專利名稱：多羥基茋類化合物的制備和抑制sars病毒藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類藥用多羥基茋類新化合物及其制備方法和用途。該類新化合物用于抑制和殺滅SARS冠狀病毒。
背景技術(shù)：
茋類化合物為具有均二苯乙烯母核的一類化合物的總稱。在自然界，多羥基茋類化合物存在藜蘆、大黃、虎仗、首烏等許多中草藥中和葡萄、花生、桑椹等食物中，具有抗菌、抗氧化、降血脂、抗血栓、抗腫瘤、殺蟲、提高免疫能力等諸多生理活性。
在WO 02/057219專利中，公開了一類茋類化合物作為T細(xì)胞、嗜中性細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及相應(yīng)的細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)器，用于治療免疫性、發(fā)炎及自身免疫的疾病。WO02/057219專利公開的結(jié)構(gòu)中，只有一個苯環(huán)中有3，5位含有烷氧基或羥基取代基，另一苯環(huán)基本為烷烴和鹵代烴取代，另外雙鍵上一般有三取代或四取代。
在CN 200410022517.7專利公開中，發(fā)現(xiàn)姜黃素在1％-100％劑量范圍內(nèi)制備治療或預(yù)防SARS的應(yīng)用。
在CN200410022518.1專利公開中，發(fā)現(xiàn)黃烷醇多酚在1％-100％劑量范圍內(nèi)制備治療或預(yù)防SARS的應(yīng)用。
在Inhibition of SARS-coronavirus infection in vitro byS-nitroso-N-acetylpenicillamine，a nitric oxide donor compound文章中[Intrenational Journalof Infectious Diseases(2004)8，223-226(刊源)]該文對S-亞硝基-N-乙酰基青霉胺(SANP)和硝普鹽(SNP)兩個NO供體化合物對SARS(Severe actute respiratory syndrome)的冠狀病毒鏈Frankfurt-1在非洲綠猴上復(fù)制(Vero E6)細(xì)胞進(jìn)行抑制活性實驗和毒性實驗，其中S-亞硝基-N-乙?；嗝拱?SANP)，其中SANP化合物50％抑制SARS-CoV濃度IC50為222.3±83.7μM，50％有毒濃度為587.7±22.5μM，選擇系數(shù)為2.6。而SANP未檢測到對SARS-CoV有作用。該研究的化合物與本發(fā)明申請的多羥基茋和多羥基氮雜茋化合物可抑制SARS-CoV無相關(guān)性。
本發(fā)明的目的是開發(fā)一類至今未見報導(dǎo)的多羥基茋類化合物及其制備方法和用于抗非典型肺炎SARS冠狀病毒藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是一種帶有取代基的多羥基茋類化合物，該類化合物具有下列結(jié)構(gòu)通式(I) 通式(I)中當(dāng)X＝N原子時，R1＝0；R2-R10＝相同或不同的H、OH、OR1、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2；當(dāng)X＝C原子時，R1-R10＝相同或不同的H、OH、OR1、C1-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2。特別優(yōu)選的化合物是1、(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶； 2、(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶；
3、(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶；(簡稱R0303) 4、(E)-2-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶； 5、(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶； 6、(E)-5-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；又名(E)-3，3’，5，5’-四羥基茋 7、(E)-4-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；又名(E)-2，3’，4，5’-四羥基茋 8、(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(簡稱R0305)又名(E)-2，3’，5，5’-四羥基茋
9、(E)-4-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；又名(E)-2，4，4’-三羥基茋 10、(E)-4-[2-(2，4-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；又名(E)-2，2’，4，4’-四羥基茋 11、(E)-4-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；又名(E)-2’，5’-二甲氧基-2，4-二羥基茋 12、(E)-5-[2-(4-甲氧基-3-((E)-3-甲基-1-丁烯基)苯基)乙烯基]-1，3-二甲氧基苯；又名(E)-3-[(E)-3-甲基-1-丁烯基]-3’，4，5’-三甲氧基茋 13、(E)-4-[2-(4-羥基-苯基)乙烯基]-2((E)-3-甲基-丁烯基)苯酚；又名(E)-3-((E)-3-甲基-丁烯基)-4，4’-二羥基茋
14、(E)-2-[2-(4-甲氧基-3-((E)-3-甲基-1-丁烯基)苯基)乙烯基]-1，4-二甲氧基苯；又名(E)-3’-((E)-3-甲基-1-丁烯基)-2，4’，5-三甲氧基茋 其式I化合物的制備方法如反應(yīng)式1-3所示，其中的取代基除特別指明外，均如前限定。
多羥基茋類化合物的制備路線可用下列反應(yīng)式表示 反應(yīng)式1
將具有烷氧取代基的芐基氯或溴化物與亞磷酸三乙酯，按摩爾比1∶1.5-15的比例加到反應(yīng)器中，在少量四丁基碘化銨存在下，于95-125℃，攪拌6-18h，然后，減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，得膦酸酯產(chǎn)物III。
反應(yīng)式2 產(chǎn)物III膦酸酯溶于干燥四氫呋喃(THF)中，冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH，攪拌。攪拌下緩慢滴加取代的烷氧基苯甲醛的THF溶液，滴加完，將反應(yīng)混合物升至室溫，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液用HCl溶液中和至pH4-6。用乙酸乙酯萃取、有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，回收溶劑，殘留物重結(jié)晶，得精制的烷氧基茋類化合物II。
反應(yīng)式3 將精制烷氧基茋類化合物II用無水二氯甲烷溶解，冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3的無水二氯甲烷溶液20mL，滴加完畢，升至25-28℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入冰水中，攪拌，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH5-8，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物I，可對溶劑進(jìn)行對I重結(jié)晶。
在上述反應(yīng)通式中當(dāng)X＝N原子時，R’1＝0；R’2-R’10＝相同或不同的H、OR1、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；
R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2；當(dāng)X＝C原子時，R’1-R’10＝相同或不同的H、OR1、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2。
本發(fā)明的多羥基茋類化合物由于含有活性成份，可與一種或多種藥物賦形劑或輔劑構(gòu)成的組合物，使這種藥物組合物里的多羥基茋為0.001-50％重量百分含量，適用于抑制和殺死SARS冠狀病毒。
抗SARS活性試驗實例細(xì)胞Vero E6細(xì)胞，北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院培養(yǎng)保存。
病毒BJ9-2b，北京工業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與生物工程學(xué)院培養(yǎng)保存(中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院贈送)藥物待測藥物先測定最大無毒濃度，檢測抗病毒活性時，以最大無毒濃度的藥物2-4倍稀釋4-5個濃度。
1.抗SARS活性的檢測將Vero E6細(xì)胞用含10％Hyclone胎牛血清Eagles’培養(yǎng)液稀釋成細(xì)胞懸液，每毫升(ml)含1.2×105細(xì)胞，加入平底96孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)，每孔0.1ml，于37℃，5％CO2溫箱培養(yǎng)24-48小時后細(xì)胞長成單層，每孔加入100TCID50BJ-2B病毒，吸附2小時，吸取上清(棄去未進(jìn)入細(xì)胞之游離病毒)，選用最大無毒濃度藥物(TC0)R0303和R0305，2倍稀釋3個濃度，每個濃度3復(fù)孔，每孔100μl，分別加入96孔板，于37℃，5％CO2溫箱繼續(xù)培養(yǎng)，72小時后，采用CPE法進(jìn)行結(jié)果判定，即當(dāng)病毒對照組的孔75％細(xì)胞出現(xiàn)病變時，觀察藥物組的病變，以75％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?++”，50％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?+”，25％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?”，無病變出現(xiàn)為“-”，試驗分別設(shè)置病毒對照組、藥物對照組、細(xì)胞對照組。最后計算50％抑制病毒病變濃度(IC50)及治療指數(shù)(TI)。
2.細(xì)胞毒的檢測方法基本同上，但細(xì)胞鋪板后，24-48小時后細(xì)胞長成單層，不感染病毒，僅加不同濃度的藥物，于37℃，5％CO2溫箱繼續(xù)培養(yǎng)，72小時后，采用CPE法判斷結(jié)果，75％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?++”，50％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?+”25％細(xì)胞出現(xiàn)病變?yōu)椤?”，無病變出現(xiàn)為“-”，試驗分別設(shè)置藥物對照組、細(xì)胞對照組，最后測定出最大無毒濃度。
見下列結(jié)果表1表1藥物抗病毒作用結(jié)果表

化合物R0303與R0305在2.0mg/ml濃度時，無細(xì)胞毒作用；在2.0mg/ml、1.0mg/ml、0.5mg/ml濃度時，Vero E6細(xì)胞中SARS冠狀病毒被殺滅，無法繁殖。
本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可分為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮膚、腹膜或直腸等，優(yōu)選口服。
本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可分為注射給藥。注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射和皮內(nèi)注射等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑型、混懸劑型。其它劑型例如片劑、膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、栓劑、凍干粉劑等。
本發(fā)明的化合物可以制成普通制劑，也可以是緩釋劑、控釋劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、白陶土、微晶纖維素、硅酸鋁等；潤濕劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀粉、碳酸氫鈉與枸杞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進(jìn)劑，例如季銨鹽、十二烷基硫酸鈉等；潤滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。其它載體如聚丙烯酸樹脂、脂質(zhì)體、水溶性載體如PEG4000和PEG6000、PVP等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片、例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片或雙片層和多片層。
例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高嶺土、滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃耆膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。
例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成份本發(fā)明化合物與上述的各利載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
例如，將本發(fā)明化合物制成注射用制劑，如溶液劑、混懸溶液劑、乳劑、凍干粉劑，這種制劑可以是含水或非水的?？珊环N和/或多種藥效學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑。如稀釋劑可選自水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的異硬脂醇、多氧化的異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、Polyoxyl 35等。另外，為了制備等滲注射液，可以向注射用制劑中添加適量的氯化鈉、葡萄糖或甘油，此外，還可以添加常規(guī)的助溶劑、緩沖劑、pH調(diào)節(jié)劑等。這些輔料是本領(lǐng)域常用的。
此外，如需要，也可以向藥物中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑、甜味劑或其他材料。
為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。
本發(fā)明提取物或化合物、藥物組合物的給藥劑量取決于許多因素，例如所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動物的性別、年齡、體重、性格及個體反應(yīng)，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的，因此本發(fā)明的治療劑量可以有大范圍的變化。一般來講，本發(fā)明藥效學(xué)成分的使用劑量是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明化合物組合物中最后的制劑中所含有的實際藥物數(shù)量，加以適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以達(dá)到其治療有效量的要求，完成本發(fā)明的化合物的用量，最優(yōu)選為0.1-20mg/Kg體重。上述劑量可以單一劑量形式或分成幾個，例如二、三或四個劑量形式給藥，這受限于給藥醫(yī)生的臨床經(jīng)驗以及包括運(yùn)用其它治療手段的給藥方案。由此可見，含有本發(fā)明披露的通式化合物多會產(chǎn)生本發(fā)明治療或者預(yù)防SARS的作用。
具體實施例方式
實施例1(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶；(又名(E)-4，6-二甲基-3’，5，5’-三羥基茋-2-氮)3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶-2-甲基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入2-氯甲基-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.01mol)、亞磷酸三乙酯2.5g(0.016mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-110℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余淺橙紅色粘稠物直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2-[2-(3，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于50mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加3，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液30mL。約1.5h滴加完畢，將反應(yīng)混合物升至室溫(14-25℃)，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至pH6，以乙酸乙酯萃取(4×50mL)，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇瑲埩粑镆砸掖歼M(jìn)行重結(jié)晶，得白色針狀晶體，產(chǎn)率34.7％，mp94-95℃。1HNMR(CDCl3)δ2.27(s，3H，4-CH3)，2.35(s，3H，6-CH3)，3.77(s，3H，5-OCH3)，3.83(s，6H，3，5-OCH3)，6.42(t，1H，J＝2.0Hz，4-H)，6.75(d，2H，J＝2.0Hz，2，6-H)，8.26(s，1H，3-H)，7.29，7.63(d，2H，J＝15.6Hz，α，β-H)。
(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2-[2-(3，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.001mol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3(3.4mL，36mmol)的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至25-28℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，呈微黃色，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，淺黃色無定形粉末，產(chǎn)率94.0％，1HNMR(DMSO-d6)δ6.47(d，2H，J＝2.2Hz，2，6-H)，6.23(t，1H，J＝2.2Hz，4-H)，7.56(s，1H，3-H)，7.05，7.11(d，2H，J＝16.63Hz，α，β-H)，1.91(s，3H，4-CH3)，2.06(s，3H，6-CH3)。
實施例2(E)-2-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶(又名(E)-4，6-二甲基-4，5’-二羥基茋-2-氮)3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶-2-甲基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入2-氯甲基-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.01mol)，亞磷酸三乙酯2.5g(0.016mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-110℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余淺橙紅色粘稠物直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于50mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加4-甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液30mL。約1.5h滴加完畢，將反應(yīng)混合物升至室溫(14-25℃)，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取(4×50mL)，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇?，殘留物以乙醇進(jìn)行重結(jié)晶，得黃色極細(xì)針狀晶體，產(chǎn)率60.6％，mp131-133℃。IR(KBr)cm-12983，2840，2672，2560，1687，1604，1515，1468，1428，1305，1264，1171，1089，1027，970，930，845，，824，773，634，616。
(E)-2-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.001mol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3(3.4mL，36mmol)的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至40-42℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，呈微黃色，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，淺黃色無定形粉末，產(chǎn)率50.2％，1HNMR(DMSO-d6)δ6.81(d，2H，J＝8.4Hz，2，6-H)，7.47(d，2H，J＝8.4Hz，3，5-H)，7.51(s，1H，3-H)，7.03，7.17(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)，1.89(s，3H，4-CH3)，2.05(s，3H，6-CH3)。
實施例3(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶(又名(E)-4，6-二甲基-2，5，5’-三羥基茋-2-氮)3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶-2-甲基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入2-氯甲基-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.01mol)，亞磷酸三乙酯2.5g(0.016mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-110℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余淺橙紅色粘稠物直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于50mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加2，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液30mL。約1.5h滴加完畢，將反應(yīng)混合物升至室溫(14-25℃)，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至pH7，以乙酸乙酯萃取(4×50mL)，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥。回收溶劑，殘留物為淺金黃油狀，不結(jié)晶。
(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-甲氧基吡啶(0.001mol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3(3.4mL，36mmol)的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至32℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，呈微黃色，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，淺黃色無定形粉末，產(chǎn)率62.8％。1HNMR(DMSO-d6)δ6.719(d，1H，J＝8.5Hz，3-H)，6.950(d，1H，J＝3.0Hz，6-H)，6.608(dd，1H，J＝3.0Hz，J＝8.5Hz，4-H)，7.473(s，1H，3-H)，7.143，7.392(d，2H，J＝16.6Hz，α，β-H)，1.887(s，3H，4-CH3)，2.031(s，3H，6-CH3)。
實施例4(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶(又名(E)-3’，5，5’，6-四羥基茋-2-氮)3，4-二甲氧基吡啶-2-甲基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入2-氯甲基-3，4-二甲氧基吡啶(0.01mol)，亞磷酸三乙酯2.5g(0.016mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-110℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余淺橙紅色粘稠物直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2-[2-(3，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，4-二甲氧基吡啶的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于50mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加3，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液30mL。約1.5h滴加完畢，將反應(yīng)混合物升至室溫(14-25℃)，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至pH6，以乙酸乙酯萃取(4×50mL)，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇瑲埩粑镆砸掖歼M(jìn)行重結(jié)晶，得黃色極細(xì)針狀晶體，產(chǎn)率18.9％，mp88-89.5℃。1HNMR(CDCl3)δ3.83(s，6H，3，5-OCH3)，3.88(s，3H，5-OCH3)，3.93(s，3H，6-OCH3)，6.43(t，1H，J＝2.0Hz，4-H)，6.78(d，2H，J＝2.0Hz，2，6-H)，6.75(d，1H，J＝5.2Hz，4-H)，8.27(d，1H，J＝5.2Hz，3-H)，7.47，7.71(d，2H，J＝16.0Hz，α，β-H)。
(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2-[2-(3，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，4-二甲氧基吡啶(0.001mol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3(3.4mL，36mmol)的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至20-26℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，呈微黃色，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，淺黃色無定形粉末，產(chǎn)率98.9％，1HNMR(DMSO-d6)δ6.17(d，2H，J＝2.2Hz，2，6-H)6.22(t，1H，J＝2.2Hz，4-H)，7.51(d，1H，J＝6.5Hz，3-H)，6.18(d，1H，J＝6.5Hz，4-H)，6.99，7.54(d，2H，J＝16.5Hz，α，β-H)。
實施例5(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶(又名(E)-2’，5，5’，6-四羥基茋-2-氮)3，4-二甲氧基吡啶-2-甲基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入2-氯甲基-3，4-二甲氧基吡啶(0.01mol)，亞磷酸三乙酯2.5g(0.016mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-110℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余淺橙紅色粘稠物直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，4-二甲氧基吡啶的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于50mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加3，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液30mL。約1.5h滴加完畢，將反應(yīng)混合物升至室溫(14-25℃)，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10mL，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至pH6，以乙酸乙酯萃取(4×50mL)，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液(30mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇?，殘留物以甲醇進(jìn)行重結(jié)晶，得微黃色柱狀晶體，產(chǎn)率20.7％，mp100-101℃。1HNMR(CDCl3)δ3.82(s，1H，5-OCH3)，3.85(s，1H，2-OCH3)，3.87(s，1H，5-OCH3)，3.92(s，1H，6-OCH3)，6.73(d，1H，J＝5.6Hz，4-H)，7.23(d，1H，J＝2.4Hz，6-H)，6.83(m，1H，4-H)，6.84(d，1H，J＝2.8Hz，3-H)，8.28(d，1H，J＝5.6Hz，3-H)，8.08，7.52(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)。
(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2-[2-(3，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-3，4-二甲氧基吡啶(0.001mol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加BBr3(3.4mL，36mmol)的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至25-35℃，攪拌3-6h左右。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，呈微黃色，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，淺黃色無定形粉末，產(chǎn)率58.3％，1HNMR(DMSO-d6)δ6.90(d，1H，J＝8.8Hz，3-H)，6.73(d，1H，J＝3.0Hz，6-H)，6.58(dd，1H，J＝3.0Hz，J＝8.8Hz，4-H)，7.47(d，1H，J＝6.7Hz，3-H)，6.18(d，1H，J＝6.7Hz，4-H)，7.16，7.54(d，2H，J＝16.9Hz，α，β-H)。
實施例6(E)-2，3’，5，5’-四羥基茋3，5-二甲氧基芐基膦酸酯的合成100mL三口燒瓶中加入3，5-二甲氧基芐基溴(0.01mol)，亞磷酸三乙酯(0.015mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至110-115℃，反應(yīng)6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2，3’，5，5’-四甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加3，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液25mL。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8小時。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇?，殘留物中加少量乙醇-正己烷重結(jié)晶，得乳白色粉末，酯化、縮合兩步反應(yīng)總收率72.6％，mp54-55℃。1HNMR(CDCl3)δ3.83(s，12H，OCH3)，6.39(t，1H，J＝2.0Hz，4-H)，6.70(d，2H，J＝2.0Hz，2，6-H)，6.80(dd，1H，J＝2.8Hz，J＝8.4Hz，4-H)，6.83(d，1H，J＝8.4Hz，3-H)，7.13(d，1H，J＝2.8Hz，6-H)，7.42，7.02(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)。
(E)-2，3’，5，5’-四羥基茋的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-2，3’，5，5’-四甲氧基茋(4mmol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加2.7mL BBr3的無水二氯甲烷溶液20mL，約1h滴加完畢，升至25-30℃，攪拌6小時。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，產(chǎn)生白色沉淀。以乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，以丙酮—水精制，得淺粉色粉末，產(chǎn)率91.9％，mp212-214℃。1HNMR(DMSO-d6)δ6.29(s，1H，4-H)，6.53(d，2H，J＝2.0Hz，2，6H)，6.60(m，1H，4-H)，6.71(d，1H，J＝8.4Hz，3-H)，6.99(d，1H，J＝2.8Hz，6-H)，7.34，6.87(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)。
實施例7(E)-3，3’，5，5’-四羥基茋3，5-二甲氧基芐基膦酸酯的合成100mL三口燒瓶中加入3，5-二甲氧基芐基溴(0.01mol)，亞磷酸三乙酯(0.015mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至110-115℃，反應(yīng)6小時。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-3，3’，5，5’-四甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加3，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液25mL。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8小時。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥。回收溶劑，殘留物中加少量乙醇-二氯甲烷重結(jié)晶，得乳白色粉末，酯化、縮合兩步反應(yīng)總收率83.0％，mp135-136℃。1HNMR(CDCl3)δ3.84(s，12H，OCH3)，6.40(t，2H，J＝2.0Hz，，4，4-H)，6.67(d，4H，J＝2.0Hz，2，2，6，6-H)，7.01(s，2H，α，β-H)。
(E)-3，3’，5，5’-四羥基茋的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-3，3’，5，5’-四甲氧基茋(4mmol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加3.4mL BBr3的無水二氯甲烷溶液20mL，26-40℃攪拌6小時。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，產(chǎn)生白色沉淀。以乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑，以丙酮水精制，得淺黃色小晶粒，產(chǎn)率95％，mp＞300℃。1HNMR(DMSO-d6)δ6.11(t，2H，J＝1.6Hz，4，4-H)，6.36(d，4H，J＝1.6Hz，2，2，6，6-H)，6.79(s，2H，α，β-H)。
實施例8(E)-2，2’，5，5’-四羥基茋2，5-二甲氧基芐基膦酸酯的合成100mL三口燒瓶中加入3，5-二甲氧基芐基氯(0.01mol)，亞磷酸三乙酯(0.015mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-115℃，反應(yīng)6小時。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-2，2’，5，5’-四甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加2，5-二甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液25mL。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8小時。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇瑲埩粑镏屑由倭恳掖?重結(jié)晶，得淺黃色針狀晶體，酯化、縮合兩步反應(yīng)總收率87.0％，mp 94.5-96℃。1HNMR(CDCl3)δ3.82(s，6H，2，2-OCH3)，3.83(s，6H，5，5-OCH3)，6.79(dd，2H，J＝9.0Hz，J＝2.4Hz，4，4-H)，6.83(d，2H，J＝9.0Hz，3，3-H)，7.20(d，2H，J＝2.4Hz，6，6-H)，7.43(s，2H，α，β-H)。
(E)-2，2’，5，5’-四羥基茋的合成100mL三口燒瓶中加入(E)-3，3’，5，5’-四甲氧基茋(2mmol)，以40mL無水二氯甲烷溶解，冰鹽水浴冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)。攪拌下緩慢滴加3.0mL BBr3的無水二氯甲烷溶液20mL，26-30℃下攪拌3-6小時。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，產(chǎn)生白色沉淀。減壓蒸除溶劑二氯甲烷，加壓抽濾，得乳白色粉狀固體，產(chǎn)率40.2％。1HNMR(DMSO-d6)δ6.49(dd，2H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，4，4-H)，6.65(d，2H，J＝8.4Hz，3，3-H)，6.91(d，2H，J＝2.4Hz，6，6-H)，7.20(s，2H，α，β-H)。
實施例9(E)-4，4’-四羥基茋4-甲氧基芐基膦酸酯的合成100mL三口燒瓶中加入4-甲氧基芐基氯(0.01mol)，亞磷酸三乙酯(0.015mol)，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至100-115℃，反應(yīng)6小時。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-4，4’-二甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加對甲氧基苯甲醛(0.01mol)的THF溶液25mL。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8小時。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，回收四氫呋喃后，有白色片狀晶體析出，產(chǎn)率79.2％。1HNMR(CDCl3)δ3.82(s，6H，4，4-OCH3)，6.89(d，4H，J＝8.8Hz，3，3’，5，5’-H)，7.42(d，4H，J＝8.8Hz，2，2’，6，6’-H)，6.93(s，2H，α，β-H)。
(E)-4，4’-二羥基茋的合成100mL三口燒瓶中加入1.8mL BBr3的無水二氯甲烷溶液20mL，充氮?dú)獗Ｗo(hù)，19-20℃下，以50mL無水二氯甲烷溶解(E)-4，4’-二甲氧基茋(2mmol)，緩慢滴加入三溴化硼中。滴加完畢，反應(yīng)升溫30℃下攪拌3-6小時。將反應(yīng)液傾入200mL冰水中，攪拌，產(chǎn)生白色沉淀。減壓蒸除溶劑二氯甲烷，加壓抽濾，得白色粉狀固體。1HNMR(DMSO-d6)δ6.74(d，4H，J＝8.4Hz，3，3’，5，5’-H)，7.35(d，4H，J＝8.4Hz，2，2’，6，6’-H)，6.89(s，2H，α，β-H)。
實施例10-12(E)-3’-((E)-3-甲基-1-丁烯)-3，4’，5-三甲氧基茋3-氯甲基-4-甲氧基苯甲醛的合成50mL三口梨形瓶中加入5.0g 37-40％的甲醛水溶液和2.5g氯化鋅，置于水溶中緩慢升溫，同時向其中通HCl氣體。上述反應(yīng)液達(dá)到58-60℃時，對6.8g對甲氧基苯甲醛緩慢滴入，滴加完畢后，保持該溫度反應(yīng)3-8h。將反應(yīng)液傾入分液漏斗中，加50mL乙酸乙酯及50mL水，充分振蕩，分出水層，有機(jī)相再以50mL水及50mL飽和NaHCO3水溶液分別洗滌，最后以無水Na2SO4除水?；厥找宜嵋阴ズ?，殘余物冷卻，直接析出淺棕黃色粒狀晶體，產(chǎn)率60.7％。1HNMR(CDCl3)δ3.98(s，3H，4-OCH3)，4.67(s，2H，3-CH2)，7.02(d，1H，J＝8.4Hz，5-H)，7.86(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，6-H)，7.92(d，1H，J＝2.0Hz，2-H)，9.90(s，1H，1-CHO)。
3，5-二甲氧基芐基膦酸酯的合成50mL三口燒瓶中加入0.01mol的3，5-二甲氧基芐基溴，0.015mol亞磷酸三乙酯，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至110-115℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
3’-氯甲基-3，4’，5-三甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯油狀物溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.025mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加0.01mol的3-氯甲基-4-甲氧基苯甲醛的25mLTHF溶液。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8h。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇瑲埩粑镏屑由倭恳掖贾亟Y(jié)晶，酯化、縮合兩步反應(yīng)總收率59.7％。1HNMR(CDCl3)δ3.83(s，6H，3，5-OCH3)，3.90(s，4H，4’-OCH3)，4.67(s，2H，3’-CH2)，6.38(t，1H，J＝2.0Hz，4-H)，6.65(d，2H，J＝2.4Hz，2，6-H)，6.69(d，1H，J＝8.4Hz，5-H)，6.92，7.02(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)，7.43(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，6-H)，7.53(d，2H，J＝2.0Hz，2-H)。
3，4’，5-三甲氧基茋-3’-亞甲基膦酯的合成50mL三口燒瓶中加入0.005mol的3’-氯甲基-3，4’，5-三甲氧基茋，0.0075mol亞磷酸三乙酯，四丁基碘化銨少量，攪拌，油浴加熱至110-115℃，反應(yīng)3-6h。將反應(yīng)物90℃以下減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，瓶中剩余的淺金黃色油狀物即為產(chǎn)物，直接用于下一步反應(yīng)。
(E)-3’-((E)-3-甲基-1-丁烯)-3，4’，5-三甲氧基茋的合成上步反應(yīng)所得膦酸酯油狀物溶于25mL干燥四氫呋喃(THF)中，冰鹽浴冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入NaH粉末(0.0125mol)，攪拌30min。攪拌下緩慢滴加1mL的異丁醛的25mL THF溶液。將反應(yīng)物升至室溫(14-25℃)，攪拌6-8h。將反應(yīng)液傾入冰水中，將反應(yīng)液以1M HCl溶液中和至偏酸性，以乙酸乙酯萃取，有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥?；厥杖軇?，殘留物為金黃色油狀、不結(jié)晶。經(jīng)柱分離(Mercker 200-300目硅膠)，洗脫液(正己烷∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到金黃色油狀產(chǎn)物，產(chǎn)率65.0％。1HNMR(CDCl3)δ1.11(s，3H，CH3)，1.13(s，3H，CH3)，2.51(m，1H，3″-CH)，3，81(s，6H，3，5-OCH3)，3.84(s，4H，4’-OCH3)，6.25(dd，1H，J＝16.4Hz，J＝6.25Hz，2″-H)，6.37(t，1H，J＝2.0Hz，4-H)，6.65(d，2H，J＝2.0Hz，2，6-H)，6.67(d，1H，J＝16.4Hz，1″-H)，6.82(d，1H，J＝8.4Hz，6-H)，6.92，7.04(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)，7.31(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，5′-H)，7.58(d，2H，J＝2.0Hz，2′-H)。
(E)-3’-((E)-3-甲基-1-丁烯)-2，4’，5-三甲氧基茋的合成條件基本同上，柱分離得金黃色油狀物。1HNMR(CDCl3)δ1.11(s，3H，CH3)，1.13(s，3H，CH3)，2.51(m，1H，3″-CH)，3,81(s，3H，5-OCH3)，3.84(s，3H，2-OCH3)，3.85(s，3H，4-OCH3)，6.26(dd，J＝16.0Hz，J＝6.8Hz，2″-H)，6.67(d，1H，J＝16.0Hz，1″-H)，6.76(dd，1H，J＝9.0Hz，J＝2.8Hz，4-H)，6.82(d，1H，J＝9.0Hz，3-H)，6.82(d，1H，J＝8.4Hz，6-H)，7.14(d，1H，J＝2.8Hz，6-H)，7.05，7.32(d，2H，J＝16.4Hz，α，β-H)，7.31(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，5-H)，7.59(d，1H，J＝2.0Hz，2-H)。
(E)-3’-((E)-3-甲基-1-丁烯)-4，4′-二甲氧基茋的合成條件基本同上，應(yīng)用乙醇/CH2Cl2重結(jié)晶得乳黃色粉末。1HNMR(CDCl3)δ1.11(s，3H，CH3)，1.13(s，3H，CH3)，2.51(m，1H，3″-CH)，3,83(s，3H，4-OCH3)，3.86(s，3H，4-OCH3)，6.25(dd，J＝16.0Hz，J＝6.8Hz，2″-H)，6.67(d，1H，J＝16.0Hz，1″-H)，6.89(d，2H，J＝8.8Hz，3′，5′-H)，7.44(d，2H，J＝8.8Hz，2′，6′-H)，6.83(d，1H，J＝8.4Hz，6-H)，6.92，6.97(d，2H，J＝16.0Hz，α，β-H)，7.31(dd，1H，J＝8.4Hz，J＝2.0Hz，5-H)，7.57(d，2H，J＝2.0Hz，2-H)。
權(quán)利要求
1.一種帶有取代基的多羥基茋類化合物，其特征在于該類化合物具有如下結(jié)構(gòu)通式(I) 通式(I)中當(dāng)X＝N原子時，R1＝O；R2-R10＝相同或不同的H、OH、OR1、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2；當(dāng)X＝C原子時，R1-R10＝相同或不同的H、OH、OR1、C1-C8烷基、C2-C8烯基、C2-C8炔基、C3-C9環(huán)烷基、苯基、芐基或被1-3個由Y取代的苯基或芐基；R1＝C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C7環(huán)烷基、苯基、芐基或1-3個被Y取代的苯基或芐基；Y＝C1-C3烷基、C2-C4烯基、鹵素、CN或NO2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多羥基茋類化合物，其特征于優(yōu)選的14個化合物是(1)(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶；(2)(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，4-二羥基吡啶；(3)(E)-2-[2-(2，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶；(4)(E)-2-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶；(5)(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-3，5-二甲基-4-羥基吡啶；(6)(E)-5-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(7)(E)-4-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(8)(E)-2-[2-(3，5-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(9)(E)-4-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(10)(E)-4-[2-(2，4-二羥基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(11)(E)-4-[2-(2，5-二甲氧基苯基)乙烯基]-1，3-苯二酚；(12)(E)-5-[2-(4-甲氧基-3-((E)-3-甲基-1-丁烯基)苯基)乙烯基]-1，3-二甲氧基苯；(13)(E)-4-[2-(4-羥基苯基)乙烯基]-2((E)-3-甲基-丁烯基)苯酚；(14)(E)-2-[2-(4-甲氧基-3-((E)-3-甲基-1-丁烯基)苯基)]乙烯基]-1，4-二甲氧基苯。
3.按照權(quán)利要求1所述多羥基茋類化合物的制備方法，其特征在于該方法是首先，將具有烷氧基取代基的芐基氯或溴化物與亞磷酸三乙酯，按摩爾比1∶1.5-15的比例加到反應(yīng)器中，在少量四丁基碘化銨存在下，于95-125℃，攪拌6-18h，然后，減壓蒸餾，除去過量的亞磷酸三乙酯，得膦酸酯溶于干燥四氫呋喃(THF)中，冷卻至0℃以下，攪拌下迅速加入60％NaH，攪拌，并在攪拌下緩慢滴加取代的烷氧基苯甲醛的THF溶液；滴加完，將反應(yīng)混合物升至室溫，攪拌8-16h。冷至0℃，緩慢滴加水10ml，淬滅過量的NaH。將反應(yīng)液用HCl溶液中和至pH4-6。用乙酸乙酯萃取、有機(jī)相以飽和NaCl水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，回收溶劑，殘留物重結(jié)晶，得精制的烷氧基茋類化合物；將精制烷氧基茋類化合物用無水二氯甲烷溶解，冷卻至0℃以下，充氮?dú)獗Ｗo(hù)，攪拌下緩慢滴加BBr3的無水二氯甲烷溶液20ml，滴加完畢，升至25-28℃，攪拌3-6h，將反應(yīng)液傾入冰水中，攪拌，加NaHCO3飽和溶液調(diào)節(jié)到pH7左右，出現(xiàn)微乳黃色沉淀，直接抽濾即可得到產(chǎn)物，可用溶劑進(jìn)行重結(jié)晶。
4.按照權(quán)利要求1所述多羥基茋類化合物的用途，其特征在于含有0.001-50％(wt)活性成份的多羥基茋化合物與一種或多種藥物賦形物或輔劑構(gòu)成的組合物，用于抑制和殺滅SARS冠狀病毒。
全文摘要
本發(fā)明提供了一類藥用多羥基茋類化合物及其制備方法和用于SARS冠狀病毒的抑制與殺滅作用。多羥基茋類化合物是由多烷(氧)基取代氯(溴)甲基苯或吡淀化合物與亞磷酸三乙酯反應(yīng)制得膦酸酯；然后，膦酸酯化合物再與多烷(氧)基苯(吡啶)甲醛反應(yīng)生成多烷(氧)基茋類化合物；最后，在三溴化硼等脫烷氧基試劑作用下制得帶有取代基的多羥基茋類化合物。含有多羥基茋活性成分可與一種或多種藥物賦形劑或輔劑構(gòu)成含多羥基茋0.001－50％(wt)的組合物，用于抑制和殺滅SARS冠狀病毒。多羥基茋在濃度為2.0mg/ml時，無細(xì)胞毒作用；在藥物濃度為0.5－2.0mg/ml時，可將Vero E6細(xì)胞中的SARS病毒殺滅、無法繁殖。
文檔編號A61K31/045GK1736986SQ20051004702
公開日2006年2月22日 申請日期2005年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月5日
發(fā)明者趙偉杰, 李澤琳, 孟慶偉, 溫瑞興, 王世盛, 曾毅, 李悅青 申請人:大連理工大學(xué), 北京工業(yè)大學(xué)