專利名稱：一種含有六環(huán)水的獸用阿米卡星溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于獸藥的技術(shù)領(lǐng)域，涉及以阿米卡星為原料制備一種廣譜抗菌藥，用于畜禽細(xì)菌和支原體感染的獸用藥劑及其制法。
背景技術(shù)：
水是所有生物中最重要的成分，生物體一般含水量都在60％以上；食品中除干制品之外，含水量都在65％-90％之間；可以說(shuō)水在我們的生活中起著非常重要的作用。水有許多特殊的性質(zhì)，近年來(lái)引起人們的關(guān)注。例如雜志《江西化工》1997年第四期第34頁(yè)《生命的水神奇的水》中介紹了具有六個(gè)水分子團(tuán)結(jié)構(gòu)的水，即所謂“六環(huán)水”，具有促進(jìn)健康的功能。
天津大學(xué)學(xué)報(bào)2000年1月第33卷第1期收載的《水的六環(huán)結(jié)構(gòu)及其對(duì)溶菌酶熱變性的影響》通過(guò)理論分析和實(shí)驗(yàn)證明了水的六環(huán)結(jié)構(gòu)及其生物功能。研究表明，水經(jīng)過(guò)低溫超聲定頻譜振后，大多數(shù)呈六環(huán)和六籠形水分子簇存在，這種水在生物蛋白、核酸、細(xì)胞及組織活動(dòng)中起到重要作用；經(jīng)DSC法實(shí)驗(yàn)證明，用六環(huán)水水合溶菌酶時(shí)，提高了其熱抗變性能力。
化學(xué)通報(bào)2004年第四期收載的《水分子團(tuán)簇結(jié)構(gòu)的改變及其生物效應(yīng)》概述了近30年來(lái)從水分子團(tuán)簇結(jié)構(gòu)的發(fā)現(xiàn)到水分子簇的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)及相關(guān)理論計(jì)算的研究進(jìn)展；總結(jié)了改變水分子團(tuán)簇結(jié)構(gòu)的四種方法，包括外加磁場(chǎng)、外加電場(chǎng)、激光輻射以及直接加熱法，分別討論了這四種方法的作用機(jī)理，介紹了水分子團(tuán)簇結(jié)構(gòu)變小后，作用于生物體，能產(chǎn)生多種生物效應(yīng)，在很多方面能夠改善生物體的生理機(jī)能。
科學(xué)研究表明，水分子團(tuán)越小，活性越大，這種水喝起來(lái)越好喝，反之亦然。許多實(shí)驗(yàn)證明，改變水的結(jié)構(gòu)時(shí)對(duì)生物的生理反應(yīng)有很大的影響；具有五個(gè)水分子或六個(gè)水分子的小分子團(tuán)結(jié)構(gòu)的水，即五環(huán)水和六環(huán)水，對(duì)健康有很好的促進(jìn)作用。目前在獸用口服液的制備工藝中，純凈水是最常用的溶媒，即將自來(lái)水進(jìn)行一定的水處理后，用做藥物的溶媒。然而科學(xué)研究表明，在藥物制作的過(guò)程中使用普通水，由于水分子的結(jié)構(gòu)，使藥物的生物利用度不能得到最大限度的發(fā)揮。然而六環(huán)水能夠保持較長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定性，對(duì)于細(xì)胞有很強(qiáng)的親和力，能夠顯著提高藥物的療效，對(duì)于疾病的恢復(fù)有較快的促進(jìn)作用。
水是一種特殊的物質(zhì)，它具有很多功能。首先它是一種良好的溶劑，它含有O2、CO2等物質(zhì)，具有不同的PH值。因此，可以溶解很多礦物質(zhì)，為人體輸送營(yíng)養(yǎng)；水體又是一個(gè)“化學(xué)場(chǎng)”，其中可以進(jìn)行各種復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)如酸堿反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)等，同時(shí)，還可以發(fā)生溶解、沉淀、分解、化合、膠溶等化學(xué)作用，在獸用口服液的制備工藝中，純凈水是最常用的溶媒。即將自來(lái)水進(jìn)行一定的水處理后，用作藥物的溶媒。在藥物制作的過(guò)程中使用普通水，由于水分子的結(jié)構(gòu)及其排列等原因，使藥物的生物利用度不能得到最大限度的發(fā)揮。
已知阿米卡星的化學(xué)名稱為O-3-氨基-3-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[6-氨基-6-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→4)]-N-(4-氨基-2-羧基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽。按干燥品計(jì)算，每1ml的效價(jià)不得少于690阿米卡星單位(n＝1.8)或不得少于674阿米卡星單位(n＝2)，阿米卡星的結(jié)構(gòu)式見(jiàn)下圖。該藥物為白色或類白色粉末或?yàn)榻Y(jié)晶粉末，幾乎無(wú)臭，無(wú)味。在水中極易溶解，在甲醇、丙酮、乙醚或三氯甲烷中幾乎不溶。
本品抗菌譜與慶大霉素相似，主要作用于革蘭氏陰性菌如大腸桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌等。對(duì)結(jié)核桿菌、金黃色葡萄球菌也有良好的抗菌作用，其特點(diǎn)是對(duì)氨基糖苷酶較慶大霉素和妥布霉素穩(wěn)定，這兩種耐藥菌的菌株對(duì)阿米卡星仍敏感。主要作用于革蘭氏陰性菌引起的呼吸道、尿路、腹腔、軟組織、骨、關(guān)節(jié)、生殖系統(tǒng)感染和敗血癥等。本類藥物通過(guò)干擾細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，對(duì)各種革蘭氏陰性桿菌有強(qiáng)大殺菌作用，其殺菌活力在較廣的范圍內(nèi)和藥物濃度成正比，并對(duì)大腸桿菌等革蘭氏陰性桿菌有較長(zhǎng)時(shí)間的抗菌后效應(yīng)作用；與頭孢菌素類、青霉素類聯(lián)合，對(duì)大腸桿菌等多種革蘭氏陰性菌具協(xié)同作用。本類藥物內(nèi)服吸收很少，幾乎完全從糞便排出，可用作腸道感染用藥，肌注給藥后吸收迅速，大部分以原形從尿中排出。
目前有關(guān)阿米卡星的產(chǎn)品主要有阿米卡星溶液，是將阿米卡星與適宜溶媒配制而成的溶液，含阿米卡星(C22H43N5O13)應(yīng)為標(biāo)示量的90.0％～110.0％，性狀為無(wú)色或微黃色澄明液體。
本產(chǎn)品的鑒別方法為(1)取本品與阿米卡星標(biāo)準(zhǔn)品適量，分別加水制成每1ml中含10mg的溶液，照薄層色譜法(《中華人民共和國(guó)獸藥典》2000年版一部附錄23頁(yè))試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠H薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液-水(1∶4∶2∶1)為展開劑，展開后，晾干，噴以0.2％茚三酮的水飽和正丁醇溶液，在100℃加熱10分鐘，供試品溶液于標(biāo)準(zhǔn)品溶液所顯斑點(diǎn)的顏色與位置相同。
(2)取本品1ml，加1mol/ml氫氧化鈉溶液1ml，混合后加5％硝酸鈷溶液2ml，即產(chǎn)生紫藍(lán)色絮狀沉淀。
(3)本品顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)(《中華人民共和國(guó)獸藥典》2000年版一部附錄15頁(yè))。
pH值應(yīng)為5.0～7.0(《中華人民共和國(guó)獸藥典》2000年版一部附錄40頁(yè))。
本藥品的含量測(cè)定方法為精密量取本品適量，加滅菌水制成每1ml中約含阿米卡星1000單位的溶液，照抗生素微生物檢定法(《中華人民共和國(guó)獸藥典》2000年版一部附錄68頁(yè))測(cè)定，1000阿米卡星單位相當(dāng)于1mg的C22H43N5O13。
阿米卡星的制備工藝為1、將阿米卡星25g加入適量純化水使之充分稀釋、攪拌均勻；2、加入30％硫酸溶液10-40ml，使之溶解。
3、加注純化水至全量1000ml，調(diào)解PH至5.0-7.04、過(guò)濾。
5、半成品送檢，測(cè)定7、合格品灌裝，裝量100±1％。
8、包裝密封性檢查。
9、裝箱打包。
以上所述的即為阿米卡星溶液現(xiàn)有的制備工藝及檢測(cè)方法，但是現(xiàn)有阿米卡星溶液存在著釋放速度慢、血藥高峰濃度存在時(shí)間短、生物利用度差等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用六環(huán)水制備的具有釋放速度快、血藥高峰濃度時(shí)間長(zhǎng)、生物利用度高的阿米卡星溶液獸用制劑。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供一種畜禽抗菌藥物，包含六環(huán)水，其特征在于以六環(huán)水為載體以微溶或溶于六環(huán)水的抗菌藥物為活性成分，制備畜禽抗菌藥物。
所述的畜禽抗菌藥物，包含六環(huán)水，阿米卡星(化學(xué)名稱為O-3-氨基-3-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[6-氨基-6-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→4)]-N-(4-氨基-2-羧基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽?；瘜W(xué)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)下圖) 其特征在于以六環(huán)水為載體制備阿米卡星溶液。
所述的阿米卡星溶液，其特征在于a、選用凈化的水(即純凈水)作為原水，一般市售合格純凈水，電導(dǎo)率小于20μs/cm即可，靜置數(shù)小時(shí)后緩慢冷凍，降溫速率為2-5℃/h，冷凍最低溫度達(dá)-30～-50℃，使水充分結(jié)晶，而后再解凍，其解凍過(guò)程在低于10℃下進(jìn)行，溶化的水及時(shí)收集儲(chǔ)存在4-10℃的溫度環(huán)境中，即得到六環(huán)水；b、將阿米卡星25g加入適量六環(huán)水使之充分稀釋、攪拌均勻；c、加入30％硫酸溶液10-40ml，使之溶解。
d、加注六環(huán)水至全量1000ml，調(diào)解PH至5.0-7.0；e、過(guò)濾；f、半成品送檢，測(cè)定；g、合格品灌裝，裝量100±1％；h、包裝密封性檢查后裝箱打包。
下面以實(shí)驗(yàn)說(shuō)明本發(fā)明的治療效果1材料與方法
1.1供試藥品試驗(yàn)藥品為六環(huán)水阿米卡星組，推薦劑量為1ml/1000ml水，飲水；對(duì)照藥品為普通水阿米卡星組，推薦劑量為1ml/1000ml水，飲水1.2試驗(yàn)動(dòng)物200只AA混合肉雛，購(gòu)自天津市某養(yǎng)雞公司，運(yùn)至本實(shí)驗(yàn)室禽舍內(nèi)籠養(yǎng)，常規(guī)管理，喂給全價(jià)飼料至14日齡，經(jīng)檢查沒(méi)有發(fā)生大腸桿菌病，即可示為實(shí)驗(yàn)用雞。將200只試驗(yàn)用健康雞分成4組，其中1、2組分別為攻毒試驗(yàn)藥物組和對(duì)照藥物組，3組為陽(yáng)性對(duì)照組，4組為陰性對(duì)照組。
1.3大腸肝菌人工感染劑量的確定1.3.1菌種 雞大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(O78血清型)由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院提供1.3.2試驗(yàn)菌液的制備 將標(biāo)準(zhǔn)凍干菌O78加0.5ml肉湯溶解后接種于麥康凱瓊脂上，分離單個(gè)菌落。挑取直徑1-2mm光滑、圓形、紅色菌落2-3個(gè)接種于2ml普通肉湯，37℃培養(yǎng)18h。肉湯培養(yǎng)物接種雞復(fù)壯后，從死雞肝臟中分離大腸桿菌，按上述方法重新接種。革蘭氏染色鏡檢無(wú)雜菌生長(zhǎng)后，作為試驗(yàn)菌液。用平板稀釋法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)約為6×109CFU/ml。
1.4試驗(yàn)方法除陰性對(duì)照組外，每只雞肌肉注射1.2億大腸桿菌。攻毒后約一周左右，雛雞表現(xiàn)羽毛松亂，精神沉郁，減食及水樣糞便或白色糞便污染肛周羽毛，飲水量增加。主要病理變化為出現(xiàn)心包膜肥厚、混濁；肝明顯腫脹，包被白色膠樣滲出物，有纖維蛋白附著物，肝有白色壞死斑；脾充血、腫脹。氣囊混濁、肥厚，再用細(xì)菌學(xué)檢查法確診，此后馬上用藥，連續(xù)使用五天，觀察治療效果。
表1試驗(yàn)分組


1.5療效判定標(biāo)準(zhǔn)1.5.1死亡 在試驗(yàn)期間出現(xiàn)雞大腸桿菌病的典型癥狀并死亡，尸體剖檢有典型的病變特征，并從肝、脾及心分離培養(yǎng)出雞大腸埃希氏菌，判定為感染該菌而死亡。根據(jù)死亡雞數(shù)計(jì)算各組的死亡率。
1.5.2治愈 在試驗(yàn)期間經(jīng)內(nèi)服給藥后雞精神狀態(tài)、食欲恢復(fù)正常，不再出現(xiàn)排稀糞等臨床癥狀，均屬治愈。根據(jù)治愈雞占試驗(yàn)雞數(shù)的比率計(jì)算治愈率。
1.5.3有效 經(jīng)內(nèi)服給藥后，完全治愈的雞和沒(méi)有死亡但有臨床癥狀表現(xiàn)者，均為有效；試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每組存活的雞數(shù)占試驗(yàn)雞數(shù)的百分率為有效率。
1.5.4增重 根據(jù)試驗(yàn)開始及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每只雞的體重，計(jì)算每只雞的增重量，然后據(jù)此計(jì)算每組試驗(yàn)雞的平均增重。相對(duì)增重率是按各用藥治療組與健康對(duì)照組的增重之比計(jì)算，其中健康對(duì)照組雞增重率設(shè)為100％。
2試驗(yàn)結(jié)果各實(shí)驗(yàn)組對(duì)雞大腸桿菌病的療效見(jiàn)表2表2試驗(yàn)療效比較

通過(guò)上表可以看出在相同條件下六環(huán)水組的治療效果比普通水組高，差異較顯著，對(duì)雞大腸桿菌病有較好的療效。
發(fā)明效果在其它條件相同情況下，與現(xiàn)有含純化水阿米卡星溶液相比，將冷凍制備的六環(huán)水加注阿米卡星溶液中，水分子簇的體積變小，相應(yīng)的水的粘度、表面張力等有所下降，使阿米卡星擴(kuò)散阻力降低，促進(jìn)藥物釋放，阿米卡星溶液藥物釋放速率和釋放量都有所提高。六環(huán)水對(duì)于細(xì)胞有很強(qiáng)的親和力，生物利用度好，用于畜禽細(xì)菌和支原體感染，能夠顯著提高藥物的療效，對(duì)于疾病的恢復(fù)有較快的促進(jìn)作用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1a、選用凈化的水(即純凈水)作為原水，一般市售合格純凈水，電導(dǎo)率小于20μs/cm即可，靜置數(shù)小時(shí)后緩慢冷凍，降溫速率為2-5℃/h，冷凍最低溫度達(dá)-30～-50℃，使水充分結(jié)晶，而后再解凍，其解凍過(guò)程在低于10℃下進(jìn)行，溶化的水及時(shí)收集儲(chǔ)存在4-10℃的溫度環(huán)境中，即得到六環(huán)水；b、將阿米卡星25g加入適量六環(huán)水使之充分稀釋、攪拌均勻；c、加入30％硫酸溶液10-40ml，使之溶解。
d、加注六環(huán)水至全量1000ml，調(diào)解PH至5.0-7.0e、過(guò)濾。
f、半成品送檢，測(cè)定g、合格品灌裝，裝量100±1％。
h、包裝密封性檢查后裝箱打包。
該方法工藝簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)。
實(shí)施例2本發(fā)明藥物，可用于治療革蘭氏陰性菌如大腸桿菌、綠膿桿菌、變形桿菌等。對(duì)結(jié)核桿菌、金黃色葡萄球菌也有良好的抗菌作用。用法用量為混飲，1ml/1000ml水，自由飲用，連用3-5天。
權(quán)利要求
1.一種畜禽抗菌藥物，包含六環(huán)水，其特征在于以六環(huán)水為載體以微溶或溶于六環(huán)水的抗菌藥物為活性成分制備畜禽抗菌藥物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的畜禽抗菌藥物，包含六環(huán)水，阿米卡星(化學(xué)名稱為O-3-氨基-3-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[6-氨基-6-脫氧-α-D-葡吡喃糖基-(1→4)]-N-(4-氨基-2-羧基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽)，化學(xué)結(jié)構(gòu)式為 其特征在于以六環(huán)水為載體制備阿米卡星溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的阿米卡星溶液，其特征在于a、選用凈化的水(即純凈水)做為原水，一般市售合格純凈水，電導(dǎo)率小于20μs/cm即可，靜置數(shù)小時(shí)后緩慢冷凍，降溫速率為2-5℃/h，冷凍最低溫度達(dá)-30～-50℃，使水充分結(jié)晶，而后再解凍，其解凍過(guò)程在低于10℃的條件下進(jìn)行，溶化的水及時(shí)收集儲(chǔ)存在4-10℃的溫度環(huán)境中，即得到六環(huán)水；b、將阿米卡星25g加人適量六環(huán)水使之充分稀釋、攪拌均勻；b、將阿米卡星25g加入適量六環(huán)水使之充分稀釋、攪拌均勻；c、加入30％硫酸溶液10-40ml，使之溶解；d、加注六環(huán)水至全量1000ml，調(diào)解PH至5.0-7.0；e、過(guò)濾；f、半成品送檢，測(cè)定；g、合格品灌裝，裝量100±1％；h、包裝密封性檢查后裝箱打包。
全文摘要
本發(fā)明屬于獸藥的技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種畜禽抗菌藥物以阿米卡星為原料制備一種抗菌溶液，阿米卡星溶液以六環(huán)水為載體，經(jīng)冷凍制備的六環(huán)水加注阿米卡星溶液中，水分子簇的體積變小，相應(yīng)的水的粘度、表面張力等有所下降，使阿米卡星擴(kuò)散阻力降低，促進(jìn)藥物釋放，發(fā)明阿米卡星溶液藥物釋放速率和釋放量都有所提高，六環(huán)水對(duì)于細(xì)胞有很強(qiáng)的親和力，用于畜禽細(xì)菌和支原體感染，能夠顯著提高藥物的療效，對(duì)于疾病的恢復(fù)有較快的促進(jìn)作用。
文檔編號(hào)A61P31/00GK1965847SQ20051001614
公開日2007年5月23日 申請(qǐng)日期2005年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月18日
發(fā)明者李旭東, 鮑恩東, 蘇建東 申請(qǐng)人:天津市潤(rùn)拓生物技術(shù)有限公司