專利名稱：含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說(shuō)它是一種含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球及其制備工藝。是一種鎮(zhèn)痛、抗炎的脂質(zhì)微球注射液，給藥途徑為靜脈給藥。
背景技術(shù)：
酮洛芬屬非甾體抗炎藥(NSAIDs)，目前已在世界范圍內(nèi)使用。臨床試驗(yàn)證明酮洛芬對(duì)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、脊椎炎、外傷及術(shù)后的抗炎鎮(zhèn)痛療效顯著。酮洛芬具有療效高、毒性低、劑量小的優(yōu)點(diǎn)；在同等劑量下其消炎鎮(zhèn)痛作用比阿司匹林強(qiáng)150倍，解熱作用是消炎痛的4倍，是阿司匹林的100倍，而毒性則為消炎痛的1/20。目前市場(chǎng)上NSAID制劑多為口服劑型或栓劑，由于已經(jīng)發(fā)現(xiàn)口服NSAID后易引起胃腸道紊亂等副作用，而且在治療術(shù)后疼痛或因癌癥引起的疼痛時(shí)，多數(shù)患者無(wú)法口服藥物，因此有必要研制NSAID的靜脈給藥劑型。注射用脂質(zhì)微球(Lipid microsphere，LM)可以選擇性地蓄積在炎癥組織及血管損傷部位，改變了藥物的體內(nèi)分布，因此將NSAID制成LM制劑靜脈給藥，可能具有靶向治療的作用，使藥物選擇性達(dá)到炎癥部位，隨后被前列腺素(PG)合成細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞攝取，抑制PG的生物合成。由于酮洛芬難溶于水，很難制成注射劑型，將酮洛芬酯化得到的前藥具有一定的親脂性，可溶于注射用油中制成LM制劑。酮洛芬酯注射用脂質(zhì)微球以合成的酮洛芬或酮洛芬酯為模型藥物，通過(guò)納米分散技術(shù)使其成為粒徑為0.05～0.3微米的納米分散體，以提高藥物的靶向性，降低藥物不良反應(yīng)。用于治療術(shù)后疼痛或因癌癥引起的疼痛。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球的制備工藝及配方。本發(fā)明提供注射用脂質(zhì)微球的制備方法，將注射用脂質(zhì)微球粒徑控制在0.05～0.3微米，但最佳粒度范圍應(yīng)控制在0.2微米以下。它包括酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯、卵磷脂、純甘油和注射用水，其特征在于以上述藥理成分可制備成注射用脂質(zhì)微球，給藥途徑為靜脈給藥。每100毫升乳液中含酮洛芬或酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500～1000mg、注射用大豆油5.0～20.0克、注射用中鏈甘油三酯5.0～10.0克、卵磷脂0.8～1.6克、純甘油2.0～3.0克、余為注射用水，其注射脂質(zhì)微球中的粒徑范圍應(yīng)在0.05～0.3微米。注射乳劑的制備方法包括以下步驟(1)將處方量的卵磷脂、甘油與預(yù)熱至80℃的適量注射用水進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；(2)于上述分散液中，加入處方量的預(yù)熱至80℃的酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯，轉(zhuǎn)入組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯均勻分散；(3)取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；(4)取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。酮洛芬酯注射用脂質(zhì)微球的組成規(guī)格為10～20毫升。
本發(fā)明的注射用脂質(zhì)微球的組成為每100毫升乳液中含酮洛芬或酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500～1000毫克注射用大豆油5.0～20.0克 注射用中鏈甘油三酯5.0～10.0克卵磷脂0.8～1.6克純甘油2.0～3.0克余為注射用水其優(yōu)選組成為每100毫升乳液中含酮洛芬或酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500毫克注射用大豆油5.0克 注射用中鏈甘油三酯5.0克卵磷脂1.2克 純甘油2.5克余為注射用水本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是研究的模型藥物酮洛芬或酮洛芬酯的原型藥物為酮洛芬，有顯著的鎮(zhèn)痛抗炎作用，且作用機(jī)制明確。為增加酮洛芬的脂溶性將其合稱為酮洛芬酯，實(shí)驗(yàn)證明，酮洛芬酯的脂質(zhì)微球注射液靜脈給藥后，釋放的酮洛芬酯被血中酯酶迅速水解成其活性代謝物酮洛芬，形成較高血藥濃度抑制PG的生物合成，可以迅速止痛。
注射用脂質(zhì)微粒是將藥物溶于脂肪油中經(jīng)磷脂乳化分散于水相后制成的脂質(zhì)乳劑，是一種以脂肪油為軟基質(zhì)而被磷脂膜包封的微粒體分散系，其中平均粒徑為200nm的乳粒被成為脂質(zhì)微球(LM)。LM在組織分布上與脂質(zhì)體相似，可選擇性地在腫瘤及炎癥部位蓄積，是新型藥物靶向治療載體。
本乳劑要求油滴90％以上為小于0.3微米的乳滴，可通過(guò)激光散射法測(cè)定本乳劑的油滴大小的分布，經(jīng)測(cè)定，通過(guò)上述方法制得的酮洛芬或酮洛芬酯脂質(zhì)微球乳滴90％以上小于0.3微米。
酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液的初步藥效學(xué)及安全性試驗(yàn)研究1、酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液靜脈注射給藥的鎮(zhèn)痛作用1.1試驗(yàn)材料1.1.1受試物酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液規(guī)格10mg/ml1.1.2對(duì)照藥酮洛芬注射液規(guī)格10mg/ml1.1.3受試動(dòng)物名稱小白鼠品系K.M.
體重18～22g性別雌性提供單位沈陽(yáng)藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心合格證號(hào)SCXK(遼)2003-0081.2試驗(yàn)方法與結(jié)果將受試動(dòng)物置于55℃熱板上(成都儀器廠HSS-1B數(shù)字式超級(jí)恒溫水浴槽)選出痛閾在5～30s小鼠70只，按基礎(chǔ)痛閾均衡分七組，分別為對(duì)照組、酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液高中低三個(gè)劑量組，劑量分別為26.0、13.0、6.5mg/kg及酮洛芬注射液三個(gè)劑量組，劑量分別為26.0、13.0、6.5mg/kg，記錄給藥后4h內(nèi)受試物的鎮(zhèn)痛作用。其鎮(zhèn)痛作用以鎮(zhèn)痛效應(yīng)百分?jǐn)?shù)比較，試驗(yàn)結(jié)果如表所示表1酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液靜脈注射給藥對(duì)小白鼠的鎮(zhèn)痛作用

各給藥組與對(duì)照組比較*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果表明酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液靜脈注射給藥對(duì)小白鼠有顯著或非常顯著的鎮(zhèn)痛作用。
2、酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液血管刺激試驗(yàn)2.1試驗(yàn)?zāi)康挠^察酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液連續(xù)在同一(相對(duì)集中)部位段血管處給家兔耳緣靜脈注射后，對(duì)家兔耳緣靜脈(血管)的刺激作用。
2.2試驗(yàn)材料2.2.1受試物酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液 規(guī)格10mg/ml2.2.2對(duì)照藥酮洛芬注射液 規(guī)格10mg/ml2.2.3受試動(dòng)物新西蘭白兔，體重2.0～3.0kg 性別雌雄兼用。由沈陽(yáng)藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，使用許可證SYXK(遼)2003-0012。
2.3劑量分組第一組 生理鹽水對(duì)照組 1ml/kg/次×1次×7d第二組 酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液，1ml(10mg)/kg/次×1次×7d第三組 靜脈乳劑對(duì)照組 1ml/kg/次×1次×7d第四組 酮洛芬注射液 1ml(10mg)/kg/次×1次×7d第五組 酮洛芬注射液溶劑 1ml/kg/次×1次×7d2.4試驗(yàn)方法取家兔15只，隨機(jī)分成五組，每組3只。分別為生理鹽水對(duì)照組、酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液組、靜脈乳劑對(duì)照組、酮洛芬注射液組、酮洛芬注射液溶劑組。每組每只家兔左耳靜脈注射給藥1ml/kg/次，給藥時(shí)間為1min；右耳作對(duì)照，連續(xù)給藥7天，每天1次。末次給藥后24小時(shí)，處死動(dòng)物，在進(jìn)針部位下1cm和5cm處，剪取兔耳，肉眼可見(jiàn)有無(wú)紅腫、丘斑形成等。并以10％甲醛固定，石蠟切片，HE染色，光鏡下觀察血管內(nèi)皮，皮下組織及血栓形成情況。
2.5試驗(yàn)結(jié)果肉眼所見(jiàn)對(duì)照組酮洛芬注射液和酮洛芬注射液溶劑在給藥過(guò)程中動(dòng)物出現(xiàn)甩頭、掙扎、尖叫等反應(yīng)，注射部位有淤血、結(jié)痂。
鏡下所見(jiàn)連續(xù)給藥7天后作病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)對(duì)照組酮洛芬注射液和酮洛芬注射液溶劑有一定刺激作用。
2.6試驗(yàn)結(jié)論酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液對(duì)家兔耳緣靜脈未見(jiàn)明顯刺激作用，而酮洛芬注射液對(duì)家兔耳緣靜脈可見(jiàn)明顯刺激作用。
3、酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液靜脈注射給藥急性毒性試驗(yàn)3.1酮洛芬異丙酯脂質(zhì)微球注射液靜脈注射給小白鼠LD50為207.2mg/kg3.2酮洛芬注射液靜脈注射給小白鼠LD50為244.6mg/kg
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取12克卵磷脂、25克甘油與預(yù)熱至80℃的注射用水800毫升進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；于上述分散液中，加入預(yù)熱至80℃的酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500毫克、大豆油50克、中鏈甘油三酯50克，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至均勻分散；取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量1000毫升，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。
實(shí)施例2取12克卵磷脂、25克甘油與預(yù)熱至80℃的注射用水800毫升進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；于上述分散液中，加入預(yù)熱至80℃的酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500毫克、大豆油100克，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至均勻分散；取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量1000毫升，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。
實(shí)施例3取12克卵磷脂、25克甘油與預(yù)熱至80℃的注射用水800毫升進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；于上述分散液中，加入預(yù)熱至80℃的酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)1000毫克、大豆油200克，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至均勻分散；取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量1000毫升，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。
實(shí)施例4取12克卵磷脂、25克甘油與預(yù)熱至80℃的注射用水800毫升進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；于上述分散液中，加入預(yù)熱至80℃的酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)1000毫克、大豆油100克、中鏈甘油三酯100克，轉(zhuǎn)入高速組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至均勻分散；取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量1000毫升，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。
權(quán)利要求
1.含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球，它包括酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯、磷脂、純甘油和注射用水，其特征在于以上述藥理成分制備的脂質(zhì)微球注射液，給藥途徑為靜脈給藥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球，其特征在于每100毫升乳液中含酮洛芬或酮洛芬酯500～1000mg、注射用大豆油5.0～20.0克、注射用中鏈甘油三酯5.0～10.0克、卵磷脂0.8～1.6克、純甘油2.0～3.0克、余為注射用水，其注射脂質(zhì)微球中的粒徑范圍應(yīng)在0.05～0.3微米。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球，其特征在于酮洛芬酯是酮洛芬乙酰氧基乙酯、酮洛芬異丙酯或酮洛芬十二酯中的一種。
4.一種如權(quán)利要求1所述的含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球的制備工藝，其特征在于(1)將處方量的卵磷脂、甘油與預(yù)熱至80℃的適量注射用水進(jìn)行混合，轉(zhuǎn)入組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至卵磷脂均勻分散；(2)于上述分散液中，加入處方量的預(yù)熱至80℃的酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯，轉(zhuǎn)入組織搗碎機(jī)內(nèi)，以每分鐘20000轉(zhuǎn)攪拌3分鐘，反復(fù)3次，直至酮洛芬或酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯均勻分散；(3)取上述初乳加入預(yù)熱至80℃的注射用水使達(dá)全量，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機(jī)內(nèi)，勻化6次，取樣鏡檢，至油滴在0.5微米以下；(4)取上述乳劑灌封于20毫升輸液瓶中，充氮，105℃下滅菌45分鐘。
全文摘要
本發(fā)明是一種含有酮洛芬或酮洛芬酯的注射用脂質(zhì)微球注射液的制備工藝及配方，它具有較好的鎮(zhèn)痛、抗炎及解熱作用，且作用機(jī)制明確。它包括酮洛芬或一種酮洛芬酯、注射用大豆油、注射用中鏈甘油三酯、磷脂、純甘油和注射用水，以上述藥理成分制備的脂質(zhì)微球注射液，給藥途徑為靜脈給藥。每100毫升乳液中含酮洛芬或酮洛芬酯(相當(dāng)于酮洛芬)500～1000mg、注射用大豆油5.0～20.0克、注射用中鏈甘油三酯5.0～10.0克、卵磷脂0.8～1.6克、純甘油2.0～3.0克、余為注射用水，其注射脂質(zhì)微球中的粒徑范圍應(yīng)在0.05～0.3微米。注射脂質(zhì)微球中所含酮洛芬酯為實(shí)驗(yàn)室合成，本發(fā)明中所涉及的酮洛芬酯均可在體內(nèi)迅速轉(zhuǎn)化成原型藥物。本發(fā)明可制備成鎮(zhèn)痛、抗炎藥物。
文檔編號(hào)A61K31/185GK1709232SQ20051004667
公開(kāi)日2005年12月21日 申請(qǐng)日期2005年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月15日
發(fā)明者唐星, 何海冰 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)