專利名稱：一種抗炎解毒木犀草素類新藥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是對(duì)具有抗炎解毒活性單體木犀草素進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾后所獲得的能在療效上更為理想的木犀草素的衍生物，及其抗炎解毒活性的藥理研究。
背景技術(shù)：
木犀草素屬弱酸性四羥基黃酮類化合物，在植物界分布較廣；化學(xué)分析表明等摩爾條件下與槲皮素及辣椒素相比，木犀草素具有最強(qiáng)的抗氧化活性和極佳的自由基清除率。此外，其具有抑制酶促、非酶促和CCl4誘發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。有關(guān)藥理實(shí)驗(yàn)及臨床觀察的結(jié)果還表明木犀草素在體內(nèi)具有抗菌、抗病毒及降低血脂和膽固醇的作用，對(duì)心肌缺血損傷也有保護(hù)作用。而且防輻射特性也已見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。根據(jù)對(duì)多種人體腫瘤細(xì)胞系的顯著抗增殖活性，木犀草素的抗腫瘤作用尤為明顯。作為醛糖還原酶的抑制劑，木犀草素還對(duì)糖尿病白內(nèi)障的惡化具有預(yù)防作用。木犀草素天然品已應(yīng)用于臨床治療止咳、祛痰、消炎，有較好的療效。
本發(fā)明式I的木犀草素衍生物具有比木犀草素更優(yōu)越的藥用特性。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)上述情況，本發(fā)明以木犀草素為基本結(jié)構(gòu)進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，以得到更為理想的抗炎解毒活性，因而可以被發(fā)展與應(yīng)用于新的抗炎解毒藥用化合物。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明進(jìn)一步的目的，是提供以這些新化合物為有效的藥用活性成分而用于抗炎的藥物，這些藥物至少可以使醫(yī)生和/或病員在對(duì)治療炎癥能增加對(duì)可供使用藥物的選擇和適用范圍。
本發(fā)明所說(shuō)的具有抗炎解毒活性的木犀草素衍生物，結(jié)構(gòu)如式(I)所示 其中，式(I)中的R1、R2、和R3可以分別是H、相同或不同的烷基，但是R1、R2、和R3不同時(shí)都為H。所說(shuō)的烷基一般為如甲基、乙基等C1-C6的小分子烷基。
藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，本發(fā)明上述的化合物(I)可以具有加強(qiáng)木犀草素的抗炎解毒活性的作用，增強(qiáng)藥效。
抗炎活性實(shí)驗(yàn)取昆明種小鼠96只，按體重隨機(jī)分為16組，每組6只，雌雄各半，即陰性對(duì)照組(灌服0.5％CMC液0.4ml/20g)；阿司匹林組(灌服3％阿司匹林0.4ml/20g)；2a、2c、2e、2f、2g、2i、2j化合物各為兩組(分別灌服0.3％及0.15％藥品)。以上各組小鼠每日給藥一次，連續(xù)給藥五天，于末次給藥后30min，用二甲苯0.05ml/鼠涂抹每鼠右耳致炎，左耳作對(duì)照，致炎后30min脫頸椎處死小鼠，以7mm直徑打孔器取下耳緣左、右片，分別用電子天平稱重，以左、右耳片重量差表示腫脹度，進(jìn)行組間顯著差比較。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1表1 式I化合物對(duì)二甲苯致小鼠耳腫脹的抗炎活性Table 1 Antiinflammatory activity of some target compounds on xylene induced mice edema

與陰性組比*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.00具體實(shí)施方式
實(shí)例18-(N，N-二乙基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2a)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入二乙胺0.037ml(99+％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率82.3％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.11～1.25(t，J＝2Hz，6H，2CH3)，2.68～2.74(q，J＝7.2Hz，4H，2CH2)，3.89(s，2H，CH2)，6.24(s，1H，6-H)，6.55(s，1H，3-H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H，5′-H)，7.32～7.37(m，2H，2′-H，6′-H)，13.49(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)370.0([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例28-(N，N-二異丙基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃4-酮(2b)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入二異丙胺0.050ml(99+％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率83.0％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.17(d，J＝6.8Hz，12H，4CH3)，3.33～3.39(m，2H，2CH)，3.99(s，2H，CH2)，6.08(s，1H，6-H)，6.49(s，1H，3-H)，6.87(d，J＝8.0Hz，1H，5′-H)，7.31～7.34(m，2H，2′-H，6′-H)，13.38(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)400.3([M+H]+，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例38-(N-乙基-1″-甲基)-次甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2c)
稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.05ml 40％乙醛水溶液，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入乙胺0.028ml(70％水溶液，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?4h，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率56.1％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.10(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，1.38(d，J＝6.8Hz，3H，CH3)，2.63～2.69(m，2H，CH2)，4.31～4.36(q，1H，CH)，6.07(s，1H，6-H)，6.51(s，1H，3-H)，6.88(d，J＝7.2Hz，1H，5′-H)，7.34～7.36(m，2H，2′-H，6′-H)，13.59(s，1H，5-OH)；MS[ESI(+)]m/z(％)358.0([M+H]+，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例48-(N-乙基-1″-甲基)-次甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2d)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.05ml 40％乙醛水溶液，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入異丙胺0.031ml(99％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?4h，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率51.3％，m.p.＞300℃。
1HNMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.13(d，J＝6.4Hz，6H，2CH3)，1.42(d，J＝6.8Hz，3H，CH3)，2.85～2.89(m，1H，CH)，4.49～4.51(q，1H，CH)，6.18(s，1H，6-H)，6.56(s，1H，3-H)，6.86(d，J＝8.4Hz，1H，5′-H)，7.35～7.38(m，2H，2′-H，6′-H)，13.59(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)370.0([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為
實(shí)例58-(N-乙基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2e)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入乙胺0.028ml(70％水溶液，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率80.4％，m.p.＞300℃。
1H MR(400Hz，DMSO-d6)δ1.17(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，2.84(q，J＝7.2Hz，2H，CH2)，3.95(s，0.8H，CH2)，4.15(s，1.2H，CH2)，5.81(s，0.6H，6-H)，5.98(s，0.4H，6-H)，6.44(s，0.4H，3-H)，6.50(s，0.6H，3-H)，6.87(d，J＝8.4Hz，1H，5′-H)，7.34～7.39(m，2H，2′-H，6′-H)，13.03(s，1H，5-OH)；MS[ESI(+)]m/z(％)344.0([M+H]+，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例68-(N-正丙基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2f)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入正丙胺0.030ml(98％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率76.1％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ0.91(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，1.53～1.60(m，2H，CH2)，2.73(t，J＝7.6Hz，2H，CH2)，3.96(s，0.8H，CH2)，4.16(s，1.2H，CH2)，5.83(s，0.6H，6-H)，6.00(s，0.4H，6-H)，6.45(s，0.4H，3-H)，6.51(s，0.6H，3-H)，6.86(d，J＝8.4Hz，1H，5′-H)，7.32～7.37(m，2H，2′-H，6′-H)，12.98(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)356.0([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例78-(N-異丙基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2g)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入異丙胺0.031ml(99％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率83.0％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.4Hz，6H，2CH3)，3.18～3.24(m，1H，CH)，3.97(s，0.8H，CH2)，4.15(s，1.2H，CH2)，5.76(s，0.6H，6-H)，5.96(s，0.4H，6-H)，6.43(s，0.4H，3-H)，6.47(s，0.6H，3-H)，6.88(d，J＝8.8Hz，1H，5′-H)，7.33～7.36(m，2H，2′-H，6′-H)，13.09(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)356.1([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為
實(shí)例88-(N-正丁基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2h)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入正丁胺0.035ml(99.5％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率73.8％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ0.87(t，J＝7.2Hz，3H，CH3)，1.30～1.32(m，2H，CH2)，1.53～1.55(m，2H，CH2)，2.73(t，J＝6.8Hz，2H，CH2)，3.94(s，0.8H，CH2)，4.14(s，1.2H，CH2)，5.81(s，0.6H，6-H)，6.01(s，0.4H，6-H)，6.43(s，0.4H，3-H)，6.47(s，0.6H，3-H)，6.82(d，J＝8.0Hz，1H，5′-H)，7.30～7.39(m，2H，2′-H，6′-H)，13.08(s，1H，5-OH)；MS[ESI(+)]m/z(％)372.1([M+H]+，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例98-(N-叔丁基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2i)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入叔丁胺0.038ml(99％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率75.2％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.28(s，9H，3CH3)，3.94(s，0.8H，CH2)，4.13(s，1.2H，CH2)，5.81(s，0.6H，6-H)，6.02(s，0.4H，6-H)，6.43(s，0.4H，3-H)，6.47(s，0.6H，3-H)，6.83(d，J＝7.6Hz，1H，5′-H)，7.05～7.15(m，2H，2′-H，6′-H)，12.96(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)370.1([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)為 實(shí)例108-(N-環(huán)己基)-亞甲基胺基-5，7，3′，4′-四羥基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(2j)稱取木犀草素100mg(0.35mmol)放入三頸瓶中，加入10ml甲醇和0.027ml 36％甲醛水溶液(0.35mmol)，電磁攪拌，加熱至70℃，反應(yīng)液澄清后停止加熱，冷卻至室溫，然后加入環(huán)己胺0.041ml(99％，0.35mmol)，室溫?cái)嚢?0min，TLC檢測(cè)反應(yīng)，展開(kāi)劑為乙酸乙酯∶甲醇＝1∶1～4∶1(V/V)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，濾液用硅膠柱分離，以乙酸乙酯/甲醇梯度洗脫，合并含有產(chǎn)物的洗脫液，回收洗脫液，殘余物用甲醇重結(jié)晶，得黃色固體產(chǎn)物，收率84.0％，m.p.＞300℃。
1H NMR(400Hz，DMSO-d6)δ1.23～1.96(m，10H，5CH2)，2.72～2.76(m，1H，CH)，3.98(s，0.8H，CH2)，4.17(s，1.2H，CH2)，5.82(s，0.6H，6-H)，6.01(s，0.4H，6-H)，6.43(s，0.4H，3-H)，6.47(s，0.6H，3-H)，6.79(d，J＝8.0Hz，1H，5′-H)，7.29～7.34(m，2H，2′-H，6′-H)，12.98(s，1H，5-OH)；MS[ESI(-)]m/z(％)396.0([M-H]-，100)。
所得產(chǎn)品化合物的結(jié)構(gòu)

權(quán)利要求
1.一種抗炎解毒木犀草素類衍生物式I及其制備方法 其中R1是H或不同的烷基，R2是H或不同的烷基，R3是H或不同的烷基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物I，即以木犀草素為母體結(jié)構(gòu)對(duì)之進(jìn)行胺甲基化反應(yīng)。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所用的醛為脂肪醛或芳香醛，所用的胺為脂肪胺或芳香胺。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于該反應(yīng)是在室溫或低于100℃條件下進(jìn)行的。
5.如權(quán)利要求2任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于反應(yīng)時(shí)間是在20min-2d。
6.如權(quán)利要求1所述，其特征在于式I具有良好的抗炎解毒活性。
7.本發(fā)明化合物可以做成片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑以及注射劑或其它臨床可接受的適宜劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗炎解毒木犀草素類衍生物(I)及其制備方法，其中R
文檔編號(hào)A61K9/48GK1785991SQ200510022029
公開(kāi)日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2005年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月9日
發(fā)明者周美榮, 竇后松, 范辰華, 郜寧, 李穎, 郭彩虹, 祝錢莉, 唐強(qiáng), 陳志輝, 尹述凡 申請(qǐng)人:四川川大華西藥業(yè)股份有限公司, 四川大學(xué)