病,肝癌,卵巢癌,膀胱癌,前列腺癌,皮膚癌,骨癌或腦癌。
21. 按權利1-15要求所述化合物中的任一種化合物的用途,其特征在于所述用途是用該化合物治療癌癥。
22. 一種能抑制腫瘤或癌細胞生長的方法,其特征在于所述方法是給該腫瘤或癌細胞用以有效量的如權利要求第1-15項中的任一項的組合物。
23. 一種組合物,其特征在于所述組合物是由如權利要求1-15項中的任一項的化合物和適當?shù)妮d體所組成。
24. 一種藥物組合物,其特征在于所述藥物組合物是由如權利要求1-15中的任一項的化合物和適當?shù)乃幬镙d體所組成。
25. 一種藥物組合物,其特征在于所述藥物組合物含有由如權利要求1-15項中的能抑制腫瘤或癌細胞生長的化合物中的任一項的化合物所組成。
26. 按權利25要求所述的藥物組合物,其特征在于所述藥物組合物能抑制的腫瘤或癌細胞是卵巢癌。
27. 一種由如權利要求1-15中的化合物中的任一項的化合物所組成的組合物,其特征在于所述組合物能醫(yī)治如下疾病松弛膀胱,改善膀胱功能,治療遺尿;改善大腦皮層和小腦的反映能力,防止人們進入深度睡眠狀態(tài);改善睡眠警覺系統(tǒng);防止進入睡眠麻痹的狀態(tài);改善膀胱壁中伸縮感應接收器給中央神經系統(tǒng)傳遞信號的功能;有助于消除由精神緊張或壓力所引起的膀胱的緊張狀態(tài)和反射亢進,從而防止尿急和尿頻;松弛由乙酰膽堿引起的膀胱組織的緊張狀態(tài),抑制乙酰膽堿酶的合成;抗炎,抗病毒;可抑制人體免疫缺失病毒蛋白酶;降低血液中膽固醇和甘油三脂的水平;防止大腦衰老、增進記憶和改善腦功能,治療癡呆、弱智、阿茲海默癥、孤獨癥、腦損傷和帕金森?。会t(yī)治關節(jié)炎、風濕癥、循環(huán)不良、動脈硬化、雷諾病、心絞痛、心臟功能紊亂、冠心病、頭痛、眩暈和腎臟功能紊亂;改善肺功能;治陽萎和早瀉;抑制膀胱癌細胞生長;調節(jié)制尿荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)促腎上腺皮質的荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)5-羥色胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解乙酰膽堿的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)多巴胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解去甲腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)神經肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的功能;治療癌癥如卵巢癌,膀胱癌,骨癌,乳腺癌,白血病,肝癌,前列腺癌和腦癌。
28. 一種自文冠果中分離提取具醫(yī)療效的化合物的方法,其特征在于所述方法包含下列步驟
(a)用適量的有機溶劑,在適當?shù)臅r間內,浸提適當數(shù)量的粉碎了的文冠果樣品適當?shù)拇螖?shù),得有機溶劑浸提物;
(b)收集有機溶劑浸提物;
(c)用適當?shù)挠袡C溶劑在適當?shù)臅r間內,回流熱提有機溶劑浸提物適當?shù)拇螖?shù),得第二提取物;
(d)回收有機溶劑,得流浸膏;
(e)干燥和滅菌第二提取物的流浸膏,得文冠果粗提取物;
(f)用高效液相色譜檢測和特定文冠果的粗提取物;
(g)在高效液相色譜檢測結果的基礎上,用快速液相色譜把文冠果的粗提取物分離成一至多個成分;
(h)篩選檢查每一成分的細胞毒性;
(i)用細胞活性測定法檢測每一成分,找出具有生物活性的成分;
(j)再用HPLC提純和分離上述具有生物活性的成分;
(k)用核磁共振和質譜法確定這些具有生物活性的成分中的化合物的化學結構。
29.一種自文冠果中分離提取具醫(yī)療效果化合物之方法,其特征在于所述方法包含下列步驟
(a)獲得文冠果粗提取物;
(b)用高效液相色譜檢測和特定文冠果的粗提取物;
(c)在高效液相色譜檢測結果的基礎上,用快速液相色譜把文冠果的粗提取物分離成一至多個成分;
(d)篩選檢查每一成分的細胞毒性;
(e)用細胞活性測定法檢測每一成分,找出具有生物活性的成分;
(f)提純和分離上述具有生物活性的成分;
(g)用核磁共振和質譜法法確定這些具有生物活性的成分中的化合物的化學結構。
30. 按權利28要求所述的方法,其特征在于所述粉碎了的文冠果樣品是粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼。
31. 按權利28或29要求所述的方法,其特征在于所述有機溶劑是乙醇,甲醇,乙醚,氯仿,丙酮或其它醇。
32. 按權利28或29要求所述的方法,其特征在于所述有機溶劑和粉碎了的文冠果樣品的比例是2∶1。
33. 按權利28要求所述的方法,其特征在于所述第(a)步中的適當?shù)臅r間是每次20-35小時,適當?shù)慕岽螖?shù)是4-5次。
34. 按權利28要求所述的方法,其特征在于所述第(c)步中的適當?shù)拇螖?shù)是2-3次。
35. 按權利28要求所述的方法,其特征在于所述第(c)步中的回流熱提的適當溫度是80℃。
36. 按權利28或29要求所述的方法,其特征在于所述篩選檢查每一成分的細胞毒性的方法是MTT法。
37. 一種含文冠果的提取物的組合物,其特征在于所述組合物含有皂甙。
38. 一種制備文冠果提取物之方法,其特征在于所述方法包含下列步驟
(i)用量的一種或多種有機溶劑,在適當?shù)臅r間內,浸提適當數(shù)量的粉碎了的文冠果樣品適當?shù)拇?,得有機溶劑浸提物;
(ii)收集有機溶劑浸提物;
(iii)用適當?shù)挠袡C溶劑在適當?shù)臅r間內,回流熱提收有機溶劑浸提物適當?shù)拇螖?shù),得第二提取物;
(iv)回收有機溶劑,得流浸膏;
(v)干燥和滅菌第二提取物的流浸膏,得粉狀文冠果粗提取物;
39. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述粉碎了的文冠果樣品是粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼。
40. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述有機溶劑是乙醇,甲醇,乙醚,氯仿,丙酮或其它醇。
41. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述有機溶劑和粉碎了的文冠果樣品的比例是2∶1。
42. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述第(i)步中的適當?shù)臅r間是每次20-35小時,適當?shù)慕岽螖?shù)是4-5次。
43. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述第(iii)步中的適當?shù)拇螖?shù)是2-3次。
44. 按權利38要求所述的方法,其特征在于所述第(iii)步中的回流熱提的適當溫度是80℃。
45. 一種能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述組合物含有效數(shù)量的如權利要求38中的提取物。
46. 按權利45要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是卵巢癌。
47. 按權利45要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是骨癌。
48. 按權利45要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是膀胱癌。
49. 按權利45要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是前列腺癌。
50. 按權利45要求所述的能抑制腫瘤或癌細胞生長的組合物,其特征在于所述能抑制的腫瘤或癌細胞是乳腺癌,白血病,肝癌,卵巢癌,膀胱癌,前列腺癌,皮膚癌,骨癌或腦癌。
51. 一種由如權利要求37中的組合物,其特征在于所述組合物能醫(yī)治如下疾病松弛膀胱,改善膀胱功能,治療遺尿;改善大腦皮層和小腦的反映能力,防止人們進入深度睡眠狀態(tài);改善睡眠警覺系統(tǒng);防止進入睡眠麻痹的狀態(tài);改善膀胱壁中伸縮感應接收器給中央神經系統(tǒng)傳遞信號的功能;有助于消除由精神緊張或壓力所引起的膀胱的緊張狀態(tài)和反射亢進,從而防止尿急和尿頻;松弛由乙酰膽堿引起的膀胱組織的緊張狀態(tài),抑制乙酰膽堿酶的合成;抗炎,抗病毒;可抑制人體免疫缺失病毒蛋白酶;降低血液中膽固醇和甘油三脂的水平;防止大腦衰老、增進記憶和改善腦功能,治療癡呆、弱智、阿茲海默癥、孤獨癥、腦損傷和帕金森??;醫(yī)治關節(jié)炎、風濕癥、循環(huán)不良、動脈硬化、雷諾病、心絞痛、心臟功能紊亂、冠心病、頭痛、眩暈和腎臟功能紊亂;改善肺功能;治陽萎和早瀉;抑制膀胱癌細胞生長;調節(jié)制尿荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)促腎上腺皮質的荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)5-羥色胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解乙酰膽堿的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)多巴胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解去甲腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)神經肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的功能;治療癌癥如卵巢癌,膀胱癌,骨癌,乳腺癌,白血病,肝癌,前列腺癌和腦癌等。
52. 一種含文冠果的提取物的組合物,其特征在于所述組合物含有皂甙;或生物堿;或黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇,酚類化合物;或多糖,糖苷,其它糖類;或單寧;或香豆素,香豆素糖苷;或芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸;或蛋白質,或者含任兩種或兩種以上的上述成分;該文冠果的提取物來自文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼。
53. 一種由如權利要求52中的組合物,其特征在于所述組合物能醫(yī)治如下疾病松弛膀胱,改善膀胱功能,治療遺尿;改善大腦皮層和小腦的反映能力,防止人們進入深度睡眠狀態(tài);改善睡眠警覺系統(tǒng);防止進入睡眠麻痹的狀態(tài);改善膀胱壁中伸縮感應接收器給中央神經系統(tǒng)傳遞信號的功能;有助于消除由精神緊張或壓力所引起的膀胱的緊張狀態(tài)和反射亢進,從而防止尿急和尿頻;松弛由乙酰膽堿引起的膀胱組織的緊張狀態(tài),抑制乙酰膽堿酶的合成;抗炎,抗病毒;可抑制人體免疫缺失病毒蛋白酶;降低血液中膽固醇和甘油三脂的水平;防止大腦衰老、增進記憶和改善腦功能,治療癡呆、弱智、阿茲海默癥、孤獨癥、腦損傷和帕金森病;醫(yī)治關節(jié)炎、風濕癥、循環(huán)不良、動脈硬化、雷諾病、心絞痛、心臟功能紊亂、冠心病、頭痛、眩暈和腎臟功能紊亂;改善肺功能;治陽萎和早瀉;抑制膀胱癌細胞生長;調節(jié)制尿荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)促腎上腺皮質的荷爾蒙的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)5-羥色胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解乙酰膽堿的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)多巴胺的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調解去甲腎上腺素的釋放,分解和攝取及其受體的功能;調節(jié)神經肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的功能;治療癌癥如卵巢癌,膀胱癌,骨癌,乳腺癌,白血病,肝癌,前列腺癌和腦癌等。
54. 一種制備如權利要求52中的組合物之方法,其特征在于所述方法包含下列步驟
(A)用乙醇浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品3次,得乙醇浸提物;收集和濃縮乙醇浸提物,得濃縮浸提物;用熱水浸提濃縮浸提物,得水溶性浸提物和非水溶性浸提物;干燥,滅菌所得水溶性浸提物和非水溶性浸提物,得水溶性和非水溶性黃色粉末狀黃酮提取物;該水溶性和非水溶性黃色粉末狀黃酮提取物含黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇,酚類化合物,有機酸和其它化合物。
(B)用乙醇,甲醇或其它有機溶劑浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品,得有機溶劑浸提物;回收溶劑得流浸膏;干燥,滅菌所得流浸膏,得皂甙提取物;該皂甙提取物有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等;
(C)用乙醇,甲醇或其它有機溶劑浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提物;收集有機溶劑浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次,得第二有機溶劑浸提物;溶解第二有機溶劑浸提物于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物;該粗皂甙提取物主要含有皂甙;
(D)用0.5%NaOH溶劑浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品,得水浸提物;收集水浸提液并用乙醚浸提文冠果水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;該香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等;
(E)室溫下,用水浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品24小時,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾二次水浸提物,得過濾水浸提物;濃縮二次水浸提物,得流浸膏;該流浸膏含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物;
(F)用水浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物;該提取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等;
(G)用10%的鹽酸浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑浸提物;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物;該提取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等;
(H)用95%的乙醇浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或
(I)用丙酮的水溶液(1∶1)浸提浸提粉碎了的文冠果的果殼,種仁,枝,樹干,葉,根,樹皮,或種殼樣品,2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚,得水溶液浸提物;用乙酸乙酯和正丁醇萃取水溶液浸提物,得乙酸乙酯和正丁醇浸提物;回收乙酸乙酯和正丁醇,得單寧提取物;該提取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白。
55. 一種組合物,其特征在于所述組合物能調節(jié)Wnt通路中的組元或它們的受體以阻止癌細胞的增殖;或能調節(jié)Ras-MAP激酶鏈中的組元或它們的受體;或能調節(jié)Ras-dependent或Myc的通路中的組元或它的受體;或能啟動“檢查機制”以阻止癌細胞的增殖;或能調節(jié)胞外生長的組元或其受體的;或能調節(jié)Ras和MAP激酶鏈中的組元或其受體以阻止卵巢癌細胞的增殖;或能調節(jié)Myc細胞增殖以阻止癌細胞的裂殖;或能調節(jié)α-TGF的組元或其受體;或能調節(jié)β-TGF的組元或其受體;或能調節(jié)蛋白質E6,E7和調節(jié)蛋白質Rb,p53的釋放以抑制畸形細胞的裂殖;或能調節(jié)或能與蛋白質起反應以引起癌細胞死亡;或能調節(jié)合成蛋白質p53的通路和其受體以抑制癌細胞裂殖;或能使細胞中被阻斷的自殺信號重新釋放;或能調節(jié)BMP,GF,Jak-jnk-STAT和Jun-fos的通路和其受體;或能調節(jié)糖腎上腺皮質激素,雌激素,酪氨酸激酶,G-蛋白,和EGF的受體;該組合物是由一定濃度如權利要求1-15中所述的任一化合物或權利要求37所述的組合物所組成。
56. 一種能減少尿量或排尿次數(shù)的組合物,其特征在于所述組合物由一定濃度如權利要求1-15中所述的任一化合物或權利要求37所述的組合物所組成。
權利要求
1. 本專利申請的一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物。
2. 本專利申請的一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的葉的提取物。
3. 本專利申請的一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的枝干的提取物。
4. 一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的種仁的提取物。
5. 一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的種仁的提取物。
6. 本專利申請的一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的根的提取物。
7. 本專利申請的一種植物的提取物,其特征在于所述植物提取物為一種叫文冠果的植物的樹皮的提取物。
8. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
9. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
10. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
11. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
12. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
13. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
14. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
15. 如申請專利范圍第1項所述文冠果的植物的果殼和/或果柄的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
16. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
17. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
18. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
19. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
20. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
21. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
22. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
23. 如申請專利范圍第2項所述文冠果的植物的葉的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
24. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
25. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
26. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
27. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
28. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
29. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
30. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
31. 如申請專利范圍第3項所述文冠果的植物的枝干的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
32. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
33. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
34. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
35. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
36. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
37. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
38. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
39. 如申請專利范圍第4項所述文冠果的植物的種仁的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
40. 如申請專利范圍第5項所述文冠果的植物的種殼的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
41. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
42. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
43. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
44. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
45. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
46. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
47. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
48. 如申請專利范圍第6項所述文冠果的植物的根的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
49. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有黃烷醇,黃酮醇,黃烷酮醇等和其它化合物如酚類化合物,有機酸等。
50. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有文冠果皂甙和其它化合物,如糖,粗蛋白等。
51. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有粗皂甙。
52. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有香豆素,香豆素糖苷和其它化合物如糖,粗蛋白等。
53. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有多糖,糖苷,其它糖類,和皂甙,單寧等其它化合物。
54. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有生物堿,香豆素,糖和其它化合物如粗蛋白等。
55. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有芳香有機酸,有機脂肪酸,萜類有機酸和其它化合物如粗蛋白等。
56. 如申請專利范圍第7項所述文冠果的植物的樹皮的提取物,其特征是該取物含有單寧和其它化合物如有機酸,糖類,粗蛋白等。
57. 本專利申請的一種可治療遺尿的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
58. 本專利申請的一種可松弛膀胱的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
59. 本專利申請的一種可能改善大腦皮層和小腦反應能力的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
60. 本專利申請的一種能防止睡眠進入深度睡眠的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
61. 本專利申請的一種能改善膀胱壁中的擴約感受接收器給中樞神經系統(tǒng)發(fā)出信號能力的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
62. 本專利申請的一種能治療由壓力,緊張,衰老或反射亢進造成尿急,尿頻的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
63. 本專利申請的一種能松弛由乙酰膽堿(Ach)引起膀胱組織緊張的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
64. 本專利申請的一種能用作乙酰膽堿酯酶(AchE)的抑制劑的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
65. 本專利申請的一種抗炎的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
66. 本專利申請的一種抗病毒的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
67. 本專利申請的一種能抑制人體免疫缺失病毒蛋白酶的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
68. 本專利申請的一種可用作癌細胞抑制劑的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
69. 本專利申請的一種可降低血液中膽固醇和甘油三酯的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
70. 本專利申請的一種能防止大腦衰老,增進記憶和改善腦功能;治療夜尿,尿頻,尿失禁,癡呆,弱智,老年癡呆,孤獨癥,腦損傷,帕金森病等和其它由于腦功能不健全或障礙所引起的病癥;醫(yī)治關節(jié)炎,風濕癥,循環(huán)不良,動脈硬化,雷諾病,心絞痛,心臟功能紊亂,冠心病,頭痛,眩暈,腎臟功能紊亂,陽萎和早瀉的組合物,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1,2,3,4,6,7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
71. 本專利申請的一種能防止大腦衰老,增進記憶和改善腦功能;治療夜尿,尿頻,尿失禁,癡呆,弱智,老年癡呆,孤獨癥,腦損傷,帕金森病等和其它由于腦功能不健全或障礙所引起的病癥;醫(yī)治關節(jié)炎,風濕癥,循環(huán)不良,動脈硬化,雷諾病,心絞痛,心臟功能紊亂,冠心病,頭痛,眩暈,腎臟功能紊亂,陽萎和早瀉的組合物,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第5項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成。
72. 本專利申請的一種配伍的藥物,其特征是所述的配伍的藥物是由如申請專利范圍第1-5項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成藥物或保健食品和下列植物或其提取物,或其它藥物配伍葡萄籽提取物或其它抗氧化劑提取物;蟲草(Cordyceps spp.)或其提取物,銀杏(Gingko biloba)或其提取物,人參(Panax ginseng)或其提取物,西洋參(P.quinquefolium)或其提取物,黃皮(Clausena lansium)或其提取物,聚果菊(Echinacea)或其提取物,小金絲桃(Hypericum perforatum)或其提取物,葛根(Pueraria lobata)或其提取物,天麻(Gastrodia elata)或其提取物,蜜環(huán)菌(Armillariella mellea)或其提取物,丹參(Salvia miltiorrhiza)或其提取物,三七(Panax notoginsen)或其提取物,紅曲(Monascus)或發(fā)酵物(Red yeast rice),黃芪(Hedysarum polybotrys)或其提取物,地黃(Rehmanniaglutinosa)或其提取物,當歸(Angelica sinensis)或其提取物,遠志(Polygala tenuifoila)或其提取物,靈芝(Ganoderma spp.)或其提取物,茯苓(Poria cocos)或其提取物,甘草(Glycyrrhizauralensis)或其提取物,石杉堿A(Huperzine A),Lacithin,Metrifonate,Nocetile,reatine,葉酸,氨基酸,維他命B,D,K和纖維添加物等。
73. 本專利申請的由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物的任一種所制成藥物或保健食品的劑型,其特征是所述的劑型為膠囊,片劑,散劑水劑或其它劑型。
74. 如申請專利范圍第8項所述的文冠果的果殼和/或果柄的黃酮類化合物提取物,其特征是制備黃酮提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎文冠果果殼和/或果柄;用乙醇浸提文冠果果殼和/或果柄粉3-4次,得乙醇浸提液;回收乙醇,得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
75. 如申請專利范圍第16項所述的文冠果的葉黃酮類化合物提取物,其特征是制備葉粗黃酮提取物(包擴水溶性和非水溶性黃酮),制備工藝依下列步驟
采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用乙醇浸提文冠果葉粉3次,得乙醇浸提液;濃縮乙醇浸提液;用熱水浸提濃縮了的乙醇浸提液,得水溶性浸提物和非水溶性浸提物;干燥,滅菌所得水溶性浸提物和非水溶性浸提物,得水溶性和非水溶性黃色粉末狀黃酮提取物。
76. 如申請專利范圍第24項所述的文冠果的枝干黃酮提取物,其特征是制備工藝依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干得文冠果枝干粉;用乙醇浸提文冠果枝干粉4次,得乙醇浸提液;回收乙醇得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
77. 如申請專利范圍第32項所述的從文冠果的種仁粗黃酮類化合物提取物,其特征是制備粗黃酮提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油,得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉,進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁霜;用乙醇提取種仁霜3-4次;回收乙醇得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
78. 如申請專利范圍第41項所述文冠果的根粗黃酮類化合物提取物,其特征是制備黃酮提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果根得文冠果根粉;用乙醇浸提文冠果根粉3-4次,得乙醇浸提液;回收乙醇得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
79. 如申請專利范圍第49項所述文冠果的樹皮粗黃酮類化合物提取物,其特征是制備樹皮粗黃酮類化合物提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用乙醇浸提文冠果樹皮粉3-4次,得乙醇浸提液;回收乙醇得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得黃色粉末狀黃酮提取物。
80. 如申請專利范圍第9項所述文冠果的果殼和/或果柄的有機溶劑提取物,其特征是該提取物制備方法依下列步驟采收文冠果(8-10月),清選果殼,干燥;粉碎文冠果果殼;醇類等有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果果殼粉(有機溶劑∶果殼粉2∶1);在室溫下,浸提4-5次,每次20-35小時;回收溶劑得流浸膏;干燥,滅菌得醇等有機溶劑提取物;得有機溶劑提取物是含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
81. 如申請專利范圍第17項所述文冠果的葉的醇類等有機溶劑提取物,其特征是制備方法依下列步驟采收文冠果葉(6-10月),清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果葉粉(有機溶劑∶文冠果葉粉2∶1);在室溫下,浸提3-4次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提液;回收有機溶劑,得流浸膏;用乙醇和水浸提流浸膏,得二次流浸膏;用正丁醇浸提二次流浸膏,得正丁醇浸提物;回收正丁醇,得三次流浸膏;干燥,滅菌所得三次流浸,得葉皂甙提取物;得葉皂甙提取物含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
82. 如申請專利范圍第25項所述文冠果的枝干的醇類等有機溶劑提取物,其特征是制備方法依下列步驟采收文冠果枝干(10-12月),清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得枝干粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果枝干粉(有機溶劑∶枝干粉2∶1);在室溫下,浸提2-3次,每次20-30小時,得有機溶劑浸提液;回收有機溶劑,得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏;得皂甙提取物;得皂甙提取物含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
83. 如申請專利范圍第33項所述文冠果的種仁的有機溶劑提取物,其特征是制備方法依下列步驟采收文冠果(8-10月),清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁霜;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提種仁霜(有機溶劑∶種仁粉2∶1),在室溫下,浸提4-5次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提液;回收有機溶劑得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏,得有機溶劑取物;得有機溶劑提取物含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
84. 如申請專利范圍第42項所述文冠果的根的有機溶劑提取物,其特征是制備方法依下列步驟采收文冠果根(10-12月),清選,干燥;粉碎文冠果根,得根粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果根粉(有機溶劑∶根粉2∶1);在室溫下,浸提2-3次,每次20-30小時,得有機溶劑浸提液;回收有機溶劑得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得根有機溶劑提取物;得根有機溶劑提取物含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
85. 如申請專利范圍第50項所述文冠果的樹皮的有機溶劑提取物,其特征是制備方法依下列步驟采收文冠果樹皮(10-12月),清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得樹皮粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果樹皮粉(有機溶劑∶樹皮粉2∶1的比例);在室溫下,浸提2-3次,每次20-30小時,得有機溶劑浸提液;回收有機溶劑得流浸膏;干燥,滅菌流浸膏得樹皮有機溶劑提取物;得樹皮有機溶劑提取物含有文冠果皂甙和其它化合物如糖,粗蛋白等。
86. 如申請專利范圍第10項所述的從文冠果的果殼和/或果柄粗皂甙提取物,
其特征是制備果殼和/或果柄粗皂甙提取物方法依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎文冠果果殼和/或果柄,果殼,得果殼和/或果柄粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果果殼和/或果柄(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得有機溶劑浸提液;收集浸提取液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物;得粗皂甙提取物主要含有皂甙。
87. 如申請專利范圍第18項所述的文冠果的葉粗皂甙提取物,其特征是制備葉粗皂甙提取物的方法依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果葉粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液;收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物;得粗皂甙提取物主要含有皂甙。
88. 如申請專利范圍第26項所述的文冠果的枝干粗皂甙提取物,其特征是制備枝干粗皂甙提取物的方法依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果枝干粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液;收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
89. 如申請專利范圍第34項所述的文冠果的種仁粗皂甙提取物,其特征是制備粗皂甙提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁霜;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提種仁霜,(2∶1)4-5次,每次20-35時,得有機溶劑浸提液;收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
90. 如申請專利范圍第43項所述的文冠果的根粗皂甙提取物,其特征是制備根粗皂甙提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果根,得文冠果根粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果根粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液;收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。
91. 如申請專利范圍第51項所述的文冠果的樹皮粗皂甙提取物,其特征是制備樹皮粗皂甙提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用有機溶劑(乙醇,甲醇等)浸提文冠果樹皮粉(2∶1)4-5次,每次20-35小時,得機溶劑浸提液;收集浸提液,再回流熱提(80℃)2-3次;收集合并提取液;回收有機溶劑,得流浸膏;溶解流浸膏于水中,得水浸提液;用正丁醇浸提水浸提液,得正丁醇浸提物;用色譜法分離正丁醇浸提物,得粗皂甙提取物。該粗皂甙提取物主要含有皂甙。
92. 如申請專利范圍第11項所述的文冠果的果殼和/或果柄制備香豆素提取物的方法,其特征是制備工藝依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎文冠果果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉;用0.5%NaOH溶液浸提果殼和/或果柄粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果果殼和/或果柄粉水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸成化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
93. 如申請專利范圍第19項所述的文冠果的葉香豆素提取物,其特征是制備香豆素提取物的方法依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用0.5%NaOH溶液浸提文冠果葉粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果葉水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
94. 如申請專利范圍第27項所述的文冠果的枝干香豆素提取物,其特征是制備枝干香豆素提取物的方法依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用0.5%NaOH溶液浸提文冠果枝干粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
95. 如申請專利范圍第35項所述的文冠果的種仁香豆素提取物,其特征是制備種仁香豆素提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁粉;用0.5%NaOH溶液浸提文冠果種仁粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果種仁粉水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
96. 如申請專利范圍第44項所述的文冠果的根香豆素提取物,其特征是制備根香豆素提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果果根,得文冠果根粉;用0.5%NaOH溶液浸提文冠果根粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果根水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
97. 如申請專利范圍第52項所述的文冠果的樹皮香豆素提取物,其特征是制備樹皮香豆素提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果果樹皮,得文冠果樹皮粉;用0.5%NaOH溶液浸提文冠果樹皮粉,得水浸提物;用乙醚浸提文冠果樹皮水浸提物,得乙醚浸提物;用HCl中和乙醚浸提物;濃縮,酸化乙醚浸提物,得香豆素提取物;得香豆素提取物主要含有香豆素,香豆素糖甙,糖類,蛋白質和其它化合物。
98. 如申請專利范圍第12項所述的文冠果的果殼和/或果柄水的提取物,其特征是制備果殼和/或果柄水提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉;用水在室溫下浸提果殼和/或柄粉24小時,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
99. 如申請專利范圍第20項所述的文冠果的葉水的提取物,其特征是制備葉的水提取物的方法依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用水在室溫下浸提文冠果葉粉24,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
100. 如申請專利范圍第28項所述的文冠果的枝干水的提取物,其特征是制備枝干水提取物的方法依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用水在室溫下浸提文冠果枝干粉24小時,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
101. 如申請專利范圍第36項所述的文冠果的種仁水的提取物,其特征是制備種仁水提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉,得去油種仁粉;用水在室溫下浸提文冠果種仁粉24小時,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
102. 如申請專利范圍第45項所述的文冠果的根水的提取物,其特征是制備根水提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果根粉;用水在室溫下浸提文冠果根粉24小時,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
103. 如申請專利范圍第53項所述的文冠果的樹皮水的提取物,其特征是樹皮備水提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用水在室溫下浸提文冠果樹皮粉24,得水浸提物;再在60-70℃的溫度下熱提1-2小時,得二次水浸提物;過濾,濃縮二次水浸提物,得流浸膏;得流浸膏(水提取物)主要含有糖,多糖類,糖甙,皂甙,單寧和其它化合物。
104. 如申請專利范圍第13項所述的文冠果的果殼和/或果柄生物堿提取物,其特征是制備果殼和/或果柄生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉;用水浸提果殼和/或果柄粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
105. 如申請專利范圍第21項所述的文冠果的葉生物堿提取物,其特征是制備生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果果葉,得文冠果葉粉;用水浸提文冠果葉粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
106. 如申請專利范圍第29項所述的文冠果的枝干的生物堿提取物,其特征是制備生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用水浸提文冠果枝干粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
107. 如申請專利范圍第37項所述的文冠果的種仁的生物堿提取物,其特征是制備生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉,得去油種仁粉;用水浸提文冠果種仁粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
108. 如申請專利范圍第46項所述的文冠果的根的生物堿提取物,其特征是制備生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果果根,得文冠果根粉;用水浸提文冠果葉根(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
109. 如申請專利范圍第54項所述的文冠果的樹皮的生物堿提取物,其特征是制備生物堿提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果果樹皮,得文冠果樹皮粉;用水浸提文冠果樹皮粉(6∶1)3-4次,每次10-15小時,得水浸提物;收集合并水浸提物;用NaOH堿化合并的水浸提物,使pH達到10-12,得堿化浸提物;用甲苯浸提堿化浸提物,得甲苯浸提物;使甲苯浸提物通過pH為5-7的2%二羧酸,得二羧酸浸提液;減壓濃縮二羧酸浸提液,得粗生物堿提取物,該粗生物堿提取物主要含有生物堿,香豆素,糖類,蛋白質和其它化合物。
110. 如申請專利范圍第14項所述的文冠果的果殼和/或果柄的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎果殼和/或果柄,得果殼和/或果柄粉;用10%的鹽酸浸提文冠果果殼和/或果柄粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物,該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
111. 如申請專利范圍第22項所述的文冠果的葉的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用10%的鹽酸浸提文冠果葉粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物。該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
112. 如申請專利范圍第30項所述的文冠果的枝干的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用10%的鹽酸浸提文冠果枝干粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物,該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
113. 如申請專利范圍第38項所述的文冠果的種仁的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁粉;用10%的鹽酸浸提文冠果種仁粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物,該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
114. 如申請專利范圍第47項所述的文冠果的根的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果根,得文冠果根粉;用10%的鹽酸浸提文冠果根粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物,該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
115. 如申請專利范圍第55項所述的文冠果的樹皮的芳香有機酸提取物,其特征是制備芳香有機酸提取物的方法依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用10%的鹽酸浸提文冠果樹皮粉,得酸浸提液;用有機溶劑(乙醚或苯)浸提酸浸提液,得有機溶劑浸提物;用5-10%HaHCO3浸提有機溶劑浸提物,得HaHCO3浸提物;酸化HaHCO3浸提物,過濾,沉淀,再用有機溶劑萃取沉淀物,得二次有機溶劑;回收機溶劑,得粗芳香有機酸提取物,該粗芳香有機酸提取物主要含有芳香有機酸,脂肪酸,萜類有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
116. 如申請專利范圍第15項所述的文冠果的果殼和/或果柄的單寧提取物,其特征是制備單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄干燥;粉碎果殼和/或果柄粉;用95%的乙醇浸提果殼和/或果柄粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果,清選果殼和/或果柄,干燥;粉碎殼和/或果柄,得殼和/或果柄粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提殼和/或果柄粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
117. 如申請專利范圍第23項所述的文冠果的葉的單寧提取物,其特征是單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果葉,得文冠果葉粉;用95%的乙醇浸提文冠果葉粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果葉,清選,干燥;粉碎文冠果果葉,得文冠果葉粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果葉粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
118. 如申請專利范圍第31項所述的文冠果的枝干的的單寧提取物,其特征是單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用95%的乙醇浸提文冠果枝干粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果枝干,清選,干燥;粉碎文冠果枝干,得文冠果枝干粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果枝干粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
119,如申請專利范圍第39項所述的文冠果的種仁的的單寧提取物,其特征是單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁粉;用95%乙醇浸提文冠果種仁粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果,清選種子,干燥;剝殼得到種仁;壓軋種仁去油得種仁餅;干燥,粉碎種仁餅得種仁粉;用正己烷提取種仁粉進一步去油;回收正己烷;干燥,磨粉得去油種仁粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果種仁粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
120. 如申請專利范圍第48項所述的文冠果的根的單寧提取物,其特征是單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果根,得文冠果根粉;用95%的乙醇浸提文冠果根粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果根,清選,干燥;粉碎文冠果根,得文冠果根粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果根粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
121. 如申請專利范圍第56項所述的文冠果的樹皮的單寧提取物,其特征是單寧提取物的方法之一依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用95%的乙醇浸提文冠果樹皮粉,得乙醇浸提液;減壓濃縮乙醇浸提液,得單寧提取物;或制備單寧提取物的方法之二依下列步驟采收文冠果樹皮,清選,干燥;粉碎文冠果樹皮,得文冠果樹皮粉;用丙酮的水溶液(1∶1)浸提文冠果樹皮粉2-7天,得丙酮的水溶液浸提物;在50℃回收丙酮,得濃縮的浸提物;過濾濃縮的浸提物;用乙醚萃取過濾的浸提物,回收乙醚得水溶液浸提物;用乙酸乙酯萃取水溶液浸提物;回收乙酸乙酯,得單寧提取物,該單寧提取物主要含有單寧,有機酸,糖類,蛋白質和其它化合物。
122. 本專利申請的一種可促進膀胱發(fā)育的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
123. 本專利申請的一種可制止深度睡眠的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
124. 本專利申請的一種可提高睡眠警覺狀態(tài)的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
125. 本專利申請的一種可調節(jié)制尿荷爾蒙(ADH)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
126. 本專利申請的一種可調節(jié)促腎上腺皮質的荷爾蒙(ACTH)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
127. 本專利申請的一種可調節(jié)5-羥色胺(5-HT)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
128. 本專利申請的一種可調解乙酰膽堿(Ach)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
129. 本專利申請的一種可調節(jié)腎上腺素(AD)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
130. 本專利申請的一種可調節(jié)多巴胺(DA)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
131. 本專利申請的一種可調解去甲腎上腺素(NE)的釋放,分解和攝取及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
132. 本專利申請的一種有助防止睡眠麻痹的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
133. 本專利申請的一種可調節(jié)肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
134. 本專利申請的一種治療癌癥(卵巢癌,膀胱癌,骨癌,乳腺癌,白血病,肝癌,前列腺癌,結腸癌,宮頸癌,皮膚癌和腦癌等)的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
135. 本專利申請的一種可改善肺和膀胱功能的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
136. 本專利申請的一種可促進骨胳生長發(fā)育的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
137. 本專利申請的一種治療骨癌的藥物或保健食品,其特征是所述的藥物或保健食品是由如申請專利范圍第1-7項所述的文冠果的植物提取物所制成。
201. 本專利申請一化合物,其特征是所述化合物的化學結構如下
202. 本專利申請一化合物,其特征是所述化合物含有
a.一個糖鏈;
b.三萜類化合物或其它皂甙元;
c.在碳21和22位有一側鏈,或當歸?;瘓F。
這些集團有機的(operatively)連在一起形成了該化合物。
203. 如申請專利范圍第202項所述的化合物,其特征是所述化合物含有兩個或兩個以上的糖鏈和一至多個當歸酰基集團。
204. 如申請專利范圍第202或203項所述的化合物,其特征是所述化合物可抑制癌細胞生長。
205. 本專利申請的一種鹽類化合物,其特征是所述鹽類化合物為如申請專利范圍第201-204項所述化合物的鹽類化合物。
206. 本專利申請的一種組合物,其特征是所述組合物由如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物中任一項化合物和一種適合的載體所組成。
207. 本專利申請的一種藥物,其特征是所述藥物是由一定數(shù)量的如申請專利范圍第206所述組合物和一種適合的藥物載體所組成。
208. 本專利申請的一種抗卵巢癌的組合物,其特征是所述組合物是由如申請專利范圍第207項所述組合物所組成。
209. 本專利申請的一種抑制卵巢癌細胞生長的方法,其特征是所述抑制卵巢癌細胞生長的方法是用一定濃度的如申請專利范圍第207項所述組合物去接觸卵巢癌細胞。
210. 本專利申請的一種治療或抗卵巢癌的方法,其特征是所述治療或抗卵巢癌的方法是適當調整如申請專利范圍第207項所述組合物的濃度。
211. 本專利申請的一種治療遺尿的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
212. 本專利申請的一種松弛膀胱的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
213. 本專利申請的一種能改善大腦皮層和小腦反應能力的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
214. 本專利申請的一種能防止睡眠進入深度睡眠的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
215. 本專利申請的一種能改善膀胱壁中的擴約感受接收器給中樞神經系統(tǒng)發(fā)出信號能力的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
216. 本專利申請的一種能治療由壓力,緊張,衰老或反射亢進引起膀胱緊張造成尿頻和尿急的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
217. 本專利申請的一種能松弛由乙酰膽堿(Ach)引起膀胱組織緊張的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
218. 本專利申請的一種能用作乙酰膽堿酯酶(AchE)的抑制劑的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
219. 本專利申請的一種抗炎的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
220. 本專利申請的一種抗病毒的的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
221. 本專利申請的一種能抑制人體免疫缺失病毒蛋白酶的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
222. 本專利申請的一種用作癌細胞抑制劑的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
223. 本專利申請的一種可降低血液中膽固醇和甘油三酯的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
224. 本專利申請的一種能防止大腦衰老和改善腦功能,治療夜尿,尿頻,尿失禁,癡呆,弱智,老年呆,孤獨癥,腦損傷,帕金森病等和由于腦功能不健全或障礙所引起的病癥,醫(yī)治關節(jié)炎,風濕癥,循環(huán)不良,動脈硬化,雷諾病,心絞痛,心臟功能紊亂,冠心病,頭痛,眩暈,腎臟功能紊亂,陽萎和早瀉的的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
225. 本專利申請的一種能改善膀胱功能或預防膀胱癌的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
226. 本專利申請的一種可防止進入深度睡眠的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
227. 本專利申請的一種可提高睡眠警覺狀態(tài)的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
228. 本專利申請的一種可調節(jié)制尿荷爾蒙(ADH)的釋放,分解和攝取的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
229. 本專利申請的一種可調節(jié)制促腎上腺皮質荷爾蒙(ACTH)的分泌,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
230. 本專利申請的一種可調節(jié)多5-羥色胺(5-HT)的釋放,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
231. 本專利申請的一種可調乙酰膽堿(Ach)的釋放,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
232. 本專利申請的一種可調節(jié)腎上腺素(AD)的釋放,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
233. 本專利申請的一種可調節(jié)多巴胺(DA)的釋放,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
234. 本專利申請的一種可調去甲腎上腺素(NE)的釋放,分解和攝取及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
235. 本專利申請的一種可有助防止睡眠麻痹的(sleep pararlysis)組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
236. 本專利申請的一種可調節(jié)肽的合成,釋放,分解和活性及其受體的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
237. 本專利申請的一種可治療癌癥,如乳腺癌,白血病,肝癌,巢癌,膀胱癌,前列腺癌和腦癌等的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
238. 本專利申請的一種改善肺或膀胱功能的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
239. 本專利申請的一種可治療骨癌的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204,205,266,267,268,或269項中所述化合物。
240. 本專利申請的一種制備文冠果提取物的方法,其特征是所述制備工藝依下列步驟
a.采收文冠果樣品,清選,干燥;
b.粉碎文冠果樣品,得樣品粉;
c.用有機溶劑(一種或幾種)浸提文冠果樣品粉,得有機溶劑浸提液;
d.收集浸提液,再回流熱提;
e.收集合并提取液;
f.回收有機溶劑得流浸膏;
g.干燥,滅菌流浸膏得文冠果提取物。
241. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述文冠果樣品是文冠果的果殼和/或果柄,枝干,葉,種仁,種殼,根,和樹皮。
242. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述有機溶劑是乙醇,甲醇,乙醚,氯仿和丙醇等。
243. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述有機溶劑和文冠果樣品的比例是2比1。
244. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的有機溶劑浸提文冠果樣品,浸提4-5次,每次20-35小時。
245. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的回流熱提是回流熱提2-3次。
246. 如申請專利范圍第240項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的回流熱提溫度是80℃。
247. 本專利申請的一種三萜類皂甙化合物,其特征是所述皂甙化合物的母環(huán)上連有三個糖和一至多個二黨歸?;?。
248. 本專利申請的一種三萜類皂甙化合物,其特征是所述皂甙化合物的母環(huán)上連有兩個糖和一至多個二黨歸?;?br> 249. 本專利申請的一種三萜類皂甙化合物,其特征是所述皂甙化合物的母環(huán)上連有四個糖和一至多個二黨歸酰基。
250. 本專利申請的一種三萜類皂甙化合物,其特征是所述皂甙化合物的母環(huán)上連有三個糖和一至多個二黨歸酰基。
251. 本專利申請的一種從文冠果提取化合物的方法,其特征是所述提取化合物的方法依下列步驟
a.用一定量的有機溶劑(一種或幾種)浸提文冠果樣品粉適當次,得有機溶劑浸提液;
b.收集合并浸提液;
c.再回流熱提浸提液,得二次浸提液;
d.回收有機溶劑得流浸膏;
e.干燥,滅菌流浸膏得文冠果粗提取物粉。
f.和分離提純文冠果提取物粉,得一或多種組分;
g.從上述組分中鑒定出具生物活性的組分;
h.用快速液相色譜(FPLC)分離提純出生物活性的成分(一種或幾種);
i.再用高壓效相色譜(HPLC)從中提純分離出具有生物活性的化合物。
252. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述文冠果樣品是文冠果的果殼和/或果柄,枝干,葉,種仁,種殼,根,和樹皮。
253. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述有機溶劑是乙醇,甲醇,乙醚,氯仿和丙醇等。
254. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述有機溶劑和文冠果樣品的比例是2比1。
255. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的有機溶劑浸提文冠果樣品,浸提4-5次,每次20-35小時。
256. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的回流熱提是回流熱提2-3次C。
257. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述的回流熱提是回流熱提的溫度是80℃。
258. 如申請專利范圍第251項所述的制備文冠果提取物的方法,其特征是所述鑒定生物活性成分的方法是用MTT鑒定法。
259. 如申請專利范圍第251項(h)所述的從文冠果提取物中分離提純出的一種或幾種生物活性成分,其特征是所述一種或幾種生物活性成分的HPLC圖譜見于圖28。
260. 如申請專利范圍第251項所述的從文冠果提取物中分離和提純出的具生物活性的化合物,其特征是所述化合物的HPLC圖譜見于圖32。
261. 本專利申請的一種能能治療膀胱癌的組合物,其特征是所述組合物含有如申請專利范圍第201,202,203,204和205項中所述化合物。
262. 本專利申請的一種能抑制卵巢癌細胞的方法,其特征是所述抑制卵巢癌細胞的方法是用一定濃度的如申請專利范圍第207項中所述組合物去接觸卵巢癌細胞。
263. 本專利申請的一種能治療或抗卵巢癌的方法,其特征是所述的方法是用適當?shù)臐舛鹊娜缟暾垖@秶?07項中所述組合物去治療卵巢癌。
264. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物的HMQC核磁共振譜的資料見于表10.2。
265. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物的HMBC核磁共振譜的資料見于表10.3。
266. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物具有化學結構如下
267. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物具有化學結構如下
268. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物具有化學結構如下
其中R1=A or B or C;R2=A or B or C;R3=B or B or C
A=當歸酰基(angeloyl) B=乙?;?acetyl)C=H
269. 本專利申請的一種的化合物,其特征是所述化合物具有化學結構如下
其中R1=A or B or C;R2=A or B or C;R3=B or B or C
A=當歸?;?angeloyl) B=乙酰基(acetyl) C=H
301. 本專利申請的一種藥物,其特征是所述藥物由一定數(shù)量的具有下列化學結構的化合物和適合的載體組成
其中R1,R2,R3,R4是短的脂族側鏈,R5有一個羥基。
302. 如申請專利范圍第324項所述的化合物,其特征是所述化合物的R1=R2=R3=R4=CH3,R5=OH。
303. 本專利申請的一種藥物,其特征是所述藥物由一定數(shù)量的含有下列化學集團的化合物和適合的載體組成
a.一個糖鏈,每個糖鏈有一至多個糖;
b.三萜類皂甙元或其它皂甙元;
c.在C21和C22位有一側鏈,或有當歸?;瘓F。
304. 如申請專利范圍第303項所述的化合物,其特征是所述化合物含有兩個或兩個以上的糖鏈。
305. 如申請專利范圍第303項所述的化合物,其特征是所述化合物含有一個或一個以上的當歸?;瘓F。
306. 如申請專利范圍第301,302,303,304或305項所述的化合物,其特征是所述任一化合物都能抑制癌細胞的生長。
307. 本專利申請的另一種鹽類化合物,其特征是所述鹽類化合物是如申請專利范圍第301-307項所述的化合物形成的鹽。
308. 本專利申請的一種藥物,其特征是所述藥物是由一定濃度如申請專利范圍第301-307項所述的任一皂甙化合物和適合的載體組成。
309. 本專利申請的一種能調節(jié)Wnt通路中的組元或它們的受體以阻止癌細胞增殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
310. 本專利申請的一種能調節(jié)Ras-MAP激酶鏈中的組元或它們的受體的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
311. 本專利申請的一種能調節(jié)Ras-pendent或Myc通路中的組元或它的的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
312. 本專利申請的一種能啟動“檢查機制”(checkpoint mechanism)以阻止癌細胞增殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
313. 本專利申請的一種能調節(jié)孢外生長的組元或其受體的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
314. 本專利申請的一種能調節(jié)Ras和MAP激酶鏈中的組元或其受體以阻止卵巢癌細胞增殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
315. 本專利申請的一種能調節(jié)Myc細胞增殖以阻止癌細胞裂殖的組元或其受體的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
316. 本專利申請的一種能調節(jié)α-TGF的組元或其受體以抑制卵巢和膀胱癌細胞增殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
317. 本專利申請的一種能調節(jié)β-TGF的組元或其受體以抑制卵巢和膀胱癌細胞增殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
318. 本專利申請的一種能調節(jié)蛋白質E6,E7和釋放蛋白質Rb,p53以抑制畸形細胞裂殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
319. 本專利申請的一種能調節(jié)或能與蛋白質起反應以引起癌細胞死亡的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
320. 本專利申請的一種能調節(jié)合成蛋白質p53的通路和其受體以抑制癌細胞裂殖的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
321. 本專利申請的一種能使細胞中被阻斷的自殺信號(suicidesignal)重新釋放的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
322. 本專利申請的一種能調節(jié)BMP,GF,Jak-jnk-STAT和Junfos的通路和其受體的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
323. 本專利申請的一種能調節(jié)糖腎上腺皮質激素,雌激素,酪氨酸激酶,G-蛋白,和EGF的受體的組合物,其特征是所述組合物是由一定濃度如申請專利范圍第301-308項所述的任一化合物所組成。
324. 本專利申請的一種抑制癌細胞生長的方法,其特征是所述方法是使一定量的具有下述化學結構的化合物和適當?shù)乃幬镙d體所組成的藥物去接觸所述癌細胞;
其中R1,R2,R3,R4是短的脂族側鏈,R5有一個羥基。
325. 如申請專利范圍第324項所述的化合物,其特征是所述化合物的R1=R2=R3=R4=CH3,R5=OH。
326. 本專利申請的一種抑制腫瘤細胞生長的方法,其特征是所述方法是由一定數(shù)量的含有下列化學集團的化合物和適合的載體組成
a一個糖鏈;
b三萜類皂甙元或其它皂甙元;
c在C21和C22位有一側鏈,或有當歸?;瘓F。
327. 本專利申請的一種抑制腫瘤細胞生長的方法,其特征是所述方法是由一定數(shù)量的具有下列化結構的化合物和適合的藥物載體組成其中R1,R2,R3,R4是短的脂族側鏈,R5有一個羥基。
328. 如申請專利范圍第327項所述的化合物,其特征是所述化合物的R1=R2=R3=R4=CH3,R5=羥基鍵。
329. 本專利申請的一種抑制腫瘤細胞生長的方法,其特征是所述方法是由一定數(shù)量的含有下列化學集團的化合物和適合的藥物載體組成
a.一個糖鏈;
b.三萜類皂甙元或其它皂甙元;
c.在C21和C22位有一側鏈,或有當歸酰基集團。
全文摘要
本發(fā)明提供了從文冠果(Xanthoceras sorbifolia)的提取物的組成,制備方法和工藝。文冠果的提取物含有生物堿,香豆素,糖,蛋白,多糖,糖甙,皂甙,單寧,酸,黃酮化合物和其它化合物。文冠果的提取物可以用于抗癌,防止腦衰老,增強記憶,改善腦功能,治療夜尿,尿頻,尿急,弱智,癡呆和老年癡呆,孤獨癥,腦創(chuàng)傷,帕金森病,和其它由于腦功能不健全或障礙所引起的病癥,還可用于治療關節(jié)炎,風濕癥,循環(huán)不良,動脈硬化,雷諾氏癥,心絞痛,心臟功能紊亂,冠心病,頭痛,頭暈,腎功能紊亂,陽萎和早瀉。本發(fā)明提供新化合物,這些化合物含有糖,三萜類化合物皂甙原,在碳21和22位有含當歸?;膫孺?。這些化合物具有各種藥學和醫(yī)療學用途。
文檔編號A61K31/35GK101242850SQ200480036761
公開日2008年8月13日 申請日期2004年10月8日 優(yōu)先權日2003年10月9日
發(fā)明者陳沛光, 麥美送, 云 王 申請人:太平洋艾瑞有限公司
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