專利名稱：刺激毛發(fā)生長的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種化合物用于促進(jìn)毛發(fā)生長、緩解脫發(fā)的用途，以及含有該化合物的藥物制劑。
背景技術(shù)：
脫發(fā)(alopecia)、或者禿頭(balding)是目前醫(yī)學(xué)界尚未治愈的常見問題。盡管雄激素與禿頭有關(guān)，但是引起毛發(fā)脫落的生理機(jī)制目前尚不清楚。然而已知在罹患脫發(fā)的個體中毛發(fā)生長的情況是各不相同的。
毛發(fā)并不是持續(xù)生長的，而是大致經(jīng)歷包括生長期、靜止期、和脫落期在內(nèi)的多個活動周期。人的頭皮通常含有100,000-350,000根毛纖維或毛干(shaft)，其在三個不同時間段歷經(jīng)變態(tài)(a)在生長期(毛發(fā)生長初期)，毛囊(即毛根)深度滲入真皮中，同時在合成毛發(fā)主要組分一角蛋白的過程中，毛囊細(xì)胞快速分解和分化。在非禿頭人群中，上述生長期持續(xù)1-5年；(b)過渡期(毛發(fā)生長中期)，其標(biāo)志為有絲分裂停止，持續(xù)2-3周；以及(c)靜止期(毛發(fā)生長終期)，在該期間毛發(fā)保留在頭皮中長達(dá)12周，直到其被由頭皮下方生長出來的新毛囊所替代。
在人類中，上述生長周期不是同步的。在這三個時間段的每一段中，每個個體可能具有上千個毛囊。然而，大多數(shù)毛囊出現(xiàn)在毛發(fā)生長初期。在健康的青年成人中，毛發(fā)生長初期與毛發(fā)生長終期的比例可以高達(dá)9∶1。在患有脫發(fā)的個體中，上述比例降至2∶1。
雄激素性脫發(fā)是由于對循環(huán)雄激素的遺傳敏感性被激活而引起的。它是最常見類型的脫發(fā)。其對男性(50％)和女性(30％)、又主要是高加索起源人群均具有影響。隨著時間的流逝和年齡的增長，在某種程度上過早地，毛干的寬度和長度逐漸發(fā)生變化。終毛逐漸變成又短又稀的無色毫毛。因此，男性在二十來歲、女性在三十至四十歲間開始注意到他們的毛發(fā)變得越來越短。在男性人群中，大部分毛發(fā)脫落出現(xiàn)在頭頂。女性是整個頭皮開始逐漸變得稀疏。如上所述，毛發(fā)生長初期與毛發(fā)生長終期的比例明顯降低，導(dǎo)致毛發(fā)生長減少。
米諾地爾是一種促進(jìn)毛發(fā)生長的鉀通道開放劑。米諾地爾在美國可以商標(biāo)Regaine商購得到。盡管米諾地爾準(zhǔn)確的作用機(jī)理尚不清楚，但是很多文獻(xiàn)都記載了其對毛發(fā)生長周期的影響。米諾地爾促進(jìn)了毛囊的生長，延長了毛囊處于毛發(fā)生長初期的時間(也就是提高了毛發(fā)生長初期與毛發(fā)生長終期的比例)。
盡管米諾地爾促進(jìn)了毛發(fā)生長，但是這種生長的美容效果差異很大。例如，Roenigk報道了83名男性局部施用3％的米諾地爾溶液劑持續(xù)19個月進(jìn)行臨床試驗的結(jié)果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)55％的受試者出現(xiàn)毛發(fā)生長。然而，只有20％的受試者認(rèn)為上述生長與美容相關(guān)(Clin.Res.，33，No.4，914A，1985)。Tosti報道指出，在他的受試者中有18.1％有在美容上可以接受的再生作用(Dermatologica，173，No.3，136-138，1986)。因此，本領(lǐng)域仍然需要這樣的化合物，其在脫發(fā)患者中能夠以更高的比例誘導(dǎo)美容上可接受的毛發(fā)生長。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種促進(jìn)毛發(fā)生長的新方法。所述方法包括向患有脫發(fā)的哺乳動物施用下式的化合物 其鹽、溶劑化物、或者它們的混合物。通常，所述哺乳動物應(yīng)當(dāng)是罹患脫發(fā)、特別是雄激素性脫發(fā)的人。然而，本發(fā)明化合物也可以向通過刺激其毛發(fā)生長而受益的任何哺乳動物給藥。
本發(fā)明另一實施方案涉及一種局部制劑，其中含有有效量的、與皮膚病學(xué)上可接受的載體相混合的上述化合物。這種制劑可以施用至人頭皮持續(xù)足以促進(jìn)毛發(fā)生長的時間。
本發(fā)明再一實施方案涉及一種被包裝用于零售的含有上述化合物的藥物制劑，其同時含有建議消費(fèi)者如何使用該產(chǎn)品刺激毛發(fā)生長的說明。
發(fā)明詳述A)定義除非另有說明，本申請(包括權(quán)利要求書)中通篇使用的下述術(shù)語具有下面的含義。除了用數(shù)字表示之外，復(fù)數(shù)和單數(shù)應(yīng)當(dāng)可以替換對待。
a.“哺乳動物”包括人，靈長類例如短尾猴(stump-tailedmacaques)，伴侶動物例如狗、貓、沙鼠等，以及家畜類例如牛、豬、馬、駱馬、和羊。
b.“促進(jìn)毛發(fā)生長”包括刺激總的毛發(fā)質(zhì)量和/或長度提高。這種提高包括毛干(即毛囊)的長度和/或生長比例提高、毛發(fā)數(shù)目增多、和/或毛發(fā)密度提高。通過延長或激活毛發(fā)生長初期、毛發(fā)周期的生長期、或者通過縮短或延遲毛發(fā)生長中期和毛發(fā)生長終期可以實現(xiàn)部分或全部上述最終結(jié)果?！按龠M(jìn)毛發(fā)生長”還應(yīng)該考慮到包括預(yù)防、停止、減少、延遲和/或逆轉(zhuǎn)毛發(fā)脫落。
c.本文所使用的“脫發(fā)”是指部分或完全禿頂、毛發(fā)脫落、和/或毛發(fā)變疏。
d.“治療或緩解脫發(fā)”是指促進(jìn)已經(jīng)經(jīng)歷過脫發(fā)或者可能將有脫發(fā)危險的哺乳動物的毛發(fā)生長。
e.“可藥用的”是指適合用于哺乳動物。
f.除非另有描述，凡是涉及式I化合物都應(yīng)該被理解為包括該化合物的所有活性形式，包括例如其游離形式，如游離酸或堿形式，還包括全部前藥、多晶型物、水合物、溶劑化物、互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，例如非對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體等、以及所有可藥用鹽、和上述物理形式的混合物。上述所有形式描述在美國專利號5,912,244中，在此將其內(nèi)容引入作為參考。還應(yīng)該理解的是，任何適宜形式的這類化合物的適宜活性代謝物也被包括在本發(fā)明中。
g.“溶劑化物”是指含有一個或多個結(jié)晶溶劑分子的化合物或其鹽的結(jié)晶形式，也就是含有以分子形式合并的溶劑的式I化合物或其鹽。“水合物”是指其中所述溶劑是水的溶劑化物。
h.“多晶型物”是指以至少一種結(jié)晶形式出現(xiàn)的化合物或其鹽，例如式I化合物或其鹽。
i.“可藥用鹽”是指“可藥用酸加成鹽”或“可藥用堿加成鹽”。“鹽”是指“可藥用鹽”或者適合用于工業(yè)方法但不一定在藥學(xué)上可接受的鹽。
j.“可藥用酸加成鹽”是指式I所述堿性化合物或其任意中間體的任何無毒性有機(jī)或無機(jī)酸加成鹽。形成適宜鹽的示例性無機(jī)酸包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、和磷酸以及酸式金屬鹽例如正磷酸一氫鈉和硫酸氫鉀。形成適宜鹽的示例性有機(jī)酸包括單-、二-、和三元羧酸。這類酸的示例是例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水楊酸、2-苯氧基苯甲酸、對甲苯磺酸、以及磺酸如甲磺酸和2-羥基乙磺酸。這類鹽可以以水合或基本上無水的形式存在。通常，這些化合物的酸加成鹽可溶于水和各種親水性有機(jī)溶劑中。
k.“可藥用堿加成鹽”是指式I所示化合物或其任意中間體的無毒性有機(jī)或無機(jī)堿加成鹽。形成適宜鹽的示例性堿包括堿金屬或堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、或氫氧化鋇；氨水、以及脂肪族、脂環(huán)族、或芳族有機(jī)胺例如甲胺、二甲胺、三甲胺、和甲基吡啶。
I.“前藥”是指可迅速體內(nèi)轉(zhuǎn)化(例如通過血液水解)得到上式母體化合物的化合物。詳細(xì)的討論參見T.Higuchi和V.Stella，″Pro-drugs as Novel Delivery Systems，″Vol.14，A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible Carriers in Drug Design，Edward B.Roche著，American Pharmaceutical Association andPergamon Press，1987，在此將這兩篇文獻(xiàn)均引入作為參考。
m.“式I化合物”、“本發(fā)明化合物”、和“化合物”在本申請中可通篇替代使用，因而可當(dāng)作同義詞對待。
B)化合物可用于本發(fā)明中的化合物是(3S，4R)-3，4-二氫-4-(2，3-二氫-2-甲基-3-氧代噠嗪-6-基)氧基-3-羥基-6-(3-羥苯基)磺?；?2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(在下文中稱作“化合物”)。其如下式所示 該化合物及其制備方法描述在美國專利號5,912,244中，在此將其內(nèi)容引入作為參考。‘244專利的實施例7舉例說明了制備該化合物的一種方法。
除了上述式I化合物之外，‘244專利還公開了一類苯并吡喃衍生物。‘244專利指出這些化合物是具有平滑肌松弛活性的鉀通道開放劑。該‘244專利還指出這些化合物可用于治療與平滑肌緊張性或運(yùn)動性改變相關(guān)的疾病。這類癥狀的實例包括慢性阻塞性氣道疾病、哮喘、尿失禁、高血壓、心肌缺血、腦缺血、青光眼、和男性禿發(fā)。
用于評價上述化合物作為鉀通道開放劑的效能的測試描述在該‘244申請的第9欄笫3-41行。所選化合物的相關(guān)數(shù)據(jù)描述在表格第30-31欄。實施例7也就是式I化合物的結(jié)果中沒有列出相關(guān)數(shù)據(jù)。
C)藥理學(xué)和醫(yī)學(xué)用途如上所述，式I化合物是一種鉀通道開放劑。業(yè)已發(fā)現(xiàn)，在與其它鉀通道開放劑相比較時，該化合物在促進(jìn)毛發(fā)生長方面具有出人意料的活性。該化合物可以刺激毛囊的生長，提高毛發(fā)生長初期毛囊的數(shù)量以及延長毛囊處于毛發(fā)生長初期的時間(也就是提高毛發(fā)生長初期與毛發(fā)生長終期的比值)。
該化合物可用于促進(jìn)人的毛發(fā)生長。因此，其可用于緩解脫發(fā)。為了緩解受試者脫發(fā)，需要以足以促進(jìn)毛發(fā)生長的用量施用該化合物。所述用量取決于待治療脫發(fā)的類型、患者脫發(fā)的嚴(yán)重程度、脫發(fā)持續(xù)時間、給藥途徑、以及患者是否存在其它隱性疾病等。如果全身性給藥的話，所述化合物通常在為大約0.1mg/kg/天至大約100mg/kg/天的劑量范圍顯示出活性?？赡苄枰磸?fù)地每天進(jìn)行給藥，當(dāng)然這取決于前面所羅列的情況。
所述化合物可以通過各種途徑給藥?？梢钥诜o藥。也可以非腸道(即皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、或鞘內(nèi))、直腸、或局部給藥。
在典型實施方案中，局部施用所述化合物以促進(jìn)毛發(fā)生長。通?？梢詫⑺龌衔镏苯邮┯弥令^皮，特別是沒有毛發(fā)或者毛發(fā)稀疏的區(qū)域。劑量可以不同，但是作為總的原則，所述化合物可以以0.01-10w/w％的含量存在于皮膚病學(xué)上可接受的載體中，同時這種皮膚病制劑每天向被感染區(qū)域施用1-4次。更為普遍的是，所述化合物可以以1-3w/w％的含量存在，同時每天施用一次或兩次。“皮膚病學(xué)上可接受的”是指可施用至皮膚或毛發(fā)且能實現(xiàn)向作用部位擴(kuò)散藥物的載體。
在另一實施方案中，所述化合物還可以用于尚未經(jīng)歷頭發(fā)脫落、但據(jù)信將有脫發(fā)危險的患者中。這類患者的實例包括那些接受已知可能誘導(dǎo)脫發(fā)的藥物方案進(jìn)行癌癥化療的患者。那些一想起禿頭就精神郁悶的年輕人，特別是有禿頂家族史的年輕人也可以受益于上述預(yù)防性治療。這種預(yù)防性治療包括在術(shù)語“促進(jìn)毛發(fā)生長”范圍之內(nèi)。
脫發(fā)的最常見類型是雄激素性脫發(fā)。這種癥狀通常也被稱作男性型禿發(fā)和女性型禿發(fā)。本發(fā)明化合物可用于促進(jìn)患有這類型脫發(fā)的個體中的毛發(fā)生長。
毛發(fā)生長初期脫發(fā)是由各種化學(xué)藥品或放射(例如用于治療癌癥的化療或放射治療)而引起的脫發(fā)。其通常也被稱作“藥物誘導(dǎo)的”或“放射誘導(dǎo)的”脫發(fā)。本發(fā)明化合物可用于上述癥狀。
局限性脫發(fā)(斑禿)是一種脫發(fā)最初出現(xiàn)在頭皮圓形區(qū)域的自身免疫性疾病。它可以演變成全部頭皮的毛發(fā)掉落(被稱作全部脫發(fā))甚至全部頭皮和身體的毛發(fā)掉落(被稱作全身脫毛)。本發(fā)明化合物可用于上述類型的脫發(fā)。
損傷性脫發(fā)是毛囊受損的結(jié)果。其通常也被稱作“瘢痕性脫發(fā)”。精神性脫發(fā)是由于急性情緒緊張而出現(xiàn)的。通過誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期，本發(fā)明化合物也可以使該類型的脫發(fā)受益。因此，本發(fā)明不應(yīng)當(dāng)被理解為局限于治療雄激素性脫發(fā)。本發(fā)明化合物可用于緩解任何類型的脫發(fā)。
所述化合物可用于促進(jìn)除了人之外的其它哺乳動物的毛發(fā)生長。例如，所述化合物可用于其毛皮(毛發(fā))生長具有經(jīng)濟(jì)效益的農(nóng)場動物(例如羊)。所述化合物還可用于刺激伴侶動物例如狗、貓、沙鼠等的毛發(fā)生長。獲得上述效果所需的劑量應(yīng)當(dāng)滿足上述原則。類似地，考慮到待治療動物的類型，所述化合物可以利用通常用于獸醫(yī)學(xué)應(yīng)用的制劑進(jìn)行給藥。根據(jù)本申請所公開的內(nèi)容，所述化合物用于促進(jìn)毛發(fā)生長的其它應(yīng)用對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見的，因而應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為包含在權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
D)制劑如果需要的話，所述化合物可以不用載體直接給藥。然而，為了方便給藥，通常將其與至少一種藥學(xué)或美容上可接受的載體(在本文中統(tǒng)稱為“載體”)一起配制。本文中使用的術(shù)語“載體”是指一種或多種適合向哺乳動物給藥的可配伍固體或液體填充劑、稀釋劑、溶媒或者包囊物質(zhì)。本文中使用的術(shù)語“可配伍的”是指組合物中的組分能夠與本文所述的化合物按照一定方式彼此進(jìn)行混合，這種混合方式應(yīng)當(dāng)能夠保證在常規(guī)使用情形中不發(fā)生可能實質(zhì)性降低組合物效能的相互作用。載體當(dāng)然也必須具有足夠高的純度和足夠低的毒性，從而適合向待治療的哺乳動物(優(yōu)選人)給藥。載體本身可以具有惰性，也可以具有其自身所擁有的各種藥物和/或化妝品作用。
可以將所述化合物配制成任何適合的(例如口服、局部或非腸道給藥)形式?？梢允褂贸Ｒ?guī)的藥物制劑技術(shù)，例如公開在Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，PA.(1990)中的技術(shù)。
根據(jù)具體的給藥途徑，可以使用本領(lǐng)域熟知的各種載體。這些載體包括固體或液體填充劑、稀釋劑、助水溶劑、表面活性劑和包囊物質(zhì)。可以含有任選的具有藥學(xué)活性和美容活性的物質(zhì)，只要這些物質(zhì)不會實質(zhì)性地影響本發(fā)明方法中所用化合物的活性。與本發(fā)明方法中所用化合物聯(lián)合使用的載體的用量應(yīng)當(dāng)足以保證按照可操作的用量施用單位劑量的化合物。用于配制可用于本發(fā)明方法中的劑型的方法和組合物描述在下述參考文獻(xiàn)中Modern Pharmaceutics，第9-10章，Banker & Rhodes，著(1979)；Lieberman等人，PharmaceuticalDosage FormsTablets(1981)；以及Ansel，Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第2版，(1976)。
所述化合物通常是用于局部給藥。局部組合物中的載體可以有助于使化合物滲透入皮膚中到達(dá)毛囊環(huán)境。這類局部組合物可以為任意形式，包括例如溶液劑、油劑、乳劑、軟膏劑、凝膠劑、洗劑、糊劑、洗發(fā)劑、保留(leave-on)和清洗毛發(fā)調(diào)理劑、乳狀物、清潔劑、增濕劑、噴霧劑、氣霧劑、皮膚貼劑等。
為了制備上述制劑，可以使用本領(lǐng)域已知的用于局部應(yīng)用的各種載體材料，例如水、醇類、蘆薈油(aloe vera gel)、尿囊素、甘油、維生素A和E油、礦物油、丙二醇等。前述參考文獻(xiàn)中公開了很多可用于制備這類局部劑型的賦型劑。
所述化合物還可以以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)進(jìn)行局部給藥，例如小型單層泡囊、單層大泡囊和多層泡囊。脂質(zhì)體可以由各種磷脂(例如膽固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷脂)形成?？捎糜诰植窟f送本發(fā)明方法中所用化合物的可能的制劑中可以使用各種脂質(zhì)體，例如描述在下述文獻(xiàn)中的那些Dowton等人，″Influence of Liposomal Composition onTopical Delivery of Encapsulated Cyclosporin AI.Anin vitroStudy Using Hairless Mouse Skin″，S.T.P.Pharma Sciences，Vol.3，pp.404-407(1993)；Wallach和Philippot，″New Type of LipidVesicleNovasome″，Liposome Technology，Vol.1，pp.141-156(1993)；美國專利號4,911,928；以及美國專利號5,834,014。
用于全身性給藥的載體包括例如糖類、淀粉、纖維素及其衍生物、麥芽糖、凝膠、滑石、硫酸鈣、植物油、合成油、多元醇、海藻酸、磷酸鹽緩沖溶液、乳化劑、等滲鹽水和無熱原水。適合非腸道給藥的載體包括例如丙二醇、油酸乙酯、吡咯烷酮、乙醇和芝麻油。
可以使用各種口服劑型，包括諸如片劑、膠囊劑、顆粒劑、和整裝散劑的固體形式。這些口服形式含有有效量(通常為至少大約5％)的化合物。可以將含有適宜的粘合劑、潤滑劑、稀釋劑、崩解劑、著色劑、調(diào)味劑、流動誘導(dǎo)劑和熔化劑的片劑進(jìn)行壓片、模印片、腸包衣、糖包衣、薄膜包衣、或者多次壓片。液體口服劑型包括含水溶液劑、乳劑、混懸劑、溶液劑和/或由非泡騰顆粒劑重制的混懸劑、以及由泡騰顆粒劑重制的泡騰制劑，其中含有適宜的溶劑、防腐劑、乳化劑、助懸劑、稀釋劑、甜味劑、熔化劑、著色劑和調(diào)味劑。
口服給藥組合物還包括液體溶液劑、乳劑、混懸劑、散劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、糖漿劑等。適合制備上述組合物的載體是本領(lǐng)域眾所周知的。糖漿劑、酏劑、乳劑和混懸劑載體中的典型組分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液體蔗糖、山梨醇和水。對于混懸劑而言，典型的助懸劑包括甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、Avicel RC-591、黃蓍膠和海藻酸鈉；典型的濕潤劑包括卵磷脂和聚山梨酯80；典型的防腐劑包括對羥基苯甲酸甲酯和苯甲酸鈉?？诜后w組合物還可以含有一種或多種諸如上述甜味劑、調(diào)味劑或著色劑的組分。
可用于實現(xiàn)全身性遞送本發(fā)明方法所用化合物的其它組合物包括舌下、口腔和鼻內(nèi)劑型。這類組合物通常含有一種或多種可溶性填充物質(zhì)例如蔗糖、山梨糖醇和甘露醇；粘合劑例如阿拉伯膠、微晶纖維素、羧甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素。還可以含有如上所述的助流劑、潤滑劑、甜味劑、著色劑、抗氧化劑和調(diào)味劑。
可以將上述劑型包裝用于直接向消費(fèi)者零售(即制品或試劑盒形式)。這類制品可以按照向患者建議如何應(yīng)用該產(chǎn)品促進(jìn)毛發(fā)生長的方式貼上標(biāo)簽并進(jìn)行包裝。所述說明應(yīng)當(dāng)包括治療的持續(xù)時間、給藥方案、注意事項等。所述說明可以為圖片、書面說明、或者兩者的聯(lián)合形式。它們可以被印刷在包裝的一側(cè)、或是插頁形式、或者是任意的適合零售市場傳播的其它形式。
如本領(lǐng)域已知的那樣，式I化合物還可以與任意的惰性載體混和，以及用于實驗室測定中，從而測量所述化合物在患者血漿、尿等中的濃度。所述化合物可用作研究工具。
盡管已經(jīng)結(jié)合各種具體實施方案對本發(fā)明進(jìn)行了說明，但是應(yīng)該理解可以對其進(jìn)行進(jìn)一步的變型，本申請意味著覆蓋了根據(jù)本發(fā)明主旨所進(jìn)行的任意變型、用途、或修飾，同時還包括落入本領(lǐng)域已知或常規(guī)實踐范疇的對本發(fā)明內(nèi)容所進(jìn)行的變型。下面的實施例和生物學(xué)數(shù)據(jù)是為了進(jìn)一步對本發(fā)明進(jìn)行示例性說明。這些內(nèi)容不應(yīng)該被理解為以任何方式構(gòu)成對本發(fā)明的限制。
E)實施例A)毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定測量了化合物(在下文中稱作“測試化合物”)將小鼠毛發(fā)生長周期中的靜止期(“毛發(fā)生長終期”)轉(zhuǎn)化為毛發(fā)生長周期中的活動期(“毛發(fā)生長初期”)的潛能。該測定利用了處于毛發(fā)生長終期中40天大C3H/HeN小鼠的毛皮(即毛發(fā))。該期間一般持續(xù)直到大約75天大，此時這些動物中自然出現(xiàn)毛發(fā)生長初期。在該測定中，將40天大的小鼠(大約)的選定區(qū)域刮毛，然后與測試劑、或?qū)φ談┙佑|，測量毛發(fā)生長速率的差異(也就是誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期)。毛發(fā)生長初期的第一標(biāo)志在于皮膚顏色變暗，這是因為毛囊中的黑素細(xì)胞已經(jīng)在獲得有色毛發(fā)的過程中開始合成黑色素。
測試化合物作為研究計劃的一部分，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中對選定的鉀通道開放劑進(jìn)行了評價。所有化合物先前均被作為鉀通道開放劑描述在相關(guān)文獻(xiàn)中，并且它們具有共同的苯并吡喃核(參見美國專利號5,912,244和5,677,324)。測試化合物如下表A所示。
表A
這些化合物因具有鉀通道開放劑的體外活性而被選擇用于毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定。各化合物所具有的活性足以使得本領(lǐng)域技術(shù)人員預(yù)期認(rèn)為，這些化合物在相關(guān)動物模型中具有顯著的抑制活性。
試驗步驟使用7周大的雌性C3H/HeN小鼠(Charles River Laboratories，Raleigh，NC)進(jìn)行研究。在研究開始之前，除去小鼠背部區(qū)域的毛皮。本研究僅選擇具有粉紅色皮膚的小鼠(該顏色為處于毛發(fā)生長終期的可視性標(biāo)志)。
將測試化合物(來自表A)溶解于由丙二醇(30％)和乙醇(70％)組成的溶媒中。將溶于溶媒、或?qū)φ杖苊?30/70的丙二醇/乙醇，除非另有限定)中的測試化合物以20μl/cm2的體積局部施用至各測試組(7-10只小鼠)小鼠中被修剪的背部區(qū)域。藥物的濃度按照下表1-15變化。治療每天一次，持續(xù)5天。
觀察治療區(qū)域，并對毛發(fā)生長的跡象打分。通過記錄每只動物在治療區(qū)域最早出現(xiàn)毛發(fā)生長跡象的那一天來量化毛發(fā)生長的響應(yīng)情況。毛發(fā)生長初期的第一標(biāo)志在于皮膚顏色變暗，這是因為毛囊中的黑素細(xì)胞開始合成黑色素。從治療開始到指定組中50％的小鼠出現(xiàn)毛發(fā)生長之間的天數(shù)被測量為響應(yīng)時間。觀察小鼠長達(dá)35天或者更長時間。
結(jié)果將結(jié)果表示為從治療開始到指定組中50％的小鼠出現(xiàn)毛發(fā)生長之間的天數(shù)。表1-15報道了這些試驗的結(jié)果。
根據(jù)觀察到溶媒對照組中50％的動物處于毛發(fā)生長初期的日子，發(fā)現(xiàn)在由這些試驗獲得的結(jié)果中存在較大偏差。例如在試驗2中，在第25天觀察到溶媒對照組中50％的動物處于毛發(fā)生長初期。在試驗11中，發(fā)現(xiàn)對照組經(jīng)過56天才到達(dá)第50個百分點(diǎn)。
根據(jù)上述偏差，發(fā)明人推斷認(rèn)為大部分試驗都被過早結(jié)束，也就是在大部分試驗在50％的測試動物出現(xiàn)毛發(fā)生長那天之前就被過早結(jié)束了。那些被過早結(jié)束的試驗不應(yīng)當(dāng)按照與能夠達(dá)到第50個百分點(diǎn)的對照組相同的方式評價。
在那些被過早結(jié)束的試驗中，并不能僅僅因為化合物在試驗結(jié)束之前沒有誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期(即毛發(fā)生長)，就推斷認(rèn)為其沒有活性。如果試驗可以進(jìn)行徹底的話，這是可能的，也就是說在對照組達(dá)到第50個百分點(diǎn)的那天，化合物可能會比對照組更早地誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期。
在不論是否過早結(jié)束、使用某測試化合物觀察到毛發(fā)生長初期的試驗中，可以推斷認(rèn)為這樣的化合物是具有活性的。根據(jù)化合物何時誘導(dǎo)50％的動物出現(xiàn)毛發(fā)生長初期，還可以潛在地檢測兩種不同化合物效能之間的差異。因此，被過早結(jié)束的試驗1、3、5、6、8、9、10和15可以根據(jù)上述觀點(diǎn)進(jìn)行評價。
試驗1在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中測試了化合物#1。觀察到下述結(jié)果表1

考慮到上述結(jié)果，為了得出結(jié)論，很快就結(jié)束了本試驗。
試驗2在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和6。觀察到下述結(jié)果
表2

使用化合物#1治療的小鼠比服用化合物#6的小鼠更早出現(xiàn)毛發(fā)生長初期跡象。
試驗3在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和2。觀察到下述結(jié)果表3

本試驗被過早結(jié)束，使得根據(jù)這些化合物的相對效力不能得出任何結(jié)論。
試驗4在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1。觀察到下述結(jié)果表4

盡管本試驗被過早結(jié)束，但是化合物#1在每個測試濃度下都誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
試驗5在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和6。觀察到下述結(jié)果表5

盡管本試驗被過早結(jié)束，但是化合物#6在最高測試濃度(0.3％)下誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
試驗6在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和6。觀察到下述結(jié)果表6

盡管本試驗被過早結(jié)束，但是化合物#1還是誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期，而化合物#6直到第35天還沒有觀察到影響。
試驗7在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和6。觀察到下述結(jié)果
表7

可以將本試驗進(jìn)行徹底?；衔?1在所有測試濃度下都誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期?；衔?6沒有在對照組之前誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期，因此被推斷認(rèn)為在本試驗中沒有活性。
試驗8在本試驗方案中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1、3、4、5、和7。觀察到下述結(jié)果
表8

1溶劑體系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本試驗中使用了兩種不同溶媒。一種試驗使用含有transcutanol(一種滲透促進(jìn)劑)、乙醇和聚乙二醇的溶劑。另一種溶劑是含有丙二醇和乙醇的30∶70混合物。將所有化合物制備在transcutol、乙醇、聚丙二醇溶媒中，然后與使用相同溶媒治療的對照組進(jìn)行對照。
本試驗進(jìn)行足以使transcutol、乙醇、聚丙二醇對照組達(dá)到50％分?jǐn)?shù)的時間。化合物#1在該溶媒的所有測試劑量下均具有活性?；衔?3、4、和5在試驗中沒有活性?；衔?7在本試驗中顯示出活性。
試驗9在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和#7。得到下述結(jié)果表3

本試驗結(jié)束太早，使得根據(jù)結(jié)果不能得出任何結(jié)論。
試驗10在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1和7。得到下述結(jié)果表10

1溶劑體系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本試驗結(jié)束太早，使得根據(jù)結(jié)果不能得出任何結(jié)論。
試驗11在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1。得到下述結(jié)果表11

本試驗進(jìn)行足以使對照組達(dá)到第50個百分點(diǎn)的時間?；衔?1誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
試驗12在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1。得到下述結(jié)果表12

本試驗進(jìn)行足以使對照組達(dá)到第50個百分點(diǎn)的時間。化合物#1在本試驗中沒有誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期。
試驗13在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1。得到下述結(jié)果
表13

本試驗進(jìn)行足以使對照組達(dá)到第50個百分點(diǎn)的時間?；衔?1誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
試驗14在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1。得到下述結(jié)果表14

本試驗進(jìn)行足以使得對照組達(dá)到第50個百分點(diǎn)的時間?；衔?1誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
試驗15在本試驗中，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中評價了化合物#1、6、和7。得到下述結(jié)果
表15

本試驗被過早結(jié)束。盡管被過早結(jié)束，但是化合物#1在兩個測試濃度下仍然都誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期?；衔?7在結(jié)束時沒有顯示出活性?；衔?6當(dāng)以0.3w/v％的濃度施用時，誘導(dǎo)了毛發(fā)生長初期。
概述在15種不同情形下按照每天一次、持續(xù)5天的劑量，在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中對(3S，4R)-3，4-二氫-4-(2，3-二氫-2-甲基-3-氧代噠嗪-6-基)氧基-3-羥基-6-(3-羥苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(即化合物#1)進(jìn)行了測試。其中八組試驗被過早結(jié)束，使得難以評價這些結(jié)果。在與表A中所列的其它鉀通道開放劑相對照時，化合物#1在模型中顯示出最高的相對效力。該結(jié)果是出人意料的。根據(jù)其作為鉀通道開放劑的體內(nèi)活性，沒有理由可以預(yù)期到該化合物在毛發(fā)生長終期轉(zhuǎn)化測定中可能具有如此出色的活性。
權(quán)利要求
1.下式化合物 或者其可藥用鹽、或其溶劑化物在制備用于脫發(fā)的藥物中的用途。
2.權(quán)利要求1的用途，其中所述脫發(fā)選自斑禿、再生期脫發(fā)、自身誘導(dǎo)性毛發(fā)脫落、靜止期脫發(fā)、瘢痕性脫發(fā)和雄激素性脫發(fā)。
3.權(quán)利要求1的用途，其中所述脫發(fā)是雄激素性脫發(fā)。
4.權(quán)利要求1-3中任意一項的用途，其中所述藥物為局部用藥物。
5.下式化合物 或者其可藥用鹽、或其溶劑化物在制備用于促進(jìn)毛發(fā)生長的藥物中的用途。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的用途，其中所述藥物為局部用藥物。
7.一種局部藥物制劑，其中含有與至少一種可藥用局部載體相混合的下式化合物 或者其可藥用鹽、或其溶劑化物。
8.一種制品，其中含有被包裝用于零售的根據(jù)權(quán)利要求7的藥物制劑以及解釋如何使用所述制劑治療脫發(fā)的說明書。
9.一種制品，其中含有被包裝用于零售的根據(jù)權(quán)利要求7的藥物制劑以及解釋如何使用所述制劑促進(jìn)毛發(fā)生長的說明書。
10.下式化合物 或者其可藥用鹽、或其溶劑化物在制備用于雄激素性脫發(fā)的局部用藥物中的用途。
11.下式化合物 或者其可藥用鹽、或其溶劑化物在制備用于誘導(dǎo)毛發(fā)生長初期的局部用藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)(3S，4R)－3，4－二氫－4－(2，3－二氫－2－甲基－3－氧代噠嗪－6－基)氧基－3－羥基－6－(3－羥苯基)磺?；?，2，3－三甲基－2H－苯并[b]吡喃可用于促進(jìn)毛發(fā)生長和緩解脫發(fā)。
文檔編號A61P17/14GK1917878SQ200580004647
公開日2007年2月21日 申請日期2005年2月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月12日
發(fā)明者N·S·多爾蒂, D·A·史密斯 申請人:沃尼爾·朗伯有限責(zé)任公司