專利名稱：參附注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥注射劑領(lǐng)域，具體涉及一種參附注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
人參是一種名貴中藥，它有很高藥用價(jià)值，《神農(nóng)本草經(jīng)》認(rèn)為，人參有“補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚降、除邪氣、明日開心益智″的功效，久服輕身延年”；而附子辛熱燥烈，補(bǔ)火散寒，上助心陽，中溫脾陽，下曖腎陽，可達(dá)表入里，溫通周身之陽氣。附子是臨床上常用藥之一，大熱，亦有大毒。所以附子的臨床應(yīng)用是要慎重對(duì)待的。
參附注射液的基礎(chǔ)方參附湯源于《婦人良方》，它具有回陽、益氣、固脫之功效，用于元?dú)獯筇潱枤獗┟?，癥見手足厥冷、汗出、呼吸微弱、脈微等。基于參附湯開發(fā)研制的參附注射液已成為急癥搶救的必備藥物，它是全國中醫(yī)院急診科室必備急救用藥，廣泛應(yīng)用于危重病的急救，顯示出較好療效。參附注射液對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、腎臟和腸道均有保護(hù)作用，在危重病的救治方面尤其是在心肺腦復(fù)蘇領(lǐng)域，參附注射液也具有廣闊的應(yīng)用前景。
中國專利96117458公開了一種參附注射液及其制備方法。其制備方法是，取人參、附子分別進(jìn)行提取人參用乙醇回流提?。桓阶佑盟恋硖崛?，然后合并人參、附子提取液配制而成。一方面，由于人參是貴重藥材，該專利中為能夠完全提取人參中的有效成分，在工藝操作中反復(fù)提取操作，因而其工藝非常繁瑣，異常耗時(shí)；且由于加熱提取的時(shí)間較長，也增大了人參有效成分降解的可能性；另一方面，由于附子是毒性較大的中藥，提取工藝的反復(fù)操作和時(shí)間的延長也會(huì)提高毒性成分的提取率，加大了臨床用藥的風(fēng)險(xiǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種參附注射液。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種參附注射液的制備方法。
具體而言，發(fā)明所述的參附注射液由人參有效部位和附子有效部位復(fù)配制成注射劑，其中人參和附子投料的重量比例為1∶2。
發(fā)明所述的附子有效部位制備過程為附子粉碎，加4-7倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到2-5，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置水浴保溫，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷或氯仿萃取，揮去溶劑即得附子有效部位。
優(yōu)選的附子有效部位制備過程為附子粉碎，加4-5倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-40℃水浴保溫1-2小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷萃取3-5次，揮去溶劑即得附子有效部位。
所述的人參有效部位制備過程為人參粉碎，加4-12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到2-5，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-45℃水浴保溫2-6小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集人參皂苷集中的乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用5-9倍量50-95％乙醇回流提取2-5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，揮去溶劑即得人參有效部位。
優(yōu)選的人參有效部位制備過程為人參粉碎，加8-12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-40℃水浴保溫4-6小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集人參皂苷集中的乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用6-9倍量70-95％乙醇回流提取3-5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，揮去溶劑即得人參有效部位。
具體而言，參附注射液制備過程為取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏8-16小時(shí)，濾過，濾液加入活性炭，煮沸，微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于安瓶中，100℃蒸汽滅菌30-60分鐘，即得。
上述的大孔樹脂選自D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、LD601型、WLD型、H107型大孔樹脂。
上述的纖維素酶是由葡聚糖內(nèi)切酶、葡聚糖外切酶和1，3-β-葡萄糖苷酶組成的混合物。
上述的淀粉酶是α淀粉酶。
上述的濾過用的微孔濾膜孔徑為0.22-0.45μm。
本發(fā)明的參附注射液對(duì)于類似配方下的參附粉針、參附凍干粉針、參附輸液等注射劑型也有借鑒意義，使這些劑型的制備和實(shí)施也成為了可能。
本發(fā)明所述參附注射液，其性狀為淡黃棕色的澄明液體。用法與用量為肌內(nèi)注射一次2～4ml，一日1～2次。靜脈滴注，一次20～100ml，(用5～10％葡萄糖注射液250～500ml稀釋后使用)。靜脈推注，一次5～20ml(用5～10％葡萄糖注射液20ml稀釋后使用)，或遵醫(yī)囑。
發(fā)明人基于簡化工藝、減少人參中有效成分降解、降低附子毒性成分的臨床風(fēng)險(xiǎn)和簡化工藝的目的，完成了本發(fā)明。通過實(shí)驗(yàn)證明，通過本發(fā)明所得的參附注射液在品質(zhì)上與原專利的產(chǎn)品相比，沒有差別。本發(fā)明與原專利的相比，它具有提高人參有效成分的提取率，降低附子毒性成分的過量提取的風(fēng)險(xiǎn)，操作簡便，耗時(shí)短的突出優(yōu)勢。令發(fā)明人驚喜的是，發(fā)明所得的參附注射液的配伍穩(wěn)定性也優(yōu)于原專利工藝。
具體實(shí)施例方式
下面用實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，有利于對(duì)本發(fā)明及其優(yōu)點(diǎn)、效果有更好的了解，但所述實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例1-參附注射液的制備a.附子有效部位的制備取1kg附子粉碎，加4倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置37℃水浴保溫2小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯萃取5次，揮去溶劑即得附子有效部位。
b.人參有效部位制備取0.5kg人參粉碎，加12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置37℃水浴保溫4-6小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集20％和30％乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用9倍量70％乙醇回流提取4次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用正丁醇萃取7次，揮去溶劑即得人參有效部位；c.注射劑的制備取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏12小時(shí)，濾過，濾液加入活性炭，煮沸，用孔徑為0.22μm微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽滅菌45分鐘，即得。
實(shí)施例2-參附注射液的制備a.附子有效部位的制備
取1kg附子粉碎，加5倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置40℃水浴保溫2小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用二氯甲烷萃取3-5次，揮去溶劑即得附子有效部位。
b.人參有效部位制備取0.5kg人參粉碎，加12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置40℃水浴保溫5小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集50％乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用6倍量70％乙醇回流提取5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯萃取5-7次，揮去溶劑即得人參有效部位；c.注射劑的制備取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏12小時(shí)，濾液加入活性炭，煮沸，用孔徑為0.22μm微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，l00℃蒸汽滅菌45分鐘，即得。
實(shí)施例3-參附注射液的制備a.附子有效部位的制備取1kg附子粉碎，加4倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置37℃水浴保溫2小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯萃取5次，揮去溶劑即得附子有效部位。
b.人參有效部位制備取0.5kg人參粉碎，加12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置37℃水浴保溫4-6小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集20％和30％乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用9倍量70％乙醇回流提取4次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用正丁醇萃取7次，揮去溶劑即得人參有效部位；c.注射劑的制備取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏12小時(shí)，濾過，濾液加入活性炭，煮沸，用孔徑為0.22μm微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽滅菌45分鐘，即得。
實(shí)施例4-參附注射液的制備a.附子有效部位的制備取1kg附子粉碎，加5倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置40℃水浴保溫2小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用二氯甲烷萃取3-5次，揮去溶劑即得附子有效部位；b.人參有效部位制備取0.5kg人參粉碎，加12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置40℃水浴保溫5小時(shí)，濾過，濾液上D101型大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集20％、30％和50％乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用6倍量70％乙醇回流提取5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯萃取5-7次，揮去溶劑即得人參有效部位；c.注射劑的制備取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏12小時(shí)，濾過，濾液加入活性炭，煮沸，用孔徑為0.22μm微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于2ml安瓶中，100℃蒸汽滅菌45分鐘，即得。
對(duì)比例1參附注射液的制備(依照中國專利96117458實(shí)施例制備)中國專利96117458參附注射液的工藝步驟如下a.制備人參提取液(1)、取人參10kg，置容器中加乙醇3萬ml，密閉，浸泡48小時(shí)，得浸泡液①；(2)、藥渣回流提取三次，每次加乙醇3萬ml，回流2小時(shí)時(shí)，得回流提取液②；(3)、取浸泡液①與回流提取②合并，得合并液③；(4)、藥渣用與原料等體積的乙醇淋洗，將淋洗液與合并液③合并，得提取液④；(5)、取提取液④過濾，按其體積加入0.5％的活性炭，攪拌1小時(shí)，放置1小時(shí)，過濾，得過濾液⑤；(6)、取過濾液⑤減壓回收乙醇至無醇味，補(bǔ)加注射用水至5萬ml，冷至室溫，用40％的NaOH溶液調(diào)pH值至7-7.5，冷藏24小時(shí)，備用，得人參備用液⑥；b、制備附子提取液(7)、將電滲水置容器中，再加濃鹽酸，使pH值達(dá)3-4，得酸水⑦；
(8)、取附子20kg，用常水搓洗、電滲水清洗后，置容器中，加入八倍量的酸水⑦，連續(xù)煎煮三次，每次2小時(shí)，合并三次煎煮液，過濾，減壓濃縮至1∶1(即每1ml中含生藥量1g)，冷至室溫，得濃縮液⑧；(9)、取濃縮液⑧，加入乙醇，攪拌，使含醇量達(dá)到75％，冷藏24小時(shí)，過濾，減壓回收乙醇至2500ml，冷至室溫，加乙醇、攪拌，使含醇量達(dá)到85％，用40％的NaOH溶液調(diào)PH值至8，冷藏過夜，得醇提取液⑨；(10)、取醇提取液⑨過濾至澄明，減壓回收乙醇至無醇味，補(bǔ)加注射用水至5萬ml，冷至室溫，用40％的NaOH溶液調(diào)PH值至7-7.5，冷藏24小時(shí)，備用，得附子備用液⑩c、配制參附注射液(11)、取人參備用液⑥和附子備用液⑩，分別過濾后，合并兩液，加入0.5％的活性炭(按配液體積計(jì)算)，煮沸30分鐘，冷至室溫，過濾至澄明，加入0.2％吐溫-80(按配液體積計(jì)算)，補(bǔ)加注射用水至全量，用40％的NaOH溶液調(diào)PH值至7-7.5，粗濾，精濾，滅菌，即得10萬ml參附注射液。
d、上述參附注射液的處方為人參10kg，附子20kg，適量注射用水，適量吐溫-80，制成10萬ml。每1ml中含有相當(dāng)于原生藥用量人參0.1g，附子0.2g。
實(shí)驗(yàn)例1-參附注射液的性狀和鑒別樣品實(shí)施例1-4和對(duì)比例性狀樣品為淡黃棕色的澄明液體。
鑒別(1)取本品各1ml，置蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干，殘?jiān)哟佐?.5ml，使溶解，移入試管中，沿試管壁加硫酸0.5ml，兩液界面呈棕紅色環(huán)。
(2)取本品各30ml，置分液漏斗中，加氯仿30ml振搖，靜置，取上層液蒸干，殘?jiān)铀?ml使溶解，加水飽和的正丁醇10ml，超聲處理30分鐘，吸收上清液，加氨試液3倍量，搖勻，放置分層，取上層液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參對(duì)照藥材1g，加乙醇30ml，置水浴上回流30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，濾過，濾液同法制成對(duì)照藥材溶液。再取人參皂苷Rb1、Re及Rg1對(duì)照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國藥典(2005版)》一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對(duì)照藥材溶液20μl與對(duì)照品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)例2-參附注射液的烏頭類生物堿限量檢查樣品實(shí)施例1-4和對(duì)比例烏頭類生物堿限量檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取烏頭堿對(duì)照品5mg，置50ml量瓶中，加0.01mol/L鹽酸溶液使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00ml，分別置分液漏斗中，各依次加入0.01mol/L鹽酸溶液2.00、1.75、1.50、1.25、1.00、0.50、0.00ml，各精密加醋酸-醋酸鈉緩沖液(取0.2mol/L醋酸溶液250ml，用0.2mol/L醋酸鈉溶液調(diào)pH值至3.1)10ml，溴甲酚綠液[取溴甲酚綠50mg，加0.05mol/L氫氧化鈉液1.6ml研磨使溶解，加水至100ml，用氯仿提取3次(每次30ml)，棄去氯仿液]2ml，氯仿10ml，振搖3分鐘，靜置，分取氯仿液，照分光光度度法(《中國藥典(2005版)》一部附錄V)在416nm波長處測定吸收度。以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備精密量取樣品各10ml，置分液漏斗中，加氨試液調(diào)節(jié)pH值10-11，用氯仿提取4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干。殘?jiān)?.01mol/L鹽酸溶液，分次溶液，并轉(zhuǎn)入10ml量瓶中，稀釋至刻度。另精密量取0.2％(g/ml)聚山梨酯80溶液10ml按同法操作，作為空白對(duì)照溶液。
測定法精密量取上述供試品溶液與空白對(duì)照溶液各2ml，分別置分液漏斗中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“各精密加醋酸-醋酸鈉緩沖液10ml”起，依法測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含烏頭堿的重量(μg)，計(jì)算，即得。
各樣品每1ml含烏頭類生物堿以烏頭堿(C24H47NO11)計(jì)，均低于0.1mg。
實(shí)驗(yàn)例3-參附注射液的人參皂苷檢測樣品實(shí)施例1-4和對(duì)比例含量測定對(duì)照品溶液的制備精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品，用甲醇制成每1ml中含人參皂苷Rb13mg的溶液，即得。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對(duì)照品溶液20、30、40、50、60μl，分別置具塞試管中，水浴上揮去溶劑，放冷，各精密加5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml，高氯酸0.8ml，搖勻，置60℃水浴中加熱15分鐘，取出，冰水浴冷卻，加冰醋酸5ml，搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，照分光光度法(《中國藥典(2005版)》一部附錄VB)，在550nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
測定法精密吸取樣品各10ml，置分液漏斗中，用氯仿振搖提取4次，每次10ml，棄去氯仿層，水層再以水飽和的正丁醇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次10ml，棄去水液，正丁醇液置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。另精密量取0.2％(g/ml)聚山梨酯80液10ml，同法處理作空白對(duì)照液。精密吸取上述供試品溶液50μl，置具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法“自水浴上揮去溶劑”起依法測定吸收度，計(jì)算，即得。
各樣品每1ml含人參總皂甙以人參皂Rb1(C54H92O23)計(jì)，均大于0.5mg。
實(shí)驗(yàn)例4-參附注射液的常規(guī)檢驗(yàn)樣品實(shí)施例1-4和對(duì)比例pH值各樣品pH值在4.5-7.0內(nèi)(《中國藥典(2005版)》一部附錄VII G)。
熱原各樣品按熱原檢查法(《中國藥典(2005版)》一部附錄X III A)檢查，劑量按家兔體重1kg注射2ml，均符合規(guī)定。
溶血試驗(yàn)2％紅血球混懸液的配制取家兔心臟血，置有玻璃珠的容器內(nèi)，振搖數(shù)分鐘，除去纖維蛋白元，使成脫纖維血，加生理鹽水，搖勻，離心，傾去上清液，沉淀的紅血球再用生物鹽水洗滌3～4次，至離心后上清液不顯紅色為止，然后按所得紅血球體積用生物鹽稀釋成2％混懸液，當(dāng)天使用，用時(shí)搖勻。
試驗(yàn)方法 取試管5支，編號(hào)，1～3號(hào)管分別加入供試品0.3、0.3、0.3及生理鹽水2.2、2.2、2.2ml，4號(hào)管加入生理鹽水2.5ml(作陰性對(duì)照管)，5號(hào)管加入蒸餾水2.5ml，置電熱恒溫箱內(nèi)，保持36.54±0.5℃的溫度，觀察3小時(shí)，各樣品均無溶血現(xiàn)象。
其他各樣品均符合注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(《中國藥典(2005版)》一部附錄IU)。
實(shí)驗(yàn)例5-實(shí)施例1與對(duì)比例1的制劑配伍對(duì)比實(shí)驗(yàn)?zāi)康膮⒏阶⑸湟号R床以輸液稀釋后靜脈滴注方式給藥?，F(xiàn)以配伍后混合溶液外觀、pH值為指標(biāo)，考察了實(shí)施例1與對(duì)比例1與不同濃度葡萄糖注射液氯化鈉注射液，葡萄糖氯化鈉注射液、鹽酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化鈉注射液、維生素C注射液及碳酸氫鈉注射液配伍后的穩(wěn)定性。
1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器及試藥樣品儀器pHS-2C型酸度計(jì)。
試藥樣品對(duì)比例1、實(shí)施例1、5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、碳酸氫鈉注射液、鹽酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化鈉注射液、維生素C注射液。
1.2方法1.2.1配伍溶液的制備與穩(wěn)定性考察取參附注射液適量，分置于5個(gè)量瓶中，分別以5％葡萄糖注射液、10％葡萄糖注射液、氯化鈉注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、碳酸氫鈉注射液、鹽酸川芎嗪注射液、氧氟沙星氯化鈉注射液、維生素C注射液稀釋制成10％(ml/ml)的配伍溶液，混勻，放置，于0、3、6、9、24h作澄明度(表1)、pH值(表2)檢查。
表1 實(shí)施例1與對(duì)比例1澄明度變化

由表1可以看出，實(shí)施例1的配伍穩(wěn)定性優(yōu)于對(duì)比例1。
表2 實(shí)施例1與對(duì)比例1配伍的pH變化


由表2可以看出，實(shí)施例1與對(duì)比例1的配伍后的pH值沒有顯著差異。
實(shí)驗(yàn)例6-實(shí)施例1與對(duì)比例1的操作時(shí)間對(duì)比發(fā)明人對(duì)實(shí)施例1與對(duì)比例1的操作時(shí)間進(jìn)行了實(shí)際操作的對(duì)比，結(jié)果如表3。
表3 實(shí)施例1與對(duì)比例1的操作時(shí)間對(duì)比

由表2可以看出，實(shí)施例1與對(duì)比例1相比，具有提高人參有效成分的提取率，降低附子毒性成分的過量提取的風(fēng)險(xiǎn)，操作簡便，耗時(shí)短的突出優(yōu)勢。
權(quán)利要求
1.一種參附注射液，其特征在于由人參有效部位和附子有效部位復(fù)配制成注射劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的參附注射液，其特征在于所述的附子有效部位的制備過程為附子粉碎，加4-7倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到2-5，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置水浴保溫，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷或氯仿萃取，揮去溶劑即得附子有效部位。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的參附注射液，其特征在于所述的附子有效部位的制備過程為附子粉碎，加4-5倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-40℃水浴保溫1-2小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集70％和95％乙醇洗脫部分，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇或二氯甲烷萃取3-5次，揮去溶劑即得附子有效部位。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的參附注射液，其特征在于所述的人參有效部位的制備過程為人參粉碎，加4-12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到2-5，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-45℃水浴保溫2-6小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集人參皂苷集中的乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用5-9倍量50-95％乙醇回流提取2-5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取3-7次，揮去溶劑即得人參有效部位。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的參附注射液，其特征在于所述的人參有效部位的制備過程為人參粉碎，加8-12倍量水浸泡24小時(shí)，用鹽酸調(diào)pH到3-4，加入纖維素酶和淀粉酶，攪拌，置30-40℃水浴保溫4-6小時(shí)，濾過，濾液上大孔樹脂，用水洗脫除去糖類，再用3-5倍體積的10％、20％和30％、50％、70％和95％乙醇梯度洗脫，收集人參皂苷集中的乙醇洗脫部分；然后將處理后的人參用6-9倍量70-95％乙醇回流提取3-5次，將乙醇洗脫部分與回流提取部分合并，減壓回收乙醇至無醇味，離心，上清液用乙酸乙酯或正丁醇萃取5-7次，揮去溶劑即得人參有效部位。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的參附注射液，其特征在于所述的參附注射液制備過程為取注射用水，加熱至沸騰，加入附子有效部位和人參有效部位攪拌使溶解，調(diào)PH約3-5，加熱至沸騰，藥液冷藏8-16小時(shí)，濾過，濾液加入活性炭，煮沸，微孔濾膜濾過，濾液加入吐溫-80，攪拌使溶解，加注射用水至定容，灌封于安瓶中，100℃蒸汽滅菌30-60分鐘，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的參附注射液，其特征在于所述的大孔樹脂選自D101型、DA201型、SIP系列、GDX104型、LD605型、LD601型、WLD型、H107型大孔樹脂。
8.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的參附注射液，其特征在于所述的纖維素酶是由葡聚糖內(nèi)切酶、葡聚糖外切酶和1，3-β-葡萄糖苷酶組成的混合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的參附注射液，其特征在于所述的淀粉酶是α淀粉酶。
10.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的參附注射液，其特征在于所述的微孔濾膜孔徑為0.22-0.45μm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種參附注射液及其制備方法，本發(fā)明具有提高人參有效成分的提取率，降低附子毒性成分的過量提取的風(fēng)險(xiǎn)，操作簡便，耗時(shí)短的突出優(yōu)勢；發(fā)明所得的參附注射液的配伍穩(wěn)定性也優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)。本發(fā)明的參附注射液，也可以應(yīng)用到類似配方下的參附粉針、參附凍干粉針、參附輸液等注射劑型，這些劑型的制備和實(shí)施也成為了可能。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1823933SQ200510134600
公開日2006年8月30日 申請日期2005年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月20日
發(fā)明者魏海關(guān) 申請人:北京天新園醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司