專利名稱：一種去抗原異種骨的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種制備用于制備骨外科處理中的移植填充材料和接骨固定物材料的方法。同時本發(fā)明還進一步涉及用這樣的材料制備骨移植填充材料和接骨固定物的方法以及所制得的骨移植物和骨固定物。
背景技術：
骨科手術中用到的材料主要是兩類。
一類是固定物材料。除很少部分為非金屬材料外，絕大部分固定物為金屬材料。金屬材料類如螺釘、圓針、髓內釘、接骨板、Cage等，仍占據(jù)著國內外極大部分市場。它們雖有較高的力學強度和抗疲勞性能，可滿足骨科手術固定的需要，但它們也可能存在植入物蝕損、金屬過敏反應及植入材料致瘤等合并癥；一般均需要二次手術取出；尤其在生物力學上，由于金屬材料與人體骨骼的彈性模量差距太大，應力遮擋作用太強，在內固定物(鋼板)平面，易發(fā)生金屬材料下方的骨皮質廢用性萎縮和松變，而致再骨折；在螺絲釘平面，易發(fā)生疲勞性骨折或螺釘折斷；在鋼板兩端，也易發(fā)生骨折。Cage有移位、下沉、不融合、感染和神經根刺激等并發(fā)癥發(fā)生。非金屬材料類固定物有芬蘭由SR-PGA和SR-PLLA材料制成的BIOFIX(百優(yōu))和我國由超高分子量PDLLA材料制成的DIKFIX(迪康)螺釘。它們都是一種高分子聚合物，常有局部積液反應和引起無菌性囊腫，不能二次消毒，價格昂貴。另外還有山西骨庫生產的同種骨植入材料，但是這種材料存在骨源困難和可能引起人類疾病傳播?；蚶米泽w骨，但這種方法損害了病人自體的健康骨骼。
另一類是移植填充材料，如Kiel骨(德)、Oswestry骨(美)及我國的金世植骨靈(RBX)。這些材料都只能用于“充填缺損”和“促進愈合”。
中國專利ZL 98112370.8公開了一種異種骨固定物的制備方法。它是采用合格的動物，在宰殺后6小時取其長骨，剝除骨膜，去除骨內蛋白質、脂肪等有機成分，初加工成長條、平板、半圓塊狀毛胚，清洗后置入75％酒精中。到此，已經制得了適于制造異種骨固定物的材料。然后，一周內機械加工成不同規(guī)格的螺釘、圓棒等固定物，潔凈后置于盛滿保養(yǎng)液的容器中密封，并用15KGY的Co60輻照滅菌。
上述發(fā)明提供的異種骨固定物經實驗表明其有足夠的力學強度和抗疲勞性能，與人體組織的相容性好，無毒，無致癌性與過敏反應，無免疫排斥反應。
目前，由于瘋牛病的出現(xiàn)，世界各國對動物制品，尤其是以牛為來源的制品，檢疫控制很嚴格。

發(fā)明內容
本發(fā)明是在申請人上述專利ZL 98112370.8基礎上的進一步改進。
本發(fā)明的技術方案是在通常的檢疫項目之外，還增加瘋牛病病毒檢測。
由于瘋牛病病毒檢測需要一定的時間，因此原來技術方案內6小時取骨難于實現(xiàn)，經過研究發(fā)現(xiàn)，在冷藏條件下保存，可延長取骨時間，對產品質量均無影響。
原技術方案中，采用75％的酒精浸泡。經研究發(fā)現(xiàn)，采用不低于50％至小于75％濃度的酒精都可以實現(xiàn)發(fā)明目的。且力學強度略有提高，如75％酒精浸泡時的抗拉、抗壓、抗折、抗扭極限荷載分別為139.9MPa、178.42MPa、22.2MPa、117.77MPa；而50％酒精浸泡時的抗拉、抗壓、抗折、抗扭極限荷載則為142.8MPa、181.77MPa、167.4MPa、50MPa。由于用于浸泡的酒精用量大，因而采用低濃度的酒精能大幅度降低生產成本。
本發(fā)明進一步提供用上述制備的去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物的方法，具體的步驟是(1)取按上述方法，于四星期以內制備去抗原異種骨，加工成所需形狀的固定物或移植物；(2)用水清洗后，在無菌條件下用脫脂液脫脂；(3)脫脂后再用水清洗，并在有生理鹽水或水的環(huán)境中單個保藏；密封后用Co60輻照滅菌，常溫下儲存?zhèn)溆谩?br> 進一步的改進是加工成型的產品在2小時內先用水至少清洗2次，清洗后的產品通過傳遞窗，更換潔凈容器進入無菌間，然后用超聲波加水清洗2次，每次至少持續(xù)5分鐘。
第2步中脫脂的時間不小于24小時。
對上述第3步中在脫脂后，所說的清洗是超聲波加水清洗2次每次至少持續(xù)5分鐘。
脫脂液可以是通用的氯仿、丙酮、三氯甲烷、甲醇等。Co60輻照滅菌可按照國家標準進行。
根據(jù)中國專利ZL98112370.8，所制備的只是用于骨科手術的固定物。本發(fā)明則公開了用所制備的去抗原異種骨還可以用于制備骨科手術用移植物。移植物的形狀可以為顆粒狀，也可為粉末。
用本發(fā)明提供的方法可制備得到去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物，本發(fā)明提供的一種去抗原異種骨的制備方法，確保生產的產品無瘋牛病病毒及其他疫病，生產成本較現(xiàn)有方法低。骨移植或骨固定物的制備方法更完善，產品質量更有保障。
具體實施例選擇1歲以上具有準宰證的“特等?！焙蜎]有四肢生理缺陷的“一等牛”為原料對象。屠宰方式(淋浴凈體、電麻致昏、刺殺放血、剝皮褪毛、開腔凈膛等)均按NY467-2001標準執(zhí)行。宰后立即取腦組織作病理學檢查和Western檢測，牛暫時放冷藏庫，結果陰性后才予取骨。取四肢骨時，去皮毛、肉、蹄和關節(jié)，留四肢長骨干。牛宰殺至取骨浸泡處理的時間應小于24小時。選擇新鮮光澤、無異常色斑、畸形和缺陷，無皮毛肌肉和污物黏附，無異常氣味的骨骼。將牛骨裝入盛有50％乙醇的塑料桶內。新鮮牛骨需去除骨膜、肌肉、松質骨，只保留皮質骨，處理要干凈、徹底。將預處理好的牛骨加工成長條、平板、圓塊狀毛胚。用50％乙醇溶液清洗干凈后，分類裝入盛有50％乙醇的不同容器中。
脫脂在無菌間進行。脫脂24小時后，再用超聲波以及水清洗2次。
產品在無菌間進行單包裝，塑料袋內盛保養(yǎng)液，密封后再加2層塑料袋包裝、密封。用Co60輻照滅菌后常溫下儲存?zhèn)溆谩?br> 去抗原異種骨的抗壓極限荷載為186.4～205.2MPa，抗折極限荷載154.7～179.8MPa，抗拉極限荷載117.1～139.1MPa，抗扭極限荷載53.5～55MPa。檢測方法為去抗原異種骨先后在上海同濟大學附屬甘泉醫(yī)院，大連醫(yī)科大學附屬四醫(yī)院，廣東藥學院附屬醫(yī)院，浙江省中醫(yī)院，中南大學湘雅二醫(yī)院，湖南中醫(yī)學院附屬一醫(yī)院，湖南省人民醫(yī)院，南華大學附屬一醫(yī)院，廣東石碣醫(yī)院，韶山市中醫(yī)院，益陽市中醫(yī)院，邵東市第二人民醫(yī)院、長沙市第四醫(yī)院，長沙市第七醫(yī)院，岳陽職業(yè)技術學院附屬醫(yī)院，衡陽市第一人民醫(yī)院，郴州鐵路醫(yī)院，張家界鐵路醫(yī)院等分布在5個省區(qū)的20多家醫(yī)院臨床應用共約400余例(其中用于移植15例)，經過多年隨訪，效果滿意病人全身情況良好，無因產品有菌而引起術后感染者；無植入后立即發(fā)生熱原反應者；無植入后發(fā)生急性全身毒性反應者；無植入后發(fā)生急性溶血者；無因產品而致癌、致畸者；切口無感染；按楊立民標準，骨折全部愈合，無延遲愈合、不愈合及畸形愈合。用于移植的15例患者觀察6～18月，骨融合，無假體松動，無骨溶解，無死骨形成。
權利要求
1.一種去抗原異種骨的制備方法，包括挑選檢疫合格的動物，取骨，去除骨上的骨膜、骨內的蛋白質脂肪等有機成分，初加工成長條、平板、或半圓塊狀毛胚，并置于酒精溶液中浸泡；其特征在于在通常的檢疫項目之外，還增加瘋牛病病毒檢測。
2.根據(jù)權利要求1所述的去抗原異種骨制備方法，其特征在于酒精溶液中乙醇的濃度為不低于50％至小于75％。
3.利用權利要求1或2所制得的去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物的方法，其特征在于(1)取于四星期以內制備的去抗原異種骨，加工成所需的固定物或移植物；(2)用水清洗后，在無菌條件下用脫脂液脫脂；(3)脫脂后再用水清洗，并在有生理鹽水或水的環(huán)境中單個保藏；(4)密封后用Co60輻照滅菌，常溫下儲存?zhèn)溆谩?br> 4.根據(jù)權利要求3所述的去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物的方法，其特征在于所說的加工成所需的固定物或移植物后，2小時內先用水至少清洗2次，清洗后的產品通過傳遞窗，更換潔凈容器進入無菌間，然后用超聲波加水清洗2次，每次至少持續(xù)5分鐘。
5.根據(jù)權利要求3所述的去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物的方法，其特征在于第(2)步中所說脫脂時間不小于24小時。
6.根據(jù)權利要求3所述的去抗原異種骨制備骨移植或骨固定物的方法，其特征在于第(3)步中所說的清洗是超聲波加水清洗2次，每次至少持續(xù)5分鐘。
7.去抗原異種骨移植物或骨固定物，其特征在于它是按權利要求3、4、5或6所述的方法制備的，其抗壓極限荷載為186.4～205.2MPa，抗折極限荷載154.7～179.8MPa，抗拉極限荷載117.1～139.1MPa，抗扭極限荷載53.5～55MPa。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備用于制備骨外科處理中的移植填充材料和接骨固定物材料的方法。同時本發(fā)明還進一步涉及用這樣的材料制備骨移植填充材料和接骨固定物的方法以及所制得的骨移植物和骨固定物。本發(fā)明的技術方案是在通常的檢疫項目之外，還增加瘋牛病病毒檢測。本發(fā)明提供的一種去抗原異種骨的制備方法，確保生產的產品無瘋牛病病毒及其他疫病，生產成本較現(xiàn)有方法低。骨移植或骨固定物的制備方法更完善，產品質量更有保障。
文檔編號A61B17/68GK1839773SQ20051003140
公開日2006年10月4日 申請日期2005年4月1日 優(yōu)先權日2005年4月1日
發(fā)明者祝天經 申請人:祝天經