專利名稱：乙肝解毒中藥制劑的質量控制方法
技術領域：
本發(fā)明涉及乙肝解毒中藥制劑的質量控制方法，屬于藥品技術的領域。
背景技術：
乙型肝炎是危害當今人民身體健康的一種常見病，乙肝解毒制劑由黃柏、草河車、黃芩、大黃、胡黃連、土茯苓、黑礬、貫眾共八味藥組成；具有清熱解毒，疏肝利膽的功效，用于治療乙型肝炎，辨證屬于肝膽濕熱內蘊者。其中“乙肝解毒膠囊”在部頒中藥成方制劑第一冊有記載，該藥物在臨床上應用多年，在治療肝區(qū)熱痛，全身乏力，口苦咽干，頭暈耳鳴或面紅耳赤，心煩易怒，大便干結，小便少而黃，舌苔黃膩，脈滑數或弦數等癥方面取得比較滿意的治療效果，但經我們研究發(fā)現，“乙肝解毒膠囊”存在質量控制標準簡單落后，產品質量不易控制的缺點。黃柏、大黃和黃芩均為乙肝解毒制劑中起主要作用的藥物，而現有制劑質量標準中并沒有對以上藥物進行含量或鑒別研究，故現有質量控制方法不能有效控制乙肝解毒制劑的質量，從而將影響產品的生產和保證質量。
為有效控制產品質量，我們建立了乙肝解毒制劑的新的質量控制方法，該方法采用照薄層色譜法對大黃和黃芩進行鑒別，采用高效液相色譜法對鹽酸小檗堿成分進行含量測定。該質量控制方法精密度、靈敏度、穩(wěn)定性均好，確保產品質量的“安全、均一、穩(wěn)定、有效、可控”。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種乙肝解毒的中藥制劑的質量控制方法，所述乙肝解毒的中藥制劑是口服制劑，優(yōu)選的是膠囊劑、片劑或顆粒劑。
本發(fā)明的乙肝解毒制劑其配方和制法如下按照重量組份計算它主要由黃柏20-100份、草河車20-100份、黃芩20-100份、大黃20-100份、胡黃連20-100份、土茯苓40-150份、黑礬20-100份、貫眾200-400份制備而成。
優(yōu)選的是，按照重量組份計算它主要由黃柏58份、草河車58份、黃芩58份、大黃58份、胡黃連58份、土茯苓87份、黑礬58份、貫眾290份制備而成。
以上組成可制成藥物制劑1000劑，所述1000劑指，制成的成品藥物制劑，如制成膠囊制劑1000粒，片劑1000片，顆粒劑1000g，液體制劑1000ml等，以上組成是按重量份作為配比的，在生產時可按照相應比例增大或減少，如大規(guī)模生產可以以公斤為單位，或以噸為單位。
本發(fā)明的制劑的制備方法可以采用以下方法通過將上述配方的中藥原料經過提取或其他方式加工，制成藥物活性物質，隨后，以該物質為原料，需要時加入藥物可接受的載體，按照制劑學的常規(guī)技術制成膠囊、片劑、口服液、糖漿、顆粒劑。所述活性物質可以通過選自以下方式的方法得到，如通過粉碎、壓榨、煅燒、研磨、過篩、滲漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、層析等方法得到，這些活性物質可以是浸膏形式的物質，可以是干浸膏也可以是流浸膏，還可以是高純度提取物，根據制劑的不同需要決定制成不同的濃度。
優(yōu)選的制備方法如下土茯苓、黑礬粉碎成細粉，其余黃柏等六味，加水煎煮兩次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮成稠膏，加入上述粉末混勻，再按照制劑學常規(guī)技術用不同的方法制成膠囊劑、片劑或顆粒劑。
本發(fā)明的制劑，在制成制劑時根據需要可以加入藥物可接受的載體，這些載體可以是任何適合制成抗栓制劑的載體，如苯甲酸或鉀鹽、甘露醇、山梨醇、山梨酸或鉀鹽、木糖醇、麥芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、尼泊爾甲酯、尼泊爾乙酯、尼泊爾丙酯、尼泊爾丁酯、焦亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、硫代硫酸鈉、鹽酸半胱氨酸、巰基乙酸、蛋氨酸、維生素A、維生素C、維生素E、維生素D、氮酮、EDTA二鈉、EDTA鈣鈉，一價堿金屬的碳酸鹽、醋酸鹽、磷酸鹽或其水溶液、鹽酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化鈉、氯化鉀、乳酸鈉、硅衍生物、纖維素及其衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、土溫60-80、司盤-80、蜂蠟、羊毛脂、液體石蠟、十六醇、沒食子酸酯類、瓊脂、三乙醇胺、堿性氨基酸、尿素、尿囊素、表面活性劑、聚乙二醇、環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、磷脂類材料等。
本發(fā)明提供的是針對以上乙肝解毒制劑的質量控制方法，為控制乙肝解毒制劑的質量。針對其特點及本發(fā)明配方，我們提供了如下質量控制方法對性狀進行觀察，對內容物大黃和黃芩進行鑒別，根據藥典的方法對內容物進行檢查，對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定。
其中對性狀進行觀察，步驟是對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；對內容物大黃和黃芩進行鑒別，步驟是(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。
(2)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加甲醇超聲提取，濾過，濾液蒸干，加水溶解，再加鹽酸，置水浴中加熱，立即冷卻，用乙醚提取，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置具塞錐形瓶中，加甲醇超聲提取，濾過，濾液揮干，殘渣加水溶解，用乙醚提取，合并水層，以水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液，分別點于同一以含1-10％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，預平衡10-60分鐘，展開，取出，晾干，噴以0.5-5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；根據藥典的方法對內容物進行檢查，步驟是應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。
對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定，步驟是鹽酸小檗堿采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1-6)＝10-50∶5-30∶100-200為流動相；檢測波長為200-500nm；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇溶解，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑或顆粒劑，精密加入甲醇-水-鹽酸＝50-100∶10-30∶0.5-5的混合溶液，超聲提取，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
優(yōu)選的方法是性狀步驟如下對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；鑒別步驟如下(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。
(2)分別取膠囊劑、片劑1-5g，或取顆粒劑5-15g，加甲醇10-100ml超聲10-100分鐘，濾過，取濾液3-10ml，蒸干，加水5-30ml使溶解，再加鹽酸0.5-5ml，置水浴中加熱10-60分鐘，立即冷卻，用乙醚提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各3-25μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑1-5g，或取顆粒劑5-15g，置具塞錐形瓶中，加甲醇10-100ml超聲10-60分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水10-50ml溶解，用乙醚提取1-6次，合并水層，以水飽和的正丁醇提取1-6次，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各3-25μl，分別點于同一以含1-10％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，預平衡10-60分鐘，展開，取出，晾干，噴以0.5-5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；檢查步驟如下應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定步驟如下
鹽酸小檗堿采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1-6)＝10-50∶5-30∶100-200為流動相；檢測波長為200-500nm，理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3000；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.01-0.1mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密加入甲醇-水-鹽酸＝50-100∶10-30∶0.5-5的溶液10-100ml，超聲處理10-60分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
本發(fā)明的方法是經過研究得到的，本發(fā)明認為，黃柏為本制劑中發(fā)揮作用的主要藥物，其中鹽酸小檗堿又是黃柏的主要有效成分。故本制劑應對黃柏中鹽酸小檗堿的含量進行測定。黃柏中鹽酸小檗堿的含量測定方法中，文獻報道較多的有分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法等。經我們研究發(fā)現，本制劑采用分光光度法和薄層掃描法對鹽酸小檗堿進行含量測定時，其專屬性不強，相對標準偏差均較高效液相色譜法大，測定結果不穩(wěn)定，故本發(fā)明采用高效液相色譜法測定鹽酸小檗堿的含量。由于本發(fā)明制劑中土茯苓、黑礬以藥粉入藥，由于黑礬為礦物藥，故本發(fā)明只對制劑土茯苓進行顯微鑒別。另外，本發(fā)明還對大黃和黃芩藥材進行薄層鑒別研究，并選擇以大黃素對照品為對照，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑鑒別制劑大黃藥材；以黃芩苷對照品為對照，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑鑒別制劑中黃芩藥材。結果其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。故采用本發(fā)明質量控制方法可有效控制這種乙肝解毒的中藥制劑的質量，從而保證該制劑的臨床療效。
本發(fā)明的質量控制方法是經過大量的篩選得到的最佳方案，以下實驗研究為本發(fā)明的優(yōu)選過程。
一、鹽酸小檗堿含量測定方法研究1、供試品溶液制備方法研究由于鹽酸小檗堿易溶于甲醇、甲醇-水-鹽酸等溶劑，樣品處理過程中采用甲醇、甲醇-水-鹽酸(60∶35∶5)、甲醇-水-鹽酸(80∶19∶1)的溶劑提取，測定結果見下表

試驗結果表明，用甲醇-水-鹽酸(80∶19∶1)為提取劑干擾小，因此質量標準正文選用甲醇-水-鹽酸(80∶19∶1)為提取劑。
2、流動相的選擇流動相1以甲醇、乙腈、0.05mol/L磷酸二氫鈉不同比例的混合溶液為流動相。
流動相2以乙腈、四氫呋喃、0.05mol/L磷酸二氫鉀不同比例的混合溶液為流動相。
流動相3以0.02mol/L磷酸鹽緩沖液、乙腈不同比例的混合溶液為流動相。
結果以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1-6)＝10-50∶5-30∶100-200為流動相；陰性樣品色譜圖在鹽酸小檗堿位置處無假陽性峰，鹽酸小檗堿和相近的雜質峰分離完全(分離度＞1.5)，即在該條件下鹽酸小檗堿與其他組分分離完全。
3、重現性試驗取本品，按本發(fā)明中鹽酸小檗堿含量測定項下供試液制備方法分別制備5份供試液，進樣，測定峰面積，計算結果列入下表。結果表明，該試驗重現性良好。

4、回收率試驗精密稱取已測定含量的制劑(平均含量0.1868％)適量，加入一定量的鹽酸小檗堿對照品，按質量標準(修訂)正文中含量測定方法處理樣品。分別制備5份，測定(

圖10)，結果見下表。平均回收率為99.26％，RSD為1.49％。

5、鹽酸小檗堿是黃柏中的主要有效成分，鹽酸小檗堿的含量測定方法中文獻報道較多有紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法等。經我們研究發(fā)現，本制劑采用紫外分光光度法及薄層掃描法對牡丹皮中丹皮酚進行含量測定，其專屬性不強，誤差大，測定結果不穩(wěn)定，相對標準偏差均較高效液相色譜法大，故本發(fā)明采用高效液相色譜法測定丹皮酚的含量，以下是本發(fā)明制劑采用高效液相色譜法與紫外分光光度法及薄層掃描法測定結果比較(n＝5)

二、大黃薄層鑒別研究以大黃素對照品制備對照品溶液。
供試品溶液制備方法一取藥物用甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴中加熱后立即冷卻，用乙醚提取，乙醚液蒸干，殘渣加氯仿制得供試品溶液。同法制備缺大黃藥材的陰性供試品溶液。
供試品溶液制備方法二取藥物用乙醇回流提取，濾過，濾液濃縮物以乙醚提取，乙醚層用5％碳酸鈉溶液萃取，取水層酸化后，以氯仿提取、濃縮制得供試品溶液。同法制備缺大黃藥材的陰性供試品溶液。
展開劑選擇分別以正己烷、乙酸乙酯和甲酸不同比例的混合溶液；以正己烷、醋酸乙酯不同比例的混合溶液為展開劑。
結果結果表明，方法一取樣量較小，簡單易操作。另外以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑，分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾。最佳展開劑為正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30∶10∶0.5)。
三、黃芩薄層鑒別研究以黃芩苷對照品制備對照品溶液。
供試品溶液制備方法一取藥物用甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解后，用乙醚提取，取水層，以水飽和的正丁醇提取，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇制得供試品溶液。同法制備缺黃芩藥材的陰性供試品溶液。
供試品溶液制備方法二取藥物用甲醇超聲處理，濾過，即得得供試品溶液。同法制備缺黃芩藥材的陰性供試品溶液。
展開劑選擇分別以醋酸乙酯、丁酮、甲酸、水不同比例的混合溶液為展開劑。
結果采用方法一制備供試品溶液，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，其分離度好，斑點顯色清晰，陰性對照無干擾，方法重現性好。最佳展開劑為醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1.2∶1)。
本發(fā)明的優(yōu)點在于本發(fā)明的質量控制方法保證了本發(fā)明的制劑的質量檢測標準能夠較全面有效控制制劑的質量特征，具有準確性和先進性，可作為質量控制和考察工藝的穩(wěn)定性的有效技術手段。對提高產品質量有重大意義。
具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發(fā)明，但不作為對本發(fā)明的限制。
實施例1性狀對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm；石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一；(2)分別取膠囊劑、片劑2.0g，或取顆粒劑10.0g，置具塞錐形瓶中，加甲醇20ml超聲30分鐘，濾過，取濾液5ml，蒸干，加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液10μl，對照液4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝30∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)分別取膠囊劑、片劑2.0g，或取顆粒劑10.0g，置具塞錐形瓶中，加甲醇40ml超聲30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，取水層，以水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各5μl，分別點于同一以含4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1.2∶1為展開劑，預平衡30分鐘，展開，展距約12cm，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；檢查應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定；含量測定鹽酸小檗堿采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH3)＝28∶12∶164為流動相；流速1.2ml/min，溫度45℃，檢測波長為430nm。理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3500；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.04mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇-水-鹽酸＝80∶19∶1的溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
實施例2性狀對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。
(2)分別取膠囊劑、片劑5g，或取顆粒劑15g，加甲醇100ml超聲100分鐘，濾過，取濾液10ml，蒸干，加水30ml使溶解，再加鹽酸5ml，置水浴中加熱60分鐘，立即冷卻，用乙醚提取5次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿2ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各3μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝50∶5∶5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑5g，或取顆粒劑15g，置具塞錐形瓶中，加甲醇100ml超聲60分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水50ml溶解，用乙醚提取6次，合并水層，以水飽和的正丁醇提取6次，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌5次，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各3μl，分別點于同一以含10％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝10∶1∶5∶0.5為展開劑，預平衡60分鐘，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；檢查應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定鹽酸小檗堿采用高效液相色譜法，色譜柱為C8柱，以乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH6)＝10∶30∶200為流動相；檢測波長為200nm，理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3000；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.01mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密加入甲醇-水-鹽酸＝100∶10∶0.5的溶液100ml，超聲處理60分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
實施例3性狀對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；鑒別(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。
(2)分別取膠囊劑、片劑1g，或取顆粒劑5g，加甲醇10ml超聲10分鐘，濾過，取濾液3ml，蒸干，加水5ml使溶解，再加鹽酸0.5ml，置水浴中加熱10分鐘，立即冷卻，用乙醚提取1次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各25μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10∶20∶0.1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。
(3)分別取膠囊劑、片劑1g，或取顆粒劑5g，置具塞錐形瓶中，加甲醇10ml超聲10分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水10ml溶解，用乙醚提取1次，合并水層，以水飽和的正丁醇提取1次，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌1次，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各25μl，分別點于同一以含1％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝10∶1∶0.5∶5為展開劑，預平衡10分鐘，展開，取出，晾干，噴以0.5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；檢查應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。
含量測定鹽酸小檗堿 采用高效液相色譜法，色譜柱為C4柱，以甲醇∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1)＝50∶5∶100為流動相；檢測波長為500nm，理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3000；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.1mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密加入甲醇-水-鹽酸＝50∶30∶5的溶液10ml，超聲處理10分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
權利要求
1.一種乙肝解毒制劑的質量控制方法，其特征在于，包括對性狀進行觀察，對內容物大黃和黃芩進行鑒別，根據藥典的方法對內容物進行檢查，對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定。
2.權利要求1的方法，其特征在于，所述乙肝解毒制劑是口服制劑。
3.權利要求2的方法，其特征在于，所述口服制劑是膠囊、片劑、口服液、糖漿或顆粒劑。
4.權利要求1的方法，其特征在于，所述乙肝解毒由如下重量份的中藥原料制成黃柏20-100份、草河車20-100份、黃芩20-100份、大黃20-100份、胡黃連20-100份、土茯苓40-150份、黑礬20-100份、貫眾200-400份。
5.權利要求1的方法，其特征在于，所述乙肝解毒由如下重量份的中藥原料制成黃柏58份、草河車58份、黃芩58份、大黃58份、胡黃連58份、土茯苓87份、黑礬58份、貫眾290份。
6.權利要求1的方法，其特征在于，其中對性狀進行觀察，步驟是對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；對內容物大黃和黃芩進行鑒別，步驟是(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。(2)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，加甲醇超聲提取，濾過，濾液蒸干，加水溶解，再加鹽酸，置水浴中加熱，立即冷卻，用乙醚提取，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。(3)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置具塞錐形瓶中，加甲醇超聲提取，濾過，濾液揮干，殘渣加水溶解，用乙醚提取，合并水層，以水飽和的正丁醇提取，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇溶解，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液，分別點于同一以含1-10％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，預平衡10-60分鐘，展開，取出，晾干，噴以0.5-5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；根據藥典的方法對內容物進行檢查，步驟是應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定，步驟是鹽酸小檗堿 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1-6)＝10-50∶5-30∶100-200為流動相；檢測波長為200-500nm；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇溶解，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑或顆粒劑，精密加入甲醇-水-鹽酸＝50-100∶10-30∶0.5-5的混合溶液，超聲提取，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
7.權利要求1的方法，其特征在于，其中對性狀進行觀察，步驟如下對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；對內容物大黃和黃芩進行鑒別，步驟如下(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm。石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一。(2)分別取膠囊劑、片劑1-5g，或取顆粒劑5-15g，加甲醇10-100ml超聲10-100分鐘，濾過，取濾液3-10ml，蒸干，加水5-30ml使溶解，再加鹽酸0.5-5ml，置水浴中加熱10-60分鐘，立即冷卻，用乙醚提取1-5次，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液與對照品溶液各3-25μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝10-50∶5-20∶0.1-5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈200-500nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。(3)分別取膠囊劑、片劑1-5g，或取顆粒劑5-15g，置具塞錐形瓶中，加甲醇10-100ml超聲10-60分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水10-50ml溶解，用乙醚提取1-6次，合并水層，以水飽和的正丁醇提取1-6次，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌1-5次，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各3-25μl，分別點于同一以含1-10％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝1-10∶1-10∶0.5-5∶0.5-5為展開劑，預平衡10-60分鐘，展開，取出，晾干，噴以0.5-5％三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；根據藥典的方法對內容物進行檢查，步驟如下應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定。對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定，步驟如下鹽酸小檗堿 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18或C4或C8柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH1-6)＝10-50∶5-30∶100-200為流動相；檢測波長為200-500nm，理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3000；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.01-0.1mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別精密稱取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密加入甲醇-水-鹽酸＝50-100∶10-30∶0.5-5的溶液10-100ml，超聲處理10-60分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5-25μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
8.權利要求1的方法，其特征在于，步驟如下對性狀進行觀察，步驟是對于膠囊劑產品內容物為為灰黑色或深褐色粉末；味苦；對于片劑藥物顯灰黑色或深褐色；味苦；對于顆粒劑產品為灰黑色或深褐色的顆粒；對內容物大黃和黃芩進行鑒別，步驟是(1)分別取膠囊劑、片劑或顆粒劑，置顯微鏡下觀察淀粉粒甚多，單粒類圓形或圓多角形，直徑8～48μm，臍點裂縫狀、三叉狀、十字狀或星狀，大粒層紋明顯；復粒由2～4分粒組成，草酸鈣針晶長40～180μm，直徑約至5μm；石細胞較多，淡棕色或無色、呈短圓形、類方形、類多角形、長方形或類三角形，邊緣稍不平整或有尖突，直徑25～28μm，壁厚8～48μm，有的厚薄不勻，孔溝大多細密并分枝，胞腔寬狹不一；(2)分別取膠囊劑、片劑2.0g，或取顆粒劑10.0g，置具塞錐形瓶中，加甲醇20ml超聲30分鐘，濾過，取濾液5ml，蒸干，加水10ml使溶解，再加鹽酸1ml，置水浴中加熱30分鐘，立即冷卻，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，蒸干，殘渣加氯仿1ml使溶解，作為供試品溶液；另取大黃素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液10μl，對照液4μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以正己烷∶乙酸乙酯∶甲酸＝30∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點；(3)分別取膠囊劑、片劑2.0g，或取顆粒劑10.0g，置具塞錐形瓶中，加甲醇40ml超聲30分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加水20ml溶解，用乙醚提取3次，每次20ml，取水層，以水飽和的正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，繼用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取供試液及對照液各5μl，分別點于同一以含4％醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯∶丁酮∶甲酸∶水＝5∶3∶1.2∶1為展開劑，預平衡30分鐘，展開，展距約12cm，取出，晾干，噴以1％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同暗綠色的斑點；根據藥典的方法對內容物進行檢查，步驟是應符合中國藥典膠囊劑、片劑或顆粒劑項下有關的各項規(guī)定；對含有的鹽酸小檗堿進行含量測定，步驟是鹽酸小檗堿 采用高效液相色譜法，色譜柱為C18柱，以甲醇或乙腈∶四氫呋喃∶0.05mol/L磷酸二氫鉀(0.7％三乙胺，磷酸調pH3)＝28∶12∶164為流動相；流速1.2ml/min，溫度45℃，檢測波長為430nm。理論塔板數以鹽酸小檗堿峰計，應不低于3500；精密稱取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含鹽酸小檗堿0.04mg的溶液，搖勻，即得對照品溶液；分別取膠囊劑、片劑0.5g，或取顆粒劑5.0g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加入甲醇-水-鹽酸＝80∶19∶1的溶液25ml，稱定重量，密塞，超聲處理30分鐘，放冷，用提取液補足減失的重量，搖勻，取上清液用濾膜0.45μm濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測定含量；該口服制劑中，膠囊劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、片劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于1mg/g、顆粒劑中含黃柏以鹽酸小檗堿計，不得少于0.1mg/g。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種乙肝解毒中藥制劑的質量控制方法，該質量控制方法保證了乙肝解毒中藥制劑的質量檢測標準能夠較全面有效控制制劑的質量特征，具有準確性和先進性，可作為質量控制和考察工藝的穩(wěn)定性的有效技術手段。對提高產品質量有重大意義。
文檔編號A61K9/10GK1824244SQ20051000334
公開日2006年8月30日 申請日期2005年12月29日 優(yōu)先權日2005年12月29日
發(fā)明者葉湘武, 張梅 申請人:貴州益佰制藥股份有限公司