專利名稱：一種埃坡霉素緩釋植入組合物及應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植入型抗腫瘤的藥物組合物，尤其涉及一種緩慢釋放的體內植入型埃坡霉素緩釋植入組合物及其應用，屬于藥物技術領域。
背景技術：
埃坡霉素A-F(Epothilones A-F)為1987年德國藥物學家從南非的纖維堆囊粘細菌中發(fā)現(xiàn)的天然化合物，1993年發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤活性。
埃坡霉素A-F的詳細結構式如下 埃坡霉素AR1＝H，R2＝H埃坡霉素BR1＝CH3，R2＝H 埃坡霉素CR1＝H埃坡霉素ER1＝H，R2＝CH3埃坡霉素FR1＝CH3，R2＝CH3埃坡霉素DR1＝CH3近年來，隨著埃坡霉素類化合物研究的逐漸深入，已經(jīng)有幾百個衍生物被報道，且有多個組分及其衍生物正在進行臨床試驗，研究表明，埃坡霉素及其衍生物不僅具有強效的抗腫瘤作用，而且在抑制腫瘤多藥耐藥性方面有較強的作用，其抗腫瘤作用機制與紫杉醇非常相似，是一類新型微管穩(wěn)定劑，具有促進GTP依賴性微管蛋白聚合形成微管的作用，并且對微管具有穩(wěn)定作用，而通過穩(wěn)定微管組裝過程抑制微管的解聚，導致微管束的排列異常，形成星狀體，進而抑制了細胞形成正常的有絲分裂紡錘體，從而抑制腫瘤細胞的生長，甚至誘導其死亡。
臨床上，將埃坡霉素及其衍生物用于治療患者疾病之前，必須將其配制成可給予患者的制劑形式。目前，國外采用主藥和可藥用溶劑制成注射液或凍干制劑，專利WO 2004032866、WO 9939694和WO 0110412對此有詳細描述。但埃坡霉素及其衍生物全身用藥后，在殺滅腫瘤細胞的同時也殺死了體內的正常細胞，造成如骨髓抑制、嘔吐、腹瀉等胃腸道反應及其他毒性，因此將埃坡霉素及其衍生物制備成緩釋植入用組合物，可以保持腫瘤局部的高濃度，減少全身用藥的劑量，降低藥品的不良反應。
體內植入型藥物緩釋制劑通過將藥劑直接植入體內而實現(xiàn)局部用藥，只需一次植入就可達到長期釋藥的效果，既可大大方便患者、又可避免使用常規(guī)藥物制劑那樣必須定時用藥、否則會影響療效甚至可能危及生命的缺陷。
由于體內植入藥物緩釋制劑還具有一定的靶向性、可以在一段長時間內維持體內需藥部位一定的藥物濃度，所以既可提高藥物的療效，又可減少藥物的用量，既可降低藥物的毒副作用，避免一般口服藥物制劑對肝、腎、胃以及全身性免疫系統(tǒng)可能產(chǎn)生的不利反應和影響，又可減少患者的用藥開支。體內植入型藥物制劑的靶向功能，還可使受血腦屏障影響而藥物難以達到的顱內疾病的治療成為可能，達到其它藥物劑型無法達到的療效。

發(fā)明內容
針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明要解決的問題是提供一種埃坡霉素緩釋植入組合物及其應用，本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入組合物包括埃坡霉素或埃坡霉素衍生物和藥用輔料，埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在所述組合物中的重量百分比為0.1-90％，優(yōu)選為1-50％，最優(yōu)選為1-20％。
本發(fā)明的埃坡霉素或埃坡霉素衍生物為埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、氮雜埃坡霉素B(內脂環(huán)中的氧被氮取代的埃坡霉素B)、21，26位分別或同時被氨基取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、9，10位去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、10，11位去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、26，27位被鹵素取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、21，26-二羥基埃坡霉素B或埃坡霉素D、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素C、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、12，13位環(huán)丙基或環(huán)丁基埃坡霉素B。
埃坡霉素AR1＝H，R2＝H埃坡霉素BR1＝CH3，R2＝H 埃坡霉素CR1＝H埃坡霉素ER1＝H，R2＝CH3埃坡霉素FR1＝CH3，R2＝CH3埃坡霉素DR1＝CH3上述埃坡霉素衍生物還可選擇中國專利CN99124010中所涉及的異埃坡霉素或如下結構的6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素(ZK-EPO)
本發(fā)明的埃坡霉素或埃坡霉素衍生物優(yōu)選為埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、氮雜埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素D、21-羥基埃坡霉素B、21-羥基埃坡霉素D、26-羥基埃坡霉素B、26-羥基埃坡霉素D、26-氨基埃坡霉素B、26-氨基埃坡霉素D、6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素、9，10去氫埃坡霉素D、26-氟埃坡霉素B、10，11去氫埃坡霉素D。
本發(fā)明的埃坡霉素或埃坡霉素衍生物最優(yōu)選為埃坡霉素A或埃坡霉素B。
本發(fā)明的埃坡霉素或埃坡霉素衍生物還包括埃坡霉素及其衍生物的各種鹽，如但不限于銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、鹽酸鹽、乳糖酸鹽、醋酸鹽、天冬酸鹽、硝酸鹽、枸櫞酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、嘌呤鹽、嘧啶鹽或琥珀酸鹽。
本發(fā)明所用的藥用輔料為聚乳酸、聚乳酸和羥基乙酸的共聚物、殼聚糖及其衍生物、明膠、膠原蛋白、阿拉伯膠、氯化鈉之一或其任意二種或其任意三種的組合。
上述藥用輔料優(yōu)選為下列之一或其任意二種或其任意三種的組合(a)分子量為12000-18000，21000-28000，36000-44000，51000-60000，60000-70000或70000-80000的聚乳酸；(b)分子量為12000-18000，21000-28000，36000-44000，51000-60000，60000-70000或70000-80000的聚乳酸和羥基乙酸的共聚物；(c)明膠或氯化鈉。
在本發(fā)明中，藥用輔料主要采用生物可降解高分子聚合物，生物相容性可降解高分子多聚物植入人體后，在體液和酶等的作用下，降解為人體內已有的小分子化合物被人體吸收、代謝，然后排出體外，對人體無毒副作用，且無需手術取出，可使患者免受二次手術的痛苦。并且，生物相容性可降解高分子多聚物在體內降解后，結構變得疏松而使藥物釋放量增加，因而可以彌補由于總含藥量減少所引起藥物釋放量的下降，是實現(xiàn)藥物恒量釋放的、理想的藥物載體材料。
利用本發(fā)明所述埃坡霉素緩釋植入組合物制備的制劑為體內植入劑、緩釋劑或緩釋植入劑，優(yōu)選為體內植入劑、緩釋植入劑。
為了臨床使用方便和保證藥品質量的均一性，本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入劑還可以制備成不同大小的顆粒，其直徑大小為0.01mm～20mm，優(yōu)選0.1mm～2mm。除制備成顆粒狀外，還可以制備成片狀、薄片狀、膜狀、球狀、塊狀及棒狀等形狀；還可添加不同用途的藥用輔料，如阻滯劑、填充劑、致孔劑、等滲劑、增溶劑等，以最大程度的滿足臨床用藥的需要。
本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入組合物的制備方法可以采用本領域技術人員常用的制備緩釋制劑的方法進行操作，如但不限于如下的方法(1)熔融法將埃坡霉素或埃坡霉素衍生物與藥用輔料研細后混合均勻，在熔融條件下制成所需要的形狀，射線滅菌后密封包裝；(2)溶劑揮發(fā)法把藥用輔料完全溶解于二氯甲烷或丙酮等有機溶劑后，將埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在以上溶液中混合均勻，然后除去有機溶劑，干燥制成所需要的形狀，射線滅菌后密封包裝；(3)微球壓片法精密稱取埃坡霉素適量(使埃坡霉素∶藥用輔料之比為1∶1至1∶10，優(yōu)選為1∶2)，完全溶解在藥用輔料濃度為1％～20％，優(yōu)選為5％的有機溶劑中，作為油相，將油相緩緩加入水相(濃度為0.2％-10％，優(yōu)選0.5％-5％的明膠水溶液)中，超聲乳化1～5分鐘，優(yōu)選1-2分鐘，或以600轉/分～4000轉/分的轉速，優(yōu)選900轉/分-2000轉/分的轉速攪拌得到乳劑。然后減壓干燥除去乳劑中的有機溶劑，離心收集微球，用蒸餾水洗滌3-4次，直接加入水配制成含微球的水混懸液，冷凍干燥得到微球，壓片，射線滅菌后密封包裝；(4)噴霧干燥法。還可以將該品制備成脂質體或乳劑后，再與藥用輔料混合或溶解均勻，干燥制粒。
本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入劑可以在瘤內、瘤周、瘤腔內放置。通過注射、介入、直接植入等方法放置在血管內、粘膜內、腹腔內、胸腔內、子宮內、陰道內，可以直接放置在手術切除腫瘤組織后留下的腔隙內，也可以通過靜脈、動脈等介入治療方法放置于供應腫瘤組織營養(yǎng)的血管內。
本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入組合物還可以和常規(guī)化療、免疫治療、激素治療、高熱治療、光化學治療、磁療、放療等同時使用，以達到疾病治療的最佳效果。
本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入組合物的應用，用于制備治療起源于人及動物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝臟、膽囊、胰腺、甲狀腺、肺臟、食管、胃、乳腺、子宮、子宮內膜、子宮頸、卵巢、輸卵管、前列腺、膀胱、結直腸、頭頸部、眼睛、咽部、口腔、淋巴結、淋巴液、皮膚、粘膜、腺體、血液、血管、脂肪的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。優(yōu)選用于制備治療起源于人的大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟、膽囊、胰腺、甲狀腺、肺臟、食管、胃、乳腺、子宮、子宮內膜、子宮頸、輸卵管、卵巢、膀胱、結直腸、淋巴結、皮膚等器官的原發(fā)性或繼發(fā)性的實體腫瘤的藥物。
本發(fā)明的埃坡霉素緩釋植入組合物可以使用棕色藥用玻璃西林瓶、藥用塑料瓶或藥用鋁箔無菌密閉包裝。
利用本發(fā)明所述的埃坡霉素緩釋植入組合物進行動物體內試驗，以小鼠抑瘤試驗為例，結果表明接種S180瘤株的小鼠瘤內植入和腹腔注射埃博霉素緩釋植入組合物后，小鼠均生長發(fā)育正常，被毛濃密而有光澤，運動活潑，鼻腔、口腔、耳道、眼、肛門及生殖器官未見異常，相同濃度埃坡霉素緩釋植入組合物腫瘤局部植入組較腹腔注射組抑瘤率高，埃坡霉素緩釋植入組合物較普通凍干劑和陰性對照組抑瘤率高且毒副作用小，說明本發(fā)明的埃博霉素緩釋植入組合物腫瘤內植入或腹腔用藥不僅能夠有效的抑制腫瘤生長，而且能夠顯著降低藥物的全身毒副作用。
具體實施例方式
實施例1將180mg分子量為60000聚乳酸置入試管中，加入10ml二氯甲烷溶解并混合均勻，然后加入20mg氮雜埃坡霉素B細末及2mg氯化鈉，重新?lián)u勻后在45℃水浴中真空干燥除去有機溶劑。待有機溶劑揮發(fā)完，將干燥后的固體組合物植入模具中成形，然后將成型的制劑，用蒸餾水沖洗4-5次，除去制劑中的氯化鈉。檢驗合格后，射線滅菌密封包裝。
經(jīng)試驗測試上述制劑在37℃生理鹽水中浸泡15天，釋藥量為38％-43％。
實施例2將1000mg分子量為22000聚乳酸置入試管中，加入100ml二氯甲烷溶解并混合均勻，然后加入20mg埃坡霉素B細末，重新?lián)u勻后在45℃水浴中真空干燥除去有機溶劑。待有機溶劑揮發(fā)完后，將干燥后的固體組合物植入模具中成形，檢驗合格后，射線滅菌后密封包裝。
經(jīng)試驗測試上述制劑在37℃生理鹽水中浸泡15天，釋藥量為51％-56％。
實施例3精密稱取100mg分子量為27000的聚乳酸，置入試管內，用5ml二氯甲烷溶解完全后，再精密稱取50mg埃坡霉素D，置入試管內完全溶解，作為油相；制備20ml 1％明膠水溶液作為水相；將油相緩緩加入水相中，超聲乳化1～2分鐘得到乳劑。然后真空干燥除去乳劑中的有機溶劑，離心收集到微球，用蒸餾水洗滌3-4次，直接加入水配制成含微球的水混懸液，冷凍干燥得到微球，壓片，射線滅菌后密封包裝。
經(jīng)試驗測試上述制劑在37℃生理鹽水中浸泡15天，釋藥量為60％-66％。
實施例4精密稱取120mg分子量為55000的聚乳酸與羥基乙酸的聚合物，置入試管內用10ml二氯甲烷完全溶解，再精密稱取80mg21-氨基埃坡霉素B，置入試管內混合均勻，然后在45℃水浴中真空干燥除去溶液中的有機溶劑，干燥后的固體組合物植入模具中成形，檢驗合格后射線滅菌并密封包裝。
經(jīng)試驗測試上述制劑在37℃生理鹽水中浸泡15天，釋藥量為31％-37％。
實施例5精密稱取140mg分子量為14000的聚乳酸與羥基乙酸的聚合物，置入試管內用5ml二氯甲烷完全溶解，再精密稱取60mg21-羥基埃坡霉素B，置入試管內混合均勻，然后在45℃水浴中真空干燥除去溶液中的有機溶劑，干燥后的固體組合物植入模具中成形，檢驗合格后射線滅菌并密封包裝。
經(jīng)試驗測試上述制劑在37℃生理鹽水中浸泡15天，釋藥量為64％-71％。
實施例6埃坡霉素植入劑的體內抑瘤試驗本實施例提供了實施例1-3所制備的埃博霉素B、氮雜埃坡霉素B和埃博霉素D緩釋植入組合物用于治療腫瘤的動物體內試驗情況。具體步驟如下1、材料1.1試驗動物成年健康KM小鼠60只，雌雄各半，體重20±2克，購于山東魯抗醫(yī)藥集團有限公司。
1.2試驗樣品本發(fā)明實施例1-3所制備的埃博霉素緩釋植入組合物。
1.3陽性對照埃坡霉素普通凍干制劑。
1.4腫瘤細胞株S180，購于山東省醫(yī)科院藥物研究所。
2、方法2.1動物分組動物稱重，編號，隨機分為6組，每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。
2.2樣品處理取實施例1和實施例2的埃坡霉素緩釋植入劑，直接植入腫瘤內，劑量分別為50mg/kg，作為第2和第3組；實施例3的埃坡霉素緩釋植入劑，分別以50mg/kg劑量腫瘤內和腹腔內注射，作為第4組和第5組。
2.3埃坡霉素陽性對照組精密稱取埃坡霉素B凍干制劑適量，用注射用水配制成埃坡霉素B混懸溶液，按0.1mg/kg的劑量腹腔注射，作為第6組。
2.4陰性對照0.5ml注射用生理鹽水直接腹腔注射，作為第1組。
2.5接種腫瘤于每只小鼠右腋窩皮下注射0.2ml S180稀釋液，待腫瘤生長5天。
2.6給藥及觀察5天后，以上各組分別腫瘤內直接植入或腹腔注射給藥，觀察小鼠特征變化，包括行為活動、被毛、精神狀態(tài)、口腔、鼻腔、耳道、肛門、生殖器官是否正常，以及腫瘤生長和小鼠死亡的情況。第30天稱重后脫椎處死，解剖剝離瘤塊，稱瘤重，計算腫瘤抑制率。
3.結論按照以下公式計算腫瘤抑制率

試驗結果

P＜0.05結論由以上結果可以看出，接種S180瘤株的小鼠瘤內植入和腹腔注射埃博霉素緩釋植入組合物后，小鼠均生長發(fā)育正常，被毛濃密而有光澤，運動活潑，鼻腔、口腔、耳道、眼、肛門及生殖器官未見異常，相同濃度埃坡霉素緩釋植入組合物腫瘤局部植入組較腹腔注射組抑瘤率高，埃坡霉素緩釋植入組合物較普通凍干劑和陰性對照組抑瘤率高且毒副作用小，說明本發(fā)明的埃博霉素緩釋植入組合物腫瘤內植入或腹腔用藥不僅能夠有效的抑制腫瘤生長，而且能夠顯著降低藥物的全身毒副作用。
權利要求
1.一種埃坡霉素緩釋植入組合物，包括埃坡霉素或埃坡霉素衍生物和藥用輔料，其特征在于，埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在所述組合物中的重量百分比為0.1-90％。
2.如權利要求1所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在組合物中的重量百分比為1-50％。
3.如權利要求2所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在組合物中的重量百分比為1-20％。
4.如權利要求1～3之一所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述埃坡霉素或埃坡霉素衍生物選自埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、氮雜埃坡霉素B、21，26位分別或同時被氨基取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、9，10位去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、10，11位去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、26，27位被鹵素取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、9位，10位，11位，14位，21位，26位分別被羥基取代的埃坡霉素B或埃坡霉素D、21，26-二羥基埃坡霉素B或埃坡霉素D、21-羥基-10，11去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9-酮-埃坡霉素C、4-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、4-去甲基-9，10-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、6-去甲基-10，11-二去氫埃坡霉素B或埃坡霉素D、12，13位環(huán)丙基或環(huán)丁基埃坡霉素B、異埃坡霉素或6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素。
5.如權利要求4所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述埃坡霉素或埃坡霉素衍生物選自埃坡霉素A、埃坡霉素B、埃坡霉素C、埃坡霉素D、埃坡霉素E、埃坡霉素F、氮雜埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素B、21-氨基埃坡霉素D、21-羥基埃坡霉素B、21-羥基埃坡霉素D、26-羥基埃坡霉素B、26-羥基埃坡霉素D、26-氨基埃坡霉素B、26-氨基埃坡霉素D、6-乙基，16-氟，17-吡啶埃坡霉素、9，10去氫埃坡霉素D、26-氟埃坡霉素B、10，11去氫埃坡霉素D。
6.如權利要求5所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述埃坡霉素或埃坡霉素衍生物選自埃坡霉素A或埃坡霉素B。
7.如權利要求1～3之一所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述藥用輔料為聚乳酸、聚乳酸和羥基乙酸的共聚物、殼聚糖及其衍生物、明膠、膠原蛋白、阿拉伯膠、氯化鈉之一或其任意二種或其任意三種的組合。
8.如權利要求7所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，所述藥用輔料為下列之一或其任意二種或其任意三種的組合(a)分子量為12000-18000，21000-28000，36000-44000，51000-60000，60000-70000或70000-80000的聚乳酸；(b)分子量為12000-18000，21000-28000，36000-44000，51000-60000，60000-70000或70000-80000的聚乳酸和羥基乙酸的共聚物；(c)明膠或氯化鈉。
9.權利要求1～3之一所述之埃坡霉素緩釋植入組合物，其特征在于，利用所述埃坡霉素緩釋植入組合物制備的制劑是體內植入劑、緩釋劑或緩釋植入劑。
10.權利要求1～3之一所述之埃坡霉素緩釋植入組合物的應用，用于制備治療起源于人及動物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝臟、膽囊、胰腺、甲狀腺、肺臟、食管、胃、乳腺、子宮、子宮內膜、子宮頸、卵巢、輸卵管、前列腺、膀胱、結直腸、頭頸部、眼睛、咽部、口腔、淋巴結、淋巴液、皮膚、粘膜、腺體、血液、血管、脂肪的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種埃坡霉素緩釋植入組合物，包括埃坡霉素或埃坡霉素衍生物和藥用輔料，其中，埃坡霉素或埃坡霉素衍生物在所述組合物中的重量百分比為0.1－90％。本發(fā)明所述埃坡霉素緩釋植入組合物制備的制劑是體內植入劑、緩釋劑或緩釋植入劑，用于制備治療起源于人及動物組織或器官的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。本發(fā)明的植入劑的穩(wěn)定性及緩釋效果好，藥效明顯，降解產(chǎn)物對人體無毒副作用，且無需手術取出，可使患者免受二次手術的痛苦。
文檔編號A61M31/00GK1813720SQ20051004543
公開日2006年8月9日 申請日期2005年12月2日 優(yōu)先權日2005年12月2日
發(fā)明者彭繼先 申請人:菏澤睿鷹制藥集團有限公司