專利名稱：一種防治人病毒感染的新穎的復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療婦女人乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒II型(HSV-2)，巨細(xì)胞病毒(CMV)感染的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的新穎組方及裝置，屬于具有針對(duì)性治療適應(yīng)癥的藥物制劑領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
1.乳頭瘤病毒(HPV)感染乳頭瘤病毒病是全世界最常見的性傳播疾病。最近報(bào)道，全球一半以上的成人被乳頭瘤病毒所感染。人乳頭瘤病毒(HPV)有許多型別，目前已鑒定的已達(dá)100個(gè)型別以上，它感染特定部位或引起特定臨床癥狀，約有30％通過性傳播。有報(bào)道指出，77％HIV陽性婦女同時(shí)也是HPV陽性。與其它性傳播疾病不同，HPV很易通過與感染的皮膚或與污染的物品直接接觸而傳播。美國資料表明，大約有1000萬美國婦女具有活動(dòng)性HPV感染，其中大多數(shù)是10多歲和20多歲。
目前，從不同的人的病灶組織中，已克隆的HPV達(dá)100個(gè)型別以上。HPV病毒顆粒的形態(tài)如說明書附

圖1所示。HPV與人類疾病的關(guān)系見下表表1 HPV與疾病關(guān)系一覽表


2.慢性宮頸炎的主要病原是人乳頭瘤病毒(HPV)、人單純皰疹病毒II型(HSV-1)和人巨細(xì)胞病毒(CMV)等在上述HPV引起的人類疾病中，婦女宮頸的HPV感染最為常見，危害性也最大。在宮頸粘膜柱狀上皮和鱗狀上皮轉(zhuǎn)變的區(qū)帶處，是嗜粘膜性乳頭瘤病毒繁殖的部位，也是慢性宮頸炎的好發(fā)部位。HPV是慢性宮頸炎的主要病原。
1989年中國病毒基因工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和北京天壇醫(yī)院合作研究發(fā)現(xiàn)，慢性宮頸炎(宮頸糜爛)與乳頭瘤病毒(HPV)，單純皰疹病毒(HSV)，巨細(xì)胞病毒(CMV)和衣原體感染關(guān)系極為密切。從慢性宮頸炎患者的宮頸中，三種病毒的檢出率均明顯地高于正常宮頸，說明這三種病毒與慢性宮頸炎的發(fā)生，特別是與乳頭瘤病毒16型(HPV16)感染有關(guān)。因而是干擾素治療的對(duì)象。
1987年錢止維等采用重組人干擾素α治療宮頸糜爛，發(fā)現(xiàn)干擾素對(duì)此常見病有十分明顯的療效。146例宮頸糜爛患者用人干擾素α治療的總有效率達(dá)93.8％，其中顯效率為60％，與同劑量的自然白細(xì)胞干擾素相當(dāng)；用常規(guī)藥婦炎靈治療的顯效率為37.7％，干擾素治療12個(gè)月后仍保持明顯療效。干擾素治療后病毒的檢出率也明顯下降。
3.宮頸HPV感染與宮頸癌關(guān)系密切目前所知，人乳頭瘤病毒是人類腫瘤病毒病因中最為重要的一類病毒。它與人類皮膚與粘膜的良性與惡性腫瘤關(guān)系最為密切。
宮頸HPV感染不僅是慢性宮頸炎的主要病因，還是宮頸癌的原始病因。目前，大量的研究表明，宮頸癌發(fā)生以前有一系列的不正常的細(xì)胞改變，這些不正常的細(xì)胞改變(dysplasia)稱為CIN I，II，III(cervical intraepithelial neoplasia)，其中CIN III即是原位癌。過去就認(rèn)為HPV感染與CIN I，II，III關(guān)系密切，稱為HPV-associated CIN I，II，III。
檢查宮頸HPV感染和宮頸癌的癌前變化的常規(guī)方法為Pap涂片檢查。近年來有許多證據(jù)，說明HPV可以引起CIN，在輔助因子的作用下，可以發(fā)展成宮頸癌1.組織的癌前變化有規(guī)律地與某些型別的乳頭瘤病毒有關(guān)，如肛門生殖器的Bowen氏病，子宮頸上皮內(nèi)腫瘤形成(CIN)等。
宮頸Pap涂片檢查將CIN分為3度主要是依據(jù)不正常細(xì)胞進(jìn)入宮頸上皮層的深度，有絲分裂的活躍程度和不典型的核CIN 1僅侵犯宮頸表層的1/3厚度；CIN 2侵犯宮頸表層的2/3厚度；CIN 3侵犯宮頸表層的全厚度。
但是所有CIN I，II，III常侵犯宮頸的一小部分。CIN I，II相當(dāng)于輕，中度的發(fā)育異常(dysplasia)；CIN III相當(dāng)于嚴(yán)重的發(fā)育異常，或稱為原位癌(carcinoma-in-situ)；但不是宮頸癌。宮頸涂片能說明是否存在CIN，但是有時(shí)不能肯定不正常細(xì)胞侵犯的深度，必要時(shí)需進(jìn)行宮頸活體檢查。
2.在子宮癌、陰頸癌、外陰和肛門周圍癌組織中可以有規(guī)律地檢出HPV DNA序列。有97.9％的宮頸癌組織中可以發(fā)現(xiàn)HPV DNA序列，主要是HPV16或HPV18，但有地區(qū)性的差異。世界衛(wèi)生組織報(bào)導(dǎo)全世界宮頸癌的年發(fā)病數(shù)為45萬人。
錢止維等(1986)發(fā)現(xiàn)，慢性宮頸炎患者的宮頸組織和洗液中，HPV16的檢出率可高達(dá)20-50％。
3.不僅是宮頸癌組織而且來自宮頸癌的細(xì)胞株如HeLa、SIHA和CASKI均含有HPV16、HPV18或其它型別的HPV DNA，后者于染色體上一個(gè)位點(diǎn)或多個(gè)位點(diǎn)處整合并有轉(zhuǎn)錄。
4.人類生殖器的癌前組織學(xué)病理改變，與動(dòng)物乳頭瘤病毒感染時(shí)所引起的病理改變是相一致的，如常有凹空細(xì)胞(Koilocytosis)。
5.HPV DNA的存在方式與癌變過程有一定聯(lián)系。在癌前病灶中，HPV DNA呈游離狀態(tài)，在浸潤癌組織細(xì)胞中則呈整合狀態(tài)，而且有一定的整合部位，即在E1-E2之間。
6.宮頸癌的高發(fā)區(qū)，陰莖癌的發(fā)生也較高。
據(jù)此，診斷為CIN后，有足夠的時(shí)間進(jìn)行治療干預(yù)，及時(shí)治療宮頸的HPV感染也可以認(rèn)為是預(yù)防宮頸癌的一種措施。
近年來研究者鑒定了有18個(gè)型別的HPV與宮頸癌有關(guān)。大部分型別過去是知道的，其中有3個(gè)型別列為″可能″的名單中。資料發(fā)表在2月6日出版的″The New England Journal ofMedicine″雜志上。
事實(shí)上所有的宮頸癌都是由HPV引起的，后者是性傳播的。目前已經(jīng)鑒定的型別已超過80個(gè)，其中僅有30個(gè)左右與癌變有關(guān)。由Columbia大學(xué)內(nèi)科和外科研究所的Dr.Thomas Wright同時(shí)發(fā)表的文章指出，絕大部分宮頸癌都含有18個(gè)型別的HPV DNA中的一種。
宮頸癌是世界上婦女第二位最常見的癌癥，在發(fā)達(dá)國家多見。
1995年癌癥研究國際機(jī)構(gòu)(IARC)指出，有足夠的證據(jù)將HPV 16和18列為致癌物質(zhì)。去年11月，研究者宣稱已開發(fā)一種疫苗對(duì)抑制HPV 16高度有效，對(duì)50％的宮頸癌均有效。
現(xiàn)在，研究的作者，除過去的4篇外(IARC的1995年公告的基礎(chǔ))，又收集了7篇研究論文，加以歸納分析。這11份研究報(bào)告來自9個(gè)國家和1,918名確證的宮頸癌婦女以及1,928名宮頸癌婦女。結(jié)果表明，91％的宮頸癌患者可檢出HPV DNA，而對(duì)照婦女為13％。
癌癥患者最常見的型別依次為16，18，45，31，33，52，58和35.對(duì)照組婦女最常見的檢出型別是16，18，45，31，6，58，35和33。
根據(jù)這些資料，有15個(gè)型別的HPV劃歸為高危。這些是16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73和82。另3個(gè)型別26，53和66列為可能高危的型別。12個(gè)型別劃分為低危型別。
4.人干擾素根據(jù)干擾素(interferons，IFNs)的定義，干擾素是一類至少在同種細(xì)胞上具有廣譜抗病毒、抗細(xì)胞分裂、免疫調(diào)節(jié)活性和在不同途徑上影響細(xì)胞的代謝、生長和分化的蛋白質(zhì)，其活性的發(fā)揮需新合成RNA和蛋白質(zhì)。它是一類重要的細(xì)胞素。經(jīng)過近半個(gè)世紀(jì)的基礎(chǔ)和臨床研究，說明它是一種重要的廣譜抗病毒、抗腫瘤治療藥物。
干擾素首先與特異性細(xì)胞受體結(jié)合，通過信號(hào)傳遞，激活細(xì)胞基因表達(dá)，從而發(fā)揮干擾素的生物學(xué)活性1.抗病毒活性抑制病毒基因的復(fù)制。
2.抗細(xì)胞增殖活性細(xì)胞膜的改變；細(xì)胞骨架的改變；刺激細(xì)胞分化；調(diào)節(jié)生長因子的表達(dá)；抑制癌基因的表達(dá)；逆轉(zhuǎn)惡化細(xì)胞的表型；激活p53基因的表達(dá)。
3.免疫調(diào)節(jié)活性誘導(dǎo)其它細(xì)胞素的表達(dá)；激活巨噬細(xì)胞，NK細(xì)胞；上調(diào)HLA I和II的表達(dá)；調(diào)節(jié)腫瘤相關(guān)抗原的表達(dá)。
迄今所知，人干擾素存在多個(gè)型別干擾素-α，β，δ，γ，ε，κ，λ，τ，ω，limitin等型別，它們的主要特點(diǎn)和可能的臨床應(yīng)用各異。
目前，研究較多并用于臨床治療的有α，β，γ；其它型別干擾素是否有臨床應(yīng)用價(jià)值尚在研究之中。
5.人白細(xì)胞介素-2(IL-2)IL-2由TH1細(xì)胞產(chǎn)生，能促進(jìn)T細(xì)胞生長，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，誘導(dǎo)或促進(jìn)多種細(xì)胞毒性的活性，協(xié)同刺激B細(xì)胞增殖及分泌Ig等。美國FDA批準(zhǔn)IL-2/125S突變體治療晚期腎癌和黑色素瘤。中國SDA批準(zhǔn)遠(yuǎn)策欣(IL-2/125C)治療晚期腎癌，黑色素瘤，癌性腹水和結(jié)核病?；蚨ㄎ蝗?q26-28；鼠3B-C。
6.胸腺素β4(Thymosin-beta-4，TB4)TB4由43個(gè)氨基酸組成，N端乙酰化，最早是從牛胸腺提取的。某些細(xì)胞系也可產(chǎn)生TB4，包括成肌細(xì)胞，成纖維細(xì)胞；某些人髓質(zhì)甲狀腺癌也可產(chǎn)生。由GM-CSF誘導(dǎo)的骨髓細(xì)胞的分化過程中可誘生TB4。人TB4與人干擾素誘生的6-26同源，也與涉及肌動(dòng)蛋白聚合的Fx同源。
TB4與TNF的融合蛋白注入帶有實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤的動(dòng)物后，觀察到明顯的抗腫瘤作用。融合蛋白在血清中的半衰期比TNF要長，在TNF無活性的濃度下還能引起腫瘤的縮小。
TB4可以明顯地促進(jìn)表皮創(chuàng)傷愈合，機(jī)制不同于表皮生長因子，不引起癌變。
7.干擾素治療性傳播的HPV感染迄今為止，國內(nèi)外已發(fā)表諸多文獻(xiàn)報(bào)道，證明干擾素對(duì)治療慢性宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤形成和預(yù)防宮頸癌具有一定效果。
申請(qǐng)者發(fā)表的文獻(xiàn)1.錢止維，…侯云德人rαD型干擾素治療慢性宮頸炎的療效 中華婦產(chǎn)科雜志22335，19872.錢止維，…侯云德人重組αD型干擾素與黃芪聯(lián)合應(yīng)用治療宮頸糜爛 中西醫(yī)結(jié)合雜志7268，19873.錢止維，…侯云德慢性宮頸炎的病毒病因 病毒學(xué)報(bào)318，19874.Qian Zhiwei，Hou Yunde et alA study on the efficacy of a recombinant human alphaD type interferon in treatment of chronic cervicitis J.Interferon Res.6suppl.134，19865.錢止維，…侯云德宮頸HPV病毒感染對(duì)黃芪干擾素的治療反應(yīng) 中華實(shí)驗(yàn)與臨床病毒學(xué)雜志160，19876.Qian Zhiwei…Hou Yunde et alViral Etiology of Chronic Cervicitis and itsTherapeutic Response to A Recombinant Interferon Chinese Medical Journal103(8)647-651，19907.干擾素協(xié)作組外用人α1型基因工程干擾素治療慢性宮頸炎673例療效觀察中國免疫學(xué)雜志1990，6218.錢止維…侯云德等子宮頸常見病毒及沙眼衣原體感染的研究 中華婦產(chǎn)科雜志25(5)266，19909.錢止維，李玉英，侯云德等宮頸病毒及沙眼衣原體感染的病原研究性醫(yī)學(xué)與性傳播疾病研究進(jìn)展，p.1-2，199010.錢止維，李玉英，楊新科，侯云德等慢性宮頸炎的病毒病因及其對(duì)重組干擾素的治療反應(yīng)性醫(yī)學(xué)與性傳播疾病研究進(jìn)展，p.3-6，1990年11.錢止維，張景華，吳廣芹，…侯云德子宮頸人乳頭瘤病毒16型感染的母嬰傳播中華婦產(chǎn)科雜志，28(45)242-212.張秀龍錢止維子宮頸糜爛面積測算方法的研究成果中華婦產(chǎn)科雜志32(1)，199713.舒利利，侯云德等在婦女宮頸濕疣中發(fā)現(xiàn)一種HPV相關(guān)序列 病毒學(xué)報(bào)5268，198918.王大婉等外用α1型基因工程干擾素治療慢性宮頸炎的療效觀察 中國生物制品學(xué)雜志6(專輯1)，24，199319.胡敏華，張景華，錢止維…侯云德等重組人α1b干擾素對(duì)宮頸人乳頭瘤病毒16型母嬰傳播的阻斷作用。北京醫(yī)學(xué)20(4)276-278，199820.李玉英，楊新科，侯云德等慢性宮頸炎的病毒病因及其對(duì)重組干擾素的治療反應(yīng) 性醫(yī)學(xué)與性傳播疾病研究進(jìn)展，p.3-6，1990年21.段淑敏，楊新科，郭津津等人乳頭瘤病毒16型和巨細(xì)胞病毒在母嬰間的感染與傳播 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，10(4)389，199622楊新科，段淑敏，侯云德孕婦-新生兒HPV-16產(chǎn)道傳播研究中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，6(4)334-336，199223.楊新科，段淑敏，郭津津等干擾素對(duì)孕婦產(chǎn)道病毒的抑制作用中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，10(2)122-123，199624.段淑敏 楊新科，#郭津津干擾素治療對(duì)足月孕婦宮頸人乳頭瘤病毒16型經(jīng)產(chǎn)道傳播的影響 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志10，2189，199625.張麗蘭#劉永清，#俞志愛等黃芪和干擾素合劑抗單純皰疹病毒的作用中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志12，3269-271，19988.當(dāng)前干擾素治療宮頸HPV感染存在的問題在80年代發(fā)明人的臨床試驗(yàn)中，鑒于嗜粘膜性HPV感染主要發(fā)生在宮頸的柱狀上皮和磷狀上皮的交接處(也是宮頸癌的好發(fā)部位)，為了準(zhǔn)確地判斷療效，采用醫(yī)院醫(yī)生給藥的方式，在陰道擴(kuò)張器的幫助下，將浸潤有1毫升干擾素液(100萬單位)的紗布直接貼敷在宮頸上，用一根棉線露出在陰道外，次日由病人自己拉出。但是，這一給藥方式，不成為藥物的一種劑型。所以，我們一直在考慮要開發(fā)合適的劑型，能將干擾素直接投放到宮頸局部。
在我們的工作發(fā)表之后，90年代以來，我國有許多廠家，相繼開發(fā)了干擾素治療慢性宮頸炎的多種劑型，包括栓劑，凝膠劑，泡騰劑等。但是上述劑型不很理想，根據(jù)我們?cè)?0年代進(jìn)行的一系列研究工作(另見文獻(xiàn))，還存在如下問題①陰道從前庭到前穹隆約為7-9厘米；從前庭到后穹隆約為10-12厘米；上述劑型用手指推入陰道時(shí)，大部分在陰道的中部，由于陰道上端的面積最大，給藥的大部分不易直接到達(dá)宮頸。
②患者自己用手指推進(jìn)給藥，如果病人不用消毒手套或指套，易于發(fā)生污染。
③目前的劑型中，干擾素劑量偏低一次劑量所含干擾素大多在50萬單位以下；而我們?cè)?0年代所進(jìn)行的研究表明，一次50萬單位干擾素全部貼敷在宮頸的效果僅為100萬單位的一半。
④干擾素與其他細(xì)胞因子的作用機(jī)理類同，它不是直接阻斷病毒的復(fù)制；而是通過與細(xì)胞受體結(jié)合，經(jīng)過信號(hào)傳遞，激活一系列基因，使細(xì)胞再產(chǎn)生一系列所謂抗病毒蛋白質(zhì)，發(fā)揮抗病毒復(fù)制的作用；栓劑、凝膠劑型緩慢釋放小量干擾素，就有可能產(chǎn)生生理性的低反應(yīng)期，不利于治療。
在國際文獻(xiàn)中雖有作者報(bào)道干擾素治療宮頸HPV感染有一定效果，但是效果并不很理想，主要是給藥方式不理想。
本

發(fā)明內(nèi)容
1.一種YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的組方本發(fā)明為克服當(dāng)前干擾素治療宮頸乳頭瘤病毒感染存在的問題提供了一種新穎的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑組方、產(chǎn)品的制備方法及裝置，用于治療慢性宮頸炎，宮頸上皮發(fā)育不良，包括宮頸上皮內(nèi)瘤形成I、II、III度(原位癌)，抑制HPV、單純皰疹病毒II型(HSV-2)，巨細(xì)胞病毒(CMV)等的繁殖，預(yù)防宮頸癌。所述的新穎YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑含有以下組分人干擾素，人白蛋白質(zhì)，天然多糖等，可含有或不含有其它人細(xì)胞因子和緩沖液。
1.1.如發(fā)明內(nèi)容1所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的人干擾素為天然和重組的各型干擾素及其亞型，如α1b，α2a，α2b，β1a，β1b，γ等。
1.2.如發(fā)明內(nèi)容1.1.所述的天然人干擾素，其特征在于，所述的天然人干擾素為在人細(xì)胞培養(yǎng)上(人血白細(xì)胞或原代細(xì)胞培養(yǎng)或二倍體細(xì)胞株培養(yǎng)或永生化的細(xì)胞系培養(yǎng)等)由任何病毒或雙鏈RNA等其它所有干擾素誘生劑所誘導(dǎo)的人干擾素。
1.3.如發(fā)明內(nèi)容1.1.所述的重組人干擾素，其特征在于，所述的重組人干擾素為由細(xì)菌(如大腸桿菌)，真菌(如酵母)或由哺乳動(dòng)物細(xì)胞所生產(chǎn)的各型重組人干擾素。
1.4.如發(fā)明內(nèi)容1.所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的人白蛋白為從人周圍血提取純化的人白蛋白或由重組技術(shù)生產(chǎn)的人白蛋白。
1.5.如發(fā)明內(nèi)容1.所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的天然多糖包括羥丙甲纖維素、透明質(zhì)酸、纖維素、淀粉、幾丁質(zhì)、殼聚糖及其衍生物，可為其中一種，或者是這些天然多糖的任意組合。
1.6.如發(fā)明內(nèi)容1.所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于還以可含有其它細(xì)胞因子，包括能促進(jìn)局部免疫反應(yīng)和促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的各類細(xì)胞因子，包括天然的或重組的人白細(xì)胞介素-2，12，天然的或重組的胸腺肽-β4，天然的或重組的乳鐵蛋白等。
1.7.如發(fā)明內(nèi)容1.6.所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，其特征在于還以可以含有一定濃度的雌激素，如雌二醇、炔雌醇、己烯雌酚等。
1.8.如發(fā)明內(nèi)容1.所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，其特征在于還以可含有一定濃度的緩沖溶液，這些包括醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液、磷酸緩沖液等，pH為3.5~5.5，與陰道的酸性環(huán)境相匹配。
1.9.如發(fā)明內(nèi)容1.所述的陰道噴霧劑，其特征在于該產(chǎn)品為無菌產(chǎn)品，其中含有人血白蛋白，而不含任何對(duì)陰道粘膜有刺激性的防腐劑。
2.由于本發(fā)明中的人干擾素，其它細(xì)胞因子和人白蛋白及天然多糖在藥物的組方中存在著十分有效的協(xié)同作用，再加之采用的特殊的藥物遞送方式，增加了干擾素在宮頸和陰道上皮的停留時(shí)間，從而顯著的增加了干擾素抗病毒的有效性。揭示了本發(fā)明YC復(fù)方干擾素組成方案能夠很好的應(yīng)用于陰道遞送生物大分子藥物，對(duì)人乳頭瘤病毒感染具有很好的防治效果。
3.本發(fā)明所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的適應(yīng)癥，其特征為預(yù)防和治療女性生殖器的人乳頭瘤病毒、人單純皰疹病毒、人巨細(xì)胞病毒感染。
3.1.內(nèi)容3所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的適應(yīng)癥，其特征為包含所有型別的HPV，特別是與宮頸癌和尖銳濕疣相關(guān)的6，11，16，18，26，31，33，35，39，40，42，43，44，45，51，52，53，54，55，56，58，59，62，66，68等型別。
3.2.如發(fā)明內(nèi)容3.1.所述的HPV感染，其特征為HPV感染的部位在女性宮頸、陰道壁、前庭、陰唇、會(huì)陰等部位。
3.3.如發(fā)明內(nèi)容3.1.所述的適應(yīng)癥，其特征還在于與HPV密切相關(guān)的宮頸上皮內(nèi)瘤形成(Cervical Intraepithelial Neoplasia，I、II、III)。
3.4.如發(fā)明內(nèi)容3所述的適應(yīng)癥，其特征還在于由HPV、HSV、CMV等引起的宮頸慢性感染或稱慢性宮頸炎或?qū)m頸糜爛。
4、如發(fā)明內(nèi)容1.所述的YC陰道噴霧裝置，其特征在于是一種特制的、適合于宮頸解剖結(jié)構(gòu)的、一次性、定量的長噴嘴型陰道噴霧裝置，可由患者自己將藥物直接遞送到病變局部。
5、YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑治療生殖器病毒感染，預(yù)防宮頸癌系國際首創(chuàng)。
本發(fā)明特點(diǎn)1.陰道噴霧劑組方的特點(diǎn)為(1)干擾素的劑量有科學(xué)依據(jù)根據(jù)1985-89年我們的臨床試驗(yàn)；在宮頸直接貼敷，每次至少為100萬單位。
(2)噴霧劑中含有一定濃度IL-2，其作用有2①擴(kuò)張毛細(xì)血管，利于藥物的作用；②刺激機(jī)體細(xì)胞免疫反應(yīng)，后者與病毒感染密切有關(guān)。
(3)噴霧劑含有0.1％的殼聚糖或其它多糖，增加了噴霧劑的粘稠度，延長了噴霧劑在粘膜表面停留的時(shí)間，同時(shí)可以擴(kuò)展上皮細(xì)胞層的細(xì)胞間隙，使干擾素進(jìn)入粘膜上皮內(nèi)，充分發(fā)揮干擾素的作用。
(4)噴霧劑中含有一定濃度的TB4，可以促進(jìn)宮頸上皮的修復(fù)。
(5)噴霧劑為酸性，不破壞陰道的酸性環(huán)境；(6)噴霧劑中不含任何可能對(duì)陰道黏膜有刺激性的防腐劑；(7)噴霧劑在無菌條件下生產(chǎn)包裝，每瓶一次性使用，排除了因反復(fù)使用而發(fā)生污染的可能。
2.YC陰道噴霧劑陰道給藥的特點(diǎn)(1)YC陰道噴霧劑根據(jù)陰道和子宮解剖學(xué)的特點(diǎn)，可以將干擾素直接噴霧到宮頸，即病毒繁殖的部位。
(2)一次性藥瓶，不僅安全，而且投藥劑量準(zhǔn)確。
(3)如果在陰唇和會(huì)陰部同時(shí)有HPV感染時(shí)，易于擴(kuò)展新適應(yīng)癥。
(4)YC陰道噴霧劑的噴霧嘴長度為7厘米，病人自己在截石位給藥，可以保證藥物到達(dá)宮頸口和宮頸周圍的穹隆區(qū)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1根據(jù)女性陰道解剖學(xué)特點(diǎn)設(shè)計(jì)的噴霧劑女性內(nèi)生殖器是由陰道、子宮頸、子宮、輸卵管和卵巢所組成。
陰道陰道呈園柱形，是一個(gè)具有高度擴(kuò)張性的、肌肉的管腔，分前后壁，上下兩端；前壁較短，約為7-9厘米；后壁較長，約10-12厘米。上端較寬，包圍宮頸。圍繞宮頸的部分稱為陰道穹隆，分前、后、左、右4部分，子宮頸陰道部凸出于陰道上端。下端開口于陰道前庭后部。較上端窄。平時(shí)陰道前后壁相貼，使陰道下部橫斷面呈H形。從前庭直到子宮。陰道管腔覆蓋的粘膜，色淡紅，由復(fù)層鱗狀上皮所覆蓋。
子宮腔與子宮頸宮腔為一上寬下窄的三角形。在子宮體與子宮頸之間形成最狹窄的部分稱為子宮峽部，在非孕期長約1厘米，其下端與宮頸內(nèi)腔相連。子宮峽部的上端，因在解剖學(xué)上較狹窄，又稱為解剖學(xué)內(nèi)口；峽部的下端組織在此由子宮頸內(nèi)膜轉(zhuǎn)變?yōu)樽訉m頸粘膜，又稱組織學(xué)內(nèi)口。宮頸內(nèi)腔呈梭形，稱子宮頸管，成年婦女長約為3厘米，其下端稱為子宮頸外口，連接陰道頂端，所以宮頸以陰道附著部為界，分為兩部分，即陰道上部和陰道部。是子宮的下部分突出于陰道管腔中，中間有口，經(jīng)血可以流出，精子可以進(jìn)入子宮。宮頸的柱狀上皮與鱗狀上皮交接處是HPV繁殖的所在地。
當(dāng)人體臥床，處于截石位時(shí)，宮頸與后穹隆最為接近，處于這一體位時(shí)，噴霧器噴霧物可達(dá)宮頸周圍。
根據(jù)宮頸以上的解剖特點(diǎn)，我們開發(fā)了陰道噴霧劑裝置，見說明書附圖8。共由3部分組成藥品瓶，噴霧泵和噴霧臂。
實(shí)施例2我們發(fā)明的陰道噴霧劑每瓶裝量標(biāo)示量1.0ml，處方如下重組人干擾素α2b(大腸桿菌)300萬IU/ml人血白蛋白0.5％
氯化鈉 0.7％殼聚糖 0.1％醋酸鹽緩沖液(pH4.5) 50mM將殼聚糖溶解，配制成1％的母液，并配制1M的醋酸鹽緩沖液(pH4.5)，然后根據(jù)處方濃度將各組分混合，攪勻，除菌過濾后，分裝至已滅菌的上述噴霧裝置中。
實(shí)施例3陰道噴霧劑每瓶裝量標(biāo)示量1.0ml，處方可以如下重組人干擾素β 100萬IU/ml人血白蛋白 0.5％重組人白介素-220萬IU/ml氯化鈉 0.6％羥丙基甲基纖維素0.5％檸檬酸鹽緩沖液(pH5.0) 50mM將羥丙基甲基纖維素溶解，配制成2％的母液，并配制1M的檸檬酸鹽緩沖液(pH5.0)，然后根據(jù)處方濃度將各組分混合，攪勻，除菌過濾后，分裝至已滅菌的上述噴霧裝置中。實(shí)施例4陰道噴霧劑每瓶裝量標(biāo)示量1.0ml，處方可以如下重組人干擾素α1b 10μg/ml人血白蛋白 0.5％胸腺素β420μg/ml氯化鈉 0.6％幾丁質(zhì) 0.5％磷酸鹽緩沖液(pH5.5)50mM將幾丁質(zhì)溶解，配制成母液，并配制1M的磷酸鹽緩沖液(pH5.5)，然后根據(jù)處方濃度將各組分混合，攪勻，除菌過濾后，分裝至已滅菌的上述噴霧裝置中。
實(shí)施例5陰道噴霧劑每瓶裝量標(biāo)示量1.0ml，處方可以如下重組人干擾素α2b(CHO細(xì)胞)300萬IU/ml人血白蛋白 0.5％氯化鈉 0.7％天然乳鐵蛋白 20μg殼聚糖 0.05％纖維素 0.1％醋酸鹽緩沖液(pH4.0) 50mM將殼聚糖和纖維素溶解，配制成母液，并配制1M的醋酸鹽緩沖液(pH4.0)，然后根據(jù)處方濃度將各組分混合，攪勻，除菌過濾后，分裝至已滅菌的上述噴霧裝置中。
實(shí)施例6陰道噴霧劑每瓶裝量標(biāo)示量1.0ml，處方可以如下重組人干擾素α2a 300萬IU/ml人血白蛋白 0.5％胸腺素β420μg/ml人IL-2 20萬IU/ml氯化鈉 0.6％透明質(zhì)酸 0.1％醋酸鹽緩沖液(pH3.8)50mM將各固體成分分別溶解，配制成母液，并配制1M的醋鹽緩沖液(pH3.8)，然后根據(jù)處方濃度將各組分混合，攪勻，除菌過濾后，分裝至已滅菌的上述噴霧裝置中。
實(shí)施例7本噴霧劑的使用方法為每周2-3次；每次1.0毫升；連續(xù)2-3周為一療程。病人自己給藥，每晚在睡前，采取截石位將噴霧嘴直接指向?qū)m頸。將藥品噴入；每瓶藥品均為一次性使用。一個(gè)療程使用6瓶。
實(shí)施例8本噴霧劑療效判斷標(biāo)準(zhǔn)宮頸糜爛病例痊愈子宮頸光滑，糜爛面縮小2度(即由III度好轉(zhuǎn)為I度)或以上。
顯效糜爛面積縮小1度(即由II度好轉(zhuǎn)為I度，III度好轉(zhuǎn)為II度)；有效糜爛面積縮小或好轉(zhuǎn)不足I度?；蛎訝€面積無縮小而顆粒變?yōu)閱渭冃停轭^型變?yōu)轭w粒型。
無效糜爛面積未縮小或擴(kuò)大；計(jì)算兩組痊愈率，顯效率。
CIN病例痊愈HPV陰轉(zhuǎn)，Pap涂片陰轉(zhuǎn)。
顯效HPV陰轉(zhuǎn)，Pap涂片CIN級(jí)別降低I度；或HPV未陰轉(zhuǎn)，CIN級(jí)別降低II度有效HPV陰轉(zhuǎn)，Pap涂片CIN級(jí)別無改變；或HPV未陰轉(zhuǎn)，但Pap涂片CIN級(jí)別降低I級(jí)。
無效HPV持續(xù)陽性和Pap涂片檢查，CIN級(jí)別無變化或加重。
兼有宮頸糜爛和CIN患者，兩種情況分別統(tǒng)計(jì)。
權(quán)利要求
1.一種復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，含有以下組分人干擾素、人白蛋白、天然多糖等，其包裝采用一種獨(dú)特的、適合于宮頸解剖結(jié)構(gòu)的、一次性、定量的長噴嘴型陰道噴霧裝置，可由患者自己將藥物直接遞送到病變局部。用以治療由于性傳播的人乳頭瘤病毒(HPV)感染引起的宮頸上皮發(fā)育不良，包括宮頸上皮內(nèi)瘤形成I、II、III度(原位癌)，以及HPV、單純皰疹病毒II型(HSV-2)，巨細(xì)胞病毒(CMV)引起的宮頸慢性感染(慢性宮頸炎或?qū)m頸糜爛)，預(yù)防宮頸癌.
2.如權(quán)利要求1所述的YC復(fù)方陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的人干擾素為天然人干擾素各型和亞型或通過基因重組技術(shù)構(gòu)建的重組人干擾素各型和亞型，如α1b，α2a，α2b，β1a，β1b，γ等。
3.如權(quán)利要求2所述的天然的人各型和亞型干擾素，其特征在于，所述的天然的人干擾素為在人細(xì)胞培養(yǎng)上(人白細(xì)胞或原代細(xì)胞培養(yǎng)或二倍體細(xì)胞株培養(yǎng)或永生化的細(xì)胞系培養(yǎng)等)由任何病毒或雙鏈RNA等其它所有干擾素誘生劑所誘導(dǎo)的人各型和亞型干擾素。
4.如權(quán)利要求2所述的重組人各型和亞型干擾素，其特征在于，所述的重組人干擾素為由細(xì)菌(如大腸桿菌)或真菌(如酵母)等所生產(chǎn)的或由哺乳動(dòng)物細(xì)胞所生產(chǎn)的重組人各型和亞型干擾素。
5.如權(quán)利要求1所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的人白蛋白為從人周圍血提取純化的人白蛋白或由重組技術(shù)生產(chǎn)的人白蛋白。
6.如權(quán)利要求1所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于，所述的天然多糖包括羥丙甲纖維素、透明質(zhì)酸、纖維素、淀粉、幾丁質(zhì)、殼聚糖及其衍生物，可為其中一種，或者是這些天然多糖的任意組合。
7.如權(quán)利要求1所述的YC陰道噴霧劑組分，其特征在于還可以含有其它細(xì)胞因子，包括能促進(jìn)局部免疫反應(yīng)和促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的各類細(xì)胞因子，包括天然的或重組的人白細(xì)胞介素-2，12，天然的或重組的胸腺肽-β4，天然的或重組的乳鐵蛋白等。
8.如權(quán)利要求7所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，其特征在于還以可以含有一定濃度的雌激素，如雌二醇、炔雌醇、己烯雌酚等。
9.如權(quán)利要求8所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，其特征在于還以可含有一定濃度的緩沖溶液，包括醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液、磷酸緩沖液等，pH為3.5~5.5，與陰道的酸性環(huán)境相匹配。
10.如權(quán)利要求9所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，其特征在于該產(chǎn)品為無菌產(chǎn)品，其中含有人血白蛋白，而不含任何對(duì)陰道粘膜有刺激性的防腐劑。
11.如權(quán)利要求10所述的陰道噴霧劑，其特征在于，其藥物的遞送裝置為適合于宮頸解剖結(jié)構(gòu)的、一次性、定量的長噴嘴型陰道噴霧裝置，可由患者自行將藥物直接遞送到宮頸病變局部。
12.如權(quán)利要求10所述的YC復(fù)方干擾素陰道噴霧劑，特征為其適應(yīng)癥是預(yù)防和治療女性生殖器的人病毒感染，包括HPV、HSV、CMV等。
13.如權(quán)利要求12所述的人乳頭瘤病毒(HPV)感染，其特征為包含所有型別的HPV，特別是與宮頸癌和尖銳濕疣相關(guān)的6，11，16，18，26，31，33，35，39，40，42，43，44，45，51，52，53，54，55，56，58，59，62，66，68等型別。
14.如權(quán)利要求12所述的HPV感染，其特征為HPV感染的部位在女性宮頸、陰道壁、前庭、陰唇、會(huì)陰等部位。
15.如權(quán)利要求12所述的適應(yīng)癥，其特征還在于與HPV密切相關(guān)的宮頸上皮內(nèi)瘤形成(Cervical Intraepitheliai Neoplasia，I、II、III)和慢性宮頸炎。
16.如權(quán)利要求12所述的適應(yīng)癥，其特征還在于由HPV、HSV、CMV等引起的宮頸慢性感染或稱慢性宮頸炎或?qū)m頸糜爛。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種新穎的復(fù)方干擾素陰道噴霧劑的組方及該產(chǎn)品的制備方法、包裝裝置，用于治療性傳播的人乳頭瘤病毒(HPV)、單純皰疹病毒II型(HSV－2)，巨細(xì)胞病毒(CMV)等感染引起的慢性宮頸炎或?qū)m頸上皮發(fā)育不良，包括宮頸上皮內(nèi)瘤形成I、II、III度(原位癌)，它具有抑制病毒繁殖，預(yù)防宮頸癌的作用。所述的新穎復(fù)方干擾素陰道噴霧劑含有以下組分(總稱為YC)人干擾素，人白蛋白，天然多糖及其它人細(xì)胞因子，緩沖液和鹽類。通過特制的、適合于宮頸解剖結(jié)構(gòu)的、一次性、定量的長噴嘴型陰道噴霧裝置，可由患者自己將藥物直接遞送到病變局部。由于本發(fā)明中的人干擾素和組方中的其它成份存在著十分有效的協(xié)同作用，特殊的藥物遞送方式，增加了YC在陰道和宮頸上皮的停留時(shí)間，從而顯著地增加了干擾素的抗病毒效果。揭示了本發(fā)明YC組成方案能夠很好地應(yīng)用于陰道遞送生物大分子藥物，對(duì)性傳播的病毒感染具有很好的防治效果。
文檔編號(hào)A61P15/00GK1927390SQ20051009845
公開日2007年3月14日 申請(qǐng)日期2005年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月8日
發(fā)明者侯云德, 張麗蘭, 張利萍 申請(qǐng)人:北京遠(yuǎn)策藥業(yè)有限責(zé)任公司