專利名稱：用于治療動脈粥樣硬化的持續(xù)釋放的口服嗎西多明組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嗎西多明及其藥學(xué)可接受的鹽，特別是24小時有效的持續(xù)釋放的口服蓋倫制劑(galenical)形式的嗎西多明及其藥學(xué)可接受的鹽，在預(yù)防或治療動脈粥樣硬化中的新的治療用途。
背景技術(shù)：
動脈粥樣硬化是動脈的一種進行性疾病，該疾病妨礙血液對下游器官的供給。于是，出現(xiàn)在冠狀動脈壁上的動脈粥樣斑能夠限制血液對心臟的供給(缺血)，這可能導(dǎo)致心肌梗死，而心肌梗死是工業(yè)化國家中死亡的主要原因。
諸如血膽固醇過多癥或高血壓等危險因素刺激動脈粥樣硬化病變的形成。
在血膽固醇過多癥的情況下，導(dǎo)致這些病變形成的機理可以總結(jié)如下低密度脂蛋白(通常稱為LDL)在內(nèi)膜(動脈壁的最內(nèi)層)累積，它們內(nèi)膜中被氧化成Ox-LDL。
內(nèi)膜中這些被氧化的分子的存在會在內(nèi)皮表面上引起諸如ICAM-1(胞間粘著分子-1)和VCAM-1(血管細胞粘著分子-1)等粘著分子的合成和表達。
這些粘著分子具有固定源自血流的單核細胞的性能，所述單核細胞透過血管壁并轉(zhuǎn)化成巨噬細胞。
這些巨噬細胞吸收Ox-LDL(吞噬作用)，并慢慢地轉(zhuǎn)化為脂飽和的泡沫細胞。而且，這些巨噬細胞釋放出細胞因子，從而引發(fā)有利于招募甚至更多單核細胞的局部炎性反應(yīng)。
平滑肌細胞增殖并轉(zhuǎn)移到內(nèi)膜中，它們在內(nèi)膜中分泌膠原、彈性纖維和蛋白多糖，導(dǎo)致病變的進行性增厚。
泡沫細胞還合成參與動脈粥樣斑中纖維蛋白的沉積的組織因子，使內(nèi)皮病變加重。
作為上述的結(jié)果，粘著分子，特別是ICAM-1，參與了動脈粥樣硬化病變的形成過程。
事實上，ICAM-1在覆蓋人冠狀動脈和頸動脈中的動脈粥樣斑的內(nèi)皮上強烈地過表達。
最近的臨床研究表明，動脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度與可溶性ICAM-1(下文稱為ICAM-1s)的水平有關(guān)。而且，在小鼠動脈粥樣硬化模型中，已發(fā)現(xiàn)ICAM-1s的缺失會產(chǎn)生對抗動脈粥樣硬化的進展的保護性作用。
因此，降低可溶性ICAM-1的水平似乎構(gòu)成恢復(fù)正常內(nèi)皮功能和預(yù)防和/或減緩動脈粥樣硬化的進展的有效措施。
還已知嗎西多明是防治各種形式的心絞痛特別有用的化合物，并通過引起血管平滑肌纖維的舒張和早期的血小板激活的抑制而發(fā)揮作用。
最初市售的嗎西多明主要有—含有2mg和4mg劑量的即釋可分的片劑形式，該片劑形式在治療勞累性心絞痛(angina of effort)中通常每天施用3次，在治療自發(fā)性心絞痛(angina of rest)和嚴(yán)重的勞累性心絞痛中則每天施用4次；和—含有8mg劑量的持續(xù)釋放的片劑形式，該片劑形式用于長期防治心絞痛，每天施用兩次。
最近，嗎西多明已經(jīng)上市(特別是在比利時的名為Coruno的嗎西多明)，該嗎西多明為含有16mg劑量、24小時有效、持續(xù)釋放的固體口服組合物的形式，其用于穩(wěn)定性心絞痛的預(yù)防和長期慢性治療。該組合物的效力和耐受性已經(jīng)在對大量患者的短期和長期研究中得到證明。
在上下文中已經(jīng)令人吃驚且完全沒有意料地發(fā)現(xiàn)，嗎西多明，特別是24小時有效的持續(xù)釋放的固體口服組合物形式的嗎西多明，使得可以恢復(fù)內(nèi)皮功能，并因此可以預(yù)防導(dǎo)致動脈粥樣硬化的生理病理學(xué)過程和/或減緩它們的進展。
更確切地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，每天施用蓋倫制劑形式的嗎西多明，可以明顯降低被認為是動脈粥樣硬化的生物標(biāo)記的循環(huán)的可溶性ICAM-1的量，因此，除了其已知的抗心絞痛性能外，嗎西多明還可以抑制內(nèi)皮上的單核細胞的固定，因而確保內(nèi)皮功能的恢復(fù)，并防止和/或減緩動脈粥樣硬化的進展。

發(fā)明內(nèi)容
于是，根據(jù)第一特征，本發(fā)明涉及嗎西多明或其藥學(xué)可接受的鹽中的一種鹽，特別是24小時有效的持續(xù)釋放的固體口服組合物形式的嗎西多明或其藥學(xué)可接受的鹽中的一種鹽，在制備用于預(yù)防或減緩動脈粥樣硬化發(fā)展的藥物中的用途。
具體實施例方式
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，可以以游離的形式使用嗎西多明，但也可以以藥學(xué)可接受的鹽，特別是例如以鹽酸鹽的形式使用嗎西多明。
在以下描述中，術(shù)語“嗎西多明”將用來表示該分子的游離形式和鹽形式。
根據(jù)本發(fā)明，在動脈粥樣硬化的治療中，嗎西多明一般通過口服施用，特別是以24小時有效的持續(xù)釋放的片劑形式通過口服施用。
這里使用的表述“24小時有效的”是指由所用藥物形式釋放的嗎西多明的量在約24小時的時間，足以產(chǎn)生至少5ng/ml，優(yōu)選至少10ng/ml的治療性血漿濃度。
嗎西多明治療動脈粥樣硬化的效果在長期治療(至少6個月)的方案中尤為重要。這些效果在穩(wěn)定性心絞痛患者中尤為顯著。
根據(jù)本發(fā)明通過施用含有16mg劑量的持續(xù)釋放的片劑已經(jīng)在治療動脈粥樣硬化中獲得了特別有價值的結(jié)果，所述片劑相當(dāng)于在比利時市售的專利醫(yī)藥產(chǎn)品Coruno。
所述蓋倫制劑形式及其制備方法在國際專利申請WO01/62256中已有描述，在此引入該專利申請作為參考。
通常，在所述國際專利申請中描述的蓋倫制劑形式的嗎西多明的主要特征在于，它們具有以下的體外溶解速率[根據(jù)歐洲藥典(EuropeanPharmacopoeia)第三版(或美國藥典(USP)XXIV)所述的方法，以50rpm，在500ml的0.1N HCl介質(zhì)中，在37℃，采用分光光度測定法在286nm或311nm測定]—在1小時后有15％～25％的嗎西多明釋放—在2小時后有20％～35％的嗎西多明釋放—在6小時后有50％～65％的嗎西多明釋放—在12小時后有75％～95％的嗎西多明釋放—在18小時后有大于85％的嗎西多明釋放—在24小時后有大于90％的嗎西多明釋放，在施用所述制劑形式后，在體內(nèi)獲得的嗎西多明的血漿峰出現(xiàn)在2.5～5小時，優(yōu)選3～4小時，并具有25ng/ml～40ng/ml的血漿值。
在上下文中，“在體內(nèi)獲得的嗎西多明的血漿峰”對應(yīng)于在至少10位健康志愿者中所見到的嗎西多明的平均最大濃度。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，可以有利地使用在所述國際專利申請WO01/62256中描述的任何蓋倫制劑形式。
通常，這些蓋倫制劑形式使得可以施用日劑量優(yōu)選為14mg～24mg，特別優(yōu)選為16mg～20mg的嗎西多明。
所述嗎西多明蓋倫制劑形式的24小時釋放曲線的特征在于缺少接近的波峰和非常明顯的波谷，證明該制劑形式特別適合于治療動脈粥樣硬化，保證在受到動脈粥樣硬化影響的部位持續(xù)而穩(wěn)定地釋放嗎西多明。
結(jié)果，沒有明顯且接近的血漿峰的嗎西多明相對緩慢而持續(xù)地釋放，這似乎構(gòu)成了獲得動脈粥樣硬化治療中所期望的效果的重要特征。
在嗎西多明化合物不誘導(dǎo)耐受性的范圍內(nèi)，在這些持續(xù)釋放的蓋倫制劑形式中使用嗎西多明是特別有價值的，而且它的使用安全性已在大量患者中得到證明。
嗎西多明在治療動脈粥樣硬化中的效果的證明1.被研究群體的特征和研究設(shè)計通過對患有穩(wěn)定性心絞痛的172位患者所進行的長期臨床研究證明了嗎西多明在治療動脈粥樣硬化中的有利效果。
本研究包含3個連續(xù)階段—采用安慰劑進行的7天預(yù)研究；—4周雙盲和雙重安慰劑的隨機交叉研究，期間患者交替接受(2×2周)目前在比利時市售的名為Corvatard的含有8mg劑量的嗎西多明類制劑(2個日劑量單位)和目前在比利時市售的名為Coruno的含有16mg劑量的24小時有效的嗎西多明類制劑(1個日劑量單位)；和—12個月研究，期間172名患者接受目前在比利時市售的名為Coruno的含有16mg劑量的嗎西多明類制劑。
所述研究可以圖示如下 在上圖和隨后的描述中，縮略詞“b.i.d.”(代表“一日兩次”)用于表示施用8mg的嗎西多明，兩個日劑量單位；縮略詞“o.a.d.”(代表“一日一次”)用于表示施用16mg的嗎西多明，一個日劑量單位。
據(jù)指出，在研究的第二階段，除了為減輕心絞痛的疼痛癥狀而可以隨意服用的舌下(s.l.)硝酸異山梨酯(ISDN)5mg片劑之外，禁止聯(lián)合使用其它的抗心絞痛藥。
此外，在研究的第三階段，允許聯(lián)合使用β-阻斷劑和/或鈣拮抗劑，但始終禁止使用口服硝基化合物和西地那非。
每天早上口服16mg嗎西多明，每天一次，服用一年。
研究根據(jù)由CPMP提供的用于抗心絞痛藥的臨床研究指南，按照歐共體(European Community)所采用的Good Clinical Practice(步驟4)進行。
在研究的過程中，記錄每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和每周服用舌下ISDN5mg片劑的次數(shù)。
此外，最重要的是，在研究三個階段的每一階段之后測量ICAM-1s的濃度，以第一次測量作為基線。
更確切地，ICAM-1s濃度的測量如下取血樣(5ml)于非肝素化的管中。將這些樣品置于室溫然后離心。分離出血清并立即冷凍于-20℃直至需要分析時。
利用可商購獲得的ELISA試驗用品(R&D Systems Europe)對循環(huán)ICAM-1進行測定。
2.統(tǒng)計分析采用描述統(tǒng)計學(xué)(平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差和％)來表征本研究的患者群體的人口統(tǒng)計學(xué)和其它參數(shù)。
采用用于以時間作為分類標(biāo)準(zhǔn)(classification criterion)的重復(fù)測定的方差分析(當(dāng)它們顯著時，接著進行Bonferonni post-hoc檢驗)來評價在本研究的短期部分(第二階段)和長期部分(第三階段)的過程中，每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和每周舌下硝基片劑的服用量以及循環(huán)ICAMs的水平的變化。
采用具有一個分類標(biāo)準(zhǔn)的Student t檢驗或ANOVA來評價性別、飲酒量、吸煙習(xí)慣(nicotine habit)和藥物聯(lián)合使用對本研究的每一階段之后(采用安慰劑進行的預(yù)研究基線、四周治療后和一年治療后)所測量的ICAMs水平的影響。
采用用于重復(fù)測定的方差分析來評價相同危險因素對ICAM-1s水平的變化的影響。
為了檢測ICAM-1s水平和連續(xù)的人口統(tǒng)計學(xué)變量或危險因素之間的可能關(guān)聯(lián)，計算了Pearson相關(guān)系數(shù)。采用相同的方法來評價ICAM-1s水平變化和危險因素變化之間的相關(guān)性。
此外，測定治療一年后ICAM-1s水平的變化的4個四分位數(shù)(quartile)。采用具有一個分類標(biāo)準(zhǔn)的ANOVA檢驗(顯著時，接著進行經(jīng)校正的Bonferonni post-hoc檢驗(adjusted Bonferonni post-hoc test))來確定在所定義的4類(4個四分位數(shù))中ICAM-1s水平變化對所觀察到(從基線到一年治療結(jié)束)的每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和ISDN片劑的服用量的變化的影響。
3.結(jié)果基線群體的人口統(tǒng)計學(xué)特征(從采用安慰劑進行的預(yù)研究中獲得)如表1所詳述。
表1.參與研究的患者的人口統(tǒng)計學(xué)特征和基線

SD＝標(biāo)準(zhǔn)偏差如表1所示，本研究中的患者年齡為56.2±8.3歲(平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差)，其中男性占多數(shù)(68.0％)，患有穩(wěn)定性心絞痛平均已有4.4±4.5年。
在采用安慰劑進行的第一階段研究中，在積極治療之前，每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和ISDN片劑的服用量分別為3.7±3.8次/周和2.5±3.2片/周。
盡管在本研究的這一階段允許聯(lián)合服用抗心絞痛藥，但是有67.4％的患者沒有服用嗎西多明以外的其它藥物，有29.1％的患者僅服用β-阻斷劑。


圖1顯示了在本研究的第二階段和第三階段每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和舌下硝基片劑服用量的變化。
結(jié)果以平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)的形式表示；用于重復(fù)測量的ANOVA，p＜0.0001；Bonferonni post-hoc檢驗**，與基線的比較，p＜0.0001；￡，4周和一年之間的比較，p＝0.002；NS，4周和一年之間的比較，p＝0.105。
如圖1所示，在研究期間測到每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)和舌下硝基片劑的服用量在總體上的明顯下降(p＜0.0001；ANOVA)。
對于心絞痛發(fā)作的次數(shù)，基線和4周治療之間(p＜0.0001；Bonferonni)以及基線和一年治療之間(p＜0.0001；Bonferonni)的差異是顯著的。4周治療和一年治療之間(p＝0.002；Bonferonni)的差異也是顯著的。
對于舌下硝基片劑的服用量，基線和4周治療之間(p＜0.0001；Bonferonni)以及基線和一年治療之間(p＜0.0001；Bonferonni)的差異是顯著的。
下表2顯示了在本研究的短期部分(第二階段)和長期部分(第三階段)中所測量的ICAM-1s濃度(ng/ml)，特別是測定了性別、飲酒、吸煙習(xí)慣和聯(lián)合藥物對循環(huán)ICAM-1s的水平變化的影響。
表2.在本研究的短期部分和長期部分中ICAM-1s濃度(ng/ml)的變化，以及性別、飲酒、吸煙習(xí)慣和聯(lián)合藥物的影響

*/*＝統(tǒng)計概率相對于基線/相對于4周的結(jié)果；Bonferonni post-hoc檢驗*＝p＜0.05；**＝p＜0.01；***＝p＝0.001；￡＝p＜0.0001；NS＝?jīng)]有顯著性，p＞0.05；NA＝不適用；SD＝標(biāo)準(zhǔn)偏差如表2所示，采用嗎西多明進行的4周治療(16mg，每天一次；或8mg，每天兩次)對循環(huán)ICAM-1s的水平?jīng)]有影響。
然而，與交叉研究之前的基線值相比，每天一次16mg嗎西多明，在12個月之后，ICAM-1s的水平明顯(p＜0.0001)較低(約10％)。
女性中的循環(huán)ICAM-1s的水平傾向于比男性中的要高。然而，根據(jù)ANOVA，與性別的相互作用不顯著(p＝0.914)，表明采用嗎西多明進行的一年治療過程中，ICAM-1s的降低在兩種性別中大體相同。
與非喝酒者相比，喝酒者傾向于顯示出較低的ICAM-1s水平。所有的差異都不顯著，并且在一年治療過程中ICAM-1s水平的變化在這兩組中大體相同(p＝0.149)。
與非吸煙者或曾經(jīng)吸煙者相比，吸煙者傾向于顯示出更高的ICAM-1s水平，但是ICAM-1s水平的變化還是大體相同(p＝0.192)，與吸煙習(xí)慣無關(guān)。
聯(lián)合使用諸如他汀類藥物、β-阻斷劑或兩者的組合等藥物都不影響ICAM-1s水平。所有的差異都不顯著，并且在一年治療期間ICAM-1s水平的變化獨立于所吸收的聯(lián)合藥物類型(p＝0.598)。
在基線上，ICAM-1s的濃度與以下人口統(tǒng)計學(xué)因素或危險因素之間不相關(guān)，所述人口統(tǒng)計學(xué)因素或危險因素例如為年齡(r＝-0.068)、體重(r＝-0.079)、穩(wěn)定性心絞痛的持續(xù)時間(r＝0.042)、每周心絞痛發(fā)作的次數(shù)(r＝0.137)、每周舌下ISDN片劑的服用次數(shù)(r＝0.124)、舒張壓(r＝0.051)、收縮壓(r＝0.097)或心率(r＝0.176)。
根據(jù)在采用嗎西多明進行的一年治療后ICAM-1s水平的變化和人口統(tǒng)計學(xué)因素和危險因素的變化之間的相關(guān)性(數(shù)據(jù)未示出)，也可以得到相同的結(jié)論。
圖2顯示在作為循環(huán)ICAM-1s的水平的變化的函數(shù)的每周ISDN片劑服用次數(shù)在每天一次16mg嗎西多明的一年治療后降低；ICAM-1s的4類變化對應(yīng)于4個分布四分位數(shù)。
該結(jié)果以平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)的形式表示；ANOVA，p＝0.031；*，Bonferonni post-hoc檢驗，p＝0.038。
圖2顯示了在本研究的第三階段ICAM-1s水平的變化的4個四分位數(shù)的分布，該圖表明ICAM-1s水平的變化對舌下ISDN片劑服用次數(shù)變化的影響是顯著的(p＝0.031)。
Bonferonni post-hoc檢驗表明，在本研究的第三階段的開始和結(jié)束(12個月后)之間的ISDN服用量的降低在顯示出ICAM-1s下降更大的組(第4分布四分位數(shù))中更為顯著(p＝0.038)。
由每周心絞痛發(fā)作次數(shù)的變化也測定到相同的趨勢，但ICAM-1s變化在4個四分位數(shù)之間的差異都不顯著(p＝0.072)(數(shù)據(jù)未示出)。
4.討論本研究使得可以評價采用每天一次16mg嗎西多明的短期(4周)治療和長期(一年)治療在患有穩(wěn)定性心絞痛的患者中的效果。
令人吃驚的是，所獲得的結(jié)果顯示，在施用該蓋倫制劑形式一年后，4周治療所測得的顯著的抗心絞痛效果仍然存在，循環(huán)ICAM-1s的水平(內(nèi)皮功能紊亂的促炎標(biāo)記和動脈粥樣硬化的病理學(xué)中的潛在治療靶)顯著下降。
在研究的早期階段，在采用安慰劑進行的7天預(yù)研究期后，ICAM-1s水平與在患有冠心病或穩(wěn)定性心絞痛的患者的其它研究中所獲得的值相當(dāng)。與男性和非吸煙者或曾經(jīng)吸煙者相比，女性和既成吸煙者傾向于具有更高的水平，證實了早期研究的觀察。
采用嗎西多明進行的短期治療(4周)對循環(huán)ICAM-1的水平?jīng)]有造成任何的影響。然而，在患有穩(wěn)定性心絞痛的這些患者中，由于心絞痛發(fā)作的數(shù)次和舌下硝基化合物的服用量的降低，4周抗心絞痛治療的療效是顯著的。
每天一次16mg嗎西多明，12個月后，ICAM-1s的水平顯著降低。這一降低與諸如性別、飲酒、吸煙習(xí)慣或聯(lián)合藥物治療等其它參數(shù)無關(guān)。一年后，嗎西多明的抗心絞痛效果仍然得以維持或者甚至得到提高，并且在顯示ICAM-1水平降低最大的患者中觀察到舌下硝基化合物的服用量降低最為明顯(第4個四分位數(shù))。
總而言之，在采用每天一次16mg嗎西多明進行一年治療后，ICAM-1s標(biāo)記下降，這表明該化合物除了其抗心絞痛的作用以外，還有利于使內(nèi)皮處于更低的活化狀態(tài)，因此使得可以預(yù)防和/或減緩動脈粥樣硬化的進展，尤其是在患有穩(wěn)定性心絞痛的患者中。
權(quán)利要求
1.嗎西多明或其藥學(xué)可接受的鹽中的一種鹽在制備用于預(yù)防或減緩動脈粥樣硬化發(fā)展的藥物中的用途，所述嗎西多明或其藥學(xué)可接受的鹽中的一種鹽為24小時有效的持續(xù)釋放的固體口服組合物形式。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的24小時有效的持續(xù)釋放的固體口服組合物的用途，其特征在于，根據(jù)歐洲藥典第三版或美國藥典XXIV所述的方法，以50rpm，在500ml的0.1N HCl介質(zhì)中，在37℃，采用分光光度測定法在286nm或311nm測定，所述組合物具有以下體外溶解速率在1小時后有15％～25％的嗎西多明釋放；在2小時后有20％～35％的嗎西多明釋放；在6小時后有50％～65％的嗎西多明釋放；在12小時后有75％～95％的嗎西多明釋放；在18小時后有大于85％的嗎西多明釋放；在24小時后有大于90％的嗎西多明釋放；在施用所述制劑形式后，在體內(nèi)獲得的嗎西多明血漿峰出現(xiàn)在2.5～5小時，優(yōu)選3～4小時，并具有25ng/ml～40ng/ml的血漿值。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述固體口服組合物的每劑量單位含有14mg～24mg，優(yōu)選含有16mg的嗎西多明，所述劑量單位設(shè)計用于每天施用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項所述的用途，其特征在于，所述固體口服組合物施用于患有心絞痛的患者。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于治療動脈粥樣硬化的持續(xù)釋放的口服嗎西多明組合物。該發(fā)明可以應(yīng)用于制藥工業(yè)，并涉及嗎西多明或其藥學(xué)上可接受的鹽，特別是24小時有效的持續(xù)釋放的固體口服組合物形式的嗎西多明或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于預(yù)防或控制動脈粥樣硬化的藥物中的用途。
文檔編號A61P9/10GK1938032SQ200580010784
公開日2007年3月28日 申請日期2005年4月1日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月5日
發(fā)明者約瑟夫-米克爾·蓋齊 申請人:斯勒博醫(yī)藥品有限公司