專利名稱：一種治療腹瀉病的中藥組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，具體來說是涉及一種用于治療腹瀉病的中藥組合物及其制備方法和應用。
背景技術：
感染性腹瀉又稱腹瀉病，是一組廣泛流行于世界各地的胃腸道傳染病，發(fā)病率高，危害嚴重。全世界每年發(fā)病數(shù)十億人次，成人與兒童均有較高的發(fā)病率。據(jù)WHO統(tǒng)計全球五歲以下每年就有幾億小兒患腹瀉，導致五百萬小兒死亡。據(jù)國內資料統(tǒng)計，因腹瀉而導致小兒死亡的原因在小兒常見死亡原因中排第四位，已引起世界衛(wèi)生組織及國內衛(wèi)生界的重視。軍隊這個相互密切接觸的大集體，是急性感染性腹瀉的易感體，而且行軍腹瀉也與細菌、病毒感染有關。現(xiàn)代醫(yī)學對感染性腹瀉的病因、診斷、感染途徑、檢測方法研究很多，但治療特別是對病毒性腹瀉無特殊有效藥物，而且致瀉病原菌隨著抗生素的廣泛應用，其耐藥性越來越嚴重，雖然不斷有新抗生素出現(xiàn)，但價格昂貴，使用也不普遍。目前，病毒性腹瀉(主要為輪狀病毒所致)在感染性腹瀉中占有重要的比例，國內尚無特異性治療病毒性腹瀉的中成藥，也沒有對細菌及病毒性腹瀉都產生良好治療效果的西藥。
由于腹瀉病因復雜，主要靠綜合性防御，各國正在開展疫苗工程，但應用于臨床還存在很多問題。中藥治療感染性腹瀉副作用小，價格便宜，配伍得當可發(fā)揮廣泛的藥理效應。如果同時具有抗腹瀉、殺菌、抗病毒作用，將對感染性腹瀉產生很好的療效，而且致瀉病原菌很少對中藥產生耐藥性。因而中藥在治療感染性腹瀉尤其是病毒感染性腹瀉中將顯現(xiàn)出獨特的優(yōu)勢。葛根黃芩黃連湯、黃芩湯、白頭翁湯、芍藥湯等是治療腹瀉的古方(《傷寒論》)，廣東民間也有使用番石榴葉治療泄瀉的經驗。

發(fā)明內容
(一)要解決的技術問題本發(fā)明的目的是提供一種既能殺滅致瀉病原菌又能滅活致瀉病毒，治療感染性腹瀉的高效、速效、安全、無毒的中藥組合物及其制備方法。
(二)技術方案為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取如下的技術方案本發(fā)明治療腹瀉病的中藥組合物是由有效成分和/或藥學上可接受的輔料組成，所述的有效成分是由按重量份計的下列原料制成的黃連27-62、黃芩27-62、白芍27-62、廣藿香15-43、番石榴葉60-120、茯苓27-62。
優(yōu)選的有效成分原料配比為黃連36-54、黃芩36-54、白芍36-54、廣藿香24-38、番石榴葉70-110、茯苓36-54。
最優(yōu)選的有效成分原料配比為黃連45、黃芩45、白芍45、廣藿香30、番石榴葉90、茯苓45。
所述的輔料選自一種或多種在制藥領域中通常使用的填料如稀釋劑、調味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑、表面活性劑或成膠囊材料。合適的固體填料包括而不限于碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可脂等。
本發(fā)明還提供了該中藥組合物的制備方法，它包括如下步驟(1)取黃連，加入按體積質量比為5-15倍的50-85％乙醇溶液，60-100℃加熱回流提取1-4小時，提取共1-4次，過濾，合并濾液，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用；(2)取黃芩、白芍、廣藿香、番石榴葉、茯苓，加入按體積質量比為5-15倍的水，60-100℃煎煮1-4小時，共煎煮1-3次，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.10-1.16，30-80℃烘干，制成B備用；(3)將A與B混勻，和藥學上常用的輔料按常規(guī)方法制成散劑、膠囊、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、滴丸、軟膠囊、泡騰片、包衣丸劑和醫(yī)藥學上可接受的其他劑型。
本發(fā)明中藥組合物的鑒別方法如下
(1)分別取本發(fā)明中藥組合物、黃連、鹽酸小檗堿制成測試溶液，按照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三樣品分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)為展開劑，置氨氣飽和的層析缸內展開，取出，晾干，置紫外光下檢視，三樣品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(2)分別取本發(fā)明中藥組合物、黃芩、黃芩甙制成測試溶液，按照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述三樣品分別點于同一聚酰胺-6薄膜上，以冰醋酸-水(3.6∶6.4)為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視，三樣品色譜的相應位置上，顯相同顏色的斑點，噴10％AlCl3乙醇溶液后，置紫外光燈(365nm)下檢視，顯相同顏色的熒光斑點。
白芍、廣藿香、番石榴葉、茯苓均可用薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗鑒別。
本發(fā)明中藥組合物以黃連為君藥，黃連味苦性寒，苦能燥濕，寒能清熱解毒，為治濕熱泄瀉之主藥；黃連大苦大寒，苦燥濕，寒勝熱，能泄降一切有余之濕火。黃芩、廣藿香為臣藥，黃芩，其性清肅，所以除邪，味苦所以燥濕，陰寒所以勝熱，故主諸熱；諸熱者，邪熱與濕熱也；苦寒能除濕熱，所以小腸利而水自逐，源清而流潔也。廣藿香芳香化濕，醒脾和胃，恢復脾土運化功能，與黃芩合用共為治濕熱泄瀉之輔藥。白芍、番石榴葉為佐藥，白芍緩急止痛，治腹瀉之腹痛；番石榴葉收斂澀腸以治標，與黃連、黃芩合用，標本同治增強效果。茯苓為使藥，茯苓入脾、小腸經，引諸藥入脾與小腸，且能健脾和胃，利水滲濕，分利小便以實大便。以上諸藥合用，可奏清熱燥濕，解毒止瀉。
(三)有益效果本發(fā)明中藥組合物具有清熱解毒、燥濕止瀉的功效，用于急性濕熱泄瀉，西醫(yī)診斷為大腸桿菌性腸炎、輪狀病毒性腸炎、沙門菌性腸炎。本發(fā)明中藥組合物對小腸推進率有明確抑制作用；能抑制腸管的自發(fā)運動；對試驗性菌痢有治療作用；能抑制輪狀病毒；并有止瀉、鎮(zhèn)痛、抗炎等作用。本發(fā)明中藥組合物小鼠灌胃給藥最大耐受量大于15g/Kg。大鼠長期毒性試驗，連續(xù)灌胃給藥4周，結果未見明顯毒性反應。
用本發(fā)明中藥組合物對致瀉病原微生物進行試驗研究。結果表明所述中藥組合物對志賀氏菌F2a野生菌株、產腸毒素大腸桿菌、霍亂弧菌均有殺滅作用，殺菌效果隨作用時間和藥物濃度的增加而升高。對輪狀病毒(HRV)具有滅活作用。400g/L的藥液30min內能使HVR抗原完全滅活，100g/L的藥液能使HVR-RNA降解。
具體實施例方式
實施例1本發(fā)明膠囊劑的制備取黃連450g，加入10倍量的70％乙醇溶液，加熱回流提取3次，每次1.5小時。過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用。取黃芩450g、白芍450g、廣藿香300g、番石榴葉900g、茯苓450g，加入10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.10(溫度60℃時)，烘干，制成B備用。將A、B混勻，整粒，裝入膠囊即得。
實施例2本發(fā)明散劑的制備取黃連360g，加入5倍量的85％乙醇溶液，加熱回流提取2次，每次3小時。過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用。取黃芩540g、白芍400g、廣藿香240g、番石榴葉1100g、茯苓500g，加入7倍量的水，煎煮1次，4小時，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.12(溫度60℃時)，烘干，制成B備用。將A、B混勻，干燥，過篩，分包即得。
實施例3本發(fā)明顆粒劑的制備取黃連540g，加入15倍量的50％乙醇溶液，加熱回流提取1次，4小時。過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用。取黃芩360g、白芍360g、廣藿香380g、番石榴葉700g、茯苓360g，加入12倍量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.16(溫度60℃時)，烘干，制成B備用。將A、B及輔料混勻，制粒后干燥，整粒，分裝即得。
實施例4本發(fā)明片劑的制備取黃連420g，加入8倍量的75％乙醇溶液，加熱回流提取4次，每次1小時。過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用。取黃芩450g、白芍380g、廣藿香350g、番石榴葉1000g、茯苓400g，加入15倍量的水，煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.15(溫度60℃時)，烘干，制成B備用。將A、B及輔料混勻，制粒后干燥，整粒，壓成片劑包衣即得。
實施例5本發(fā)明丸劑的制備取黃連400g，加入6倍量的80％乙醇溶液，加熱回流提取4次，每次1.5小時。過濾，合并濾液，減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用。取黃芩400g、白芍400g、廣藿香250g、番石榴葉800g、茯苓400g，加入6倍量的水，煎煮3次，每次1.5小時，合并煎液，過濾，濾液減壓濃縮到相對密度1.13(溫度60℃時)，烘干，制成B備用。將A、B及輔料混合成塊狀物，干燥，粉碎成細粉，再泛制成丸即得。
實施例6本發(fā)明口服液的制備取黃芩450g、白芍450g、廣藿香300g、番石榴葉900g、茯苓450g，加入10倍量的水，煎煮2次，每次1.5小時，合并煎液，過濾制成B備用。取黃連450g，加入10倍量的70％乙醇溶液，加熱回流提取3次，每次1.5小時，過濾，合并濾液減壓回收乙醇，加入B后減壓濃縮至浸膏狀，用適量純化水稀釋，冷藏，濾過，加入矯味劑、矯嗅劑、著色劑及防腐劑等，再加適量的純化水至1000ml，冷藏，濾過，封裝即得。
實驗例1本發(fā)明中藥組合物對在體小鼠腸功能的影響試驗試驗方法1、藥物取本發(fā)明實施例6所得口服液備用，作為試驗組。瀉痢停片(哈爾濱制藥六廠生產，批號960274)，作為對照組；同時設空白對照(同體積生理鹽水)。
2、動物及操作方法ICR小鼠，雌雄各半，體重22±3.6g，第一軍醫(yī)大學試驗動物研究中心提供，合格證號97A026。50只隨機分為5組，即空白對照組、對照組，試驗組低、中、高劑量組。
本發(fā)明中藥組合物按成人劑量折算小鼠劑量設置低劑量組1g/Kg、中劑量組2g/Kg、高劑量組4g/Kg；瀉痢停劑量0.25g/Kg。灌胃給藥。
試驗結果數(shù)據(jù)見表1-3。
表1本發(fā)明中藥組合物對小腸推進率的影響(n＝10)

**表示各組與空白對照組比P＜0.01 △表示與陽性空白對照組相比P＞0.0.5表2本發(fā)明中藥組合物新斯的明所致小腸機能亢進的影響(n＝10)

**表示各組與空白對照組相比P＜0.01 △表示與對照組相比P＞0.05 ▲▲表示與對照組比較P＜0.01表3本發(fā)明中藥組合物對小鼠小腸吸收功能的影響(n＝10)

**表示各組與空白對照組相比P＞0.01 △表示與對照組相比P＞0.0.5 ▲表示與對照組比較P＜0.05。
本試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物對小鼠小腸推進率有明顯抑制作用，并能拮抗新期的明引起的小腸運動亢進，促進小腸對水份和Cl-的吸收。
實驗例2本發(fā)明中藥組合物對實驗性急性菌痢的治療作用試驗方法1、藥物取實施例1所得膠囊劑用滅菌蒸餾水制成濃度為1g/ml，2g/ml混懸液，每次灌胃前新鮮配制，作為試驗組；氟哌酸膠囊(汕頭金石制藥總廠生產，批號950206)作為對照組；同時設空白對照(同體積生理鹽水)。
2、動物及操作方法新西蘭兔，雌雄各半，體重2.27±0.13Kg，第一軍醫(yī)大學試驗動物研究中心提供，合格證號97A52。將30只兔隨機分為6組，即空白對照組、菌痢模型組、氟哌酸組，本發(fā)明中藥組合物低、中、高劑量組。各組動物觀察一周，無腹瀉及試驗前連續(xù)三天未培養(yǎng)出志賀氏菌或沙門氏菌的動物即可做為試驗動物。
本發(fā)明中藥組合物按成人劑量折算兔劑量設置低劑量組0.22g/Kg、中劑量組0.44g/Kg、高劑量組0.88g/Kg；氟哌酸劑量0.25g/Kg。灌胃給藥，與臨床用藥途徑一致。
試驗結果數(shù)據(jù)見表4-5。
表4兔血漿IL-1活性(U/ml)變化結果

*P＜0.05a，b，c，d分別表示同組內與第0，1，2，3相比較；e表示同一天內與空白對照組相比較。
表5兔血漿TNF活性(U/ml)變化結果

*P＜0.05a，b，c，d分別表示同組內與第0，1，2，3天相比較；e表示同一天內與空白對照組相比較。
本試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物對實驗性急性菌痢具有治療作用，能殺滅病原體，保護腸道細胞，促進受損腸粘膜的修復。還能降低菌痢時血漿中IL-1和TNF的濃度，這可能是藥物抑制炎癥，殺死志賀氏菌的機理之一。
實驗例3本發(fā)明中藥組合物對輪狀病毒的抑制作用實驗方法
1、藥物取實施例1所得膠囊劑300g加蒸餾水200ml，浸1小時后加熱煎沸40min，過濾，殘渣再加水100ml煎30min，過濾，合并二次濾液，于水浴上濃縮至100ml藥液，pH調至7.0，過濾，濾液中加112ml 95％乙醇，邊加邊攪拌，使藥液含醇量達50％左右。冷藏24小時。過濾，去沉淀。再將濾液中加280ml 95％乙醇，邊加邊攪拌使藥液含醇量達70％左右，冷藏24小時。過濾，棄去沉淀。最后以四蒸水加至100ml，以兩個50ml瓶分裝，滅菌后置冰箱貯存?zhèn)溆?，作為試驗組。病毒唑注射液，0.1g/ml，江蘇無錫市第七制藥廠提供，批號960820，作為對照組。
2、操作方法輪狀病毒抗原ELSA檢測試劑盒，由第一軍醫(yī)大學珠江醫(yī)院生物高科技中心提供，批號970126。
毒株人輪狀病毒W(wǎng)a株(A群、血清I型，長型)衛(wèi)生部蘭州生物制品研究所提供。
細胞恒河猴胚腎MA104傳代細胞，衛(wèi)生部蘭州生物制品研究所提供。正常細胞對照。
試驗組對MA104培養(yǎng)細胞的毒性試驗，結果顯示1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640的參試藥液與0.25/L、0.125g/L、0.0625g/L病毒唑對MA104培養(yǎng)細胞的生長無毒副作用，與正常細胞對照組一致，無病變現(xiàn)象出現(xiàn)。而1∶5、1∶10濃度的參試藥液對MA104細胞影響明顯，引起細胞變圓、聚合或融合，拉網(wǎng)，甚至細胞溶解、脫落，細胞瓶中培養(yǎng)液變渾濁。1∶20濃度參試藥液對MA104細胞稍有影響，有2孔細胞界面模糊，間隙增大，細胞質內顆粒增多，出現(xiàn)細胞病變，即CPE現(xiàn)象，故取1∶40、1∶80、1∶160三個濃度的參試藥液和0.125g/L對照組作抗病毒試驗用。
抗病毒試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物制劑對輪狀病毒感染的MA104細胞具有預防保護作用和治療作用。能抑制輪狀病毒在細胞中的復制和繁殖，使病毒顆粒的外殼或內核破壞、受損，并有增強白細胞介素-2的含量，增強細胞免疫和體液免疫的作用。
實驗例4本發(fā)明中藥組合物的止瀉作用實驗方法1、藥物取本發(fā)明實施例6所得口服液備用，作為試驗組。瀉痢停片(哈爾濱制藥六廠生產，批號960274)，作為對照組。同時設空白對照(同體積生理鹽水)。
本發(fā)明中藥組合物按成人劑量折算小鼠劑量設置低劑量組1g/Kg、中劑量組2g/Kg、高劑量組4g/Kg；瀉痢停劑量0.25g/Kg。灌胃給藥。
2、動物及分組ICR小鼠，雌雄各半，體重22±3.6g，第一軍醫(yī)大學試驗動物研究中心提供，合格證號97A026。小鼠50只隨機分為5組，即空白對照組、對照組，本發(fā)明中藥組合物低、中、高劑量組。
將川大黃飲片烘干，打成粗粉，取100g加蒸餾水200ml浸24小時，過濾，制成1∶2濾液備用。各組動物禁食12小時后，灌胃給藥，1小時后灌服大黃冷浸液，0.5ml/只，隨機將小鼠單個置鐵籠內，籠下墊濾紙，觀察給大黃后5小時內濾紙上大便的情況，記錄每只鼠排稀便、干便的數(shù)量。制備病理模型。
試驗結果數(shù)據(jù)見表6。
表6本發(fā)明中藥組合物對大黃冷浸液所致腹瀉的影響(n＝10)

**表示各組與對照組相比P＜0.01 △表示與空白對照組相比P＞0.05。
本試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物能減少大黃引起的小鼠排便增多，有止瀉作用。
實驗例5本發(fā)明中藥組合物的鎮(zhèn)痛作用實驗方法1、藥物取本發(fā)明實施例6所得口服液備用，作為試驗組。瀉痢停片(哈爾濱制藥六廠生產，批號960274)，作為對照組。同時設空白對照(同體積生理鹽水)。
2、動物及分組ICR小鼠，雌雄各半，體重22±3.6g，第一軍醫(yī)大學試驗動物研究中心提供，合格證號97A026。小鼠40只隨機分為4組，即空白對照組、對照組，本發(fā)明中藥組合物低、高劑量組。
本發(fā)明中藥組合物按成人劑量折算小鼠劑量設置低劑量組1g/Kg、高劑量組4g/Kg；對照劑量0.25g/Kg。灌胃給藥。
試驗結果數(shù)據(jù)見表7-8。
表7本發(fā)明中藥組合物對乙酸所致小鼠扭體反應的影響(n＝10)

**表示各組與對照組相比P＜0.01 △表示與空白對照組相比P＞0.05，▲表示與對照組比較P＜0.05。
表8本發(fā)明中藥組合物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用(甩尾法)(n＝10)

**表示各組與對照組相比P＜0.01。
本試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物具有鎮(zhèn)痛作用，能提高痛閾值。
實驗例6本發(fā)明中藥組合物的抗炎作用實驗方法1、藥物取實施例2所得散劑用滅菌蒸餾水制成濃度為0.5g/ml混懸液作為灌胃用，作為試驗組。瀉痢停片(哈爾濱制藥六廠生產，批號960274)，作為對照組。同時設空白對照(同體積生理鹽水)。
2、動物及操作方法ICR小鼠，雌雄各半，體重22±3.6g，第一軍醫(yī)大學試驗動物研究中心提供，合格證號97A026。小鼠40只隨機分為4組，即空白對照組、對照組，本發(fā)明中藥組合物低、高劑量組。
本發(fā)明中藥組合物按成人劑量折算小鼠劑量設置低劑量組1g/Kg、中劑量組2g/Kg、高劑量組4g/Kg；瀉痢停劑量0.25g/Kg。灌胃給藥。
實驗結果數(shù)據(jù)見表9-10，本試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物能降低毛細血管通透性，有明顯的抗炎作用。
表9本發(fā)明中藥組合物小鼠毛細血管通透性的影響(n＝10)

**表示各組與對照組相比P＜0.01 △表示與空白對照組相比P＞0.05。
表10本發(fā)明中藥組合物對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥的影響(n＝10)

**表示各組與對照組相比P＜0.01 △表示與空白對照組相比P＞0.05。
實驗例7本發(fā)明中藥組合物急性毒性試驗試驗方法藥物經預實驗測不出LD50，故按最大耐受量方法測定小鼠對本發(fā)明中藥組合物的最大耐受劑量(MTD)。藥物按最大溶解度，最大劑量配制成0.3g/ml，取20只健康昆明種小鼠，雌雄各半，實驗在室溫下進行(溫度18-24℃，濕度為40％)，動物喂以普通飼料。動物灌胃藥量為15g/kg(0.3g/ml、1ml/只)，連續(xù)二次灌胃，每次0.5ml/只，間隔2小時。觀察并記錄24小時及1周內動物死亡情況及毒性反應。
試驗結果健康昆明小鼠20只，連續(xù)二次灌胃，總劑量為15g/kg，(相當于體重人的劑量200倍)，24小時內未見動物死亡，繼續(xù)觀察一周，小鼠生理狀態(tài)未見異常，活動、飲食、精神狀態(tài)、大小便等無異常，口腔、眼、鼻、無異常分泌物，心跳、呼吸正常。尸檢未見主要臟器病理學改變。
試驗結果表明，本發(fā)明中藥組合物臨床劑量0.075g/kg是安全的。
實驗例8本發(fā)明中藥組合物長期毒性試驗試驗方法本發(fā)明中藥組合物臨床劑量0.075g/kg.d，試驗設高劑量組7.5g/kg.d、中劑量組3.75g/kg.d、低劑量組1.5g/kg.d、對照組給同體積水。藥物均從每天上午8-9時灌胃給藥，每周給藥7天，并稱重一次，按體重變化調整給藥量，連續(xù)灌胃四周。
試驗結果在試驗期間內動物生長發(fā)育良好，活動及精神狀態(tài)無任何異常。動物皮毛光澤，飲食正常，體重隨年齡增長而增加，試驗各組及對照組動物體重增長數(shù)據(jù)經統(tǒng)計學處理無顯著性差異。數(shù)據(jù)見表11。
表11連續(xù)給藥二十八天大鼠體重變化(X±SD.g)

按7.5g/kg.d、3.75g/kg.d、1.5g/kg.d、給大鼠灌胃28天后，對大鼠飲食、體重增長、血尿常規(guī)及主要臟器系數(shù)無顯著影響。生化指標檢測結果統(tǒng)計分析表明，除高劑量組膽紅素增高外，其它各項指標與對照組比較均無顯著差異。停藥后兩周，高劑量組膽紅素恢復正常。病理診斷結果顯示，大鼠給藥28天后，對心、肝、肺、脾、腎、胃、大腸、甲狀腺、腎上腺、性器官等臟器組織的結構無明顯病理改變。綜合各項檢測結果，連續(xù)灌胃大鼠28天對動物未產生明顯的毒副反應，表明本發(fā)明中藥組合物臨床給藥劑量是安全的。
實驗例9臨床療效對比用本發(fā)明中藥組合物治療感染性腹瀉的臨床觀察，并與瀉痢停(瀉痢停片，哈爾濱制藥六廠生產，批號960274)對照，結果本發(fā)明中藥組合物組，止瀉最短時間為12小時，最長3天，24小時止瀉率為87.3％，3天所有病人止瀉。瀉痢停組，止瀉時間最短24小時，最長5天，24小時止瀉率為74.3％，本發(fā)明中藥組合物明顯優(yōu)于瀉痢停組，P＜0.05。
實驗例10本發(fā)明中藥組合物治療急性感染性腹瀉的臨床研究1、試驗藥品試驗組急瀉康膠囊，每粒0.35g，每次5粒，每日3次，口服。
對照組葛根芩連膠囊，每粒0.4g，每次4粒，每日3次，口服。選用葛根芩連膠囊(由安徽東南藥業(yè)有限責任公司生產，批準文號(97)衛(wèi)藥準字Z-086號)作為陽性對照。葛根芩連膠囊是由傳統(tǒng)的葛根黃芩黃連湯的原方提煉而成。葛根芩連湯是最新規(guī)范普通高等教育《中醫(yī)內科學》教材中治療泄瀉濕熱證的主方，所以在傳統(tǒng)藥物中是金對照。
兩組療程均為3天。試驗期間均不得使用氟哌酸、痢特靈、百炎凈、黃連素、瀉痢停、藿香正氣丸等治療腹瀉的中西藥物。
2、受試者選擇(1)納入標準a、符合上述中醫(yī)辨證及西醫(yī)診斷標準者；b、年齡在18～65歲；c、病程不超過24小時者；d、大便常規(guī)檢查發(fā)現(xiàn)白細胞或膿細胞及紅細胞者，或ELISA法檢測出患者糞便中有輪狀病毒特異性抗原者；或用PCR法快速檢出ETEC基因片段者；e、受試者或受試者指定代理人簽署知情同意書后。
(2)病例入組情況表12各中心病例分布情況

注釋①中心一為廣州中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院；中心二為浙江省中醫(yī)院；中心三為江西中醫(yī)學院附屬醫(yī)院；中心四為湖南中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院；中心五為福建中醫(yī)藥研究院。
如表12所示，試驗組為396例，對照組為132例，共528例。其中試驗組脫落1例，對照組脫落1例，共2例。試驗組剔除5例，對照組剔除2例，共7例。脫落率為0.37％、剔除率為1.33％。
(3)統(tǒng)計病例情況表13統(tǒng)計病例情況

如表13所示進入ITT集的有522例，試驗組為392例，對照組為130例；進入PP集的有519例，試驗組為390例，對照組為129例；進入安全集的有524例，試驗組為393例，對照組為131例。
3、實驗結果(1)濕熱證兩組臨床療效總有效率的比較表14濕熱證兩組臨床療效總有效率的比較

注不考慮中心效應如表14所示，ITT數(shù)據(jù)集治療濕熱證試驗組總有效率86.73％，對照組總有效率82.31％；PP數(shù)據(jù)集試驗組總有效率86.67％，對照組總有效率82.95％，兩組臨床總有效率比較無顯著性差異(P＞0.05)。
(2)對致瀉性大腸桿菌性腸炎臨床總有效率的比較表15對致瀉性大腸桿菌性腸炎臨床總有效率的比較

注不考慮中心效應如表15所示，ITT數(shù)據(jù)集試驗組對致瀉性大腸桿菌性腸炎總有效率91.24％，對照組總有效率81.25％，比較具有顯著差異(P＜0.05)。PP數(shù)據(jù)集試驗組總有效率91.19％，對照組總有效率82.54％，比較無顯著性差異(P＞0.05)。
(3)對輪狀病毒性腸炎臨床總有效率的比較表16輪狀病毒性腸炎臨床總有效率的比較

注不考慮中心效應如表16所示，ITT數(shù)據(jù)集試驗組對輪狀病毒性腸炎總有效率為82.32％，對照組總有效率83.33％；PP數(shù)據(jù)集試驗組總有效率82.23％，對照組總有效率83.33％，比較均無顯著性差異(P＞0.05)。見表16。
(4)兩組治療后生命體征指標的比較表17兩組治療后生命體征的比較

如表17所示，兩組間治療后生命體征指標的均值比較，兩組組內比較，收縮壓和舒張壓無顯著性差異(P＞0.05)，心率、脈搏和呼吸有顯著性差異(P＜0.01)，但是無臨床意義。兩組治療前后差值的比較，呼吸、收縮壓和舒張壓無顯著差異(P＞0.05)，心率和脈搏有顯著性差異(P＜0.05)，但是無臨床意義。
(5)治療前、后安全性檢查指標正、異?；蜿幮浴㈥栃郧闆r的比較表18兩組治療前血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖正常、異常的比較


如表18所示，兩組治療前各項檢查指標的正常、異常情況比較，所有指標均無顯著性差異(P＞0.05)。
(6)兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖正常、異常情況的比較表19兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖正常、異常的比較


如表19示，兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖正常、異常情況的比較，均無顯著性差異(P＞0.05)。
(7)兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖轉正常率、轉異常率的比較表20兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖轉正常率、轉異常率的比較


注-/-表示治療前正常，療后仍正常；-/+表示治療前正常，療后變異常；+/-表示治療前異常，治療后轉正常；+/+表示治療前異常，治療后仍異常如表20所示，兩組治療后血常規(guī)、尿常規(guī)、肝功能、腎功能及心電圖的治療前正常轉異常率、治療前異常轉正常率的比較，均無顯著性差異(P＞0.05)。
(8)不良反應情況記錄表21不良反應情況記錄

(9)不良反應的發(fā)生率表22不良反應的發(fā)生率比較

如表22所示，兩組不良反應的發(fā)生率比較，無顯著性差異(P＞0.05)。
4、研究結論根據(jù)實驗結果，本發(fā)明的中藥組合物治療急性感染性腹瀉(濕熱證)有良好的療效，作用與對照藥(葛根芩連膠囊)一致；對輪狀病毒性腸炎的臨床療效(按臨床痊愈、顯效、有效、無效分級)，試驗組優(yōu)于對照組；對輪狀病毒轉陰率，試驗組亦優(yōu)于對照組。試驗藥安全性好，不良反應輕微。
權利要求
1.一種治療腹瀉病的中藥組合物，它是由有效成分和/或藥學上可接受的輔料組成，其特征在于，所述的有效成分是由按重量份配比的下列原料制成黃連27-62、黃芩27-62、白芍27-62、廣藿香15-43、番石榴葉60-120、茯苓27-62。
2.根據(jù)權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，所述的有效成分是由按重量份配比的下列原料制成黃連27-62、黃芩27-62、自芍27-62、廣藿香15-43、番石榴葉60-120、茯苓27-62。
3.根據(jù)權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，所述的有效成分是由按重量份配比的下列原料制成黃連45、黃芩45、自芍45、廣藿香30、番石榴葉90、茯苓45。
4.根據(jù)權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，它是散劑、膠囊、片劑、口服液、顆粒劑、丸劑、滴丸、軟膠囊、泡騰片或包衣丸劑。
5.一種制備權利要求4所述的中藥組合物的方法，它包括如下步驟(1)取黃連，按重量計用量比1∶5-15加入乙醇溶液，加熱回流，過濾，濾液減壓回收乙醇，濃縮液噴霧干燥成細粉A備用；(2)取黃芩、白芍、廣藿香、番石榴葉、茯苓，按重量計用量比1∶5-15加入水，煎煮，過濾，濾液減壓濃縮，烘干，制成B備用；(3)將A與B混勻，直接制成或與藥學上可接受的輔料制成不同劑型。
6.根據(jù)權利要求5所述的方法，其特征在于，其中步驟(2)中濾液減壓濃縮是在30-80℃溫度下濃縮至濾液相對密度為1.10-1.16。
7.權利要求1-4之任一所述的中藥組合物在制備治療腹瀉病藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種治療腹瀉病的中藥組合物，是由黃連、黃芩、白芍、廣藿香、番石榴葉、茯苓為原料制成。它具有清熱解毒、燥濕止瀉的功效，既能殺滅致瀉病原菌又能滅活致瀉病毒，治療急性感染性腹瀉高效、速效、安全、無毒。
文檔編號A61K36/076GK1772081SQ20051008680
公開日2006年5月17日 申請日期2005年11月7日 優(yōu)先權日2005年11月7日
發(fā)明者黃輝球 申請人:惠州九惠制藥廠