專利名稱：一種主治子宮肌瘤的中成藥和制備、質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有中藥材為原料的醫(yī)藥制品及制備方法和產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法，具體是涉及一種治療婦科子宮肌瘤和盆腔炎性包塊疾病的中成藥。
背景技術(shù)：
子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊，是發(fā)病率較高的良性腫瘤，為婦科常見多發(fā)病，屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)“癥瘕”范疇。據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計(jì)報(bào)告，30歲以上婦女約25％有潛在子宮肌瘤。對(duì)此類疾病的治療，目前國(guó)內(nèi)外多采用手術(shù)治療或激素療法，但前者不適用于未婚和育齡婦女，后者副作用明顯，并發(fā)癥多。近年來(lái)，不少醫(yī)家采用中醫(yī)藥對(duì)本病作了探索性治療，不僅免除了手術(shù)之苦，而且毒副作用小，方法安全簡(jiǎn)便，取得了可喜的成績(jī)。
但通過文獻(xiàn)查閱和專利檢索，發(fā)現(xiàn)對(duì)本病的治療多側(cè)重于臨床療效的觀察，或單、驗(yàn)、經(jīng)方的臨床驗(yàn)證，并沒有形成一種或多種臨床療效較好的藥物，且由于各地病例選擇、成功率統(tǒng)計(jì)和療效判定標(biāo)準(zhǔn)不一致，缺乏優(yōu)選和可比性。因此，運(yùn)用中醫(yī)藥治療本病的基礎(chǔ)研究和理論上的進(jìn)一步探討少有為之，且針對(duì)性強(qiáng)、療效較為理想的臨床新藥，迄今尚不多見。目前，《中國(guó)藥典》2005版一部所公開的桂枝茯苓膠囊(丸)，由桂枝、茯苓、牡丹皮、桃仁、白芍(赤芍)組成，臨床上應(yīng)用于治療婦科子宮肌瘤和慢性盆腔炎包塊。其處方源于《金匱要略》經(jīng)典方，活血化瘀藥相對(duì)較少，活血化瘀之功較弱。據(jù)文獻(xiàn)《漢英常用中醫(yī)處方手冊(cè)》(歐明主編，廣東科技出版社，1991，407)中所述桂枝茯苓丸、抵當(dāng)湯、下瘀血湯均有活血祛瘀之效，均可用于淤血阻滯所致的腹痛諸癥，但其效力有強(qiáng)弱之不同，其中抵當(dāng)湯作用最為峻猛，次為下瘀血湯，再次為桂枝茯苓丸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種組方合理、毒副作用小，專門用于治療氣滯血瘀所致的子宮肌瘤和盆腔炎性包塊，便于服用和攜帶方便的中成藥及提供該中成藥的制備方法和質(zhì)量控制方法。
為達(dá)到本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)施本發(fā)明所說(shuō)的主治子宮肌瘤、盆腔炎性包塊的中成藥，它是由下述重量百分比的中藥材和方法制成的口服制劑，處方丹參12.57～18.85％三七4.18～6.28％三棱6.67～9.03％莪術(shù)4.45～6.01％ 去皮桃仁5.34～7.22％當(dāng)歸4.45～6.01％鱉甲6.07～9.03％ 海藻11.13～15.05％ 鹽炒杜仲4.71～5.75％炒白術(shù)7.06～8.64％半枝蓮14.14～17.28％桂枝4.24～5.18％將三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲四味藥材分別粉碎成細(xì)粉；當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝三味藥材提取揮發(fā)油；丹參、鹽炒杜仲二味藥材用60～95％的乙醇溶液提取、提取液濃縮成浸膏A；將當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝提取揮發(fā)油后的藥渣和丹參、鹽炒杜仲乙醇溶液提取后的藥渣加去皮桃仁、海藻、半枝蓮三味藥材一起用水提取，取水提液濃縮成浸膏B；合并浸膏A和浸膏B繼續(xù)濃縮成稠膏C，加入三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲的細(xì)粉和當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝的揮發(fā)油混勻成藥粉D后，按常規(guī)中藥制劑工藝制成口服制劑，用高效液相色譜法或薄層色譜掃描法測(cè)定藥粉D中含三七以人參皂苷Rg1計(jì)，不得少于1.50mg/g。
本發(fā)明的中成藥由12味中藥材制備而成，組方中丹參、三七活血化瘀，消癥止痛“治一切血，補(bǔ)一切勞，破惡血，養(yǎng)新血及主癥瘕”?！侗静輩R言》指出“丹參善治血分，去滯生新，一物而有四物之功，補(bǔ)血生血功過歸地，調(diào)經(jīng)斂血力堪芍藥，逐瘀生新性倍芎蓉”；三七“和營(yíng)止血，通脈行瘀，行瘀血而斂新血”，具有“止血而不留瘀”之特點(diǎn)。二藥合用，祛瘀生新，功大力宏，故為君藥。三棱、莪術(shù)，破血逐瘀，行氣止痛，張錫純尤為推崇，指出“三棱、莪術(shù)為化瘀血之要藥，以治女子癥瘕，月經(jīng)不通，性非猛烈而建功甚速”。又說(shuō)“若論消磨癥瘕，十倍香附亦不及三棱、莪術(shù)”。桃仁“苦以泄滯血，甘以生新血”，善攻日久之蓄血，破堅(jiān)下血閉；當(dāng)歸，補(bǔ)血、養(yǎng)血潤(rùn)燥，使瘀祛而不傷陰血。鱉甲、海藻，軟堅(jiān)散結(jié)，養(yǎng)陰清熱。與君藥相伍，既可促使瘀血排除、消散，又可牽制活血化瘀藥物的溫燥之性。且鱉甲攻堅(jiān)又不損氣“陰陽(yáng)上下有痞滯不除者，皆宜用之”。六藥合用，共助君藥?kù)铕鲅?、生新血，消癥瘕，共為臣。炒白術(shù)，健脾益氣，調(diào)中和胃而消積，以資后天氣血生化之源；杜仲，炒炭后補(bǔ)腎強(qiáng)腰而固沖，以固先天之本。杜仲、白術(shù)一固先天之本，一資后天之源，共協(xié)君藥?kù)铕錾?，調(diào)經(jīng)止漏，使癥消瘀祛而不傷正。半枝蓮，清熱解毒，抗癌消腫瘤，共為佐藥。桂枝，溫經(jīng)通脈而和營(yíng)血，與方中桃仁同伍，既可通脈和營(yíng)又可加強(qiáng)破血行瘀之力，且可帥諸藥以達(dá)病所，故為使藥?？v觀全方，師古法而不泥古方，攻補(bǔ)兼施，活化并用，祛瘀生新而消癥，諸藥合用，共圖活血化瘀，軟堅(jiān)散結(jié)之功效。
本發(fā)明所說(shuō)的中成藥最佳是由下述重量百分比的中藥材制成處方丹參15.71％三七5.23％三棱7.85％莪術(shù)5.23％ 去皮桃仁6.28％當(dāng)歸5.23％鱉甲7.85％ 海藻13.09％ 鹽炒杜仲5.23％炒白術(shù)7.85％ 半枝蓮15.71％ 桂枝4.71％。
為了服用和攜帶方便，所說(shuō)的口服制劑可以是制成片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等。
為達(dá)到本發(fā)明的另一個(gè)目的，提供一種主治子宮肌瘤、盆腔炎性包塊的中成藥的制備方法如下(1)按處方量稱取三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲分別粉碎成細(xì)粉，過篩，備用；(2)按處方量稱取當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油備用；(3)按處方量稱丹參、鹽炒杜仲用60～95％的乙醇溶液提取、過濾、提取液濃縮成在70～80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.05～1.25的浸膏A，備用，藥渣另存；(4)將當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝提取揮發(fā)油后的藥渣和丹參、鹽炒杜仲乙醇溶液提取后的藥渣加去皮桃仁、海藻、半枝蓮一起用水煎煮提取1～3次，合并水提液，濃縮成浸膏B，合并浸膏A和浸膏B繼續(xù)濃縮成在70～80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.15～1.30的稠膏C，(5)稠膏C加三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲的細(xì)粉混勻、干燥，粉碎，再加入當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝的揮發(fā)油，混勻成藥粉D，然后可添加適量的藥用輔料，按常規(guī)中藥制劑工藝制成口服制劑，按常規(guī)中藥制劑制成口服制劑。
取上述加入揮發(fā)油后的藥粉D，直接填充膠囊，即得膠囊劑；取上述加入揮發(fā)油后的藥粉D，加入適量的潤(rùn)滑劑等藥用輔料，直接壓片，為了延長(zhǎng)保質(zhì)期，素片可再包衣，即得包衣片。
取上述加入揮發(fā)油后的藥粉D，加入藥劑學(xué)上允許的輔料，制粒，過篩，即得顆粒劑。
取上述加入揮發(fā)油后的藥粉D，以水和/或蜂蜜作為黏合劑，制成丸劑，或可繼續(xù)包衣得到。
也可以采用上述制得的稠膏C加三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲的細(xì)粉，混勻后，添加適量的藥用輔料，制粒，再加入當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝的揮發(fā)油，制成顆粒劑，或壓制成片劑。
為達(dá)到本發(fā)明的另一目的，所提供的一種主治子宮肌瘤的中成藥的質(zhì)量控制方法是(1)用高效液相色譜法測(cè)定藥粉D中含人參皂苷Rg1的含量；2)用薄層色譜掃描法測(cè)定藥粉D中含人參皂苷Rg1的含量。
為了檢查產(chǎn)品中有否采用藥材當(dāng)歸、丹參、三七、莪術(shù)來(lái)制備，還可以用(1)薄層色譜法試驗(yàn)，硅膠G作薄層板，正己烷∶醋酸乙酯體積比為9∶1的混合溶液作展開劑，置紫外光燈365nm波長(zhǎng)下檢視，與當(dāng)歸對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)；(2)用薄層色譜法試驗(yàn)，以丹參酮IIA為對(duì)照品，硅膠G作薄層板，以苯∶醋酸乙酯體積比為19∶1的混合溶液作展開劑，在色譜相應(yīng)的位置上，顯相同暗紅色的斑點(diǎn)；(3)用薄層色譜法試驗(yàn)，以人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1為對(duì)照品，500μm厚的硅膠G作薄層板，以氯仿∶甲醇∶水體積比為13∶7∶2的混合溶液作展開劑，噴以10％硫酸乙醇溶液顯色，在色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(4)用薄層色譜法試驗(yàn)，以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G作薄層板，以氯仿∶乙醚∶甲酸的體積比為9∶1∶0.1的混合溶液作展開劑，噴以5％香草醛濃硫酸溶液顯色，與廣西莪術(shù)藥材在色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
所述的高效液相色譜法測(cè)定藥粉D中含三七以人參皂苷含量，在具體操作時(shí)可以采用如下方法色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈∶4％甲醇溶液體積比為18∶82的溶液作流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，柱溫為35℃，理論塔板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。
對(duì)照品溶液的制備取取人參皂苷Rg1對(duì)照品加流動(dòng)相制成每1ml含人參皂苷Rg10.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取藥粉D 4g，置具塞的錐形瓶中，加入水飽和正丁醇50ml，稱定重量，密塞，放置過夜，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用水飽和的正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，置分液漏斗中，用氨試液洗滌，棄去氨試液，正丁醇層蒸干，殘?jiān)芗尤?0ml的水，稱定重量，超聲處理約5分鐘，使殘?jiān)稚?，再稱定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置10ml容量瓶中，并加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得。
測(cè)定法分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
所述薄層色譜掃描法具體的操作方法如下照薄層色譜掃描法(中國(guó)藥典2005版一部附錄VIB)試驗(yàn)。
供試品溶液的制備取藥粉D4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇50ml，稱定重量，超聲處理再稱定重量，加水飽和正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，用氨試液洗滌，取正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液；對(duì)照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；測(cè)定方法精密吸取供試品溶液1μl，對(duì)照品溶液1μl、5μl，分別交叉點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶水體積比為13∶7∶2的溶液，10℃以下放置12小時(shí)的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，固定。照薄層色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)λS＝525nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。
為證明本發(fā)明所提供的產(chǎn)品可用于治療氣滯血瘀所致的子宮肌瘤和盆腔炎性包塊，用本發(fā)明所提供的產(chǎn)品進(jìn)行主要藥效學(xué)研究和毒理試驗(yàn)，結(jié)果表明本品具有對(duì)抗血清雌激素和孕酮水平作用，對(duì)雌激素誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤樣增生有顯著的抑制作用；對(duì)血瘀證模型動(dòng)物的微循環(huán)和血液流變有顯著的改善作用；對(duì)大鼠離體子宮平滑肌收縮幅度無(wú)明顯影響，而對(duì)于收縮頻率和子宮活動(dòng)力有顯著抑制作用(P＜0.05和0.01)；可顯著縮短小鼠斷尾出血時(shí)間，而對(duì)凝血時(shí)間無(wú)顯著影響；對(duì)二甲苯所致小鼠炎癥、大鼠子宮內(nèi)異物炎癥和大鼠棉球肉芽腫有明顯的抑制作用。
一、抗子宮平滑肌瘤樣增生作用試驗(yàn)(一)動(dòng)物與分組選用雌性成年未孕豚鼠60只，體重350-400g，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，造模組，桂枝茯苓丸組(GZFLW組)，試驗(yàn)樣品小劑量組(DBJN小劑量)、試驗(yàn)樣品大劑量組(DBJN大劑量)，每組12只。
(二)藥物與試劑苯甲酸雌二醇注射液(1mg/ml)；黃體酮注射液(10mg/ml)；試驗(yàn)組樣品下述實(shí)施例1的藥粉D；桂枝茯苓丸，山西省臨汾中藥廠生產(chǎn)。
(三)實(shí)驗(yàn)方法和指標(biāo)參照李氏法制作子宮平滑肌瘤樣增生模型。
空白組常規(guī)飼養(yǎng)，并每日灌胃生理鹽水2ml；四組造模方法為肌內(nèi)注射苯甲酸雌二醇，0.2mg/只，每周3次，連續(xù)三個(gè)月后，加黃體酮1.5mg/只肌注，2次/周，連續(xù)一個(gè)月。在造模同時(shí)，模型組每日灌胃生理鹽水2ml/只，桂枝茯苓丸組每日灌胃桂枝苓丸3g/kg(0.5g/ml，2ml/只/天，約相當(dāng)于60kg體重成人常規(guī)用量的20倍)，試驗(yàn)樣品小劑量組，每日灌胃該藥藥粉1.5g/kg，約相當(dāng)于60kg體重成人常規(guī)量的15倍)，試驗(yàn)樣品大劑量組每日灌胃該藥3g/kg/日(約當(dāng)于成人量30倍)。四個(gè)月后，所有動(dòng)物稱重，剖腹觀察子宮大體形態(tài)，剪取子宮，稱重，計(jì)算子宮系數(shù)(子宮重/100g體重)，量取子宮頸以上及分角子宮根部橫徑，然后固定于10％中性福爾馬林，子宮分角以上相同部位橫切取材0.3mm，石蠟包埋，HE染色，光鏡觀察子宮組織形態(tài)，每張切片選取5個(gè)部位在10×10倍鏡下顯微測(cè)微尺測(cè)量平滑肌厚度，取平均值。
(四)統(tǒng)計(jì)方法數(shù)據(jù)采用MINITAB SOFTWARE統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析Q檢驗(yàn)處理。
(五)結(jié)果1、子宮重量模型組子宮重量增加，與對(duì)照組相比，差異非常顯著意義(P＜0.01)，試驗(yàn)樣品大劑量組子宮重量較模型組顯著減輕(P＜0.05)，試驗(yàn)樣品小劑量組，桂枝茯苓丸組子宮重量較模型組有減輕趨勢(shì)(P＞0.05)，見表1。
表1子宮重量比較(X±SD)

**與對(duì)照組比較P＜0.01#與模型組比較P＜0.052、子宮橫徑變化結(jié)果顯示，模型組兩處子宮橫徑較空白組增粗，差異有非常顯著意義(P＜0.01)，而治療組橫徑均小于模型組，差異有顯著意義(P＜0.05)，見表2。
表2 子宮橫徑比較(X±SD) 單位cm

**與對(duì)照組比較P＜0.01#與模型組比較P＜0.053、子宮組織學(xué)形態(tài)變化鏡下觀察，造模組分角子宮根部平滑肌層明顯呈不均勻增厚，且平滑肌細(xì)胞排列紊亂，其中有7只平滑肌排列呈卷云狀或紡織狀，病變近似瘤樣增生；試驗(yàn)樣品大、小劑量組及桂枝茯苓丸組分角子宮平滑肌層薄于造模組(P＜0.05)，排列規(guī)整，試驗(yàn)樣品小劑量組和桂枝茯苓丸組各有2只，4只個(gè)別區(qū)域出現(xiàn)瘤樣增生病變。
4、子宮平滑肌厚度變化模型組子宮平滑肌較空白對(duì)照組明顯增厚(P＜0.01)，桂枝茯苓丸和試驗(yàn)樣品大、小劑量組子宮平滑肌厚度較模型組薄(P＜0.05)，見表3。
表3 子宮平滑肌厚度比較(計(jì)量單位為顯微測(cè)微尺計(jì)數(shù))

**與對(duì)照組比較P＜0.01
#與模型組比較P＜0.05(六)結(jié)論長(zhǎng)期給豚鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇和黃體酮，可造成豚鼠子宮重量增加，平滑肌增厚，平滑肌細(xì)胞排列紊亂，多數(shù)動(dòng)物子宮平滑肌出現(xiàn)瘤樣增生等病理改變；灌喂本發(fā)明的試驗(yàn)樣品可顯著改善上述病理變化，說(shuō)明本發(fā)明的產(chǎn)品對(duì)于雌激素誘發(fā)的豚鼠子宮平滑肌瘤樣增生有顯著的抑制作用，為臨床治療子宮平滑肌瘤提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)提示該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與本品臨床功能主治相一致。
二、對(duì)血瘀證模型動(dòng)物血液流變學(xué)的影響試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)材料1、動(dòng)物健康未孕家兔32只，體重2.5-3.0kg，雌雄兼用。
2、藥物與試劑①試驗(yàn)樣品取本發(fā)明的藥粉D，用70％乙醇溶液浸泡，然后依次用濃度為70％、50％、30％、10％的乙醇溶液滲漉，再將幾種滲漉液合并，濃縮為70％的提取液，備用。
②桂枝茯苓丸桂枝茯苓丸提取液制法同試驗(yàn)樣品提取液制法。
方法與結(jié)果取家兔32只，靜注10％高分子右旋糖酐5ml/kg，每日2次，連續(xù)2d，造成高粘滯性血瘀證模型。于第2天，第二次給高分子右旋糖酐后15min，心臟取血，肝素抗凝，測(cè)定用藥前血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)。5d后各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別以5ml/kg/日生理鹽水(對(duì)照組)，6g/kg/日桂枝茯苓丸(GZFLW組)，6g/kg/日試驗(yàn)樣品(DBJN大劑量)、3g/kg/日試驗(yàn)樣品(DBJN小劑量)混懸液灌胃，連續(xù)3天。從給藥的第2天開始與用藥的同時(shí)按上述方法給高分子右旋糖酐。第3次給藥50min后，心臟取血測(cè)定用藥后血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)。結(jié)果見表4。
表4對(duì)“血瘀證”家兔血液流變學(xué)的影響(X±SD)

與對(duì)照組比較*P＜0.05**P＜0.01上述結(jié)果表明本發(fā)明的產(chǎn)品可以明顯地降低高分子右旋糖酐所致的家兔高粘滯性血液的粘度，全血比粘度、全血還原比粘度、血漿比粘度與給藥前相比，均有顯著或非常顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)；試驗(yàn)樣品各用藥組紅細(xì)胞電泳時(shí)間給藥前后相比，有顯著性差異(P＜0.05)，而相應(yīng)對(duì)照組給藥前后比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
結(jié)論本發(fā)明的產(chǎn)品可改善腎上腺素引起的大鼠腸系膜微循環(huán)障礙狀態(tài)，促進(jìn)微循環(huán)的恢復(fù)；可明顯降低高分子右旋糖酐所致的家兔高粘滯性血液的粘度，增加紅細(xì)胞電泳速度，從而改變血液流變性。
提示這些結(jié)果與該藥的臨床功效相一致，也是其用于防治子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊等病癥作用機(jī)理的一個(gè)重要方面。
三、毒理學(xué)研究(1)急性毒性試驗(yàn)以成人口服劑量的1879倍于24小時(shí)分3次灌胃小鼠，觀察7天，未見一動(dòng)物死亡。(2)長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)以成人口服劑量的120倍和60倍量，分別給大鼠連續(xù)給藥180天，停藥后15天，對(duì)其血象，肝，腎功能等進(jìn)行檢測(cè)，均未發(fā)現(xiàn)有毒副作用，對(duì)各臟器器官進(jìn)行組織學(xué)病理檢查，未見有病理學(xué)改變。提示本品毒副作用小，安全可靠。
四、用本發(fā)明所提供的產(chǎn)品(名稱丹鱉膠囊0.38g/粒)進(jìn)行臨床驗(yàn)證。
采用隨機(jī)雙盲、平行對(duì)照、部分開放的方法，以本配方為治療組，“桂枝茯苓膠囊”為對(duì)照組，觀察氣滯血瘀證子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊共480例，其中子宮肌瘤240例(治療組120例，對(duì)照組90例，開放組30例)，盆腔炎性腫塊240例(治療組120例，對(duì)照組60例，開放組60例)。試驗(yàn)結(jié)果如下1.將治療前各組患者的年齡、病程、病情、體征、中醫(yī)證候等項(xiàng)作了統(tǒng)計(jì)，經(jīng)卡方檢驗(yàn)，各項(xiàng)分布均勻，具可比性。
2.臨床總療效分析，子宮肌瘤治療組綜合療效、中醫(yī)證候療效及體征療效的總有效率分別為87.5％、92.5％、64.17％，93.55，對(duì)照組分別為75.56％、82.22％、45.56％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P均小于0.01，有非常顯著性差異，治療組優(yōu)于對(duì)照組“桂枝茯苓膠囊”；盆腔炎性腫塊治療組綜合療效、中醫(yī)證候療效及體征療效的總有效率分別為93.33％、96.67％、91.67％，對(duì)照組“桂枝茯苓膠囊”分別為86.67％、91.67％、80.00％。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P均小于0.01，有非常顯著性差異，治療組優(yōu)于對(duì)照組。
3.中醫(yī)癥狀改善情況比較分析，治療組和對(duì)照組治療后均能明顯改善各項(xiàng)中醫(yī)癥狀(P＜0.01)，兩組相比，治療組對(duì)小腹脹痛的療效優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.01)，其它各項(xiàng)沒有顯著性差異(P＞0.05)。
4.臨床試驗(yàn)過程中治療組有2例患者在服藥一個(gè)月后偶爾出現(xiàn)輕微頭暈，過后自動(dòng)消失，不影響繼續(xù)用藥，其余未見明顯不良反應(yīng)。安全性檢查通過對(duì)血、尿、便常規(guī)檢驗(yàn)及心電圖、肝、腎功能檢測(cè)，未發(fā)現(xiàn)明顯毒副作用，臨床使用比較安全。
另臨床觀察乳腺增生、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫、月經(jīng)不調(diào)各100例，有效率分別為93.55％、78.51％、91.28％、92.32％。
5.臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，本品具有活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)的功能，主治氣滯血瘀、瘀血留結(jié)胞宮及小腹所致的癥瘕(子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫)及乳腺增生、月經(jīng)不調(diào)，證見小腹脹痛，腰骶酸痛，帶下量多，肛門墜脹，舌暗有斑。
本發(fā)明的有益效果是1、本品具有活血化瘀、軟堅(jiān)散結(jié)的功能，主治氣滯血瘀、瘀血留結(jié)胞宮及小腹所致的癥瘕(子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫)及乳腺增生、月經(jīng)不調(diào)，證見小腹脹痛，腰骶酸痛，帶下量多，肛門墜脹，舌暗有斑。為治療子宮肌瘤、盆腔炎性腫塊、乳腺增生、子宮內(nèi)膜異位癥、卵巢囊腫、月經(jīng)不調(diào)增添了一個(gè)療效確切、毒副作用小的中成藥。
2、制備方法適合工業(yè)化大批量生產(chǎn)。
3、產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)單可行，可操作性強(qiáng)，便于保證產(chǎn)品的質(zhì)量。


附圖1、是本發(fā)明所提供的主治子宮肌瘤中成藥的制備方法流程簡(jiǎn)圖。下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳述實(shí)施例1一、半成品的制備處方丹參2850g三七950g 三棱1425g莪術(shù)950g 去皮桃仁1140g當(dāng)歸950g鱉甲1425g海藻2375g鹽炒杜仲950g炒白術(shù)1425g 半枝蓮2850g 桂枝855g操作方法見附圖1①稱取三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲四味藥材，分別粉碎成細(xì)粉，按處方量稱取備用。
②按處方量稱取丹參、鹽炒杜仲碎成1cm以內(nèi)的塊段，以6倍量90％乙醇回流提取兩次，每次1小時(shí)，乙醇提取液過濾，濃縮成相對(duì)密度70℃時(shí)測(cè)為1.20的浸膏A，備用。藥渣另存。
③按處方量稱取當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝，用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，備用。
④提取揮發(fā)油后的藥渣與上述丹參、鹽炒杜仲的藥渣合并，再加入海藻、去皮桃仁、半枝蓮三味藥材，以12倍量水煎煮2次，每次1.5小時(shí)，水提液過濾后，濃縮成浸膏B，再加入浸膏A，繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度70℃時(shí)測(cè)為1.27的稠膏C。
⑤稠膏C加入三七、三棱、莪術(shù)和鱉甲的細(xì)粉，混勻，60℃以下低溫干燥，粉碎成過65目篩的藥粉，加入揮發(fā)油，混勻，得藥粉D。用高效液相色譜法測(cè)定藥粉D中含三七以人參皂苷Rg1計(jì)，為4.060mg/g。
二、制劑的制備硬膠囊制備取藥粉D380g填裝膠囊，制成1000粒，即得。每粒膠囊裝有藥粉0.38g，用薄層色譜掃描法測(cè)定含三七以人參皂苷Rg1計(jì)為1.54mg/粒。
片劑制備取藥粉D 380g，加入羧甲基纖維素鈉3.8g，硬脂酸鎂1.9g，混合均勻，壓制成1000片，每片重0.38g，薄層色譜掃描法測(cè)定含三七以人參皂苷Rg1計(jì)為1.52mg/粒。
顆粒劑制備取藥粉D 380g，制成顆粒，分裝成200包每包重1.9g，即得。用薄層色譜掃描法測(cè)定含三七以人參皂苷Rg1計(jì)為6.94mg/包。
丸劑制備取藥粉D 380g，加適量水，泛制成丸，干燥，制成水丸2000粒，每粒0.19g，即得。用薄層色譜掃描法測(cè)定含三七以人參皂苷Rg1計(jì)為0.75mg/g。
實(shí)施例2～6同實(shí)施例1的操作，具體條件如下半成品的制備1.投料量

2.揮發(fā)油的提取用水蒸汽蒸餾法提取，各實(shí)施例揮發(fā)油提取量見下表。

3.乙醇提取各實(shí)施例提取過程與相關(guān)工藝參數(shù)見下表。

(4)水提各實(shí)施例提取過程與相關(guān)工藝參數(shù)見下表。

(5)稠膏C的制備各實(shí)施例提取過程與相關(guān)工藝參數(shù)見下表。

(6)藥粉D的制備各實(shí)施例提取過程與相關(guān)工藝參數(shù)見下表。

權(quán)利要求
1.一種主治子宮肌瘤、盆腔炎性包塊的中成藥，其特征在于是由下述重量百分比的中藥材和方法制成的口服制劑，處方丹參12.57～18.85％ 三七4.18～6.28％三棱6.67～9.03％莪術(shù)4.45～6.01％去皮桃仁5.34～7.22％當(dāng)歸4.45～6.01％鱉甲6.07～9.03％海藻11.13～15.05％ 鹽炒杜仲4.71～5.75％炒白術(shù)7.06～8.64％ 半枝蓮14.14～17.28％桂枝4.24～5.18％將三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲分別粉碎成細(xì)粉；當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝提取揮發(fā)油；丹參、鹽炒杜仲用60～95％的乙醇溶液提取、提取液濃縮成浸膏A；將當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝提取揮發(fā)油后的藥渣和丹參、鹽炒杜仲乙醇溶液提取后的藥渣加去皮桃仁、海藻、半枝蓮一起用水提取，取水提液濃縮成浸膏B；合并浸膏A和浸膏B繼續(xù)濃縮成稠膏C，加入三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲的細(xì)粉和當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝的揮發(fā)油混勻成藥粉D，按常規(guī)中藥制劑制成口服制劑，用高效液相色譜法或薄層色譜掃描法測(cè)定藥粉D中含三七以人參皂苷Rg1計(jì)，不得少于1.50mg/g。
2.如權(quán)利要求1所述的中成藥，其特征在于由下述重量百分比的原料制成，處方丹參15.71％ 三七5.23％ 三棱7.85％莪術(shù)5.23％ 去皮桃仁6.28％ 當(dāng)歸5.23％鱉甲7.85％ 海藻13.09％ 鹽炒杜仲5.23％炒白術(shù)7.85％半枝蓮15.71％桂枝4.71％。
3.如權(quán)利要求1所述的中成藥，其特征在于所說(shuō)的口服制劑是片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑。
4.一種如權(quán)利要求1所說(shuō)的主治子宮肌瘤、盆腔炎性包塊的中成藥的制備方法，其特征在于(1)取三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲四味原料分別粉碎成細(xì)粉，過篩，備用；(2)取當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝三味原料用提取揮發(fā)油備用；(3)丹參、鹽炒杜仲二味原料用60～95％的乙醇溶液提取、過濾、提取液濃縮成在70～80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.05～1.25的浸膏A，備用，藥渣另存；(4)將當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝提取揮發(fā)油后的藥渣和丹參、鹽炒杜仲乙醇溶液提取后的藥渣加去皮桃仁、海藻、半枝蓮三味原料一起用水煎煮提取1～3次，合并水提液，濃縮成浸膏B，合并浸膏A和浸膏B繼續(xù)濃縮成在70～80℃時(shí)測(cè)定相對(duì)密度為1.15～1.30的稠膏C，(5)稠膏C加三七、三棱、莪術(shù)、鱉甲的細(xì)粉，混勻、干燥，粉碎，再加入當(dāng)歸、炒白術(shù)、桂枝的揮發(fā)油，混勻成藥粉D，按常規(guī)中藥制劑工藝制成口服制劑。
5.一種如權(quán)利要求1所說(shuō)的主治子宮肌瘤、盆腔炎性包塊的中成藥的質(zhì)量控制方法，其特征在于(1)用高效液相色譜法測(cè)定藥粉D中含人參皂苷Rg1的含量；(2)用薄層色譜掃描方法測(cè)定藥粉D中含人參皂苷Rg1的含量。
6.如權(quán)利要求5所說(shuō)的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說(shuō)的高效液相色譜法的方法是色譜條件 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈∶4％甲醇溶液體積比為18∶82的溶液作流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，柱溫為35℃，理論塔板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；對(duì)照品溶液的制備 取人參皂苷Rg1對(duì)照品加流動(dòng)相制成每1ml含人參皂苷Rg10.5mg的溶液，即得；供試品溶液的制備 取藥粉D 4g，置具塞的錐形瓶中，加入水飽和正丁醇50ml，稱定重量，密塞，放置過夜，超聲處理，放冷，再稱定重量，用水飽和的正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，置分液漏斗中，用氨試液洗滌，棄去氨試液，正丁醇層蒸干，殘?jiān)芗尤?0ml的水，稱定重量，超聲處理，使殘?jiān)稚ⅲ俜Q定重量，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置10ml容量瓶中，并加流動(dòng)相至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，即得。
7.如權(quán)利要求5所說(shuō)的質(zhì)量控制方法，其特征在于所說(shuō)的薄層色譜掃描的方法是供試品溶液的制備 取藥粉D 4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和正丁醇50ml，稱定重量，超聲處理再稱定重量，加水飽和正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，用氨試液洗滌，取正丁醇液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至2ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液；對(duì)照品溶液的制備 精密稱取人參皂苷Rg1對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；測(cè)定方法 精密吸取供試品溶液1μl，對(duì)照品溶液1μl、5μl，分別交叉點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿∶甲醇∶水體積比為13∶7∶2的溶液，10℃以下放置12小時(shí)的下層溶液為展開劑，10℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)λS＝525nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。
全文摘要
一種主治子宮肌瘤的中成藥和制備、質(zhì)量控制方法，涉及含有中藥材為原料的醫(yī)藥制品。它是由下述重量百分比的藥材制成的制劑，丹參12.57～18.85、三七4.18～6.28、三棱6.67～9.03、莪術(shù)4.45～6.01、去皮桃仁5.34～7.22、當(dāng)歸4.45～6.01、鱉甲6.07～9.03、海藻11.13～15.05、鹽炒杜仲4.71～5.75、炒白術(shù)7.06～8.64、半枝蓮14.14～17.28、桂枝4.24～5.18，用高效液相色譜或薄層色譜掃描法測(cè)定藥粉D中人參皂苷Rg
文檔編號(hào)A61P15/00GK1733287SQ200510036468
公開日2006年2月15日 申請(qǐng)日期2005年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月10日
發(fā)明者魏大華, 羅國(guó)器, 莫國(guó)強(qiáng), 黎彤, 陳潔標(biāo), 陳世斌, 龍成, 黎佩紅, 黃潔 申請(qǐng)人:廣州潘高壽藥業(yè)股份有限公司