專利名稱：一種v的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種VE煙酸酯(維生素E煙酸酯)原料精制方法、相對(duì)應(yīng)的質(zhì)量指標(biāo)及采用該精制原料所制備的制劑。
背景技術(shù)：
VE煙酸酯(維生素E煙酸酯)是生育酚(維生素E)和煙酸二者經(jīng)酯化而形成的化合物，國(guó)內(nèi)的生產(chǎn)廠家為“上海三維制藥有限公司”、“北京賽科藥業(yè)有限責(zé)任公司”、“西南合成制藥股份有限公司”、“東北制藥總廠”、“浙江巨泰藥業(yè)有限公司”、“廣州僑光制藥有限公司”、“浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠”、“海南西普制藥有限公司”，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下 維生素E煙酸酯為微循環(huán)活化劑。它不但具有維生素E(維生素E對(duì)四氯化碳肝毒性保護(hù)作用的評(píng)價(jià)1989，23(1)7～8；新型脂肪乳劑普外臨床1993，8(6)325～327；維生素E對(duì)乙醇性肝損傷大鼠肝線粒體SOD和MDA的影響中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志1997，7(4)221～223；維生素E抗大鼠四氯化碳所致肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究中華消化雜志1998，18(2)101～104；維生素E乳劑對(duì)肝臟星狀細(xì)胞口型前膠原和MMP/mRNA表達(dá)的影響世界華人消化雜志1999，7(12)1085；苦參素及聯(lián)合維生素E的抗肝纖維化作用及機(jī)制中華傳染病雜志2003，21(4)278～280中藥；缺血再灌注時(shí)維生素E乳劑抗氧化作用的實(shí)驗(yàn)研究中華創(chuàng)傷雜志1999，15(6)433～434)和煙酸(煙酸注射液對(duì)脂肪栓塞綜合征防治作用的實(shí)驗(yàn)研究中華醫(yī)學(xué)雜志1996，76(1)9～12；煙酸對(duì)大鼠腦缺血再灌性記憶再現(xiàn)障礙的保護(hù)作用中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志1996，10(3)178～180；煙酸對(duì)大鼠急性壞死性胰腺炎合并肺損傷的防治作用首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)1998，19(4)349～351；煙酸的降血脂及促纖維蛋白溶解作用臨床醫(yī)學(xué)1999，19(4)45～46)各自的生理作用，消除了因單獨(dú)使用維生素E或煙酸所引起的毒副作用，而且療效更持久、穩(wěn)定。其藥理作用促進(jìn)微循環(huán)，改善組織血氧供應(yīng)。抑制膽固醇合成，全面調(diào)節(jié)血脂水平。防止特異性血管的通透性亢進(jìn)，防止溶血。抑制血小板凝聚，保持血管的彈性。亦具有抗心率失常作用(Schlieper P，Tawfik H.(Institut fur Pharmakologie，Universitat Dusseldorf，F(xiàn)ed.Rep.of Germany.Arzneimittelforschung).Antiarrhythmic activity of alpha-tocopherol nicotinateand related compounds and their physico-chemical properties.1987Aug；37(8)920-3)。臨床可用于頭痛、耳鳴、感覺(jué)麻木、眩暈；四肢僵直、感覺(jué)肢冷。腦震蕩、輕微腦挫傷、腦外傷后遺癥。視網(wǎng)膜炎、循環(huán)障礙的中心性視網(wǎng)膜炎、糖尿病視網(wǎng)膜炎。高血壓、動(dòng)脈硬化、中風(fēng)、脂質(zhì)代謝異常、冠狀動(dòng)脈不全的血液循環(huán)障礙引起的各種癥狀疾病。預(yù)防腦中風(fēng)，延長(zhǎng)壽命。日本弘前大學(xué)醫(yī)學(xué)部卒中研究所長(zhǎng)達(dá)6年的臨床觀察證實(shí)每日服用維生素E煙酸酯300mg能大大減少腦血管意外的發(fā)生，生存率提高兩倍。北京醫(yī)院等四家醫(yī)院300例臨床驗(yàn)證結(jié)果表明其有效率分別為降低血脂方面(93.75％)；降低膽固醇方面(63％)；改善腦血流圖方面(93.75％)；對(duì)改善血液粘滯度的影響(68.75％)；對(duì)心率和血壓無(wú)明顯影響。
現(xiàn)有VE煙酸酯原料收載于部頒標(biāo)準(zhǔn)中(WS-10001-(HD-0473)-2002)，在標(biāo)準(zhǔn)中明確指明其外觀性狀為微黃色或淡黃色蠟狀固體；另外，標(biāo)準(zhǔn)中的含量測(cè)定方法為容量分析法，具體操作如下取本品約0.4g，精密稱定，加氯仿5ml與醋酐15ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯黃色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于53.58mg的C35H53NO3。該方法不僅操作麻煩，用藥量大，使用有毒有機(jī)溶劑氯仿，而且不能區(qū)分原料中的雜質(zhì)，不利于質(zhì)量控制。采用我們建立的HPLC法進(jìn)行檢查，按照面積歸一化法計(jì)算其純度小于99％，不利于制備高質(zhì)量的制劑，除此之外，現(xiàn)有的原料為微黃色或淡黃色蠟狀固體，可能會(huì)有HPLC不能檢查的雜質(zhì)，有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用現(xiàn)有的原料發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)，其可能原因?yàn)樵喜患兯?。至今未?jiàn)報(bào)道原料的純化(精制)方法，相對(duì)應(yīng)的高質(zhì)量原料制備的制劑也未能開(kāi)發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是對(duì)現(xiàn)有原料進(jìn)行精制，建立符合工業(yè)化大生產(chǎn)的純化(精制)方法，制訂高質(zhì)量原料的標(biāo)準(zhǔn)，并采用所純化的高質(zhì)量原料制備和研究相對(duì)應(yīng)的各種高質(zhì)量制劑。
本發(fā)明提供了一種具有保護(hù)血管、改善微循環(huán)、降血脂、清除自由基等作用的VE煙酸酯原料的精制方法，系將VE煙酸酯原料用適量的有機(jī)溶劑溶解，加入吸附劑或不加入吸附劑，室溫至80℃保溫?cái)嚢?～500分鐘，過(guò)濾除去吸附劑后，所得溶液于低溫(5℃～零下50℃度)放置1～100小時(shí)，收集沉淀，干燥即得。所述的有機(jī)溶劑包括C1～C5醇類，如乙醇、甲醇；C3～C8有機(jī)酸酯類、C1～C4有機(jī)酸類、C2～C8醚類、C3～C8酮類；吸附劑為活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土中的一種或幾種；純化后的VE煙酸酯原料由原來(lái)的微黃色或淡黃色蠟狀固體改變?yōu)榘咨令惏咨慕Y(jié)晶性疏松狀粉或細(xì)粒狀，其振實(shí)密度為0.2～0.5，最佳值為0.3～0.4；在色譜柱Diamonsil ODS C18柱(ID 4.6mm×200mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇∶乙醚＝92∶8；室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)264nm條件下進(jìn)行HPLC檢查，純度大于99％。X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.0～12.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0；或X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0、24.1～24.5；或X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0。
考慮到生育酚分為α、β、γ、δ型，其中α-生育酚的生物活性最強(qiáng)，而γ-生育酚約為α-生育酚生物活性的10％。為了確保臨床用藥的質(zhì)量，有必要控制其含量。根據(jù)大量的試驗(yàn)研究結(jié)果，我們將本發(fā)明專利的精制原料中α型VE煙酸酯含量控制在99％以上，以便確保藥物的療效。
采用所精制VE煙酸酯原料可以制備成不同制劑，包括乳劑(包括注射乳劑、口服乳劑)、硬膠囊、軟膠囊(包括自乳化)、片劑、顆粒劑、混懸劑。
所述的乳劑(包括注射乳劑和口服乳劑)為一種VE煙酸酯乳劑，含有效劑量的VE煙酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，其特征是藥用輔料包括油、乳化劑、助乳化劑、甘油、pH調(diào)節(jié)劑；藥∶油＝1∶3～1∶300。所述的油為C6～C28的植物油或動(dòng)物油(包括經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯，用量為1～30％(w/v)。乳化劑包括磷脂(蛋黃磷脂或大豆磷脂)(0.5％～5％)(w/v)、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)(0.1％～5％)(w/v)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0.1％～5％)(w/v)、DSPE-PEG、泊洛沙姆(0.05％～5％)(w/v)、吐溫類(0.1％～5％)(w/v)、司盤類中的一種或幾種混合物；口服乳劑還可以采用明膠、阿拉伯膠作為乳化劑；可以根據(jù)需要加入助乳化劑，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、膽酸(包括豬、鵝、熊去氧膽酸)中的一種或幾種混合物；pH調(diào)節(jié)劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉等中的一種或幾種，最佳pH范圍是4～9；所制乳劑的粒徑范圍是10nm～10um。
乳劑的制備工藝為1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將注射用油加熱至40-90℃，加入乳化劑(或加在水相中)，強(qiáng)烈攪拌至溶解，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌混勻。
2)在配制罐中制備水相將水和甘油在40～90℃下攪拌5min，使之完全混溶。
3)在40～80℃時(shí)，將油相加入水相(或水相加入油相)，強(qiáng)烈攪拌混勻，形成初乳。
4)調(diào)節(jié)pH值到4～9。
5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至520～600kg/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至100～140kg/cm2，(或微射流儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至4000-8000psi，第二步再調(diào)節(jié)至10000-16000psi)將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
所述的軟膠囊劑(包括自乳化)，其溶劑可以是C6～C18的植物油或動(dòng)物油(包括經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化軟膠囊劑中所采用的油為C8～C10的中鏈油，除此之外，尚有乳化劑、助乳化劑。所說(shuō)的乳化劑包括磷脂、高HLB表面活性劑，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、泊洛沙姆、吐溫類、蔗糖脂肪酸酯類、中的一種或幾種混合物；助乳化劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基異山梨酯中的一種或幾種混合物)；除此之外，還可以加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。
所述的硬膠囊劑，可以是直接填裝精制原料粉顆粒，也可以加入適當(dāng)?shù)妮o料混合后填裝；片劑、顆粒劑、混懸劑按照常規(guī)方法、采用常規(guī)輔料制備。
毒性比較按照2g/Kg的劑量對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，連續(xù)給藥30天，考察市售原料和精制原料的毒性。結(jié)果，三家市售原料組均有動(dòng)物死亡，而本專利的精制原料組健康，沒(méi)有出現(xiàn)死亡。即本發(fā)明專利的精制原料安全性遠(yuǎn)高于市售原料，利于臨床長(zhǎng)期用藥。
藥理作用動(dòng)物家兔50只，雌雄兼用；藥物尼莫地平注射液、VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑。
方法將家兔隨機(jī)分為五組，用帶線繡花針制造血栓，穿線前耳緣靜脈注射尼莫地平0.20mg/kg，VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑40mg/kg、20mg/kg、10mg/kg，共計(jì)注射兩次(手術(shù)前40分鐘和手術(shù)完畢)，結(jié)果用t-檢驗(yàn)考察，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。
表1.VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑對(duì)家兔體內(nèi)血栓的作用

結(jié)果表明VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑能夠顯著抑制家兔體內(nèi)血栓的形成。高劑量VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑可使血栓生成顯著減少，與生理鹽水組比較有非常顯著的差異(P＜0.01)，尼莫地平、中劑量和低劑量VE煙酸酯靜脈注射亞微乳劑與生理鹽水比較有顯著差異(0.01＜P＜0.05)，因此，注射用VE煙酸酯乳劑有良好的臨床應(yīng)用前景。
血漿及各組織中藥物濃度測(cè)定制劑乳劑；給藥途徑靜脈注射色譜柱Dismonsil C18柱(200mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇∶乙醚∶水＝89∶10∶1；流速1mL/min；柱溫室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)264nm。內(nèi)標(biāo)為維生素E醋酸酯。其典型色譜如附圖1。
血漿及各組織中各點(diǎn)的藥物濃度見(jiàn)表2。
表2.血藥濃度測(cè)定結(jié)果及體內(nèi)分布

VE煙酸酯在不同組織中的藥-時(shí)曲線圖見(jiàn)圖2、3。


圖1為血漿色譜2為VE煙酸酯在不同組織中的藥-時(shí)曲線3為24小時(shí)內(nèi)VE煙酸酯在不同組織中的血藥濃度曲線下面積4為實(shí)施例1的X-射線衍射5為實(shí)施例2的X-射線衍射6為實(shí)施例3的X-射線衍射7為實(shí)施例4的X-射線衍射8為實(shí)施例5的X-射線衍射9為VE煙酸酯(Sigma)HPLC圖譜圖10為VE煙酸酯原料HPLC圖譜圖11為VE煙酸酯精制品HPLC圖譜圖1中A.空白血漿；B空白血漿+VE煙酸酯；C血漿樣品+內(nèi)標(biāo)；峰1內(nèi)標(biāo)；峰2.VE煙酸酯小鼠體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明VE煙酸酯在肝中分布最多，其余依次是脾、腎、心、肺和腦。由此可知，VE煙酸酯在血和肝中有很高的量，從而解釋該藥可顯著抑制體內(nèi)血栓形成的原因，且可以預(yù)測(cè)VE煙酸酯在肝臟保護(hù)、抗肝纖維化治療方面將會(huì)發(fā)揮重要作用。另外，VE煙酸酯在心、脾、肺、腦中亦有一定的分布量，可用于預(yù)防與治療這些組織的病變。
粒度測(cè)定本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用PSS.NICOMpTM380作為測(cè)定粒徑的儀器。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是建立了一種VE煙酸酯的純化方法，所獲得的產(chǎn)品由原來(lái)的淡黃色提高為白色或類白色；用所建立的HPLC方法控制藥物的純度大于99％，從而大大提高了用藥安全性；以高質(zhì)量的VE煙酸酯原料制備的乳劑研究了VE煙酸酯靜脈注射后的體內(nèi)藥物動(dòng)力學(xué)和組織分布，在國(guó)內(nèi)外首次獲得了這些參數(shù)，為臨床應(yīng)用提供可靠的依據(jù)。
具體實(shí)施方案實(shí)施例1取口服VE煙酸酯原料10g，于30℃溶于400mL乙醇中，加入活性炭0.5g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續(xù)降溫至-15℃，放置7小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率76％，外觀為類白色，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.73％，純度為99.27％。其振實(shí)密度為0.33。
實(shí)施例2取口服VE煙酸酯原料10g，于20℃溶于300mL戊醇中，加入硅膠1g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，在-5℃左右加入粉狀晶種，攪拌15分鐘，繼續(xù)降溫至-5℃，放置8小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，得到精制VE煙酸酯。收率66％，外觀為類白色，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.76％，純度為99.24％。其振實(shí)密度為0.29。
實(shí)施例3取口服VE煙酸酯原料10g，于30℃溶于200mL甲醇中，加入活性炭2g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌20分鐘，繼續(xù)降溫至-25℃，放置6小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率81％，外觀為白色粉末，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.66％，純度為99.34％。振實(shí)密度0.38。
實(shí)施例4取口服VE煙酸酯原料10g，于30℃溶于50mL甲醇-乙酸乙酯(100∶1)中，加入活性炭0.05g、硅膠2g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，在5℃左右加入粉狀晶種，攪拌15分鐘，繼續(xù)降溫至-10℃，放置10小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率76％，外觀為白色粉末，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.61％，純度為99.39％。其振實(shí)密度為0.41。
實(shí)施例5取口服VE煙酸酯原料10g，于20℃溶于100mL甲醇-甲酸-乙醚-丙酮(100∶0.1∶1∶1)中，加入活性炭0.2g、硅藻土1g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌5分鐘，繼續(xù)降溫至-15℃，放置7小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率81％，外觀為白色粉末，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.83％，純度為99.17％。其振實(shí)密度為0.46。
實(shí)施例6取口服VE煙酸酯原料10g，于35℃溶于150mL乙醇中，加入活性炭0.5g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，攪拌10分鐘，繼續(xù)降溫至-25℃，放置6小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率81％，外觀為白色粉末，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.83％，純度為99.17％。其振實(shí)密度為0.36。
實(shí)施例7取口服VE煙酸酯原料10g，于20℃溶于75mL丙酮中，加入活性炭0.2g，攪拌，充分混勻，抽濾除去活性炭，將濾液降溫，在-5℃左右加入粉狀晶種，攪拌5分鐘，繼續(xù)降溫至-25℃，放置6小時(shí)，減壓抽濾，回收溶劑，干燥，得到精制VE煙酸酯。收率81％，外觀為白色粉末，HPLC測(cè)定有關(guān)物質(zhì)0.83％，純度為99.17％。其振實(shí)密度為0.31。
實(shí)施例8X-射線衍射測(cè)定(儀器日本理學(xué)D/max 2500PC型X-射線衍射儀)，X-射線衍射圖譜見(jiàn)附圖4-8，X-射線衍射數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。
表3.X-射線衍射數(shù)據(jù)

實(shí)例9熔點(diǎn)測(cè)定儀測(cè)定熔點(diǎn)及DSC分析按照常規(guī)熔點(diǎn)測(cè)定方法測(cè)定精制原料的熔點(diǎn)；采用差示掃描量熱儀(DSC)研究精制原料的熱分析特征。結(jié)果見(jiàn)表4。
表4.VE煙酸酯的熔點(diǎn)與DSC分析


實(shí)例10維生素E煙酸酯HPLC純度檢查儀器P230高壓恒流泵；UV200 II紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器；色譜柱DiamonsilODS C18柱(ID 4.6mm×200mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇∶乙醚＝92∶8；室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)264nm；濃度0.2mg/ml。結(jié)果見(jiàn)附圖。
實(shí)例11高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢查VE煙酸酯質(zhì)量稱取VE煙酸酯(Sigma)適量，用流動(dòng)相稀釋配制成5mg/mL的溶液，濾過(guò)，即得VE煙酸酯溶液。進(jìn)樣20μL，記錄譜圖。
由圖可知，色譜圖主要由三種物質(zhì)A、B和C組成，物質(zhì)A、B和C的出峰時(shí)間分別為35.86min、37.91min和33.14min。
從一級(jí)全掃描質(zhì)譜圖中可以找到m/z 536.4、m/z 558.3、m/z 1071.2和m/z 1093.3的離子，分別為[M+H]+、[M+Na]+、[2M+H]+和[2M+Na]+，由于C有兩種同位素12C和13C，所以m/z 537.5和m/z 1094.3的離子為[M+1]+和[2M+Na]+。由二級(jí)全掃描質(zhì)譜圖中可以找到其二級(jí)碎片離子A物質(zhì)為m/z 270和m/z 430.3的離子；B物質(zhì)為m/z 270和m/z 430.2的離子；C物質(zhì)為m/z 270、m/z 430.3、m/z 284.1和m/z 205.1的離子。由二級(jí)質(zhì)譜圖可知三種物質(zhì)的分子量相同；A物質(zhì)和B物質(zhì)的質(zhì)譜行為完全相同；C物質(zhì)的主要二級(jí)碎片離子與A、B兩物質(zhì)相同。因?yàn)門N本身是外消旋體，所以可以推斷A物質(zhì)和B物質(zhì)是VE煙酸酯的對(duì)映異構(gòu)體。而C物質(zhì)的譜圖中m/z 270和m/z 430.3的碎片離子的相對(duì)豐度與A、B兩物質(zhì)的不同，且存在其它碎片離子(可以用TN的結(jié)構(gòu)式解析出來(lái))。所以可以推斷，C物質(zhì)是VE煙酸酯的同分異構(gòu)體，且結(jié)構(gòu)相似，認(rèn)為可能是其非對(duì)映異構(gòu)體。
實(shí)施例12VE煙酸酯乳劑的制備成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，磷脂0.9g，泊洛沙姆0.3g，豆油12.5g，甘油2.2g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將豆油加熱至90℃，加入磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至50℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將泊洛沙姆和甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在40℃時(shí)，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌12min，形成初乳；
4)用適量的氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH值至9；5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至120kg/Gm2，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為268nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例13成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，磷脂0.8g，HS150.4g，茶油20g，甘油2g，鹽酸適量，其余為注射用水，共100ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將茶油加熱至80℃，加入磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至45℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將HS 15和甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在45℃時(shí)，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌17min，形成初乳；4)用適量的鹽酸溶液，調(diào)節(jié)PH值至4；5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至580kg/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至140kg/cm2，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為289nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例14成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，磷脂1.2g，中鏈油辛葵酸甘油酯與長(zhǎng)鏈油大豆油(比例為1∶1)25g，甘油2.3g，磷酸鈉適量，其余為注射用水，共100ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將橄欖油加熱至70℃，加入磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至40℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在40℃時(shí)，將油相加入水相，強(qiáng)烈攪拌16min，形成初乳；4)用適量的磷酸鈉溶液，調(diào)節(jié)PH值至7；5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至520/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至100kg/cm2，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為386nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例15成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，HS15 5g，泊洛沙姆2g，紅花油12.5g，甘油24g，醋酸鈉適量，其余為注射用水，共1000ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將紅花油加熱至45℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將HS15、泊洛沙姆和甘油加入注射用水中，在70℃下攪拌15min，使之完全混溶；3)在45℃時(shí)，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌22min，形成初乳；4)用適量的醋酸鈉溶液，調(diào)節(jié)PH值至7.5；5)過(guò)微射流儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至6000psi，第二步再調(diào)節(jié)至14000psi，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為186nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例16成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，HS156g，紅花油25g，甘油21g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共1000ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將紅花油加熱至45℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將HS15和甘油加入注射用水中，在85℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在45℃時(shí)，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌14min，形成初乳；4)用適量的氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)PH值至8；5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至140kg/cm2，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為262nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例17成分為有效劑量的VE煙酸酯5g，磷脂1.4g，中鏈油15g，甘油1.2g，氫氧化鈉適量，其余為注射用水，共100ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將中鏈油加熱至80℃，加入磷脂，強(qiáng)烈攪拌至溶解，降溫至45℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將甘油加入注射用水中，在80℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在45℃時(shí)，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌18min，形成初乳；4)用適量的氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)pH值至8.5；5)過(guò)微射流儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至8000psi，第二步再調(diào)節(jié)至16000psi，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝(50mg/ml、100mg/2ml、500mg/10mi)，滅菌，即得本品。
平均粒徑為238nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例18成分為有效劑量的VE煙酸酯2.5g，泊洛沙姆14g，豆油12.5g，甘油48g，磷酸鈉適量，其余為注射用水，共2000ml。
制造方法1)在配制罐中制備油相在配制罐中，將豆油加熱至45℃，加入藥物，強(qiáng)烈攪拌5min；2)在配制罐中制備水相將泊洛沙姆和甘油加入注射用水中，在80℃下攪拌5min，使之完全混溶；3)在45℃時(shí)，將水相加入油相，強(qiáng)烈攪拌15min，形成初乳；4)用適量的磷酸鈉溶液，調(diào)節(jié)PH值至6；5)過(guò)均質(zhì)儀，第一步調(diào)節(jié)勻化壓力至600kg/cm2，第二步再調(diào)節(jié)至140kg/cm2，將溶液反復(fù)勻化，得到均勻的乳劑，過(guò)微孔濾膜，封裝，滅菌，即得本品。
平均粒徑為127nm，不含大于5um的乳粒。所得乳劑可以注射也可以口服。
實(shí)例19硬膠囊劑將實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?所得精制品與10％微粉硅膠混合均勻后，直接裝填于硬膠囊中即得。每個(gè)規(guī)格50mg或100mg。
實(shí)例20片劑將實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?所得精制品與20％多孔淀粉、10％微晶纖維素、5％PVPP、10％微粉硅膠混合均勻后，直接壓片即得。每個(gè)規(guī)格50mg或100mg。
實(shí)例21顆粒劑將實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?所得精制品與20％蔗糖、5％糊精、5％羧甲基纖維素鈉、2％HPMC混合均勻后，按照濕法制粒，干燥、整粒即得。每個(gè)規(guī)格50mg或100mg。
實(shí)例22混懸劑將實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?所得精制品與50％蔗糖、5％HPMC混合均勻后，加入0.1％尼泊金乙酯，或0.1苯甲酸，并加入蒸餾水，用膠體磨分散即得。每個(gè)規(guī)格50mg或100mg。
實(shí)例23軟膠囊劑或自乳化軟膠囊劑將實(shí)施例1或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?或?qū)嵤├?所得精制品與C6～C18的植物油或動(dòng)物油(包括經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯(Delios)(稱為中鏈三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化軟膠囊劑中所采用的油為C8～C10的中鏈油，除此之外，尚有乳化劑、助乳化劑。所說(shuō)的乳化劑包括磷脂、高HLB表面活性劑，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、DSPE-PEG、泊洛沙姆、吐溫類、蔗糖脂肪酸酯類、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯、聚氧乙烯(20)山梨醇油酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯中的一種或幾種混合物；助乳化劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基異山梨酯中的一種或幾種混合物)；除此之外，還可以加入抗氧化劑，包括丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。壓丸即得。每個(gè)規(guī)格50mg或100mg。
權(quán)利要求
1.VE煙酸酯原料精制方法，其特征在于將VE煙酸酯原料用有機(jī)溶劑溶解，加入吸附劑或不加入吸附劑，室溫至80℃保溫?cái)嚢?～500分鐘，過(guò)濾除去吸附劑后，所得溶液于低溫5℃～零下50℃度放置1～100小時(shí)，收集沉淀，干燥即得，純化后的VE煙酸酯原料為白色至類白色的結(jié)晶性疏松狀粉或細(xì)粒狀，其振實(shí)密度為0.2～0.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的VE煙酸酯原料精制方法，其特征在于所述有機(jī)溶劑包括C1～C5醇類，乙醇、甲醇；C3～C8有機(jī)酸酯類、C1～C4有機(jī)酸類、C2～C8醚類、C3～C8酮類；吸附劑為活性炭、硅膠、氧化鋁、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的VE煙酸酯原料精制方法，其特征在于純化后的VE煙酸酯原料在色譜柱Diamonsil 0DS C18柱(ID 4.6mm×200mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇∶乙醚＝92∶8；室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)264nm條件下進(jìn)行HPLC檢查，純度大于99％；X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.0～12.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0；或X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0、24.1～24.5；或X衍射特征峰2θ角為3.5～3.7、10.5～11.5、12.5～13.5、14.0～15.0、15.0～16.0、16.0～17.0、17.0～18.0、18.0～19.0、19.0～19.5、19.5～20.0、20.0～21.0、22.0～22.5、23.0～24.0。
4.一種VE煙酸酯乳劑，其特征在于含有效劑量的純化后的VE煙酸酯作為藥物，并含有藥用輔料，藥用輔料包括油、乳化劑、等滲調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、抗氧劑、助乳化劑或不含有助乳化劑、；藥∶油＝1∶3～1∶300。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的VE煙酸酯乳劑，其特征在于所述的油為C6～C28的植物油或動(dòng)物油，包括經(jīng)過(guò)結(jié)構(gòu)改造和水解后的植物油、甘油三酸酯，椰子油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或Delios，稱為中鏈三甘油酯；也包括脂肪酸的衍生物，油酸乙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、亞油酸乙酯、油酸山梨醇酯、油酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油單酯或雙酯、椰子油C8/C10丙二醇雙酯、椰子油C8/C10甘油三酯、椰子油C8/C10甘油三酯、純化乙酰化的單甘油酯、純化向日葵油單甘油酯等中的一種或幾種混合物，用量為1～30％(w/v)；所述的乳化劑包括磷脂(0.5％～5％)(w/v)、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)(0.1％～5％)(w/v)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0.1％～5％)(w/v)、泊洛沙姆(0.05％～5％)(w/v)、吐溫類(0.1％～5％)(w/v)、司盤類中的一種或幾種混合物；口服乳劑還可以采用明膠、阿拉伯膠、西黃嗜膠、人血清白蛋白作為乳化劑；可以根據(jù)需要加入/或不加入助乳化劑，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕櫚酸、亞油酸、亞麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、膽酸(包括豬、鵝、熊去氧膽酸)中的一種或幾種混合物；還可以加入防腐劑，尼泊金酯類、苯甲酸類。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的VE煙酸酯乳劑，其特征在于其等滲調(diào)節(jié)劑是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇中的一種或幾種混合物；pH調(diào)節(jié)劑是鹽酸、氫氧化鈉、醋酸、醋酸鈉、磷酸、磷酸鈉、檸檬酸、檸檬酸鈉等中的一種或幾種，pH范圍是3～9；抗氧劑為惰性氣體、EDTA及其鹽類、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C及其衍生物，維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。
7.一種VE煙酸酯軟膠囊劑，其特征在于所述的軟膠囊劑或自乳化軟膠囊劑，其溶劑可以是C6～C18的植物油或動(dòng)物油、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄欖油、大豆油、紅花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或Delios，稱為中鏈三甘油酯；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯；自乳化軟膠囊劑中所采用的油為C8～C10的中鏈油，除此之外，尚有乳化劑、助乳化劑；所說(shuō)的乳化劑包括磷脂、高HLB表面活性劑，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羥基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)、維生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、DSPE-PEG、泊洛沙姆、吐溫類、蔗糖脂肪酸酯類、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯、聚氧乙烯(20)山梨醇油酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯中的一種或幾種混合物；助乳化劑(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基異山梨酯中的一種或幾種混合物)；除此之外，還可以加入抗氧化劑，丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、維生素C棕櫚酸酯中的一種或幾種混合物。
8.一種VE煙酸酯硬膠囊劑，其特征在于硬膠囊劑可以是直接填裝精制原料粉顆粒，也可以加入適當(dāng)?shù)妮o料混合后填裝。
9.一種VE煙酸酯制劑，其特征在于用純化后的VE煙酸酯原料按照常規(guī)方法制備片劑、顆粒劑、混懸劑、注射或口服乳劑、脂質(zhì)體，脂質(zhì)納米粒，包括自乳化軟膠囊、片劑、顆粒劑、混懸劑。
10.一種如權(quán)利要求1所述的精制VE煙酸酯的用途，其特征在于VE煙酸酯可用于制備預(yù)防與治療血栓形成、高血脂癥、動(dòng)脈粥樣硬化防治、肝保護(hù)或修復(fù)及其他心腦血管疾病預(yù)防與治療的藥物，包括用于制備治療高血壓、腦動(dòng)脈硬化、腦中風(fēng)、腦外傷后遺癥、脂質(zhì)代謝異常、冠脈功能不全和血液循環(huán)障礙引起的各種疾病的藥物。
全文摘要
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文檔編號(hào)A61K9/10GK1757637SQ20051004692
公開(kāi)日2006年4月12日 申請(qǐng)日期2005年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月18日
發(fā)明者鄧意輝, 鄭少輝 申請(qǐng)人:沈陽(yáng)藥科大學(xué)