專利名稱：A2a腺苷受體激動劑的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及心肌顯像方法，其通過將regadenoson(一種腺苷A2A受體激動劑)的多劑量給予進行心肌顯像的哺乳動物來實現(xiàn)。
背景技術：
心肌灌注顯像(MPI)是對于冠心病的檢測和表征很有用的診斷技術。灌注顯像利用諸如放射性核素的物質來確定血流量不足的區(qū)域。在MPI中，檢測靜止時的血流量，并將該結果與進行踏車鍛煉(心臟壓力試驗，這樣的用力(盡力，exertion)對于刺激血流量是必要的)過程中檢測到的血流量進行比較，。不幸地，許多患者由于諸如外周血管疾病、關節(jié)炎等的醫(yī)學疾病而不能夠以提供充足血流量所必需的程度進行鍛煉。
因此，一短時期內增加心臟血流量(CBF)的藥劑將具有很大的益處，尤其是不會引起外周血管舒張的藥劑。血管舒張藥，例如迪普萊達莫(dipyridamole)已在用放射性核素顯像之前在患者中用于這種目的。迪普萊達莫是一種長效化合物并且經(jīng)常需要解毒劑以反轉長期的副作用。其是一種輸注而不是一種推注(如regadenoson)。其對腺苷受體也是非選擇性的并且需要基于體重的給藥量。
腺苷(一種天然存在的核苷酸)作為血管舒張藥也是很有用的。腺苷通過與表征為亞型A1、A2A、A2B和A3的腺苷受體族相互作用而施加其生物學作用。Adenoscan是一種天然存在的腺苷的制劑。出售的Adenoscan為利用放射性鉈-201的灌注研究中的佐劑。然而，它的應用由于副作用如潮紅、胸部不適、急促深呼吸、頭痛、喉痛、頸痛以及顎痛而受到限制。腺苷的這些有害作用是由于除了A2A之外的其它腺苷受體亞型的活化，其介導外周血管舒張效應為腺苷的支氣管收縮。另外，腺苷的短半衰期使得在治療過程中連續(xù)輸注成為必要，這進一步使其應用變得復雜。Adenoscan在許多患者中是禁忌的，包括具有第二級或第三級阻滯、竇房結疾病、支氣管收縮性或支氣管痙攣性肺病的那些患者和具有已知的藥物過敏性的那些患者。
用于A2A腺苷受體的其它有效和選擇性激動劑是已知的。例如，MRE-0470(Medco)是腺苷A2A受體激動劑，其為腺苷的有效和選擇性衍生物。WRC-0470(Medco)是腺苷A2A激動劑，用作顯像中的佐劑。通常，諸如這些的化合物對A2A受體具有較高的親和力，因此具有長的作用持續(xù)時間，而這在顯像中是不希望的，并且可能延長副作用的持續(xù)時間。
一種特別有效和有用的腺苷A2A受體激動劑是regadenoson。Regadenoson對腺苷A2A受體是選擇性的，具有較短的作用持續(xù)時間并且似乎不需要以持續(xù)輸注方式來給予。Regadenoson和相關化合物以及用于制造其的方法和在心臟灌注顯像中的應用披露在美國專利第6,403,567、6,642,210、6,214,807和6,770,634號以及公布的美國專利申請第2002-0012946和2004-0022177中，其每一個說明書的全部內容以引用方式并入本文。盡管regadenoson是一種已知的化合物，但是關于其藥代動力學分布和可能的治療用途范圍還有許多是未知的。

發(fā)明內容
本發(fā)明的一個方面是一種產(chǎn)生冠脈舒張而沒有外周血管舒張的方法，包括給予人單劑量的一種包含regadenoson和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物，其量是足以使平均冠脈峰值流速增加至少約16.5cm/sec的量。
本發(fā)明的另一個方面是一種產(chǎn)生冠脈舒張而沒有外周血管舒張的方法，包括給予人單劑量的一種包含regadenoson和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物，其量是足以使平均冠脈峰值流速增加至少約16.5cm/sec的量，其中該藥物組合物是通過靜脈推注給予的。
本發(fā)明的又一方面是一種產(chǎn)生冠脈舒張而沒有外周血管舒張的方法，包括給予人單劑量的一種包含regadenoson和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物，其量是足以使平均冠脈峰值流速增加至少約16.5cm/sec的量，其中該藥物組合物是在約10至約20秒內給予的。
本發(fā)明的又一方面是一種產(chǎn)生冠脈舒張而沒有外周血管舒張的方法，包括給予人單劑量的一種包含regadenoson和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物，其量是足以使平均冠脈峰值流速增加至少約16.5cm/sec的量，其中給予的該藥物組合物的量為足以使平均冠脈峰值流速增加的量從約16.5至約77.0cm/sec范圍的量。
在本發(fā)明的又一方面，該單劑量的藥物組合物包含約10至約500微克的regadenoson或可替換地包含其量的范圍從約0.05至約60μg/kg人體重的regadenoson。
在又一方面，本發(fā)明包括在將單劑量的藥物組合物給予人之后實施該人的心肌灌注顯像的步驟。在本發(fā)明的該方面，至少一種放射性核素可以在一個時間被給予該人，其中所述給予時間選自由在該人接受所述劑量的藥物組合物之前、給予所述劑量的藥物組合物的同時或在將所述劑量的藥物組合物給予人之后組成的組。這就意味著該放射性核素和所述單劑量的藥物組合物可以分別給予該人或同時給予該人。在本方法的一個優(yōu)選方面，在將所述單劑量的藥物組合物給予該人后約1分鐘立即開始心肌檢查。
具體實施例方式
，當或者在服用顯像劑之前或者與顯像劑一起加入時，有效的A2A激動劑在心臟顯像中作為佐劑是很有用的。合適的顯像劑包括但不限于201鉈或99m锝-Sestamibi、99mTc-teboroxime以及锝-99m(III)。
已經(jīng)確定了增大CBF但不顯著增大外周血流的新的和有效的A2A激動劑。一種尤其有用的A2A激動劑是regadenoson。Regadenoson在文獻中也被稱為CVT-3146或(1-{9-[(4S，2R，3R，5R)-3，4-二羥基-5-(羥甲基)草脲胺-2-基]-6-氨基嘌呤-2-基}吡唑-4-基)-N-甲基羰基酰胺，并具有化學式 用于合成regadenoson以及相關化合物的方法在美國專利第6,403,567號中提出，其說明書全部內容以引用方式并入本文。
Regadenoson可以通過本領域已知的藥物給予方法進行給予。優(yōu)選regadenoson是靜脈給藥的。更優(yōu)選regadenoson是以單劑量靜脈給予的。術語“單劑量”通常指的是單次快速給予的一個治療量的regadenoson的劑量。術語“單劑量”不包括通過例如連續(xù)靜脈推注在延長的時間期內給予的一個劑量或多個劑量。
Regadenoson通常在使用前被合并到藥物組合物中。術語“藥物組合物”指的是regadenson與至少一種液體載體的組合，其一起形成溶液或懸浮液。。只要粉末在使用之前需要通過添加合適的液體載體進行重新組成，那么包括本發(fā)明組合物的凍干的粉末屬于“藥物組合物”的范圍。合適的液體載體的實例包括但不限于水、蒸餾水、去離子水、鹽水、緩沖溶液、標準等滲鹽溶液、葡萄糖水溶液及其組合。這樣的藥物組合物通常適于注射。
如本文使用的，術語“緩沖溶液”或“緩沖劑”指的是一種含有弱酸和其共軛弱堿的溶液。將該緩沖溶液用于本發(fā)明的藥物組合物中以防止pH變化。有用的緩沖溶液的非限制性實例是包含碳酸氫鈉和磷酸鈉的溶液。
包含本發(fā)明的化合物和/或其衍生物的藥物組合物可以被配制成用于腸胃外給藥的溶液或凍干粉末。粉末可通過在使用前加入一種合適的稀釋劑或其它藥用載體而進行重組。如果以液體形式加以使用，則本發(fā)明的化合物優(yōu)選被合并到緩沖的等滲壓水溶液中。合適的稀釋劑的實例是標準等滲鹽水溶液、標準的5％葡萄糖水溶液和緩沖乙酸鈉或乙酸銨溶液。這樣的液體制劑適于腸胃外給藥，但也可用于口服給藥。將賦形劑(如聚乙烯吡咯烷酮、明膠、羥基纖維素、阿拉伯樹膠、聚乙二醇、甘露醇、氯化鈉、檸檬酸鈉或本領域技術人員已知的任何其它賦形劑)加入到包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物中是希望的。
包含regadenoson的藥物組合物可以在有或沒有中間儲存的情況下進行制備然后給予。當配制本發(fā)明的藥物組合物時考慮的各種性能包括但不限于產(chǎn)品保存期、regadenoson溶解性、組合物pH值、靜脈刺激作用(vein irritation)、溶血性、儲存條件(例如，藥物組合物是否要在室溫或一些其它溫度下儲存)以及耐受殺菌過程的能力。
獲得所希望的藥物組合物性能的一種方法是藥物組合物中含有共溶劑。共溶劑可選自賦予藥物組合物所希望的性能的任何液體或溶液中的化合物。有用共溶劑的實例包括但不限于甲基硼酸、硼酸鹽緩沖液、丙二醇、或聚乙二醇。藥物組合物中共溶劑的量將取決于各種性質，如所選A2A受體激動劑的溶解性和穩(wěn)定性。含有共溶劑的藥物組合物的實例可以在美國專利申請公開第2005/0020915號中找到，其說明書全部內容以引入方式并入本文。
Regadenoson在水中的溶解度為約50微克/mL。因此，只要所期望regadenoson的重量可在可接受的體積內給予，則regadenoson可在水中溶解并進行給予。例如，優(yōu)選約400微克的劑量可在8mL的水中進行給予。如果這個體積對于給藥目的來說太大，或者如果藥物組合物將在不同于室溫(RT)的溫度下儲存，那么可將另外的成分加入到組合物中，以增大regadenoson在組合物中的溶解性和/或為所得藥物組合物提供其它改善的性質，如改善的穩(wěn)定性和儲存性。
本發(fā)明包含regadenoson的藥物組合物可以包括高達約1毫克/mL的regadenoson。優(yōu)選包含regadenoson的藥物組合物包括約50至約250微克/mL、并且更優(yōu)選約50至150微克/mL的regadenoson。
為了提高溶解性和儲存性，regadenoson可在一種包含甲基硼酸(MBA)共溶劑的藥物組合物中進行給予。將該甲基硼酸加入到藥物組合物，以改善激動劑溶解性和保存期。MBA增加所得組合物的pH值。當組合物pH值朝著中性下降時，包含MBA的藥物組合物中的regadenoson的溶解性趨于下降。因此，在有regadenoson的情況下，最佳的含MBA的組合物pH值為約8.5至10，優(yōu)選具有約9.1至約9.4的pH值，并且約9.3的pH值是最優(yōu)選的。這對應于包含約50至約250mg/mL的MBA的組合物。作為MBA的可替換方案，regadenoson可與硼酸鹽緩沖溶液進行組合。通常，硼酸鹽緩沖溶液將由用酸或堿調節(jié)到希望的pH值如pH值為9.3的硼酸鈉水溶液所組成。
含MBA的藥物組合物可能有儲存問題。即，當包裝在某種I型玻璃容器中時，MBA可能會引起分層。這個問題可通過將含MBA的藥物組合物保存在塑料容器或更高抗性的I型玻璃容器中而得以克服。
如果希望含regadenoson的藥物組合物具有更接近中性的pH，則一種可替換方案是將regadenoson與丙二醇(PG)共溶劑進行組合。當使用regadenoson時，用于該組合物中的PG的量可以在按體積計約5％至高達25％的范圍內，其中按體積計約8％至約20％的范圍是更優(yōu)選的。PG的替代物是聚乙二醇-PEG。優(yōu)選PEG的平均分子量為約200至400。
優(yōu)選地，包含PG或PEG的regadenoson組合物具有約6至約8的pH值，其中約7的pH值是優(yōu)選的?？梢允褂萌魏紊砩峡山邮艿哪軌驅⒃摻M合物的pH調節(jié)至希望值的緩沖液。這樣的緩沖液的實例包括但不限于磷酸氫二鈉、磷酸氫二鈉脫水物、和磷酸二氫鈉一水合物。另外可選的成分如EDTA和二甲基乙酰胺也可用到該組合物中。
本發(fā)明的藥物組合物可以包含一種或多種抗氧化劑，如丁基化羥基苯甲醚(BHA)。
當給藥時，regadenoson具有快速發(fā)作的作用和較短持續(xù)時間的作用。當以單次推注靜脈內(i.v.)注射中的一個極小量給予時，regadenoson是非常有用的。Regadenoson可以以少至10μg和高至2000μg或更大的量給予。優(yōu)化的劑量可以包括少至10μg和多至約1000μg或更多的regadenoson。更優(yōu)選地，優(yōu)化劑量為在從約100至約500μg范圍的regadenoson。優(yōu)選將regadenoson以選自約300μg、約400μg、約500μg、約600μg、和約700μg的量在單次推注注射中進行給予。當與通常以約140μg/kg/min的速度通過靜脈輸注連續(xù)給予的腺苷相比時，這些量出乎意料地小。與腺苷不同，相同劑量的regadenoson可在不考慮患者的體重的情況下可給予人類患者。因此，用于心肌顯像的單次相同量的regadenoson通過靜脈推注方式給予比依賴時間和體重的腺苷給予顯著更簡單，并且更不容易產(chǎn)生誤差。然而，給予人患者的regadenoson的劑量是由體重決定的。通常，基于體重的劑量的范圍為約0.05至約60μg/kg，并且更優(yōu)選為從約0.1至約30μg/kg。當以高達10μg/kg的量給予站立的患者和以高達20μg/kg的量給予仰臥的患者時，regadenoson尤其通常是良好耐受的。
在一個可替換具體實施方式
中，regadenoson可口服、靜脈內、通過表皮或通過任何其它本領域已知的用于給予治療劑的方式給予，其中靜脈推注給藥是優(yōu)選的。在一個具體實施方式
中，推注給藥在60秒或更短的時間內發(fā)生。在其他具體實施方式
中，推注給藥在約30秒或更短的時間內，并且更優(yōu)選在約20秒或更短的時間內，或在約10秒或更短的時間內發(fā)生。
Regadenoson的藥代動力學在下面的實施例中更詳細地進行披露。
實施例1本研究的目的是考察regadenoson在健康人受試者中的藥代動力學(PK)、藥效學(PD)、以及最大耐受量。
在該研究中包括了36個健康的男性受試者。這些受試者接受單次靜脈推注劑量的范圍在0.1至30μg/kg的regadenoson。在這個實施例和下面的實施例2和3中給予的regadenoson劑量是中性pH劑量，包含上面論述的優(yōu)選成分。Regadenoson的濃度在藥物給予后在各個時間收集的血漿樣品和24小時周期內收集的尿樣品中確定。ECG、血壓(BP)、和心率(HR)在給藥后記錄達24小時。不良事件(AE)在給藥后監(jiān)測達24小時并在7天后通過電話監(jiān)測。在對血漿濃度-時間采用三室PK模型和對心率的時間-過程采用Michaelis-Menten模型中利用了總體方法?？疾炝烁鞣N共變數(shù)對PK和PD模型參數(shù)的可能影響。
清除率(CL)的總體值估計為40.6L/h，其中腎清除率占總清除率的57％。Regadenoson分布的體積估計為83.3L。該模型評估了一個基線和一個最大增加值在HR方面為62和76bpm。引起在HR方面(效價)半最大增加值的regadenoson的濃度估計為12.4ng/mL。諸如體重指數(shù)、體重、年齡、和身高的共變數(shù)對PK或PD參數(shù)沒有影響。不良事件通常為輕微至中度、快速發(fā)作、較短持續(xù)時間，并且沒有一個需要醫(yī)療介入。它們包括腹部不適、胸部壓力/壓迫、頭暈、呼吸困難、潮紅、頭痛、換氣過度、惡心、心悸、以及嘔吐，并且隨著劑量水平增加。在仰臥位的最大耐受劑量為20μg/kg，而在站立位的最大耐受劑量為10μg/kg，其中在站立位的受試者中觀察到限制劑量的暈厥或接近暈厥。
這個實施例證實，regadenoson在健康男性受試者中是良好耐受的。缺少各個共變數(shù)對PK和PD模型參數(shù)的任何顯著影響表明用于regadenoson的基于單位的給藥量。
實施例2本研究的目的是考察regadenoson在經(jīng)歷臨床指示的心導管插入術的受試者中的藥代動力學(PK)和藥效學(PD)。
研究了36個經(jīng)歷臨床指示的冠狀動脈血管造影術的男性和女性受試者。受試者接受單次靜脈推注劑量的范圍在10至500μg的regadenoson。Regadenoson的濃度在藥物給予之前和之后的各個時間收集的血漿樣品中進行確定。利用冠脈內多普勒流量線(Dopplerflow wire)來測量ECG、平均冠脈峰值流速(APV)，在給藥后連續(xù)檢測血壓(BP)和心率(HR)達3小時。不良事件(AE)的發(fā)生在給藥后監(jiān)測大約3小時并在大約14天后通過電話進行監(jiān)測。在對血漿濃度、APV、以及HR數(shù)據(jù)采用PK和PD模型中利用了一種總體方法?？疾炝烁鞣N共變數(shù)對PK和PD模型參數(shù)的可能影響。
PK數(shù)據(jù)通過三室模型被最好地描述。清除率的總體值和分布的體積被估計分別為29.9L/h和68.1L。APV數(shù)據(jù)的PD模型包含了一種假想的作用室?；€和最大增加值在APV方面基于該數(shù)據(jù)被估計為16.5和105cm/秒，具有29.9ng/mL的效價(引起半最大作用的regadenoson的濃度)。該模型評估了從血漿至作用部位的分布速率常數(shù)的較小值(4min-1)，表示更快速的作用發(fā)作。一種Michaelis-Menten模型導致產(chǎn)生HR數(shù)據(jù)的最佳擬合，其中基線和最大增加值在HR方面估計為67和41bpm，而效價為27.5ng/mL。諸如體重指數(shù)、體重、年齡、和身高的共變數(shù)對PK或PD參數(shù)沒有顯著影響。少于受試者的一半(n＝17)報道了AE；3個或更多受試者報道的事件是胸不適(n＝3)、心動過速(n＝4)、以及在導管部位出血(n＝3)。
這些結果表明，regadenoson是一種有效的和良好耐受的冠狀血管擴張藥。缺少共變數(shù)對PK和PD模型參數(shù)的任何顯著影響表明用于regadenoson的基于單位的給藥量。
實施例3Regadenoson在心肌灌注顯像期間、在形成冠狀動脈系統(tǒng)的急性擴張下是一種選擇性A2-腺苷受體激動劑。A2A-腺苷受體活化被報道引起血小板聚集和嗜中性白細胞活化的抑制。
為了更完全地表征該藥物，在本研究中，我們確定用于結合和對人血小板和嗜中性白細胞(膜和完整細胞)、表達人A2A受體的CHO細胞(膜和完整細胞)、以及大鼠腦紋狀體膜的制劑中的regadenoson的功能性響應的親和力和效價值。為了比較，對基準A2A激動劑CGS21680的響應的平行測定與regadenoson的每個測定一起實施。測定結果報告在下面表1中。
表1用于regadenoson在A2A-腺苷受體的親和力[Ki]和效價[EC50或IC50]的值(平均值±SE)

1代替結合[3H]-ZM2413852代替結合[3H]-CG-S21680對regadenoson和CGS21680的響應在幅度上是相似的。在所有測定中，CGS21680比regadenoson稍微更有效(即，對于12個測定的EC50的值平均低于CGS21680的13倍)。從本研究中可以推斷，與CGS21680相同，regadenoson不僅是一種冠狀血管擴張藥，而且也是一種血小板聚集和嗜中性白細胞活化(即，發(fā)炎)的抑制劑。
權利要求
1.一種產(chǎn)生冠脈舒張而沒有外周血管舒張的方法，包括給予人單劑量的包含regadenoson和至少一種藥用賦形劑的藥物組合物，所述藥物組合物的給予量是足以使平均冠脈峰值流速增加至少約16.5cm/sec的量。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，所述單劑量的藥物組合物是通過靜脈推注給予的。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，所述單劑量的藥物組合物是在約10至約20秒內給予的。
4.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，給予的所述單劑量的藥物組合物的量足以使所述平均冠脈峰值流速增加的量的范圍為約16.5至約77.0cm/sec。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，所述單劑量的藥物組合物包括約10至約500微克的regadenoson。
6.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，所述單劑量的藥物組合物包括的regadenoson的量的范圍為約0.05至約60μg/kg。
7.根據(jù)權利要求1所述的方法，其中，人的心肌灌注顯像是在將所述單劑量的所述藥物組合物給予所述人之后實施的。
8.根據(jù)權利要求7所述的方法，進一步包括在一個時間將至少一種放射性核素給予所述人，其中所述時間選自由在所述人接受所述劑量的藥物組合物之前、給予所述劑量的藥物組合物的同時或在將所述劑量的藥物組合物給予所述人之后組成的組。
9.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中，所述放射性核素和所述單劑量的藥物組合物是分別給予所述人的。
10.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中，所述放射性核素和所述單劑量的藥物組合物是同時給予所述人的。
11.根據(jù)權利要求7所述的方法，其中，所述心肌檢查在所述單劑量的所述藥物組合物給予所述人后約1分鐘立即開始。
全文摘要
通過將一種包含regadenoson(一種腺苷A
文檔編號A61K49/22GK101076343SQ200580035640
公開日2007年11月21日 申請日期2005年10月19日 優(yōu)先權日2004年10月20日
發(fā)明者圖菲加·戈爾迪, 安·沃爾斯·奧姆斯特德, 劉曉悌, 路易斯·貝拉爾迪內利 申請人:Cv醫(yī)藥有限公司