專利名稱：咪唑并[1,2－а]嘌呤衍生物及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種阻斷DNA合成的化合物，尤其涉及一種咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
參與DNA合成過程的許多酶都可能作為抗腫瘤藥物的作用靶點(diǎn)，抗代謝藥物實(shí)際上就是這些酶的抑制劑，在一定程度上可以阻斷DNA的合成。嘌呤拮抗劑是一類抗腫瘤藥物，其可以阻斷DNA的合成。其結(jié)構(gòu)中堿基部分為嘌呤或嘌呤類似物；其糖基部分有別于核糖，是經(jīng)修飾的核糖類似物。嘌呤拮抗劑以偽結(jié)構(gòu)摻入DNA鏈的合成中，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞DNA合成鏈終止而起到抗腫瘤的作用。目前上市的藥物有6-巰嘌呤(6-MP)、溶癌呤(AT-1438)、6-硫鳥嘌呤(6-TG)、8-氮雜鳥嘌呤(AZG)、氟達(dá)拉濱(fludarabine)、噴司他丁(DCF，pentostatin)、克拉屈濱(cladribine)等。此外，clofarabine在登記中，Nelarabine處于III期臨床，BCX-1777處于II期臨床。
近十幾年來的研究發(fā)現(xiàn)含N-9芐基(或甲基芳香雜環(huán))取代的鳥嘌呤衍生物(I類)以及鳥嘌呤9-去氮-9-芐基(或甲基芳香雜環(huán))取代的化合物(II類)，對(duì)嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase，PNP)有較好的抑制活性，從而使這些化合物具有抗腫瘤活性。
Poluektova研究發(fā)現(xiàn)(Int J Immunopharmacol，Vol 21(11)，1999，p777-92)，不僅9-芐基鳥嘌呤有PNP抑制活性，7-芐基-8-溴鳥嘌呤同樣對(duì)T-白血病細(xì)胞和T-淋巴細(xì)胞有抑制其增殖的作用，不影響B(tài)-細(xì)胞的作用，而且抑制作用更強(qiáng)。
R’1＝H，NH2；R’2＝Ar R”1＝H，NH2；R”2＝Ar I類 II類 7-芐基-8-溴鳥嘌呤。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是為了提供一種新的抗腫瘤的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物含N-1取代的甲基芳香三環(huán)化合物，這種三環(huán)結(jié)構(gòu)的化合物在體外篩選中表現(xiàn)出對(duì)鼠L1210白血病細(xì)胞和人淋巴腫瘤細(xì)胞Hut78有一定的抗腫瘤活性。
本發(fā)明的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物的結(jié)構(gòu)如式I所示 式I
其中，R1為氫、取代或未取代C1～8烷基、取代或未取代C2～8烯基、取代或未取代C2～8炔基、取代或未取代C3～6環(huán)烷基、取代或未取代3～6元雜環(huán)基、取代或未取代芳基、或者取代或未取代雜環(huán)芳基；R2為取代或未取代C1～8烷基、取代或未取代C2～8烯基、取代或未取代芳基、或者取代或未取代雜環(huán)芳基。
本發(fā)明所述的芳基是芳香烴分子中去掉一個(gè)H原子后所剩下的原子團(tuán)稱為芳基。芳香烴是一類具有芳香性的化合物，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不易加成，不易氧化，容易取代和碳環(huán)異常穩(wěn)定的特性，不同于一般的飽和化合物的性質(zhì)，包括1)單環(huán)芳烴，分子中只含有一個(gè)苯環(huán)，如苯、甲苯、乙苯、苯乙烯等等；2)多環(huán)芳烴，分子中有2個(gè)或2個(gè)以上的苯環(huán)，如聯(lián)苯、萘、蒽、菲等；3)非苯芳烴，分子中不含苯環(huán)，但含有結(jié)構(gòu)及性質(zhì)與苯環(huán)相似的芳烴，并具有芳香族化合物的特性，如環(huán)戊二烯負(fù)離子等。
所述的取代芳基是指芳基上的氫原子被其它取代基所取代得到的基團(tuán)。
雜環(huán)基代表穩(wěn)定的3至8元單環(huán)飽和環(huán)體系，它們由碳原子以及從N，O，S中選的1至3個(gè)雜原子組成，其中N，S雜原子可以被隨意氧化，N雜原子還可以被隨意季銨化。
在本發(fā)明中，所述的雜環(huán)芳基除非有特別說明，代表穩(wěn)定的5或6元單環(huán)芳香環(huán)體系，也可以代表9或10元苯稠雜芳環(huán)體系或二環(huán)稠雜芳環(huán)體系，它們由碳原子和由1至4個(gè)從N，O，S中選擇的雜原子組成，其中N，S雜原子可以被隨意氧化，N雜原子還可以被隨意季銨化。
在本發(fā)明中，所述的取代是指被下列一個(gè)或多個(gè)取代基所取代烷基、烯基、炔基、烷氧基、鹵素、硝基、芳基、雜環(huán)芳基、雜環(huán)基、腈基、異腈基、羥基、氨基、羧基、氧代、烷酰基、烷氧碳酰基、烷基亞磺?；?、烷基磺酰基、芳磺酰基、砜基、氰基、氨甲酰基、烯氧基、炔氧基、烷硫基、N-(烷基)氨甲?；?、N，N-二-(烷基)氨甲?；⑼轷Ｑ趸?、烷酰胺基、炔酰胺基、N-(烷基)氨磺?；?、N，N-二-(C1-8烷基)氨磺?；?。其中，本發(fā)明的芳基或雜環(huán)芳基可被上述任何吸電子、推電子基團(tuán)所取代。
在本發(fā)明的進(jìn)一步較佳實(shí)施例中，R1為取代或未取代C1～5烷基，取代或未取代C2～5烯基，取代或未取代C2～5炔基，取代或未取代C5～6環(huán)烷基，取代或未取代5～6元雜環(huán)基，取代或未取代苯基、聯(lián)苯基、萘基、蒽基或菲基，或者，取代或未取代的5～6元雜環(huán)芳基；R2為取代或未取代C1～5烷基，取代或未取代C2～5烯基，取代或未取代苯基、聯(lián)苯基、萘基、蒽基或菲基，或者，取代或未取代的5～6元雜環(huán)芳基。
在本發(fā)明的一較佳實(shí)施例中，所述的取代是指被下列一個(gè)或多個(gè)取代基所取代C1～5烷基、C2～5烯基、C2～5炔基、C1～5烷氧基、鹵素、硝基、芳基、雜環(huán)芳基、雜環(huán)基、腈基、羥基、氨基、羧基和氧代，較佳地是C1～5烷基、C2～5烯基、C1～5烷氧基、鹵素、硝基；尤其是，本發(fā)明所述的芳基或雜環(huán)芳基被上述取代基所取代。所述的鹵素為氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟、氯或溴。
更佳地，本發(fā)明所述的雜環(huán)芳基為含有1～2個(gè)選自N、O和S雜原子的雜環(huán)芳基，如吡咯基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、γ-吡喃基、嘧啶基、吲哚基或喹啉基等。
在本發(fā)明的更進(jìn)一步較佳實(shí)施例中，R1為甲基、苯基、甲苯基、二甲苯基、氟苯基、氯苯基、溴苯基、硝基苯基、甲氧基苯基或萘基；R2為苯基、氯苯基、吡啶基、呋喃基或噻吩基。
在本發(fā)明的最佳實(shí)施例中，所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物為6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-1)、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-2) 、6-對(duì)甲苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-3)、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-4)、6-甲基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-5)、6-苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-6)、6-鄰氯苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-7)、6-鄰氯苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-8)、6-(β’-萘基)-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-9)、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-10)、6-間硝基苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-11)、6-苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-12)、6-對(duì)溴苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-13)、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-14)、6-對(duì)甲氧基苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-15)、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-16)、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-17) 、6-對(duì)氯苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-18)、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-19)、6-對(duì)甲苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-20)、6-對(duì)甲苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-21)、6-苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-22)、6-鄰氯苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-23)、6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-24)、6-對(duì)氟苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-25)、
6-對(duì)甲氧基苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-26)、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-27)、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-28)、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-29)、6-(2’，4’-二甲基苯基)-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-30)、6-對(duì)溴苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-31)、6-對(duì)甲苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-32)、6-苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-33)、6-對(duì)氯苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-34)、6-對(duì)氟苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-35)、6-(β’-萘基)-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-36)、6-鄰氯苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-37)、6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-38)、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-39)、6-乙烯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-40)、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(1’-乙烯基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤或(I-41)或6-對(duì)溴苯基-1-丁基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤(I-42)。
本發(fā)明的另一目的是提供一種制備本發(fā)明的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物的方法，該方法包括如下步驟1)在堿性條件下，將含有雙乙酰鳥嘌呤(式2化合物)的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲醚(DME)和/或二甲亞砜(DMSO)溶劑，室溫?cái)嚢韬笊郎刂?0～150℃，滴加入R2CH2X；TLC跟蹤反應(yīng)，反應(yīng)完畢，減壓蒸干溶劑，進(jìn)行加壓柱層析，洗脫劑為氯仿∶甲醇＝100～5∶1，得式3化合物；所述的堿性條件優(yōu)選氫化鈉和/或碳酸鉀；X為鹵素，優(yōu)選氯或溴；較佳地是雙乙酰鳥嘌呤與R2CH2X的摩爾比為1∶1～1∶2.5，每克雙乙酰鳥嘌呤所用的溶劑為5～100mL；反應(yīng)時(shí)間較佳地為2～24小時(shí)。
2)攪拌含有式3化合物和甲胺水溶液的混合液，回流1～10小時(shí)；水解完全后，冷卻，減壓蒸干溶劑，加入氯仿或乙酸乙酯洗滌，抽濾，得式4化合物；3)在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將含有式4化合物，叔丁醇鉀和/或NaH，溶劑DMF、DME和/或DMSO的混合液進(jìn)行攪拌，較佳地?cái)嚢?分鐘以上，更佳地為5～120分鐘，更佳地60分鐘，加入R1COCH2Br，在30～120℃反應(yīng)3～30小時(shí)；反應(yīng)液倒入水中，乙酸乙酯抽提兩次，合并有機(jī)層，減壓蒸干溶劑，進(jìn)行加壓柱層析，洗脫劑為氯仿∶甲醇＝50～1∶1，得本發(fā)明所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物(式I化合物)；其中R1、R2的定義如上。
本發(fā)明的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物的合成路線如下所示
其中，步驟1)的雙乙酰鳥嘌呤可以是市售的雙乙酰鳥嘌呤，也可以自己合成將鳥嘌呤(式1化合物)在催化劑[如磷酸和4-二甲氨基吡啶(DMAP)]存在下與醋酸酐反應(yīng)得到的雙乙酰鳥嘌呤。
上述路線中，“Ac2O”是指醋酸酐，“Cat”是指催化劑，“Ac”是指乙酰基，“t-BuOK”是指叔丁醇鉀，R1是指R1，R2是指R2。
本發(fā)明的再一目的是提供本發(fā)明的鳥嘌呤衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的鳥嘌呤衍生物表現(xiàn)出對(duì)鼠L1210白血病細(xì)胞和人淋巴腫瘤細(xì)胞Hut78有一定的抗腫瘤活性。
其中，化合物I-4，I-10，I-15～I(xiàn)-18，I-20，I-22～I(xiàn)-25，I-27～I(xiàn)-36，I-38，I-39活性較佳；化合物I-10、I-17、I-20、I-24、I-25、I-31、I-34、I-39活性更佳。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1～40式I化合物合成其中R1，R2基團(tuán)及相應(yīng)的化合物的編號(hào)、以及分子式、質(zhì)譜、熔點(diǎn)等理化數(shù)據(jù)見表1所示。
式I表1


以制備實(shí)施例1的化合物為例①二乙酰鳥嘌呤的制備500mL蛋形燒瓶中加入鳥嘌呤20.0g(0.133mol)，醋酐400mL(4.23mol)，85％磷酸2.0g(0.174mol)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)2.0g(0.164mol)；磁力攪拌，加熱至160℃，回流5小時(shí)；反應(yīng)完畢后，冷卻，抽濾，固體用無水乙醇20ml洗滌兩次，干燥后得淺褐色固體即二乙酰鳥嘌呤，產(chǎn)量18.5g，收率59.3％。mp285℃(與文獻(xiàn)一致)。
EAC9H9N5O3，Calcd.C-45.96 H-3.86 N-29.78；Found C-45.69 H-3.80N-29.39。MS(EI)m/e[M]+235。1HNMR(DMSO)12.21(s，1H，1-NH)，11.71(s，1H，NHCO-)，8.44(s，1H，8-H)，2.82(s，3H，CH3CO)，2.21(s，3H，CH3CO)。
②7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-2-乙酰-鳥嘌呤的制備250mL蛋形瓶中加入雙乙酰鳥嘌呤9.65g(50.0mmol)，經(jīng)鈣氫干燥過的無水DMF(N，N-二甲基甲酰胺)50mL；磁力攪拌，加入鈉氫(60％)2.60g(65.0mmol)，室溫?cái)嚢?5分鐘后，升溫至85℃；滴加入3-吡啶基溴甲烷 10.26克(60.0mmol)溶于50mL DMF的溶液，TLC跟蹤反應(yīng)，20小時(shí)反應(yīng)完畢；減壓蒸干溶劑，進(jìn)行加壓柱層析，洗脫劑為氯仿∶甲醇＝100∶1～5∶1，梯度洗脫，得化合物7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-2-乙酰-鳥嘌呤，經(jīng)少量乙酸乙酯洗滌，產(chǎn)量為3.80g，收率27％。
MS(EI)m/e[M]+284，[M-COCH3]+242。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ11.5-12.2(br，2H，CONH，NHAc)，8.62(d，1H，吡啶環(huán))，8.50(d，IH，吡啶環(huán))，8.38(s，1H，8-H)，7.74(m，1H，吡啶環(huán))，7.36(m，1H，吡啶環(huán))，5.55(s，2H，-NCH2Ph)，2.1 5(s，3H，-COCH3)。
③7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]鳥嘌呤的制備500mL蛋形瓶中加入7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-2-乙酰-鳥嘌呤2.84g(10.0mmol)，40％甲胺水溶液200mL；磁力攪拌，回流3小時(shí)；反應(yīng)完全后，冷卻，減壓蒸干溶劑，加入氯仿150mL，攪拌30分鐘，抽濾；固體再用乙酸乙酯200mL洗滌30分鐘，抽濾，經(jīng)紅外燈干燥后得白色固體即7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]鳥嘌呤，產(chǎn)量1.62g，收率67％。mp＞280℃；MS(EI)m/e[M]+242。
④6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤的制備在100mL蛋形瓶中加入7-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-鳥嘌呤160mg(0.66mmol)，經(jīng)干燥處理的二甲亞砜(DMSO)7mL，加入新鮮制備的叔丁醇鉀224mg(2.0mmol)；氮?dú)獗Ｗo(hù)下，室溫下攪拌1小時(shí)；之后，加入ω-溴代對(duì)氯苯乙酮186mg(0.79mmol)，于室溫N2下反應(yīng)7小時(shí)，原料點(diǎn)消失；把反應(yīng)液倒入100mL水中，乙酸乙酯100mL抽提兩次，氯仿100mL再抽提兩次，合并有機(jī)層，減壓蒸干溶劑；進(jìn)行加壓柱層析，梯度洗脫，洗脫劑為氯仿∶甲醇(體積比)＝50∶1(150mL)→40∶1(150mL)→30∶1(150mL)→20∶1(150mL)→15∶1(150mL)→10∶1(200mL)，分得粗品經(jīng)乙酸乙酯洗滌，紅外燈干燥后，得白色固體即I-1化合物，產(chǎn)量92mg，收率37.0％。mp＞270℃。MS(EI)m/e[M]+376，同位素峰378(3∶1)(基峰)。
以實(shí)施例29的化合物的制備為例
①二乙酰鳥嘌呤的制備如實(shí)施例1。
②7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-2-乙酰-鳥嘌呤的制備100mL蛋形瓶中加入雙乙酰鳥嘌呤9.65g(50.0mmol)，經(jīng)鈣氫干燥過的無水DMF2500mL；磁力攪拌，加入60％氫化鈉(NaH)2.60g(65.0mmol)，室溫?cái)嚢瑁?5分鐘后升溫至85℃，滴加入2-呋喃基溴甲烷 7.1mL(60.0mmol)溶于50mL DMF的溶液，TLC跟蹤反應(yīng)，20小時(shí)反應(yīng)完畢；減壓蒸干溶劑，進(jìn)行加壓柱層析，洗脫劑為氯仿∶甲醇＝100∶1～5∶1，梯度洗脫，得化合物7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-2-乙酰-鳥嘌呤，經(jīng)少量乙酸乙酯洗滌，產(chǎn)量為3.80g，收率26.9％。
③7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]鳥嘌呤的制備500mL蛋形瓶中加入7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-2-乙酰-鳥嘌呤2.87g(10.0mmol)，40％甲胺水溶液200mL，磁力攪拌，回流3小時(shí)；反應(yīng)完全后，冷卻，減壓蒸干溶劑，加入氯仿150mL，攪拌30分鐘，抽濾；固體再用乙酸乙酯200mL洗滌30分鐘，抽濾，經(jīng)紅外燈干燥后得白色固體即7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]鳥嘌呤1.62g，收率67.2％。mp＞280℃。
④6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤的制備100mL蛋形瓶中加入7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-鳥嘌呤300mg(1.3mmol)，經(jīng)干燥處理的DMSO10mL，加入新鮮制備的叔丁醇鉀583mg(5.2mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，室溫下攪拌1小時(shí)；之后，加入ω-溴代對(duì)氟苯乙酮410mg(1.9mmol)，于室溫N2下反應(yīng)7小時(shí)，原料點(diǎn)消失；把反應(yīng)液倒入150mL水中，乙酸乙酯150mL抽提兩次，氯仿150mL再抽提兩次，合并有機(jī)層，減壓蒸干溶劑；拌入6g100-200目硅膠，烘干后進(jìn)行加壓柱層析，梯度洗脫，洗脫劑氯仿∶甲醇＝50∶1(200mL)→40∶1(200mL)→30∶1(200mL)→20∶1(200mL)→15∶1(200mL)→10∶1(400mL)；分得粗品經(jīng)乙酸乙酯洗滌，紅外燈干燥后，得白色固體即I-1化合物，產(chǎn)量143mg，收率31.5％，mp250℃，MS(EI)m/e[M]+349。
以實(shí)施例35的化合物的制備為例①二乙酰鳥嘌呤的制備如實(shí)施例1。
②7-芐基-2-乙酰-鳥嘌呤的制備100ml蛋形瓶中加入雙乙酰鳥嘌呤9.65g(50.0mmol)，經(jīng)鈣氫干燥過的無水DMF2500ml，磁力攪拌，加入鈉氫(60％)2.60g(65.0mmol)，室溫?cái)嚢?5分鐘后，升溫至80-90℃，滴加入溴芐7.1ml(60.0mmol)溶于50mlDMF的溶液，TLC跟蹤反應(yīng)，20小時(shí)反應(yīng)完全。減壓蒸干溶劑，進(jìn)行加壓柱層析。洗脫劑氯仿∶甲醇＝100∶1～5∶1。得化合物7-芐基-2-乙酰-鳥嘌呤，經(jīng)少量乙酸乙酯洗滌，得3.80g。收率26.9％。
MS(EI)m/e[M]+283，[M-COCH3]+241；1H-NMR(400MHz，DMSO)δ11.1-12.1(br，2H，CONH，NHAc)，8.31(s，1H，8-H)，7.35(m，5H，苯環(huán))，5.51(s，2H，-NCH2Ph)，2.15(s，3H，-COCH3)。
③7-芐基鳥嘌呤500ml蛋形瓶中加入7-芐基-2-乙酰-鳥嘌呤2.87g(10.0mmol)，甲胺水溶液200ml，磁力攪拌，回流3小時(shí)，反應(yīng)完全。冷卻，減壓蒸干溶劑，加入氯仿150ml，攪拌30分鐘，抽濾，固體再用乙酸乙酯200ml洗滌30分鐘，抽濾，經(jīng)紅外燈干燥后，得白色固體1.62g。收率67.2％，mp＞280℃。
MS(EI)m/e[M]+241；1H-NMR(400MHz，DMSO)δ10.65(s，1H，CONH)，8.03(s，1H，8-H)，7.29(m，5H，苯環(huán))，6.05(s，2H，NH2)，5.42(s，2H，-NCH2Ph)。
④6-對(duì)氟苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤的制備將實(shí)施例29中的7-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-鳥嘌呤換為7-芐基鳥嘌呤，同法與ω-溴代對(duì)氟苯乙酮反應(yīng)制得6-對(duì)氟苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤。
根據(jù)上述實(shí)施例1、29、35的化合物的制備過程，同理制備實(shí)施例2～28、30～34、36～42的化合物。這些實(shí)施例中所用到的原料R1COCH2Br和R2CH2X中的R1和R2如表1中所示的R1和R2，其它原料同實(shí)施例1。所涉及到的原料在市場(chǎng)上均有銷售。實(shí)施例1～42制得的化合物I-1～I(xiàn) 42的核磁共振譜數(shù)據(jù)如表2所示。
表2




效果實(shí)施例1檢測(cè)I-1～I(xiàn) 42化合物對(duì)L1210和Hut78的抗腫瘤活性抑制試驗(yàn)。
MTT法96孔板每孔加入濃度為1×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液90μL，加入樣品液，10μL/孔，設(shè)雙復(fù)孔，37℃，5％CO2作用48h，每孔加入5mg/mL的MTT溶液20μL，作用4h后加入溶解液，100μl/孔，置培養(yǎng)箱內(nèi)，溶解后用MK-2全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)570nm OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。
表3



帶有*的數(shù)據(jù)是換算成摩爾濃度的數(shù)據(jù)，單位為mol/L。
結(jié)論由此可見，一些含N-1(鳥嘌呤的N-7位)亞甲基芳基取代、C-6芳基取代的三環(huán)咪唑并[1，2-a]嘌呤化合物對(duì)鼠的L1210白血病細(xì)胞和人淋巴腫瘤細(xì)胞Hut78有一定的抗腫瘤活性。
權(quán)利要求
1.一種式I所示的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物 式I或其藥學(xué)上可接受的鹽，其中，R1為氫、取代或未取代C1～8烷基、取代或未取代C2～8烯基、取代或未取代C2～8炔基、取代或未取代C3～6環(huán)烷基、取代或未取代3～6元雜環(huán)基、取代或未取代芳基、或者取代或未取代雜環(huán)芳基；R2為取代或未取代C1～8烷基、取代或未取代C2～8烯基、取代或未取代芳基、或者取代或未取代雜環(huán)芳基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于R1為取代或未取代C1～5烷基，取代或未取代C2～5烯基，取代或未取代C2～5炔基，取代或未取代C5～6環(huán)烷基，取代或未取代5～6元雜環(huán)基，取代或未取代苯基、聯(lián)苯基、萘基、蒽基或菲基，或者，取代或未取代的5～6元雜環(huán)芳基；R2為取代或未取代C1～5烷基，取代或未取代C2～5烯基，取代或未取代苯基、聯(lián)苯基、萘基、蒽基或菲基，或者，取代或未取代的5～6元雜環(huán)芳基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于所述的取代是指被下列一個(gè)或多個(gè)取代基所取代C1～5烷基、C2～5烯基、C2～5炔基、C1～5烷氧基、鹵素、硝基、芳基、雜環(huán)芳基、雜環(huán)基、腈基、羥基、氨基、羧基和氧代。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于所述的鹵素為氟、氯或溴。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于所述的雜環(huán)芳基為含有1～2個(gè)選自N、O和S雜原子的雜環(huán)芳基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于R1為甲基、苯基、甲苯基、二甲苯基、氟苯基、氯苯基、溴苯基、硝基苯基、甲氧基苯基或萘基；R2為苯基、氯苯基、吡啶基、呋喃基或噻吩基。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物，其特征在于所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物為6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-甲基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-鄰氯苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-鄰氯苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(β’-萘基)-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-間硝基苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)溴苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲氧基苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(2’，4’二甲基苯基)-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氯苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-鄰氯苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氟苯基-1-間氯苯基甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲氧基苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)溴苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲氧基苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(2’，4’-二甲基苯基)-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)溴苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)甲苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氯苯基-1-間氯苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氟苯基-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-(β’-萘基)-1-苯甲基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-鄰氯苯基-1-[亞甲基-(2’-呋喃基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氯苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(2’-噻吩基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-乙烯基-1-[亞甲基-(3’-吡啶基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤、6-對(duì)氟苯基-1-[亞甲基-(1’-乙烯基)]-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤或6-對(duì)溴苯基-1-丁基-9-酮-5-H-咪唑并[1，2-a]嘌呤。
7.一種制備權(quán)利要求1所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物的方法，其包括如下步驟1)在堿性條件下，將含有雙乙酰鳥嘌呤的N，N-二甲基甲酰胺、二甲醚和/或二甲亞砜溶劑，攪拌升溫至40～150℃，滴加入R2CH2X，反應(yīng)完畢得式3化合物； 2)攪拌含有式3化合物和甲胺水溶液的混合液，回流1～10小時(shí)，水解得式4化合物；3)在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將含有式4化合物，叔丁醇鉀和/或NaH，溶劑N，N-二甲基甲酰胺、二甲醚和/或二甲亞砜的混合液進(jìn)行攪拌，加入R1COCH2Br，在30～120℃反應(yīng)3～30小時(shí)得權(quán)利要求1所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物；其中R1、R2的定義如權(quán)利要求1所述，X為鹵素。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于步驟1)所述的堿性條件為NaH和/或碳酸鉀，反應(yīng)時(shí)間為2～24小時(shí)，X為氯或溴；步驟3)加入R1COCH2Br之前的攪拌時(shí)間為5～120分鐘。
9.權(quán)利要求1所述的咪唑并[1，2-a]嘌呤衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于該抗腫瘤藥物為抗白血病或淋巴瘤藥物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種咪唑并[1，2－a]嘌呤衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽，本發(fā)明的咪唑并[1，2－a]嘌呤衍生物的結(jié)構(gòu)如式I所示，式I其中，R
文檔編號(hào)A61P35/02GK1966505SQ20051011053
公開日2007年5月23日 申請(qǐng)日期2005年11月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月18日
發(fā)明者肖旭華, 馬維勇, 孫文劼 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院