專利名稱：錦燈籠多糖在制備治療糖尿病藥物和保健品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，具體涉及錦燈籠果實(shí)多糖在制備治療糖尿病藥物和降血糖保健品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著社會(huì)進(jìn)步和經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展，糖尿病的發(fā)病率日益增高，而且中青年人兩倍于老年人的速度加入糖尿病的“大軍”。因此，與預(yù)防和治療糖尿病相關(guān)的藥物成為國際、國內(nèi)研究的熱點(diǎn)和發(fā)展趨勢(shì)。
目前，我國的降糖市場(chǎng)以西藥為主，約占整個(gè)市場(chǎng)份額的73.68％；中成藥為輔，約占24.7％。占降糖類產(chǎn)品絕對(duì)優(yōu)勢(shì)份額的主要是化學(xué)類處方藥，雖然效果較明顯，但長期服藥引起的耐藥性、抗藥性、肝腎損傷等副作用使糖尿病患者倍感痛苦。而植物成分，特別是中醫(yī)常用的中藥成分如植物多糖和皂苷等，不僅毒副作用小，而且很多藥物同時(shí)具有降血脂、提高免疫力、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種作用，對(duì)糖尿病并發(fā)癥有預(yù)防及治療作用。因而從藥用植物中發(fā)掘療效更好的抗糖尿病的天然藥物和保健品具有重要的意義和廣闊的市場(chǎng)前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從錦燈籠果實(shí)中提取的有顯著降血糖效果且無毒副作用的多糖藥物或保健品。
本發(fā)明的具體提取步驟步驟1新鮮的或干燥的錦燈籠果加5-10倍(V/V)去離子水加熱沸騰2-3小時(shí)，過濾殘?jiān)辉儆?-10倍(V/V)去離子水提取兩次，合并濾液；將濾液濃縮至原體積的1/15左右，加入4-5倍乙醇攪拌沉淀，沉淀物經(jīng)過離心，真空干燥，得到總多糖的粗制品。
步驟2將粗多糖溶解在去離子水中，反復(fù)凍溶后離心，棄沉淀；將上清液中多糖配制成2％的水溶液，加乙醇使其終濃度為30％并調(diào)整pH至2.5，靜止過夜，離心后棄沉淀；向上清液中繼續(xù)加入乙醇溶液使其終濃度為70％，靜止過夜，沉淀物經(jīng)過離心，真空干燥，得到的粗多糖A可作為糖尿病患者或高血糖亞健康人群緩解以及預(yù)防糖尿病的保健品。
步驟3將步驟2得到的粗多糖A通過Sephadex G-200柱層析，洗脫液為0.15M NaCl，洗脫液經(jīng)硫酸苯酚法檢測(cè)，取陽性部分合并，冷凍干燥得樣品B。該樣品經(jīng)過HPLC檢測(cè)，結(jié)果為單一對(duì)稱峰，證明該多糖為純品，該純品可作為糖尿病患者的治療藥品。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)1.本發(fā)明具體地闡明了錦燈籠果實(shí)多糖為降血糖的有效藥用成分，是具有顯著降血糖作用的天然藥物或保健品。純化的錦燈籠果實(shí)多糖可用于治療糖尿病藥物，而其粗制品可用于糖尿病患者或高血糖亞健康人群緩解以及預(yù)防糖尿病的保健品。而其他相關(guān)研究和發(fā)明均為極其粗糙的提取物，藥效成分不明確，利用價(jià)值低。
2.提取工藝簡(jiǎn)便，成本低廉。
3.材料來源廣泛。錦燈籠適應(yīng)性很強(qiáng)，極易大規(guī)模人工栽種，一旦種植可多年生存下去，規(guī)?；姆N植錦燈籠可以使種植農(nóng)戶脫貧致富。
具體實(shí)施例方式步驟1新鮮的或干燥的錦燈籠果1Kg加5-10倍(V/V)去離子水加熱沸騰2-3小時(shí)，過濾殘?jiān)?；再?-10倍(V/V)去離子水提取兩次，合并濾液；將濾液濃縮至原體積的1/15左右，加入4-5倍乙醇攪拌沉淀，沉淀物經(jīng)過離心，真空干燥，得到總多糖的粗制品32g。
步驟2將粗多糖溶解在去離子水中，反復(fù)凍溶后離心，棄沉淀；將上清液中多糖配制成2％的水溶液，加乙醇使其終濃度為30％并調(diào)整pH至2.5，靜止過夜，離心后棄沉淀；向上清液中繼續(xù)加入乙醇溶液使其終濃度為70％，靜止過夜，沉淀物經(jīng)過離心，真空干燥，得到的粗多糖A 25.6g可作為糖尿病患者或高血糖亞健康人群緩解以及預(yù)防糖尿病的保健品。
步驟3將步驟2得到的粗多糖通過Sephadex G-200柱層析，洗脫液為0.15M NaCl，洗脫液經(jīng)硫酸苯酚法檢測(cè)，取陽性部分合并，透析后濃縮，冷凍干燥得樣品B 6.9g。該樣品經(jīng)過HPLC檢測(cè)，結(jié)果為單一對(duì)稱峰，證明該多糖為純品，該純品可作為糖尿病患者的治療藥品。
有關(guān)其降血糖活性的藥效實(shí)驗(yàn)1.對(duì)正常小鼠的降血糖作用和體重的影響昆明小鼠每組10只，劑量A為50mg/kg，B為25mg/kg；連續(xù)灌胃7天后測(cè)定其空腹血糖。對(duì)照組連續(xù)灌胃7天生理鹽水。
降血糖作用粗品A和純品B對(duì)正常小鼠空腹血糖的影響如表1.和對(duì)照組相比，粗品A和純品B具有明顯降血糖作用(分別為p＜0.05)，B和A相比降血糖作用差異顯著p＜0.05.
表1粗品A和純品B對(duì)正常小鼠空腹血糖和體重的影響

體重的變化由表2可見，和對(duì)照組相比，粗品A和純品B對(duì)小鼠體重的變化影響不大，說明無毒副作用。
表2 粗品A和純品B對(duì)正常小鼠體重的影響

2.對(duì)四氧嘧啶引起的高血糖大鼠的降血糖作用Wistar大鼠四氧嘧啶致高血糖后，篩選高血糖大鼠每組10只，，連續(xù)灌胃7天后測(cè)定其空腹血糖。灌胃劑量A為50mg/kg，B為25mg/kg。
空白對(duì)照組(10只)連續(xù)灌胃7天生理鹽水；高血糖對(duì)照組為四氧嘧啶致高血糖后連續(xù)灌胃7天生理鹽水；高血糖+粗品A組為四氧嘧啶致高血糖后連續(xù)灌胃7天粗品A；高血糖+粗品B組為四氧嘧啶致高血糖后連續(xù)灌胃7天純品。
降血糖作用
由表3可以看出，與高血糖對(duì)照組相比，粗品A和純品B對(duì)四氧嘧啶致高血糖大鼠具有明顯降血糖作用(分別為p＜0.05，p＜0.01)。
表3粗品A和純品B對(duì)四氧嘧啶引起的高血糖大鼠空腹血糖的影響

對(duì)體重的影響由表4可以看出，對(duì)照組體重增加，高血糖組體重明顯降低，降低率為7.0％；而灌胃粗品A和純品B的糖尿病大鼠體重略減輕，降低率分別為2.0％和1.5％，說明其對(duì)高血糖大鼠體重的減輕有一定的抑制作用。
表4粗品A和純品B對(duì)四氧嘧啶引起的高血糖大鼠體重的影響

3毒性實(shí)驗(yàn)以正常劑量的十倍(A為500mg/kg，B為250mg/kg)連續(xù)灌胃昆明小鼠7天后，無一小鼠死亡并未見任何毒副作用和異常，說明粗品A和純品B無毒副作用。
HPLC、氣相色譜、紅外光譜及核磁共振等結(jié)果表明該多糖分子量為270kD，其單糖組分為鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸，其摩爾比為2.2∶2.7∶0.9∶0.6∶4∶2∶2.5，白色粉末。
權(quán)利要求
1.錦燈籠多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
2.錦燈籠多糖在制備作為緩解或預(yù)防糖尿病的保健品的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域中的應(yīng)用，具體涉及錦燈籠果實(shí)多糖在制備治療糖尿病藥物和降血糖保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明通過對(duì)新鮮的或干燥的錦燈籠果加去離子水加熱、過濾、濃縮、攪拌沉淀、離心，真空干燥等步驟提取總多糖的粗制品。再進(jìn)一步加工成粗多糖A及多糖B，具有顯著降血糖作用。純化的錦燈籠果實(shí)多糖可用于治療糖尿病藥物，而其粗制品可用于糖尿病患者或高血糖亞健康人群的保健品。本發(fā)明提取工藝簡(jiǎn)便，成本低廉，材料來源廣泛。錦燈籠適應(yīng)性很強(qiáng)，適于大規(guī)模人工栽種，易于推廣應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K36/81GK1823811SQ20051011914
公開日2006年8月30日 申請(qǐng)日期2005年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月28日
發(fā)明者王桂云 申請(qǐng)人:東北師范大學(xué)