專利名稱：一種納米血塞通注射制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種納米血塞通注射制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
納米中藥主要是指運(yùn)用納米技術(shù)制造的，粒徑小于100nm的中藥有效成分、有效部位、原藥及復(fù)方制劑。生物機(jī)體對藥物的吸收、代謝是一個復(fù)雜的過程，中藥制劑產(chǎn)生的藥理效應(yīng)不能僅僅歸之于藥物特有的化學(xué)組成還與該制劑的物理狀態(tài)密切相關(guān)。因此，改變藥物制劑地物理狀態(tài)是新藥研制的一種有效方法。在改變物理狀態(tài)方面，改變藥物的單元尺寸是十分有效的。當(dāng)顆粒尺寸進(jìn)入納米量級時由于量子尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng)，納米粒子呈現(xiàn)出新奇的物理化學(xué)和生物學(xué)特性。這就是應(yīng)用納米技術(shù)于中藥研究可能使藥物活性和生物利用度提高乃至產(chǎn)生新的特性依據(jù)所在。
納米中藥的制備是研究納米中藥最基礎(chǔ)的，也是最重要的問題。將納米技術(shù)引入中藥的研究時，必須考慮中藥組方的多樣性、中藥成分的復(fù)雜性，例如中藥單味藥可分為礦物藥、植物藥、動物藥和菌物藥等，中藥的有效部位和有效成分又包括無機(jī)化合物和有機(jī)化合物、水溶性成分和脂溶性成分等。因此，針對不同的藥物，在進(jìn)行納米化時必須采用不同的技術(shù)路線。納米中藥與中藥新制劑關(guān)系十分密切，如何在中藥理論的指導(dǎo)下進(jìn)行納米中藥新制劑的研究，將中藥制成高效、速效、長效、計量小、低毒、服用方便的現(xiàn)代制劑，也是進(jìn)行中藥納米化時必須考慮的問題。
目前，納米技術(shù)在中藥研究中存在的問題也不能忽視的。第一，納米中藥的制備困難我國雖已制備一些納米級的中藥，可是由于中藥品種繁多，成分復(fù)雜，不同的成分由于其作用部位、作用機(jī)制及作用緩急的不同而要求其粒徑大小、載體成分及給藥劑量均有可能不同。同時納米中藥應(yīng)該有它自己的一套質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，使其生產(chǎn)規(guī)范化。第二，納米中藥的毒副作用藥物制成納米微粒，其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)均發(fā)生了顯著的變化，這些變化對人體是否有毒副反應(yīng)均未有有關(guān)的研究報道。但由于納米材料的特殊性，除了可穿透皮膚，還會進(jìn)入細(xì)胞器內(nèi)，是否會直接參與或作為催化劑擾亂機(jī)體正常的化學(xué)反應(yīng)，均未見有關(guān)報道。此外，納米中藥還可以通過機(jī)體的屏障系統(tǒng)，那它是否會影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)，精子的生成及其活力、胎兒的發(fā)育等，這些問題均無法回避。第三，中藥在納米級粉碎后，納米微粒表面積變大，由于納米微粒表面的活性使他們很容易團(tuán)聚在一起，這給納米微粒的收集及其藥效的穩(wěn)定性帶來很大的困難。第四，成本提高由于現(xiàn)有技術(shù)水平及設(shè)備的限制，造成納米中藥在制備中的花費比傳統(tǒng)中藥的制備要高出不少。
現(xiàn)代中藥的研究就是要在繼承中藥傳統(tǒng)的基礎(chǔ)上，充分利用現(xiàn)代科技手段，使中藥具有先進(jìn)的生產(chǎn)工藝和現(xiàn)代劑型，做到“有效、安全、可控”，將納米技術(shù)應(yīng)用于中藥領(lǐng)域是現(xiàn)代中藥發(fā)展的重要方向之一。納米中藥一般不是簡單地將中藥材進(jìn)行粉碎至納米量級，而是針對組成中藥方劑的某味藥的有效部位甚至是有效成分進(jìn)行納米技術(shù)加工處理，賦予傳統(tǒng)中藥以新的功能，如提高生物利用度，增強(qiáng)靶向性；降低毒副作用；呈現(xiàn)新的藥效，拓寬原藥的適應(yīng)證；豐富中藥的劑型選擇；減少用藥量，節(jié)省中藥資源等。
同傳統(tǒng)中藥相比，納米中藥具有以下特點①提高了藥物的利用度，減少用藥量。②增強(qiáng)藥物的靶向性。③具有緩釋功能，將中藥納米粒進(jìn)行一定的表面修飾后，可能使中藥具有緩釋作用。④呈現(xiàn)新的藥效，拓寬原藥適應(yīng)癥，中藥加工至納米尺寸時，由于其量子尺寸等效應(yīng)導(dǎo)致其物理、化學(xué)特性的改變，從而可使中藥呈現(xiàn)出新功能。⑤豐富中藥的劑型選擇，提升傳統(tǒng)給藥途徑。
徐輝碧等檢索了1998年～2000年美國專利中涉及納米科技的專利，發(fā)現(xiàn)該類專利與生物醫(yī)學(xué)相關(guān)的專利占總數(shù)的80％以上，楊孟君在2001年一年內(nèi)申請了940多件納米中藥的專利，但其申請的大部分都是中藥原料藥進(jìn)行納米粉碎，其專利實用性不強(qiáng)。
目前納米中藥的研究主要集中于利用納米技術(shù)對少數(shù)成分比較明確的單體有效成分進(jìn)行納米處理制成納米制劑，或?qū)⒃纤幹苯臃鬯槌杉{米級，對大部分中藥的納米制劑研究還很少，主要是因為中藥有效成分和有效部位特別是中藥復(fù)方中有效部位本身就是一個“黑匣子”，中藥中真正起藥理作用的有效成分或有效部位研究本身就是一個難題，而且由于中藥成分比較復(fù)雜，所以將其制備成納米制劑需要克服的困難較多，因此，中藥納米制劑及技術(shù)是醫(yī)藥科研工作者的重要研究課題。
三七總皂苷是三七蘆頭按一定工藝提制的總皂苷，具有活血祛瘀、通脈活絡(luò)的功能，用于治療心腦血管系統(tǒng)疾病，腦血管病后遺癥等。以三七總皂苷為有效成分的注射制劑有血塞通注射液[部頒標(biāo)準(zhǔn)19冊]和血塞通粉針(商品名絡(luò)泰)，自上市以來，在臨床上雖然取得了一定的治療效果，但是存在一個很大的問題，即藥物透過血腦屏障的量很小，很難達(dá)到有效的血藥濃度，所以治療效果并不是很理想。所以，如何提高現(xiàn)有血塞通注射制劑的療效，成了人們急待解決的問題。
在專利檢索中未發(fā)現(xiàn)有關(guān)納米血塞通注射制劑的任何報道。

發(fā)明內(nèi)容
為了提高現(xiàn)有血塞通注射制劑的療效，本發(fā)明研究人員經(jīng)過大量的實驗，研制出一種納米血塞通注射制劑。藥理實驗表明，本發(fā)明納米血塞通注射制劑能很好的透過血腦屏障，具有緩釋作用，療效比現(xiàn)有血塞通注射制劑有顯著提高；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察實驗結(jié)果表明，本發(fā)明納米注射制劑分散性好、包封率高、載藥量大；安全性評價實驗結(jié)果表明，本發(fā)明具有很好的注射給藥安全性。
本發(fā)明的一個目的是公開一種納米血塞通注射制劑。
本發(fā)明的另一個目的是公開上述納米血塞通注射制劑的制備方法。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)
一、制備方法
(1)主藥混懸液的制備
處方為三七總皂苷1重量份、載體7-10重量份；
方法一將三七總皂苷藥粉、脂質(zhì)和乳化劑，在通氮氣條件下加熱至80±5℃，得到組分A；將甘油和poloxamer188的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在80±5℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)載在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得。
方法二稱取脂質(zhì)加入三七總皂苷，加熱熔融作為油相；稱取乳化劑，加少量吐溫-80，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相；將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1小時后超聲分散，室溫，頻率45-50Hz，超聲時間5-8分鐘，即得。
方法三取三七總皂苷，脂質(zhì)和丙酮適量加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑，微熱使溶成有機(jī)相；另取乳化劑溶于適量水中，構(gòu)成水相；將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4小時，使有機(jī)溶媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相中，繼續(xù)攪拌2小時，即得。
方法四取三七總皂苷，溶于50％-80％乙醇中；將脂質(zhì)的一種或多種溶于烷烴，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1-0.2個大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，即得。
方法五將三七總皂苷藥粉與載體，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相為1∶4(v/v)，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過濾，即得。
(2)制劑的制備
水針制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每支5ml的水針制劑。
輸液制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑，加入氯化鈉或葡萄糖調(diào)等滲，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每瓶100ml的輸液制劑。
粉針制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入水溶性注射用藥用輔料，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，干燥，制備成粉針制劑。
上述制備方法中，其中固體脂質(zhì)納米粒中的載體包括脂質(zhì)、乳化劑、助乳化劑；納米囊中的載體為聚氰基丙烯酸烷酯、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯、殼聚糖、明膠中的一種或幾種。
上述制備方法中，其中脂質(zhì)為脂肪酸甘油酯類(包括三硬脂酸甘油酯、三棕櫚酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三窬酸甘油酯、Witepsol W35、Witepsol H35、Witepsol H42、單硬脂酸甘油酯)、脂肪酸類(如硬脂酸、棕櫚酸)中的一種或幾種；乳化劑為磷脂(包括大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂及磷脂酰膽堿等)；泊洛沙姆、聚山梨醇(吐溫-80等)、甘油中的一種或幾種為助乳化劑。
上述制備方法中所述的穩(wěn)定劑為聚乙烯吡咯烷酮。
上述制備方法中所述的水溶性注射用藥用輔料選自甘露醇、右旋糖苷、果糖、葡聚糖、乳糖中的一種或幾種。
二、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察
標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《中國藥典》2005年版附錄XIX E“微囊、微球與脂質(zhì)體制劑指導(dǎo)原則”中的方法。H-7000型透射電鏡儀(日本Hitachi公司)；Zetamaster光子相關(guān)光譜儀(英國Malvern公司)；LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)；TGL-18G型臺式高速離心機(jī)；5批本發(fā)明納米血塞通注射制劑由廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司提供。
1、形態(tài)觀察及粒徑
將5批本發(fā)明納米血塞通注射制劑在透射電鏡下進(jìn)行形態(tài)觀察，可見呈圓球體，大小較均勻，表面光滑，無粘連。根據(jù)光學(xué)顯微照片測定了500個，平均粒徑為55±12nm，最大粒徑為84nm，最小粒徑為22nm，且粒徑分布符合正態(tài)分布規(guī)律。
2、包封率和載藥量測定
采用薄層色譜法進(jìn)行含量測定。
用下述公式計算包封率和載藥量
包封率(％)＝(投藥量-游離藥物量)/投藥量×100％；
載藥量(％)＝(投藥量-游離藥物量)/納米藥物的重量×100％。
結(jié)果5批本發(fā)明納米血塞通注射制劑中三七總皂苷包封率為86.5-93.4％，載藥量為8.0-12.0％。
由上述實驗數(shù)據(jù)可以看出，本發(fā)明納米血塞通注射制劑中三七總皂苷為0.8-1.2重量份、載體為8.8-9.2重量份。
3、穩(wěn)定性考察
將本發(fā)明納米血塞通注射制劑分別置于小瓶內(nèi)，密封。于冰箱(3-5℃)、室溫(20-25℃)和37℃(RH75％)的環(huán)境中放置，于0、1、2和3月觀測納米藥物的外觀、大小、再分散性等。
結(jié)果平均粒徑和顏色均未見明顯變化，不同條件下的藥物再分散性保持良好，無聚合現(xiàn)象的發(fā)生。結(jié)果見表1。
表1 穩(wěn)定性實驗結(jié)果
三、藥理實施例
三七總皂苷為市售的同一批，標(biāo)準(zhǔn)符合[許海琴，等。常用天然提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參考手冊?；瘜W(xué)工業(yè)出版社，2003，109]三七總皂苷項下的各項規(guī)定，其中三七總皂苷的含量為95.2％。陽性對照藥血塞通注射液(100mg/支)按照[部頒標(biāo)準(zhǔn)19冊]中血塞通注射液項下的制法制備而成，本發(fā)明納米血塞通注射制劑(100mg/支)按照上述的方法制備而成。均由廣東天之驕藥物開發(fā)有限公司提供。
1、腦脊液中藥物濃度的測定
取新西蘭家兔6只，體重約2.5kg，雌雄不限，分為2組，即血塞通注射液組和本發(fā)明納米血塞通注射制劑組。靜脈注射給藥，于給藥后不同時間抽取0.5ml腦脊液進(jìn)行實驗，取樣時間分別為注射藥物后的5min、10min、20min、30min、60min，120min。取腦脊液0.25ml加適量溶劑混懸15min后，靜置15min，以10000r/min離心1min，取上清液20μl進(jìn)樣，用高效液相色譜法測定。結(jié)果見表1。
表1 腦脊液中藥物濃度的測定
注1為血塞通注射液，2為本發(fā)明納米血塞通注射制劑；“-”表示檢測不出。
由以上實驗可以看出，本發(fā)明納米血塞通注射制劑通過血腦屏障的藥物量比現(xiàn)有血塞通注射制劑有顯著提高，說明本發(fā)明納米血塞通注射制劑透過血腦屏障的藥物量明顯增加，提高了腦組織中的血藥濃度，因而會提高治療效果；實驗數(shù)據(jù)同時表明，本發(fā)明納米血塞通注射制劑在組織中具有很好的緩釋作用，因而本發(fā)明納米血塞通注射制劑可以減少給藥次數(shù)。
2、對大鼠血栓形成的影響
體重300-400g的大白鼠30只，隨機(jī)分成3組，即對照組、血塞通注射液組、本發(fā)明納米血塞通注射制劑組。每組10只，給藥劑量均為500mg/kg，尾靜脈注射給藥，對照組給予等體積的生理鹽水。連續(xù)給藥5天，末次給藥后半小時將大白鼠麻醉(戊巴比妥鈉30-40mg/kg，ip)，仰臥位固定，分離氣管，插入一塑料套管，并分離右頸總動脈及左頸外靜脈，在聚乙烯管的中段放入一根長6厘米的絲線，以肝素生理鹽水溶液，充滿聚乙烯管，當(dāng)聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈后，由聚乙烯管準(zhǔn)確的注入肝素抗凝，然后再將聚乙烯管的另一端插入右頸總動脈，打開動脈夾，血液從右頸總動脈流至聚乙烯管，返回左頸外靜脈，開放血流15分鐘后斷血流，迅速取出絲線稱重，總重量減去絲線重量即得血栓重量。將空白組和另外三組給藥組的動物血栓濕重進(jìn)行記錄，進(jìn)行計算。結(jié)果見表3。
表3 對血栓形成的影響(X)
注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與血塞通注射液組比較#P＜0.05。
3、對小鼠缺氧耐力的影響實驗
取健康昆明種小鼠30只，體重20-24g。即對照組、血塞通注射液組、本發(fā)明納米血塞通注射制劑組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。給藥劑量均為600mg/kg，尾靜脈注射給藥，對照組給生理鹽水，1次/天，連續(xù)5天。于末次給藥后0.5小時，將小鼠分別置于體積為150ml磨口瓶中，內(nèi)放15g鈉石灰，密閉觀察其存活時間。結(jié)果見表4。
表4 對小鼠常壓缺氧的影響(X±S)
注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與血塞通注射液組比較#P＜0.05。
4、對小鼠心肌缺氧的保護(hù)作用實驗
取健康昆明種小鼠30只，體重18-22g，即對照組、血塞通注射液組、本發(fā)明納米血塞通注射制劑組。每組雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。給藥劑量均為600mg/kg，尾靜脈注射給藥，對照組給生理鹽水，1次/天，連續(xù)5天。于末次給藥后半小時用烏拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，背部固定，分離氣管，以動脈夾夾閉氣管，用心電儀觀察心電，并用秒表記下小鼠夾閉氣管后至心電消失的時間。結(jié)果見表5。
表5 對小鼠心肌缺氧的影響(X±S)
注與對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與血塞通注射液組比較#P＜0.05。
由上述實驗可以看出，本發(fā)明納米血塞通注射制劑比現(xiàn)有血塞通注射液有更好的藥理作用。
四、安全性評價
1、血管刺激性考察
取健康大耳家兔3只，將動物固定于兔箱內(nèi)，用酒精將皮膚消毒后，于右側(cè)耳緣靜脈處注射本發(fā)明納米血塞通注射制劑，于另一側(cè)對應(yīng)部位注射同一體積的等滲葡萄糖水作為對照。每日注射1次，連續(xù)3次，觀察兔耳緣靜脈反應(yīng)。于末次給藥24h后將兔放血處死，取下兩耳，用10％甲醛溶液浸泡，距注射部位1-4cm處，解剖取出靜脈，做組織切片檢查，觀察注射部位的反應(yīng)。
結(jié)果試驗過程中，肉眼觀察兩耳靜脈注射部位處，未見紅腫、熱等刺激表現(xiàn)。表明給藥組切片部位組織形態(tài)無明顯差異，未見本品毒性所致的病理形態(tài)學(xué)改變(血管結(jié)構(gòu)正常，無內(nèi)皮細(xì)胞損傷，無血栓形成及其他病理性變化)。
2、溶血毒性考察
2％紅細(xì)胞混懸液的制備取兔耳緣靜脈取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的錐形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血。加10倍量的生理鹽水溶液，搖勻，離心，除去上清液，沉淀的紅細(xì)胞再用生理鹽水溶液洗滌2-3次，至上清液不呈紅色時為止。將所得的紅細(xì)胞用用生理鹽水配成濃度為2％的混懸液，即得。
試驗方法取試管6支，按下表中的配比量依次加入2％紅細(xì)胞混懸液和生理鹽水溶液，混勻，于37℃恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的藥液(以第6管為空白對照)，搖勻后，置37℃恒溫箱中，開始每隔15分鐘觀察1次，1小時后，每隔1小時觀察1次，共觀察2小時。
表6 溶血試驗設(shè)計
結(jié)果以第3試管為準(zhǔn)，各管均未染有紅色，顯微鏡下觀察未見有紅細(xì)胞破裂，說明本品不溶血，安全性好。
3、急性毒性實驗
取健康小鼠40只，體重18-22g，，雌雄各半。分為血塞通注射液組、本發(fā)明納米血塞通注射制劑組，尾靜脈給藥，給藥劑量按照人給藥劑量的50倍，按照體表面積換算成小鼠給藥劑量，每天給藥1次，連續(xù)7天，觀察小鼠死亡情況，記錄數(shù)據(jù)，實驗結(jié)果見表7。
表7 小鼠急性毒性實驗
通過上述實驗表明，本發(fā)明納米血塞通注射制劑具有很好的安全性。
五、制備實施例
實施例1
將三七總皂苷藥粉1kg、三硬脂酸甘油酯3kg和大豆卵磷脂2kg，在通氮氣條件下加熱至80℃，得到組分A；將甘油2.5kg和poloxamer188 2.5kg的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在80℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得主藥混懸液；
實施例2
將三七總皂苷藥粉1kg、單硬脂酸甘油酯5kg和蛋黃卵磷脂1kg，在通氮氣條件下加熱至85℃，得到組分A；將甘油0.5kg和poloxamer188 1.0kg的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在85℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得主藥混懸液；
實施例3
將三七總皂苷藥粉1kg、硬脂酸2kg和磷脂酰膽堿3kg，在通氮氣條件下加熱至82℃，得到組分A；將甘油2kg和poloxamer188 2kg的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在82℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得主藥混懸液；
實施例4
將三七總皂苷藥粉1kg、三月桂酸甘油酯4kg和蛋黃卵磷脂2kg，在通氮氣條件下加熱至84℃，得到組分A；將甘油1.5kg和poloxamer188 0.5kg的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在84℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得主藥混懸液；
實施例5
將三七總皂苷藥粉1kg與聚氰基丙烯酸烷酯5kg、聚乳酸5kg，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相為1∶4(v/v)，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過濾，即得主藥混懸液。
實施例6
將三七總皂苷藥粉1kg與聚丙交酯—乙交酯8kg，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相為1∶4(v/v)，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過濾，即得主藥混懸液。
實施例7
將三七總皂苷藥粉1kg與殼聚糖6kg、明膠3kg，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相為1∶4(v/v)，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過濾，即得主藥混懸液。
實施例8
將三七總皂苷藥粉1kg與聚乳酸2kg、聚丙交酯—乙交酯5kg，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相為1∶4(v/v)，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用玻砂漏斗(9-15μm)過濾，即得主藥混懸液。
實施例9
稱取Witepsol H35 6kg加入三七總皂苷1kg，加熱熔融作為油相；稱取大豆卵磷脂3kg，加少量吐溫-80 1kg，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相；再將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1小時后超聲分散，室溫，頻率45-50Hz，超聲時間5-8分鐘，即得主藥混懸液。
實施例10
取三七總皂苷1kg，三月桂酸甘油酯6kg和丙酮適量加入容器中，超聲使充分溶解，加入蛋黃卵磷脂2kg，微熱使溶成有機(jī)相；另取蛋黃卵磷脂1kg溶于適量水中，構(gòu)成水相；將有機(jī)相在(1000r/min)攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4小時，使有機(jī)溶媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下(1000r/min)快速溶解于0-2℃的水相中，繼續(xù)攪拌2小時，即得主藥混懸液。
實施例11
取三七總皂苷1kg，溶于50％乙醇中；將硬脂酸10kg溶于正己烷，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1個大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，即得主藥混懸液。
實施例12
取三七總皂苷1kg，溶于80％乙醇中；將三月桂酸甘油酯8kg溶于正己烷，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.2個大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，即得主藥混懸液。
實施例13
取三七總皂苷1kg，溶于60％乙醇中；將單硬脂酸甘油酯9kg溶于正己烷，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.15個大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，即得主藥混懸液。
實施例14
將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑聚乙烯吡咯烷酮，調(diào)pH值為5.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每支5ml的水針制劑10000支。
實施例15
將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑聚乙烯吡咯烷酮，加入氯化鈉調(diào)等滲，調(diào)pH值為7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每瓶100ml的輸液制劑10000瓶。
實施例16
將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入甘露醇，調(diào)pH值為6.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，干燥，制備成粉針制劑10000支。
實施例17
將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入右旋糖苷，調(diào)pH值為5.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成凍干粉針制劑10000支。
實施例18
將上述主藥混懸液加入適量注射用水和聚乙烯吡咯烷酮，調(diào)pH值為6.5，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每支5ml的水針制劑10000支。
實施例19
將上述主藥混懸液加入適量注射用水和聚乙烯吡咯烷酮，加入葡萄糖調(diào)等滲，調(diào)pH值為5.8，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每瓶100ml的輸液制劑10000瓶。
實施例20
將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入果糖，調(diào)pH值為6.2，用0.22μm微孔濾膜過濾，干燥，制備成粉針制劑10000支。
實施例21
將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入葡聚糖、乳糖，調(diào)pH值為6.7，用0.22μm微孔濾膜過濾，冷凍干燥，制備成凍干粉針制劑10000支。
權(quán)利要求
1、一種納米血塞通注射制劑，其特征在于它是將三七總皂苷配以載體制成納米級的主藥混懸液得到的注射制劑，其中三七總皂苷0.8-1.2重量份、載體8.8-9.2重量份。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的納米血塞通注射制劑，其特征在于所述的納米級為22nm-84nm。
3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的納米血塞通注射制劑，其特征在于，其制備方法為
(1)主藥混懸液是用下述五種方法中的任何一種制備而成
處方為三七總皂苷1重量份、載體7-10重量份；
方法一將三七總皂苷藥粉、脂質(zhì)和乳化劑，在通氮氣條件下加熱至80±5℃，得到組分A；將甘油和poloxamer188的水溶液，加熱至與組分A相同的溫度，得到組分B；在攪拌條件下將組分A加入到組分B中，制成粗乳，在80±5℃通氮氣條件下用高壓乳勻機(jī)載在41.4MPa壓力下乳勻5次，充氮氣分裝后，迅速冷卻，即得。
方法二稱取脂質(zhì)加入三七總皂苷，加熱熔融作為油相；稱取乳化劑，加少量吐溫-80，在高速攪拌條件加入70±5℃的蒸餾水中，待完全熔融作為水相；將油相緩慢加入水相中，持續(xù)攪拌1小時后超聲分散，室溫，頻率45-50Hz，超聲時間5-8分鐘，即得。
方法三取三七總皂苷，脂質(zhì)和丙酮適量加入容器中，超聲使充分溶解，加入乳化劑，微熱使溶成有機(jī)相；另取乳化劑溶于適量水中，構(gòu)成水相；將有機(jī)相在1000r/min攪拌下注入75±2℃水相中，繼續(xù)加熱攪拌4小時，使有機(jī)溶媒完全蒸發(fā)并使體系濃縮，將所得的半透明體系攪拌下1000r/min快速溶解于0-2℃的水相中，繼續(xù)攪拌2小時，即得。
方法四取三七總皂苷，溶于50％-80％乙醇中；將脂質(zhì)的一種或多種溶于烷烴，混合攪拌均勻；將乙醇溶解物和烷烴溶解物混合，放入旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀，控制壓力0.1-0.2個大氣壓，去除有機(jī)溶劑至盡，將蒸餾物放入密閉容器中進(jìn)行超聲處理，即得。
方法五將三七總皂苷藥粉與載體，同無水乙醇混合，搖勻，得油相；pH值為6的0.5％Pluronic F68的水溶液，為水相；在將兩相保持溫度為20℃，按油相∶水相體積比為1∶4，將油相通過硅膠管或細(xì)針頭射入電磁攪拌的水相中，立即形成納米囊，將溶液真空蒸發(fā)至原體積的1/5左右，用9-15μm玻砂漏斗過濾，即得。
(2)制劑的制備
水針制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每支5ml的水針制劑；
輸液制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水和穩(wěn)定劑，加入氯化鈉或葡萄糖調(diào)等滲，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，滅菌，制備成每瓶100ml的輸液制劑；
粉針制劑的制備將上述主藥混懸液加入適量注射用水，再加入水溶性注射用藥用輔料，調(diào)pH值為5.0-7.0，用0.22μm微孔濾膜過濾，干燥，制備成粉針制劑。
全文摘要
本發(fā)明屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種納米血塞通注射制劑及其制備方法；藥理實驗表明，本發(fā)明納米血塞通注射制劑能很好的透過血腦屏障，具有緩釋作用，且療效比現(xiàn)有注射制劑有顯著提高；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)考察實驗表明，本發(fā)明制劑分散性好、包封率高、載藥量大；安全性評價實驗表明，本發(fā)明具有很好的注射給藥安全性。
文檔編號A61P7/02GK1879638SQ200510077200
公開日2006年12月20日 申請日期2005年6月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月17日
發(fā)明者張晴龍 申請人:張晴龍