專利名稱：蕁麻多糖的制備和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的說(shuō)，涉及蕁麻多糖的制備方法及其治療前列腺增生的用途。
背景技術(shù)：
蕁麻(Urtica)是民族藥或民間藥，始載于《圖經(jīng)本草》，全草或根入藥。具有祛風(fēng)通絡(luò)、平肝定驚、消積通便、解毒等功效。我國(guó)資源豐富，分布于西北、華北、東北及西南各地，。
國(guó)外報(bào)導(dǎo)異株蕁麻(Urtica dioica)提取物自80年代開(kāi)始用于前列腺增生的治療，臨床適應(yīng)癥為輕度和中度BPH。國(guó)外報(bào)道用異株蕁麻根20％甲醇提取物在體外能夠抑制前列腺組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，能夠抑制雄激素依賴的人前列腺腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，但對(duì)于原代前列腺基質(zhì)細(xì)胞無(wú)毒性作用(1)(2)。將小鼠前列腺前側(cè)植入胎尿生殖竇(UGS)后，誘導(dǎo)產(chǎn)生前列腺過(guò)度增生。用此動(dòng)物模型評(píng)價(jià)異株蕁麻根20％甲醇提取物，觀察假性手術(shù)和移植手術(shù)的前列腺葉生長(zhǎng)，口服28天后該提取物抑制生長(zhǎng)率達(dá)51％(3)。20％甲醇提取物的主要成分有蛋白質(zhì)、多糖、東莨菪苷原。在另一項(xiàng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中，Lichius等人用同樣的方法制備BPH小鼠模型，進(jìn)一步分析了20％甲醇提取物中的多糖、凝集素、左旋開(kāi)環(huán)落葉松樹(shù)脂酚，評(píng)價(jià)它們的活性，多糖部分能顯著抑制前列腺葉的生長(zhǎng)達(dá)33.8％，而凝集素、左旋開(kāi)環(huán)落葉松樹(shù)脂酚則無(wú)此抑制作用(4)。
異株蕁麻在國(guó)外得到了廣泛的研究與應(yīng)用，相比之下，廣布于我國(guó)各地區(qū)的蕁麻屬植物卻未被開(kāi)發(fā)與應(yīng)用。我國(guó)約有15種蕁麻屬植物，分布于西北、華北、東北及西南各地，資源豐富。目前我國(guó)對(duì)該屬植物尚未進(jìn)行系統(tǒng)的研究開(kāi)發(fā)，只是在各地民間常作藥用，用于治療風(fēng)濕病、扭傷疼痛、皮膚瘙癢等癥。王夢(mèng)月等人對(duì)蕁麻、寬葉蕁麻、紅火麻的水煎液及蕁麻多糖的藥理作用作了初步研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明它們對(duì)交叉菜膠和二甲苯所致的炎癥，均有明顯的抑制作用，具有顯著的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，蕁麻多糖還能增強(qiáng)免疫功能(5)(6)。
目前所用提取方法所含雜質(zhì)較多，有效部位多糖的含量低，尚需研究簡(jiǎn)單廉價(jià)、有效部位含量高的新方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供以草藥蕁麻為原料，從中提取分離蕁麻多糖的方法，得到含量較高的蕁麻多糖。
具體的說(shuō)，本發(fā)明的蕁麻多糖制備方法包括如下步驟(a)蕁麻根或莖經(jīng)過(guò)粉碎后，用低級(jí)醇或丙酮微沸提取，除去脂溶性成分；
(b)殘?jiān)梅兴崛?，合并水提液?c)將水提液濃縮得到濃縮液(d)濃縮液用低級(jí)醇/酮沉淀或冷凍干燥，得到蕁麻多糖。
上述方法所述步驟(a)中，用低級(jí)醇或丙酮提取時(shí)的固液比為1∶2～1∶15，優(yōu)選為1∶5～1∶10；提取時(shí)間1～6小時(shí)，優(yōu)選為2～3小時(shí)。
上述方法所述步驟(b)中，沸水提取時(shí)的固液比為1∶2～1∶15，優(yōu)選為1∶5～1∶10；提取1～5次，優(yōu)選為2～3次；每次提取1～6小時(shí)，優(yōu)選為2～3小時(shí)。
上述方法所述步驟(c)中，濃縮采用中空纖維超濾柱超濾，中空纖維超濾柱的截留分子量大于等于5000k。
上述方法所述步驟(c)中，濃縮也可采用本領(lǐng)域常規(guī)方法，將水提液濃縮至1/20～1/5。
上述方法所述步驟(d)中，濃縮液用1-5倍低級(jí)醇或酮經(jīng)1-3次沉淀。
上述方法所述低級(jí)醇或酮是碳原子數(shù)小于五的醇或酮，如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮等。低級(jí)醇或酮的濃度大于80％。
本發(fā)明的另一目的是提供了一種蕁麻多糖，其特征在于由上述方法制備得到。
本發(fā)明提供的蕁麻多糖制備工藝簡(jiǎn)單，具有顯著抑制前列腺增生功能，成本低廉而且毒性很低。小鼠口服1100mg/kg無(wú)死亡，雌性小鼠MTD大于21.6g/kg，雄性小鼠MTD大于20.9g/kg，小鼠的進(jìn)食量與體重的變化與正常對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
此蕁麻多糖可采用本領(lǐng)域的常規(guī)方法，與藥學(xué)上可接受的輔料相結(jié)合，制備治療前列腺增生的藥物組合物。
具體實(shí)施例方式
為了進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的實(shí)施方式和用途，參照以下實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明。實(shí)施例是為了解釋而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍，本領(lǐng)域技術(shù)人員在權(quán)利要求的范圍內(nèi)所做出的某些改變和調(diào)整也應(yīng)認(rèn)為屬于本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例一蕁麻(Urtica cannabina)根1公斤經(jīng)過(guò)粉碎后，用8公斤95％乙醇微沸提取3小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)?公斤沸水提取兩次，每次3小時(shí)，過(guò)濾，合并水提液，通過(guò)截留分子量為5000k的中空纖維超濾柱濃縮，濃縮液再用5倍95％乙醇進(jìn)行一次沉淀，得到蕁麻多糖。
實(shí)施例二蕁麻(Urtica cannabina)莖1公斤經(jīng)過(guò)粉碎后，用8公斤95％丙酮微沸提取3小時(shí)，過(guò)濾，殘?jiān)?公斤沸水提取三次，每次2小時(shí)，過(guò)濾，合并水提液，濃縮水提液至2公斤，濃縮水提液用4公斤95％乙醇沉淀三次，得到蕁麻多糖。
本發(fā)明制備的蕁麻多糖，其多糖平均含量40％以上，按生藥量計(jì)算收率為2-3％，外觀為微黃色疏松固體，水溶解性好。
本屬其他植物采用類似方法也可達(dá)到本發(fā)明的技術(shù)效果。
實(shí)例三蕁麻多糖抑制前列腺增生試驗(yàn)取200±5g大鼠80只，注射異戊巴比妥鈉0.5-0.6ml，麻醉，將大鼠去勢(shì)，一周后把去勢(shì)大鼠按體重隨機(jī)分組，即蕁麻多糖組(500、250、125mg/kg)陽(yáng)性對(duì)照組(雌二醇)、模型組(丙酸睪丸酮)、正常對(duì)照組，每天灌胃一次，連續(xù)30天，每周稱量一次體重，以調(diào)節(jié)用藥量。30天后取大鼠前列腺各葉，稱量濕重，容積法測(cè)前列腺體積，在60℃烘箱中烘烤24小時(shí)，稱量干重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明多糖組對(duì)大鼠前列腺增生的抑制作用與模型組相比具有顯著性意義(*P＜0.05**P＜0.01)，與正常對(duì)照組相比，模型組各值均有極顯著性意義。與模型對(duì)照組相比各用藥組對(duì)大鼠前列腺各葉濕重、干重及體積的抑制百分率見(jiàn)表1～3。
表1各用藥組對(duì)大鼠前列腺各葉濕重的抑制百分率(％)

表2各用藥組對(duì)大鼠前列腺各葉干重的抑制百分率(％)

表3各用藥組對(duì)大鼠前列腺各葉體積的抑制百分率(％)

實(shí)施例四蕁麻多糖片劑

分別取多糖、淀粉、內(nèi)加羧甲基淀粉鈉粉碎，過(guò)100目篩，稱取處方量用40目篩混合均勻。取聚乙烯吡咯烷酮K30溶于95％乙醇制備得到10％溶液，作為粘合劑。粘合劑與上述混合藥物粉末制備軟材，制備18目顆粒，50℃烘干，18目篩整粒，并與外加羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂混勻，用11.5mm淺凹沖壓片。
實(shí)施例五蕁麻多糖膠囊

取多糖粉碎，過(guò)100目篩，稱取處方量與微晶纖維素和滑石粉用30目篩混合均勻，填裝于0號(hào)膠囊。
參考文獻(xiàn)[1]Lichius J J，Lenz C，Lindemann P，et al.Antiproliferative effect of a polysaccharide fraction of a 20％methanolic extract of stinging nettle roots upon epithelial cells of the human prostate(LNCaP)[J].Pharmazie，1999，54(10)768-71[2]Konrad L，Lenz C，Muller H H，et al.Antiproliferative effect on human prostate cancer cells by a stingingnettle root(Urtica dioica)extract[J].Planta Med，2000，66(1)44-47[3]Lichius J J，Muth C.The inhibiting effects of Urtica dioica root extracts on experimentally induced prostatichyperplasia in the mouse[J].Planta Med，1997，63(4)307-10[4]Lichius J J，Renneberg H，Blaschek W，et al.The inhibiting effects of components of stinging nettle root onexperimentally induced prostatic hyperplasia in mice[J].Planta Med，1999，65(7)666-68[5]王夢(mèng)月，劉瑛，衛(wèi)瑩芳，邢芳，史焱，川產(chǎn)蕁麻藥理作用的初步研究，中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，2001，51229-231[6]王夢(mèng)月，衛(wèi)瑩芳，史焱，姚云綺，三種活麻水煎液藥理作用探索，時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2001，12(8)676-7權(quán)利要求
1.一種從草藥蕁麻中提取蕁麻多糖的方法，其特征在于包括如下步驟(a)蕁麻根或莖經(jīng)過(guò)粉碎后，用低級(jí)醇或丙酮微沸提取，除去脂溶性成分；(b)殘?jiān)梅兴崛?，合并水提液?c)將水提液濃縮得到濃縮液(d)濃縮液用低級(jí)醇/酮沉淀或冷凍干燥，得到蕁麻多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(a)中，用低級(jí)醇或丙酮提取時(shí)的固液比為1∶2～1∶15，提取時(shí)間1～6小時(shí)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(b)中，沸水提取時(shí)的固液比為1∶2～1∶15，提取1～5次，每次提取1～6小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(c)中，濃縮采用中空纖維超濾柱超濾，中空纖維超濾柱的截留分子量大于等于5000k。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(c)中，濃縮采用本領(lǐng)域常規(guī)方法將水提液濃縮至1/20～1/5
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(d)中，濃縮液用1-5倍低級(jí)醇或酮經(jīng)1-3次沉淀。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述低級(jí)醇或酮是碳原子數(shù)小于五的醇或酮，如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮等，低級(jí)醇或酮的濃度大于80％。
8.蕁麻多糖，其特征在于采用權(quán)利要求1所述方法制備得到。
9.權(quán)利要求8所述的蕁麻多糖在制備治療前列腺增生藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種從草藥蕁麻中提取蕁麻多糖的方法，其特征在于包括如下步驟蕁麻根或莖經(jīng)過(guò)粉碎后，用低級(jí)醇或丙酮微沸提取，除去脂溶性成分；殘?jiān)梅兴崛。喜⑺嵋?；將水提液濃縮得到濃縮液，用低級(jí)醇/酮沉淀或冷凍干燥，得到蕁麻多糖。蕁麻多糖可用于制備治療前列腺增生的藥物。
文檔編號(hào)A61P13/00GK1865289SQ20051006927
公開(kāi)日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2005年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月16日
發(fā)明者張慶林, 李妍, 肖鳳君, 吳祖澤 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所