專利名稱：葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧和對心臟的保護作用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是涉及葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧和對心臟的保護作用新的藥效作用以及新的 提取工藝。
現(xiàn)有技術(shù) 未見有葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧和對心臟的保護作用的報導(dǎo)，具國際領(lǐng)先水平

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明在于開發(fā)葛根黃酮新的藥效作用，使之造福于人類。抗輻射機理葛根黃酮為 總黃酮，經(jīng)檢測內(nèi)含20多種異黃酮，其中包括葛根素(Puerarin)、大豆苷(Daidzin)和大豆苷元(Daidzein) 等。文獻報道，大豆異黃酮有抗輻射作用[4]，但未見葛根黃酮的抗輻射作用的報道。實驗研究結(jié)果表明， 葛根總黃酮的抗輻射作用顯著，與受試品Pue中眾多異黃酮的綜合作用有關(guān)。電離輻射使膜脂質(zhì)過氧化， 引發(fā)細胞凋亡。因此，清除輻射誘導(dǎo)產(chǎn)生的自由基和抑制脂質(zhì)過氧化，是Pue抗輻射作用的重要機制。此 外，葛根總黃酮具有雌激素樣作用，異黃酮與雌激素受體(ER)有弱的親和力[5]，從而可以通過激活ER 的信號通路發(fā)揮抗輻射作用。因此，葛根黃酮可能通過多個與輻射損傷相關(guān)的靶點起作用。 可采取如下技術(shù)法方案實現(xiàn)目的
1、 葛根黃酮的制備方法，其特征在于:小米一6倍黃豆大小的野葛或粉葛或柴葛，冷浸1一48小時，以 50%—95%乙醇熱提3次，每次2小時，過濾，合并濾液濃縮成浸膏，經(jīng)層析純化，得葛根總黃酮(葛 根黃酮)含葛根黃酮在50%~90%。
2、 葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧作用，采用小鼠口服葛根黃酮全身60COY射線照射引起的急性輻射損 傷，觀察存活率和白細胞總數(shù)等。設(shè)高劑量組、低劑量組；以尼爾雌醇為陽性對照、生理鹽水為空白 對照，記錄。KM種小鼠受60Co全身照射，劑量8Gy，結(jié)果發(fā)現(xiàn)照前連續(xù)兩天灌服葛根黃酮能明顯 提高受照小鼠的存活率，呈劑量依賴性。以高劑量最有效。同時對受照小鼠白細胞計數(shù)、脾臟系數(shù)、 胸腺系數(shù)、白細胞系數(shù)、骨髓DNA、脾結(jié)節(jié)(CFU-S)臟器細胞的恢復(fù)有促進作用，加速造血功能的恢 復(fù)。葛根黃酮對受照小鼠的血液系統(tǒng)、細胞均有明顯的保護作用。因此，葛根黃酮有明顯的抗輻射作 用。
3、 葛根黃酮抗疲勞作用，采用小鼠在低溫下(15土0.rC)游泳致疲勞，外加應(yīng)激實驗連續(xù)灌胃7天， 并設(shè)高劑量組、低級量組；以西洋參為陽性對照、生理鹽水為空白對照，記錄時間。結(jié)果表明，高劑 量組、西洋參組、低劑量組與生理鹽水組之間有顯著性差異(PO.05);西洋參組和低劑量組之間無 顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明，葛根黃酮有抗疲勞的作用。
4、 葛根黃酮耐缺氧作用，增強小鼠腦耐缺氧能力的實驗顯示了葛根黃酮有增加腦供血、腦耐缺氧能力 的作用，使腦耗氧、耗能明顯降低。5天時給藥組與桂利嗪組比較有顯著性差異(P<0.05)。
5、 葛根黃酮對心臟的保護作用葛根黃酮對離體豚鼠心臟冠脈血流量影響采用Langendorff氏法給藥
后記錄冠流量的變化，陽性對照為復(fù)方丹參滴丸，空白對照樂氏液，與空白組對照冠脈流量有顯著性 差異(PO.Ol)。葛根黃酮滴丸對心電圖的影響制造動物心肌缺血模型小鼠口服藥物1周后由于 有抗心肌缺血缺氧的能力，因此使造成心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段保持正常狀態(tài)，而未用 藥組心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段明顯升高。葛根黃酮對心臟有保護作用。
6、葛根黃酮滴丸、膠囊的抗輻射抗疲勞耐缺氧對心腦的保護作用，實驗方法同權(quán)利要求書2 5。其特征 在于葛根黃酮滴丸膠囊有抗輻射、抗疲勞、耐缺氧以及對心腦有保護作用。
具體實施方式
結(jié)合實施方式對本技術(shù)方案的丙容作進一步敘述。
實施例1 葛根黃酮的制備方法，其特征在于:小米一 6倍黃豆大小的野葛或粉葛或柴葛，冷浸1 一
48小時，以50%—95%乙醇熱提3次，每次2小時，過濾，合并濾液濃縮成浸膏，經(jīng)層析純化，得葛根
總黃酮(葛根黃酮)含葛根黃酮在50%~90%。
實施例2 葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧作用，采用小鼠口服葛根黃酮全身60COY射線照射引起 的急性輻射損傷，觀察存活率、白細胞總數(shù)、脾細胞凋亡、Caspase-3酶活性、血清MDA水平檢測。設(shè) 高劑量組、低劑量組；以尼爾雌醇為陽性對照、生理鹽水為空白對照，記錄。KM種小鼠受60Co全身照 射，劑量8Gy，結(jié)果發(fā)現(xiàn)照前連續(xù)兩天灌服葛根黃酮能明顯提高受照小鼠的存活率，呈劑量依賴性。以高 劑量最有效。同時對受照小鼠(4.0 Gy)白細胞計數(shù)的恢復(fù)有促進作用，加速造血功能的恢復(fù)。葛根黃酮 有明顯的抗輻射作用。
實施例3 葛根黃酮抗疲勞作用，采用小鼠在低溫下(15土o.rc)游泳致疲勞，外加應(yīng)激實驗連 續(xù)灌胃7天，并設(shè)高劑量組、低級量組；以西洋參為陽性對照、生理鹽水為空白對照，記錄時間。結(jié)果 表明，高劑量組、西洋參組、低劑量組與生理鹽水組之間有顯著性差異(PO.05);西洋參組和低劑量組 之間無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明，葛根黃酮有抗疲勞的作用。
實施例4葛根黃酮耐缺氧作用，增強小鼠腦耐缺氧能力的實驗顯示了葛根黃酮有增加腦供血、 腦耐缺氧能力的作用，使腦耗氧、耗能明顯降低。5天時給藥組與桂利嗪組比較有顯著性差異(P<0.05)。
實施例5葛根黃酮對心臟的保護作用葛根黃酮對離體豚鼠心臟冠脈血流量影響采用 Langendorff氏法給藥后記錄冠流量的變化，陽性對照為復(fù)方丹參滴丸，空白對照樂氏液，與空白組對照 冠脈流量有顯著性差異(P<0.01)。葛根黃酮滴丸對心電圖的影響制造動物心肌缺血模型小鼠口服 藥物1周后由于有抗心肌缺血缺氧的能力，因此使造成心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段保持正常狀 態(tài)，而未用藥組心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段明顯升高。葛根黃酮對心臟有保護作用。
實施例6 葛根黃酮滴丸、膠囊的抗輻射抗疲勞耐缺氧對心腦的保護作用，實驗方法同權(quán)利要求書 2~5。其特征在于葛根黃酮滴丸膠囊有抗輻射、抗疲勞、耐缺氧以及對心腦有保護作用。
權(quán)利要求
1、葛根黃酮的制備方法，其特征在于小米一6倍黃豆大小的野葛或粉葛或柴葛，冷浸1一48小時，以50％-95％乙醇熱提3次，每次2小時，過濾，合并濾液濃縮成浸膏，經(jīng)層析純化，得葛根總黃酮(葛根黃酮)含葛根黃酮在50％～90％。
2、 葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧作用，采用小鼠口服葛根黃酮全身60COY射線照射引起的急性輻射損 傷，觀察存活率和白細胞總數(shù)。設(shè)高劑量組、低劑量組；以尼爾雌醇為陽性對照、生理鹽水為空白對 照，記錄。KM種小鼠受60Co全身照射，結(jié)果發(fā)現(xiàn)照前連續(xù)兩天灌服葛根黃酮能明顯提高受照小鼠 的存活率，呈劑量依賴性。以高劑量最有效。同時對受照小鼠白細胞計數(shù)受照小鼠白細胞計數(shù)、脾臟 系數(shù)、胸腺系數(shù)、骨髓DNA、脾結(jié)節(jié)(CFU-S)臟器細胞的恢復(fù)有促進作用的恢復(fù)有一定促進作用，加 速造血功能的恢復(fù)。葛根黃酮有明顯的抗輻射作用。
3、 葛根黃酮抗疲勞作用，采用小鼠在低溫下(15土0.rC)游泳致疲勞，外加應(yīng)激實驗連續(xù)灌胃7天， 并設(shè)高劑量組、低級量組；以西洋參為陽性對照、生理鹽水為空白對照，記錄時間。結(jié)果表明，高劑 量組、西洋參組、低劑量組與生理鹽水組之間有顯著性差異(PO.05);西洋參組和低劑量組之間無 顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明，葛根黃酮有抗疲勞的作用。
4、 葛根黃酮耐缺氧作用，增強小鼠腦耐缺氧能力的實驗顯示了葛根黃酮有增加腦供血、腦耐缺氧能力 的作用，使腦耗氧、耗能明顯降低。5天時給藥組與桂利嗪組比較有顯著性差異(P<0.05)。
5、 葛根黃酮對心臟的保護作用葛根黃酮對離體豚鼠心臟冠脈血流量影響采用Langendorff氏法給藥 后記錄冠流量的變化，陽性對照為復(fù)方丹參滴丸，空白對照樂氏液，與空白組對照冠脈流量有顯著性 差異(PO.Ol)。葛根黃酮滴丸對心電圖的影響制造動物心肌缺血模型小鼠口服藥物l周后由于 有抗心肌缺血缺氧的能力，因此使造成心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段保持正常狀態(tài)，而未用 藥組心肌缺血缺氧狀態(tài)的小鼠心電圖ST段明顯升高。葛根黃酮對心臟有保護作用。
6、 葛根黃酮滴丸、膠囊的抗輻射抗疲勞耐缺氧對心腦的保護作用，實驗方法同權(quán)利要求書2 5。其特征 在于葛根黃酮滴丸膠囊有抗輻射、抗疲勞、耐缺氧以及對心腦有保護作用。
全文摘要
本發(fā)明涉及葛根黃酮抗輻射抗疲勞耐缺氧和對心臟的保護作用新的藥效作用以及新的提取工藝。本發(fā)明的目的在于開發(fā)葛根黃酮新的藥效作用。1.葛根黃酮及制劑的制備方法，其特征在于小米-6倍黃豆大小的野葛或粉葛或柴葛，冷浸1-48小時，以50％-95％乙醇熱提或冷提3次，每次2小時，過濾，合并濾液濃縮成浸膏，經(jīng)層析純化，得葛根總黃酮(葛根黃酮)含葛根黃酮在50％～90％。制劑方法略。2.葛根黃酮新的藥效作用為抗輻射、抗疲勞，耐缺氧。葛根黃酮滴丸、膠囊等制劑的抗輻射抗疲勞耐缺氧對心腦的保護作用。
文檔編號A61P9/00GK101099761SQ20051013561
公開日2008年1月9日 申請日期2005年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月31日
發(fā)明者郭建平 申請人:郭建平;呂秋軍;嵇 楊