專利名稱：梔芩雙苷注射劑及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療急性呼吸系統(tǒng)感染疾病的中藥復(fù)方有效部位注射劑，特別是從中藥黃芩與梔子組成的方劑中提取有效部位黃芩苷與梔子總苷，再以適當(dāng)比例配伍制成的可供靜脈注射用的梔芩雙苷注射劑，本發(fā)明也涉及制備該梔芩雙苷注射劑的方法及藥物用途。
背景技術(shù)：
急性呼吸系統(tǒng)感染為臨床最為常見的疾病，包含呼吸道與肺部感染等，通常起病較急，如不很快控制，常繼發(fā)更為嚴(yán)重的機(jī)體損害，臨床上多以注射劑抗菌抗病毒及退熱治療，目前抗生素濫用帶來的危害已引起全世界廣泛的關(guān)注，具抗菌消炎作用的中藥注射劑得到臨床醫(yī)生的普遍重視。但縱觀目前已用于臨床的中藥注射劑，諸如柴胡注射液、板藍(lán)根注射液、魚腥草注射液、去感熱注射液、雙黃連注射液、清開靈注射液、銀黃注射液等，不管是單方還是復(fù)方制劑，基本上都沒有經(jīng)過嚴(yán)格的提取分離純化處理，有效部位不明確或有效部位含量低，有害雜質(zhì)含量較高，療效差，毒副作用大，臨床應(yīng)用經(jīng)常有過敏反應(yīng)、甚至致死的報(bào)道，已成為阻礙中藥注射劑發(fā)展的一大瓶頸。
黃芩與梔子均為清熱瀉火的常用要藥，兩者相配既可清泄心肺之熱，又可瀉肝膽之火，經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究證明對(duì)于治療肺熱所致呼吸系統(tǒng)感染的獨(dú)特療效，但卻一直未見有注射劑開發(fā)與報(bào)道，特別是經(jīng)過嚴(yán)格的提取純化處理、可供靜脈注射用的復(fù)方有效部位注射劑開發(fā)。按照現(xiàn)行藥品注冊(cè)相關(guān)法規(guī)，供靜脈使用的中藥有效部位注射劑，要求原料提取物中有效部位含量應(yīng)在80％以上。近年來，研究表明，黃芩具有很強(qiáng)的抗菌、抗病毒、抗炎及解熱作用，主要有效部位為以黃芩苷(Baicalin)為主的黃酮類成分，其提取分離純化也有了較為成熟的工藝水煎煮提取，煎液反復(fù)以酸沉淀，堿與乙醇溶解處理，可使有效部位黃芩苷含量達(dá)85％以上；梔子也已發(fā)現(xiàn)有明確的抗菌消炎解熱作用，主要有效部位為以梔子苷(京尼平苷，geniposide)為主的環(huán)烯醚萜苷類成分。呂茂平等報(bào)道以乙醇提取，大孔樹脂純化處理，可分離梔子苷等環(huán)烯醚萜類成分，但此工藝還不能使提取物中有效部位梔子總苷純度達(dá)到80％以上，同時(shí)，由于梔子中含大量色素，我們的試驗(yàn)研究證明，梔子乙醇提取物直接上大孔樹脂柱將造成樹脂污染及再生困難；其后楊永安等“治療肝炎的梔子總甙組合物及其制備方法”公開的梔子總甙組合物先采用與前述文獻(xiàn)相似的大孔樹脂工藝，然后又經(jīng)中性氧化鋁柱處理，盡管可使純度提高，但也未解決樹脂再生的問題，且氧化鋁柱純化工藝在工業(yè)生產(chǎn)中的可行性較差，難以規(guī)?；a(chǎn)；李文軍“一種梔子提取物及其制備工藝和它的應(yīng)用”公開的梔子提取物工藝與前述報(bào)道也相近，存在同樣的問題，且若要獲得梔子苷含量在80％的提取物，尚須經(jīng)過正丁醇或醋酸乙酯或通過硅膠柱或氧化鋁柱層析進(jìn)一步純化處理，工業(yè)生產(chǎn)成本較高。范崔生等“梔子環(huán)烯醚萜總提取物及其制備方法和用途”公開的水煎煮或醇提取工藝難以達(dá)到有效部位含量超過80％的要求。
中醫(yī)用藥，講究方劑配伍與藥物的協(xié)同作用，處方中的藥味構(gòu)成與用量對(duì)于其功效有較大的影響，但現(xiàn)代制劑中對(duì)于有效組分的配伍研究卻較少進(jìn)行。本申請(qǐng)人的藥效學(xué)研究結(jié)果證明，以黃芩提取物與梔子提取物配伍應(yīng)用，制成靜脈注射劑，兩種藥物在抗菌譜上有非常明顯的互補(bǔ)作用，在抗病毒、抗炎與解熱方面也有非常明顯的協(xié)同作用，用于治療急性呼吸系統(tǒng)感染時(shí)可以產(chǎn)生明顯的互補(bǔ)作用，增強(qiáng)藥物的療效。同時(shí)，對(duì)于黃芩提取物與梔子提取物用量配比的研究也表明，兩者不同配比對(duì)其藥理作用有明顯影響，在治療呼吸系統(tǒng)感染方面，應(yīng)以黃芩提取物為主，輔以梔子提取物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前治療急性呼吸系統(tǒng)感染疾病的中藥注射劑存在的問題，以及目前黃芩與梔子組成方劑的制劑開發(fā)狀況，為臨床提供一種中藥復(fù)方有效部位注射劑-梔芩雙苷注射劑，其中包括小容量梔芩雙苷注射液、大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液、大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液、梔芩雙苷凍干粉針劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供這種梔芩雙苷注射劑的制備方法，其中并包含原料梔子提取物的制備方法。
本發(fā)明的又一目的是提供梔芩雙苷注射劑在治療呼吸系統(tǒng)感染疾病方面的藥物用途。
本發(fā)明的目的是通過如下配方和制備方法制取的藥物來實(shí)現(xiàn)的一種梔芩雙苷注射劑組合物，由適量的黃芩提取物、梔子提取物、輔料和注射用水組成，其特征在于所述梔子提取物中含有重量百分比80％以上的梔子總苷；所述黃芩提取物中含有重量百分比80％以上的黃芩苷。每劑量單位處方中藥物含量為黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))60～100mg，梔子提取物(以梔子總苷計(jì))30～50mg；兩組分的重量比例為2～3∶1。
本發(fā)明的藥物組合物的優(yōu)選每劑量單位處方中藥物含量為黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))80mg，梔子提取物(以梔子總苷計(jì))40mg；兩組分的重量比例為2∶1。
附加技術(shù)特征是a、小容量梔芩雙苷注射液每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg，亞硫酸氫鈉10-30mg，加注射用水至5-10ml。
b、大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg、亞硫酸氫鈉75-300mg、枸櫞酸鈉75-300mg、氯化鈉38-152mg，加注射用水至50-200mml。
c、大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg、亞硫酸氫鈉75-300mg、葡萄糖5-10g，加注射用水至50-200ml。
d、梔芩雙苷凍干粉針每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-15mg、磷酸二氫鈉2-10mg，注射用水至5-10ml，冷凍干燥制成。
一種梔芩雙苷注射劑組合物的制備方法，其中包括原料梔子提取物的制備方法、小容量梔芩雙苷注射液的制備方法、大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液的制備方法、大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液的制備方法、梔芩雙苷凍干粉針劑的制備方法。
梔子提取物制備方法取梔子粉碎成粗顆粒狀，用70-95％乙醇回流或滲漉提取，合并提取液，以相當(dāng)于藥材重量3％的活性炭回流或上柱處理，乙醇液低溫放置，濾過，濾液減壓回收乙醇并濃縮，加水沉淀，冷藏靜置，濾過，濾液濃縮，通過裝有藥材重量30-80倍預(yù)處理好的大孔樹脂柱，加水洗脫，棄去水溶液，繼用30％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮，噴霧干燥，即得。本發(fā)明梔子提取物的制備方法優(yōu)點(diǎn)在于采用較高濃度的乙醇提取可減少水溶性雜質(zhì)的溶出，活性炭脫色與加水沉淀處理可去除脂溶性雜質(zhì)，減少大孔樹脂柱污染與負(fù)擔(dān)，樹脂柱再生容易。此工藝所得梔子提取物以梔子苷為對(duì)照，比色法測(cè)定，梔子總苷含量超過80％，以高效液相色譜法測(cè)定，梔子苷含量超過60％。
小容量梔芩雙苷注射液的制備方法取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，滅菌，包裝，即得。
大容量梔芩雙苷氯化鈉注射劑制備方法取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；取注射用氯化鈉、亞硫酸氫鈉、枸櫞酸鈉，加注射用水使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。
大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液的制備方法取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；取注射用葡萄糖、亞硫酸氫鈉，加注射用水使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。
梔芩雙苷凍干粉針劑的制備方法取梔子提取物，加0.02mol/L磷酸二氫鈉注射用水溶液使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，與上述溶液合并，加注射用水適量，加活性炭，攪勻，保溫，放冷，濾過，濾液加注射用水，精濾，分裝，冷凍干燥，即得。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于①作為靜脈用注射劑，比其它劑型更具有藥物吸收快、生物利用度高、作用迅速、適用于急性及中重度病例、靜脈輸注可避免二次污染等突出優(yōu)點(diǎn)；②作為有效部位注射劑，比其它粗提取純化的注射劑更具有有效部位含量高、雜質(zhì)少，療效高、使用安全等突出優(yōu)點(diǎn)；③作為黃芩與梔子復(fù)方有效部位注射劑，它相比單方注射劑更具有可發(fā)揮有效組分的協(xié)同作用以增效減毒的優(yōu)點(diǎn)。
本發(fā)明對(duì)梔芩雙苷注射劑組合物進(jìn)行了藥效配比試驗(yàn)研究。結(jié)果表明該藥物組合物具有明顯抗病毒性肺炎和抗細(xì)菌性肺炎作用，其組合物黃芩提取物與梔子提取物合用比單用作用強(qiáng)，以黃芩提取物∶梔子提取物＝2∶1比例配伍效果最好，作用最強(qiáng)。
1、抗腺病毒3型感染小鼠模型試驗(yàn)表1顯示該藥物組合物的4種配伍比例均有抑制腺病毒3型感染小鼠體重降低、肺指數(shù)升高及肺內(nèi)病毒增殖作用，且比單用梔子提取物組和黃芩提取物組作用強(qiáng)。而4種配伍比例中又以梔子提取物∶黃芩提取物＝1∶2的配伍比例抗病毒效果最好。
表1 梔芩雙苷注射劑抗腺病毒3型感染小鼠模型試驗(yàn)

注①病毒感染模型組與正常對(duì)照組比較▲▲▲P＜0.001②各給藥組與病毒感染模型組比較***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.05
2、抗甲型流感病毒H1N1感染小鼠模型試驗(yàn)表2顯示該藥物組合物的4種配伍比例均有抑制甲型流感病毒H1N1感染小鼠體重降低、肺指數(shù)升高及肺內(nèi)病毒增殖作用，且比單用梔子提取物組和黃芩提取物組作用強(qiáng)。而4種配伍比例中又以梔子提取物∶黃芩提取物＝1∶2的配伍比例抗病毒效果最好。
表2 梔芩雙苷注射劑抗甲型流感病毒H1N1感染小鼠模型試驗(yàn)

注①病毒感染模型組與正常對(duì)照組比較▲▲▲P＜0.001②各給藥組與病毒感染模型組比較***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.053、抗肺炎鏈球菌感染小鼠模型試驗(yàn)表1顯示該藥物組合物的4種配伍比例均有抑制肺炎鏈球菌感染所致小鼠體重降低和肺指數(shù)升高作用，且比單用梔子提取物組和黃芩提取物組作用強(qiáng)。而4種配伍比例中又以梔子提取物∶黃芩提取物＝1∶2的配伍比例抗肺炎效果最好。
表3 梔芩雙苷注射劑抗甲型流感病毒H1N1感染小鼠模型試驗(yàn)

注①病毒感染模型組與正常對(duì)照組比較▲▲▲P＜0.001②各給藥組與病毒感染模型組比較***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.05本發(fā)明的梔芩雙苷注射劑藥物組合物經(jīng)系統(tǒng)藥效學(xué)、毒理學(xué)試驗(yàn)研究證明，用于，急性呼吸系統(tǒng)感染疾病治療，療效確切，使用安全。
1、藥效學(xué)研究(1)抗炎試驗(yàn)顯示，80～40mg/kg該藥物組合物對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹有顯著或明顯抑制作用(P＜0.01或P＜0.05)。64～32mg/kg該藥物組合物對(duì)角叉菜膠所致足腫有明顯的抑制作用(P＜0.05)。80～40mg/kg該藥物組合物能極顯著或顯著抑制小鼠棉球肉芽增生腫脹(P＜0.001或P＜0.01)。80～20mg/kg該藥物組合物能顯著或明顯抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高(P＜0.01或P＜0.05)。
(2)解熱試驗(yàn)顯示，2，4二硝基苯酚致熱試驗(yàn)結(jié)果表明，60～90min時(shí)64～16mg/kg該藥物組合物及黃芩組能顯著或明顯降低致熱大鼠的體溫(P＜0.01或P＜0.05)。
內(nèi)毒素致熱試驗(yàn)結(jié)果表明，給藥3～4小時(shí)40～20mg/kg該藥物組合物均能明顯降低致熱家兔的體溫(P＜0.05)。
(3)抗過敏試驗(yàn)顯示，馬血清致豚鼠過敏試驗(yàn)結(jié)果表明，80～40mg/kg該藥物組合物及拆方兩組能明顯或顯著抑制1∶10和1∶20稀釋度的馬血清所致的豚鼠過敏反應(yīng)(P＜0.05或P＜0.01)。
大鼠被動(dòng)皮膚過敏(PCA)試驗(yàn)結(jié)果表明，64～16mg/kg該藥物組合物能顯著或明顯抑制1∶5和1∶10稀釋度的卵白蛋白所致的大鼠被動(dòng)皮膚過敏反應(yīng)(P＜0.01或P＜0.05)。
(4)止血試驗(yàn)顯示，80mg/kg該藥物組合物及黃芩組能明顯縮短小鼠出血時(shí)間及凝血酶原時(shí)間(P＜0.05)。
(5)鎮(zhèn)痛試驗(yàn)顯示，80～40mg/kg該藥物組合物及梔子組能顯著或明顯減少醋酸所致的小鼠扭體次數(shù)(P＜0.01或P＜0.05)，延長(zhǎng)疼痛發(fā)作的潛伏期(P＜0.05)。對(duì)熱板法小鼠無明顯鎮(zhèn)痛作用(P＞0.05)。
結(jié)論該藥物組合物，有明顯的抗菌、抗病毒、抗炎、解熱、抗過敏、止血、鎮(zhèn)痛等作用。
2、安全性研究(1)一般藥理學(xué)研究a.神經(jīng)系統(tǒng)200mg/kg該藥物組合物對(duì)小鼠自發(fā)活動(dòng)有明顯抑制作用(P＜0.05)，能明顯協(xié)同閾劑量戊巴比妥鈉催眠的作用(P＜0.05)。
b.心血管系統(tǒng)120～30mg/kg該藥物組合物對(duì)清醒Beagle犬無明顯影響(P＞0.05)。
c.呼吸系統(tǒng)120～30mg/kg該藥物組合物對(duì)清醒Beagle犬無明顯影響(P＞0.05)。
結(jié)論該藥物組合物一般藥理學(xué)試驗(yàn)研究顯示，該藥200mg/kg明顯抑制動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)，而對(duì)心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)無明顯作用，未引起明顯的不良反應(yīng)。
(2)動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)研究該藥物組合物小鼠和大鼠尾靜脈注射給藥和腹腔注射給藥的最大給藥量分別為1800mg/kg/24h和2250mg/kg24h，最大給藥倍數(shù)分別為60kg體重成人臨床口服日用藥量的450倍和562.5倍。給藥后觀察14天，動(dòng)物無死亡。給藥后30min至3小時(shí)，動(dòng)物表現(xiàn)為安定，活動(dòng)減少。其余未見異常癥狀。觀察期間，動(dòng)物的攝食量和體重?zé)o明顯減少。處死動(dòng)物后，肉眼觀察重要器官(心、肝、脾、肺、腎等)均無異常發(fā)現(xiàn)。
結(jié)論該藥物組合物注射液安全劑量范圍較大。
(3)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)該藥物組合物按400、200和100mg/kg三個(gè)劑量，分別相當(dāng)于其臨床劑量的100、50和25倍，連續(xù)對(duì)大鼠腹腔注射給藥90天及停藥14天，觀察結(jié)果如下①一般情況及體重該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高、中劑量組及拆方兩組于給藥后49～90天，體重顯著或明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)。
②血常規(guī)給藥90天檢查可見高、中、低劑量組及梔子組、黃芩組RBC、HGB分別顯著或明顯降低(P＜0.01或P＜0.05)，PLT顯著升高(P＜0.01)，無性別差異(P＞0.05)。停藥14天檢查未見異常。拆方研究表明，兩者合用有減毒的作用。
③電解質(zhì)檢查該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高、中、低劑量組及拆方兩組Cl-均顯著升高(P＜0.01＝，但均在正常生理值范圍內(nèi)，，故認(rèn)為無臨床意義。
④肝功能該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高、中劑量組和梔子組AST明顯升高(P＜0.05)，無性別差異(P＞0.05)。停藥14天檢查未見明顯異常。
⑤腎功能該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高、中劑量組crea明顯升高(P＜0.05)，停藥14天檢查未見明顯異常。
⑥其它生化指標(biāo)未見異常。
⑦系統(tǒng)尸解及臟器指數(shù)該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高劑量組及梔子組肝臟臟器指數(shù)明顯升高(P＞0.05)。
⑧病理組織學(xué)檢查未見異常。
結(jié)論該藥物組合物以400mg/kg大劑量長(zhǎng)期給藥，會(huì)影響血液系統(tǒng)(降低LYM、LY、HGB和MCHC，升高GR，縮短PT和aPTT)，停藥后可恢復(fù)200mg/kg及以下為其安全劑量范圍。各項(xiàng)指標(biāo)未見延遲性毒性反應(yīng)及明顯性別差異。
(4)Beagle犬長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)論該藥物組合物按200、100和50mg/kg三個(gè)劑量，分別相當(dāng)于其臨床劑量的50、25和12.5倍，連續(xù)對(duì)Beagle犬靜脈滴注給藥90天及停藥14天，結(jié)果如下①生長(zhǎng)發(fā)育及一般情況觀察給藥期間和停藥觀察，動(dòng)物的精神行為活動(dòng)、皮毛、呼吸、循環(huán)、食欲，大小便等均未見明顯異常。給藥及停藥期間，對(duì)犬體重增長(zhǎng)和發(fā)育無明顯影響，亦無延遲性毒性反應(yīng)。
②尿常規(guī)檢查未見異常。
③對(duì)血象的影響未見異常。
④對(duì)電解質(zhì)的影響該藥物組合物連續(xù)給藥90天，可見高、中、低劑量組Cl-均明顯升高(P＜0.05＝，但均在正常生理值范圍內(nèi)，故認(rèn)為無臨床意義。
⑤對(duì)肝腎功能的影響對(duì)肝腎功能無明顯影響(P＞0.05)。
⑥對(duì)其它生化指標(biāo)的影響未見異常。
⑦對(duì)心電圖的影響未見異常。
⑧活體動(dòng)物骨髓檢查未見異常。
⑨系統(tǒng)尸解和臟器指數(shù)未見異常。
⑩病理組織學(xué)檢查未見異常。
結(jié)論該藥物組合物較大劑量(200mg/kg)長(zhǎng)期靜脈滴注給藥，主要對(duì)Beagle犬電解質(zhì)有一定影響，但停藥后可恢復(fù)。100mg/kg及以下劑量各項(xiàng)指標(biāo)未見明顯異常影響，亦無明顯延遲性毒性反應(yīng)，屬安全劑量范圍。


圖1為本發(fā)明黃芩提取物的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜圖2為本發(fā)明梔子提取物的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜圖3為本發(fā)明梔芩雙苷注射劑的黃芩標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜圖4為本發(fā)明梔芩雙苷注射劑的梔子標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜具體實(shí)施方式
實(shí)施例中黃芩藥材購(gòu)自山東膠縣黃芩GAP生產(chǎn)基地，按《中國(guó)藥典》2005年版黃芩提取物項(xiàng)下制法制成黃芩提取物，梔子藥材購(gòu)自江西樟樹市吳城鄉(xiāng)梔子GAP生產(chǎn)基地。
黃芩苷測(cè)定方法樣品與黃芩苷對(duì)照品采用甲醇溶解，高效液相色譜法測(cè)定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(42∶58∶0.2)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；理論板數(shù)以黃芩苷峰計(jì)算不得低于2500。
梔子總苷測(cè)定方法樣品及梔子苷對(duì)照品制成甲醇溶液，加5％香草醛冰醋酸-高氯酸(2∶8)(臨用新配)的混合溶液1.0ml，于60℃水浴中保溫15分鐘，取出，置冰浴中冷卻，精密加冰醋酸5.0ml，搖勻，照比色法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄V B)，在530nm波長(zhǎng)處測(cè)定。
梔子苷測(cè)定方法樣品與梔子苷對(duì)照品采用甲醇溶解，高效液相色譜法測(cè)定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(15∶85)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)238nm；理論板數(shù)以梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
下面給出最佳實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明但并不對(duì)本發(fā)明限制。
實(shí)施例1黃芩提取物的制備取黃芩1kg，加水煎煮兩次，第一次加10倍量水煎煮1小時(shí)，第二次加8倍量水煎煮1小時(shí)，濾過，合并濾液；以1mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH值至1.0～2.0，80℃保溫1小時(shí)，靜置12小時(shí)，濾過，棄去上清液，沉淀加2倍量水?dāng)噭?，再?0％氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至7.0，并加等量乙醇攪拌使溶解，濾過，濾液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.0～2.0，充分?jǐn)嚢韬笥?0℃保溫30分鐘，靜置12小時(shí)，濾過，沉淀加2倍量水洗滌后，再以50％乙醇洗滌pH至4.0，加10倍量水，攪拌，用40％NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，加入0.5％活性炭充分?jǐn)嚢瑁?0℃保溫30分鐘，加入等量乙醇攪勻，濾過，濾液用2mol/L鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH至1.0，60℃保溫30分鐘，靜置12小時(shí)，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌后，于60℃減壓干燥，得黃芩提取物98g。以高效液相色譜法測(cè)定，該黃芩提取物含黃芩苷92％。
實(shí)施例2梔子提取物的制備取梔子藥材1Kg，粉碎成粗顆粒狀，用85％乙醇提取3次，第一次用10倍量提取2小時(shí)，第二次用8倍量提取1.5小時(shí)，第三次用6倍量提取1小時(shí)，合并提取液，加活性炭30g，回流60分鐘，低溫放置12小時(shí)，濾過，濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度約為1.20(60℃)的清膏，加10倍量水，靜置，冷藏24小時(shí)，濾過，濾液濃縮至1670ml，濾過，濾液通過裝有50升預(yù)處理好的D101大孔吸附樹脂柱，加水12L洗脫，棄去水溶液，繼用30％乙醇13L洗脫，收集30％的乙醇洗脫液，減壓回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度約為1.08～1.12(60℃)的清膏，噴霧干燥，得梔子提取物96g。以比色法測(cè)定，該梔子提取物含梔子總苷86.3％；以高效液相色譜法測(cè)定，該梔子提取物含梔子苷63.5％。
實(shí)施例3小容量芩梔注射液的制備取黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))8g，加注射用水400ml，加10％氫氧化鈉溶液7.5ml使溶解，備用；取梔子提取物(以梔子總苷計(jì))4g，加注射用水400ml使溶解，備用；藥液合并，加熱煮沸，加活性炭2g，攪勻，煮沸30分鐘，濾過，濾液加注射用水至1000ml，調(diào)節(jié)pH值至6.5～7.0，精濾，分裝于10ml安培瓶中，制成100支，熔封，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。
實(shí)施例4大容量芩梔氯化鈉注射液的制備取黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))80g，加注射用水15L，加10％氫氧化鈉溶液150ml使溶解，備用；取梔子提取物(以梔子總苷計(jì))40g，加注射用水10L使溶解，備用；取注射用氯化鈉760g，亞硫酸氫鈉150g，枸櫞酸鈉150g，加注射用水10L使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭30g，攪勻，煮沸30分鐘，濾過，濾液加注射用水至100L，調(diào)節(jié)pH值至6.5～7.0，精濾，分裝于100ml輸液瓶中，制成1000瓶，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。
實(shí)施例5大容量芩梔葡萄糖注射液的制備取黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))80g，加注射用水15L，加10)％氫氧化鈉溶液150ml使溶解，備用；取梔子提取物(以梔子總苷計(jì))40g，加注射用水10L使溶解，備用；取注射用葡萄糖5kg，亞硫酸氫鈉150g，加注射用水50L使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭300g，攪勻，煮沸30分鐘，濾過，濾液加注射用水至100L，調(diào)節(jié)pH值至6.5～7.0，精濾，分裝于100ml輸液瓶中，制成1000瓶，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。
實(shí)施例6芩梔凍干粉針的制備取黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))80g，加注射用水1000ml，加10％氫氧化鈉溶液90ml使溶解，備用；取梔子提取物(以梔子總苷計(jì))40g，加0.02mol/L磷酸二氫鈉注射用水溶液800ml使溶解，與上述溶液合并，加注射用水至4000ml，加活性炭4g，攪勻，85℃保溫45分鐘，放冷，濾過，濾液加注射用水至4000ml，精濾，分裝成1000瓶，冷凍干燥，即得。
權(quán)利要求
1.一種梔芩雙苷注射劑組合物，包括小容量梔芩雙苷注射液、大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液、大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液、梔芩雙苷凍干粉針劑，均由適量的黃芩提取物、梔子提取物、輔料和注射用水組成，其特征在于每劑量單位處方中的藥物含量為黃芩提取物(以黃芩苷計(jì))60～100mg，梔子提取物(以梔子總苷計(jì))30～50mg；兩組分的重量比為2∶1。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的梔芩雙苷注射劑組合物，其特征在于所述黃芩提取物是指《中國(guó)藥典》2005年版一部收載的黃芩提取物，含有重量百分比85％以上的黃芩苷；所述梔子提取物中含有重量百分比80％以上的梔子總苷；所述輔料為藥學(xué)上可接受的賦形劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小容量梔芩雙苷注射液組合物，其特征在于每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg，亞硫酸氫鈉10-30mg，加注射用水至5-10ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液組合物，其特征在于每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg、亞硫酸氫鈉75-300mg、枸櫞酸鈉75-300mg、氯化鈉38-152mg，加注射用水至50-200ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液組合物，其特征在于每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-20mg、亞硫酸氫鈉75-300mg、葡萄糖5-10g，加注射用水至50-200ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的梔芩雙苷凍干粉針組合物，其特征在于每劑量單位含黃芩苷60-100mg、梔子總苷30-50mg、氫氧化鈉5-15mg、磷酸二氫鈉2-10mg，注射用水至5-10ml，冷凍干燥制成。
7.如權(quán)利要求1、2、3、4、5、6所述的梔芩雙苷注射劑組合物的制備方法，其特征在于包含梔子提取物的制備方法及注射劑的制備方法。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的梔子提取物的制備方法，其特征在于，它包括如下步驟a.梔子粉碎成粗粉后乙醇回流或滲漉法提??；b.提取液加活性炭回流或上活性炭柱處理，收集乙醇液，回收乙醇得浸膏；c.加水沉淀處理，濾除沉淀；d.水液經(jīng)聚乙烯型大孔樹脂吸附并用水洗除去雜質(zhì)；e.吸附于聚乙烯型大孔樹脂上的環(huán)烯醚萜苷用20-90％的含水乙醇洗脫，含水乙醇的用量為生藥量的3-10倍；f.洗脫液回收乙醇并濃縮，干燥，即得。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的注射劑的制備方法，其特征在于包含小容量梔芩雙苷注射液制備方法、大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液制備方法、大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液制備方法、梔芩雙苷凍干粉針劑制備方法。其中a.小容量梔芩雙苷注射液制備方法如下取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，滅菌，包裝，即得。b.大容量梔芩雙苷氯化鈉注射液制備方法如下取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；取注射用氯化鈉、亞硫酸氫鈉、枸櫞酸鈉，加注射用水使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。c.大容量梔芩雙苷葡萄糖注射液制備方法如下取梔子提取物，加注射用水使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，備用；取注射用葡萄糖、亞硫酸氫鈉，加注射用水使溶解，與上述藥液合并，加熱煮沸，加活性炭適量，攪勻，煮沸，濾過，濾液加注射用水，調(diào)節(jié)pH值，精濾，分裝，軋蓋，滅菌，檢查澄明度，包裝，即得。d.梔芩雙苷凍干粉針劑制備方法如下取梔子提取物，加0.02mol/L磷酸二氫鈉注射用水溶液使溶解，備用；取黃芩提取物，加注射用水及氫氧化鈉溶液使溶解，與上述溶液合并，加注射用水適量，加活性炭，攪勻，保溫，放冷，濾過，濾液加注射用水，精濾，分裝，冷凍干燥，即得。
10.如權(quán)利要求1、2、3、4、5、6所述的梔芩雙苷注射劑組合物的用途，其特征在于所說的用途是在治療急性呼吸系統(tǒng)感染疾病方面的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從中藥黃芩與梔子組成的方劑中提取有效部位黃芩苷與梔子總苷，再按一定比例并加入適量輔料制成的可供靜脈注射用中藥復(fù)方有效部位注射劑－梔芩雙苷注射劑，本發(fā)明也涉及制備該梔芩雙苷注射劑的方法，以及該梔芩雙苷注射劑在治療急性呼吸系統(tǒng)感染疾病方面的藥物用途。黃芩按《中國(guó)藥典》2005年版一部所載黃芩提取物的制法制得有效部位黃芩苷含量大于85％的黃芩提取物；梔子經(jīng)乙醇回流提取，加活性炭回流或上活性炭柱吸附除雜，收集乙醇液，回收乙醇并水沉淀處理，大孔樹脂純化，制得有效部位梔子總苷大于80％的梔子提取物；黃芩提取物與梔子提取物按照每劑量單位含黃芩苷60－100mg，梔子總苷30－50mg，兩組分重量比為2～3∶1的比例配成中藥復(fù)方有效部位組合物，并加入適量輔料和注射用水，制成可供靜脈注射用的小水針、輸液及凍干粉針。黃芩清肺注射劑有效部位含量高，雜質(zhì)低，制劑安全性符合要求，靜脈使用不良反應(yīng)小。經(jīng)藥理毒理試驗(yàn)研究證明，梔芩雙苷注射劑安全劑量范圍大，療效好，是一種具有良好開發(fā)前景的中藥復(fù)方有效組分注射劑。
文檔編號(hào)A61K36/539GK1730052SQ200510065829
公開日2006年2月8日 申請(qǐng)日期2005年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月11日
發(fā)明者張良, 楊奎 申請(qǐng)人:成都精晶天然藥物開發(fā)有限公司, 成都百康醫(yī)藥工業(yè)藥理毒理研究院