專利名稱：提高5,5－二苯基巴比妥酸的生物利用度和增強其腦遞送的組合物及方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組合物及提高巴比妥酸衍生物的生物利用度和增強將其向哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的遞送的方法。特別地，本發(fā)明涉及給予一種含有5，5-二苯基巴比妥酸鹽的口服劑，以在哺乳動物的血液和腦中產(chǎn)生有效水平的5，5-二苯基巴比妥酸的方法，該鹽選自由鈉鹽、鉀鹽和鋰鹽構(gòu)成的組。
背景技術(shù)：
5，5-二苯基巴比妥酸(DPB)是非鎮(zhèn)靜巴比妥類藥物中的一員，并且是1，3-二甲氧甲基-5，5-二苯基巴比妥酸(DMMDPB)和單甲氧甲基-5，5-二苯基巴比妥酸(MMMDPB)的代謝物。自從DPB的合成在1935年首次報道，5，5-二苯基巴比妥酸(DPB)的醫(yī)療用途就被忽視，部分原因是由于其缺乏傳說的催眠活性。(McElvain et al.“5，5-Diphenylbarbituric Acid”J.Am.Chem.Soc.1935，571301-04)。發(fā)現(xiàn)DPB只有在非常大的劑量時才有效，因此被認(rèn)為沒有藥學(xué)用途。DPB具有下述結(jié)構(gòu)，并以自由酸的形式存在。對于發(fā)明所能了解的范圍，沒有鹽形式的DPB被分離和報道。
5，5-二苯基巴比妥酸1945年，Merritt等人在數(shù)百種篩選的DPB化合物中對其在貓中的電休克發(fā)作閥值的升高進(jìn)行了報道。(Experimentaldetermination of anticonvulsive activity of chemical compounds”Epilepsia，1945，3751-75)。Merritt等人將DPB描述為弱的抗驚厥劑。DPB(自由酸形式)以膠囊形式口服給予，但該作者指出“有些化合物在以溶液給予時有效，但以膠囊給予時完全無效”。1947年，Alles等人發(fā)現(xiàn)，DPB(自由酸形式)在延長在家兔中產(chǎn)生發(fā)作所需電流的持續(xù)時間方面具有活性(“Comparative central depressantactions of some 5-phenyl-5-alkyl-barbituric acids”J.Pharmacol.，1947，89356-367)。
1973年，Raines等人利用最大電休克發(fā)作(MES)試驗重新評價了DPB在小鼠模型中的抗驚厥作用。(“A Comparison of theanticonvulsant，neurotoxic and lethal effects of diphenylbarbituric acid，Phenobarbital and dipheylhydantoin in the mouse”Journal ofPharmacology1973，186315-322)。通過胃管給予的DPB能夠有效地保護小鼠不會出現(xiàn)由電休克或者戊四唑(一種化學(xué)驚厥劑)誘導(dǎo)的發(fā)作。然而，不可能通過胃管給予足以產(chǎn)生神經(jīng)毒性或者致死的DPB，因為弱可溶性的DPB(自由酸形式)不能被充分吸收而達(dá)到這些后者的程度。在后繼的大鼠研究中，Raines等人檢測了DPB的血藥濃度和腦濃度，并且推測DPB(自由酸形式)可能緩慢地從胃腸道被吸收然后慢慢地到達(dá)腦而提供抗發(fā)作活性。(“The effectsof 5，5-diphenyl-barbituric acid on experimental seizures in ratscorrelation between plasma and brain concentrations and anticonvulsantactivity”Epilepsia，1975，16575-581)。
DPB不是一個可行的口服治療劑，很大程度上是由于與其較差的生物利用度相關(guān)的問題。已知DPB的水溶性極弱，在pH為7的水溶液中與苯巴比妥相比僅為1/100倍低的可溶性。(見，Epilepsia，1973，186，315-22)。DPB自由酸已經(jīng)以不可溶形式(即，懸浮液)口服給藥。事實上，Raines等人認(rèn)為“由于有限的水溶性，胃腸吸收不夠有效......”J.Pharmacol.& Exp.Ther.1973，186315。因此，DPB的低的口服吸收歸因于其生物利用度并非最理想，因此作為口服治療劑的DPB具有有限的應(yīng)用。若干研究得出結(jié)論DPB(自由酸)的口服劑型效果不佳?，F(xiàn)有技術(shù)也沒有啟示任何可以提高生物利用度的非鎮(zhèn)靜巴比妥藥物的鹽形式。具體地說，已經(jīng)知道，對于一些巴比妥藥物(例如，戊巴比妥)，其鈉鹽的吸收比相應(yīng)的自由酸更快，但其生物利用度則不是這樣。(The PharmacologicalBasis of Therapeutics2001，p.417，Tenth Ed.)。因為發(fā)現(xiàn)自由酸形式的DPB只是在大劑量時有效，所以還沒有提出DPB在藥物方面的應(yīng)用。
盡管作出大量的努力，在提高DPB的生物利用度方面還沒有成功。這包括對替代的給藥途徑的探索。為此，Raines等人比較了DPB(自由酸形式)的腹膜內(nèi)和口服給藥，并將血漿DPB濃度與抗驚厥活性相關(guān)聯(lián)。(“The effects of 5，5-diphenyl barbituric acid onexperimental seizures in ratscorrelation between plasma and brainconcentrations and anticonvulsant activity”Epilepsia，1975，16，575-81)。當(dāng)與DPB的腹膜內(nèi)給藥相比時，發(fā)現(xiàn)DPB(自由酸形式)的經(jīng)口管飼效力低得多，這與DPB經(jīng)口的吸收很差的結(jié)論很好地吻合。盡管具有較好的生物利用度，但是腹膜內(nèi)給藥并不代表實用的治療途徑。
為了克服與DPB相關(guān)的低吸收問題，Raines等人研究了用于靜脈內(nèi)給藥的DPB鹽水溶液的制劑。(Epilepsia，1985，26158-166)。需要氫氧化鈉來將DPB保持在溶液中，造成溶液約10.5至12的高pH。這種堿性溶液的靜脈內(nèi)給藥或者口服給藥會引起顯著的組織壞死，因此對于受治療者的安全使用并非可行的選擇。除了已知的DPB(自由酸形式)的靜脈內(nèi)和腹膜內(nèi)給藥法，沒有其他已知的DPB劑型能提供在哺乳動物中的良好生物利用度并因此允許DPB的最佳和持續(xù)循環(huán)水平(量)。
已經(jīng)作出多種努力來提供更高水平的DPB，包括給予前藥。對于人類，相比于大鼠或者狗，發(fā)現(xiàn)DMMDPB能被更好地吸收并且具有更長的半衰期(見例如，WO02/07729)。在人身上的出乎意料的高吸收和延長的半衰期產(chǎn)生這樣的可能性，即DMMDPB可以導(dǎo)致產(chǎn)生DPB的持續(xù)源，提供延長時間的抗驚厥效能。為此，已作出使用DMMDPB和MMMDPB作為前藥的許多努力，以試圖提供治療神經(jīng)疾病的DPB的血藥水平。例如，美國專利No.6,756,379披露了DMMDPB和MMMDPB對于治療尤其包括腦缺血、腦創(chuàng)傷、中風(fēng)和癲癇癥的神經(jīng)疾病的應(yīng)用。WO2004/052350描述了DMMDPB和MMMDPB對運動障礙，更特別地對特發(fā)性震顫(家族遺傳性震顫)的應(yīng)用。DMMDPB和MMMDPB作為DPB的前藥的應(yīng)用需要大劑量的前藥(因為差的生物利用度)以提供理想、穩(wěn)定的DPB血藥濃度。當(dāng)口服給予DMMDPB時，觀察到在血清DPB水平的個體間和個體內(nèi)的變化。個體間的變化可以反映差的和變化的生物利用度，或者可歸因于DMMDPB在通過肝酶代謝成MMMDPB和DPB中的差異，其中，該酶的活性可以隨受治療者及其健康狀況而變化。差的生物利用度可能導(dǎo)致個體間和個體內(nèi)的變化。變化的血清水平是不希望的，因為它可能增加突發(fā)性發(fā)作的發(fā)生率和由過量藥物水平產(chǎn)生的副作用。
繼續(xù)需要提供用于提高DPB的生物利用度和增強其腦遞送至哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的組合物和方法。還沒有現(xiàn)有技術(shù)披露以具有提高的生物利用度的DPB鹽形式的口服固體劑型。我們在本文報導(dǎo)了DPB鹽的可靠合成以及口服固體劑型的DPB鹽的生產(chǎn)。令人驚奇地，與其相應(yīng)的自由酸相反，DPB鹽的口服劑型提供高并且持續(xù)的DPB血藥濃度，并增強了DPB的腦遞送，以致它在中樞系統(tǒng)中發(fā)揮其作用。相信提高的DPB生物利用度能夠促進(jìn)其在治療神經(jīng)疾病中的有益作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是，通過以口服劑型給予分離鹽(isolated salt)形式的DPB而提供巴比妥酸衍生物(即，DPB)向哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的增強和有效的遞送。優(yōu)選地，該口服劑型為固體的干劑型。優(yōu)選地，該鹽形式的DPB為選自由鈉鹽、鉀鹽和鋰鹽構(gòu)成的組的鹽。優(yōu)選地，以足以確保在患有神經(jīng)疾病的人中DPB的持續(xù)的治療性血藥濃度的劑量給予DPB鈉鹽。
本發(fā)明的另一目的是提供一種方法，其中利用鹽形式的巴比妥酸衍生物(即DPB)將DPB遞送至中樞神經(jīng)系統(tǒng)(即通過血腦屏障)，從而進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腦脊液。
本發(fā)明的另一目的是提供一種用于治療神經(jīng)疾病的方法，包括給予分離鹽形式的DPB以將DPB遞送至中樞神經(jīng)系統(tǒng)的步驟。優(yōu)選地，該分離鹽為DPB鈉鹽。
本發(fā)明的再一個目的是提供一種組合物，其包含可用于改善DPB的體內(nèi)遞送的分離鹽形式的DPB。特別地，本發(fā)明的口服制劑提供了提高DPB在體內(nèi)的生物利用度和增強其腦遞送的優(yōu)點。
因此，本發(fā)明提供一種用于治療哺乳動物神經(jīng)疾病的方法，包括以足以提供有效血藥水平的5，5-二苯基巴比妥酸的量，將包含5，5-二苯基巴比妥酸的鹽形式的口服劑給予哺乳動物的步驟。優(yōu)選地，該口服制劑含有分離的DPB鈉鹽。
根據(jù)本發(fā)明，該提高的生物利用度的特征在于至少800μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征在于至少1200μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征在于至少1500μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。
根據(jù)本發(fā)明，該提高的生物利用度的特征進(jìn)一步在于至少50μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征進(jìn)一步在于至少75μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征進(jìn)一步在于至少100μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。
根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)與自由酸形式相比較時，證實5，5-二苯基巴比妥酸的鹽形式具有提高的生物利用度。優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征在于5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約1.5倍。
更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約2倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約3倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約3.5倍。
優(yōu)選地，該提高的生物利用度的特征進(jìn)一步在于5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約1.25倍。
優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約1.5倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約2倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約2.5倍。
優(yōu)選地，該鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸是5，5-二苯基巴比妥酸鈉鹽、5，5-二苯基巴比妥酸鉀鹽或5，5-二苯基巴比妥酸鋰鹽。更優(yōu)選地，該鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸是5，5-二苯基巴比妥酸鈉鹽。
優(yōu)選地，該鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸是以足以提供5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約1.5倍的量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約2倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約3倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給藥相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約4倍。
優(yōu)選地，給予的5，5-二苯基巴比妥酸鈉鹽在給藥后24小時提供至少約20μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。更優(yōu)選地，給予的5，5-二苯基巴比妥酸鈉鹽在給藥后36小時提供至少約20μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。更優(yōu)選地，給予的5，5-二苯基巴比妥酸鈉鹽在給藥后48小時提供至少約8μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。
優(yōu)選地，該口服劑型為片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑、顆粒劑、懸浮劑、凝膠劑或者軟凝膠劑。更優(yōu)選地，該口服劑為固體形式，如片劑、丸劑、膠囊劑、或囊片劑。
優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約0.5mg/kg至約100mg/kg的劑量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約2mg/kg至約25mg/kg的劑量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約3mg/kg至約15mg/kg的劑量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約5mg/kg至約10mg/kg的劑量給予的。
優(yōu)選地，對于60kg的受治療者，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約30mg至約3,000mg的量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約60mg至約1500mg的量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約150mg至約900mg的量給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約300mg至約600mg的量給予的。
優(yōu)選地，該神經(jīng)疾病選自由驚厥、癲癇癥、腦缺血、創(chuàng)傷性腦損傷、中風(fēng)、脊髓損傷、焦慮、神經(jīng)緊張(疲勞)和運動障礙構(gòu)成的組。優(yōu)選地，該運動障礙為特發(fā)性震顫、張力障礙或者帕金森氏癥。優(yōu)選地，該運動障礙選自由震顫、張力障礙、舞蹈病、手足徐動癥、瞼痙攣、偏側(cè)投擲癥(hemiballysmus)、肌陣攣、斜頸、和書寫痙攣組成的組。優(yōu)選地，哺乳動物為狗、大鼠、小鼠、靈長類動物、牲畜或者寵物。優(yōu)選地，哺乳動物為狗。更優(yōu)選地，哺乳動物為人。
相應(yīng)地，本發(fā)明提供一種包含鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸和藥學(xué)上可接受的賦形劑的口服劑型，所述鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸是選自由5，5-二苯基巴比妥酸鈉、5，5-二苯基巴比妥酸鉀和5，5-二苯基巴比妥酸鋰組成的組中的至少一種。優(yōu)選地，該鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸是5，5-二苯基巴比妥酸鈉。更優(yōu)選地，該口服劑型選自由片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑、顆粒劑、懸浮劑、凝膠劑和軟凝膠劑組成的組。
相應(yīng)地，本發(fā)明提供一種制備含有鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的藥物組合物的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸與有機溶劑和堿進(jìn)行混合以形成5，5-二苯基巴比妥酸的鹽；b)分離該5，5-二苯基巴比妥酸的鹽。優(yōu)選地，所述堿被混合在乙醇中。優(yōu)選地，所述步驟進(jìn)一步包括將堿溶解在另一種(第二)溶劑中，并且將溶液中的堿加入到在有機溶劑中的5，5-二苯基巴比妥酸的溶液中。
相應(yīng)地，本發(fā)明提供一種制備鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸溶解在一有機溶劑中，該有機溶劑選自由四氫呋喃、2-甲基-四氫呋喃，二乙醚、二異丙基醚、叔丁基甲基醚、二甲氧乙烷、二氧六環(huán)、二乙二醇二甲醚、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、乙醇、n-丙醇、乙二醇、1，3-丁二醇、乙二醇單甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基咪唑啉、二甲亞砜、環(huán)丁砜、乙腈及其混合物構(gòu)成的組；b)將堿加入該有機溶劑中，所述堿是選自由氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰構(gòu)成的組中的至少一種，其被加到溶解的5，5-二苯基巴比妥酸溶液中，以形成鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸；以及c)分離該鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸。
優(yōu)選地，有機溶劑為四氫呋喃。優(yōu)選地，在步驟b)中，堿和溶解的5，5-二苯基巴比妥酸以約1∶1的摩爾比提供。優(yōu)選地，分離步驟是通過過濾進(jìn)行的。優(yōu)選地，本發(fā)明進(jìn)一步包括洗滌該分離鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸。優(yōu)選地，該分離鹽形式是5，5-二苯基巴比妥酸鈉。
該鹽形式的DPB可以是單取代的，具有大約等摩爾比的陰離子和陽離子。其基本上為純的，并且是固態(tài)的。


圖1示出了在給予畢爾格犬單次口服劑量的MMMDPB(30mg/kg，n＝8)之后，MMMDPB和DPB的平均血藥濃度。
圖2示出了在給予畢爾格犬單次口服劑量的NaMMMDPB(30mg/kg，n＝8)之后，MMMDPB和DPB的平均血藥濃度。
圖3示出了在給畢爾格犬單次靜脈注射NaMMMDPB(15mg/kg，T＝15min，n＝8)之后，MMMDPB和DPB的平均血藥濃度。
圖4示出了在給予畢爾格犬單次口服劑量的DPB(75mg/kg，n＝8)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖5示出了在給予畢爾格犬單次口服劑量的NaDPB(75mg/kg，n＝8)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖6示出了在給畢爾格犬單次靜脈注射NaDPB(75mg/kg，T＝30min，n＝4)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖7示出了在給予Sprague-Dawley大鼠單次口服劑量的DPB(150mg/kg，n＝18)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖8示出了在給予Sprague-Dawley大鼠單次口服劑量的NaDPB(150mg/kg，n＝18)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖9示出了在給Sprague-Dawley大鼠單次靜脈注射NaDPB(150mg/kg，T＝30min，n＝18)之后，DPB的平均血藥濃度。
圖10示出了在給予Sprague-Dawley大鼠單次口服劑量的DPB(150mg/kg，n＝18)之后，DPB的平均腦濃度。
圖11示出了在給予Sprague-Dawley大鼠單次口服劑量的NaDPB(150mg/kg，n＝18)之后，DPB的平均腦濃度。
圖12示出了在給Sprague-Dawley大鼠單次靜脈注射NaDPB(150mg/kg，T＝30min，n＝18)之后，DPB的平均腦濃度。
下面提供的詳細(xì)描述及其參考的附圖僅用于描述和圖解說明本發(fā)明的某些實施例和具體實施方式
，而不用于窮舉地描述或示出本發(fā)明的所有可能的具體實施方式
或?qū)嵤├?br> 具體實施例方式
定義“DMMDPB”為1，3-二甲氧基甲基-5，5-二苯基巴比妥酸；“MMMDPB”為單甲氧基甲基-5，5-二苯基巴比妥酸；“DPB”為5，5-二苯基巴比妥酸。用于本發(fā)明目的的藥物的“生物利用度”既被定義為所給予劑型的藥物進(jìn)入系統(tǒng)循環(huán)的相對量，也被定義為藥物出現(xiàn)在血流中的速率。生物利用度很大程度上由AUC反映，AUC由至少三個因素控制i)吸收，其控制生物利用度，然后ii)其組織再分配以及iii)消除(代謝降解，以及腎和其他機制)；“絕對生物利用度”是在血管外給藥后被吸收的藥物相比于所給予劑量大小的程度或分?jǐn)?shù)?！敖^對生物利用度”通過考慮組織的再分配和生物轉(zhuǎn)化(即消除)進(jìn)行評估的，其中生物轉(zhuǎn)化又可以通過藥物的靜脈內(nèi)給予來評估?！疤岣叩纳锢枚取笔侵窪PB的鹽相比于自由酸形式的DPB具有更高的AUC(假定代謝和組織分配相對不變)。優(yōu)選地，提高的生物利用度是指至少800μg·hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-t?！癆UC”是指在血藥濃度-時間曲線下的平均面積；“AUC0-t”是指濃度-時間曲線下的從時間零到最后樣品收集的時間的面積；“AUC0-24”是指濃度-時間曲線下的從時間零到24小時的面積；“AUC0-48”是指濃度-時間曲線下的從時間零到48小時的面積；“Cmax”是指觀測到的最大血藥濃度；“Tmax”(或“tmax”)是指達(dá)到Cmax的時間；“t1/2”是指表觀的半衰期，以(ln2/Kel)計算，其中，Kel是指表觀一級消除速率常數(shù)?！癗aDPB”和“DPB的鈉鹽”在本文中互換使用，是指5，5-二苯基巴比妥酸鈉；“NaMMMDPB”和“MMMDPB的鈉鹽”在本文中互換使用，是指單甲氧基甲基-5，5-二苯基巴比妥酸鈉。除非另有所指，“平均血藥濃度”和“血藥濃度”在文中互換使用；“平均腦濃度”和“腦濃度”在文中互換使用；“BQL”是指低于分析定量限度；“T”是指藥物的靜脈內(nèi)注射時間(分鐘)；“HPLC”是指高效液相色譜；“藥用鹽”或“藥學(xué)上可接受的鹽”是指生理上可耐受的物質(zhì)，其給予哺乳動物時通常不產(chǎn)生過敏或其他不利的反應(yīng)，如胃炎、頭暈等；“哺乳動物”是指高級脊椎動物，包括人和所有其他的以乳腺分泌的乳喂養(yǎng)幼崽，并具有通?；蚨嗷蛏俑采w有毛發(fā)的皮膚的動物；“治療”用來包括緩解、減輕或消除哺乳動物神經(jīng)疾病的至少一種癥狀。
以前試圖遞送最佳血藥濃度(blood level)的DPB的努力遭到失敗，而本發(fā)明卻獲得成功。本發(fā)明解決了主要的與弱溶解的非鎮(zhèn)靜巴比妥藥物(即DPB)相關(guān)的生物利用度問題。本發(fā)明提供一種鹽形式的DPB，其提供足夠的血藥濃度，以產(chǎn)生對神經(jīng)疾病的有臨床意義的改善。
本發(fā)明提供了制備和分離多種鹽形式的DPB的方法。本發(fā)明中的DPB的鹽包括選自由DPB鈉、DPB鉀和DPB鋰構(gòu)成的組的至少一種化合物。DPB的其它藥學(xué)可接受鹽也適于實施本發(fā)明。
本發(fā)明意外地發(fā)現(xiàn)了一種用于向需要治療神經(jīng)疾病的受治療者遞送DPB的新的方法，包括以口服劑型給予分離鹽形式的DPB的步驟；優(yōu)選地，該口服劑型含有5，5-二苯基巴比妥酸鈉。本發(fā)明的組合物和方法比現(xiàn)有技術(shù)具有顯著的臨床優(yōu)勢，因為它提供了DPB的提高的生物利用度和增強的向中樞神經(jīng)系統(tǒng)的遞送。
除了允許不頻繁的給藥(這能大大提高受治療者對藥物的順應(yīng)性)外，本發(fā)明還提供了一種DPB鹽的劑型，其具有提高的生物利用度，這可顯著增大每一劑藥物的可靠性。本發(fā)明還確保對于DPB的治療有效性至關(guān)重要的最佳血清和組織中DPB水平的維持。因此，更高有效的生物利用度的優(yōu)點包括較低的劑量、順應(yīng)性提高而丸數(shù)較少(例如，一天一個)、治療可靠性和可預(yù)測性。
DPB鹽有優(yōu)勢的生物利用度來自增大的吸收速率和程度，其通過在確定時間段(例如8、12、24、36和48小時)內(nèi)的AUC和Cmax來衡量。不用于限制，假定對于DPB(自由酸)和鹽形式的DPB來說，組織再分配和生物轉(zhuǎn)化(例如代謝)以及排泄的過程很可能大致相同，并且鹽形式的優(yōu)勢主要來自快速吸收。例如，較高的Cmax可以導(dǎo)致較高的DPB腦水平。另一方面，有可能在哺乳動物中金屬陽離子(例如鈉)與DPB部分在一起，在此情況下，吸收后的藥理學(xué)現(xiàn)象在更高效的生物利用度中也發(fā)揮作用。
本發(fā)明是出人意料的，根據(jù)觀察結(jié)果，諸如戊巴比妥的其他巴比妥藥物的鹽(盡管改變了吸收速率)并不具有提高生物利用度的這種獨特性能。(見The Pharmacological Basis of Therapeutics2001，p.417，Tenth Ed.)生物利用度研究本發(fā)明驚人地發(fā)現(xiàn)，DPB鹽的劑型比其自由酸對應(yīng)物表現(xiàn)出提高的生物利用度。不希望受理論的限制，可以認(rèn)為提高的生物利用度至少部分可歸因于DPB吸收的增加，最終導(dǎo)致DPB血清水平的增加。提高的藥物生物利用度經(jīng)常由AUC(濃度-時間曲線)的增加來反映。在有些情況下，提高的生物利用度也可以由Cmax的增加來反映AUC和Cmax的計算根據(jù)本發(fā)明，藥物代謝動力學(xué)參數(shù)(簡稱藥動參數(shù))是利用標(biāo)準(zhǔn)非房室方法(如在WinNonlinTM4.0.1中執(zhí)行的)計算得到。對于每個取樣時間和每次處理，對MMMDPB和DPB血藥濃度計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)和變異的百分比系數(shù)(CV(％))。該平均值、SD和CV(％)被用來計算對于每個動物和每個分析對象的AUC0-t(μg·h/Ml)、Cmax(μg/mL)(最大觀察濃度)、Tmax(小時)(達(dá)到最高濃度的時間)以及Kel(消除速率常數(shù))。
對于每一個接受口服給予NaDPB、NaMMMDPB或其自由酸對應(yīng)物的動物測定濃度-時間曲線(AUC)下的面積。利用采用近似積分式的線性梯形規(guī)則來計算AUC0-t。計算每個梯形的面積，所有梯形的面積總和得到曲線下真實面積的估計值。(見Gibaldietal.，Pharmacikinetics.2ndEd.Marcel Dekker，Inc.，1982；Yeh et al.，Acomparison of numerical integrating algorithms by trapezoidal，lagrange，and spline approximations.J.Pharmacokinet Biopharm.679(1978)，其披露內(nèi)容以引用形式并入本文)然后為每一濃度-時間圖確定Cmax和Tmax。使用血藥濃度值(y)對時間(x)的自然對數(shù)log(ln)的回歸分析來計算消除速率常數(shù)(Kel)。
藥物代謝動力學(xué)特征如上所述，本發(fā)明在于這樣的發(fā)現(xiàn)鹽形式的DPB具有改善的可同時實現(xiàn)兩個結(jié)果的藥物動力學(xué)特征。第一，含有鹽形式的DPB的口服劑型在給藥后一段時間內(nèi)(例如48小時內(nèi))維持治療水平的DPB。第二，含有鹽形式DPB的口服劑型導(dǎo)致將DPB最佳遞送至血液和中樞神經(jīng)系統(tǒng)(例如腦)，在那里產(chǎn)生神經(jīng)上的有益效果。
為了獲得這些有益效果，必須將鹽形式的DPB制成DPB的口服劑型，以獲得當(dāng)相比于相應(yīng)自由酸形式的DPB的口服劑型時的特定藥動參數(shù)。鹽形式的DPB、尤其是5，5-二苯基巴比妥酸鈉的口服劑型通過增大DPB的血藥濃度而顯著改善生物利用度以及DPB的血藥濃度-時間分布(例如AUC0-t和Cmax)。除了增大最高DPB血藥濃度(即Cmax)之外，對于鹽形式的DPB的口服劑型來說，增大被吸收的DPB總量(總藥物吸收量稱作AUC或者曲線下的面積)也是重要的。
當(dāng)與自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型相比時，鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸(如5，5-二苯基巴比妥酸鈉)的口服劑型的AUC增大至少約1.5倍。對于鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型，在24小時、36小時和48小時間隔內(nèi)的所有AUC皆表現(xiàn)出增大。優(yōu)選地，該口服劑型包含足量的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約2倍的AUC。更優(yōu)選地，該口服劑型包含足量的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于比自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約3倍的AUC。更優(yōu)選地，該口服劑型包含足量的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約3.5倍的AUC。因此，就吸收程度而言，應(yīng)該認(rèn)為本發(fā)明的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型提高了DPB的生物利用度。
當(dāng)相比于自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型的Cmax時，鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸(如5，5-二苯基巴比妥酸鈉)的口服劑型的Cmax大至少約1.5倍。對于鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型，在24小時、36小時和48小時間隔內(nèi)的所有血藥濃度皆表現(xiàn)出增大。更優(yōu)選地，該口服劑型包含足量鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于比自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約2倍的Cmax。更優(yōu)選地，該口服劑型包含足量的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于比自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約2.5倍的Cmax。更優(yōu)選地，該口服劑型包含足量的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，當(dāng)相比于比自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型時，其提供大至少約3倍的Cmax。因此，就最高血藥濃度而言，應(yīng)該認(rèn)為本發(fā)明的鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的口服劑型產(chǎn)生了提高的DPB生物利用度。
DPB口服生物利用度的提高被認(rèn)為在保持治療有效性方面是至關(guān)重要的，其由最佳AUC來反映。最佳Cmax可進(jìn)一步反映提高的DPB口服生物利用度。DPB充分遞送至中樞神經(jīng)系統(tǒng)被認(rèn)為在其對受治療者患有神經(jīng)疾病的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用中起著重要作用。預(yù)計需要至少約0.5μg/ml的血藥濃度。更優(yōu)選地，預(yù)計最佳血藥濃度可以是約10μg/ml至約125μg/ml的DPB。更優(yōu)選地，預(yù)計最佳血藥濃度可以是約15μg/ml至約75μg/ml的DPB。
在此指出，含有MMMDPB鈉鹽的口服劑型并不增大DPB的生物利用度。相比于口服給予自由酸形式的MMMDPB，在口服給予鈉鹽形式的MMMDPB后，DPB的AUC0-t和Cmax實際上更低(分別為135.10μg·hr/mL對193.18μg·hr/mL和7.28μg/ml對9.39μg/ml)(參見表1)。因此，鈉鹽形式的MMMDPB不能增加DPB的生物利用度。
優(yōu)選地，足量給予鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，以提供比口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所觀察到的大至少約1.5倍的5，5-二苯基巴比妥酸腦濃度。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比口服給予相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所觀察到的大至少約2.0倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比口服給予相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所觀察到的大至少約3倍。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比口服給予相同量的自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所觀察到的大至少約4倍。
本發(fā)明的鹽形式的DPB的口服劑型提供了向中樞神經(jīng)系統(tǒng)(例如腦)的最佳DPB輸送。優(yōu)選地，給予單次口服劑量的5，5-二苯基巴比妥酸鈉可以在給藥后24小時產(chǎn)生至少約20μg/g的DPB腦濃度。優(yōu)選地，給予單次口服劑量的5，5-二苯基巴比妥酸鈉可以在給藥后36小時產(chǎn)生至少約20μg/g的DPB腦濃度。優(yōu)選地，給予單次口服劑量的5，5-二苯基巴比妥酸鈉可以在給藥后48小時產(chǎn)生至少約8μg/g的DPB腦濃度。
基于來自利用最大電休克發(fā)作(MES)試驗的動物研究的累積觀察結(jié)果(參見，例如Epilepsia1975，16575-581)，一般認(rèn)為小于1μg/ml的DPB腦濃度通常是無效的或者效果很弱(大約20％或者更小的保護)；超過10μg/ml的腦濃度通常有效(50％或者更大的保護)；而1-10μg/ml的腦濃度具有變化的作用(在30％和40％之間的保護)。因此，本發(fā)明的鹽形式的DPB的口服劑型能夠充分地向腦提供有效量的DPB，以在其中發(fā)揮其藥物學(xué)作用(諸如抗驚厥和神經(jīng)保護)。
不希望受理論束縛，認(rèn)為DPB的鈉鹽能由腸更快且更完全地更好吸收。還認(rèn)為所得到的較高DPB的血藥濃度導(dǎo)致藥物更快地進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。
一般說來，經(jīng)口給予的藥物由于使用的便利性、成本節(jié)約和受治療者的順應(yīng)性的緣故是優(yōu)選的。然而，對于很多疏水性藥物來說，由于不能吸收，所以經(jīng)口攝取常常無法形成有效的血藥濃度。此外，當(dāng)從胃腸道吸收的藥物在進(jìn)入大循環(huán)之前就被肝臟大量代謝時，這種給藥途徑就會存在問題。我們意外地發(fā)現(xiàn)，鹽形式的DPB(即5，5-二苯基巴比妥酸鈉)更好地獲得DPB的血藥濃度，以便遞送最佳血藥濃度的DPB。利用口服給予DPB鈉鹽后增大的血藥濃度相當(dāng)于靜脈給藥的血藥濃度。然而，藥物注射有它的不足。需要受過訓(xùn)練的人員。給藥的速度至關(guān)重要，并且需要仔細(xì)調(diào)整和監(jiān)控。必須嚴(yán)格防止感染，注射時會伴隨疼痛，而且通常比口服藥更昂貴和更不安全。
對于DPB以及所有其他被測試的非鎮(zhèn)靜巴比妥藥物，觀察到在雌性大鼠中的藥動參數(shù)AUC0-t和Cmax比雄性大鼠中的大(見表3和圖5)。我們觀察到，鹽形式DPB的給予減小了雌性和雄性大鼠間的血藥濃度的差別。該觀察結(jié)果是出人意料和令人驚訝的。據(jù)發(fā)明人目前所知，還沒有報導(dǎo)涉及可以減小在雌、雄性之間血清巴比妥藥物的差別的巴比妥鹽，更不用說非鎮(zhèn)靜巴比妥藥物。不希望受理論束縛，該意外發(fā)現(xiàn)與鹽形式的DPB能導(dǎo)致更好的DPB吸收，并因此減小兩性之間的差別的假設(shè)相一致。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明提供向包括腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)遞送巴比妥酸衍生物(即DPB)的方法。在哺乳動物中，腦是通過血腦屏障保持其環(huán)境不變的。血腦屏障將腦與血液循環(huán)分開并涉及腦體內(nèi)平衡。血腦屏障和血-腦脊液屏障常常阻礙或者減緩藥物進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。血腦屏障由各種細(xì)胞型(如內(nèi)皮細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、血管周圍巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞)構(gòu)成。大腦細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞形成血腦屏障的形態(tài)和功能基礎(chǔ)。大量的腦和脊髓被稱為腦脊髓液的特別分泌的清澈液體包圍。藥物在進(jìn)入腦脊髓液(在這里它們可以自由擴散進(jìn)入腦組織中)之前需要移動穿過血腦屏障。諸如巴比妥酸衍生物的藥物進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)要受血腦屏障的限制。我們出人意料地發(fā)現(xiàn)，口服給予鈉鹽形式的DPB提高了生物利用度，并使DPB能夠容易地進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，如通過腦的外觀所證實的。認(rèn)為更高速率和更高程度的DPB向中樞神經(jīng)系統(tǒng)的遞送提供了通過這一類非鎮(zhèn)靜巴比妥衍生物對神經(jīng)疾病的快速且有效的治療。
本發(fā)明旨在提供治療哺乳動物中神經(jīng)疾病的方法。為了本發(fā)明的目的，所述哺乳動物包括嚙齒動物(如大鼠)，狗，人等。優(yōu)選地，哺乳動物是人。更具體地，本發(fā)明通過利用有效量DPB來提供提高的生物利用度而提供治療受治療者的神經(jīng)缺陷的方法。根據(jù)本發(fā)明，“受治療者”一詞包括任何需要用DPB治療的哺乳動物，特別是患有神經(jīng)疾病的人類患者。
為了本發(fā)明的目的，神經(jīng)疾病包括但不限于驚厥、癲癇發(fā)作、癲癇癥、腦缺血、創(chuàng)傷性腦損傷、中風(fēng)、脊髓損傷、焦慮、神經(jīng)緊張和運動障礙。運動障礙包括種類廣泛的疾病狀態(tài)和生理疾病。非限制性的例子包括各種運動障礙，如震顫、張力障礙、舞蹈病、手足徐動癥、瞼痙攣、偏側(cè)投擲癥、肌陣攣、以及病灶性張力障礙如書寫痙攣和斜頸。這些異常的非本意的運動可能在速率、頻率、周期性和進(jìn)展上有所不同。這樣的運動有時可以在疊加(overlapping)疾病中觀察到，如帕金森氏?。惶匕l(fā)性震顫，又名良性震顫或者家族性震顫；抽動性疾病，例如圖雷特(Tourette)綜合征；陣發(fā)性肌張力障礙(包括書寫痙攣)，進(jìn)行性核上性麻痹和威爾遜(Wilson)癥。特發(fā)性震顫是最常見形式的震顫之一，并且是所有運動障礙中最常見的，它影響大約1-22％的老年人口。帕金森氏病進(jìn)行性障礙，在50歲以上人群中患病率為1-2％。優(yōu)選地，該神經(jīng)疾病為腦缺血、癲癇癥、特發(fā)性震顫或者帕金森癥。
在本發(fā)明的組合物中，鹽形式的DPB或者其藥學(xué)可接受鹽的劑量依幾種因素，包括但不限于年齡、體重和患者物種、受治療者的總體健康、在神經(jīng)受損中的癥狀的嚴(yán)重性、組合物是否是單獨給予還是與其他藥劑聯(lián)合給予、副作用的發(fā)生率等等而變化。
盡管可以單獨給予鹽形式的DPB，但是優(yōu)選以藥物組合物給予。優(yōu)選地，本發(fā)明的藥物組合物包括至少一種DPB的鈉鹽(如上所述)以及它的一種或多種可接受的載體和可選的其他治療劑。
上述方法可以通過與藥物組合物中其他活性成分相聯(lián)合地給予該化合物本身(例如鹽形式的DPB)而實施。適用于本發(fā)明的其他治療劑是通過相同或其他機制對預(yù)期目的有效的任何相容的藥物，或者是對本發(fā)明這些藥劑例如其他巴比妥衍生物，特別是MMMDPB、DMMDPB或其他非鎮(zhèn)靜的巴比妥藥物提供補充效果的藥物。在聯(lián)合療法中使用的化合物可以同時地給予(或者以分開制劑或者以組合制劑)，或者在不同于本發(fā)明化合物的時間給予，例如按先后順序，以達(dá)到聯(lián)合的效果。給藥的量和策略由從業(yè)者調(diào)節(jié)，優(yōu)選一開始降低其標(biāo)準(zhǔn)劑量，然后以滴定法測定上調(diào)劑量，直到獲得最佳結(jié)果。本發(fā)明的治療方法可以與其他療法聯(lián)合使用，對此從業(yè)者不需要過度試驗就可確定。
包括DPB的鈉鹽、鉀鹽和鋰鹽的藥物組合物本發(fā)明涵蓋利用鹽形式的DPB的藥物組合物、藥物劑型、藥盒以及治療神經(jīng)疾病的方法。本發(fā)明的藥物組合物包含鹽形式的DPB和藥用賦形劑。優(yōu)選地，該藥物組合物包括DPB的分離鹽。優(yōu)選地，該鹽形式為鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽等。更優(yōu)選地，該鹽形式為DPB的鈉鹽形式。
本發(fā)明的藥物組合物可以以干的口服制劑形式經(jīng)口給予。根據(jù)本發(fā)明，該鹽形式的DPB可被制成多種用于治療用途，尤其是治療神經(jīng)疾病的藥物組合物和劑型。本發(fā)明的藥物組合物可以以片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑、顆粒劑、懸浮劑、凝膠劑等經(jīng)口給予。口服組合物可以包括常用載體、賦形劑和稀釋劑。本發(fā)明藥物組合物的口服劑型可以用本領(lǐng)域已知技術(shù)制備，并含有治療上有效量的分離鹽形式的DPB。對于本發(fā)明制劑的治療有效的口服劑量根據(jù)從業(yè)醫(yī)生的判斷通過標(biāo)準(zhǔn)臨床技術(shù)來確定。例如，除醫(yī)學(xué)參考書和藥物學(xué)文獻(xiàn)提供的信息外，可以用熟知的體外或者體內(nèi)化驗來幫助確定最佳劑量。
本發(fā)明的藥物組合物可以單獨使用，或者在適當(dāng)情況下，與其他藥物活性化合物結(jié)合使用。例如，可以與其他的鎮(zhèn)靜性巴比妥藥物結(jié)合使用。
本發(fā)明的藥物組合物可以含有一種或多種藥用賦形劑。賦形劑出于多種目的被加入到組合物中。該組合物可以方便地以單位劑量形式提供，并且由本領(lǐng)域已知的方法制備。這樣的方法包括將活性成分與載體相組合的步驟，其中載體本身可以包括一種或多種輔助成分。一般地，該劑型的制備是通過均勻而密切地使活性成分與液體載體、或者細(xì)分固體載體或者二者的結(jié)合相混合，然后必要時成形該產(chǎn)物。可以使用各種單位劑量和多劑量容器，例如密封的安瓿和針劑藥瓶，這在本領(lǐng)域是熟知的(見Remington’s PharmaceuticalSciences，19th Edition，Alfonso R.Gennaro ed.，Mack PublishingCompany，Easton，Pa.，Eighteenth edition(1995)，其披露內(nèi)容以引用形式并入)。
優(yōu)選地，該藥物組合物是干的口服劑型。優(yōu)選地，該藥物組合物是固體劑型。優(yōu)選地，該藥物組合物是選自由片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑和顆粒劑構(gòu)成的組的口服劑型。干的劑型可以包括藥學(xué)可接受的添加劑，如賦形劑、載體、稀釋劑、穩(wěn)定劑、增塑劑、粘結(jié)劑、助流劑、崩解劑、填充劑、潤滑劑、塑化劑，著色劑、成膜劑、增味劑、防腐劑、給藥載體(dosing vehicle)以及前述中的任意結(jié)合。
本發(fā)明的藥物組合物可以以單位劑量形式提供，其中每一劑量單位(例如片或膠囊)含有預(yù)定量的單一的或與其他藥物學(xué)活性劑相結(jié)合的藥物。“單位劑量形式”或“單位劑型”是指對人和動物受治者適合作為單次劑量的物理上分開的單位，每一單位含有預(yù)定量的單一、或與其他藥物學(xué)活性劑聯(lián)合的本發(fā)明組合物，以足以產(chǎn)生希望作用的量計算，與藥用賦形劑(例如鹽水)相結(jié)合。本發(fā)明的新的單位劑型的規(guī)格取決于要達(dá)到的具體效果和藥物在特定宿主體內(nèi)的具體藥物代謝動力學(xué)參數(shù)。
片劑和丸劑可以另外地用腸溶衣和其他控釋涂層(緩釋涂層)制備，只要其提供類似的藥動特征即可。該涂層(膜)可以用藥學(xué)可接受染料著色。涂層液(coating liquid)中的染料和其他賦形劑的量可以變化，并且不影響片劑或者丸劑。涂層液通常包含成膜聚合物，如在丙烯酸聚合物或者聚合物混合物中的羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、纖維素酯或醚。該涂層溶液通常是水溶液，其還可以包含丙二醇、山梨聚糖單油酸酯、山梨酸、填料和/或如二氧化鈦(一種藥用顏料)的著色劑。
稀釋劑增加固體藥物組合物的體積，可以使含有該成分的藥物劑型易于生產(chǎn)和方便受治療者和護理人員使用。用于固體組合物的稀釋劑包括例如微晶纖維素(如AVICEL)、聚合物(如羥丙基甲基纖維素)超細(xì)纖維素、乳糖、磷酸氫鈣、磷酸鈣、高嶺土、碳酸鎂、氧化鎂、麥芽糊精、甘露醇、聚甲基丙烯酸酯(如Eudragit)、氯化鉀、粉末纖維素、氯化鈉、山梨醇和滑石。
用于固體藥物組合物的粘合劑包括阿拉伯樹膠、褐藻酸、卡波姆(如carbopol)、羧甲基纖維素鈉、糊精、乙基纖維素、明膠、瓜爾膠、氫化植物油、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素(如KLUCEL)、羥丙基甲基纖維素(如METHOCEL)、液體葡萄糖、硅酸鎂鋁、麥芽糊精、甲基纖維素、聚甲基丙烯酸酯、聚維酮(povidone)(如KOLLIDON、PLASDONE)、預(yù)膠化淀粉、藻酸鈉和淀粉。
通過向組合物加入崩解劑可以增加緊密的藥物組合物在受治療者胃中的溶解速率。崩解劑包括褐藻酸、羧甲基纖維素鈣、羧甲基纖維素鈉(如AC-DI-SOL、PRIMELLOSE)、膠體二氧化硅、交聯(lián)羧甲纖維素鈉(croscarmellose sodium)，聚乙烯聚吡咯烷酮(如KOLLIDON、POLYPLASDONE)、瓜爾膠、硅酸鎂鋁、甲基纖維素、微晶纖維素、波拉克林鉀(polacrilin potassium)、粉末纖維素、預(yù)膠化淀粉、藻酸鈉、羥基乙酸淀粉鈉(如EXPLOTAB)和淀粉。
可以加入助流劑來改善非緊密固體組合物的流動性能和提高劑量給藥的精確性?？梢宰鳛橹鲃┑馁x形劑包括膠體二氧化硅、三硅酸鎂、粉末纖維素、滑石粉和磷酸鈣。
當(dāng)通過壓實粉末組合物來制備諸如片劑的劑型時，該組合物承受來自沖壓機和沖模的壓力。一些賦形劑和活性成分易于粘結(jié)到?jīng)_壓機和沖模的表面，這可以使產(chǎn)物具有凹痕和其他表面瑕疵。潤滑劑可以加入到組合物中，以減少粘結(jié)并使產(chǎn)物易于從沖模的釋放。潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、單硬脂酸甘油酯、棕櫚酰硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、氫化植物油、礦物油、聚乙二醇、苯甲酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十八烷基富馬酸鈉、硬脂酸、滑石粉和硬脂酸鋅。增味劑和味道強化劑使該劑型更讓受治療者接受。用于可包含在本發(fā)明組合物中的藥物的常用增味劑和味道強化劑包括麥芽醇、香蘭素、乙基香蘭素、薄荷醇、檸檬酸、富馬酸、乙基麥芽醇和酒石酸。本發(fā)明的經(jīng)口給藥的制劑還可以可選地包括一種或多種甜味劑和一種或多種增味劑，以提供藥學(xué)上更可口的制劑。組合物還可以用藥用著色劑著色，以改善外觀和/或促進(jìn)受治療者對產(chǎn)品和單位劑量水平的識別。
賦形劑和用量的選擇由制劑設(shè)計師根據(jù)經(jīng)驗并考慮標(biāo)準(zhǔn)工序和本領(lǐng)域參考資料很容易確定。本發(fā)明的固體組合物包括粉末、顆粒、聚集體和壓實組分。本發(fā)明的優(yōu)選途徑是口服。該劑量可以以單位劑型方便地提供，并用藥學(xué)領(lǐng)域的任何熟知方法制備。劑型包括固體劑型，如片劑、丸劑、粉劑、膠囊、顆粒劑、囊片劑、小袋劑、藥片和錠劑。本發(fā)明特別優(yōu)選的劑型為片劑。
在神經(jīng)疾病的治療中，鹽形式的DPB的預(yù)防性或治療性單劑的量通常隨神經(jīng)疾病的嚴(yán)重程度和類型而不同。該單次劑量(和可能的用藥頻率)也會根據(jù)受治療者的年齡、體重、響應(yīng)和過去的治療史而有所不同。適宜的給藥策略可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員在考慮這樣的因素通過依據(jù)例如，文獻(xiàn)中報導(dǎo)的劑量和Physician’s DeskReference推薦的劑量而容易地選擇。
在本發(fā)明的一個具體實施方式
中，鹽形式的DPB(如NaDPB)是以單劑量口服給予。優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約0.5mg/kg至約100mg/kg的劑量口服給予。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約2mg/kg至約25mg/kg的劑量口服給予。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約3mg/kg至約15mg/kg的劑量口服給予。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約5mg/kg至約10mg/kg的劑量口服給予。
優(yōu)選地，對于60kg的受治療者，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約30mg至約3,000mg的量給予。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約60mg至約1,500mg的量口服給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約150mg至900mg的量口服給予的。更優(yōu)選地，5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約300mg至600mg的量口服給予的。
在本發(fā)明的另一具體實施方式
中，鹽形式的DPB是口服給予的，并且每天用量為約1mg至約2,000mg，優(yōu)選約50mg至約1,000mg，更優(yōu)選約100mg至約750mg，并且最優(yōu)選約200mg至約500mg。
本發(fā)明包括用治療上安全和有效劑量的DPB來治療神經(jīng)疾病的方法。因此，在本發(fā)明的另一具體實施方式
中，鹽形式的DPB是以約一周為一個循環(huán)(例如，一天一次，連續(xù)一周)給予的。在本發(fā)明的另一具體實施方式
中，鹽形式的DPB是以約2周為一個循環(huán)(例如，一天一次，連續(xù)2周)給予的。本發(fā)明還允許增加DPB鹽給藥循環(huán)的頻率、數(shù)量和長度。在本發(fā)明的另一具體實施方式
中，DPB鹽是以更大數(shù)量的日劑量以及通常足以治療潛在神經(jīng)疾病的周期進(jìn)行給予的。
以上提供的劑量和頻率由本文使用的術(shù)語“治療有效的”、“預(yù)防有效的”、和“治療或預(yù)防有效的”所涵蓋。當(dāng)具體到DPB鹽的量時，這些術(shù)語還涵蓋減輕、預(yù)防或者消除與潛在神經(jīng)疾病有關(guān)的副作用的DPB的量。
根據(jù)本發(fā)明，在口服給予DPB鹽后，通過在給定時間對于口服給予的DPB鹽的AUC而測得的DPB的絕對生物利用度，與靜脈(IV)給藥相比，至少為約55％、65％、75％或者85％。
本發(fā)明的藥物組合物可以給予空腹的人。本發(fā)明組合物還可以給予飯后的人。
本發(fā)明還包括簡化給予受治療者適當(dāng)量的鹽形式的DPB的藥盒。本發(fā)明的典型藥盒包括分離鹽形式的DPB劑型和藥用賦形劑。
在一具體實施方式
中，本發(fā)明提供一種制備含有鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的藥物組合物的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸與有機溶劑和堿混合以形成5，5-二苯基巴比妥酸的鹽；和b)分離該5，5-二苯基巴比妥酸的鹽。
在另一具體實施方式
中，本發(fā)明提供了一種制備藥物組合物的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸溶解在有機溶劑中，該有機溶劑選自由四氫呋喃、2-甲基-四氫呋喃、二乙醚、二異丙基醚、叔丁基甲基醚、二甲氧乙烷、二氧六環(huán)、二乙二醇二甲醚、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、乙醇、n-丙醇、乙二醇、1，3-丁二醇、乙二醇單甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基咪唑啉、二甲亞砜、環(huán)丁砜、乙腈及其混合物構(gòu)成的組；b)向所述有機溶劑中加入堿溶液，所述堿是選自由氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液和氫氧化鋰溶液構(gòu)成的組中的至少一種，其被加到溶解的5，5-二苯基巴比妥酸溶液中，以形成鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸；以及c)分離5，5-二苯基巴比妥酸的鹽。優(yōu)選地，該鹽是5，5-二苯基巴比妥酸的鈉鹽。
5，5-二苯基巴比妥酸的溶解步驟可以在多種溶劑中進(jìn)行。所用溶劑的實例包括醚，如四氫呋喃、2-甲基-四氫呋喃、二甲氧乙烷、二氧六環(huán)和二乙二醇二甲醚；芳香烴，如苯、甲苯、二甲苯、氯苯和二氯苯；醇，如乙醇、n-丙醇、乙二醇、1，3-丁二醇和乙二醇單甲醚；酰胺，如N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、和N，N-二甲基咪唑啉；含硫的烴，如二甲亞砜和環(huán)丁砜，以及水；或極性非質(zhì)子溶劑如乙腈等。優(yōu)選地，該有機溶劑為四氫呋喃。
在上述反應(yīng)中，使用約1∶1摩爾比的5，5-二苯基巴比妥酸和堿。該反應(yīng)進(jìn)行的溫度將由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所使用的堿和溶劑加以調(diào)節(jié)。
分離步驟可以通過過濾進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員還可以采用其他便利的方法。可選地，攪拌和冷卻可以促進(jìn)沉淀。優(yōu)選地，溶液被冷至約4℃。優(yōu)選地，溶液在室溫下攪拌約2小時，然后冷卻至4℃。優(yōu)選地，本發(fā)明還包括洗滌分離的5，5-二苯基巴比妥酸的鹽的步驟。
DPB鹽的純度至少為約90％。純度可以至少為約95％、97％、或99％。在本文中，純度是指DPB鹽除以DPB鹽加上自由酸的總量的比值?；旧霞兊腄PB鹽是至少約90％純的鹽。
所給予受治療者的DPB鈉鹽的精確數(shù)量隨疾病的程度和受治療者的大小而不同。正常體重(～60kg)的成年人可以從約0.5mg/kg至約50mg/kg的劑量開始。優(yōu)選地，DPB鈉鹽的量為約2mg/kg至約25mg/kg。更優(yōu)選地，DPB鈉鹽的量為約3mg/kg至約15mg/kg。更優(yōu)選地，DPB鈉鹽的量為約5mg/kg至約10mg/kg。片劑、膠囊劑、錠劑和其他劑型優(yōu)選包含單位劑量的DPB鈉鹽。
以單劑給予受治療者的本發(fā)明的藥物組合物的日劑量可以為約30mg至約3,000mg。優(yōu)選地，每日劑量為約60mg至約1,500mg。更優(yōu)選地，每日劑量為約150mg至約900mg。更優(yōu)選地，每日劑量為約300mg至約600mg。
本發(fā)明的一具體實施方式
涉及包含二苯基巴比妥酸的鹽的固體口服藥物劑型。本發(fā)明提供了一種包括將堿加入到二苯基巴比妥酸以制備DPB的鹽的方法。本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)藥物產(chǎn)品的方法，包括將DPB鹽與載體復(fù)合以制得固體劑型。本發(fā)明涉及一種方法，包括按臨床可接受的劑量以固體劑型將DPB鹽經(jīng)口給予哺乳動物。該劑量可產(chǎn)生至少約25μg/ml的DPB血藥濃度。該給藥方法產(chǎn)生治療效果。該劑量有效地提供神經(jīng)保護。組合物的有效量可以是在宿主中產(chǎn)生預(yù)期藥物學(xué)效果的量。
本發(fā)明的一個具體實施方式
涉及一種固體口服藥物劑型，其包含二苯基巴比妥酸的鈉鹽或鉀鹽。根據(jù)本發(fā)明的方法包括將自由酸的DPB轉(zhuǎn)化成鈉鹽或者鉀鹽形式。本發(fā)明提供一種生產(chǎn)藥物產(chǎn)品的方法，包括將DPB鹽與載體復(fù)合以制得固體劑型，其中所述鹽為鈉鹽或鉀鹽。本發(fā)明涉及一種治療神經(jīng)障礙(紊亂)的方法，包括按有效獲得預(yù)期的藥物學(xué)效果的量以固體劑型將DPB鹽經(jīng)口給予哺乳動物。該障礙可以是緊張或應(yīng)激癥狀或者神經(jīng)功能障礙，如驚厥、癲癇發(fā)作、肌肉僵硬，神經(jīng)緊張和焦慮。該組合物可以用于治療癲癇癥或作為神經(jīng)保護劑，并且能夠給予正經(jīng)歷外科手術(shù)或經(jīng)歷或具有下述危險的個體心房纖顫、短暫性腦缺血發(fā)作、腦缺血、頭外傷或者其他急性神經(jīng)損傷。該藥物組合物可以是涂有涂層的片劑，或者硬的或軟的膠囊。劑量可以至少為約0.5、1、5、10、或15mg/kg/天，并且可以產(chǎn)生至少約10μg/ml的DPB血藥濃度。
以固體口服藥物劑型使用的本發(fā)明的DPB鹽可以是藥物學(xué)可接受鹽，其包括衍生自合適的堿如堿金屬(例如鈉、鉀)、堿土金屬(例如鈣、鎂)、銨等的鹽。所有這些鹽形式可以通過使適宜的堿與自由形式的該化合物反應(yīng)，用傳統(tǒng)方法從相應(yīng)化合物制得。該鹽可以與賦形劑結(jié)合并形成固體劑型。
本發(fā)明的組合物和方法可以用于治療各種受治療者群(雄性/雌性、年輕/年老)，其具有可接受的個體內(nèi)和個體間差異，顯著小于使用DPB自由酸所存在的差異。本發(fā)明提供通過血清DPB測得的提高的有效生物利用度。本發(fā)明可以在一短時間(～8、12、18或24小時)內(nèi)比自由酸的同樣劑量和劑型提供更高的血清水平(AUC和/或Cmax)。該方法在一時間段內(nèi)可以提供與較高劑量的自由酸相同的血清水平。
根據(jù)本發(fā)明，用于獲得DPB的目標(biāo)療效血藥濃度的方法包括給予分離的DPB鈉鹽。該治療血藥濃度可以通過AUC或Cmax來衡量，并高于對DPB自由酸所測得的水平。用以產(chǎn)生DPB的目標(biāo)血藥濃度而給予的DPB的量至少比用DPB自由酸所需要的量少約10％、20％、30％、40％、或50％。對給定血藥濃度所需的DPB鹽的量比對于同樣血藥濃度所需的DPB自由酸的量少約1/5、1/4、1/3或1/2。
本發(fā)明的方法和組合物有效地產(chǎn)生約10-125、25-100或者40-80μg/ml的DPB血藥濃度。
現(xiàn)在已經(jīng)大致描述了本發(fā)明，通過參考下面的實施例將更好地理解本發(fā)明，這些實施例的提供僅僅是出于例舉說明的目的，并不用于限制本發(fā)明或其任何實施方式，除非其明確指出。
實施例實施例1 鹽形式的DPB的制備鈉鹽材料

THF四氫呋喃；DI水去離子水操作將DPB溶解在1500ml THF中。渾濁的溶液被濾過折疊的濾紙。氫氧化鈉溶液通過溶解于150ml THF和25ml水的混合物中制得。將該氫氧化鈉溶液在0.5小時內(nèi)逐滴加入DPB溶液中。DPB鈉鹽形成并從溶液中沉淀。將混合物在室溫下攪拌2小時，然后冷卻到4℃，并在該溫度下再攪拌2小時。過濾產(chǎn)物，用冷的THF洗滌。得到42.57g濕產(chǎn)物。在50℃的真空烘箱中將收集的鹽干燥至40.12g的恒重。收率80％。
鉀鹽材料

THF四氫呋喃；DI水去離子水操作將DPB溶解在300ml THF中。渾濁的溶液被濾過折疊的濾紙。氫氧化鉀溶液通過溶解于30ml THF和5ml水的混合物中制得。將該氫氧化鉀溶液在0.5小時內(nèi)逐滴加入DPB溶液。DPB鉀鹽形成并從溶液中沉淀。將混合物在室溫下攪拌2小時，然后冷卻到4℃，并在該溫度下再攪拌2小時。過濾產(chǎn)物，用冷的THF洗滌。得到10.11g濕產(chǎn)物。在50℃的真空烘箱中將收集的鹽干燥至恒重。收率96.9％。
鋰鹽材料


THF四氫呋喃；DI水去離子水操作將DPB溶解在30ml THF中。渾濁的溶液被濾過折疊的濾紙。氫氧化鋰溶液通過溶解于3ml THF和1ml水的混合物中制得。將該氫氧化鋰溶液在0.5小時內(nèi)逐滴加入DPB溶液。DPB鋰鹽形成并從溶液中沉淀。將混合物在室溫下攪拌2小時，然后冷卻到4℃，并在該溫度下再攪拌2小時。過濾產(chǎn)物，用冷的THF洗滌。得到0.92g濕產(chǎn)物。在50℃的真空烘箱中將收集的鹽干燥至恒重。收率97.2％。
實施例2 DPB鈉鹽的其他制備在實施例1中，DPB被溶解在THF中，然后加入等摩爾量的氫氧化鈉水溶液。本實施例使用氫氧化鈉在乙醇中的溶液(即，制備10％的NaOH乙醇溶液)。
操作(在THF中合成)將DPB(7.0g)于室溫下溶解在70ml的THF中。向溶液中加入1g NaOH(顆粒)在10ml無水乙醇中的溶液。在室溫下攪拌所得混合物。立即觀察到渾濁并在數(shù)分鐘內(nèi)看到物質(zhì)沉淀。然后在室溫下將反應(yīng)混合物再攪拌2小時。過濾產(chǎn)物，用15ml THF洗滌。濕產(chǎn)物在105℃下真空干燥。得到定量的DPB。產(chǎn)物純度為99.2％，用卡爾費休(Karl Fisher)方法測得的含水量為1.26％。
操作(在乙醇中合成)將DPB(1.2g)懸浮在無水乙醇中，在室溫下加入0.17g NaOH顆粒。攪拌混合物0.5小時至完全溶解。再攪拌2小時后，揮發(fā)掉一半乙醇(40℃和100毫巴)以濃縮DPB和NaOH，并沉淀產(chǎn)物。然后將混合物冷卻至7℃并過濾產(chǎn)物。濾餅不用洗滌以免產(chǎn)物溶解。得到定量的收率和99.1％的純度。
實施例3 鹽形式的MMMDPB的制備鈉鹽將22g MMMDPB(68mmol)懸浮在330ml叔丁基甲基醚和10ml甲醇中。懸浮液被加熱至60℃并在此溫度下攪拌30分鐘。然后逐滴加入13ml 30％的甲醇鈉溶液。在加入過程中，懸浮液變成清澈溶液，一段時間后產(chǎn)物開始沉淀。將堿完全加入后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫并另外攪拌4小時。過濾后得到非常細(xì)的鈉鹽晶體。
產(chǎn)物(NaMMMDPB)在60℃的真空烘箱中干燥3小時。得到18.4g干的鈉鹽，HPLC分析的純度為98.6％。收率78.4％。
實施例4MMMDPB的鈉鹽沒有增大MMMDPB和DPB的生物利用度本研究比較了將MMMDPB(30mg/kg)和MMMDPB鈉鹽(30mg/kg)口服給予狗后的MMMDPB和DPB的藥物代謝動力學(xué)。MMMDPB或MMMDPB鈉鹽的口服懸浮液是通過將MMMDPB或者M(jìn)MMDPB的鈉鹽懸浮在2％(w/v)羧甲基纖維素(CMC)水溶液中而制得的。用單次口服強飼法給予8只畢爾格犬MMMDPB或者M(jìn)MMDPB鈉鹽的口服懸浮液。
獲得給藥前和給藥后0.25、0.5、1、2、3、4、6、9、12、15、18、和24小時的血液樣品。抽取靜脈血(～1ml)并收集在肝素鋰(抗凝血劑)中。血液樣品在冷凍離心機中旋轉(zhuǎn)，在分析前將血漿儲存在-80℃下。使用帶串聯(lián)質(zhì)譜檢測的HPLC(LLOQ＝0.25μg/ml)在血漿中定量MMMDPB和DPB。通過峰面積比(被分析物/內(nèi)標(biāo))對校準(zhǔn)用基準(zhǔn)標(biāo)稱濃度的加權(quán)(1/C2)最小平方線性回歸分析，獲得校準(zhǔn)曲線。通過從描繪的校準(zhǔn)曲線的內(nèi)插得到濃度。用PESciex Analyst Version 1.2軟件產(chǎn)生回歸和圖。
將血漿樣品解凍，并用2ml乙腈進(jìn)行固相提取，然后用帶串聯(lián)質(zhì)譜檢測的HPLC分析。色譜條件如下色譜模式 反相等度/梯度方式等度流動相流速 1ml/min背壓 140巴(大約)自動取樣器上升體積(rising vol.)1000μl柱 Zorbax SBC18保留時間2.15min(DPB)3.46min(MMMDPB)在給予畢格爾犬單次口服劑量(30mg/kg)的MMMDPB(圖1)后，MMMDPB和DPB的平均血藥濃度略微高于被給予MMMDPB鈉鹽的那些(圖2)。在給予畢格爾犬單次靜脈注射NaMMMDPB(15mg/kg)后，MMMDPB和DPB的平均血藥濃度顯示在圖3中。
表1總結(jié)了在口服給予畢格爾犬MMMDPB和NaMMMDPB以及靜脈注射NaMMMDPB(30mg/kg PO，15mg/kg IV，n＝8)之后，MMMDPB和DPB的平均藥動參數(shù)。
在口服給予MMMDPB的鈉鹽后的對MMMDPB的AUC0-t和Cmax要比在口服給予MMMDPB后更小(29.44μg·hr/mL對57.41μg·hr/mL和6.45μg/mL對10.22μg/mL)(見表1)。
在口服給予MMMDPB鈉鹽后的對DPB的AUC0-t和Cmax要比在口服給予MMMDPB后更小(135.10μg·hr/mL對193.18μg·hr/mL和7.28μg/mL對9.39μ/mL)(見表1)。
在給予MMMDPB后，MMMDPB的平均口服生物利用度為107％(范圍43％-177％)，相比之下，給予NaMMMDPB則為60％(范圍34％-99％)。換句話說，口服給予MMMDPB后的MMMDPB的絕對生物利用度(即F值)為1.07?？诜o予MMMDPB鈉鹽的MMDPB的F值為0.60。該數(shù)據(jù)表明MMMDPB的鹽形式并不增大MMMDPB和DPB的生物利用度。
表1在將NaMMMDPB口服給予畢格爾犬(30mg/kg，PO，15mg/kg IV，n＝8)之后，MMMDPB和DPB的平均藥動參數(shù)

F為絕對生物利用度因此，這些數(shù)據(jù)表明，口服給予MMMDPB的鈉鹽不能增大DPB的生物利用度。
實施例5DPB的鈉鹽增大DPB的生物利用度我們通過直接給予狗DPB并與DPB的鈉鹽相比較，考察了DPB向血管腔隙的遞送。該研究比較了在口服給予畢格爾犬單次劑量DPB(75mg/kg)或DPB鈉鹽(75mg/kg)之后，DPB的藥物代謝動力學(xué)。通過單次口服強飼(n＝24)給予28只畢格爾犬DPB和DPB鈉鹽。在給藥前和給藥后0.5、1、2、3、4、6、12、18、24、36和48小時采集血樣。用HPLC定量血漿中的DPB(LLOQ＝0.25μg/mL)。
在單次口服將DPB給予畢格爾犬(75mg/kg，n＝8)之后的DPB的平均血藥濃度(圖4)明顯低于給予DPB鈉鹽(75mg/kg，n＝8)的那些(圖5)。圖6示出了給畢格爾犬單次靜脈(IV)注射NaDPB(75mg/kg，T＝30min，n＝4)后，DPB的平均血藥濃度。
表2總結(jié)了在口服給予畢格爾犬DPB、NaDPB和靜脈注射NaDPB(75mg/kg，n＝28)之后，DPB的平均藥動參數(shù)。
在口服給予DPB鈉鹽后DPB的AUC0-t比口服給予DPB后大(～4倍)(882.8μg·hr/mL對222.1μg·hr/mL)(見表2)。
在口服給予DPB鈉鹽后比口服給予DPB后，DPB的Cmax大(～3倍)(882.8μg·hr/mL對222.lμg·hr/mL)(見表2)。
表2在將DPB和NaDPB口服給予畢格爾犬(75mg/kg，n＝8)之后，DPB的平均藥物動力學(xué)參數(shù)

這些數(shù)據(jù)表明，給予DPB的鈉鹽增大DPB的生物利用度。在口服和靜脈給予NaDPB后的DPB的平均AUC0-t和Cmax大于口服給予DPB的相應(yīng)值。給予NaDPB后DPB的絕對生物利用度約為58％。
應(yīng)當(dāng)注意，在本研究中給予了相等重量的DPB鈉鹽和DPB(即75mg/kg)。當(dāng)考慮鈉的分子量時，在摩爾數(shù)上，DPB比DPB鈉鹽多6％。盡管有此差異，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)DPB鈉鹽的AUC0-t和Cmax有明顯的增大。
實施例6DPB的鈉鹽增大DPB的生物利用度我們計算了在口服給予DPB和DPB鈉鹽后，DPB在不同時間(24、36和48小時)的AUC0-t。數(shù)據(jù)總結(jié)在下面的表3中。
表3將DPB和NaDPB口服給予畢格爾犬(75mg/kg，n＝28)后不同時間(24、36和48小時)的AUC值

這些數(shù)據(jù)表明，口服給予DPB鈉鹽與口服給予DPB后相比，增大了平均的AUC0-24、AUC0-36、和AUC0-48。
實施例7給予DPB和鈉鹽形式的DPB我們通過直接給予DPB并與DPB鈉鹽相比較，考察了DPB向血管腔隙的遞送。該研究比較了在口服給予大鼠DPB(150mg/kg)和DPB鈉鹽(150mg/kg)之后，DPB的藥物代謝動力學(xué)。通過單次口服強飼法給予54只(n＝54)大鼠DPB和DPB鈉鹽。采集血樣(每份約0.5ml)，其是在每次處理后通過頸靜脈從動物收集的。給藥后在不同時間收集來自3只大鼠/性別/時間點的組中的血樣，以便提供給藥前和給藥后0.5、1、2、3、4、6、12、18、24、36和48小時的完整的時間點。將每個血樣收集在裝有肝素鋰的管中，并將樣品置于冷凍離心機中旋轉(zhuǎn)。所得血漿在分析前在-80℃下貯存。用HPLC(LLOQ＝0.25μg/mL)定量血漿中的DPB。
在單次口服給予Sprague-Dawley大鼠DPB(150mg/kg，n＝18)之后的DPB的平均血藥濃度(圖7)明顯低于給予DPB鈉鹽(150mg/kg，n＝18)的那些(圖8)。圖9示出了給Sprague-Dawley大鼠單次靜脈(IV)注射NaDPB(150mg/kg，T＝30min，n＝18)后，DPB的平均血藥濃度。
表4總結(jié)了在口服給予Sprague-Dawley大鼠DPB、NaDPB和靜脈注射NaDPB(150mg/kg，n＝72)之后，DPB的平均藥物動力學(xué)參數(shù)。對于DPB，AUC0-t和Cmax在口服和靜脈給予NaDPB后相比于給予DPB后要大。
雌鼠中的AUC0-t和Cmax大于雄性的相應(yīng)值。如圖4所示，在口服給予DPB鈉鹽后相比于口服給予DPB后，雄性(～4.5倍)和雌性(～2倍)中DPB的AUC0-t較大(3414.7μg·hr/mL對775.5μg·hr/mL，和4037.6μg·hr/mL對1945.9μg·hr/mL)(見表4)。
在口服給予DPB鈉鹽后相比于口服給予DPB后，雄性(～2.5倍)和雌性(～1.5倍)中DPB的Cmax較大(86.9μg/mL對38.3μg/mL，和104.5μg/mL對74.0μg/mL)(見表4)與口服相比，靜脈給予后的AUC0-t和Cmax略大。
口服給予NaDPB后，雄大鼠中NaDPB的絕對生物利用度(F)為70.6。在口服給予DPB鈉鹽后，雌大鼠中NaDPB的F值為87.7。這些數(shù)據(jù)表明，鹽形式的DPB(即NaDPB)大大提高了DPB的絕對生物利用度。
表4在將DPB和NaDPB口服給予Sprague-Dawley大鼠(150mg/kg，n＝72)之后，DPB的平均藥物動力學(xué)參數(shù)

F代表絕對利用度綜合起來，這些數(shù)據(jù)表明給予DPB鈉鹽大大提高DPB的生物利用度。
實施例8DPB鈉鹽增大DPB的生物利用度我們計算了在口服給予DPB和DPB鈉鹽后，DPB在不同時間(24、36和48小時)的AUC0-t。數(shù)據(jù)總結(jié)在下面的表5中。
表5口服將DPB和NaDPB給予畢格爾犬(75mg/kg，n＝28)后不同時間(24、36和48小時)的AUC

這些數(shù)據(jù)表明，口服給予DPB鈉鹽與口服給予DPB后相比，增大了平均的AUC0-24、AUC0-36、和AUC0-48。
實施例9DPB的鈉鹽增大了DPB的腦遞送在本研究中，我們測量了DPB的腦濃度。在將每只大鼠安樂死后盡可能快地收集腦。在測定DPB的腦組織濃度前它們貯存在-80℃的冷凍箱中。表6總結(jié)了在口服給予Sprague-Dawley大鼠DPB和DPB鈉鹽后，DPB的腦濃度。
在單次口服給予Sprague-Dawley大鼠DPB(150mg/kg，n＝18)(圖10)后，DPB的腦濃度明顯低于給予DPB鈉鹽(150mg/kg，n＝18)的那些(圖11)。圖12示出了給Sprague-Dawley大鼠單次靜脈注射NaDPB(150mg/kg，T＝30min，n＝18)(圖10)后，DPB的平均腦濃度。
與在血漿中的情況一樣，在給予NaDPB后，在雌性動物中的DPB的腦組織平均濃度通常大于雄性中的濃度。如表6所示，在所有時間間隔(即24、36和48小時)，口服給予DPB鈉鹽的雄鼠中DPB腦濃度大于口服給予DPB的腦濃度(分別為29.91μg/g對3.09μg/g；23.64μg/g對3.36μg/g；9.46μg/g對BQL)(見表6)。
在所有時間間隔(即24、36和48小時)，口服給予DPB鈉鹽的雌鼠中DPB腦濃度也大于口服給予DPB的腦濃度(分別為25.80μg/g對7.04μg/g；28.40μg/g對6.84μg/g；14.94μg/g對5.24)(見表6)。
表6口服給予Sprague-Dawley大鼠DPB和NaDPB(150mg/kg，n＝72)后的DPB的平均腦濃度(μg/g)

BQL低于定量限，-沒有測定這些數(shù)據(jù)表明，與口服給予自由酸形式的DPB的觀測結(jié)果相比，給予的DPB鈉鹽快速和相對強烈地從消化系統(tǒng)吸收，將DPB對腦的生物利用度提高了至少很多倍。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會認(rèn)識到，或者根據(jù)常規(guī)經(jīng)驗就可以確定很多本文所描述的本發(fā)明具體實施方式
的等效替換。本申請引用的出版物的披露內(nèi)容也以引用形式全部并入本文中，以作為參考。然而應(yīng)該明白，本發(fā)明的范圍不限于上述具體實施方式
。本發(fā)明不按照這些具體描述也可以實施，并且仍然在所附的權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種在需要抗驚厥治療的哺乳動物中提高5，5-二苯基巴比妥酸的生物利用度的方法，包括將包含5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽的口服劑給予所述哺乳動物的步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽為5，5-二苯基巴比妥酸鈉、5，5-二苯基巴比妥酸鉀或者5，5-二苯基巴比妥酸鋰。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽為5，5-二苯基巴比妥酸鈉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽基本上為純物質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽的純度為至少約90％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少800μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少1200μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少1500μg.hr/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少50μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少75μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供至少100μg/mL的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約1.5倍。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約2倍。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約2.5倍。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約3倍。
16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的AUC0-48比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的AUC0-48大至少約3.5倍。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約1.5倍。
18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約2倍。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法提供的5，5-二苯基巴比妥酸的Cmax比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的Cmax大至少約2.5倍。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中給予足夠量的5，5-二苯基巴比妥酸的鹽，以使提供的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約1.5倍。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中給予足夠量的5，5-二苯基巴比妥酸的鹽，以使提供的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約2倍。
22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中給予足夠量的5，5-二苯基巴比妥酸的鹽，以使提供的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約3倍。
23.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中給予足夠量的5，5-二苯基巴比妥酸的鹽，以使提供的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度比通過口服給予相同量自由酸形式的5，5-二苯基巴比妥酸所提供的腦濃度大至少約4倍。
24.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中給予5，5-二苯基巴比妥酸鈉，以在給予后24小時提供至少約20μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。
25.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中給予5，5-二苯基巴比妥酸鈉，以在給予后36小時提供至少約20μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。
26.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中給予5，5-二苯基巴比妥酸鈉，以在給予后48小時提供至少約8μg/g的5，5-二苯基巴比妥酸的腦濃度。
27.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述口服劑是固態(tài)。
28.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述口服劑為片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑、顆粒劑、懸浮劑、凝膠劑或者軟凝膠劑。
29.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約0.5mg/kg至約100mg/kg的劑量給予。
30.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約2mg/kg至約25mg/kg的劑量給予。
31.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約3mg/kg至約15mg/kg的劑量給予。
32.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約5mg/kg至約10mg/kg的劑量給予。
33.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約30mg至約3000mg的量給予。
34.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約60mg至約1500mg的量給予。
35.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約150mg至約900mg的量給予。
36.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以每天約300mg至約600mg的量給予。
37.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動物是狗。
38.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述哺乳動物是人。
39.一種治療方法，包括以口服形式將固體劑型的5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽給予一個哺乳動物。
40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約0.5mg/kg至約100mg/kg的劑量給予。
41.根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約2mg/kg至約25mg/kg的劑量給予。
42.根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸鈉是以約5mg/kg至約10mg/kg的劑量給予。
43.根據(jù)權(quán)利要求39所述的方法，其中所述固體劑型每天給予一次。
44.根據(jù)權(quán)利要求43所述的方法，其中所述固體劑型至少給予一周。
45.根據(jù)權(quán)利要求43所述的方法，其中所述固體劑型至少給予兩周。
46.一種獲得5，5-二苯基巴比妥酸在需要抗驚厥治療的哺乳動物中治療有效血藥濃度的方法，包括將5，5-二苯基巴比妥酸鹽給予所述哺乳動物的步驟，其中給予的所述5，5-二苯基巴比妥酸鹽的量比獲得相同治療有效血藥濃度所需的5，5-二苯基巴比妥酸的量低至少30％。
47.根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述治療血藥濃度為至少800μg.hr/mL的AUC0-t。
48.根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述治療血藥濃度為至少50μg/mL的Cmax。
49.一種口服劑型，包括5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽和藥用賦形劑。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的鹽為選自由5，5-二苯基巴比妥酸鈉、5，5-二苯基巴比妥酸鉀和5，5-二苯基巴比妥酸鋰構(gòu)成的組中的至少一種鹽。
51.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的鹽為5，5-二苯基巴比妥酸鈉。
52.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述口服劑是固態(tài)。
53.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述口服劑是干的。
54.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述分離鹽包括基本上純的5，5-二苯基巴比妥酸鹽。
55.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述口服劑型為單位劑型。
56.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述5，5-二苯基巴比妥酸的分離鹽含有等摩爾量的5，5-二苯基巴比妥酸鹽的陰離子和陽離子。
57.根據(jù)權(quán)利要求49所述的口服劑型，其中所述口服劑型選自由片劑、丸劑、膠囊劑、囊片劑、粉劑、顆粒劑、懸浮劑、凝膠劑和軟凝膠劑構(gòu)成的組。
58.一種藥物產(chǎn)品，包含分離鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸。
59.根據(jù)權(quán)利要求58所述的藥物產(chǎn)品，其中所述分離鹽形式為鈉鹽。
60.一種制備藥物組合物的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸與有機溶劑和堿混合，以形成5，5-二苯基巴比妥酸的鹽；和b)分離所述5，5-二苯基巴比妥酸的鹽。
61.根據(jù)權(quán)利要求60所述的方法，其中所述堿被混合在乙醇中。
62.根據(jù)權(quán)利要求60所述的方法，進(jìn)一步包括將所述堿溶解在另一溶劑中并且將溶液中的所述堿加入到在有機溶劑中的5，5-二苯基巴比妥酸溶液中。
63.一種制備鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的方法，包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸溶解在一有機溶劑中，所述有機溶劑選自由四氫呋喃、2-甲基-四氫呋喃，二乙醚、二異丙基醚、叔丁基甲基醚、二甲氧乙烷、二氧六環(huán)、二乙二醇二甲醚、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、乙醇、n-丙醇、乙二醇、1，3-丁二醇、乙二醇單甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基咪唑啉、二甲亞砜、環(huán)丁砜、乙腈及其混合物構(gòu)成的組；b)向所述有機溶劑中加入堿，所述堿是選自由氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰構(gòu)成的組中的至少一種堿，其被加入到溶解的5，5-二苯基巴比妥酸溶液中以形成一種鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸；以及c)分離所述鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸。
64.根據(jù)權(quán)利要求63的所述的方法，其中所述有機溶劑為四氫呋喃。
65.根據(jù)權(quán)利要求63的所述的方法，其中在步驟b)中，所述堿和所述溶解的5，5-二苯基巴比妥酸以1∶1的摩爾比提供。
66.根據(jù)權(quán)利要求63的所述的方法，其中所述分離步驟是通過過濾實施的。
67.根據(jù)權(quán)利要求63的所述的方法，進(jìn)一步包括洗滌所述分離鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸的步驟。
68.根據(jù)權(quán)利要求63的所述的方法，其中所述鹽形式是5，5-二苯基巴比妥酸鈉。
69.一種根據(jù)以下方法制備的分離鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸，所述方法包括步驟a)將5，5-二苯基巴比妥酸溶解在一有機溶劑中，所述有機溶劑選自由四氫呋喃、2-甲基-四氫呋喃，二乙醚、二異丙基醚、叔丁基甲基醚、二甲氧乙烷、二氧六環(huán)、二乙二醇二甲醚、苯、甲苯、二甲苯、氯苯、二氯苯、乙醇、n-丙醇、乙二醇、1，3-丁二醇、乙二醇單甲醚、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、N，N-二甲基咪唑啉、二甲亞砜、環(huán)丁砜、乙腈及其混合物構(gòu)成的組；b)向所述有機溶劑中加入堿溶液，所述堿是選自由氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液和氫氧化鋰溶液構(gòu)成的組中的至少一種，其被加到溶解的5，5-二苯基巴比妥酸溶液中，以形成鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸；以及c)分離鹽形式的5，5-二苯基巴比妥酸。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種向需要治療神經(jīng)疾病的哺乳動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)遞送巴比妥酸衍生物的組合物和方法。具體地，本發(fā)明涉及一種給予口服劑型的5，5－二苯基巴比妥酸的鈉鹽的方法，以提高5，5－二苯基巴比妥酸的生物利用度并且增強其腦遞送。
文檔編號A61K31/515GK101052403SQ200580034058
公開日2007年10月10日 申請日期2005年8月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月10日
發(fā)明者丹尼拉·古特曼, 阿夫拉漢姆·亞科比, 丹尼爾·莫羅斯, 巴里·萊維特, 霍華德·魯特曼 申請人:塔羅制藥工業(yè)有限公司