專利名稱：黃連中的單體成分藥根堿在制備促胃動(dòng)力藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及中藥黃連中的單體成分藥根堿在制備促胃動(dòng)力藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
胃平滑肌收縮功能的下降和膜去極化能力減弱，在臨床上表現(xiàn)為胃排空不足，能導(dǎo)致胃腸運(yùn)動(dòng)性疾病的發(fā)生，這些疾病飲用胃食道反流病、功能性消化不良、胃輕癱、假性腸梗阻、腸胃激綜合征及慢性便秘等。雖然，這些疾病是功能性或器質(zhì)性的原因，但應(yīng)用促胃腸動(dòng)力藥恢復(fù)工增強(qiáng)已減弱的胃腸運(yùn)動(dòng)功能是這類疾病治療的主要措施。因此，促胃腸動(dòng)力藥的研究已成為當(dāng)今世界醫(yī)學(xué)研究的重要課題之一。
最近，本發(fā)明人對(duì)黃連影響豚鼠胃平滑肌環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)黃連總生物堿在小劑量時(shí)，能增加環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅；在大劑量時(shí)，能夠降低環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅，說明上述反應(yīng)是黃連中不同的藥效物質(zhì)在起作用。又進(jìn)一步觀察了黃連中3種單體成分小檗堿、巴馬丁堿和藥根堿(Jatrorrhizine)對(duì)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的作用，發(fā)現(xiàn)小檗堿和巴馬丁能夠劑量依賴性地抑制環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅；而藥根堿能夠劑量依賴性地增加環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅，說明藥根堿具有促胃動(dòng)力的作用。
目前，有關(guān)藥根堿的藥效作用和機(jī)制的研究，報(bào)道甚少，主要的作用為抗菌、抗氧化和抗自由基損傷，抗突變等。迄今為止，有關(guān)藥根堿促進(jìn)胃腸動(dòng)力作用的研究未見報(bào)道。藥根堿的結(jié)構(gòu)式如下

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于通過研究黃連中的單體成分，設(shè)計(jì)藥根堿的促胃動(dòng)力作用研究。
為解決上述問題，本發(fā)明人設(shè)計(jì)了具體的實(shí)驗(yàn)方案材料與方法1)豚鼠胃平滑肌分離方法豚鼠體重300-400g，雄性，經(jīng)頭部擊昏后，打開腹腔，取出胃體部或胃竇部，置入Krebs液(mMNaCl 118，NaHCO3 25，KCl 4.7，KH2PO4 1.2，CaCl2 2.5，MgSO2 1.2，葡萄糖11，pH＝7.35-7.45)中，用精細(xì)鑷子將粘膜層仔細(xì)分離干凈，完整地保留肌層，沿環(huán)行肌方向剪成約2×8mm的肌條，固定在含有10ml的充灌5％CO2+95％O2混合氣體、溫度維持在37℃的Krebs液的浴槽中。
2)胃平滑肌張力測(cè)定胃平滑肌肌條的底端固定在垂直浴槽內(nèi)兩片鉑金板的中間，上端連接MLT 0202/D型張力換能器(ADInstrument)，換能器的輸出通過PowerLab/4SP生物信號(hào)處理系統(tǒng)處理和通過Chart v 3.4.6(PowerLab)軟件記錄、儲(chǔ)存和分析。浴槽中內(nèi)兩片鉑金板連接SEN-3301型電子刺激器(Nihon Kohden，Japan)。肌條的起始張力調(diào)節(jié)到0.5g，平衡時(shí)間不少于60分鐘，每15分鐘，換液1次，防止代謝產(chǎn)物的累積。平衡到自發(fā)節(jié)律不再變化時(shí)，開始平滑肌張力測(cè)定的實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果1.黃連單體成分藥根堿對(duì)豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律振幅的影響當(dāng)豚鼠胃平滑肌標(biāo)本在浴槽內(nèi)穩(wěn)定60分鐘后，開始實(shí)驗(yàn)。向浴槽內(nèi)加入0.3、1、3、10、30、100、300μM不同濃度的黃連單體成分，觀察自發(fā)節(jié)律的變化。見圖1、2、3。
表1.黃連中不同生物堿引起環(huán)行肌50％收縮振幅增加所需濃度(EC50)或抑制所需濃度(IC50)(Mean±SD)受試藥物 n EC50(μM)IC50(μM)藥根堿 4 44.7±0.9 -巴馬丁 4 - -小檗堿 4 - 64.3±13.8結(jié)果表明黃連中3種單體成分藥根堿、巴馬丁、小檗堿對(duì)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的作用是不同的，小檗堿能夠劑量依賴性地抑制環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅。與此相反，藥根堿能夠劑量依賴性地增強(qiáng)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅。巴馬丁未表現(xiàn)出明顯的增強(qiáng)或抑制作用。從表1的EC50和IC50值來看，藥根堿引起環(huán)行肌50％收縮振幅增加所需濃度為44.7±0.9μM，小檗堿引起環(huán)行肌50％收縮振幅減弱所需濃度為64.3±13.8μM，在巴馬丁，未能測(cè)出其EC50和IC50值。當(dāng)藥根堿濃度為300μM時(shí)，胃環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅提高約100％，說明藥根堿具有很好的促胃動(dòng)力的效應(yīng)，是臨床用于治療胃食道反流病、功能性消化不良、胃輕癱、假性腸梗阻、腸易激綜合征及慢性便秘等疾病的候選藥物之一。
2.黃連單體成分藥根堿對(duì)碳酰膽堿引起的豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律振幅的抑制作用當(dāng)豚鼠胃平滑肌標(biāo)本在浴槽內(nèi)穩(wěn)定60分鐘后，開始實(shí)驗(yàn)。首先應(yīng)用10μM碳酰膽堿造成胃平滑肌張力增強(qiáng)，當(dāng)碳酰膽堿刺激的豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律的振幅達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定的水平，向浴槽內(nèi)加入0.3、1、3、10、30、100、300μM不同濃度的黃連單體成分，觀察它們對(duì)豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律振幅的抑制作用(圖4)。
表2.黃連中不同生物堿對(duì)由1μM碳酰膽堿引起的豚鼠胃環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律增強(qiáng)后，抑制環(huán)行肌50％收縮振幅所需濃度(IC50)變化(Mean±SD)受試藥物n IC50(μM)藥根堿 5 43.7±10.8巴馬丁 5 18.0±9.8小檗堿 5 33.4±0.9結(jié)果表明黃連中3種單體成分小檗堿、巴馬丁和藥根堿對(duì)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律振幅的抑制作用的強(qiáng)度是不同的，表2列出了這些藥物在通過1μM碳酰膽堿所造成的豚鼠胃平滑肌環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律增強(qiáng)穩(wěn)定后，引起50％收縮振幅降低所需濃度(IC50)。以上結(jié)果證明黃連中不同的主要單體成分均能抑制由碳酰膽堿造成胃平滑肌張力增強(qiáng)的作用。為什么在生理?xiàng)l件下藥根堿能夠增強(qiáng)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律振幅，而在膽堿能受體激活的情況下，能夠抑制環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律的振幅，說明藥根堿屬于部分激動(dòng)劑。
結(jié)論在離體器官水平的研究證明藥根堿具有促胃動(dòng)力的作用。由此可進(jìn)一步研究設(shè)計(jì)藥根堿用于制備促胃動(dòng)力的藥物組合物。
用于治療胃食道反流病、功能性消化不良、胃輕癱、假性腸梗阻、腸易激綜合征及慢性便秘等疾病。在臨床上有廣闊的應(yīng)用前景。


圖1100μM濃度的藥根堿對(duì)豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律振幅的影響。
箭頭(↓)表示加入100μM濃度的藥根堿。
圖2300μM濃度的藥根堿對(duì)豚鼠胃平滑肌自發(fā)節(jié)律振幅的影響。
箭頭(↓)分別表示加入0.3、1.0、3.0、10、30、100、300μM濃度的藥根堿。
圖3黃連中不同生物堿對(duì)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律影響的量一效曲線。
黃連中不同生物堿藥根堿[(●)、小檗堿(▲)和巴馬丁(■)]對(duì)環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律影響的量-效曲線。
圖4藥根堿、小檗堿和巴馬丁對(duì)由碳酰膽堿引起的豚鼠胃平滑肌環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律增強(qiáng)的抑制作用。藥根堿(▲)、小檗堿(●)和巴馬丁(■)對(duì)由碳酰膽堿引起的豚鼠胃平滑肌環(huán)行肌自發(fā)節(jié)律增強(qiáng)的抑制作用。
權(quán)利要求
1.一種黃連中單體成分藥根堿在制備促胃動(dòng)力藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了黃連中的單體成分藥根堿在制備促胃動(dòng)力藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過藥根堿對(duì)豚鼠胃平滑肌的作用，證實(shí)具有很好的促胃動(dòng)力的效應(yīng)，能用于制備促胃動(dòng)力藥物。在臨床上用于治療胃食道反流病功能性消化不良等，有較好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A61P1/14GK1732932SQ200510029129
公開日2006年2月15日 申請(qǐng)日期2005年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月26日
發(fā)明者吳大正, 周吉燕, 胡之璧 申請(qǐng)人:上海中醫(yī)藥大學(xué)