專利名稱：鬼針草醇提取物在制備防治酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及鬼針草醇提取物的新用途，具體涉及鬼針草醇提取物在制藥領(lǐng)域中的用途，確切的說(shuō)是在制備防治酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
鬼針草又名婆婆針、鬼杈草、小鬼針、粘身草等，其藥用歷史悠久，始載于唐·陳藏器《本草拾遺》，謂“鬼釵草，味苦平，無(wú)毒，主蛇及蜘蛛咬，杵碎傅之，亦杵絞汁服。生地畔，有椏，方莖，子作釵腳，著人如衣針，北方呼之為鬼針?！惫磲槻蓊愃幉娜菥捎盟?，味苦性平而無(wú)毒，具有清熱解毒，散瘀消腫等功效，主治瘧疾、腹瀉、痢疾、肝炎、急性腎炎、胃痛、噎膈、腸癰、咽喉腫痛、跌打損傷、蛇蟲咬傷等。為了更好的認(rèn)識(shí)和了解這一自然資源，更好的開發(fā)與利用，現(xiàn)將鬼針草的研究與開發(fā)現(xiàn)狀綜述如下。
鬼針草為菊科(Compositae)管狀花亞科鬼針草屬(Bidens L.)植物為一年生草本，其藥材資源非常豐富，主要分布于我國(guó)東北、河北、山東、山西、河南、江蘇、云南、四川、兩廣等地，生于水邊、河岸、濕地、荒地及山坡等處，極易采集。
鬼針草的化學(xué)成分鬼針草所含化學(xué)成分種類較多，文獻(xiàn)報(bào)道曾從該植物中分離得到揮發(fā)油類、甾醇、查耳酮、橙酮、聚乙炔類等，其活性成分以聚乙炔類和黃酮類成分為主。已分離出多種聚乙炔類成分。乙醇提取物的正丁醇部分鑒定出4個(gè)黃酮成分，為金絲桃甙(hyperoside)、奧卡寧(okanin)、異奧卡寧-7-O-葡萄糖甙和海生菊甙(maritimein)。鬼針草各部位中黃酮類成分有較大差異，在花果期，葉和花序中總黃酮含量較高(分別為6.67％和6.68％)，莖枝中含量較低(0.89％)。葉中分離鑒定了21種揮發(fā)性成分，主要為脂肪烷和脂肪酸類，另外含少量的醛、酮烯、腈、胺及呋喃類成分；其中脂肪類化合物占相當(dāng)比例。分離出的4種酚酸類成分，經(jīng)理化測(cè)試及光譜分析，分別鑒定為水楊酸、原幾茶酸、沒(méi)食子酸、脂肪酸類化合物。還有甾體類化合物如菠甾醇、胡蘿卜苷，谷甾醇、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。
鬼針草含有豐富的氨基酸，如天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、酪氨酸、賴氨酸等17種氨基酸，其中8種為人體必需氨基酸，總蛋白質(zhì)157.89g/kg，總游離氨基酸含量達(dá)139.89g/kg，必需氨基酸總量57.09g/kg。鬼針草所含氨基酸與傳統(tǒng)名貴藥材亞香棒蟲草、冬蟲夏草相比，在種類上多了胱氨酸，在含量上脯氨酸、谷氨酸高于兩者，其他氨基酸含量相當(dāng)另外鬼針草中還含有11種人體必需微量元素，測(cè)定結(jié)果表明，Mg含量最高，P、Fe、Ca含量較高，Cu、Zn次之，Mn、Co、Ni、Mo、Cr含量最低，鬼針草中含有豐富的P，是其調(diào)節(jié)神經(jīng)、催眠、鎮(zhèn)靜等作用的內(nèi)在原因。
維生素在鬼針草中也有分布，如維生素B1、維生素B2、β-胡蘿卜素。
鬼針草藥材資源豐富，藥用歷史悠久，在民間驗(yàn)方中有小人參之稱。其生物活性多樣，且作用溫和持久，具有較高的藥用價(jià)值，尤其對(duì)消化系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)顯示較強(qiáng)的藥理作用。近年來(lái)對(duì)鬼針草藥材進(jìn)行了一些開發(fā)和利用，目前國(guó)內(nèi)的鬼針草產(chǎn)品有悅年片、鬼針草口服液、鬼針草保健沖劑等，但也僅限于防治高血壓等心血管疾病，還未見鬼針草醇提取物在制備防治酒精性脂肪肝藥物方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供鬼針草醇提取物的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。
實(shí)際上，本發(fā)明提供了鬼針草醇提取物在制備預(yù)防或治療酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用。
近年來(lái)，隨著生活水平的提高以及酒精飲料消費(fèi)的日益增長(zhǎng)，酒精性脂肪肝的發(fā)病率在逐年上升。酒精性脂肪肝是酒精性肝炎、酒精性肝纖維化、酒精性肝硬化等酒精性肝病的前期病變，酒精性肝病已成為發(fā)達(dá)國(guó)家青壯年死亡的主要原因之一。據(jù)日本、美國(guó)等學(xué)者統(tǒng)計(jì)，脂肪肝發(fā)病率占平均人口的10％，嗜酒者的57.6％，而且與其他類型的脂肪肝相比，酒精性脂肪肝發(fā)生肝纖維化和肝硬化的進(jìn)程相對(duì)較快，發(fā)生率相對(duì)較高。因此，酒精性脂肪肝對(duì)人體健康的危害越來(lái)越受到人們的重視，而研究和開發(fā)治療酒精性肝病的藥物已成為當(dāng)今全球醫(yī)藥界的重點(diǎn)和難點(diǎn)。
目前臨床上對(duì)于酒精性脂肪肝的治療仍缺乏特效手段，主要采用病因治療、支持療法，予以飲食控制，補(bǔ)充氨基酸、維生素和礦物質(zhì)等對(duì)癥治療。藥物治療主要包括降脂類藥物和保肝類藥物的應(yīng)用，但這些藥物均存在一些嚴(yán)重的不足之處。如許多降血脂藥可促進(jìn)血脂更集中于肝臟進(jìn)行代謝，反而可能促進(jìn)脂質(zhì)在肝內(nèi)的蓄積，并進(jìn)一步損害肝功能；且這些藥物需長(zhǎng)期服用，價(jià)格昂貴。因此，積極尋找具有保肝、降血脂、抗脂肪肝的藥物是非常必要的，而發(fā)揮中醫(yī)藥治療的優(yōu)勢(shì)尤為重要。
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為酒精對(duì)肝臟的直接毒性作用、乙醛的毒性、內(nèi)毒素血癥等在酒精性脂肪肝的形成過(guò)程中起重要作用，這與祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為的酒為一種特殊的濕熱邪毒不謀而合。國(guó)內(nèi)的許多基礎(chǔ)和臨床研究也表明中藥對(duì)酒精性脂肪肝的治療是有效的，中藥通過(guò)舒肝、促進(jìn)血液循環(huán)、化痰等可有效改善酒精導(dǎo)致的肝臟脂肪變性。本發(fā)明遵循這一治療原則，基于長(zhǎng)期治療經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)鬼針草具有清熱解毒，散瘀消腫等功效，不僅具有抗高血壓等心血管作用，而且對(duì)酒精性脂肪肝也有很好的治療作用，為將其開發(fā)成對(duì)肝病作用的有效藥物提供非常珍貴的依據(jù)。我們提取其有效部位，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)其有顯著的防治酒精性脂肪肝的作用。
為了更好地理解本發(fā)明的實(shí)質(zhì)，下面將用鬼針草醇提取物的藥理實(shí)驗(yàn)及結(jié)果來(lái)說(shuō)明其在防治酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用。
鬼針草總黃酮防治酒精性脂肪肝試驗(yàn)如下(一)鬼針草醇提取物的制備取鬼針草生藥粉碎，40-80％的乙醇回流提取2-3次，提取液合并，回收乙醇，減壓濃縮得浸膏。浸膏水溶，靜置，過(guò)濾，澄清液上樹脂柱，水洗后收集40-95％乙醇洗脫部分，回收乙醇，減壓濃縮，干燥即得鬼針草醇提取物。該提取物為黃綠色粉末，具有芳香味，易潮解；其主要成分為總黃酮，含量為20-60％。該提取物可加入相應(yīng)輔料，制成片劑、膠囊、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑，并進(jìn)一步純化制成針劑。
(二)實(shí)驗(yàn)鬼針草醇提取物對(duì)大鼠酒精性脂肪肝的作用1、材料與試劑鬼針草醇提取物；水飛薊賓片(益肝靈，每片含水飛薊賓38.5mg)；動(dòng)物SD大鼠66只，雌雄各半，體重180-200g；實(shí)驗(yàn)用酒使用市售紅星牌二鍋頭白酒，酒精度55％(V/V)，實(shí)驗(yàn)采用10％酒精濃度。TC、TG、ALT、AST、AKP、HDL-C、LDL-C、MDA、SOD、GSH試劑盒。
2、方法SD大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥水飛薊賓組、鬼針草醇提取物(320、160、80mg·kg-1)組。正常對(duì)照組ig生理鹽水，飲用蒸餾水代替酒精，飼普通飼料；其余大鼠自由飲用10％酒精及飼高營(yíng)養(yǎng)飼料(普通飼料添加10％全脂奶粉、10％蛋黃粉、10％煉豬油等)6周后，分成模型組和各給藥組，繼續(xù)飼高營(yíng)養(yǎng)飼料和飲用10％酒精4周，并ig藥物或蒸餾水4周。末次給藥24小時(shí)后，眼眶放血，并分離血清，測(cè)血清肝功能；處死動(dòng)物，制肝勻漿，測(cè)肝細(xì)胞血脂，肝脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)。
3、結(jié)果(1)鬼針草醇提取物對(duì)大鼠酒精性脂肪肝肝功能的影響表1鬼針草醇提取物對(duì)酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影響(x±s)

*p＜0.05，**P＜0.01與模型組相比結(jié)果表明，模型組與正常組比較，ALT明顯升高(P＜0.01)，說(shuō)明模型出現(xiàn)肝臟酶學(xué)的改變，即肝細(xì)胞有變性或壞死發(fā)生。而與模型組相比，水飛薊賓組和鬼針草醇提取物組可以顯著降低升高的ALT、AST和AKP，說(shuō)明鬼針草醇提取物對(duì)大鼠酒精性脂肪肝肝功能有保護(hù)作用。
(2)鬼針草醇提取物對(duì)酒精性脂肪肝大鼠血清血脂的影響表2鬼針草醇提取物對(duì)酒精性脂肪肝大鼠血脂的影響(x±s)

*p＜0.05，**P＜0.01與模型組相比由表2結(jié)果表明鬼針草醇提取物能顯著降低酒精性脂肪肝大鼠血清TG和LDL-C含量，提高血清HDL-C含量，說(shuō)明鬼針草醇提取物具有調(diào)節(jié)血脂作用。
(3)鬼針草醇提取物對(duì)酒精性脂肪肝大鼠肝細(xì)胞TG含量及脂質(zhì)過(guò)氧化的影響表3鬼針草醇提取物對(duì)酒精性脂肪肝大鼠肝細(xì)胞TG含量及脂質(zhì)過(guò)氧化的影響(x±s)

*p＜0.05，**P＜0.01與模型組相比由表3結(jié)果可見，模型組肝細(xì)胞內(nèi)TG含量明顯升高，MDA含量明顯上升，SOD活性降低，GSH貯量減少，與正常組相比有顯著差異性。鬼針草醇提取物組能顯著降低酒精性脂肪肝大鼠肝TG含量，同時(shí)能明顯抑制MDA的產(chǎn)生，提高SOD活性，顯著提高GSH貯量作用。說(shuō)明鬼針草醇提取物可以抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕自由基損傷，具有保護(hù)肝細(xì)胞、調(diào)節(jié)血脂的作用。
由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知鬼針草醇提取物具有明顯的降脂、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化和保肝作用，可有效控制和消除因長(zhǎng)期飲酒過(guò)量導(dǎo)致的酒精性脂肪肝。
上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明具有幾個(gè)方面的優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明鬼針草醇提取物是從中藥材鬼針草中提取的有效成分，具有明顯的降脂、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化和保肝作用，可有效控制和消除因長(zhǎng)期飲酒過(guò)量導(dǎo)致的酒精性脂肪肝；發(fā)掘了鬼針草醇提取物新的藥用前景，開拓了一個(gè)新的藥用領(lǐng)域；2、本發(fā)明的鬼針草醇提取物采用口服給藥，服用方便，毒副作用小，長(zhǎng)期服藥無(wú)危害；3、本發(fā)明鬼針草醇提取物的原藥資源非常豐富，具有良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益；4、本發(fā)明的鬼針草醇提取物適用于酒精性脂肪肝，療效確切；5、本發(fā)明為將鬼針草進(jìn)一步開發(fā)成新藥提供了強(qiáng)有力的基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步地描述。
實(shí)施例1稱取鬼針草生藥10kg，粉碎后加入80％乙醇100L，熱回流提取2次，每次1h，合并提取液，回收乙醇，減壓濃縮得浸膏。浸膏水溶，靜置，過(guò)濾，澄清液上大孔樹脂柱，水洗后收集80％乙醇洗脫部分?；厥找掖迹瑴p壓濃縮，干燥即得鬼針草醇提取物。該提取物為黃綠色粉末，具有芳香味，易潮解；其主要成分為總黃酮，含量為20-60％。該提取物可加入相應(yīng)輔料，制成片劑、膠囊、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑，并進(jìn)一步純化制成針劑。鬼針草醇提取物臨床推薦劑量300-1200mg/天，口服，一日三次。
權(quán)利要求
1.鬼針草醇提取物在制備防治酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用，其特征在于鬼針草醇提取物在制備防治酒精性脂肪肝藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及鬼針草醇提取物在制備防治酒精性脂肪肝藥物中的新用途。鬼針草醇提取物是從中藥材鬼針草中提取的有效成分，具有明顯的降脂、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化和保肝作用，可有效控制和消除因長(zhǎng)期飲酒過(guò)量導(dǎo)致的酒精性脂肪肝。本發(fā)明采用口服給藥，服用方便，長(zhǎng)期服用無(wú)毒副作用。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1887304SQ20051009734
公開日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2005年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月31日
發(fā)明者陳飛虎, 李俊, 鐘明媚 申請(qǐng)人:安徽醫(yī)科大學(xué)