專利名稱：用于人類癌癥治療的蒜頭果蛋白質(zhì)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于人類癌癥治療的蛋白質(zhì)藥物，尤其是一種用于人類癌癥治療的蒜頭果蛋白質(zhì)。
背景技術(shù)：
蒜頭果是國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物鐵青樹科蒜頭果樹(Malania oleifera Chun etS.K.Lee)的果實(shí)，因?yàn)槠湫螤钕蟠笏忸^而得名，主要分布于廣西西部和云南東南部的狹窄地帶，生長(zhǎng)于石灰?guī)r的山坡、山腳雜木林中土壤濕潤(rùn)肥沃的地方，在桂西南垂直分布于海拔300～1200米，在滇東南可達(dá)海拔1640米。蒜頭果種仁含油率高達(dá)51.85％～67.0％，成分主要為油酸、棕櫚酸和硬脂酸等，是良好的木本油料植物，其油脂可作潤(rùn)滑油和制作肥皂的原料，也可用作食用，同時(shí)，又是合成麝香酮的理想原料，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。它的木材紋理直，結(jié)構(gòu)細(xì)，材質(zhì)中等，不易翹裂，易加工，可作為家具、船舶、雕刻及建筑用材等。
蒜頭果樹是我國(guó)的特有屬，僅分布于廣西西部和云南東南部的狹窄地帶。國(guó)外沒(méi)有蒜頭果植物資源，未見(jiàn)有關(guān)蒜頭果的研究報(bào)道。在國(guó)內(nèi)，對(duì)蒜頭果研究的歷史也很短，研究的報(bào)道也較少。1973年，在《中國(guó)油脂植物手冊(cè)》和《云南經(jīng)濟(jì)植物》中，蒜頭果樹雖然已被置于樟科和茶茱萸科，但還沒(méi)有合格的拉丁學(xué)名。直到1980年，廣西植物研究所的李樹剛教授才正式發(fā)表蒜頭果的拉丁名Malania oleifera，并將它置于鐵青樹科。本世紀(jì)80年代，植物化學(xué)研究者發(fā)現(xiàn)，蒜頭果種仁中含油率高達(dá)51.85％～67.0％，其油脂中的脂肪酸具有較高的醫(yī)用價(jià)值，因此，在廣西被列為綜合開(kāi)發(fā)重要經(jīng)濟(jì)樹種。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種用于人類癌癥治療的蒜頭果蛋白質(zhì)，它以鐵青樹科蒜頭果樹(Malania oleifera Chun et S.K.Lee)的果實(shí)蒜頭果中提取的蒜頭果蛋白質(zhì)或其可藥用鹽為活性成分，或使用含有此活性成分的藥物或藥物組合物治療人類癌癥。本發(fā)明為臨床治療癌癥病人提供了一種全新的藥物或藥物組合物。所述蛋白質(zhì)由A、B兩條多肽鏈組成，分子量大約在55kD，其中，A鏈分子量約32kD，N-端氨基酸序列是NH2-D-E-T-X-T-D-E-E-F-N-(X一般情況下為C)，B鏈分子量約23kD，N-端序列是NH2-D-Y-P-K-L-T-F-T-T-S-，兩條多肽鏈之間由二硫鍵共價(jià)連接。在體外實(shí)驗(yàn)條件下，此蛋白質(zhì)樣品對(duì)人類多種癌細(xì)胞系具有強(qiáng)烈的抑制活性，其IC50達(dá)到10-9mol/L水平。
所述蒜頭果蛋白質(zhì)的制備方法，該方法包括以下步驟將蒜頭果在不高于4℃的低溫條件下?lián)v碎，過(guò)濾，上清液用30％～100％硫酸銨分級(jí)沉淀，透析，再通過(guò)蛋白質(zhì)分離專用的色譜儀器純化，獲得SDS-PAGE電泳純度的樣品。
可以依據(jù)醫(yī)學(xué)臨床實(shí)踐，以蒜頭果蛋白質(zhì)為活性成份用于治療人類癌癥的藥物組合物，其中含有治療有效劑量的蛋白質(zhì)或其可藥用鹽，需要時(shí)可與其他有藥物活性的物質(zhì)或在治療上可以配伍的敷料配伍使用。
所述的蛋白質(zhì)或其可藥用鹽，按藥學(xué)上可以接受的公知方法制成制劑形式。
以下對(duì)本發(fā)明提出的蒜頭果蛋白質(zhì)作詳細(xì)闡述1.蒜頭果蛋白質(zhì)的分離、純化將蒜頭果去外殼和表皮，用預(yù)先冷卻的20mM pH 7.0磷酸鹽緩沖液(內(nèi)加1mM EDTA和1mM巰基乙醇)在高速組織搗碎機(jī)里搗碎后，再用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)處理30分鐘，用4層紗布過(guò)濾，高速冷凍離心機(jī)離心(HITACHI CR21G 8000rpm，30分鐘，4℃)，去除固體物，上清液用30％～100％硫酸銨分級(jí)沉淀，冷凍離心，得到高鹽蛋白質(zhì)沉淀，把分級(jí)沉淀得到的初提物樣品采用透析袋法脫鹽，用電導(dǎo)儀控制平衡溶液的電導(dǎo)率，當(dāng)電導(dǎo)率低于2ms/cm即可，樣品溶液經(jīng)真空冷凍干燥機(jī)干燥，得到白色真空冷凍干燥蛋白質(zhì)樣品，此蛋白質(zhì)樣品再經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)(Amersham KTA Explorer 100，采用HiprepTMphenyl FF層析柱)進(jìn)一步純化，蛋白質(zhì)電泳系統(tǒng)(Amersham Hoefer SE260)檢測(cè)，獲得SDS_PAGE單一條帶純度蛋白質(zhì)樣品。
2.蒜頭果蛋白質(zhì)部分結(jié)構(gòu)鑒定——A、B鏈N-末端測(cè)序先做SDS-PAGE電泳，加入2-巰基乙醇按Laemmli方法進(jìn)行，采用Bio-Rad電泳系統(tǒng)中的微型電泳槽(10cm×8cm×1.5mm)，分離膠濃度為12％，濃縮膠濃度為3.0％，然后用濕法電轉(zhuǎn)至PVDF膜上。
電印跡程序?yàn)殡娪窘Y(jié)束后卸下凝膠置于CAPS緩沖液浸泡2min，同時(shí)將測(cè)序級(jí)PVDF膜在無(wú)水甲醇中浸15s，再移至CAPS緩沖液中，迅速將Bio-Rad印跡用的兩塊海綿和裁好的4張與凝膠大小一致的濾紙?jiān)贑APS緩沖液中浸泡。然后按常規(guī)電印跡方法[22]，以轉(zhuǎn)膜夾的陽(yáng)極板上依次放入海綿1塊、濾紙2張、適當(dāng)大小的PVDF膜、電泳后的凝膠、濾紙2張、海綿1塊，特別要注意排除濾紙、PVDF膜、凝膠之間的氣泡，然后合上轉(zhuǎn)膜夾，按轉(zhuǎn)膜設(shè)備使用書上的要求安裝好轉(zhuǎn)膜裝置，注意轉(zhuǎn)膜夾的正負(fù)極一定要安放正確，否則蛋白質(zhì)就不能轉(zhuǎn)移至PVDF膜上。接通電源(恒流150mA)，5h后轉(zhuǎn)膜結(jié)束，取出PVDF膜，將有蛋白質(zhì)的一面朝上，用去離子水沖洗3次，將PVDF膜切出兩孔，置于專用染色液(0.1％考馬斯亮藍(lán)R-250、1％冰醋酸、40％甲醇)中，在室溫條件下染色2～5min，目標(biāo)帶剛剛顯現(xiàn)即終止染色。再將染色過(guò)的PVDF膜置于50％甲醇中漂洗脫色5～10min，并不斷更換脫色液，脫色過(guò)程中應(yīng)時(shí)時(shí)注意脫色程度，目標(biāo)帶一旦清晰可見(jiàn)且背景滿意即可終止脫色。將PVDF膜置于新的干凈濾紙上晾干后，與未染色的PVDF膜對(duì)照，用新的單面刀片切下未染色的PVDF膜上的兩個(gè)亞基條帶，上面分子量大(約30kD)的條帶標(biāo)記為A鏈，下面分子量小的標(biāo)記為B鏈(約23kD)。將A鏈和B鏈分別在1.5ml的eppendorf管中密封保存，用于A、B鏈的N-末端測(cè)序。
3.蒜頭果蛋白質(zhì)活性測(cè)定1)蒜頭果蛋白質(zhì)細(xì)胞活性測(cè)定將Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞)和人癌細(xì)胞系在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。同時(shí)，將蒜頭果蛋白質(zhì)凍干粉配成工作濃度為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml，在無(wú)菌室的超凈工作臺(tái)上用一次性過(guò)濾器(0.22um)過(guò)濾除菌后，點(diǎn)樣(50ul/孔)，繼續(xù)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1天后，觀察結(jié)果。
2)蒜頭果蛋白質(zhì)體外抑制癌細(xì)胞活性的測(cè)定用MTT比色法測(cè)定人類癌細(xì)胞系的ID50。具體操作如下(1)細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)24小時(shí)。
(2)MTT溶液的配制四甲基偶氮唑鹽[MTT，3-dimethyl-2-thiazolyl-2，5-diphenyl tetrazolium bromide]溶于pH7.2的磷酸鹽緩沖液中，濃度為50mg/ml，過(guò)濾除菌后，于4℃避光保存，使用前用含10％小牛血清的DMEM培養(yǎng)液稀釋至5mg/ml。
(3)樣品的處理樣品是經(jīng)疏水層析純化后，收集活性峰的部分，經(jīng)BCA蛋白質(zhì)檢測(cè)方法測(cè)定其濃度為4.79ug/ml。人血清白蛋白(68000Da)作為標(biāo)準(zhǔn)品，則此樣品的實(shí)際濃度的換算方法為(ug/ml)×10-6/68,000×10-3(mol/L)，故其濃度為8.05735×10-7mol/L。將此濃度的樣品按4倍逐步稀釋成8個(gè)濃度，取后6個(gè)濃度作為實(shí)驗(yàn)樣品。即稀釋濃度＝原液濃度/4°(mol/L)(n＝3～8)。
例濃度③為8.05735×10-7/43＝1.259×10-8mol/L；濃度④為8.05735×10-7/44＝3.147×10-9mol/L等，依次類推。
(4)細(xì)胞死亡率的測(cè)定癌細(xì)胞培養(yǎng)于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中(104個(gè))，在5％CO2，37℃條件下培養(yǎng)24h后，每孔加入20ul不同濃度的稀釋樣品，6個(gè)平行復(fù)孔，培養(yǎng)72h后，吸除藥液，每孔加入新配制的MTT溶液，37℃培育4h，吸去上清，每孔加入150ul二甲亞砜(DMSO)，振蕩30min，在酶標(biāo)儀(TECANSunrise)上測(cè)定OD570。以有細(xì)胞而不加蛋白質(zhì)的孔為對(duì)照孔；以不加細(xì)胞和培養(yǎng)基，只加MTT和DMSO的孔為空白孔，計(jì)算細(xì)胞死亡率。細(xì)胞死亡率按下式計(jì)算
細(xì)胞死亡率IC(％)＝(1-OD實(shí)驗(yàn)組/OD對(duì)照組)×100％(5)IC50的測(cè)定將純化后的蒜頭果蛋白質(zhì)樣品連續(xù)倍比稀釋后，測(cè)定每個(gè)濃度的死亡率，以引起50％細(xì)胞死亡的最小蛋白質(zhì)含量為IC50。其計(jì)算公式為IC50＝(1-實(shí)驗(yàn)組OD50/對(duì)照組OD50)×100％。
體外試驗(yàn)用細(xì)胞株①非洲綠猴腎細(xì)胞系(Vero)，②人宮頸癌細(xì)胞系(Hela)，③早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)，④人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)，⑤人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)，⑥人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)。


圖1是本發(fā)明的蒜頭果蛋白質(zhì)的SDS-PAGE電泳圖譜。
圖中1是加入巰基乙醇處理的蒜頭果粗蛋白；2是加入巰基乙醇處理的蒜頭果蛋白質(zhì)；3中純化的蒜頭果蛋白質(zhì)；4是未加入巰基乙醇處理的蒜頭果粗蛋白；5是標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子量。A為分子量大的條帶標(biāo)記鏈，B為分子量小的條帶標(biāo)記鏈。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步說(shuō)明以下的實(shí)施例只是為了本領(lǐng)域的技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，沒(méi)有限制本發(fā)明之意。
實(shí)施例1具有體外強(qiáng)烈抑制癌細(xì)胞活性的蒜頭果蛋白質(zhì)的制備稱取1kg蒜頭果去外殼和表皮，用預(yù)先冷卻的20mM pH 7.0磷酸鹽緩沖液(內(nèi)加1mM EDTA和1mM巰基乙醇)在高速組織搗碎機(jī)里搗碎后，再用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)處理30分鐘，用4層紗布過(guò)濾，高速冷凍離心機(jī)離心(HITACHI CR21G 8000rpm，30分鐘，4℃)，去除固體物部分，上清液用30％～100％硫酸銨分級(jí)沉淀，冷凍離心，得到高鹽蛋白質(zhì)沉淀，把分級(jí)沉淀得到的初提物樣品采用透析袋法脫鹽，用電導(dǎo)儀控制平衡溶液的電導(dǎo)率，當(dāng)電導(dǎo)率低于2ms/cm即可，樣品溶液經(jīng)真空冷凍干燥機(jī)干燥，得到白色冷凍干燥蛋白質(zhì)樣品，此蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)純化系統(tǒng)(Amersham KTA Explorer 100，采用HiprepTMphenyl FF層析柱)進(jìn)一步純化，蛋白質(zhì)電泳系統(tǒng)(Amersham Hoefer SE260)檢測(cè)，獲得SDS-PAGE單一條帶純度蛋白質(zhì)樣品，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)附圖1。
實(shí)施例2蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系(Hela)體外抑制癌細(xì)胞活性測(cè)定將人宮頸癌細(xì)胞(Hela)分別在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)，在正對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期將其酶解、消化，鋪24孔板，每孔1ml，蒜頭果蛋白質(zhì)樣品(濃度分別為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml)經(jīng)0.22um膜過(guò)濾除菌后，各點(diǎn)50ul/孔，24h就可以觀察到細(xì)胞的病變，用倒置顯微鏡觀察，開(kāi)始時(shí)有部分細(xì)胞圓縮，然后可見(jiàn)整片的細(xì)胞呈網(wǎng)狀，繼而細(xì)胞發(fā)生崩解。與陰性對(duì)照比較，蒜頭果蛋白質(zhì)表現(xiàn)出對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)非常強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，即使在0.1ug/ml的濃度下，人宮頸癌細(xì)胞(Hela)兩天后全部死亡，依照前面描述的方法，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理，計(jì)算得到蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞系(Hela)的IC50＝1.26×10-9(mol/L)。
實(shí)施例3蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)體外抑制活性測(cè)定將早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)分別在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)，在正對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期將其酶解、消化，鋪24孔板，每孔1ml，蒜頭果蛋白質(zhì)樣品(濃度分別為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml)經(jīng)0.22um膜過(guò)濾除菌后，各點(diǎn)50ul/孔，24h就可以觀察到細(xì)胞的病變，用倒置顯微鏡觀察，開(kāi)始時(shí)有部分細(xì)胞圓縮，然后可見(jiàn)整片的細(xì)胞呈網(wǎng)狀，繼而細(xì)胞發(fā)生崩解。與陰性對(duì)照比較，蒜頭果蛋白質(zhì)表現(xiàn)出對(duì)早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)非常強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，即使在0.1ug/ml的濃度下，早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)兩天后全部死亡，依照前面描述的方法，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理，計(jì)算得到蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)的IC50＝6.17×10-9(mol/L)。
實(shí)施例4蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)體外抑制活性測(cè)定將人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)分別在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)，在正對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期將其酶解、消化，鋪24孔板，每孔1ml，蒜頭果蛋白質(zhì)樣品(濃度分別為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml)經(jīng)0.22um膜過(guò)濾除菌后，各點(diǎn)50ul/孔，24h就可以觀察到細(xì)胞的病變，用倒置顯微鏡觀察，開(kāi)始時(shí)有部分細(xì)胞圓縮，然后可見(jiàn)整片的細(xì)胞呈網(wǎng)狀，繼而細(xì)胞發(fā)生崩解。與陰性對(duì)照比較，蒜頭果蛋白質(zhì)表現(xiàn)出對(duì)人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)非常強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，即使在0.1ug/ml的濃度下，人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)兩天后全部死亡，依照前面描述的方法，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理，計(jì)算得到蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人乳腺癌細(xì)胞系(MCF-7)的IC50＝4.63×10-9(mol/L)。
實(shí)施例5蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)體外抑制活性測(cè)定將人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)分別在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)，在正對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期將其酶解、消化，鋪24孔板，每孔1ml，蒜頭果蛋白質(zhì)樣品(濃度分別為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml)經(jīng)0.22um膜過(guò)濾除菌后，各點(diǎn)50ul/孔，24h就可以觀察到細(xì)胞的病變，用倒置顯微鏡觀察，開(kāi)始時(shí)有部分細(xì)胞圓縮，然后可見(jiàn)整片的細(xì)胞呈網(wǎng)狀，繼而細(xì)胞發(fā)生崩解。與陰性對(duì)照比較，蒜頭果蛋白質(zhì)表現(xiàn)出對(duì)人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)非常強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，即使在0.1ug/ml的濃度下，人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)兩天后全部死亡，依照前面描述的方法，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理，計(jì)算得到蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人肝癌細(xì)胞系(Bel-4702)的IC50＝1.97×10-9(mol/L)。
實(shí)施例6蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)體外抑制活性測(cè)定將人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)分別在含有10％滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37℃，5％CO2條件下培養(yǎng)，在正對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期將其酶解、消化，鋪24孔板，每孔1ml，蒜頭果蛋白質(zhì)樣品(濃度分別為50ug/ml，10ug/ml，1ug/ml，0.1ug/ml)經(jīng)0.22um膜過(guò)濾除菌后，各點(diǎn)50ul/孔，24h就可以觀察到細(xì)胞的病變，用倒置顯微鏡觀察，開(kāi)始時(shí)有部分細(xì)胞圓縮，然后可見(jiàn)整片的細(xì)胞呈網(wǎng)狀，繼而細(xì)胞發(fā)生崩解。與陰性對(duì)照比較，蒜頭果蛋白質(zhì)表現(xiàn)出對(duì)人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)非常強(qiáng)烈的細(xì)胞毒性，即使在0.1ug/ml的濃度下，人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)兩天后全部死亡，依照前面描述的方法，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)處理，計(jì)算得到蒜頭果蛋白質(zhì)對(duì)人肺癌細(xì)胞系(SPC-A1)的IC50＝4.89×10-9(mol/L)。
權(quán)利要求
1.一種用于人類癌癥治療的蒜頭果蛋白質(zhì)，該蛋白質(zhì)來(lái)源于鐵青樹科蒜頭果樹(Malaniaoleifera Chun et S.K.Lee)的果實(shí)，它由A、B兩條多肽鏈組成，分子量大約在55kD，其中，A鏈分子量32kD，N-端氨基酸序列是NH2-D-E-T-X-T-D-E-E-F-N-(X一般情況下為C)，B鏈分子量23kD，N-端序列是NH2-D-Y-P-K-L-T-F-T-T-S-，A、B兩條多肽鏈之間由二硫鍵共價(jià)連接。
2.如權(quán)利要求1所述蒜頭果蛋白質(zhì)的制備方法，該方法包括以下步驟將蒜頭果在不高于4℃的低溫條件下?lián)v碎，過(guò)濾，上清液用30％～100％硫酸銨分級(jí)沉淀，透析，再通過(guò)蛋白質(zhì)分離專用的色譜儀器純化，獲得SDS-PAGE電泳純度的樣品。
3.以蒜頭果蛋白質(zhì)為活性成份用于治療人類癌癥的藥物組合物，其中含有治療有效劑量的權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)或其可藥用鹽，需要時(shí)可與其他有藥物活性的物質(zhì)或在治療上可以配伍的敷料配伍使用。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，使用如權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)或其可藥用鹽，按藥學(xué)上可以接受的公知方法制成制劑形式。
全文摘要
一種用于人類癌癥治療的蒜頭果蛋白質(zhì)，以鐵青樹科蒜頭果樹(Malania oleifera Chunet S. K. Lee)的果實(shí)蒜頭果中提取的蒜頭果蛋白質(zhì)或其可藥用鹽為活性成分，或使用含有此活性成分的藥物或藥物組合物治療人類癌癥；蒜頭果蛋白質(zhì)的制備方法包括以下步驟將蒜頭果在不高于4℃的低溫條件下?lián)v碎，過(guò)濾，上清液用30％～100％硫酸銨分級(jí)沉淀，透析，再通過(guò)蛋白質(zhì)分離專用的色譜儀器純化，獲得SDS－PAGE電泳純度的樣品。本發(fā)明為臨床治療癌癥病人提供了一種全新的藥物或藥物組合物。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1814621SQ20051001063
公開(kāi)日2006年8月9日 申請(qǐng)日期2005年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月31日
發(fā)明者戴曉暢, 毛宇, 黃曉麒, 吳凱 申請(qǐng)人:云南大學(xué)