專利名稱：用于經(jīng)皮輸送血管內(nèi)皮生長因子的微突出陣列的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明主要涉及經(jīng)皮試劑輸送系統(tǒng)和方法。更具體來說，本發(fā)明涉及用于經(jīng)皮輸送基于血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的試劑的設(shè)備和方法。
背景技術(shù)：
眾所周知，子癇前癥是高血壓、水腫和蛋白尿的綜合癥。子癇前癥影響著5到10％的孕婦并造成幾乎全部的胎兒發(fā)病率和死亡率。子癇前癥還造成每年世界上至少200,000個產(chǎn)婦死亡。子癇前癥在嚴重程度上有所不同，從輕度到威脅生命的程度。輕度子癇前癥可以通過臥床和經(jīng)常監(jiān)測來治療。對于中度到重度的情況來說，則推薦住院治療并且建議血壓藥物治療或抗驚厥藥物治療以防癲癇發(fā)作。如果達到威脅母親或胎兒生命的程度，則通常要中止妊娠并使胎兒早產(chǎn)。胎兒和胎盤的良好發(fā)育是由一些生長因子介導(dǎo)的。這些生長因子之一是血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)。VEGF是內(nèi)皮細胞特異性的促有絲分裂原、血管生成的誘導(dǎo)劑以及血管滲透性的介質(zhì)。 VEGF還發(fā)現(xiàn)對腎小球毛細血管的修復(fù)來說很重要。VEGF作為同型二聚體連接著兩個同源跨膜酪氨酸激酶受體之一、鰭狀酪氨酸激酶(Flt-1)和激酶結(jié)構(gòu)域受體(KDR)，它們在來自許多不同組織的內(nèi)皮細胞中以不同的形式表達。Flt-1(但不是KDR)通過促進胎盤形成的滋養(yǎng)層細胞而高度表達。胎盤生長因子(P1GF)是VEGF家族的成員，它也與胎盤的發(fā)育有關(guān)。P1GF通過細胞滋養(yǎng)層和合體滋養(yǎng)層表達并能夠引發(fā)內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和活化。P1GF作為同型二聚體連接著Flt-1受體，但不是KDR受體。P1GF和VEGF都有助于對胎盤發(fā)育來說至關(guān)重要的有絲分裂活性和血管生成。近來發(fā)現(xiàn)sFlt-1(Flt-1的剪切變異體)的水平在患有子癇前癥的孕婦胎盤組織樣品中會顯著升高。sFit-1已知能作為“生理凹穴(sink)”來對抗VEGF和PIGF，并且在子癇前癥或子癇癥的婦女中，sFlt-1會造成胎盤中這些必需的血管生成和有絲分裂因子的需要量發(fā)生損耗。有人認為過量的sFlt-1還會導(dǎo)致子癇癥，因為其和破壞了保持血腦屏障的內(nèi)皮細胞和/或生長在大腦脈絡(luò)叢的內(nèi)皮細胞，從而造成子癇癥婦女經(jīng)常出現(xiàn)的腦水腫或癲癇。參見PCT公開號WO2004/008946。因而給子癇前癥或子癇癥婦女施用各種VEGF基試劑和化合物以提高VEGF和PIGF水平，從而控制升高的sFlt-1的影響。例如公開號為WO 2004/008946的PCT申請和公開號為2002/0137680的美國申請中公開的、VEGF基試劑和化合物，在此引入作為參考。盡管VEGF基試劑在治療諸如子癇前癥這類疾病時很有效，但是所公開的輸送VEGF基試劑的現(xiàn)有技術(shù)方法，尤其是皮下注射法，也存在一些缺點和不足。一個主要缺點在于皮下注射是困難、疼痛且令人不舒服的過程，因而患者很難適應(yīng)。因此經(jīng)皮輸送法對施加VEGF基試劑和化合物來說提供了一種有效的替代性方法，否則其將需要通過皮下注射或靜脈輸液來輸送。這里使用的詞語“經(jīng)皮”是專業(yè)術(shù)語，指通過皮膚向局部組織或體循環(huán)系統(tǒng)輸送活性物質(zhì)或治療劑而基本上不用切開或刺透皮膚，如用手術(shù)刀切開或用皮下注射針穿刺。經(jīng)皮試劑輸送因而包括通過被動擴散以及基于外部能量源，如電(離子電滲療法)和超聲波(例如超聲透入療法)的輸送來進行的皮內(nèi)、皮下和表皮內(nèi)輸送。更為常用的是被動經(jīng)皮試劑輸送系統(tǒng)，通常包括含有高濃度活性試劑的藥物池。該池適合于與皮膚接觸，使得試劑通過皮膚擴散并進入患者的機體組織或血流中。如本領(lǐng)域所公知，經(jīng)皮藥物通量依賴于皮膚狀況、藥物分子的大小和理/化性質(zhì)、以及跨皮膚的濃度梯度。由于許多藥物具有低皮膚滲透性，經(jīng)皮輸送具有有限的應(yīng)用。這種低滲透性主要歸因于角質(zhì)層，即由脂雙層包圍的、扁平、充滿角蛋白纖維的死細胞(即角化細胞)構(gòu)成的皮膚最外層。脂雙層的這種高度有序化結(jié)構(gòu)賦予角質(zhì)層相對不易滲透的性質(zhì)。提高被動經(jīng)皮擴散試劑通量的一種常用方法是用試劑，一種皮膚滲透促進劑預(yù)處理皮膚。當(dāng)滲透促進劑施加到輸送所述試劑的體表時，會提高通過其的試劑通量。然而，這些方法在提高經(jīng)皮蛋白質(zhì)通量方面由于其尺寸原因而效率有限，至少對于較大的蛋白質(zhì)來說如此。還開發(fā)出了許多技術(shù)和裝置用以機械地穿刺或破壞最外層的皮膚，從而形成進入皮膚的途徑以便提高經(jīng)皮輸送的試劑量。例如No.3964482號美國專利中所公開的藥物輸送裝置，在此引入作為參考。采用微小的皮膚穿刺元件以提高經(jīng)皮試劑輸送的其它系統(tǒng)和設(shè)備公開于美國專利No.5879326、3814097、5250023、3964482，再頒No.25637，以及PCT申請WO 96/37155、WO 96/37256、WO96/17648、WO 97/03718、WO 98/11937、WO 98/00193、WO 97/48440、WO 97/48441、WO 97/48442、WO 98/001 93、WO 99/64580、WO98/28037、WO 98/29298、和WO 98/29365；所有文獻在此引入作為參考。所公開的系統(tǒng)和設(shè)備采用各種形狀和大小的穿刺元件來刺穿最外層的(即角質(zhì)層)皮膚。所公開的穿刺元件通常從一個薄而扁平的部件，如墊或片垂直延伸出來。該穿刺元件裝置通常極小，只有大約25-400微米的微突出長度和大約5-50微米的微突出厚度。所公開的系統(tǒng)通常還包括用于儲存試劑的儲液池和用于將試劑從所述儲液池中傳送通過角質(zhì)層的輸送系統(tǒng)，例如空心針頭或尖齒。這種裝置的一個實例公開于PCT No.WO 93/17754中，其具有液體試劑儲液池。如美國專利申請No.10/045842中公開，這里全文引入作為參考，可以將要輸送給對象或患者的活性試劑涂布在微突出物上，以代替包含在物理儲液池中。這就不再需要單獨的物理儲液池和開發(fā)專用于該儲液池的試劑制劑或組合物。因而本發(fā)明的一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，其有助于使VEGF基試劑最小侵入性地給藥于對象。因而本發(fā)明的一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，其可將VEGF皮內(nèi)輸送給對象。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，用于治療或預(yù)防子癇前癥或子癇癥。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種VEGF基制劑，用于皮內(nèi)輸送給對象。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，其包括微突出物，上面涂布有包括VEGF基制劑的生物相容性涂層。本發(fā)明的另一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，其包括適于吸納含VEGF基制劑的水凝膠制劑的凝膠膏。本發(fā)明還有另一個目的在于提供一種經(jīng)皮試劑輸送設(shè)備和方法，其包括固態(tài)形式的VEGF基制劑，其在經(jīng)由水凝膠輸送之前適于被復(fù)原。
發(fā)明概述按照上述目的以及以下將會提到的和將變得顯而易見的那些目的，根據(jù)本發(fā)明用于向?qū)ο蠼?jīng)皮輸送VEGF基試劑的設(shè)備和方法包括，具有微突出元件(或組件)的輸送系統(tǒng)，其包括適于刺穿角質(zhì)層進入下面的表皮層，或表皮和真皮層的多個微突出物(或其陣列)。在優(yōu)選的實施方式中，所述微突出元件包括其中設(shè)置有至少一種VEGF基試劑的生物相容性涂層。在另一種實施方式中，所述微突出元件包括具有至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑。而另一種實施方式中，所述微突出元件包括具有至少一種VEGF基試劑的固態(tài)制劑和水合水凝膠制劑。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述微突出元件的微突出物密度至少為大約10個微突出物/cm2，更優(yōu)選地，在至少大約200-2000個微突出物/cm2的范圍。在一種實施方式中，所述微突出元件由不銹鋼、鈦、鎳鈦合金、或類似的生物相容性材料制成。在另一種實施方式中，所述微突出元件由非導(dǎo)電性材料，如聚合物材料制成?；蛘?，所述微突出元件可涂布有非導(dǎo)電性材料，如Parylene，或疏水性材料，如Teflon，硅或其它低能材料。應(yīng)用于所述微突出元件上以形成固態(tài)生物相容性涂層的涂層制劑可包括水性或非水性制劑。優(yōu)選地，所述涂層制劑包括至少一種VEGF基試劑，其可溶解于生物相容性載體中或者懸浮于所述載體中。優(yōu)選地，所述、VEGF基試劑包括VEGF家族成員，包括但不限于VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF 148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方式中，VEGF基試劑包括VEGF 121。在本申請中，術(shù)語“VEGF基試劑”和“VEGF 121基試劑”包括但不限于重組VEGF 121，合成VEGF 121和VEGF 121鹽類。適于藥用的VEGF 121鹽類的實例包括但不限于，醋酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、乙酰丙酸鹽、氯化物、溴化物、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、乙醇酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、3-羥基異丁酸鹽、2-羥基異丁酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、丙酮酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽、硫酸鹽和磺酸鹽。優(yōu)選地，所述VEGF基試劑存在于所述涂層試劑中的濃度在大約1-30wt.％的范圍。所述固態(tài)生物相容性涂層(即微突出元件或產(chǎn)物)中包含的VEGF基試劑優(yōu)選在1-1000μg范圍，更優(yōu)選在1-500μg范圍，甚至更優(yōu)選在1-200μg范圍。優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值低于大約pH5.5或高于pH7.0。更優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值在大約pH2-pH5.5或者pH7.0-pH11的范圍。甚至更優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值在大約pH2.5-pH5.5或者pH7.0-pH10.5的范圍。在本發(fā)明的一些實施方式中，用于涂布所述微突出物的涂層制劑的粘度通過添加低揮發(fā)性配對離子而得以增加。在一種實施方式中，其中涂層制劑的pH小于pH5.5，所述VEGF基試劑帶正電，而增強粘性的配對離子包括酸。優(yōu)選地，所述酸性配對離子包括非揮發(fā)性的弱酸，其具有至少一個酸性pKa，Patm下熔點高于大約50℃，或者沸點高于大約170℃。合適的酸包括檸檬酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、葡糖醛酸、乳酸、蘋果酸、丙酮酸、酒石酸、丙醇二酸、以及延胡索酸。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述酸性配對離子包括強酸，其至少一個pKa小于大約2。這種酸的實例包括鹽酸、溴化氫、硝酸、磺酸、硫酸、馬來酸、磷酸、苯磺酸以及甲基磺酸。本發(fā)明的另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括弱酸，而至少一種配對離子包括非揮發(fā)性的弱酸。另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括強酸，而至少一種配對離子包括高揮發(fā)性、至少一個pKa高于大約2、Patm下熔點低于大約50℃，或沸點高于大約170℃的弱酸。這種酸的實例包括醋酸、丙酸、戊酸等等。所述酸性配對離子優(yōu)選的存在量在所述制劑的pH下足以中和存在于VEGF基試劑的上的正電荷。在另一個實施方式中，加入了過量的配對離子(作為游離酸或作為鹽)以控制pH值并提供足夠的緩沖能力。在本發(fā)明的另一種實施方式中，其中所述涂層制劑的pH值大于pH7.0，所述VEGF基試劑帶負電，而增粘配對離子包括堿。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方式中，所述堿性配對離子包括低揮發(fā)性的弱堿，其具有至少一個酸性pKa，Patm下熔點高于大約50℃，或者沸點高于大約170℃。合適的堿包括單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、甲基葡糖胺和葡糖胺。在另一種施方式中，所述配對離子包括強堿，其至少一個pKa大于大約12。合適的強堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣和氫氧化鎂。本發(fā)明的另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括強堿，而至少一種配對離子包括包括低揮發(fā)性的弱堿。另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括強堿，而至少一種配對離子包括高揮發(fā)性、至少一個pKa低于大約12、Patm下熔點低于大約50℃，或沸點高于大約170℃的弱堿。這種堿的實例包括氨水和嗎啉。在本發(fā)明所提到的實施方式中，堿性配對離子優(yōu)選在所述制劑的pH下足以中和存在于VEGF基試劑的上的負電荷。在另一個實施方式中，加入了過量的配對離子(作為游離酸或作為鹽)以控制pH值并提供足夠的緩沖能力。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種緩沖液。這種緩沖液的實例包括但不限于抗壞血酸、檸檬酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、葡糖醛酸、乳酸、蘋果酸、丙酮酸、酒石酸、延胡索酸、馬來酸、磷酸、丙三羧酸、丙二酸、己二酸、檸康酸、戊二酸、衣康酸、甲基反丁烯二酸、檸蘋酸、二羥甲基丙酸、惕備酸、甘油酸、甲基丙烯酸、異巴豆酸、β-羥丁酸、巴豆酸、當(dāng)歸酸、羥基丙酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、嗎啉、甲基葡糖胺、葡糖胺、以及其混合物。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種表面活性劑，可以為兩性離子的、兩性的、陽離子的、陰離子的或非離子的表面活性劑，包括但不限于月桂酰兩性基乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十二烷基三甲基銨(TMAC)、芐烷銨、氯化物、聚山梨醇酯類例如Tween 20和Tween 80，其它的山梨聚糖衍生物，如山梨聚糖lauratealkoxylated醇類，如laureth-4以及聚氧乙烯蓖麻油衍生物，如Cremophor EL。在本發(fā)明所述的實施方式中，表面活性劑的濃度優(yōu)選占涂層制劑的大約0.001-2wt.％的范圍。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種聚合物材料或具有兩性特性的聚合物，其包括但不限于，纖維素衍生物，羥基乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥基丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥基乙基甲基纖維素(HEMC)、或乙基羥基乙基纖維素(EHEC)以及pluronics。在本發(fā)明的一種實施方式中，涂層制劑中表現(xiàn)兩性特征的聚合物濃度優(yōu)選占涂層制劑的大約0.01-20wt.％，更優(yōu)選地，在大約0.03-10wt.％的范圍。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括選自以下組的親水性聚合物羥乙基淀粉、羧甲基纖維素以及右旋糖酐、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸鹽)、聚(正乙烯吡咯烷酮)、聚乙二醇的鹽類，以及其混合物，以及類似聚合物。在優(yōu)選實施方式中，涂層制劑中的親水聚合物濃度范圍大約為0.1-20wt.％，更優(yōu)選地，占涂層制劑的大約0.03-10wt.％。在本發(fā)明的另一種實施方式中，涂層制劑包括生物相容性載體，其可包括但不限于，人白蛋白、生物工程制的人白蛋白、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚組氨酸、木聚硫酸鹽、聚氨基酸、蔗糖、海藻糖、松三糖、棉子糖和水蘇糖。優(yōu)選地，涂層制劑中生物相容性載體的濃度范圍在大約在2-70wt.％，更優(yōu)選地，占涂層制劑的大約5-50wt.％。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括穩(wěn)定劑，其可包括但不限于，非還原糖、多糖或還原糖。適用于本發(fā)明的方法和組合物的非還原糖包括，例如蔗糖、海藻糖、水蘇糖或棉子糖。適用于本發(fā)明的方法和組合物的多糖包括，例如，右旋糖酐、可溶性淀粉、糊精和胰島素。適用于本發(fā)明的方法和組合物的還原糖包括，例如，單糖類，例如芹菜糖，阿拉伯糖，來蘇糖，核糖，毛地黃毒素糖，海藻糖，櫟醇，奎諾糖，鼠李糖，阿洛糖，阿卓糖，果糖，半乳糖，葡萄糖，古洛糖，金縷梅糖，艾杜糖，甘露糖，塔格糖等等；以及二糖類，例如櫻草糖，莢豆二糖，蕓香糖，綿棗兒二糖，纖維二糖，龍膽二糖，乳糖，乳果糖，麥芽糖，蜜二糖，槐糖，以及松二糖等等。優(yōu)選地，涂層制劑中所述穩(wěn)定劑與VEGF基試劑的濃度比在大約0.1-2.0∶1。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括血管收縮劑，其可包括但不限于，酰胺福林、cafaminol、環(huán)噴他明、脫氧腎上腺素、腎上腺素、苯賴加壓素、茚唑啉、美替唑啉、米多君、萘唑啉、nordefrin、二甲己胺、鳥氨加壓素、oxymethazoline、苯福林、苯乙醇胺、苯丙醇胺、六氫脫氧麻黃堿、偽麻黃堿、四氫唑啉、曲馬唑啉、異庚胺、泰馬唑啉、后葉加壓素、賽洛唑啉，以及其混合物。最優(yōu)選的血管收縮劑包括腎上腺素、萘唑啉、四氫唑啉、茚唑啉、美替唑啉、曲馬唑啉、泰馬唑啉、羥甲唑啉和賽洛唑啉。如果采用的話，所述血管收縮劑的濃度優(yōu)選占涂層制劑的大約0.1wt.％到10wt.％。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種“途徑開放調(diào)節(jié)劑”，其可包括但不限于，滲透劑(例如氯化鈉)，兩性離子化合物(例如氨基酸)，以及消炎劑，例如倍他米松21-磷酸二鈉鹽，曲安奈德21-磷酸二鈉，鹽酸氫可他酯，氫化可的松21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，帕拉米松磷酸二鈉和強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，以及抗凝血劑，例如檸檬酸，檸檬酸鹽(例如檸檬酸鈉)，糊精硫酸鈉，阿斯匹林和EDTA。優(yōu)選地，所述涂層制劑的粘度小于大約500厘泊并大于3厘泊。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述生物相容性涂層的厚度小于25微米，更優(yōu)選地，小于10微米，從所述微突出表面測量。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述輸送系統(tǒng)包括水凝膠制劑。優(yōu)選地，所述水凝膠制劑包含在凝膠膏中。在本發(fā)明的至少一種實施方式中，所述水凝膠制劑含有至少一種VEGF基試劑。優(yōu)選地，VEGF基試劑的濃度超出或小于飽和度。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述VEGF基試劑包括大約1-40wt.％的水凝膠制劑。優(yōu)選地，所述水凝膠制劑包括具有大分子聚合物網(wǎng)絡(luò)的水基水凝膠。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方式中，所述聚合物網(wǎng)絡(luò)包括但不限于，羥乙基淀粉、右旋糖酐、羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥乙基-甲基纖維素(HEMC)、乙基羥乙基纖維素(EHEC)、羧甲基纖維素(CMC)、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(正乙烯吡咯烷酮)以及pluronics。所述水凝膠制劑優(yōu)選包括至少一種表面活性劑，其可以是兩性離子的、兩性的、陽離子的、陰離子的或非離子的表面活性劑。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述表面活性劑包括月桂酰兩性基乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十二烷基三甲基銨(TMAC)、芐烷銨、氯化物、聚山梨醇酯類例如Tween 20和Tween 80，其它的山梨聚糖衍生物，如山梨醇月桂酸酯、以及烷氧基化醇類，如laureth-4。在另一種實施方式中，所述水凝膠制劑包括至少一種聚合物材料或具有兩性特性的聚合物，其包括但不限于，纖維素衍生物，羥基乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥基丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥基乙基甲基纖維素(HEMC)、或乙基羥基乙基纖維素(EHEC)以及pluronics。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述水凝膠制劑包括至少一種途徑開放調(diào)節(jié)劑，其可包括但不限于，滲透劑(例如氯化鈉)，兩性離子化合物(例如氨基酸)，以及消炎劑，例如倍他米松21-磷酸二鈉鹽，曲安奈德21-磷酸二鈉，鹽酸氫可他酯，氫化可的松21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，帕拉米松磷酸二鈉和強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，以及抗凝血劑，例如檸檬酸，檸檬酸鹽(例如檸檬酸鈉)，糊精硫酸鈉，阿斯匹林和EDTA。而本發(fā)明的另一種實施方式中，所述水凝膠制劑包括至少一種血管收縮劑，其包括但不限于腎上腺素、萘唑啉、四氫唑啉、茚唑啉、美替唑啉、曲馬唑啉、泰馬唑啉、羥甲唑啉、賽洛唑啉、酰胺福林、cafaminol、環(huán)噴他明、脫氧腎上腺素、腎上腺素、苯賴加壓素、茚唑啉、美替唑啉、米多君、萘唑啉、nordefrin、二甲己胺、鳥氨加壓素、oxymethazoline、苯福林、苯乙醇胺、phenylpropolamine、六氫脫氧麻黃堿、偽麻黃堿、四氫唑啉、曲馬唑啉、異庚胺、泰馬唑啉、后葉加壓素和賽洛唑啉，以及其混合物。而根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于輸送VEGF基試劑的輸送系統(tǒng)包括具有上和下表面的微突出元件，延伸穿過所述微突出元件的多個開口，以及從突起于所述微突出元件的下表面的多個微突出物。所述微突出元件進一步包括水凝膠制劑和具有至少一種VEGF基試劑，優(yōu)選為VEGF121的固態(tài)制劑。在一種實施方式中，所述固態(tài)制劑設(shè)置得接近于所述微突出元件的上表面。在另一種實施方式中，所述固態(tài)制劑設(shè)置得接近于所述微突出元件的下表面。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑，因而僅僅是一種水合作用機制。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述固態(tài)制劑是固體薄膜。優(yōu)選地，所述固體薄膜通過澆注以下物質(zhì)組成的液態(tài)制劑制成至少一種VEGF基試劑，一種聚合物材料，如羥乙基淀粉、右旋糖酐、羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥乙基-甲基纖維素(HEMC)、乙基羥乙基纖維素(EHEC)、羧甲基纖維素(CMC)、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(正乙烯吡咯烷酮)以及pluronics，一種增塑劑，例如甘油、丙二醇、聚乙二醇，一種表面活性劑，如Tween20和Tween80，以及一種揮發(fā)性溶劑，例如水、異丙醇、甲醇和乙醇。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述固態(tài)制劑由選自以下組的方法制成噴霧干燥法、凍干法、噴霧凍干法、以及超臨界流體萃取法。目前優(yōu)選的方法是噴霧凍干法。在所述實施方式中，生物相容性涂層適于通過合適的溶劑在最多大約15分鐘內(nèi)復(fù)原，優(yōu)選最多大約1分鐘內(nèi)復(fù)原。所述涂層制劑還優(yōu)選包括抗氧化劑。根據(jù)本發(fā)明的一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供具有微突出元件的輸送系統(tǒng)，所述微突出元件包括多個微突出物和具有至少一種VEGF基試劑的生物相容性涂層，(ii)向患者的皮膚施加所述涂層微突出元件，從而所述微突出物刺穿皮膚并將含試劑的涂層溶解于體液并釋放到皮膚中。所述涂層微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5秒到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件-凝膠膏組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，從而所述含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層。優(yōu)選地，所述涂層微突出元件-凝膠膏組件(包括含試劑的水凝膠制劑)放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5秒到24小時。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層，并且所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑，因而其僅僅是一種水合作用機制。優(yōu)選地，所述涂層微突出元件-凝膠膏組件(包括含試劑的水凝膠制劑)放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，以及(iii)將所述凝膠膏放在施加的微突出元件上，從而含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述涂層微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層，并且所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑，因而其僅僅是一種水合作用機制。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，(iii)從患者皮膚上去掉所述微突出元件；以及(iv)將所述凝膠膏放在預(yù)處理的皮膚上面，從而含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。而本發(fā)明的另一種實時方式中，將具有含VEGF基試劑的生物相容性涂層的微突出元件施加到患者皮膚上，然后將具有含VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏放在所施加的微突出元件上面，從而使所述含試劑的涂層溶解于體液并釋放到皮膚中，并且所述含試劑的水凝膠制劑進入并通過角質(zhì)層中由所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在本發(fā)明的另一種實施方式中，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供微突出組件，其具有微突出元件，水凝膠制劑和具有至少一種VEGF基試劑的固態(tài)制劑，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層，水凝膠制劑水合化并從固態(tài)制劑中釋放所述試劑，而所述試劑入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘秒到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在本發(fā)明的另一種實施方式中，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供微突出組件，其具有微突出元件，以及具有至少一種VEGF基試劑的固態(tài)制劑，(ii)提供具有水凝膠制劑的凝膠膏，(iii)向患者的皮膚施加所述微突出組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層；以及(iv)將所述凝膠膏放在所施加的微突出組件上，從而水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并釋放固態(tài)制劑中包含的試劑，所述試劑和水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘秒到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。優(yōu)選地，這里使用的微突出元件(和組件)以及微突出元件-凝膠膏組件通過調(diào)節(jié)器施加到患者的皮膚上。優(yōu)選地，通過上述方法皮內(nèi)輸送的VEGF基試劑在每劑量單元大約1-500μg范圍，更優(yōu)選在大約1-100μg范圍，甚至更優(yōu)選地，在大約1-50μg的范圍。
附圖簡要說明通過以下對本發(fā)明優(yōu)選實施方式更新具體的說明，其它特征和優(yōu)點將更加顯而易見，如附圖中所示，其中整個附圖中同類的附圖標記通常指相同的部件或元件，其中

圖1是微突出元件的一個實施例的部份透視圖；圖2是圖1中所示的微突出元件的透視圖，其中根據(jù)本發(fā)明，微突出物上沉積有涂層；圖3是具有粘性背襯的微突出元件的側(cè)視圖；圖4是其中設(shè)有微突出元件的固定環(huán)的側(cè)視圖；圖5是圖4中所示的固定環(huán)的透視圖；圖6是敷貼器和固定環(huán)的分解透視圖；圖7是表示VEGF基試劑的電荷性質(zhì)的曲線圖；圖8和9是表示VEGF基試劑的靜電荷物質(zhì)摩爾比的曲線圖。
發(fā)明詳細說明在詳細描述本發(fā)明之前，應(yīng)當(dāng)明白的是，本發(fā)明并不僅限于特別舉例的材料、方法或結(jié)構(gòu)，因為它們當(dāng)然可以有所改變。因此，盡管在實施本發(fā)明時也可以采用這里記載的多種材料和方法的類似或等價物，但優(yōu)選的還是這里記載的材料和方法。還應(yīng)當(dāng)明白的是，這里使用的術(shù)語僅用于描述本發(fā)明的特別實施方式，沒有限制的含義。除非另外定義，這里使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同。此外，這里引用的所有公開出版物、專利和專利申請，無論在前文還是下文中，都引入其全文作為參考。最后，本說明書和所附權(quán)利要求中使用的單數(shù)形式“一”、“一個”和“所述”也包括所指對象的復(fù)數(shù)，除非上下文以其它方式清楚地指出。因此，例如“VEGF基試劑”包括兩種或多種這種試劑，“微突出物”包括兩種或多種這種微突出物等等。
定義這里使用的術(shù)語“經(jīng)皮”表示將試劑輸入和/或通過皮膚用以局部或全身治療。因此術(shù)語“經(jīng)皮”表示并包括將試劑，例如肽，通過被動擴散以及基于能量擴散的輸送，例如離子電滲療法和超聲透入療法，皮內(nèi)、皮下和表皮內(nèi)輸送進入和/或透過皮膚。這里使用的術(shù)語“經(jīng)皮通量”指經(jīng)皮輸送的速率。這里使用的術(shù)語“對象”指哺乳動物，包括但不限于人或非人哺乳動物，例如牛、馬、犬、綿羊或貓。術(shù)語“對象”還包括懷孕、產(chǎn)后和非懷孕的哺乳動物。這里使用的術(shù)語“子癇前癥”指一種多系統(tǒng)疾病，特征在于由于懷孕或近期懷孕的影響，具有高血壓伴隨蛋白尿或水腫或二者均有，腎小球機能障礙，腦水腫，肺水腫，肝水腫，或者凝血異常。子癇前癥通常出現(xiàn)在妊娠第20周，并通常表現(xiàn)為以下綜合的癥狀(1)妊娠20周后收縮壓(BP)140mmHg，舒張壓BP 90mmHg，(2)新發(fā)蛋白尿(試紙尿檢1+，24小時采集尿樣中蛋白質(zhì)＞300mg，或者單個隨機尿樣的蛋白質(zhì)/肌酸酐比＞0.3)，以及(3)產(chǎn)后12周高血壓和蛋白尿消失。子癇前癥的癥狀還可以包括腎功能紊亂和腎小球內(nèi)皮增生或者肥大。在子癇前癥中，高血壓和蛋白尿通常在七天內(nèi)相繼發(fā)生。在嚴重的子癇前癥中，嚴重高血壓、嚴重蛋白尿和HELLP癥狀(溶些、肝臟酶類升高、低血小板)或者子癇癥會同時發(fā)生或者每次只出現(xiàn)一種癥狀。這里使用的術(shù)語“子癇前癥癥狀”和“子癇癥癥狀”指由于懷孕或近期懷孕的影響，而產(chǎn)生的任何上述的癥狀，包括癲癇和昏迷。這里使用的術(shù)語“治療”指出于預(yù)防和/或治療目的施加的治療劑或藥物組合物。這里使用的術(shù)語“治療性治療”指對已經(jīng)患病的對象進行治療以改善對象的狀況。優(yōu)選地，所述對象由于表現(xiàn)出任何上述的特征性癥狀而被診斷出患有子癇前癥或子癇癥。這里使用的術(shù)語“預(yù)防性治療”指對還沒有罹患，但容易或者有風(fēng)險患上特定疾病的對象進行預(yù)防性的治療。這里使用的術(shù)語“血管內(nèi)皮生長因子”和“VEGF”指一種哺乳動物生長因子，其與美國專利No.5332671、5240848、5194596和5219739中定義的生長因子具有同源性并具有VEGF生物學(xué)活性，所述文獻在此特別引入作為參考。內(nèi)源性VEGF的生物學(xué)活性包括促進血管內(nèi)皮細胞或臍靜脈內(nèi)皮細胞的選擇性生長以及誘導(dǎo)血管新生。這里使用的術(shù)語“VEGF基試劑”和“VEGF 121基試劑”包括但不限于，所有VEGF家族的成員，包括但不限于VEGF 206、VEGF189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF 148、VEGF 145、VEGF 121、bVEGF 120、bVEGF 164、hVEGF 121和hVEGF 165的異型體，和鹽類、突變體、類似物、簡單衍生物以及其組合。因此術(shù)語“VEGF基試劑”和“VEGF 121基試劑”包括但不限于，重組VEGF 121、合成VEGF 121和VEGF 121鹽類。制藥學(xué)上適用的VEGF 121鹽類實例包括但不限于醋酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、乙酰丙酸鹽、氯化物、溴化物、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、]乙醇酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、3-羥基異丁酸鹽、2-羥基異丁酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、丙酮酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽、硫酸鹽和磺酸鹽。應(yīng)當(dāng)明白的是，不止一種VEGF基試劑可以加入本發(fā)明的試劑來源、儲液池和/或涂層中，并且使用術(shù)語“VEGF基試劑”絕不排除使用兩種或多種這類試劑。這里使用的術(shù)語“生物學(xué)有效量”或“治療有效量”指需要影響預(yù)期的治療結(jié)果，通常是有益效果的VEGF基試劑的量或流速。因而本發(fā)明涂層中使用的VEGF基試劑量是用以輸送治療有效量的VEGF基試劑以獲得預(yù)期治療結(jié)果所必需的量。實踐中，這根據(jù)被輸送的特定VEGF基試、輸送位點、治療情況的嚴重程度、預(yù)期的療效以及從涂層向皮膚組織輸送VEGF基試劑的釋放動力學(xué)而有所不同。優(yōu)選地，向患子癇前癥或子癇癥的對象施加的治療有效量的VEGF基試劑足以使這里所述的子癇前癥或子癇癥的癥狀在質(zhì)或量上減輕。這里使用的術(shù)語“協(xié)同輸送”指在VEGF基試劑輸送之前，VEGF基試劑經(jīng)皮通量之前和過程中，VEGF基試劑經(jīng)皮通量過程中，VEGF基試劑經(jīng)皮通量過程中和之后，和/或VEGF基試劑經(jīng)皮通量之后，經(jīng)皮施加的輔助試劑。此外，涂層和/或制劑中可以配制兩種或多種VEGF基試劑，使得VEGF基試劑協(xié)同輸送。這里使用的術(shù)語“微突出物”和“微凸起”指適于刺穿或割開對象，特別是或哺乳動物體，更特別是人的皮膚角質(zhì)層進入下面的表皮層、或者表皮層和真皮層的穿刺元件。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述穿刺元件的突出長度小于1000微米。在另一種實施方式中，所述穿刺元件的突出長度小于500微米，更優(yōu)選小于250微米。所述微突出物還具有大約25-500微米范圍內(nèi)的寬度(圖1中表示為“W”)，以及大約10-100微米范圍內(nèi)的厚度。所述微突出物可以制成不同的形狀，例如針頭、刀尖、釘頭、打孔器、以及其組合。這里使用的術(shù)語“微突出元件”通常指包括多個設(shè)置成陣列的微突出物用以刺穿角質(zhì)層的微突出物陣列。所述微突出元件可以這樣制成從薄片中蝕刻或沖出多個微突出物，然后將微突出物從薄片平面中折疊或彎曲出來形成一種構(gòu)型，如圖1所示。所述微突出元件還可以以其它已知的方式制成，例如通過制成一個或多個長條，沿每個長條的邊緣具有微突出物，如美國專利No.6050988中公開，這里全文引入作為參考。這里使用的術(shù)語“涂層制劑”是指并且包括一種自由流動的組合物或混合物，其用以涂覆所述微突出物和/或其陣列。優(yōu)選地，所述涂層制劑包括至少一種VEGF基試劑，其可以處于所述制劑的溶液或懸液中。這里使用的術(shù)語“生物相容性涂層”和“固體涂層”是指并且包括基本上呈固態(tài)的“涂層制劑”。這里使用的術(shù)語“固態(tài)制劑”是指并且包括由澆注形成的固體薄膜，以及由噴霧干燥法、凍干法、噴霧凍干法以及超臨界流體萃取法制成的粉末或粉餅。如上面所指出，本發(fā)明主要包括一種輸送系統(tǒng)，其包括具有多個微突出物(或其陣列)、適于刺穿角質(zhì)層進入下層的表皮層或表皮和真皮層的微突出元件(或系統(tǒng))。所述微突出元件(或系統(tǒng))包括至少一種試劑來源或試劑輸送介質(zhì)(即生物相容性涂層、水凝膠制劑、或固態(tài)制劑)。在優(yōu)選地實施方式中，所述微突出元件包括設(shè)置在上面的生物相容性涂層。所述的“子癇前癥”是一種多系統(tǒng)疾病，特征在于由于懷孕或近期懷孕的影響，具有高血壓伴隨蛋白尿或水腫或二者均有，腎小球機能障礙，腦水腫，肝水腫，肺水腫，或者凝血異常。子癇前癥通常出現(xiàn)在妊娠第20周。通常伴隨子癇前癥發(fā)生的癥狀包括(1)妊娠20周后收縮壓(BP)140mmHg，舒張壓BP 90mmHg，(2)新發(fā)蛋白尿(試紙尿檢1+，24小時采集尿樣中蛋白質(zhì)＞300mg，或者單個隨機尿樣的蛋白質(zhì)/肌酸酐比＞0.3)，以及(3)產(chǎn)后12周高血壓和蛋白尿消失。子癇前癥的癥狀還可以包括腎功能紊亂和腎小球內(nèi)皮增生或者肥大。嚴重子癇前癥通常定義為(1)舒張壓BP 110mmHg，或者(2)蛋白尿，特征在于通過試紙尿檢，24小時采集尿樣中蛋白質(zhì)測量值為3.5g或以上，或者兩個試紙檢測的隨機尿樣蛋白質(zhì)至少為3+。在子癇前癥中，高血壓和蛋白尿通常在七天內(nèi)相繼發(fā)生。在嚴重的子癇前癥中，嚴重高血壓、嚴重蛋白尿和HELLP癥狀(溶血、肝臟酶類升高、低血小板)或者子癇癥會同時發(fā)生或者每次只出現(xiàn)一種癥狀。如上面所詳細論述，本發(fā)明的關(guān)鍵優(yōu)點在于所述輸送系統(tǒng)系統(tǒng)地輸送VEGF基試劑給對象，特別是人類患者，從而所述VEGF基試劑至少在一種所述子癇前癥和/或子癇癥的癥狀方面產(chǎn)生質(zhì)或量的減輕?，F(xiàn)在參見圖1，表示了一種用于本發(fā)明的微突出元件30的實施方式。如圖1所示，微突出元件30包括具有多個微突出物34的微突出陣列32。所述微突出物34優(yōu)選以大致90°的角度從薄片中伸出，所述薄片在所示實施方式中包括開口38。根據(jù)本發(fā)明，薄片36可以加入輸送貼片中，該貼片包括用于薄片36的背襯40，還可以另外包括粘合劑16用以將貼片粘到皮膚上(參見圖3)。在該實施方式中，微突出物34這樣制成從薄金屬片36中蝕刻或沖出多個微突出物34，然后將微突出物34從薄片36的平面中彎折出來。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述微突出元件30具有至少大約10個微突出物/cm2的微突出物密度，更優(yōu)選地，在至少大約200-2000個微突出物/cm2的范圍。優(yōu)選地，試劑通過的每單位面積的開口數(shù)目至少大約為10個開口/cm2，小于大約2000個開口/cm2。如上面所指出，微突出物34優(yōu)選具有小于1000微米的突出長度。在一種實施方式中，微突出物34的長度小于500微米，更優(yōu)選地小于250微米。所述微突出物34還優(yōu)選具有大約25-500微米范圍內(nèi)的寬度，以及大約10-100微米范圍內(nèi)的厚度。為了提高所述微突出元件30的生物相容性(例如，減少對象皮膚使用后的出血和刺激感)，在本發(fā)明的一種實施方式中，微突出物34優(yōu)選長度小于145μm，更優(yōu)選在大約50-145μm的范圍，甚至更優(yōu)選在大約70-140μm的范圍。另外，所述微突出元件30包括微突出物密度優(yōu)選大于100個微突出物/cm2的陣列，更優(yōu)選的范圍在大約200-3000個微突出物/cm2。所述微突出元件30可以由各種金屬制成，例如不銹鋼、鈦、鎳鈦合金、或類似的生物相容性材料。根據(jù)本發(fā)明，所述微突出元件30還可以由非導(dǎo)電性材料，如聚合物材料制成。或者，所述微突出元件可涂布有非導(dǎo)電性材料，如Parylene，或疏水性材料，如Teflon，硅或其它低能材料。所述疏水材料和相連的基底(例如光刻膠)層列于美國申請No.60/484142中，這里引入作為參考。本發(fā)明可以采用的微突出元件包括但不限于，美國專利No.6083196、6050988、6091975中公開的元件，這里全文引入作為參考。本發(fā)明可以采用的其它微突出元件包括利用硅芯片蝕刻技術(shù)蝕刻硅或利用蝕刻好微模具模制形成的元件，所述蝕刻好的微模具例如美國專利No.5879326中公開的元件，這里全文引入作為參考。根據(jù)本發(fā)明，要給藥于受體的VEGF基試劑可以包含在生物相容性涂層中，該涂層置于微突出元件30上或包含在水凝膠制劑中，或者同時包含在生物相容性涂層和水凝膠制劑中。在另一種實施方式中，其中所述微突出元件包括含試劑的固態(tài)制劑，所述VEGF基試劑可以包含在生物相容性涂層、水凝膠制劑或者固態(tài)制劑中，或者同時在上述三種輸送介質(zhì)中。根據(jù)本發(fā)明，在至少一種上述輸送介質(zhì)中包含有至少一種VEGF基試劑。輸送介質(zhì)以及其微突出系統(tǒng)中使用的VEGF基試劑的量應(yīng)當(dāng)為，輸送治療有效量的VEGF基試劑以獲得預(yù)期效果所必需的量。實踐中，這依據(jù)VEGF基試劑、輸送位點、病情嚴重程度、以及預(yù)期療效而有很大的不同。現(xiàn)在參見圖2，其表示了一種具有微突出物34的微突出元件30，該微突出物包括上面設(shè)有VEGF基試劑的生物相容性涂層35。根據(jù)本發(fā)明，涂層35可以將各個微突出物34部分或全部覆蓋。例如，涂層35可以以干燥的形式涂布在微突出物34上。涂層35也可以在微突出物34成型之前或之后施加。根據(jù)本發(fā)明，涂層35可以通過各種已知的方法施加到微突出物34上。優(yōu)選地，所述涂層僅僅施加到那些刺穿皮膚的微突出元件30或微突出34的部分(例如，尖端部39)。一種這樣的涂層方法包括蘸涂法。蘸涂法是一種通過將微突出物34部分或全部浸入涂層溶液中來涂布所述微突出物的方式。利用部分浸入技術(shù)，可以將涂層35僅限制在微突出物34的尖端部39。另一種涂層方法包括滾涂法，其采用了滾涂機構(gòu)，同樣可將涂層35限制在微突出物34的尖端部39。滾涂法在美國申請No.10/099604(公開號2002/0132054)中公開，這里全文引入作為參考。如所述申請中詳細討論的那樣，所公開的滾涂方法提供了一層在皮膚穿刺過程中不易從微突出物34上脫去的光滑涂層。根據(jù)本發(fā)明，微突出物34可進一步包括適于吸收和/或增加涂層35的體積的裝置，例如開口(未示出)、凹槽(未示出)、表面不平整設(shè)置(未示出)或類似的修飾，其中所述裝置增加了表面積，上面可以沉積更多量的涂層。在本發(fā)明范圍內(nèi)可以采用的另一種涂層方法包括噴涂法。根據(jù)本發(fā)明，噴涂法可包括制備涂層組合物的氣溶膠懸液。在一種實施方式中，將液滴大小大約為10到200微微升的氣溶膠懸液噴灑到微突出物10上然后干燥。還可以采用模式涂層法來涂布微突出物34。應(yīng)用模式涂布法可采用分配系統(tǒng)來將沉積液體置于微突出物表面上。沉積液體的量優(yōu)選在0.1到20納升/微突出物的范圍。合適的精量液體分配器在美國專利No.5916524、5743960、5741554和5738728中公開，這里全文引入作為參考。微突出物涂層制劑或溶液還可以利用噴墨技術(shù)來施加，其采用的是通常使用電場控制的已知電磁閥分配器、選擇性流體動力裝置和設(shè)置裝置。來自印刷工業(yè)或本領(lǐng)域已知的其它類似液體分配技術(shù)也可以用來施加本發(fā)明的模式涂層?，F(xiàn)在參見圖4和5，對于存放和應(yīng)用來說，微突出元件30優(yōu)選通過粘性件6懸置在固定環(huán)40中，如美國申請No.09/976762(公開號為2002/0091357)中所詳細記載，這里全文引入作為參考。在固定環(huán)40中安裝好微突出元件30后，將該微突出元件30放到患者皮膚上。優(yōu)選地，利用沖擊式敷貼器45，如圖6所示并在美國未審專利申請No.09/976978中有所記載，將微突出元件30貼到患者的皮膚上，這里全文引入該申請作為參考。如上所述，根據(jù)本發(fā)明的一種實施方式，施加到微突出元件30上形成固體生物相容性涂層的涂層制劑可包括具有至少一種VEGF基試劑的水溶液和非水溶液制劑。根據(jù)本發(fā)明，VEGF基試劑可溶解于生物相容性載體中或者懸浮在該載體內(nèi)?，F(xiàn)在參見圖7，表示了一種酸性pKa為25、堿性pKa為23的蛋白質(zhì)，VEGF 121的預(yù)測電荷圖。如圖7所示，在pH值6.0時，該蛋白質(zhì)表現(xiàn)出零凈電荷。該位點也稱作等電點或pI?，F(xiàn)在參見圖8，表示了VEGF 121的凈電荷物質(zhì)的預(yù)測摩爾比。如圖8所示，中性物質(zhì)僅明顯存在于pH5.5到pH7.0的pH范圍內(nèi)(也可參見圖9)。在該pH值范圍內(nèi)，預(yù)計蛋白質(zhì)會從溶液中沉淀出來。因而該數(shù)據(jù)反映出，在pH值低于大約pH5.5或高于pH7.0時，可實現(xiàn)VEGF 121的溶解度與適于涂布在本發(fā)明的微突出物陣列上的制劑相協(xié)調(diào)。因此，本發(fā)明涂層制劑的優(yōu)選pH值范圍在pH2-pH5.5或pH7.0-pH11。優(yōu)選地，VEGF基試劑包括VEGF家族成員，包括但不限于VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF 148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類、突變體、類似物和簡單衍生物。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方式中，VEGF基試劑包括VEGF 121。在本申請全文中，術(shù)語VEGF基試劑”和“VEGF 121基試劑”包括但不限于重組VEGF 121，合成VEGF 121和VEGF 121鹽類。適于藥用的VEGF 121鹽類的實例包括但不限于，醋酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、乙酰丙酸鹽、氯化物、溴化物、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、]乙醇酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、3-羥基異丁酸鹽、2-羥基異丁酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、丙酮酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽、硫酸鹽和磺酸鹽。優(yōu)選地，所述VEGF基試劑存在于所述涂層試劑中的濃度在大約1-30wt.％的范圍。所述固態(tài)生物相容性涂層(即微突出元件或產(chǎn)物)中包含的VEGF基試劑優(yōu)選在1-1000μg范圍，更優(yōu)選在1-500μg范圍，甚至更優(yōu)選在1-200μg范圍。優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值低于大約pH5.5或高于pH7.0。更優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值在大約pH2-pH5.5或者pH7.0-pH11的范圍。甚至更優(yōu)選地，所述涂層制劑的pH值在大約pH2.5-pH5.5或者pH7.0-pH10.5的范圍。在本發(fā)明的一些實施方式中，用于涂布所述微突出物的涂層制劑的粘度通過添加低揮發(fā)性配對離子而得以增加。在一種實施方式中，其中涂層制劑的pH小于pH5.5，所述VEGF基試劑帶正電，而增強粘性的配對離子包括酸。優(yōu)選地，所述酸性配對離子包括非揮發(fā)性的弱酸，其具有至少一個酸性pKa，Patm下熔點高于大約50℃，或者沸點高于大約170℃。合適的酸包括檸檬酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、葡糖醛酸、乳酸、蘋果酸、丙酮酸、酒石酸、丙醇二酸、以及延胡索酸。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述酸性配對離子包括強酸，其至少一個pKa小于大約2。這種酸的實例包括鹽酸、溴化氫、硝酸、磺酸、硫酸、馬來酸、磷酸、苯磺酸以及甲基磺酸。本發(fā)明的另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括弱酸，而至少一種配對離子包括包括非揮發(fā)性的弱酸。另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括強酸，而至少一種配對離子包括高揮發(fā)性、至少一個pKa高于大約2、Patm下熔點低于大約50℃，或沸點高于大約170℃的弱酸。這種酸的實例包括醋酸、丙酸、戊酸等等。所述酸性配對離子優(yōu)選的存在量在所述制劑的pH下足以中和存在于VEGF基試劑的上的正電荷。在另一個實施方式中，加入了過量的配對離子(作為游離酸或作為鹽)以控制pH值并提供足夠的緩沖能力。在本發(fā)明的另一種實施方式中，其中所述涂層制劑的pH值大于pH7.0，所述VEGF基試劑帶負電，而增粘配對離子包括堿。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方式中，所述堿性配對離子包括低揮發(fā)性的弱堿，其具有至少一個酸性pKa，Patm下熔點高于大約50℃，或者沸點高于大約170℃。合適的堿包括單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、甲基葡糖胺和葡糖胺。在另一種施方式中，所述配對離子包括強堿，其至少一個pKa大于大約12。合適的強堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣和氫氧化鎂。本發(fā)明的另一種實施方式涉及配對離子混合物，其中至少一種配對離子包括強堿，而至少一種配對離子包括低揮發(fā)性的堿。另一種實施方式涉及配對離子的混合物，其中至少一種配對離子包括強堿，而至少一種配對離子包括高揮發(fā)性、至少一個pKa低于大約12、Patm下熔點低于大約50℃，或沸點高于大約170℃的弱堿。這種堿的實例包括氨水和嗎啉。在本發(fā)明所提到的實施方式中，堿性配對離子優(yōu)選在所述制劑的pH下足以中和存在于VEGF基試劑的上的負電荷。在另一個實施方式中，加入了過量的配對離子(作為游離酸或作為鹽)以控制pH值并提供足夠的緩沖能力。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種緩沖液。這種緩沖液的實例包括但不限于抗壞血酸、檸檬酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、葡糖醛酸、乳酸、蘋果酸、丙酮酸、酒石酸、延胡索酸、馬來酸、磷酸、丙三羧酸、丙二酸、己二酸、檸康酸、戊二酸、衣康酸、甲基反丁烯二酸、檸蘋酸、二羥甲基丙酸、惕各酸、甘油酸、甲基丙烯酸、異巴豆酸、β-羥丁酸、巴豆酸、當(dāng)歸酸、羥基丙酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、嗎啉、甲基葡糖胺、葡糖胺、以及其混合物。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種表面活性劑，可以為兩性離子的、兩性的、陽離子的、陰離子的或非離子的表面活性劑，包括但不限于月桂酰兩性基乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十二烷基三甲基銨(TMAC)、氯化芐烷銨、聚山梨醇酯類例如Tween 20和Tween 80，其它的山梨聚糖衍生物，如山梨聚糖lauratealkoxylated醇類，如laureth-4以及聚氧乙烯蓖麻油衍生物，如Cremophor EL。在本發(fā)明所述的實施方式中，表面活性劑的濃度優(yōu)選在涂層制劑的大約0.001-2wt.％的范圍。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種聚合物材料或具有兩性特性的聚合物，其包括但不限于，纖維素衍生物，羥基乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥基丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥基乙基甲基纖維素(HEMC)、或乙基羥基乙基纖維素(EHEC)以及pluronics。在本發(fā)明的一種實施方式中，涂層制劑中表現(xiàn)兩性特征的聚合物濃度優(yōu)選占涂層制劑的大約0.01-20wt.％，更優(yōu)選地，在大約0.03-10wt.％的范圍。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括選自以下組的親水性聚合物羥乙基淀粉、羧甲基纖維素以及右旋糖酐、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸鹽)、聚(正乙烯吡咯烷酮)、聚乙二醇的鹽類，以及其混合物，以及類似聚合物。在優(yōu)選實施方式中，涂層制劑中的親水聚合物濃度范圍大約為0.1-20wt.％，更優(yōu)選地，占涂層制劑的大約0.03-10wt.％。在本發(fā)明的另一種實施方式中，涂層制劑包括生物相容性載體，其可包括但不限于，人白蛋白、生物工程制的人白蛋白、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚組氨酸、木聚硫酸鹽、聚氨基酸、蔗糖、海藻糖、松三糖、棉子糖和水蘇糖。優(yōu)選地，涂層制劑中生物相容性載體的濃度范圍在大約在2-70wt.％，更優(yōu)選地，占涂層制劑的大約5-50wt.％。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括穩(wěn)定劑，其可包括但不限于，非還原糖、多糖或還原糖。適用于本發(fā)明的方法和組合物的非還原糖包括，例如蔗糖、海藻糖、水蘇糖或棉子糖。適用于本發(fā)明的方法和組合物的多糖包括，例如，右旋糖酐、可溶性淀粉、糊精和胰島素。適用于本發(fā)明的方法和組合物的還原糖包括，例如，單糖類，例如芹菜糖，阿拉伯糖，來蘇糖，核糖，毛地黃毒素糖，海藻糖，櫟醇，奎諾糖，鼠李糖，阿洛糖，阿卓糖，果糖，半乳糖，葡萄糖，古洛糖，金縷梅糖，艾杜糖，甘露糖，塔格糖等等；以及二糖類，例如櫻草糖，莢豆二糖，蕓香糖，綿棗兒二糖，纖維二糖，龍膽二糖，乳糖，乳果糖，麥芽糖，蜜二糖，槐糖，以及松二糖等等。優(yōu)選地，涂層制劑中所述穩(wěn)定劑與VEGF基試劑的濃度比在大約0.1-2.0∶1。在另一種實施方式中，所述涂層制劑包括血管收縮劑，其可包括但不限于，酰胺福林、cafaminol、環(huán)噴他明、脫氧腎上腺素、腎上腺素、苯賴加壓素、茚唑啉、美替唑啉、米多君、萘唑啉、nordefrin、二甲己胺、鳥氨加壓素、oxymethazoline、苯福林、苯乙醇胺、苯丙醇胺、六氫脫氧麻黃堿、偽麻黃堿、四氫唑啉、曲馬唑啉、異庚胺、泰馬唑啉、后葉加壓素、賽洛唑啉，以及其混合物。最優(yōu)選的血管收縮劑包括腎上腺素、萘唑啉、四氫唑啉、茚唑啉、美替唑啉、曲馬唑啉、泰馬唑啉、羥甲唑啉和賽洛唑啉。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)明白，向涂層制劑及本發(fā)明的固體生物相容性涂層添加血管收縮劑特別有助于防止在使用微突出元件或陣列后發(fā)生出血，并通過減少應(yīng)用部位的血液流動和減小從該皮膚部位進入體循環(huán)的吸收速率而延長VEGF基試劑的藥代動力學(xué)。如果采用的話，所述學(xué)管收縮劑的濃度優(yōu)選占涂層制劑的大約0.1wt.％到10wt.％。在本發(fā)明的另一種實施方式中，所述涂層制劑包括至少一種“途徑開放調(diào)節(jié)劑”，其可包括但不限于，滲透劑(例如氯化鈉)，兩性離子化合物(例如氨基酸)，以及消炎劑，例如倍他米松21-磷酸二鈉鹽，曲安奈德21-磷酸二鈉，鹽酸氫可他酯，氫化可的松21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-磷酸二鈉鹽，甲基強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，帕拉米松磷酸二鈉和強的松龍21-琥珀酸鈉鹽，以及抗凝血劑，例如檸檬酸，檸檬酸鹽(例如檸檬酸鈉)，糊精硫酸鈉，阿斯匹林和EDTA。優(yōu)選地，所述涂層制劑的黏度小于大約500厘泊并大于3厘泊。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述生物相容性涂層的厚度小于25微米，更優(yōu)選地，小于10微米，從所述微突出表面測量。預(yù)期的涂層厚度取決于一些因素，包括所需要的劑量、以及用以輸送該劑量所必需的涂層厚度、每單位面積薄片的微突出物密度、涂層組合物的粘性和濃度以及所選擇的涂布方法。根據(jù)本發(fā)明，在涂層制劑施加到微突出物34上之后，可以通過各種方式來干燥所述涂層制劑。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方式中，涂布的微突出元件30在環(huán)境室溫條件下干燥。然而，可以采用各種溫度和濕度水平來干燥微突出物上的涂層制劑。此外，可將涂布的元件進行加熱、冷凍干燥、凍干或類似的技術(shù)以去除涂層上的水分。根據(jù)本發(fā)明，也可以通過水凝膠制劑來輸送VEGF基試劑。在所述實施方式中，輸送系統(tǒng)因而包括水凝膠制劑和用于容納它的設(shè)置(例如凝膠膏)，例如美國專利No.6083196和6050988以及未審美國專利申請序列No.10/970901、10/971430、10/971877和10/971338中公開，這里全文引入作為參考。在至少一種實施方式中，水凝膠制劑含有至少一種VEGF基試劑。在本發(fā)明的另一種實施方式中，凝膠制劑不含VEGF基試劑，因此僅僅是一種水合作用機制。根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)水凝膠制劑含有一種上述VEGF基試劑時，所述試劑的存在濃度可超過飽和度或低于飽和度。本發(fā)明的水凝膠制劑中采用的VEGF基試劑的量應(yīng)當(dāng)為，輸送治療有效量的VEGF基試劑以達到預(yù)期的效果所必需的量。在本發(fā)明的一種實施方式中，所述VEGF基試劑的濃度范圍占水凝膠制劑的1-40wt.％。根據(jù)本發(fā)明，當(dāng)水凝膠制劑不含VEGF基試劑時，所述VEGF基試劑可涂布于微突出元件上，如上面所述，或者包含在固態(tài)制劑中，如下面所述。優(yōu)選地，本發(fā)明的水凝膠制劑包括水基水凝膠。水凝膠作為優(yōu)選的制劑是因為其具有高度的水分含量和生物相容性。如本領(lǐng)域所公知，水凝膠是溶脹于水中的大分子聚合物網(wǎng)絡(luò)。合適的聚合物網(wǎng)絡(luò)實例包括但不限于，羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥乙基-甲基纖維素(HEMC)、乙基羥乙基纖維素(EHEC)、羧甲基纖維素(CMC)、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(正乙烯吡咯烷酮)以及pluronics。最優(yōu)選的聚合物材料是纖維素衍生物。獲得的所述聚合物可以是不同平均分子量的各種等級，并因而表現(xiàn)出不同的流變學(xué)特性。優(yōu)選地，所述聚合物材料的濃度范圍在水凝膠制劑的大約0.5-40wt.％。本發(fā)明的水凝膠制劑優(yōu)選具有足夠的表面活性以確保制劑表現(xiàn)出足夠的潤濕性，這對于在制劑和微突出元件與皮膚以及可選擇性的，固態(tài)制劑之間建立最佳的接觸性來說很重要。根據(jù)本發(fā)明，足夠的潤濕性可通過在水凝膠制劑中添加至少一種潤濕劑獲得，例如表面活性劑和具有兩性特性的聚合物?？蛇x擇地，潤濕劑還可以添加到固態(tài)制劑中。根據(jù)本發(fā)明，表面活性劑可以是兩性離子的、兩性的、陽離子的、陰離子的或非離子的。合適的表面活性劑實例包括月桂酰兩性基乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十二烷基三甲基銨(TMAC)、芐烷銨、氯化物、聚山梨醇酯類例如Tween 20和Tween 80，其它的山梨聚糖衍生物，如山梨醇月桂酸酯、以及烷氧基化醇類，如laureth-4。最優(yōu)選的表面活性劑包括Tween 20、Tween 80和SDS。具有兩性特性的合適聚合物材料或聚合物包括但不限于，纖維素衍生物，如羥基乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥基丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥基乙基甲基纖維素(HEMC)、或乙基羥基乙基纖維素(EHEC)以及pluronics。優(yōu)選地，所述表面活性劑的濃度在水凝膠制劑的大約0.001-2wt.％的范圍。表現(xiàn)出兩性特性的聚合物濃度優(yōu)選在水凝膠制劑的大約0.5-40wt.％的范圍。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)明白，所述潤濕劑可以單獨或組合使用。根據(jù)本發(fā)明，水凝膠制劑可包括至少一種前面所述的途徑開放調(diào)節(jié)劑。所述水凝膠制劑可進一步包括至少一種前面所述的血管收縮劑。本發(fā)明的水凝膠制劑表現(xiàn)出足夠的粘性，使得所述制劑可以包含在凝膠膏中，在應(yīng)用過程中保持其整體性，并且其流動性足以使其流動通過微突出元件的開口并進入皮膚通道。對于表現(xiàn)出牛頓學(xué)性質(zhì)的水凝膠制劑來說，在25℃下測量該水凝膠制劑的粘度優(yōu)選在大約2-30泊(P)的范圍。對于剪切致稀水凝膠制劑來說，在25℃下，分別在667/s和2667/s的剪切速率下測量其粘度優(yōu)選在1.5-30P或0.5到10P的范圍。對于膨脹制劑來說，在25℃下，667/s的剪切速率下測量其粘度優(yōu)選在1.5-30P的范圍。根據(jù)本發(fā)明，VEGF基試劑也可以包含在固態(tài)制劑中。在一種實施方式中，固態(tài)制劑為固體薄膜，如PCT公開號WO 98/28037中公開，這里同樣全文引入作為參考。在另一種實施方式中，固態(tài)制劑是干粉制劑，如下面所述。所述固態(tài)制劑適用于設(shè)置在微突出陣列的皮膚側(cè)，如未審美國專利申請序列號No.10/970901中所公開，這里引入作為參考，或者設(shè)置在所述陣列的上表面。如所述未審申請中所詳細討論，包含固體薄膜的固態(tài)制劑通常通過澆注由以下成分組成的液體制劑制成VEGF基試劑，聚合物材料如，羥乙基纖維素(HEC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、羥丙基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥乙基-甲基纖維素(HEMC)、乙基羥乙基纖維素(EHEC)、羧甲基纖維素(CMC)、聚(乙烯醇)、聚(氧化乙烯)、聚(2-羥乙基甲基丙烯酸酯)、聚(正乙烯吡咯烷酮)以及pluronics，一種增塑劑如，甘油、丙二醇、聚乙二醇，一種表面活性劑，如Tween20和Tween80，以及一種揮發(fā)性溶劑，例如水、異丙醇、甲醇和乙醇。在澆注和隨后的溶解蒸發(fā)之后，制成了固體薄膜。在一種實施方式中，用于制造固體薄膜的液體制劑包括0.1-20wt.％的VEGF基試劑，5-40wt.％的聚合物，5-40％的增塑劑，0-2wt.％的表面活性劑，以及包括揮發(fā)性物質(zhì)的余量物質(zhì)。如上所述，在本發(fā)明的其它實施方式中，固態(tài)制劑是粉末或粉餅制劑。合適的制劑通過噴霧干燥、凍干、噴霧凍干和超臨界流體處理獲得。根據(jù)本發(fā)明，這些方法可形成高有效負載的粉末或粉餅狀固態(tài)制劑，其在VEGF基試劑經(jīng)皮輸送之前通過水凝膠制劑復(fù)原。優(yōu)選地，所述粉末制劑適合具有較高的空隙度以有助于復(fù)原過程并提高患者的舒適度。所述制備粉末和粉餅制劑的方法很高效，通常產(chǎn)量在大約85％。此外，該方法不需要使用會降低Tg并相應(yīng)縮短保存期限的增塑劑。優(yōu)選地，在所述方法中用于干燥或超臨界流體萃取的所述制劑還包括碳水化合物，例如糖或糖醇以幫助保護VEGF基試劑。還優(yōu)選的是，所述制劑包括抗氧化劑，例如蛋氨酸。噴霧干燥法、凍干法、噴霧凍干法和超臨界流體萃取法可對顆粒尺寸和分布、顆粒形狀和形態(tài)提供良好的控制。所述技術(shù)在本領(lǐng)域也是公知的。例如，噴霧凍干過程可以理想地用于高產(chǎn)量制備批尺寸小至300mg的高價值治療藥物。所述方法可以制備優(yōu)選在最多大約15min內(nèi)復(fù)原、更優(yōu)選在最多大約1min內(nèi)復(fù)原的固態(tài)制劑。應(yīng)當(dāng)明白，噴霧干燥法、凍干法、噴霧凍干法和超臨界流體萃取法可制成容易加入上述微突出系統(tǒng)中的粉餅形式。或者，所述方法可制備粉末形式，其經(jīng)過進一步處理形成粉餅。在其它的實施方式中，粉末形式裝在適于與水凝膠相連的容器中。優(yōu)選地，這種實施方式包括可剝離的釋放襯墊，用以隔離粉末形式和水凝膠，直到需要復(fù)原之時。在本發(fā)明的另一種實施方式中，合適的噴霧凍干方法通常涉及將含有VEGF基試劑的霧化液體制劑暴露于液氮中。在低溫下，使霧化液滴在毫秒級的時間內(nèi)冷凍。該冷凍過程產(chǎn)生了非常細小的冰晶，然后將其凍干。所述方法產(chǎn)生了具有高粒子內(nèi)孔隙度的粉末，使其在水溶液介質(zhì)中能迅速復(fù)原。在本發(fā)明的另一種實施方式中，合適的超臨界流體方法通常涉及將VEGF基試劑液體制劑在保持在其超臨界溫度和壓力以上的溶劑中結(jié)晶?？刂平Y(jié)晶過程的條件，使得制成的VEGF基試劑粉末具有預(yù)期的顆粒尺寸和分布、顆粒形狀和形態(tài)。優(yōu)選地，用于制備固態(tài)制劑的液體制劑的pH值低于大約pH5.5或高于pH7.0。更優(yōu)選地，用于制備固態(tài)制劑的制劑的pH值在大約pH2-pH5.5或者pH7.0-pH11的范圍。甚至更優(yōu)選地，用于制備固態(tài)制劑的液體制劑的pH值在大約pH2.5-pH5.5或者pH7.0-pH10.5的范圍。在另一種實施方式中，所述固態(tài)制劑包括穩(wěn)定劑，其可包括但不限于，非還原糖類、多糖或還原糖。合適的非還原糖包括，例如蔗糖、海藻糖、水蘇糖或棉子糖。合適的多糖包括，例如，右旋糖酐、可溶性淀粉、糊精和胰島素。合適的還原糖包括，例如，單糖類，例如芹菜糖，阿拉伯糖，來蘇糖，核糖，毛地黃毒素糖，海藻糖，櫟醇，奎諾糖，鼠李糖，阿洛糖，阿卓糖，果糖，半乳糖，葡萄糖，古洛糖，金縷梅糖，艾杜糖，甘露糖，塔格糖等等；以及二糖類，例如櫻草糖，莢豆二糖，蕓香糖，綿棗兒二糖，纖維二糖，龍膽二糖，乳糖，乳果糖，麥芽糖，蜜二糖，槐糖，以及松二糖等等。根據(jù)本發(fā)明，所述固態(tài)制劑可包括至少一種上述途徑開放調(diào)節(jié)劑、血管收縮劑、或緩沖劑。根據(jù)本發(fā)明的一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供具有微突出元件的輸送系統(tǒng)，所述微突出元件包括多個微突出物和具有至少一種VEGF基試劑的生物相容性涂層，(ii)向患者的皮膚施加所述涂層微突出元件，從而所述微突出物刺穿皮膚并將含試劑的涂層溶解于體液并釋放到皮膚中。所述涂層微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5秒到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件-凝膠膏組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，從而所述含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層。優(yōu)選地，所述涂層微突出元件-凝膠膏組件(包括含試劑的水凝膠制劑)放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5秒到24小時。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層，并且所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑，因而其僅僅是一種水合作用機制。優(yōu)選地，所述涂層微突出元件-凝膠膏組件(包括含試劑的水凝膠制劑)放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于向患者輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，以及(iii)將所述凝膠膏放在施加的微突出元件上，從而含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述涂層微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在所述實施方式的另一個方面，所述微突出元件包括含試劑的生物相容性涂層，并且所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑，因而其僅僅是一種水合作用機制。根據(jù)本發(fā)明的另一種實施方式，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供輸送系統(tǒng)，其具有微突出元件，以及包括至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出元件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層并在角質(zhì)層上形成多個小細口，(iii)從患者皮膚上去掉所述微突出元件；以及(iv)將所述凝膠膏放在預(yù)處理的皮膚上面，從而含試劑的水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。而本發(fā)明的另一種實施方式中，將具有含VEGF基試劑的生物相容性涂層的微突出元件施加到患者皮膚上，然后將具有含VEGF基試劑的水凝膠制劑的凝膠膏放在所施加的微突出元件上面，從而使所述含試劑的涂層溶解于體液并釋放到皮膚中。所述含試劑的水凝膠制劑進入并通過角質(zhì)層中由所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件-凝膠膏組件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在本發(fā)明的另一種實施方式中，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供微突出組件，其具有微突出元件，水凝膠制劑和具有至少一種VEGF基試劑的固態(tài)制劑，(ii)向患者的皮膚施加所述微突出組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層，水凝膠制劑水合化并從固態(tài)制劑中釋放所述試劑，而所述試劑入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。在本發(fā)明的另一種實施方式中，用于輸送VEGF基試劑的方法包括以下步驟(i)提供微突出組件，其具有微突出元件，以及具有至少一種VEGF基試劑的固態(tài)制劑，(ii)提供具有水凝膠制劑的凝膠膏，(iii)向患者的皮膚施加所述微突出組件，從而使所述微突出物刺穿角質(zhì)層；以及(iv)將所述凝膠膏放在所施加的微突出組件上，從而水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并釋放固態(tài)制劑中包含的試劑，所述試劑和水凝膠制劑進入并通過所述微突出物形成的小細口。所述微突出元件優(yōu)選放置在患者皮膚上的時間持續(xù)5分鐘到24小時。放置預(yù)定的時間之后，從皮膚上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。優(yōu)選地，這里使用的微突出元件和組件以及微突出元件-凝膠膏組件通過調(diào)節(jié)器施加到患者的皮膚上。優(yōu)選地，通過上述方法皮內(nèi)輸送的VEGF基試劑在大約1-500μg范圍，更優(yōu)選在大約1-100μg范圍，甚至更優(yōu)選地，在大約1-50μg每劑量單元的范圍本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)明白，為了有助于藥物跨皮膚屏障的輸送，本發(fā)明還可以結(jié)合各種離子電滲法或電遷移系統(tǒng)一起使用，本發(fā)明并不在這方面受到任何限制。說明性的電遷移藥物輸送系統(tǒng)在美國專利No.5147296、5080646、5169382和5169383中公開，其公開內(nèi)容在此全文引入作為參考。術(shù)語“電遷移”通常指有益試劑例如藥物或藥物前體通過體表如皮膚、粘液、粘膜、指甲等等的通道。試劑的輸送通過應(yīng)用電勢而加以引導(dǎo)或增強，這使得應(yīng)用的電流可以輸送試劑或提高試劑的輸送，或者對于“反向”電遷移來說，可輸送樣品或提高試劑取樣?？梢酝ㄟ^各種方式實現(xiàn)將試劑電遷移輸入或輸出人體。一種廣泛應(yīng)用的電遷移方法，離子電滲法，涉及對帶電離子的電引導(dǎo)傳輸。另一種涉及經(jīng)皮傳輸未帶電或中性電荷分子(例如，葡萄糖的經(jīng)皮取樣)的電遷移方法，電滲法，涉及在電場影響下使帶試劑的溶劑通過薄膜。還有另一種電遷移方法，電穿孔法，涉及向薄膜施加電脈沖、高壓脈沖形成的孔狀試劑通道。在許多情況下，不只一種所述方法可以同時以不同程度進行。因此，術(shù)語“電遷移”這里給出了其最廣泛的可能性解釋，包括至少一種帶電或不帶電試劑或其混合物的電引導(dǎo)或增強的輸送，而無論該試劑實際上被傳輸?shù)奶厥鈾C制是什么。此外，超聲波導(dǎo)入或壓電裝置可以與本發(fā)明結(jié)合使用。
實施例給出以下實施例用以使本領(lǐng)域技術(shù)人員能更加清楚地理解和應(yīng)用本發(fā)明。它們并不視為是對本發(fā)明范圍的限制，而僅僅是表示其典型實施方式。
VEGF制劑進行以下學(xué)習(xí)是為了開發(fā)出合適的分析方法并證實VEGF基試劑制劑適于涂布經(jīng)皮輸送微突物陣列的適合程度。從Scios獲得110mL體積的VEGF(Scios lot#8331058再加工#1)。以蔗糖與VEGF 3∶1的重量比配制100mL該溶液(@1.82mg VEGF/mL)，并裝在四個50mL的離心管中在Virtis多支管型凍干機上進行凍干，其中每個管含有25mL的液體制劑。凍干之后，將每份粉末用2mL的WFI復(fù)原，混合并加載到10000 MWCO的透析卡中。將濃縮物相對2mM的檸檬酸鹽緩沖液(pH4.6)在2-8℃下進行兩次1L的交換，至少12h/次交換。透析之后，將21mL的滲余物從卡中回收并通過UV-Vis分析蛋白質(zhì)含量，開始濃度以8.7mg/mL計。對引入的原材料和回收的滲余物進行UV含量分析，表明在第一次凍干和透析步驟之后96％的VEGF肽被回收。然后將透析滲余物以蔗糖∶VEGF為3∶1的重量比重新配制，并在Virtis凍干機上凍干?；厥樟舜蠹s722mg的凍干粉末并通過HPLC分析，結(jié)果示于表1中。
表1
制劑性質(zhì)將大約一半的凍干粉末(332mg)用400μL的WFI+0.125％聚山梨醇酯20進行復(fù)原，得到～750μL涂層溶液，計算出VEGF濃度為110mg/mL，蔗糖330mg/mL，聚山梨醇酯20為0.13％。所述粉末完全復(fù)原，沒有可見的明顯沉淀或聚集物/細纖維形成。將該涂層溶液樣品在裝有珀爾帖致冷器和1°錐板的Bohlin C-VOR錐板粘度計上進行分析。測定70μL樣品的粘度作為400l/s的剪切速率下溫度的函數(shù)，并作為5℃和400l/s的剪切速率下時間的函數(shù)，從而確定涂層溶液在恒定剪切力下的穩(wěn)定性以及該制劑在剪切力下的任何凝膠化趨勢。溫度測試表明，涂層制劑的粘度作為漸減溫度的函數(shù)稍微有所增加。這與前面對其它肽涂層溶液的觀察結(jié)果一致。在1℃的典型涂層溫度下，所得到的粘度60cP正好在微突出陣列可以接受的涂布性參數(shù)內(nèi)。時間測試表明該涂層溶液在恒定剪切力下兩小時后不易發(fā)生凝膠化。觀察到粘度上有略微增減，這最有可能表明由于不可控的室內(nèi)環(huán)境濕度引起的樣品臺上水分的濃縮/蒸發(fā)，造成溶液濃度和稀釋度隨著實驗過程的進行而發(fā)生改變。還測定了5℃下該制劑的粘度特征作為剪切速率的函數(shù)。該溶液的粘度通常對剪切速率的增加不靈敏，并且溶液的剪切應(yīng)力作為剪切速率的函數(shù)直線下降(R2＝0.9839)，這表現(xiàn)出牛頓學(xué)流體的特征。在鈦基板上用Tantec接觸角測定儀測定VEGF涂層溶液的接觸角。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所知那樣，過大的接觸角，例如大于70℃，不會使鈦尖端部具有良好的潤濕性，并使得所述制劑“不可涂布”。類似地，太小的接觸角，例如小于30℃，使所述溶液太易潤濕。在每個涂布孔道或者尖端部沿微突出物軸桿潤濕太深時，蘸入溶液之后任何非常少的涂布溶液也會保留在尖端部上，使得不需要的制劑遷移到陣列基部。具有0.13％聚山梨醇酯20的110mg/mL的VEGF溶液的接觸角大約為54°，該值正好處于涂有其它肽試劑的微突出陣列所觀察到的可涂布區(qū)域內(nèi)。
涂布可行性為了證實所述制劑的涂層效果，將700μL 110mg/mL的VEGF涂層溶液加載到涂層儲液池中。如上所述，利用滾涂技術(shù)，采用具有Delrin側(cè)板的儲液池和0.621”不銹鋼鼓輪，儲液池刮片與鼓輪之間的間隔大約為100μm。用珀耳帖制冷臺將所述儲液池冷卻到-1.0℃的溫度，使得鼓輪表面的薄膜溫度在3到4℃之間。以50rpm的速度旋轉(zhuǎn)鼓輪，并用高度為250μm的雪橇式托運器(sled)(225μm尖端+25μm的箔片襯紙)涂布微突出陣列條帶(MacrofluxMF1035 2cm2陣列，225μm標襯尖端突出長度，來自Alza Corp.，Mountain View，CA)。用6、8、10、12和14涂布孔道涂布微突出陣列條帶得到涂布量曲線，并確定涂布過程本身的可行性。用掃描電子顯微圖(SEM)和反相高壓液相色譜(RP-HPLC)分析涂布條帶的VEGF含量，RP-HPLC含量測試法如下面所描述。SEM圖像表明，所述制劑形成的涂層具有光滑的尖端部涂層形態(tài)，其在整個微突出陣列上均勻一致。此外，該涂層制劑的粘度和接觸角合乎需要，因為圖像證實所述涂層不會使微突出物軸桿潤濕到下面太深處。RP含量分析表明，每個涂布孔道的涂層量具有6-14個孔道區(qū)的良好線性度，其中除開始6個涂層之外每個孔道添加10μgVEGF。
分析方法開發(fā)開發(fā)了高靈敏度RP-HPLC方法以適合于低濃度測定貼片殘余物和低濃度的皮膚涂拭樣品，從而支持各種體外和體內(nèi)的臨床前輸送研究。改進的RP方法采用了小細孔的分析柱以提高方法的靈敏度，因為與較大孔柱相比，注入的樣品在分離過程中稀釋度較少。還采用了對細孔柱進行了優(yōu)化的移動相梯度。利用該改進方法使信噪比因此得以增加，使得VEGF涂層分析量等于或大于45μg VEGF/陣列。常規(guī)的陣列需要大于100μg的VEGF/陣列。特別是，利用Agilent Zorbax2.1×150mm的C3和5μm細孔柱，RP的定量極限對于VEGF來說可減小到0.36μg，而與之相比的其它方法需要1.8μg。在一個小時的涂布過程之后，通過該RP測試法和尺寸排阻色譜法(SEC)和離子交換色譜法(IEC)測定涂層溶液樣品的肽純度。將這些結(jié)果與VEGF的對照樣品、重新凍干的粉末和涂布陣列的提取物進行比較。數(shù)據(jù)列于表1中，如上面所述。RP和IEC測試表明，所述肽在預(yù)制備、涂布、或最終的提取過程中沒有表現(xiàn)出任何化學(xué)降解的跡象。SEC結(jié)果可能表明在所述處理材料中，尤其是涂布后溶液中，具有較高的二聚體含量。然而，不清楚在涂布過程中，或者在分析之前樣品的存放過程中是否會發(fā)生其它的凝聚反應(yīng)。
涂層穩(wěn)定性將如上所述的用80μgVEGF涂布的陣列與5cm2的粘性貼片、固定環(huán)進行組裝，并與3.5g 4的分子篩干燥劑一起包裝于氮氣清潔過的金屬箔小袋中，存放于較高的溫度下(40℃)以測定其穩(wěn)定性和主要降解途徑。在T＝0、1周、2周和1個月時撕開加壓樣品，通過RP-HPLC、陰離子交換色譜法(AEC)和SEC測定。表2中匯總了這些系統(tǒng)的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。將從存放時間點得到的數(shù)據(jù)與時間為零時的分析樣品和藥物參照標準進行比較。結(jié)果表明VEGF基試劑涂布的微突出陣列隨著時間流逝具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，即使在40℃的較高溫度下也如此。
表2
用涂布陣列輸送VEGF將不同的涂布貼片應(yīng)用到無毛豚鼠(HGP)上以測試藥物輸送的可行性。特別地，進行了臨床前研究以估測對如上所述的涂布微突出陣列的藥物輸送耐受功效，其中采用0.29J力的敷貼器涂布24μg、42μg和80μgVEGF。在應(yīng)用于HGP上后拿開的陣列上進行殘余化驗，以測定殘留在陣列上的藥物量。將這些殘余量與表3中的對照量比較，從而可表明輸送量。與相對具有紅斑/水腫跡象的現(xiàn)象相比，該研究表明絕大多數(shù)涂布的VEGF已從微突出物輸送入了HCP皮膚而沒有明顯的局部反應(yīng)。
表3 總而言之，上面的樣品表明通過濃縮至10mg/mL、經(jīng)透析減少檸檬酸鹽成分、以蔗糖∶VEG F制劑為3∶1的比例進行凍干、并用0.125％的聚山梨醇酯20重懸制成的VEGF基試劑，可產(chǎn)生0.75mL具有合乎需要的粘度和接觸角、用于微突出尖端涂布方法的涂布溶液。所述制劑可成功地用于涂布微突出陣列，其中VEGF量在大約20μg到90μg的范圍。實驗證實涂布的VEGF具有與原始API溶液相近似的純度和RP-HPLC性質(zhì)。其它的HPLC測試(IC、SEC)測定了在制備、涂布和高溫下存放的過程中保持原樣的API純度。此外，還可確定涂布的陣列在大約5到200μgVEGF/mL的范圍內(nèi)具有良好的線性度。在不背離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的情況下，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以對本發(fā)明做出各種改變和修改，以使其適應(yīng)各種用途和條件。因此，這些改變和修改適當(dāng)?shù)?、合理地并且已?jīng)預(yù)計包括在以下權(quán)利要求的等價方式的全部范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的裝置，包括具有適于刺穿所述患者角質(zhì)層的多個微突出物的微突出元件；以及設(shè)置在所述微突出元件上的生物相容性涂層，所述涂層由置于其上的具有至少一種VEGF基試劑的涂層制劑制成。
2.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層設(shè)置在所述多個微突出物的至少一個上面。
3.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑包括水溶液制劑。
4.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑包括非水溶液制劑。
5.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
6.權(quán)利要求5所述的裝置，其中所述VEGF 121鹽選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組醋酸鹽、丙酸鹽、丁酸鹽、戊酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、乙酰丙酸鹽、氯化物、溴化物、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、乙醇酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、3-羥基異丁酸鹽、2-羥基異丁酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、丙酮酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲基磺酸鹽、硫酸鹽和磺酸鹽。
7.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述VEGF基試劑占所述涂層試劑的大約1-30wt.％的范圍。
8.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述VEGF基試劑占所述生物相容性涂層的1μg-1000μg的范圍。
9.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑的pH值低于大約pH5.5。
10.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑的pH值高于大約pH7.0。
11.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑包括至少一種低揮發(fā)性配對離子。
12.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑包括至少多種配對離子。
13.權(quán)利要求9所述的裝置，其中所述VEGF基試劑在所述涂層制劑pH下帶正電，并且其中涂層制劑包括至少一種酸性配對離子。
14.權(quán)利要求12所述的裝置，其中所述多種配對離子的至少一種包括第一種弱酸，而所述多個配對離子的至少一種包括第二種非揮發(fā)性弱酸。
15.權(quán)利要求12所述的裝置，其中所述多種配對離子的至少一種包括具有高揮發(fā)性的第二種弱酸。
16.權(quán)利要求10所述的裝置，其中所述VEGF基試劑在所述涂層制劑pH下帶正電，并且其中涂層制劑包括至少一種包含堿的第二種配對離子。
17.權(quán)利要求12所述的裝置，其中所述多種配對離子的至少一種包括第一種強堿，而所述多個配對離子的至少一種包括第二種弱堿。
18.權(quán)利要求12所述的裝置，其中所述多種配對離子的至少一種包括另一種強堿，而所述多種配對離子的至少一種包括第三種弱堿。
19.權(quán)利要求11所述的裝置，其中所述低揮發(fā)性配對離子存在于所述涂層制劑中的量足以中和所述VEGF基試劑的電荷。
20.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述VEGF基試劑包括VEGF121，并且其中所述涂層制劑包括至少一種增強粘性的配對離子。
21.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述涂層制劑的粘度范圍在大約3-500厘伯范圍內(nèi)。
22.權(quán)利要求1所述的裝置，其中所述生物相容性涂層的厚度小于大約25微米。
23.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的系統(tǒng)，包括具有適于刺穿所述患者角質(zhì)層的多個微突出物的微突出元件；以及具有至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑，所述水凝膠制劑與所述微突出元件相連。
24.權(quán)利要求23所述的輸送系統(tǒng)，其中所述VEGF基試劑占所述水凝膠制劑的大約1-40wt.％的范圍。
25.權(quán)利要求23所述的輸送系統(tǒng)，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF 148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
26.權(quán)利要求23所述的輸送系統(tǒng)，其中所述水凝膠制劑包括具有大分子聚合物網(wǎng)絡(luò)的水基水凝膠。
27.權(quán)利要求23所述的輸送系統(tǒng)，其中所述水凝膠制劑包括至少一種表面活性劑，選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組月桂酰兩性基乙酸鈉、十二烷基硫酸鈉(SDS)、氯化十六烷基吡啶(CPC)、氯化十二烷基三甲基銨(TMAC)、芐烷銨、氯化物、聚山梨醇酯類，山梨聚糖衍生物，以及烷氧基化醇類。
28.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的系統(tǒng)，包括具有適于刺穿所述患者角質(zhì)層的多個微突出物的微突出元件；設(shè)置在所述微突出元件附近的固態(tài)制劑；以及具有水凝膠制劑，所述水凝膠制劑與所述固態(tài)制劑相連。
29.權(quán)利要求28所述的輸送系統(tǒng)，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF 148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
30.權(quán)利要求28所述的輸送系統(tǒng)，其中所述固態(tài)制劑是固體薄膜，其通過澆注以下物質(zhì)組成的液態(tài)制劑制成至少一種VEGF基試劑，一種聚合物材料，一種增塑劑，一種表面活性劑，以及一種揮發(fā)性溶劑。
31.權(quán)利要求28所述的輸送系統(tǒng)，其中所述固態(tài)制劑由選自以下組的方法制成噴霧干燥法、凍干法、噴霧凍干法、以及超臨界流體萃取法。
32.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有多個微突出物的微突出元件，所述微突出元件具有設(shè)置于其上的涂層，所述涂層包括至少一種VEGF基試劑；向所述患者的皮膚位點施加所述涂層微突出元件，從而所述微突出物刺穿角質(zhì)層并將所述VEGF基試劑輸送到所述患者中；以及從所述皮膚位點上去掉所述微突出元件。
33.權(quán)利要求32所述的方法，其中所述微突出元件保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5秒到24小時范圍。
34.權(quán)利要求32所述的方法，其中所述VEGF基試劑占所述生物相容性涂層的1μg-1000μg的范圍。
35.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有微突出元件和凝膠膏的微突出組件，所述微突出元件包括多個微突出物，所述凝膠膏包括具有至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑；向所述患者的皮膚位點施加所述微突出元件-凝膠膏組件，從而在所述患者的角質(zhì)層上形成多個小細口，從而使所述水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并進入和通過所述微突出物形成的所述小細口；以及從所述皮膚位點上去掉所述微突出元件-凝膠膏組件。
36.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述微突出元件-凝膠膏組件保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5分鐘到24小時范圍。
37.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述微突出元件包括具有至少一種VEGF基試劑的生物相容性涂層。
38.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述微突出物-凝膠膏組件保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5秒到24小時范圍。
39.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
40.權(quán)利要求35所述的方法，其中所述水凝膠制劑不含VEGF基試劑。
41.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有微突出元件和凝膠膏的微突出組件，所述微突出元件包括多個微突出物，所述凝膠膏包括具有至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑；向所述患者的皮膚位點施加所述微突出元件，從而在所述患者的角質(zhì)層上形成多個小細口；將所述凝膠膏放在所述微突出元件上，從而所述水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并進入和通過所述微突出物形成的所述小細口；以及從所述皮膚位點上去掉所述微突出元件。
42.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述凝膠膏包括可釋放襯墊，并且所述方法包括在將所述凝膠膏放在所述微突出元件上之前去掉所述釋放襯墊的步驟。
43.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述微突出元件-凝膠膏組件保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5分鐘到24小時范圍。
44.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述微突出元件包括具有至少一種VEGF基試劑的生物相容性涂層。
45.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
46.權(quán)利要求41所述的方法，其中所述VEGF基試劑占所述水凝膠制劑的大約0.1-2wt.％的范圍。
47.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有微突出元件和凝膠膏的微突出組件，所述微突出元件包括多個微突出物，所述凝膠膏包括具有至少一種VEGF基試劑的水凝膠制劑；向所述患者的皮膚位點施加所述微突出元件，從而在所述患者的角質(zhì)層上形成多個小細口；從所述皮膚位點上去掉所述微突出元件；將所述凝膠膏放在所述預(yù)處理的皮膚位點上，從而所述水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并進入和通過所述微突出物形成的所述小細口；以及從所述皮膚位點上去掉所述凝膠膏。
48.權(quán)利要求47所述的方法，其中所述凝膠膏保持施加到所述預(yù)處理的皮膚位點上的一段時間在5分鐘到24小時范圍。
49.權(quán)利要求47所述的方法，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
50.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有微突出元件、凝膠膏和固態(tài)制劑的微突出組件，所述微突出元件包括多個微突出物，所述凝膠膏包括水凝膠制劑，所述固態(tài)制劑設(shè)置在所述微突出元件附近并且包括至少一種VEGF基試劑；向所述患者的皮膚位點施加所述微突出組件，從而在所述患者的角質(zhì)層上形成多個小細口，從而所述水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并釋放包含在所述固態(tài)制劑中的所述試劑，所述試劑和水凝膠制劑進入和通過所述微突出物形成的所述小細口；以及從所述皮膚位點上去掉所述微突出組件。
51.權(quán)利要求50所述的方法，其中所述微突出組件保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5分鐘到24小時范圍。
52.權(quán)利要求50所述的方法，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
53.一種用于向患者經(jīng)皮輸送VEGF基試劑的方法，包括以下步驟提供具有微突出元件和凝膠膏的微突出組件，所述微突出元件包括多個微突出物，所述固態(tài)制劑設(shè)置在所述微突出元件附近并且包括至少一種VEGF基試劑；提供具有水凝膠制劑的凝膠膏；向所述患者的皮膚位點施加所述微突出組件，從而在所述患者的角質(zhì)層上形成多個小細口；將所述凝膠膏放在所述微突出組件上，從而所述水凝膠制劑從所述凝膠膏中釋放出來并釋放包含在所述固態(tài)制劑中的所述試劑，所述試劑和水凝膠制劑進入和通過所述微突出物形成的所述小細口；以及從所述皮膚位點上去掉所述微突出組件。
54.權(quán)利要求53所述的方法，其中所述凝膠膏包括可釋放襯墊，并且所述方法包括在將所述凝膠膏放在所述微突出元件上之前去掉所述釋放襯墊的步驟。
55.權(quán)利要求53所述的方法，其中所述微突出組件-凝膠膏保持施加到所述皮膚位點上的一段時間在5分鐘到24小時范圍。
56.權(quán)利要求53所述的方法，其中所述VEGF基試劑選自以下物質(zhì)構(gòu)成的組VEGF 206、VEGF 189、VEGF 183、VEGF 165、VEGF148、VEGF 145和VEGF 121的異型體，以及其鹽類和簡單衍生物。
全文摘要
一種經(jīng)皮輸送生物活性試劑的設(shè)備和方法包括，具有微突出元件(或組件)的輸送系統(tǒng)，其包括適于刺穿角質(zhì)層進入下面的表皮層，或表皮和真皮層的多個微突出物(或其陣列)。在一種實施方式中，VEGF基試劑包含在應(yīng)用于所述微突出元件上的生物相容性涂層中。
文檔編號A61K38/18GK101048151SQ200580035758
公開日2007年10月3日 申請日期2005年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月19日
發(fā)明者M·阿梅里, M·J·N·科爾米爾, Y·-F·馬, P·達多納, F·斯通班克斯 申請人:阿爾扎公司