專利名稱：鬼針草總黃酮在制備防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鬼針草總黃酮的用途，確切地說(shuō)是鬼針草總黃酮在防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
鬼針草又名婆婆針、鬼杈草，小鬼針，粘身草等，其藥用歷史悠久，始載于唐.陳藏器《本草拾遺》，謂“鬼釵草，味苦平，無(wú)毒，主蛇及蜘蛛咬，杵碎傅之，亦杵絞汁服。生地畔，有椏，方莖，子作釵腳，著人如衣針，北方呼之為鬼針?！惫磲槻蓊愃幉娜菥捎盟?，味苦性平而無(wú)毒，具有清熱解毒，散瘀消腫等功效，主治瘧疾、腹瀉、痢疾、肝炎、急性腎炎、胃痛、噎膈、腸癰、咽喉腫痛、跌打損傷、蛇蟲(chóng)咬傷等。為了更好的認(rèn)識(shí)和了解這一自然資源，更好的開(kāi)發(fā)與利用，現(xiàn)將鬼針草的研究與開(kāi)發(fā)現(xiàn)狀綜述如下。
鬼針草為菊科(Compositae)管狀花亞科鬼針草屬(Bidens L.)植物為一年生草本，其藥材資源非常豐富，主要分布于我國(guó)東北、河北、山東、山西、河南、江蘇、云南、四川、兩廣等地，生于水邊、河岸、濕地、荒地及山坡等處，極易采集。鬼針草的化學(xué)成分鬼針草所含化學(xué)成分種類較多，文獻(xiàn)報(bào)道曾從該植物中分離得到揮發(fā)油類、甾醇、查耳酮、橙酮、聚乙炔類等，其活性成分以聚乙炔類和黃酮類成分為主。已分離出多種聚乙炔類成分。乙醇提取物的正丁醇部分鑒定出4個(gè)黃酮成分，為金絲桃甙(hyperoside)、奧卡寧(okanin)、異奧卡寧-7-O-葡萄糖甙和海生菊甙(maritimein)。鬼針草各部位中黃酮類成分有較大差異，在花果期，葉和花序中總黃酮含量較高(分別為6.67％和6.68％)，莖枝中含量較低(0.89％)。葉中分離鑒定了21種揮發(fā)性成分，主要為脂肪烷和脂肪酸類，另外含少量的醛、酮烯、腈、胺及呋喃類成分；其中脂肪類化合物占相當(dāng)比例。分離出的4種酚酸類成分，經(jīng)理化測(cè)試及光譜分析，分別鑒定為水楊酸、原兒茶酸、沒(méi)食子酸、脂肪酸類化合物。還有甾體類化合物如菠甾醇、胡蘿卜苷，谷甾醇、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。
鬼針草含有豐富的氨基酸，如天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、賴氨酸等17種氨基酸，其中8種為人體必需氨基酸，總蛋白質(zhì)157.89g/kg，總游離氨基酸含量達(dá)139.89g/kg，必需氨基酸總量57.09g/kg。鬼針草所含氨基酸與傳統(tǒng)名貴藥材亞香棒蟲(chóng)草、冬蟲(chóng)夏草相比，在種類上多了胱氨酸，在含量上脯氨酸、谷氨酸高于兩者，其他氨基酸含量相當(dāng)另外鬼針草中還含有11種人體必需微量元素，測(cè)定結(jié)果表明，Mg含量最高，P、Fe、Ca含量較高，Cu、Zn次之，Mn、Co、Ni、Mo、Cr含量最低，鬼針草中含有豐富的P，是其調(diào)節(jié)神經(jīng)、催眠、鎮(zhèn)靜等作用的內(nèi)在原因。
維生素在鬼針草中也有分布，如維生素B1、維生素B2、β-胡蘿卜素。
鬼針草化學(xué)成分多樣，因其富含各種氨基酸和維生素及對(duì)人體有益的微量元素，在民間驗(yàn)方中有小人參之稱。鬼針草的生物活性多樣，且作用溫和持久，具有較高的藥用價(jià)值，尤其對(duì)消化系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)顯示較強(qiáng)的藥理作用，目前我國(guó)的鬼針草產(chǎn)品有悅年片、鬼針草口服液、鬼針草保健沖劑等。這些都是用于防治高血壓等心腦血管的藥物，對(duì)于肝纖維化作用的此藥物的開(kāi)發(fā)還沒(méi)有。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供鬼針草總黃酮的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。
實(shí)際上，本發(fā)明提供了鬼針草總黃酮在制備防治肝纖維化炎的藥物中的應(yīng)用。
肝纖維化是一種病理狀態(tài)，是慢性肝損傷的代償性修復(fù)反應(yīng)，肝臟內(nèi)結(jié)締組織呈異常增生。生物化學(xué)測(cè)定表明，每克正常肝組織濕重平均有5.5-6.5毫克的膠原，而肝硬化的肝臟達(dá)20毫克以上。肝纖維化是慢性肝病進(jìn)一步向肝硬化發(fā)展的主要中間環(huán)節(jié)，故阻止和逆轉(zhuǎn)肝硬化的發(fā)展，促進(jìn)肝纖維化的逐步分解吸收，不僅能減輕肝臟損害程度，而且能防止肝硬化的發(fā)生。各種病因引起的慢性肝病絕大多數(shù)都有肝纖維化，其中25％-40％最終發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。肝纖維化是可逆性病變，肝硬化是不可逆性病變，因此抗纖維化治療是控制肝纖維化進(jìn)展的重要途徑。
目前治療肝纖維化的藥物有1抗病毒肝纖維化在我國(guó)80％和病毒感染有關(guān)，因此抗病毒治療對(duì)于我國(guó)肝纖維化治療的研究尤為重要。
1.1干擾素(IFN) 常規(guī)IFN具有廣譜抗病毒作用。它通過(guò)誘導(dǎo)釋放胞內(nèi)酶如2，5一寡核昔酸合成酶和雙股DNA依賴蛋白激酶，引起病毒mRNA降解和抑制蛋白質(zhì)合成，其抗病毒效果已被證實(shí)。
1.2拉咪映定 拉咪吠定為第二胞普雙脫氧核昔類似物。通過(guò)對(duì)乙型肝炎病毒(HBV)逆轉(zhuǎn)錄酶活性的強(qiáng)制作用，從而抑制HBV復(fù)制和肝內(nèi)循環(huán)感染終止，使肝臟的炎癥壞死反應(yīng)趨向好轉(zhuǎn)。其抗病毒作用已得到肯定。
2抑制肝臟細(xì)胞的炎癥反應(yīng)肝纖維化是以肝損傷和炎癥反應(yīng)為起點(diǎn)的，減低或抑制肝損傷及炎癥反應(yīng)可能是當(dāng)前防治肝纖維化的又一重要課題。
2.1白細(xì)胞介素10(IL-10) 是肝纖維化過(guò)程中重要的負(fù)性調(diào)節(jié)因子，主要由Th2細(xì)胞分泌，HSC可能通過(guò)分泌IL-10等細(xì)胞因子反饋調(diào)節(jié)肝臟枯否細(xì)胞(Kupffer cell)的功能而參與調(diào)節(jié)肝臟炎癥反應(yīng)及肝纖維化的發(fā)生發(fā)展。
2.2馬洛替酉剮malotilate) 馬洛替醋基本結(jié)構(gòu)為二異丙基-1，3-二乙硫基-2-叉丙二酸鹽，為二硫戊環(huán)衍生物，肝臟蛋白產(chǎn)生的誘導(dǎo)劑。
2.3前列腺素(PGE) PGE2可增加細(xì)胞內(nèi)CAMP的水平，減少膠原的產(chǎn)生，抑制膠原蛋白的合成。PGE1能夠改善肝纖維化患者血清纖維化指標(biāo)可能和其抑制炎癥有關(guān)。前列腺素具有較好的保肝和抗纖維化作用。
3保護(hù)肝細(xì)胞肝細(xì)胞損傷是肝纖維化的啟動(dòng)因素，也是經(jīng)旁分泌作用促進(jìn)HSC活化的重要因素，保護(hù)肝細(xì)胞損傷是預(yù)防肝纖維化的重要環(huán)節(jié)。
3.1?；撬? 牛磺酸是體內(nèi)含量豐富的含硫氨基酸，有穩(wěn)定細(xì)胞膜，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)及抗脂質(zhì)過(guò)氧化多種效應(yīng)。
3.2維生素E(VitE) 維生素E有直接降低自由基生成，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化的作用，能減輕肝細(xì)胞的變性和壞死，改善肝細(xì)胞功能從而拮抗肝纖維化。
4抑制HSC活化增殖和ECM的合成HSC活化是肝纖維化發(fā)生的關(guān)鍵事件，活化的HSC具有增殖，纖維生成，致炎和收縮肌成纖維細(xì)胞表型的作用，抑制該細(xì)胞的活化與增殖是目前抗肝纖維化治療的中心策略。
4.1促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素(HGF) HGF能抑制成纖維細(xì)胞增殖分化，減少膠原纖維形成。其機(jī)制可能為(1)HGF可促進(jìn)肝細(xì)胞內(nèi)DNA的合成，保護(hù)肝細(xì)胞免受損傷；(2)可刺激膠原酶活性，促進(jìn)膠原降解；(3)可抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(3，(TGF(3，)mRNA的過(guò)度表達(dá)和肝細(xì)胞的凋亡而間接發(fā)揮抗肝纖維化的作用。
4.2奧曲膚(OCT) OCT是一種抑制性調(diào)控因子，能夠抑制多種激素和細(xì)胞因子的合成和分泌，降低其活性。OTC可能通過(guò)阻斷或逆轉(zhuǎn)HSC的激活與轉(zhuǎn)化，而抑制HSC合成與分泌ECM，從而起到抗肝纖維化作用。
4.3培噪普利 培噪普利為組織滲透型血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑，培噪普利可抑制實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化的形成，降低實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化血清LN和HA的含量，同時(shí)還可抑制血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF-BB)和TGF-(3的蛋白質(zhì)表達(dá)，從而抑制HSC的活化增殖而發(fā)揮抗肝纖維化的作用。
4.4秋水仙堿(Colchicine) 秋水仙堿在體外能抑制I型膠原mRNA水平。并刺激膠原酶活性。近年發(fā)現(xiàn)其代謝物去甲秋水仙堿也有抗纖維化活性。但目前對(duì)它的抗肝纖維化作用仍有爭(zhēng)議。
5促進(jìn)ECM的降解肝纖維化發(fā)生是ECM合成增加，降解減少及ECM重建的結(jié)果，促進(jìn)ECM降解仍是防治肝纖維化的有效手段。
5.1多不飽和卵磷脂 多不飽和卵磷脂是從大豆中提取的，已被作為肝細(xì)胞保護(hù)和抗肝纖維化藥物在酒精性肝損傷中進(jìn)行研究。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)其能抑制肝星狀細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維母細(xì)胞，從而抑制細(xì)胞外基質(zhì)分泌，提高膠原酶活力，促使已經(jīng)形成的膠原分解。
5.2松弛素 松弛素是一種自然提取物，在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均可促使膠原合成減少，ECM降解增加。
6誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞調(diào)亡HSC調(diào)亡減少活化的HSC的絕對(duì)數(shù)量，不僅減少膠原合成，而且通過(guò)減少基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子(TIMP)表達(dá)，使對(duì)膠原降解的抑制減弱。
6.1精甘一天冬一絲氨酸四膚(RGDS) RGDS是一種整合素抑制劑，RGDS可明顯破壞纖維連結(jié)素(FN)與HSC之間的勃附作用，于擾整合素介導(dǎo)的生存信號(hào)通路，誘導(dǎo)HSC調(diào)亡。
6.2曲霉菌素 曲霉菌素在體內(nèi)外均被證明可使活化的HSC數(shù)量減少50％，肝纖維化程度明顯減輕。
但是上述藥物的療效還沒(méi)完全肯定，存在一定的毒副作用，而且治療費(fèi)用昂貴。
近年來(lái)廣泛開(kāi)展了抗肝纖維化的中藥實(shí)驗(yàn)與臨床研究。取得了不少階段性成果。為臨床治療提供了許多寶貴經(jīng)驗(yàn)，顯示出特有的優(yōu)越性?？墒钦嬲龂?guó)家藥品管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)的上市抗肝纖維化的中藥并不多。
根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)理論，大多數(shù)慢性肝病及肝纖維化患者的中醫(yī)辯證診斷證型為肝郁脾虛證及淤血阻絡(luò)證，相應(yīng)的治療應(yīng)為益氣養(yǎng)血，活血化瘀，舒肝健脾。本發(fā)明遵循這一治療原則，基于長(zhǎng)期治療經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)鬼針草具有清熱解毒，散瘀消腫等功效，不僅有抗乙肝病毒作用，而且對(duì)其引起的肝纖維化也有很好的治療作用。為將其開(kāi)發(fā)成對(duì)肝病作用的有效藥物提供非常珍貴的依據(jù)。我們提取其有效部位總黃酮，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)其有顯著的抗纖維化作用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用鬼針草總黃酮的藥理實(shí)驗(yàn)及結(jié)果來(lái)說(shuō)明其在防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用。
鬼針草總黃酮防治肝纖維化試驗(yàn)如下(一)鬼針草總黃酮的制備取鬼針草生藥粉碎，40-80％的乙醇回流提取2-3次，提取液合并，回收乙醇，減壓濃縮得浸膏。浸膏水溶，靜置，過(guò)濾，澄清液上樹(shù)脂柱，水洗后收集40-95％乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥即得提取物，所述提取物鬼針草總黃酮。鬼針草總黃酮為黃綠色粉末，具有芳香味，易潮解；其主要成分總黃酮含量為20-60％。提取物可加入相應(yīng)輔料，制成片劑、膠囊、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑，并進(jìn)一步純化制成針劑。
(二)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1.總黃酮對(duì)四氯化碳致小鼠急性化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用(1)材料及試劑鬼針草總黃酮；0.1％CCl4；聯(lián)苯雙酯；ALT，AST試劑盒南京建成生物技術(shù)公司；昆明種雄性小鼠60只，體重18-22g，由安徽醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
(2)方法正常小鼠60只隨機(jī)分6組，灌胃給藥(鬼針草總黃酮80mg/kg、160mg/kg、320mg/kg，陽(yáng)性藥對(duì)照組聯(lián)苯雙酯100mg/kg)或等體積生理鹽水(正常對(duì)照、模型)，每天2次，連續(xù)7d，于末次給藥后2h，正常對(duì)照組ip10ml/kg花生油，其余5組均ip0.1％CCl410ml/kg，禁食16h后自小鼠后眼眶靜脈從取血，測(cè)定血清ALT，AST活性，并取肝臟左葉同一部位，固定，做病理切片，進(jìn)行肝臟病理組織學(xué)HE染色檢查，結(jié)果以光鏡下肝臟病理?yè)p傷程度評(píng)分和病理照片作為標(biāo)準(zhǔn)。
肝組織病變程度分級(jí)方法光鏡下檢查，按肝臟壞死程度分為5級(jí)0級(jí)，正?；蚋闻K有輕微變性，肝細(xì)胞無(wú)壞死；I級(jí)，點(diǎn)狀壞死，壞死占肝小葉＜1/4；II級(jí)，點(diǎn)灶狀壞死，壞死占肝小葉1/4-1/3；III級(jí)，灶狀壞死，壞死占肝小葉＜1/2；IV級(jí)，片狀壞死，壞死占肝小葉＞1/2。
(3)結(jié)果表1結(jié)果表明，CCl4顯著升高小鼠血清中ALT、AST活性，而鬼針草總黃酮顯著降低CCl4致急性化學(xué)性肝損傷小鼠血清中過(guò)高的ALT、AST活性。
表1鬼針草總黃酮對(duì)小鼠血清中ALT、AST的影響(n＝10，x±s)

**p＜0.01與對(duì)照組相比；##p＜0.01與模型組相比表2結(jié)果顯示，模型組肝組織可見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，出現(xiàn)不同程度的壞死。鬼針草總黃酮可明顯減輕肝臟炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和壞死。
表2鬼針草總黃酮對(duì)CCl4致急性化學(xué)性肝損傷小鼠病理組織學(xué)的影響


2.四氯化碳致大鼠化學(xué)性肝纖維性模型2.1藥物由本室提供，實(shí)驗(yàn)前用NS配成所需濃度；50％CCl4CCl4用花生油配成50％；2.2動(dòng)物分組Wiatar大鼠60只，♂，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)130-150g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、總黃酮50，100，200mg/kg組以及秋水仙堿陽(yáng)性藥對(duì)照組。
2.3模型制備及給藥自造模之日起，除正常組外，其它各組大鼠按0.1ml/100g體重背部皮下注射50％CCl4精致花生油溶液，每周2次，每周稱重一次，連續(xù)13周。造模4周后，每日ig給藥或溶媒，連續(xù)9周。
2.4處理實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，股動(dòng)脈采血，測(cè)定血漿中HA、PCIII、Hyp。同時(shí)取固定部位肝臟組織行病理組織學(xué)檢查。
2.5指標(biāo)測(cè)定(1)HA、PCIII、Hyp測(cè)定根據(jù)Sigma公司提供的試劑盒中的步驟進(jìn)行。
(2)臟病理組織學(xué)觀察及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)a.病理學(xué)檢查由由安徽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科協(xié)助；b.肝纖維化病理分級(jí)判定標(biāo)準(zhǔn)0級(jí)肝細(xì)胞正常，幾乎無(wú)纖維化1級(jí)限匯管區(qū)圓形纖維化II級(jí)小葉內(nèi)有纖細(xì)的纖維性間隔形成III級(jí)小葉內(nèi)粗大纖維性間隔伴肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂IV級(jí)纖維結(jié)締組織包繞分割肝小葉，使正常肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，有假小葉形成的趨勢(shì)。
2.6實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.6.1鬼針草總黃酮對(duì)CCl4致大鼠化學(xué)性肝纖維性模型大鼠血清中HA，Hyp和PCIII含量的影響表3結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠血清中HA，Hyp和PCIII含量顯著升高，而鬼針草總黃酮100，200Mg/kg可顯著降低HA，Hyp和PCIII水平。
表3鬼針草總黃酮對(duì)CCl4致大鼠化學(xué)性肝纖維性模型大鼠血清中HA，Hyp和PCIII含量的影響(n＝10，x±s)

##P＜0.01與對(duì)照組相比，**P＜0.01與模型組相比2.6.3鬼針草總黃酮對(duì)CCl4致大鼠化學(xué)性肝纖維性模型大鼠病理組織學(xué)影響表5結(jié)果顯示，正常肝組織的肝小葉結(jié)構(gòu)完整。其余各組均有不同程度的肝纖維組織增生，其中模型組最嚴(yán)重，可見(jiàn)假小葉形成。除正常組外，各組均可見(jiàn)較輕的肝細(xì)胞損傷。鬼針草總黃酮提取物各組大鼠肝臟肝小葉結(jié)構(gòu)基本完整，纖維增生程度減輕。
表4鬼針草總黃酮對(duì)CCl4致大鼠化學(xué)性肝纖維性模型大鼠病理組織學(xué)影響(n＝10，x±s)

##P＜0.01與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01與模型組相比3.豬血清誘導(dǎo)免疫性肝纖維化大鼠模型3.1藥物由本室提供，實(shí)驗(yàn)前用NS配成所需濃度；豬血清新鮮豬血離心取血清，濾過(guò)除菌備用。
3.2動(dòng)物分組Wiatar大鼠60只，♂，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)130-150g，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、總黃酮50，100，200mg/kg組以及秋水仙堿陽(yáng)性藥對(duì)照組。
3.3模型制備及給藥除正常對(duì)照組外，其余組大鼠腹腔注射豬血清0.5ml，每周2次，連續(xù)12周。藥物于造模時(shí)同時(shí)給藥，1次/天。
3.4處理實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，處死大鼠，取血清測(cè)定ALT、AST、TGF-β、PCIII、HA。同時(shí)取固定部位肝臟組織行病理組織學(xué)檢查。
3.5指標(biāo)測(cè)定(1)ALT、AST、TGF-β、PCIII、HA的測(cè)定根據(jù)Sigma公司提供的試劑盒中的步驟進(jìn)行。
(2)肝臟病理組織學(xué)觀察及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)同2.53.6實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.6.1鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫肝纖維化模型大鼠血清中ALT、AST含量的影響表5結(jié)果表明，與正常組相比，模型組大鼠血清中ALT、AST水平明顯升高，給予鬼針草總黃酮可以顯著降低各組大鼠血清中ALT、AST含量。
表5鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫肝纖維化模型大鼠血清中ALT、AST含量的影響(n＝10，x±s)

##P＜0.01與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01與模型組相比3.6.2鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫肝纖維化模型大鼠血清中TGF-β、PCIII、HA含量的影響表6結(jié)果顯示，模型組大鼠血清中TGF-β、PCIII、HA含量顯著升高，鬼針草總黃酮提取物組均可降低大鼠血清中TGF-β、PCIII、HA含量。
表6鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫肝纖維化模型大鼠血清中TGF-β、PCIII、HA含量的影響(n＝10，x±s)

##P＜0.01與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01與模型組相比3.6.2鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫肝纖維化模型大鼠病理組織學(xué)影響表7結(jié)果顯示，正常肝組織的肝小葉結(jié)構(gòu)完整。其余各組均有不同程度的肝纖維組織增生，其中模型組最嚴(yán)重，可見(jiàn)假小葉形成。除正常組外，各組均可見(jiàn)較輕的肝細(xì)胞損傷。鬼針草總黃酮100，200mg/kg組大鼠肝臟纖維增生程度減輕。
表7鬼針草總黃酮對(duì)豬血清誘導(dǎo)免疫性肝纖維化大鼠模型大鼠病理組織學(xué)影響(n＝10，x±s)


##P＜0.01與對(duì)照組相比，*P＜0.05，**P＜0.01與模型組相比上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明具有幾個(gè)方面的優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明發(fā)掘了鬼針草總黃酮新的藥用前景，開(kāi)拓了一個(gè)新的藥用領(lǐng)域；2、本發(fā)明的鬼針草總黃酮采用口服給藥，服用方便，毒副作用小，長(zhǎng)期服藥無(wú)危害；3、本發(fā)明鬼針草總黃酮的原藥資源非常豐富，具有良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益；4、本發(fā)明的鬼針草總黃酮對(duì)肝纖維化的療效確切；5、本發(fā)明為將鬼針草進(jìn)一步開(kāi)發(fā)成新藥提供了強(qiáng)有力的基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地描述。
實(shí)施例1稱取鬼針草生藥10kg，粉碎后加入80％乙醇100L，熱回流提取2次，每次1h，合并提取液，回收乙醇，減壓濃縮得浸膏。浸膏水溶，靜置，過(guò)濾，澄清液上大孔樹(shù)脂柱，水洗后收集80％乙醇洗脫部分。回收乙醇，減壓濃縮，干燥即得提取物，所述提取物鬼針草總黃酮。鬼針草總黃酮為黃綠色粉末，具有芳香味，易潮解；其主要成分總黃酮含量為20-60％。提取物可加入相應(yīng)輔料，制成片劑、膠囊、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑，并進(jìn)一步純化制成針劑。
鬼針草總黃酮臨床推薦劑量300-1200mg/天，口服，一日三次。
權(quán)利要求
1.鬼針草總黃酮在制備防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用，其特征在于鬼針草總黃酮在制備防治肝纖維化藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及鬼針草總黃酮的用途，是鬼針草總黃酮在預(yù)防和治療肝纖維化藥物中的應(yīng)用。鬼針草總黃酮是從鬼針草中提取的有效部位。本發(fā)明通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說(shuō)明其對(duì)小鼠四氯化碳引起的急性肝損傷具有保護(hù)作用；四氯化碳、豬血清造成的大鼠肝纖維化模型證明鬼針草總黃酮對(duì)慢性肝纖維化具有較好的預(yù)防和治療作用。結(jié)果說(shuō)明鬼針草總黃酮具有確切的抗纖維化作用，因此可用來(lái)制備預(yù)防和治療肝纖維化的藥物。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1887302SQ20051009734
公開(kāi)日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2005年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月30日
發(fā)明者陳飛虎, 李俊, 袁麗萍 申請(qǐng)人:安徽醫(yī)科大學(xué)