專利名稱：包含bcrp抑制劑和4－(4－甲基哌嗪－1－基甲基)－n－[4－甲基－3－(4－吡啶－3－基 ...的制作方法
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本發(fā)明涉及包(a)BCRP抑制劑和(b)化合物I或其可藥用鹽的用于在治療疾病或延緩疾病的發(fā)展中同時、單獨或連續(xù)使用的組合，其中所說的疾病尤其是癌癥、特別是耐藥的癌癥，特別是對化合物I耐藥的癌癥；所述組合在制備用于延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥的藥物中的用途；以及預(yù)防癌癥、延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥的方法。
本發(fā)明涉及包含(a)BCRP抑制劑、(b)化合物I和(c)P-gp抑制劑或其可藥用鹽的用于在治療疾病或延緩疾病特別是癌癥的發(fā)展中同時、單獨或連續(xù)使用的組合。
化合物I是具有下面的式I結(jié)構(gòu)的4-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基]苯基]-苯甲酰胺 在歐洲授權(quán)專利0564409中公開了化合物I的游離堿、其可用鹽和它的制備?；衔颕的游離堿對應(yīng)于活性部分。
在1999年1月28日公布的PCT專利申請WO99/03854中，描述了化合物I的單甲磺酸加成鹽和其優(yōu)選的晶形如β晶形。
已經(jīng)證實化合物I在表達Bcr/Abl的慢性髓樣白血病和表達c-Kit的胃腸基質(zhì)腫瘤中具有顯著的臨床有效性和安全性?；衔颕或其可藥用鹽是強效和選擇性的酪氨酸激酶抑制劑，在臨床前實驗中已經(jīng)表明其可有效地抑制血小板衍生生長因子(PDGF)誘導(dǎo)的成膠質(zhì)細胞瘤細胞生長。
中樞神經(jīng)系統(tǒng)的原發(fā)性腫瘤，例如多形性成膠質(zhì)細胞瘤和間變型星形細胞瘤，在男性和女性年輕成年人中分別是第三和第四位的與癌癥有關(guān)的死亡原因。此外，原發(fā)性腦瘤是兒童期最常見的實體瘤，并且在兒童中是在白血病之后的第二大癌癥死亡原因。近來，已經(jīng)報道了在成功達到和維持系統(tǒng)緩解之后，在長期口服化合物I的CML患者中出現(xiàn)了中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)腫瘤的復(fù)發(fā)和白血病。不幸的是，由于包含多種排出轉(zhuǎn)運蛋白的高效的血腦屏障，治療CNS腫瘤經(jīng)常受限于抗腫瘤劑在腦內(nèi)的低分布。所述的排出轉(zhuǎn)運蛋白包括P-糖蛋白(MDR1、ABCB1)和乳癌抗性蛋白(ABCG2)，它們可逆著濃度梯度從腦中清除生物異源物質(zhì)，從而限制CNS與這些化合物的接觸。已經(jīng)報道了化合物I有限地穿透入人類和非人類的靈長類的腦脊液。
令人驚奇地，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)施用本文所公開的組合可導(dǎo)致藥物局部濃度的增加。該發(fā)現(xiàn)使得本文所公開的組合比相應(yīng)的單獨抗癌藥更適宜于治療癌癥，例如對抗癌藥耐受的癌癥。
本發(fā)明涉及組合，例如組合的制劑或藥物組合物，其包含BCRP抑制劑和化合物I或其可藥用鹽并任選地包含至少一種可藥用載體，其中，在每種情況下活性成分以游離形式或可藥用鹽形式存在；該組合用于同時、單獨或連續(xù)的使用，特別是用于延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥，特別是腦癌，尤其是神經(jīng)膠質(zhì)癌。該組合優(yōu)選是組合的制劑或藥物組合物。
術(shù)語“用于同時、單獨或連續(xù)使用的組合制劑或藥物組合物”特別表示“由各部分組成的藥盒”，在這個意義上說，可以將各個組成部分，即BCRP抑制劑和化合物I單獨給藥，或使用具有顯著量的各組成部分的不同的固定組合進行給藥，即在不同的時間點或同時給藥?？梢酝瑫r或按照錯開的時間施用由各部分組成的藥盒的各個部分，也就是在不同的時間點、以相同或不同的時間間隔施用由各部分組成的藥盒的任何部分。優(yōu)選對時間間隔進行選擇，從而使得各部分組合使用時在所治療的疾病或病癥中產(chǎn)生的效果大于僅使用組成部分中任何一種所獲得的效果。
本文所用的術(shù)語“延緩發(fā)展”表示與沒有進行治療的患者相比，對患者施用本發(fā)明的組合可導(dǎo)致疾病的較慢發(fā)展或沒有發(fā)展。
在本文中，結(jié)合癌癥一起使用的術(shù)語“藥物耐受的”或“藥物耐受性”涉及例如在構(gòu)成所述藥物的標(biāo)準(zhǔn)治療方案的劑量和使用期限下用藥物難以治療或變得難以治療的癌癥。例如，藥物耐受的癌癥可以是用化合物I難以治療的癌癥，或例如化合物I對于所述的癌癥正變得有效性降低或不再有效，例如由于活性藥物從細胞的外流，化合物I的生物利用度降低了。
“癌癥”表示但不局限于例如液體和實體瘤，例如慢性骨髓性白血病CML、急性成淋巴細胞白血病(ALL)、胃腸道基質(zhì)腫瘤(GIST)、腦癌例如中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤，例如神經(jīng)膠質(zhì)瘤、多形性成膠質(zhì)細胞瘤、間變型星形細胞瘤。
本文所用的術(shù)語“BCRP抑制劑”涉及抑制乳癌抗性蛋白活性的化合物。該術(shù)語包括但不限于潘托拉唑(pantroprazole)、煙曲霉(Aspergillusfumigatus)次生代謝物tryprostatin A、縮寫為FTC的fumitremorgin C和它的衍生物去甲氧基fumitremorgin C類似物、Ko132、Ko134、Ko143、GF120918、喹唑啉基HER族酪氨酸激酶抑制劑CI1033、雌激素例如雌酮和17β-雌二醇，例如雌二醇-17-β-D-葡糖苷酸。
被稱為Elacridar的GF120918可從位于NC的Research Triangle Park的GlaxoWellcome獲得。
潘托拉唑，Pantozol_可購自荷蘭Hoofddorp的Altana Pharma。
本文所用的術(shù)語“P-gp抑制劑”涉及可抑制P-糖蛋白(P-gp)活性的化合物。術(shù)語P-gp抑制劑包括但不限于維拉帕米、在EP 0 296 122的實施例H中分別作為環(huán)孢菌素1.37、1.38和1.39公開的[3’-脫氧-3’-氧代-MeBmt]1-環(huán)孢菌素、[3’-脫氧-3’-氧代-MeBmt]1-[Val]2-環(huán)孢菌素和[3’-脫氧-3’-氧代-MeBmt]1-[Nva]2-環(huán)孢菌素，以及在EP 0 360 760中分別作為實施例52和1(第一個化合物)公開的環(huán)-[Pec-MeVal-Val-MeAsp(β-P-t-Bu)-MeIle-MeIle-Gly-MeVal-Tyr(Me)-L-Lact]和環(huán)-[Pec-MeVal-Val-MeAsp-MeIle-MeIle-Gly-MeVal-Tyr(Me)-D-Lact]。對于本發(fā)明的所有方面，優(yōu)選[3’-脫氧-3’-氧代-MeBmt]1-[Val]2-環(huán)孢菌素A，也被稱為伐司樸達(Valspodar)，在下文中稱之為PSC833，其記載于EP 02 96 122(實施例H)中并被用作P-gp抑制劑。可用WO 93/20833中公開的蓋侖組合物的形式施用PSC833。
也可以水合物的形式或包含用于結(jié)晶的其他溶劑的形式使用活性成分或其可藥用鹽。
通過代碼、通用名或商品名識別的活性劑的結(jié)構(gòu)可得自當(dāng)前版的標(biāo)準(zhǔn)手冊“The Merck Index”或數(shù)據(jù)庫例如Patents International(例如IMSWorld Publication)。此處引用其相應(yīng)內(nèi)容作為參考。
通過確定的實驗?zāi)Ｐ鸵约疤貏e是本文所描述的實驗?zāi)Ｐ?，可以證實BCRP抑制劑和化合物I或其在每種情況下的可藥用鹽的組合對癌癥產(chǎn)生更有效的延緩發(fā)展或治療作用。例如，可基本上按照下文所述的在大鼠中的體內(nèi)實驗方法或臨床研究來證實藥理活性。
此外，本發(fā)明還涉及用于同時、單獨或連續(xù)使用的組合的制劑，其包含BCRP抑制劑和化合物I以及任選的至少一種可藥用載體，其中，在每種情況下活性成分以游離形式或可藥用鹽形式存在。
本發(fā)明的一個目的是提供一種藥物組合物，其包含在治療癌癥、特別是耐受藥物的癌癥中共同治療有效量的(i)BCRP抑制劑和(ii)化合物I或其可藥用鹽，以及至少一種可藥用的載體。在本組合物中，可以以一個組合的單位劑型或以兩個單獨的單位劑型共同地、一個接著一個地或單獨地施用組成部分(i)和(ii)。所述單位劑型也可以是固定的組合。
本發(fā)明的藥物組合物可以以本身已知的方式進行制備，并且是適于通過腸道例如口服或直腸和腸胃外施用的方式給予包括人類在內(nèi)的哺乳動物(溫血動物)的形式，其包含治療有效量的藥理活性化合物(單獨或與一種或多種可藥用的載體組合)，特別適宜于腸或腸胃外的應(yīng)用。
新的藥物組合物含有例如從約10％至約100％，優(yōu)選80％、優(yōu)選從約20％至約60％的活性成分。用作組合療法的可用于腸或腸胃外施用的藥物制劑為例如以單位劑型存在的那些，例如糖包衣片、片劑、膠囊或栓劑，以及安瓿劑。除非另有說明，否則它們以本身已知的方式制備，例如通過常規(guī)的混合、制粒、包糖衣、溶解或凍干的方法。所以，口服使用的藥物制劑可以通過將活性成分與固體載體進行混合而制得，如果需要可將獲得的混合物進行制粒，并加工混合物或顆粒，如果需要或有必要，在加入適宜的賦形劑后可給出片劑或包糖衣的片芯。
應(yīng)該理解，包含在每一劑型的單個劑量中的一種或多種活性組分的單位含量本身不必構(gòu)成有效量，因為必需的有效量可以通過施用多個劑量單位來達到。
特別地，可以同時或連續(xù)地并以任何順序施用本發(fā)明組合的每一種組分的治療有效量，并且可以單獨地或以固定的組合施用各組分?？蓪⒈窘M合的各個組分以分割或單個組合的形式在治療過程中的不同時間單獨施用或者同時施用。此外，術(shù)語施用也包括可在體內(nèi)轉(zhuǎn)換成選擇性藥物的任何藥物的前體藥物的使用。因此，本發(fā)明也應(yīng)被理解為包括所有同時或交替治療的這類方案，并且術(shù)語“施用”也應(yīng)作相應(yīng)的解釋。
本發(fā)明劑型施用的優(yōu)選途徑是腸道或優(yōu)選口服。由于它們易于施用，片劑和膠囊是最有利的口服劑量單位形式，在這樣的情況下，顯然采用固體藥用載體。
在組合療法中采用的每一種活性成分的有效劑量，可依據(jù)采用的特定的藥物組合物、施用的方式或所治療的病癥的嚴(yán)重性而變化。普通的醫(yī)師、臨床醫(yī)師或獸醫(yī)可容易地確定并開出預(yù)防、對抗或停止病癥的發(fā)展所需的有效量。
本發(fā)明還提供了預(yù)防、延緩發(fā)展或治療癌癥、特別是耐抗腫瘤藥例如耐化合物I的癌癥的方法和用于延緩發(fā)展或治療癌癥、特別是耐抗腫瘤藥例如耐化合物I的癌癥的藥物組合物。治療涉及給需要這類治療的患者施用包含藥物載體和治療有效量的本發(fā)明組合中的每一種化合物的藥物組合物。
在本發(fā)明的一個實施方案中，給患有癌癥或本文所提及的其他疾病的哺乳動物特別是人類在腦部局部施用如本文所公開的組合。所述局部施用可以例如通過放置于哺乳動物皮下的小泵來完成，所述小泵連續(xù)地提供所述組合到身體的特定區(qū)域例如腦。所以，本發(fā)明也涉及本文所公開的組合用于制備藥物的用途，其中的藥物適合于局部施用于哺乳動物的腦部的特定區(qū)域。
本發(fā)明尤其涉及包含共同治療有效量的游離或可藥用鹽形式的BCRP抑制劑和化合物I以及用于治療癌癥、特別是耐抗腫瘤藥的癌癥的使用說明書的商業(yè)包裝。
實施例1材料從Nethlands Cancer Institute的藥房獲得潘托拉唑(Pantozol.40mg i.v.，Altana Pharma，Hoofddorp，荷蘭)。Glaxo Wellcome(ResearchTriangle Park，NC)惠贈Elacridar(GF120918)。在該實施例中，“化合物I”指的是化合物I甲磺酸鹽。
通過MDCKII單層的運輸將MDCKII(Madin-Darby犬腎細胞株II)細胞在補充有10％胎牛血清和100單位青霉素/鏈霉素每毫升的Dulbecco改進的Eagle培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細胞在37℃、含有5％CO2的潮濕環(huán)境下生長。在文獻中描述了穩(wěn)定表達人MRP2(ABCC2)或鼠Bcrp1(abcg2)cDNA的極化的MDCKII細胞(Jonker等人，J.Natl.Cancer.Inst.2000，921651-56)。如文獻中的描述進行經(jīng)內(nèi)皮運輸?shù)臏y定(Jonker等人，J.Natl.Cancer.Inst.2000，921651-56)。
動物本研究所用的動物為具有可比較的遺傳背景(FVB)的9至14周的雄性Bcrp1-/-(Bcrp1-/-敲除)、Mdr1a/1b-/-(Mdr1a/1b敲除)和野生型的小鼠。按照符合荷蘭法律的學(xué)會指導(dǎo)原則飼養(yǎng)和處理小鼠。
藥物溶液將化合物I和[14C]化合物I的混合物(約3μCi)用0.9％的NaCl稀釋至1.6mg/ml的最終濃度。將一瓶潘托拉唑(Pantozol_40mg)用0.9％的NaCl稀釋至8mg/ml的最終濃度。將Elacridar以10mg/ml的濃度混懸于羥丙基甲基纖維素(10g/L)/2％吐溫80/H2O(0.5∶1∶98.5[體積/體積/體積]用于口服施用)的混合物中。
藥物施用和分析所有小鼠以12.5mg/kg的劑量在尾靜脈通過靜脈內(nèi)施用接受[14C]化合物I。本研究包括7個不同的研究組1.野生型對照小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；2.Bcrp1敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；3.Mdr1a/1b敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；4.野生型小鼠，在化合物I之前2小時接受口服的elacridar(100mg/kg)(19)；5.野生型小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)；6.Bcrp1敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)；7.Mdr1a/1b敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)；在化合物I施用后5、15、30、60、90和120分鐘從尾靜脈抽取血樣(30μl)。在最后的取樣時間點之后，動物用甲氧氟烷進行麻醉，通過心臟穿刺收集剩余的血液，并在通過頸脫位處死之后取出器官。通過使用肝素化的毛細管進行血液取樣來預(yù)防血液凝固。3000g離心5分鐘之后收集血液樣本的血漿部分。在4％(重量/體積)的BSA中勻化器官。通過液體閃爍計數(shù)法(Tri-Carb.2100 CA液體閃爍分析儀，Canberra Packard，Groningen，荷蘭)確定在血漿樣本和組織勻漿中的放射活性。
藥動學(xué)和統(tǒng)計分析使用軟件包MW\Pharm(MEDI\WARE，3.02版)，通過非隔室方法計算化合物I靜脈注射施用后的藥動學(xué)參數(shù)。使用線性-對數(shù)梯形法計算從0至120分鐘的血漿濃度-時間曲線下面積。通過公式Cl＝劑量/AUC計算清除率。使用雙側(cè)不成對的Student’s t檢驗來評價兩套數(shù)據(jù)之間的差別的統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)表示。當(dāng)p＜0.05時認(rèn)為差別具有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果和討論化合物I通過MDCKII單層的運輸。在MDCKII-Bcrp1和MDCKII親代細胞(15)中研究了通過Bcrp1的化合物I運輸。為了排除P-gp(12)的任何干擾，加入了P-gp抑制劑zosuquidar(5μM)(18)。通過Bcrp1的1和10μM化合物I的有效運輸(每小時約20％的凈主動運輸)，在濃度高于10μM時達到飽和?；衔颕不通過MRP2進行運輸(數(shù)據(jù)未顯示)。
在體外實驗中潘托拉唑和elacridar對Bcrp1介導(dǎo)的化合物I的運輸?shù)挠绊懸惭芯苛伺送欣蚝蚭lacridar對1μM的化合物I在MDCKII轉(zhuǎn)染的細胞中的運輸?shù)挠绊憽Ｔ谠搶嶒炛醒芯苛伺送欣虻挠绊憽榱伺懦齈-gp的任何干擾，加入了P-gp抑制劑zosuquidar(5μM)。潘托拉唑和elacridar抑制了Bcrp1介導(dǎo)的化合物I的運輸(數(shù)據(jù)未顯示)。
Bcrp1對化合物I在小鼠中的清除率的作用將[14C]化合物I(12.5mg/kg)施用給Bcrp1-/-(Bcrp1-/-敲除)、Mdr1a/1b-/-(P-gp敲除)和野生型的小鼠，在化合物I的血漿濃度測定之后通過120分鐘時間段內(nèi)總的放射活性確定清除率。與對照小鼠相比，在Bcrp1敲除小鼠中靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.6倍(p＜0.01)。與對照小鼠相比，在P-gp敲除的小鼠中靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.25倍(p＜0.01)。這些結(jié)果表明，在小鼠靜脈注射的化合物I的清除率中，Bcrp1起著重要的作用，并甚至可能起著比P-gp更顯著的作用。
P-gp和Bcrp1抑制劑對化合物I在小鼠中的清除率的影響對用elacridar或潘托拉唑或僅用溶劑(作為對照)預(yù)處理的小鼠靜脈注射施用[14C]化合物I(12.5mg/kg)。與對照小鼠相比，在用elacridar預(yù)處理的野生型小鼠中靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.5倍(p＜0.05)，與在Bcrp1敲除和P-gp敲除小鼠中的清除率沒有顯著的不同(數(shù)據(jù)未顯示)。與對照小鼠相比，在用潘托拉唑預(yù)處理的小鼠中靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.7倍(p＜0.001)。與對照的野生型小鼠相比，在Bcrp1敲除小鼠中與潘托拉唑共施用的靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.7倍(p＜0.001)，與對照的Bcrp1敲除小鼠沒有顯著的不同。與對照小鼠相比，在用潘托拉唑預(yù)處理的P-gp敲除小鼠中靜脈注射的化合物I的清除率降低了1.7倍(p＜0.001)，并且與對照的P-gp敲除小鼠相比降低了1.4倍(p＜0.001)(數(shù)據(jù)未顯示)。這些結(jié)果提示，將潘托拉唑與化合物I一起施用通過競爭Bcrp1降低了靜脈注射的化合物I的清除率?？傊?，這些數(shù)據(jù)表明共施用P-gp和BCRP抑制劑降低了靜脈注射的化合物I的清除率，與用敲除小鼠獲得的結(jié)果相一致。
Bcrp1對化合物I在小鼠腦部穿透的影響通過測定在靜脈注射施用化合物I后2小時收集的全腦勻漿的放射活性確定化合物I的腦濃度。由于化合物I具有低的CNS分布，從在全腦勻漿中測得的腦濃度中扣除了在腦血管空間中的化合物I的腦濃度(即在t＝2h時的1.4％的血漿濃度)。由于AUC能比施用后2h的血漿濃度更好地反映化合物I在腦的總暴露，通過確定在t＝2h時化合物I的腦濃度相對于血漿AUC(0-2h)來計算化合物I的腦穿透。如圖4所示，與對照小鼠相比，在Bcrp1敲除小鼠中化合物I的腦穿透增加了2.5倍(p＜0.01)，而在P-gp敲除小鼠中則增加了3.6倍(p＜0.01)。這些結(jié)果表明，在血腦屏障中Bcrp1的存在限制了化合物I的腦穿透，但比P-gp的程度要低。
P-gp和Bcrp1抑制劑對化合物I在小鼠腦部的穿透的影響如圖4所示，在野生型小鼠中共施用P-gp和BCRP抑制劑elacridar，增加了化合物I的相對腦部穿透，與對照小鼠相比增加了4.2倍(p＜0.05)，與Bcrp1敲除小鼠相比增加了1.7倍(p＝0.08)，與P-gp敲除小鼠相比增加了1.2倍(p＝0.45)?？紤]到單劑量elacridar對P-gp的抑制約為70-80％(19)，在化合物I的腦部穿透中Bcrp1的作用有可能比在P-gp敲除小鼠中提示的1.2倍的增加更重要。所以，通過在血腦屏障中P-gp和Bcrp1的雙重抑制，elacridar的共施用有效地增加了化合物I的腦部穿透。與對照小鼠相比，在用潘托拉唑處理的野生型小鼠中化合物I的腦部穿透增加了1.8倍(p＜0.05)(圖1)。與對照的野生型小鼠相比，在用潘托拉唑處理的P-gp敲除小鼠中化合物I的腦部穿透增加了4.7倍(p＜0.01)，與對照的P-gp敲除小鼠相比增加了1.3倍(p＜0.05)。所以，當(dāng)不存在P-gp時，通過潘托拉唑?qū)crp1的進一步抑制更能增加化合物I的腦部穿透。與對照小鼠相比，在用潘托拉唑處理的Bcrp1敲除小鼠中化合物I的腦部穿透增加了2.3倍(p＜0.05)，與對照的Bcrp1敲除小鼠相比沒有顯著的差別。這些結(jié)果提示，通過Bcrp1的抑制而不是通過P-gp的抑制，潘托拉唑的施用增加了化合物I的腦部穿透。這與潘托拉唑抑制Bcrp1介導(dǎo)的化合物I的清除的結(jié)果是一致的。總之，我們的結(jié)果顯示除了P-gp之外Bcrp1在化合物I的藥動學(xué)和腦穿透中也起著重要的作用。通過共施用P-gp和/或BCRP抑制劑如elacridar和潘托拉唑可促進化合物I的腦部穿透。結(jié)果提示Bcrp1和P-gp的雙重抑制可能比單獨抑制P-gp更有效地增加化合物I的腦部穿透。在患有復(fù)發(fā)性成膠質(zhì)細胞瘤的患者中進行的化合物I甲磺酸鹽的第一個多中心II期研究的最近報告顯示出令人鼓舞的抗腫瘤活性，BCRP和P-gp抑制劑的共施用可促進化合物I甲磺酸鹽向惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的傳送。所以，口服化合物I結(jié)合Bcrp1和P-gp抑制劑的臨床試驗是有充分理由的。


圖1在小鼠中[14C]化合物I(12.5mg/kg)的腦部穿透在靜脈注射[14C]化合物I之前3分鐘，對照的野生型小鼠(WT)靜脈注射0.9％的NaCl進行處理。Bcrp1敲除(k.o.)和P-gp敲除(k.o.)小鼠靜脈注射0.9％的NaCl(對照)進行預(yù)處理并與對照小鼠比較以確定在化合物I的腦部穿透中Bcrp1相對于P-gp的作用。在靜脈注射[14C]化合物I之前2小時，WT小鼠口服elacridar(GF120918)(100mg/kg)進行處理，并與對照的WT小鼠和對照的Bcrp1敲除小鼠和對照的Mdr1a/1b敲除小鼠進行比較以確定在化合物I的腦部穿透中P-gp和BCRP抑制劑的影響。在靜脈注射[14C]化合物I之前3分鐘，WT小鼠、Bcrp1敲除小鼠和Mdr1a/1b敲除小鼠用靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg，120mg/m2)進行處理，并與對照進行比較以確定質(zhì)子泵抑制劑潘托拉唑在化合物I的腦部穿透中的影響。上述的小鼠各組在圖1中用柱狀圖下方的編號為1至7來表示1.野生型對照小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；2.Bcrp1敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；3.Mdr1a/1b敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的0.9％的NaCl；4.野生型小鼠，在化合物I之前2小時接受口服的elacridar(100mg/kg)(19)；5.野生型小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)；6.Bcrp1敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)；7.Mdr1a/1b敲除小鼠，在化合物I之前3分鐘接受靜脈注射的潘托拉唑(40mg/kg)(15)。Y軸提供化合物I的腦部穿透×10-3h-1。在給藥后2小時收集血漿和全腦組織勻漿并計數(shù)放射活性。以每一個試驗組在t＝2h時的腦濃度對血漿AUC(0-2h)的比值計算的腦部穿透進行作圖(腦部的濃度用腦血管空間，即在t＝2h時的血漿濃度的1.4％進行校正)。結(jié)果以均值±SD(n＝3)表示。
權(quán)利要求
1.用于同時、單獨或連續(xù)使用的組合，其包含BCRP抑制劑和式I化合物并任選地包含至少一種可藥用載體， 其中，在每種情況下活性成分以游離形式或可藥用鹽形式存在。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的組合，其是固定的藥物組合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的組合，其特征在于BCRP抑制劑選自潘托拉唑、tryprostatin A、fumitremorgin C、Ko132、Ko134、Ko143、GF120918、喹唑啉基HER族酪氨酸激酶抑制劑CI1033、雌激素。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的組合，其特征在于BCRP抑制劑是GF120918。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的組合，其特征在于BCRP抑制劑是潘托拉唑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4的任何一項的組合，其用于同時、單獨或連續(xù)地使用以延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥。
7.對患有癌癥的溫血動物進行治療的方法，包括以有效對抗癌癥的共同治療有效量給動物施用下列物質(zhì)的組合(a)選自潘托拉唑、tryprostatin A、fumitremorgin C、Ko132、Ko134、Ko143、GF120918、喹唑啉基HER族酪氨酸激酶抑制劑CI1033和雌激素的BCRP抑制劑和(b)化合物I或其可藥用鹽，其中這些化合物也可以它們的可藥用鹽形式存在。
8.藥物組合物，其包含對抗癌癥治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至5的任何一項的組合和至少一種可藥用的載體。
9.根據(jù)權(quán)利要求6的藥物組合物，其包含對抗藥物耐受癌癥共同治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至5的任何一項的組合，以及至少一種可藥用的載體。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至5的任何一項的組合的用途，用于制備延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥的藥物。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的用途，其特征在于癌癥是藥物耐受的。
12.根據(jù)權(quán)利要求10的用途，其中的癌癥選自CML、ALL、GIST和腦癌。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，其中的腦癌是神經(jīng)膠質(zhì)瘤。
14.根據(jù)權(quán)利要求12或13的用途，其中的藥物適合局部施用于哺乳動物的腦的特定區(qū)域。
15.商業(yè)包裝，其包含作為活性劑的(a)BCRP抑制劑和(b)式I化合物或其可藥用鹽，連同同時、單獨或連續(xù)地使用這些活性劑以延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥的使用說明書。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至6的任何一項的組合，還包含P-gp抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于同時、單獨或連續(xù)使用的，尤其是用于延緩癌癥的發(fā)展或治療癌癥的組合，其包含BCRP抑制劑和式(I)化合物并任選地包含至少一種可藥用載體，其中，在每種情況下活性成分以游離形式或可藥用鹽形式存在。此外，本發(fā)明還涉及包含該組合的藥物組合物。
文檔編號A61K31/506GK1976708SQ200580022017
公開日2007年6月6日 申請日期2005年6月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月1日
發(fā)明者P·布里維德, G·西普里安尼, D·普盧姆, J·H·M·舍倫斯, O·范特林根, P·R·維林格 申請人:荷蘭癌癥研究所