專利名稱：預(yù)防和治療膿毒癥的蛇毒提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及采用一種用于預(yù)防和治療膿毒癥的蛇毒提取物，具體地說(shuō)是一種同活化C蛋白功能相似的用于預(yù)防和治療膿毒癥的提取物。
背景技術(shù)：
膿毒癥是嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克、大手術(shù)后常見的并發(fā)癥，是導(dǎo)致人類死亡的一常見病種，它有極高的發(fā)病率和死亡率。(Alerti C，Brun-Buission C，Burchardi H，etal.Epidemiology of sepsis and infection in ICU patients from an international multicentercohort study[J].Intensive Care Med，2002，28(2)108-121.)膿毒癥是指由感染或者有高度可疑感染灶引起的全身炎癥反應(yīng)綜合癥，其病原菌包括細(xì)菌、真菌、寄生蟲及病毒等，臨床癥狀包括但不限于(1)體溫＞38℃或＜36℃；(2)心率＞90次/分鐘；呼吸＞20次/分鐘或PaCO2＜32mm Hg；(4)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)＞12×109/L，＜4×109/L或成熟粒細(xì)胞＞10％；(5)器官功能障礙，高灌注或高血壓。(王正國(guó).膿毒癥研究概況[J].中華創(chuàng)傷雜志，2003，19(1)5-7.)自20世紀(jì)80年代以來(lái)，隨著對(duì)膿毒癥發(fā)病機(jī)制研究的深入，開發(fā)各種旨在抑制膿毒癥形成的藥物也隨即興起，并進(jìn)行了80多項(xiàng)臨床試驗(yàn)，其中幾個(gè)有希望的藥物進(jìn)行了III期臨床試驗(yàn)，但是遺憾的是僅有一個(gè)藥物(活化C蛋白)被開發(fā)成功。(Polderman KH and Girbes ARJ.Drug intervention trials in sepsisdivergent results[J].Lancet，2004，3631721-1723.)。活化C蛋白(商品名為Xigris)的開發(fā)成功為新的治療嚴(yán)重膿毒癥藥物的開發(fā)提供了借鑒，特別是在天然產(chǎn)物中尋找同其功能相似的物質(zhì)，在此稱為活化C蛋白樣酶(activated protein C like enzyme)。由于在靜脈血栓病人中約有64％的患者對(duì)活化C蛋白是抗性的，所以這部分病人患膿毒癥后再用Xigris治療肯定是無(wú)效的，而活化C蛋白樣物質(zhì)就可以彌補(bǔ)Xigris的不足。另外，Xigris的生產(chǎn)過(guò)程復(fù)雜，生產(chǎn)成本較高，每個(gè)病人一個(gè)療程的費(fèi)用約為6800美元，如此高的價(jià)格限制了它在臨床上的廣泛應(yīng)用。以上這些原因使得活化C蛋白樣酶的尋找和開發(fā)有著非常重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。(馮軍，趙文杰.活化C蛋白[J].國(guó)外醫(yī)藥——合成藥、生化藥、制劑藥分冊(cè)，2002，23(6)348～351.)我國(guó)有著豐富的蛇毒資源，在世界各地分布的500多種毒蛇，在我國(guó)就有150多種。蛇毒是一種混合物，它含有許多種類具有不同生物活性的蛋白質(zhì)，其中很多蛋白質(zhì)作用于人血液系統(tǒng)的成分。(Markland FS.Snake venoms and the hemostatic system[J].Toxicon，1998，36(12)1749～1800.)但是，至今沒有發(fā)現(xiàn)利用蛇毒單一組分進(jìn)行預(yù)防和治療膿毒癥的報(bào)道。
基于活化C蛋白被成功開發(fā)為治療嚴(yán)重膿毒癥藥物和蛇毒中存在多種作用于血液系統(tǒng)的組分，有必要提出從蛇毒中尋找活化C蛋白樣酶，進(jìn)行治療膿毒癥創(chuàng)新藥物的開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用于預(yù)防和治療膿毒癥的蛇毒提取物，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
本發(fā)明需要解決的另一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供這種用于預(yù)防和治療膿毒癥的提取物的制備方法。
本發(fā)明需要解決的再一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供這種提取物在制備治療膿毒癥的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明公開了一種蛇毒提取物，其特征在于，該提取物在體外能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物，在體內(nèi)它能顯著降低膿毒癥試驗(yàn)動(dòng)物的死亡率。
該蛇毒提取物，由如下方法制備(1)蛇毒的分離純化，選自離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)或離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀技術(shù)中的一種；(2)將收集液進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定和水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，取同時(shí)具有二者活性的組分。
其中離子交換層析技術(shù)的具體步驟如下蛇毒溶于pH為5～10的起始緩沖液，如乙酸-乙酸鈉緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液、磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液、磷酸二氫鈉-氫氧化鈉緩沖液、Tris-HCl緩沖液、巴比妥-鹽酸緩沖液、硼砂緩沖液、甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液等，其中最優(yōu)地使用pH為7.6的Tris-HCl緩沖液中，對(duì)起始緩沖液透析，然后取出，離心，離心條件為10000g，30min，取上清；采用陰離子交換層析分離蛇毒，所使用陰離子交換層析介質(zhì)為本領(lǐng)域所公知的各種層析介質(zhì)，根據(jù)其骨架的不同可分為聚苯乙烯型、纖維素型、葡聚糖型、瓊脂糖型、球狀纖維素型等，如Q Sepharose系列、DEAE Sepharose系列、DEAE Sephacel系列、QAE Sephadex系列、DEAE Sephadex系列、SOURCE Q系列等，其中最優(yōu)的使用SOURCE 30Q作為層析介質(zhì)進(jìn)行分離，層析條件根據(jù)每種層析介質(zhì)的使用說(shuō)明和要分離的蛇毒量做相應(yīng)的調(diào)整，方法為本領(lǐng)域所公知。
上述蛇毒提取物的來(lái)源包括但不限于蝮蛇毒(Agkistrodon halys venom)、烙鐵頭蛇毒(Trimeresurus mucroquamatus venom)、蝰蛇毒(Vipera russelli venom)、尖吻蝮蛇毒(Agkistrodon acutus venom)、眼鏡蛇毒(Naja naja atra venom)、眼鏡王蛇毒(Ophiophagus hannah venom)、金環(huán)蛇毒(Bungarus multicinctus venom)、竹葉青蛇毒(Trimeresurus stejnegeri venom)、白眉蝮蛇毒(Baimei pallas pit viper)。
本發(fā)明還公開了該蛇毒提取物的制備方法，可以是從不同種屬的蛇毒中提取，也可以是用基因工程手段制備的這些重組的蛇毒有效組分。
本發(fā)明制備預(yù)防和治療膿毒癥蛇毒有效組分的方法是采用本領(lǐng)域公知的蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)，如離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)、離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀等技術(shù)對(duì)蛇毒進(jìn)行分離純化，然后對(duì)蛇毒分離組分進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間和水解活化C蛋白特異顯色肽底物能力的測(cè)定，同時(shí)具有二者活性的組分即為預(yù)防和治療膿毒癥蛇毒有效組分。
這些蛇毒提取物的提取方法如下(1)蛇毒的分離純化，選自離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)或離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀技術(shù)中的一種。
(2)將收集液進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定和水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，取同時(shí)具有二者活性的組分。
其中離子交換層析技術(shù)的具體步驟如下蛇毒溶于起始緩沖液即Tris-HCl緩沖液中，2-25℃透析3-24小時(shí)，然后取出，2～25℃離心，離心條件為3000～10000g，時(shí)間為5～60min，取上清；最優(yōu)的使用SOURCE 30Q作為層析介質(zhì)進(jìn)行分離0.1～10克蛇毒，陰離子層析的柱體積為6～600ml，流速為0.5～50ml/min；用起始緩沖液平衡3～8倍柱體積；上樣量為2～200ml；先用1～5倍柱體積的起始緩沖液洗脫未吸附部分，再使用梯度洗脫，梯度液組成為起始緩沖液(A)，起始緩沖液+0.2mol/L NaCl緩沖液(B)，B從0～100％，洗脫20倍CV；取既能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物中的收集液。
采用SOURCE 30Q陰離子交換層析介質(zhì)對(duì)蝮蛇毒進(jìn)行分離，得到了6個(gè)組分，分別對(duì)陰離子交換層析得到的6個(gè)蝮蛇毒組分峰進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定，結(jié)果表明峰5組分具有明顯的延長(zhǎng)活化部分凝血活酶時(shí)間，其中一管收集液可比對(duì)照的時(shí)間延長(zhǎng)10倍，而其它5個(gè)組分峰僅有較弱的延長(zhǎng)活化部分凝血活酶時(shí)間的能力。
分別對(duì)陰離子交換層析得到的6個(gè)蝮蛇毒組分峰進(jìn)行水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，結(jié)果表明僅有峰5組分具有明顯的水解L PefachromePCa3297的能力。
蝮蛇毒有效組分對(duì)膿毒癥實(shí)驗(yàn)小鼠的作用，小鼠注射脂多糖24h后，開始觀察到有小鼠的死亡，繼續(xù)觀察至72h。各組小鼠的死亡情況見表4。從表中可看出蝮蛇毒有效組分能顯著降低膿毒癥小鼠的死亡率，低劑量組降低15％，中劑量組降低55％，高劑量組降低65％。
用烙鐵頭蛇毒、白眉蝮蛇毒、眼鏡王蛇毒、尖吻蝮蛇毒、眼鏡蛇毒、眼鏡王蛇毒、金環(huán)蛇毒、蝰蛇毒、竹葉青蛇毒替換蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的竹葉青蛇毒有效組分。
本發(fā)明公開的蛇毒提取物，同活化C蛋白功能有相似用途，可用于制備預(yù)防和治療膿毒癥的藥物。
本發(fā)明中蛇毒提取物的制備方法同活化C蛋白相比，具有來(lái)源方便，生產(chǎn)簡(jiǎn)單易行，成本低等優(yōu)點(diǎn)。


圖1為蝮蛇毒的陰離子交換層析圖譜。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1陰離子交換層析分離蝮蛇毒稱取0.5g蝮蛇毒，溶于10ml 0.05mol/L，pH 7.6的Tris-HCl緩沖液(起始緩沖液)中，對(duì)該緩沖液透析過(guò)夜(4℃)，然后取出，離心(4℃，10000g，30min)，棄沉淀，收集上清，進(jìn)行陰離子交換層析，層析條件如下層析介質(zhì)SOURCE 30Q；柱體積30ml；流速5ml/min；柱平衡用起始緩沖液平衡5倍柱體積；上樣量10ml；洗脫先用3倍柱體積的起始緩沖液洗脫未吸附部分，再使用梯度洗脫，梯度液組成為起始緩沖液(A)，起始緩沖液+0.2mol/L NaCl緩沖液(B)，B從0～100％，洗脫20倍CV；收集8.0ml/管。
采用SOURCE 30Q陰離子交換層析介質(zhì)對(duì)蝮蛇毒進(jìn)行分離，得到了6個(gè)組分，具體結(jié)果見附圖1和表1。
表1陰離子交換層析各組分峰的積分結(jié)果

實(shí)施例2延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定取凝血活酶(白陶土-腦磷脂)混懸液0.1ml，加正常人混合新鮮血漿0.1ml，對(duì)照組加生理鹽水0.1ml，混勻，37℃水浴孵育5min，加入0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml，立即開動(dòng)秒表，記錄凝血時(shí)間，試驗(yàn)組除用蝮蛇毒分離液代替生理鹽水外，其它與對(duì)照組相同。[參見，王鴻利.血栓與止血檢驗(yàn)技術(shù)，第一版[M]，上海上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1992，66-67.]分別對(duì)陰離子交換層析得到的6個(gè)蝮蛇毒組分峰進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明峰5組分具有明顯的延長(zhǎng)活化部分凝血活酶時(shí)間，其中一管收集液可比對(duì)照的時(shí)間延長(zhǎng)10倍，而其它5個(gè)組分峰僅有較弱的延長(zhǎng)活化部分凝血活酶時(shí)間的能力。
實(shí)施例3水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定取4μmol/L PefachromePCa3297(活化C蛋白特異顯色肽，購(gòu)自瑞典Pentapharm公司)0.2ml，加pH 8.4的0.05mol/L Tris-咪唑緩沖液1.65ml，再加入不同的蝮蛇毒分離液0.2ml，混勻，在405nm測(cè)吸收值的變化(測(cè)定3min)。參比溶液為用0.2ml水溶液替換蛇毒溶液的上述溶液組成。[參見，Martinoli JL，Stocker K.Fast functionalprotein C assay using Protac，a novel protein C activator[J].Thromb Res，1986，43(3)253～264.]
分別對(duì)陰離子交換層析得到的6個(gè)蝮蛇毒組分峰進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明僅有峰5組分具有明顯的水解L PefachromePCa3297的能力。
實(shí)施例2、3的試驗(yàn)結(jié)果表明峰5組分(以下稱為蝮蛇毒有效組分)具有同活化C蛋白功能相似的作用。
實(shí)施例4蝮蛇毒有效組分對(duì)膿毒癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用(1)脂多糖對(duì)小鼠LD100的測(cè)定取18～22g小鼠30只，每10只分為一組，雌雄各半，分別以2mg/kg bwt(體重)、10mg/kg bwt和50mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射脂多糖(E.coli 055B5，購(gòu)自Sigma公司)溶液，注射速度為0.5ml/min，在72h內(nèi)觀察各組小鼠的死亡情況。
小鼠被注射脂多糖24h后，開始觀察到有小鼠的死亡，繼續(xù)觀察至72h。具體各組小鼠的死亡情況見表3。從表中可看出小鼠對(duì)脂多糖的敏感性較低，只有當(dāng)脂多糖的劑量達(dá)到50mg/kg bwt時(shí)，其致死率才達(dá)到100％，因此確定本試驗(yàn)所測(cè)定的脂多糖對(duì)小鼠LD100為50mg/kg bwt，該劑量約相當(dāng)于每只小鼠注射1.0mg的脂多糖。
表3LPS對(duì)小鼠LD100的測(cè)定結(jié)果

(3)蝮蛇毒有效組分對(duì)膿毒癥實(shí)驗(yàn)小鼠的作用取18～22g小鼠80只，每20只分為一組，雌雄各半，分成四組。第一組以50mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射脂多糖溶液；第二組先以2mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射0.4mg/ml的蝮蛇毒有效組分溶液，30min后再以50mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射2mg/ml的脂多糖溶液；第三組先以4mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射0.4mg/ml的蝮蛇毒有效組分溶液，30min后再以50mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射2mg/ml的脂多糖溶液；第四組先以8mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射0.4mg/ml的蝮蛇毒有效組分溶液，30min后再以50mg/kg bwt的劑量尾靜脈注射2mg/ml的脂多糖溶液注射速度均為0.5ml/min，在72h內(nèi)觀察各組小鼠的死亡情況，計(jì)算死亡率。
小鼠注射脂多糖24h后，開始觀察到有小鼠的死亡，繼續(xù)觀察至72h。各組小鼠的死亡情況見表4。從表中可看出蝮蛇毒有效組分能顯著降低膿毒癥小鼠的死亡率，低劑量組降低15％，中劑量組降低55％，高劑量組降低65％。
表4蝮蛇毒有效組分降低膿毒癥小鼠死亡率的試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)施例5在實(shí)施例4下“用蝮蛇毒有效組分對(duì)膿毒癥實(shí)驗(yàn)小鼠的作用”中以先注射脂多糖，再注射蝮蛇毒有效組分做替換，也得到了相類似的試驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)施例6用烙鐵頭蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的烙鐵頭蛇毒有效組分。
實(shí)施例7用白眉蝮蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的白眉蝮蛇毒有效組分。
實(shí)施例8用眼鏡王蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的眼鏡王蛇毒有效組分。
實(shí)施例9用尖吻蝮蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的尖吻蝮蛇毒有效組分。
實(shí)施例10用眼鏡蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的眼鏡蛇毒有效組分。
實(shí)施例11
用眼鏡王蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的眼鏡王蛇毒有效組分。
實(shí)施例12用金環(huán)蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的金環(huán)蛇毒有效組分。
實(shí)施例13用蝰蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的蝰蛇毒有效組分。
實(shí)施例14用竹葉青蛇毒替換實(shí)施例1-5中的蝮蛇毒，也得到了類似的具有預(yù)防和治療膿毒癥作用的竹葉青蛇毒有效組分。
權(quán)利要求
1.一種蛇毒提取物，其特征在于，該提取物在體外能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物，在體內(nèi)它能顯著降低膿毒癥試驗(yàn)動(dòng)物的死亡率。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛇毒提取物，其特征在于，所述及的提取物由如下方法制備(1)蛇毒的分離純化，選自離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)或離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀技術(shù)中的一種；(2)將收集液進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定和水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，取同時(shí)具有二者活性的組分。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蛇毒提取物，其特征在于，所述及的離子交換層析技術(shù)的具體步驟如下蛇毒溶于溶于起始pH為5～10的起始緩沖液緩沖液，2～25℃透析過(guò)夜，然后取出，離心，離心條件為，2～25℃，3000～10000g，時(shí)間為5～60min，取上清；陰離子層析介質(zhì)最優(yōu)的使用SOURCE 30Q，陰離子層析的柱體積為6～600ml，流速為0.5～50ml/min；用起始緩沖液平衡3～8倍柱體積；上樣量為2～200ml；先用1～5倍柱體積的起始緩沖液洗脫未吸附部分，再使用梯度洗脫，梯度液組成為起始緩沖液(A)，起始緩沖液+0.2mol/L NaCl緩沖液(B)，B從0～100％，洗脫20倍CV；取既能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物中的收集液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一所述的蛇毒提取物，其特征在于，所述及的蛇毒選自蝮蛇毒、烙鐵頭蛇毒、蝰蛇毒、尖吻蝮蛇毒、眼鏡蛇毒、眼鏡王蛇毒、金環(huán)蛇毒、竹葉青蛇毒或白眉蝮蛇毒。
5.一種蛇毒提取物的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟(1)蛇毒的分離純化，選自離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)或離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀技術(shù)中的一種。(2)將收集液進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定和水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，取同時(shí)具有二者活性的組分。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的蛇毒提取物，其特征在于，所述及的離子交換層析技術(shù)的具體步驟如下蛇毒溶于溶于起始pH為5～10的起始緩沖液緩沖液，2～25℃透析過(guò)夜，然后取出，離心，離心條件為，2～25℃，3000～10000g，時(shí)間為5～60min，取上清；陰離子層析介質(zhì)最優(yōu)的使用SOURCE 30Q，陰離子層析的柱體積為6～600ml，流速為0.5～50ml/min；用起始緩沖液平衡3～8倍柱體積；上樣量為2～200ml；先用1～5倍柱體積的起始緩沖液洗脫未吸附部分，再使用梯度洗脫，梯度液組成為起始緩沖液(A)，起始緩沖液+0.2mol/L NaCl緩沖液(B)，B從0～100％，洗脫20倍CV；取既能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物中的收集液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一所述的蛇毒提取物在制備預(yù)防和治療膿毒癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種同活化C蛋白功能相似的蛇毒提取物，該提取物在體外既能顯著延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間又能水解活化C蛋白特異顯色肽底物，在體內(nèi)它能顯著降低膿毒癥試驗(yàn)動(dòng)物的死亡率。本發(fā)明還公開了該提取物的制備方法，蛇毒的分離純化，選自離子交換層析技術(shù)、凝膠過(guò)濾層析技術(shù)、親和層析技術(shù)、疏水層析技術(shù)或離心、超濾、鹽析、有機(jī)溶劑沉淀技術(shù)中的一種，將收集液進(jìn)行延長(zhǎng)人血漿活化部分凝血活酶時(shí)間的測(cè)定和水解活化C蛋白特異顯色肽能力的測(cè)定，取同時(shí)具有二者活性的組分。該蛇毒提取物可用于制備預(yù)防和治療膿毒癥的藥物，同活化C蛋白相比，具有來(lái)源方便，生產(chǎn)簡(jiǎn)單易行，成本低等優(yōu)點(diǎn)，有非常重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。
文檔編號(hào)A61P17/00GK1846713SQ20051002505
公開日2006年10月18日 申請(qǐng)日期2005年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月13日
發(fā)明者馮軍, 趙文杰, 朱寶泉 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院