專利名稱：：糖皮質(zhì)激素和糖皮質(zhì)激素衍生物的脂質(zhì)體組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明通常涉及脂質(zhì)體技術(shù)，具體地說(shuō)，涉及該技術(shù)用于體內(nèi)輸送糖皮質(zhì)激素的用途。
背景技術(shù)：
：糖皮質(zhì)激素(糖皮質(zhì)類固醇)是一類特征在于能與在幾乎所有脊椎動(dòng)物組織細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的皮質(zhì)醇受體結(jié)合并引發(fā)相似效果的類固醇激素。糖皮質(zhì)激素通過(guò)特定受體、靶細(xì)胞和效果等與諸如性類固醇等其他類固醇區(qū)分開(kāi)。皮質(zhì)醇(或氫化可的松)是天然的最重要的人糖皮質(zhì)激素。糖皮質(zhì)激素具有潛在的抗炎和免疫抑制性質(zhì)。這在以藥理劑量施用糖皮質(zhì)激素時(shí)是非常明顯的，而且在生理學(xué)免疫應(yīng)答中也是重要的。結(jié)果，糖皮質(zhì)激素廣泛用作用于治療諸如關(guān)節(jié)炎或皮炎等炎性癥狀的藥物，以及用作諸如自體免疫疾病等癥狀的附加療法。另一方面，由作為藥物施用導(dǎo)致的過(guò)量糖皮質(zhì)激素水平或腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)對(duì)許多系統(tǒng)都有副作用，一些實(shí)例包括抑制骨骼形成、抑制鈣吸收以及延緩傷口愈合等。已開(kāi)發(fā)多種合成的糖皮質(zhì)激素用于治療用途，其中一些比皮質(zhì)醇有效得多。它們具有不同的藥物代謝動(dòng)力學(xué)(吸收因素、半衰期、分布體積、清除率)和藥物效應(yīng)動(dòng)力學(xué)(例如鹽皮質(zhì)激素活性的能力鈉(Na+)和水的保持)。因?yàn)榭珊芎玫赝ㄟ^(guò)小腸吸收，它們主要通過(guò)口服(經(jīng)口)施用，但也可通過(guò)諸如在皮膚上局部施用等其他途徑施用。甲潑尼龍(孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮，11，17，21-三羥基-6-甲基-，(6α，11β)。C22H30O5，MW374.48)是治療上有效的合成糖皮質(zhì)激素藥物的一個(gè)實(shí)例，由于其具有疏水特性，因此通常口服服用。類似于大多數(shù)腎上腺皮質(zhì)類固醇，甲潑尼龍通常用于抗炎目的。然而，糖皮質(zhì)激素具有廣泛的作用，包括對(duì)代謝和免疫應(yīng)答的改變。類似于其他皮質(zhì)類固醇，甲潑尼龍對(duì)之有效的疾病或病理癥狀的列表是相當(dāng)長(zhǎng)的。常見(jiàn)用途包括關(guān)節(jié)炎治療，以及由于各種呼吸道疾病導(dǎo)致的支氣管炎癥的短期治療。雖然非常有效，但由于頻發(fā)尤其是與長(zhǎng)期治療有關(guān)的嚴(yán)重不良作用，它們的全身應(yīng)用受到限制。糖皮質(zhì)激素的全身施用的有效性和安全性研究揭示了除所述藥物在不同組織中的深?yuàn)W活性外，這些藥物被從血漿中快速清除，因此需要大而頻繁的劑量以獲得靶位點(diǎn)處的有效量。因此，研究了作為另外一種選擇的用于腸胃外施用的方法。例如，開(kāi)發(fā)糖皮質(zhì)激素的局部區(qū)域內(nèi)施用(例如通過(guò)在哮喘中使用吸入器和在關(guān)節(jié)炎中使用關(guān)節(jié)內(nèi)注射)使得能使用較低劑量的類固醇而在損傷處獲得足夠藥物水平，同時(shí)具有最小的副作用。另外的方法包括通過(guò)使用諸如脂質(zhì)體等合適的載體將藥物靶向靶組織。FildesFJ等，[JPharm.Pharmacol.30(6)337-42(1978)]首次嘗試將皮質(zhì)類固醇包封在脂質(zhì)體中，其中包括在脂質(zhì)體的脂雙層中包封膽固醇。該方法基于皮質(zhì)類固醇實(shí)際上是疏水性的理解。然而，這樣的脂質(zhì)體制劑變得不適合臨床應(yīng)用。同樣也努力開(kāi)發(fā)“可溶性”糖皮質(zhì)激素。實(shí)例包括琥珀酸(succinate)衍生的類固醇，例如氫化可的松半琥珀酸鈉鹽和甲潑尼龍半琥珀酸鈉鹽。另一類可溶性糖皮質(zhì)激素包括類固醇的磷酸衍生物。當(dāng)賦予類固醇水溶性使得能使用注射用酸性類固醇時(shí)，顯示出這些“藥物前體”在注射后少于6小時(shí)內(nèi)從血漿中完全清除。[MishinaEV等，PharmRes13(1)141-5(1996)]。還研究了酸性類固醇與脂質(zhì)體的組合。Schmidt等，[SchmidtJ等，Brain126(8)1895-1904(2003)]描述了聚乙二醇(PEG)包覆的長(zhǎng)期循環(huán)空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體包封有磷酸潑尼松龍(水溶性類固醇藥物前體中的一種)的制劑以及其在治療多發(fā)性硬化中與游離形式的類固醇相比的有利效果。然而，類似包封半琥珀酸甲潑尼龍(一種弱酸)的嘗試失敗了，原因在于其導(dǎo)致產(chǎn)生不穩(wěn)定的制劑。另外，[Gonzalez-Rothi，RicardoJ等，PharmaceuticalResearch13(11)1699-1703(1996)]描述了將磷酸曲安奈德(曲安西龍的水溶性強(qiáng)酸衍生物(pKa小于2))包封在脂質(zhì)體中。所述脂質(zhì)體制劑通過(guò)將酸性皮質(zhì)類固醇被動(dòng)裝載入脂質(zhì)體中進(jìn)行制備并用作用于治療肺部癥狀的可注射劑型(靜脈內(nèi)的或氣管內(nèi)的)。另外，離體(exvivo)穩(wěn)定性研究中顯示出在24小時(shí)后所述脂質(zhì)體保留有超過(guò)75％的酸性皮質(zhì)類固醇。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明基于以下發(fā)現(xiàn)采用化學(xué)修飾的糖皮質(zhì)激素(GC)(以其兩親弱酸形式)使得能在脂質(zhì)體中有效裝載酸性GC。令人驚奇地是，因此形成的脂質(zhì)體弱酸性GC是穩(wěn)定的，即在4℃保存甚至14個(gè)月以后大部分所述物質(zhì)以完整的酸性GC的形式保留在脂質(zhì)體內(nèi)。一旦從脂質(zhì)體中釋放至水或體液中，所述酸性GC水解得到活性非酸性GC。因此，根據(jù)本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供了含有包封在脂質(zhì)體中的GC或GC衍生物的藥物組合物，其中所述GC或GC衍生物基本上保留在所述脂質(zhì)體中6個(gè)月，優(yōu)選為10個(gè)月和更優(yōu)選為14個(gè)月，所述GC/GC衍生物選自i)具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱堿性GC或GC衍生物；ii)具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱酸性GC或GC衍生物。所述GC衍生物優(yōu)選為酸性GC，即在從脂質(zhì)體釋放至體液后轉(zhuǎn)化為非酸性形式的兩親弱酸性GC衍生物。更具體地說(shuō)，所述酸性GC是甲潑尼龍半琥珀酸鈉(MPS)。優(yōu)選的本發(fā)明的MPS制劑含有由氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)、(甲基)聚乙二醇包覆的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)和膽固醇以55∶40∶5的摩爾比組合形成的空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體。所述藥物組合物優(yōu)選用于任何其可接受的治療形式包括施用糖皮質(zhì)激素的疾病的治療或預(yù)防。本發(fā)明的藥物組合物通常至少在以下一個(gè)方面優(yōu)于非包封的GC更好地輸送至靶位點(diǎn)、更長(zhǎng)的循環(huán)時(shí)間、更慢的清除率、更少的副作用、更高的效率或更高的治療指數(shù)。所述藥物組合物優(yōu)選用于多發(fā)性硬化的治療或防治。所述藥物組合物也優(yōu)選用于已知對(duì)類固醇敏感的癌癥的治療或防治，所述癌癥例如造血起源的癌癥，包括淋巴瘤、白血病、骨髓瘤、乳癌和前列腺癌。本發(fā)明還提供了GC或GC衍生物用于制備本發(fā)明的藥物組合物的應(yīng)用，所述GC或GC衍生物包封在脂質(zhì)體中，其中所述GC或GC衍生物基本上保留在所述脂質(zhì)體中6個(gè)月，優(yōu)選為10個(gè)月和更優(yōu)選為14個(gè)月，所述GC或GC衍生物選自i)具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱堿性GC或GC衍生物；ii)具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱酸性GC或GC衍生物。此外，本發(fā)明提供一種將糖皮質(zhì)激素(GC)，優(yōu)選為不與水混溶的GC，輸送至體內(nèi)靶位點(diǎn)的方法，所述方法包括將所述GC化學(xué)修飾為如權(quán)利要求1～14中任一項(xiàng)所述的兩親弱酸衍生物或兩親弱堿衍生物，以及將所述兩親弱酸衍生物或兩親弱堿衍生物裝載在脂質(zhì)體中。具體地說(shuō)，所述脂質(zhì)體是空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體和所述GC衍生物通過(guò)形成跨脂質(zhì)體膜離子或pH梯度(即通過(guò)主動(dòng)裝載技術(shù))而裝載入所述脂質(zhì)體中。此外，本發(fā)明提供一種用于治療或防治疾病或病理癥狀的方法，所述方法包括向有需要的受試對(duì)象施用一定量的包封在脂質(zhì)體中的GC或GC衍生物，所述量足以實(shí)現(xiàn)治療效果。優(yōu)選為所述方法包括注射所述包封有GC或GC衍生物的脂質(zhì)體。為理解本發(fā)明并領(lǐng)會(huì)如何實(shí)際實(shí)施本發(fā)明，現(xiàn)將僅通過(guò)非限制性實(shí)施例的方式，參考如下附圖描述優(yōu)選實(shí)施方案，在所述附圖中圖1A-1C是顯示甲潑尼龍半琥珀酸鈉(MPS)化學(xué)特性的曲線圖，所述化學(xué)特性包括作為pH函數(shù)的MPS的濁度(圖1A)；MPS在不同pH點(diǎn)的分配系數(shù)(圖1B)；以及作為GC濃度函數(shù)的半琥珀酸甲潑尼龍和磷酸地塞米松的表面張力(圖1C)。圖2A-2B是在主動(dòng)裝載MPS前(圖2A)和后(圖2B)脂質(zhì)體的Cryo-TEM(透射電子顯微術(shù))圖像。圖3A-3B是在4℃保存14個(gè)月后SSL-MPS的尺寸排阻色譜圖，而圖3B是描述圖3A的級(jí)分8～17的這部分的放大圖，顯示存在極少量的游離MPS和甲潑尼龍(MP)。圖4是在血漿中溫育時(shí)，MPS和Ca+2從SSL-MPS中的釋放曲線。圖5是顯示SSL-MPS治療在實(shí)驗(yàn)性自體免疫腦脊髓炎(EAE)中的效果的示圖。圖6A和6B是顯示SSL-MPS治療在EAE誘導(dǎo)的動(dòng)物中對(duì)存活率(％)(圖6A)和平均臨床評(píng)分(圖6B)的效果的曲線圖。圖7是顯示與兩種常規(guī)藥物倍泰龍(Betaferon)和克帕松(Copaxone)相比，SSL-MPS治療對(duì)EAE的效果的曲線圖。圖8是顯示SSL-MPS治療在慢性EAE動(dòng)物模型中的效果的曲線圖。圖9是顯示SSL-MPS治療對(duì)BCL-1淋巴瘤的存活率的效果的曲線圖。具體實(shí)施例方式糖皮質(zhì)激素(GC)是主要影響碳水化合物(和在更小范圍里的脂肪和蛋白)的代謝(并具有其他作用)的一類激素。糖皮質(zhì)激素是在腎上腺的外側(cè)部分(皮質(zhì))中產(chǎn)生并在化學(xué)上分類為類固醇。皮質(zhì)醇是主要的天然糖皮質(zhì)激素。雖然如此，術(shù)語(yǔ)“糖皮質(zhì)激素”也用于指實(shí)驗(yàn)室中合成的等價(jià)激素。在互聯(lián)網(wǎng)站點(diǎn)http//www.steraloids.com/可以找到糖皮質(zhì)激素的非限制性列表，在此以參考的方式全文引入。實(shí)例包括半琥珀酸潑尼松龍、半琥珀酸甲潑尼龍、半琥珀酸地塞米松、半琥珀酸別孕烷醇酮、倍氯米松21-半琥珀酸、倍他米松21-半琥珀酸、半琥珀酸勃地酮、半琥珀酸潑尼松龍鈉鹽、潑尼松龍21-半琥珀酸、半琥珀酸諾龍、19-去甲睪酮半琥珀酸酯、脫氧皮質(zhì)酮21-半琥珀酸、半琥珀酸地塞米松、半琥珀酸地塞米松精胺、半琥珀酸皮質(zhì)酮、11-脫氧皮甾醇半琥珀酸酯(cortexolonehemisuccinate)。類似許多其他藥物，施用游離形式的GC可具有一些缺點(diǎn)，例如使受治療個(gè)體受到已知與GC治療伴生的副作用影響的風(fēng)險(xiǎn)，類固醇從血漿中被迅速清除等。在尋求克服這些缺點(diǎn)時(shí)，本發(fā)明人已設(shè)想，盡管難以將相當(dāng)疏水的GC有效地和穩(wěn)定地裝載入載體中，但通過(guò)對(duì)糖皮質(zhì)激素進(jìn)行相當(dāng)簡(jiǎn)單的化學(xué)修飾(涉及將所述類固醇轉(zhuǎn)化為水溶性衍生物)可以將所述衍生物裝載入脂質(zhì)體中。因此，本發(fā)明提供了含有包封在脂質(zhì)體中的糖皮質(zhì)激素(GC)或GC衍生物的穩(wěn)定藥物組合物，其中所述GC或GC衍生物基本上保留在所述脂質(zhì)體中6個(gè)月，優(yōu)選為10個(gè)月，更優(yōu)選為14個(gè)月，所述GC或GC衍生物選自i)具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱堿性GC或GC衍生物；ii)具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為約-2.5～約1.5，優(yōu)選為約-1.5～約1.0的兩親弱酸性GC或GC衍生物。此處使用的術(shù)語(yǔ)“GC衍生物”指或者通過(guò)插入化學(xué)基團(tuán)或者通過(guò)從GC分子上移除化學(xué)基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)修飾過(guò)的GC分子，所述修飾導(dǎo)致所述分子根據(jù)所用修飾的類型轉(zhuǎn)化為兩親弱堿或兩親弱酸。正如精通類固醇化學(xué)的技術(shù)人員能很好地理解的那樣，這些天然親水分子具有至少一個(gè)可與弱酸或弱堿結(jié)合而形成相應(yīng)的兩親弱酸或兩親弱堿分子的化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)。正如精通化學(xué)的技術(shù)人員公知的那樣，通常包含在類固醇基本結(jié)構(gòu)中的化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)的非限制性實(shí)例有羥基、羧基等。應(yīng)當(dāng)注意的是在本發(fā)明的上下文中，GC衍生物也包括活性的、非修飾的、兩親的和弱酸性的GC。一方面，GC衍生物是藥物前體，即當(dāng)其為存在于脂質(zhì)體中的形式時(shí)不具有藥物活性。隨著從脂質(zhì)體中釋放，所述GC藥物前體通過(guò)例如酯酶等酶轉(zhuǎn)化為其具有藥物活性的疏水形式。根據(jù)另一方面，包封在脂質(zhì)體中的GC已經(jīng)是其藥物活性形式，和不需要進(jìn)行任何酶促過(guò)程使之變得有活性。根據(jù)第二方面，GC本身是弱兩親酸或堿。此處使用的術(shù)語(yǔ)“兩親弱酸”指既具有疏水基團(tuán)又具有親水基團(tuán)的分子，GC的類固醇骨架基本構(gòu)成所述疏水基團(tuán)，而由于上述修飾而連接在GC上的弱酸部分基本構(gòu)成所述親水基團(tuán)。所述GC兩親弱酸或GC衍生物的特征在于下列物理特性-pKa其具有大于3.0，優(yōu)選為大于3.5，更優(yōu)選為約3.5～約6.5的pKa；-分配系數(shù)在pH為7.0的正辛醇/緩沖液(水相)體系中，其具有約-2.5～約1.5，更優(yōu)選為約-1.5～約1.0的logD?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)將GC與二羧酸或三羧酸反應(yīng)，或者將GC連接到氨基酸的氨基上而得到上述GC的兩親弱酸性衍生物。GC衍生物的具體實(shí)例包括，但不限制于，倍他米松21-半琥珀酸潑尼松龍半琥珀酸鈉鹽、潑尼松龍21-半琥珀酸、半琥珀酸地塞米松、半琥珀酸地塞米松精胺、半琥珀酸皮質(zhì)酮半琥珀酸潑尼松龍、半琥珀酸甲潑尼龍、半琥珀酸地塞米松。此處使用的術(shù)語(yǔ)“兩親弱堿”指既具有疏水基團(tuán)又具有親水基團(tuán)的分子，GC的類固醇骨架基本構(gòu)成所述疏水基團(tuán)，而由于上述修飾而連接在GC上的弱堿部分基本構(gòu)成所述親水基團(tuán)。所述GC兩親弱堿性衍生物的特征在于下列物理特性-pKa其具有小于11.0，更優(yōu)選為約11.0～約7.5的pKa；-分配系數(shù)在正辛醇/緩沖液(水相)體系中，其具有約-2.5～約1.5，優(yōu)選為-1.5～約1.0的logD。可通過(guò)以下方法得到上述GC的兩親弱堿性衍生物將GC與諸如精氨酸或賴氨酸等堿性氨基酸反應(yīng)，或使GC通過(guò)其羧基與任何氨基酸反應(yīng)而使氨基自由，或?qū)C與諸如亞精胺或精胺等多胺反應(yīng)。此處使用的術(shù)語(yǔ)“脂質(zhì)體”指基于脂質(zhì)的雙層泡囊。脂質(zhì)體廣泛用作藥物、肽、蛋白質(zhì)、原生質(zhì)DNA(plasmicDNA)、反義寡核苷酸或核酶的生物相容性載體，而用于藥物、化妝和生化目的。所述脂質(zhì)在顆粒尺寸和物理參數(shù)上極其豐富的多樣性提供了有吸引力的潛力，以用于為廣泛的應(yīng)用而構(gòu)建特制載體。對(duì)于不同的應(yīng)用(例如胃腸外、經(jīng)皮、肺部、鼻內(nèi)和口服施用)的各種脂質(zhì)制劑(脂質(zhì)體、脂復(fù)合物、立方相、乳劑、微膠粒和固體脂質(zhì)納米顆粒)的不同性質(zhì)(尺寸、膠體行為、相轉(zhuǎn)移、電荷和多形性)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是可用的和已知的。這些性質(zhì)影響所述脂質(zhì)體的相關(guān)性質(zhì)，例如脂質(zhì)體在保存時(shí)和在血清中的穩(wěn)定性，生物分布和貨物的被動(dòng)或主動(dòng)(特異性)靶向，以及如何觸發(fā)藥物釋放和膜解體和/或融合。本發(fā)明可用于大量脂質(zhì)體組合物而本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何根據(jù)不同的考慮來(lái)選擇所述脂質(zhì)體的組成，所述考慮包括GC或GC衍生物的選擇、最終脂質(zhì)體制劑的施用模式等。所述脂質(zhì)體是主要由形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)所組成的脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)是兩親分子，該兩親分子的基本特征在于包裝參數(shù)為0.74～1.0或者在于加和包裝參數(shù)(脂質(zhì)體每種成分的包裝參數(shù)乘以每種成分的摩爾分?jǐn)?shù)的總和)為0.74～1的脂質(zhì)混合物。形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)，此處可舉出磷脂，其在水中形成雙層泡囊。所述脂質(zhì)體也可以包括加入到所述脂質(zhì)雙層中的其他脂質(zhì)，例如磷脂酰乙醇胺(PE)和甾醇，這些其他的脂質(zhì)的疏水部分與雙層膜的內(nèi)側(cè)疏水區(qū)域相接觸，而其頭部基團(tuán)部分朝向雙層膜的外側(cè)極性表面。這些附加的非形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分的類型和水平取決于所述脂質(zhì)雙層的所有組分的加和包裝參數(shù)保持為0.74～1.0。所述形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)優(yōu)選為具有丙三醇骨架的脂質(zhì)，在丙三醇骨架中頭部基團(tuán)的至少一個(gè)優(yōu)選兩個(gè)羥基優(yōu)選被?；溔〈?以形成?；蚨；苌?，然而也可以被烷基鏈或烯基鏈、磷酸基團(tuán)或它們的組合或衍生物取代，并且在所述頭部基團(tuán)中可含有化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)(例如胺、酸、酯、醛或醇)，因此提供了極性頭部基團(tuán)。諸如鞘磷脂等鞘脂是甘油磷酸酯的優(yōu)秀替代物。通常，所述取代鏈，例如酰基鏈、烷基鏈或烯基鏈的長(zhǎng)度為14～約24個(gè)碳原子，并具有為完全氫化、部分氫化或非氫化脂質(zhì)等不同的飽和度。此外，所述脂質(zhì)可以是天然來(lái)源的、半合成的或者全合成的脂質(zhì)，并且可以是中性的、帶負(fù)電的或帶正電的。存在大量形成泡囊的合成脂質(zhì)和形成泡囊的天然脂質(zhì)，包括諸如磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰甘油(PG)、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、蛋黃磷脂酰膽堿(EPC)、1-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰膽堿(POPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)等磷脂；磷脂酸(PA)、磷脂酰絲氨酸(PS)1-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰膽堿(POPC)，以及諸如具有12～24個(gè)碳原子酰基鏈或烷基鏈的鞘磷脂(SM)等鞘磷脂。上述具有不同飽和度的烴鏈(?；?烷基/烯基鏈)的脂質(zhì)和磷脂可以商購(gòu)或根據(jù)公開(kāi)的方法制備。其他合適的包含在脂質(zhì)體中的脂質(zhì)有甘油糖脂和鞘糖脂和甾醇(例如膽固醇或植物甾醇)。優(yōu)選為所述磷脂是蛋磷脂酰膽堿(EPC)、1-棕櫚酰-2-油酰磷脂酰膽堿(POPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)或氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)。陽(yáng)離子脂質(zhì)(單陽(yáng)離子和多陽(yáng)離子)也適合用于本發(fā)明的脂質(zhì)體中，其中所述陽(yáng)離子脂質(zhì)可作為所述脂質(zhì)組合物的次要成分或作為主要或單獨(dú)組分被包含于其中。所述陽(yáng)離子脂質(zhì)通常具有親脂部分，諸如甾醇、?；溁蚨；?，并且其中所述脂質(zhì)具有整體上的凈正電荷。優(yōu)選為所述脂質(zhì)載體的頭部基團(tuán)帶正電。單正電荷脂質(zhì)可包括例如，1，2-二肉豆蔻酰-3-三甲基銨丙烷(DMTAP)、1，2-二油酰氧-3-(三甲基氨基)丙烷(DOTAP)、N-[1-(2，3-二(十四烷氧基))丙基]-N，N-二甲基-N-羥乙基溴化銨(DMRIE)、N-[1-(2，3-二油酰氧)丙基]-N，N-二甲基-N-羥乙基-溴化銨(DORIE)、N-[1-(2，3-二油酰氧)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)、3β[N-(N′，N′-二甲基氨基乙烷)氨基甲酰基]膽固醇(DC-Chol)和二甲基-二(十八烷基)銨(DDAB)。多陽(yáng)離子脂質(zhì)的實(shí)例包括與單陽(yáng)離子脂質(zhì)相似的親脂性部分，多陽(yáng)離子部分與所述親脂性部分相連。示例性多陽(yáng)離子部分包括精胺或亞精胺(可舉出DOSPA和DOSPER)，或者諸如聚賴氨酸等肽或其他多胺脂質(zhì)。例如，中性脂質(zhì)(DOPE)能與聚賴氨酸衍生形成陽(yáng)離子脂質(zhì)。多陽(yáng)離子脂質(zhì)包括但不局限于N-[2-[[2，5-雙(3-氨丙基)氨基]-1-氧戊基]氨基]乙基]-N，N-二甲基-2，3-雙[(1-氧-9-十八碳烯基)氧基]-1-丙銨(DOSPA)和神經(jīng)酰胺氨基甲?；?CCS)。所述形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)混合物可經(jīng)選擇后實(shí)現(xiàn)特定程度的流動(dòng)性或剛性，以控制所述脂質(zhì)體在血清中的穩(wěn)定性以及控制被包封在脂質(zhì)體中的試劑的釋放速率。此外，所述脂質(zhì)體也可以包括脂質(zhì)與親水聚合物衍生形成的稱為脂聚合物的新的實(shí)體。脂聚合物優(yōu)選包括在其頭部基團(tuán)處使用分子量等于或大于750Da的聚合物進(jìn)行修飾的脂質(zhì)。所述頭部基團(tuán)可以是極性的或非極性的，然而，優(yōu)選連接有較大(＞750Da)高度水化(每個(gè)頭部基團(tuán)水化至少60個(gè)分子水)的柔性聚合物的極性頭部基團(tuán)。所述親水聚合物頭部基團(tuán)與脂質(zhì)區(qū)域的連接可以是共價(jià)的或者非共價(jià)的連接，然而，優(yōu)選通過(guò)共價(jià)鍵的形成(可選地通過(guò)接頭)。親水聚合物鏈的最外層有效地使得脂質(zhì)體在體內(nèi)具有較長(zhǎng)的血液循環(huán)壽命。所述脂聚合物可以通過(guò)兩種不同方式導(dǎo)入脂質(zhì)體(a)或者通過(guò)將所述脂聚合物加入到形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)混合物中。所述脂聚合物將被合并以及暴露在脂質(zhì)體雙層的內(nèi)小葉和外小葉[UsterP.S.等，F(xiàn)EBBSLetters386243(1996)]；(b)或者通過(guò)首先制備脂質(zhì)體然后或者通過(guò)在高于脂質(zhì)體和形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)的Tm的溫度溫育，或者通過(guò)短時(shí)間微波照射將脂聚合物并入預(yù)先形成的脂質(zhì)體的外小葉。以下文獻(xiàn)中已經(jīng)描述了包含形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)的泡囊的制備和親水聚合物對(duì)所述脂質(zhì)的衍生(因此形成脂聚合物)，例如Tirosh等，[Tirosh等，Biopys.J.，74(3)1371-1379，(1998)]和在美國(guó)專利第5,013,556號(hào)、第5,395,619號(hào)、第5,817,856號(hào)、第6,043,094號(hào)、第6,165,501號(hào)中，在此通過(guò)參考的方式整體引入，以及在WO98/07409中。所述脂聚合物可以是非離子脂聚合物(有時(shí)也稱為中性脂聚合物或不帶電荷的脂聚合物)或具有凈負(fù)電荷或凈正電荷的脂聚合物。存在可以連接到脂質(zhì)上的大量聚合物。通常用作脂質(zhì)修飾物的聚合物包括但不局限于聚乙二醇(PEG)、聚唾液酸、聚乳酸(也稱為聚丙交酯)、聚羥基乙酸(也稱為聚乙交酯)、聚乳酸-聚羥基乙酸(apolylactic-polyglycolicacid)、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基噁唑啉、聚乙基噁唑啉、聚羥乙基噁唑啉、聚羥丙基噁唑啉、聚天冬酰胺(polyaspartmide)、聚羥丙基甲基丙烯酰胺、聚甲基丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、聚乙烯基甲基醚、聚丙烯酸羥乙基酯、諸如羥甲基纖維素或羥乙基纖維素等衍生纖維素。這些聚合物可以以均聚物或嵌段共聚物或無(wú)規(guī)共聚物的形式使用。盡管衍生為脂聚合物的脂質(zhì)可以是中性、帶負(fù)電荷以及帶正電荷的，但是對(duì)帶特定電荷(或者不帶電荷)沒(méi)有限制，最常使用并可市售購(gòu)得的衍生為脂聚合物的脂質(zhì)是基于磷脂酰乙醇胺(PE)，通常為二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)的那些脂質(zhì)。本發(fā)明采用的一類具體的脂聚合物包括連接至DSPE的單甲基化PEG(具有不同長(zhǎng)度的PEG鏈，所述甲基化PEG在本文簡(jiǎn)稱為PEG)，其中所述PEG聚合物通過(guò)氨基甲酸酯連接與脂質(zhì)相連而形成帶負(fù)電荷的脂聚合物。其他脂聚合物是中性甲基聚乙二醇二硬脂酰甘油(mPEG-DSG)和中性甲基聚乙二醇羥羰基-3-氨基-1，2-丙二醇二硬脂酰酯(mPEG-DS)[GarbuzenkoO.等，Langmuir.212560-2568(2005)]。所述PEG部分優(yōu)選具有分子量為約750Da～約20,000Da的頭部基團(tuán)。更優(yōu)選為所述分子量為約750Da～約12,000Da以及最優(yōu)選為約1,000Da～約5,000Da。本文采用的一種具體的PEG-DSPE是其中PEG具有2000Da分子量的PEG-DSPE，在本文稱為2000PEG-DSPE或者2kPEG-DSPE。已描述包括所述衍生脂質(zhì)的脂質(zhì)體的制備，其中通常為1摩爾％～20摩爾％的所述衍生脂質(zhì)包括在所述脂質(zhì)體制劑中。已很好地確定脂質(zhì)體制劑的制備涉及除水相成分成分以外選擇合適的脂質(zhì)組合物，所述水相成分例如緩沖劑、抗氧化劑、金屬螯合劑和低溫保護(hù)劑等。諸如磷脂酰甘油等電荷誘導(dǎo)脂質(zhì)可加入到脂質(zhì)體雙層中以降低泡囊-泡囊融合并增強(qiáng)與細(xì)胞的相互作用，同時(shí)膽固醇和鞘磷脂可包含在制劑中以降低包封藥物的可透過(guò)性和泄漏。在中性pH的緩沖劑能減低水解。加入諸如抗壞血酸鈉等抗氧化劑能降低氧化等。這些脂質(zhì)體成分間比例的變化控制所述脂質(zhì)體的藥物性質(zhì)，包括脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，這是多種類型的泡囊應(yīng)用的主要考慮因素。顯然，脂質(zhì)體的穩(wěn)定性應(yīng)當(dāng)滿足與常規(guī)藥物相同的標(biāo)準(zhǔn)?；瘜W(xué)穩(wěn)定性涉及防止磷脂雙層中的酯鍵水解和脂質(zhì)鏈中不飽和位點(diǎn)的氧化?；瘜W(xué)不穩(wěn)定性可導(dǎo)致物理不穩(wěn)定性或者包封藥物從雙層中的泄漏以及泡囊的融合和聚集?；瘜W(xué)不穩(wěn)定性也可導(dǎo)致脂質(zhì)體的血液循環(huán)時(shí)間短，這將影響有效接近靶目標(biāo)和與靶目標(biāo)的相互作用。本發(fā)明的優(yōu)選制劑是含有諸如蛋PC(EPC)或氫化大豆PC(HSPC)等磷脂酰膽堿(PC)(作為形成脂質(zhì)體的脂質(zhì))、PEG化(2000Da)的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)和膽固醇的制劑。明顯地是，也可以以相同、相近或者不同摩爾比采用其他脂質(zhì)混合物，條件是脂質(zhì)體的不同成分的最終加和包裝參數(shù)為約0.74～1.0。已證明本發(fā)明的藥物制劑是高度穩(wěn)定的。在本發(fā)明的一個(gè)示意性實(shí)施方案中，GC衍生物、琥珀酸甲潑尼龍(用琥珀酸修飾的甲潑尼龍)被包封在含有上述三種成分的脂質(zhì)體中，該實(shí)施方案顯示在4℃保存14個(gè)月后GC衍生物僅有少量的減少(從起始濃度算少于20％)(圖3A-3B)。因此，在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語(yǔ)“穩(wěn)定性”指制劑在常規(guī)保存條件(4℃)在脂質(zhì)體中保留大部分(超過(guò)80％，優(yōu)選超過(guò)90％)GC/GC衍生物長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月、優(yōu)選為10個(gè)月并更優(yōu)選為14個(gè)月。因此，此處使用的術(shù)語(yǔ)“基本上保留”指80％，優(yōu)選90％的GC/GC衍生物在保存條件下保留在脂質(zhì)體中長(zhǎng)達(dá)約6個(gè)月，優(yōu)選為10個(gè)月并更優(yōu)選為14個(gè)月。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，通過(guò)使用立體穩(wěn)定脂質(zhì)體(SSL)，即包覆有親水成分的脂質(zhì)體來(lái)保持脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。根據(jù)一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，所述SSL包含摩爾比為55∶40∶5的氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)、2000PEG-DSPE和膽固醇的組合。通常，可獲得多種藥物裝載方法以制備含有俘獲藥物的脂質(zhì)體，包括被動(dòng)俘獲和主動(dòng)遠(yuǎn)程裝載。所述被動(dòng)俘獲法最適合將親脂性藥物俘獲入脂質(zhì)體膜中以及最適合俘獲高水溶解性的藥物。在可離子化親水性或兩親藥物的情況下，通過(guò)將藥物逆膜離子梯度裝載入脂質(zhì)體甚至能實(shí)現(xiàn)更高的藥物裝載效率[Nichols，J.W.，等，Biochim.Biophys.Acta455269-271(1976)；Cramer，J.，等，BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications75(2)295-301(1977)]。通常稱為遠(yuǎn)程裝載的這種裝載方法通常涉及天然為兩親并具有可離子化基團(tuán)的藥物，通過(guò)將所述藥物加入到具有內(nèi)側(cè)較高/外側(cè)較低的H+和/或離子梯度的脂質(zhì)體懸浮液中進(jìn)行裝載。在本發(fā)明的上下文中采用的脂質(zhì)體優(yōu)選通過(guò)遠(yuǎn)程裝載原理進(jìn)行裝載。所得制劑表現(xiàn)出顯著高的GC衍生物脂質(zhì)比例。優(yōu)選為GC衍生物與脂質(zhì)的摩爾比為0.01～2.0，更優(yōu)選為0.04～0.25。對(duì)于GC衍生物的高裝載，有時(shí)候優(yōu)選其在脂質(zhì)體中的濃度為使其在預(yù)先俘獲的反離子存在下沉淀?？梢酝ㄟ^(guò)多種技術(shù)制備用于遠(yuǎn)程裝載中具有跨脂質(zhì)體雙層的H+和/或離子梯度的脂質(zhì)體。典型的方法包括將具有形成穩(wěn)定脂質(zhì)體的比例的脂質(zhì)混合物溶解在合適的有機(jī)溶劑中并在容器中蒸發(fā)形成脂質(zhì)薄膜。隨后使用將在脂質(zhì)體內(nèi)部空間中形成水相的含有溶質(zhì)物質(zhì)的水性介質(zhì)覆蓋在薄膜上。在脂質(zhì)體形成后，根據(jù)已知方法可以調(diào)節(jié)泡囊的尺寸以實(shí)現(xiàn)在所選范圍內(nèi)的脂質(zhì)體尺寸分布。在本發(fā)明中使用的脂質(zhì)體優(yōu)選為均勻調(diào)整至選定的尺寸范圍70nm～100nm，優(yōu)選為約80nm。在調(diào)整尺寸后，脂質(zhì)體的外部介質(zhì)經(jīng)處理形成跨脂質(zhì)體膜的離子梯度(通常使用與形成脂質(zhì)體相同的緩沖液)，其通常為內(nèi)側(cè)較高/外側(cè)較低的離子濃度梯度。這可以通過(guò)多種方式完成，例如通過(guò)(i)稀釋外部介質(zhì)，(ii)對(duì)所需的最終介質(zhì)透析，(iii)凝膠排阻色譜，例如使用SephadexG-50，在用于洗脫的所需介質(zhì)中平衡，或者(iv)重復(fù)進(jìn)行高速離心和將沉淀脂質(zhì)體在所需最終介質(zhì)中重懸浮。外部介質(zhì)的選擇取決于梯度的類型、梯度形成的機(jī)制、外部溶質(zhì)和所需的pH，現(xiàn)將進(jìn)行描述。在產(chǎn)生離子和/或H+梯度的最簡(jiǎn)單的方法中，脂質(zhì)在具有選定的內(nèi)部介質(zhì)pH的介質(zhì)中進(jìn)行水合和調(diào)整大小。脂質(zhì)體的懸浮液經(jīng)過(guò)滴定直到外部脂質(zhì)體混合物達(dá)到所需最終pH，或者經(jīng)過(guò)如上處理使外部相緩沖液與具有所需外部pH的緩沖液交換。例如，在選定的緩沖液，例如谷氨酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、富馬酸鹽緩沖液中的起始水合介質(zhì)可具有5.5的pH，而最終外部介質(zhì)可具有在相同或不同緩沖液中的8.5的pH。這些緩沖液的共同特性是它們形成自脂質(zhì)體基本不能穿過(guò)的酸。優(yōu)選選擇內(nèi)部和外部介質(zhì)使之含有相同的重量克分子滲透濃度，例如通過(guò)合適地調(diào)節(jié)緩沖液、鹽或諸如葡萄糖或蔗糖等低分子非電解質(zhì)溶質(zhì)的濃度。在另外一種通用方法中，通過(guò)在脂質(zhì)體中包括選定的離子載體來(lái)生成梯度。為了進(jìn)行示例，在鉀緩沖液中制備用于制備在脂質(zhì)體雙層中包含纈氨霉素的脂質(zhì)體，調(diào)整尺寸，然后外部介質(zhì)與鈉緩沖液交換，而產(chǎn)生內(nèi)側(cè)鉀/外側(cè)鈉的梯度。鉀離子由內(nèi)向外方向的移動(dòng)接著產(chǎn)生內(nèi)側(cè)較低/外側(cè)較高的pH梯度，大概是由于質(zhì)子響應(yīng)跨脂質(zhì)體膜的凈電負(fù)性從而進(jìn)入脂質(zhì)體的移動(dòng)[Deamer，D.W.，等，Biochim.etBiophys.Acta274323(1972)]。相似的方法是水合所述脂質(zhì)和在高濃度硫酸鎂中調(diào)整所形成的多層脂質(zhì)體的尺寸。通過(guò)對(duì)蔗糖中的20mMHEPPES，pH7.4的緩沖液透析產(chǎn)生所述硫酸鎂梯度。然后，加入A23187離子載體，而引起鎂離子的向外轉(zhuǎn)運(yùn)以每個(gè)鎂離子交換兩個(gè)質(zhì)子，還建立脂質(zhì)體內(nèi)側(cè)高/脂質(zhì)體外側(cè)低的質(zhì)子梯度[SenskeDB等(Biochim.Biophys.Acta1414188-204(1998)]。在另一個(gè)更優(yōu)選的方法中，用于藥物裝載的質(zhì)子梯度是通過(guò)建立跨脂質(zhì)體膜的銨離子梯度產(chǎn)生的，如同在例如美國(guó)專利第5,192,549號(hào)和第5,316,771號(hào)中所描述，在此以參考的方式引入。所述脂質(zhì)體在含有諸如硫酸銨、磷酸銨和檸檬酸銨等銨鹽的水性緩沖液中制備，所述銨鹽通常為在諸如5.5～7.5的合適pH的0.1M～0.3M銨鹽。所述梯度也可以通過(guò)在水合介質(zhì)中包括硫酸化聚合物產(chǎn)生，所述硫酸化聚合物例如葡萄糖硫酸酯銨鹽、肝素硫酸酯銨鹽或硫糖鋁。在脂質(zhì)體形成和尺寸調(diào)整以后，外部介質(zhì)與不含銨離子的介質(zhì)交換。在該方法中，在裝載過(guò)程中兩親弱堿與銨離子進(jìn)行交換。還有，在美國(guó)專利第5,939,096號(hào)中描述了另一種方法，在此以參考的方式引入。簡(jiǎn)言之，所述方法采用包括諸如乙酸等弱酸的鹽的質(zhì)子穿梭機(jī)制，所述弱酸鹽的質(zhì)子化形式跨過(guò)脂質(zhì)體膜進(jìn)行位置轉(zhuǎn)移而形成內(nèi)側(cè)高/外側(cè)低的pH梯度。然后將兩親弱酸化合物加入到預(yù)先形成的脂質(zhì)體的介質(zhì)中。所述兩親弱酸響應(yīng)該梯度在脂質(zhì)體內(nèi)聚集，并通過(guò)陽(yáng)離子(例如鈣離子)促進(jìn)的沉淀或跨脂質(zhì)體膜低穿透性保留在脂質(zhì)體中，即，所述兩親弱酸與乙酸交換。裝載有GC或GC衍生物的脂質(zhì)體可以以多種方式施用。它可與本領(lǐng)域內(nèi)已知的生理上可接受的賦形劑聯(lián)合配制。根據(jù)本發(fā)明采用的可藥用賦形劑通常包括優(yōu)選不與脂質(zhì)體反應(yīng)的惰性無(wú)毒物質(zhì)。所述賦形劑可以是任何通常使用的賦形劑并只受限于化學(xué)-物理考慮(例如溶解度和不具有與脂質(zhì)體的反應(yīng)性)和施用途徑。賦形劑有時(shí)還可以具有提高所述脂質(zhì)體制劑輸送或滲到靶組織、提高所述脂質(zhì)體制劑的穩(wěn)定性、減緩清除速度、賦予緩釋特性和減少不希望的副反應(yīng)等作用。所述賦形劑也可以是穩(wěn)定制劑的物質(zhì)(例如防腐劑)，為制劑提供可食用香味等。所述賦形劑可以包括添加劑、著色劑、稀釋劑、緩沖劑、崩解劑、濕潤(rùn)劑、防腐劑、香味劑以及藥理學(xué)相容的載體。例如，當(dāng)治療神經(jīng)變性癥狀時(shí)，所述賦形劑可以是已知能促進(jìn)或協(xié)助通過(guò)血腦屏障(BBB)的分子，諸如轉(zhuǎn)鐵蛋白受體結(jié)合劑、抗體或者任何自身能通過(guò)BBB轉(zhuǎn)移的藥物。本發(fā)明的藥物組合物具有用于治療多種癥狀的優(yōu)點(diǎn)，所述癥狀通常是已知能通過(guò)施用GC進(jìn)行治療的癥狀(至少在其進(jìn)程中的一個(gè)階段)。這樣的癥狀的實(shí)例包括神經(jīng)變性癥狀和癌癥，在后文中詳細(xì)描述。因此，除GC或GC衍生物以外，本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑還可含有一種以上活性成分。附加的活性成分可以處于游離形式或者也包封在脂質(zhì)體中(與含有GC衍生物脂質(zhì)體在一起或者分離)。例如，當(dāng)治療癌癥時(shí)，所述附加活性成分可以是包封在相同或不同脂質(zhì)體中的細(xì)胞毒性藥物，諸如阿霉素。用于治療神經(jīng)變性癥狀時(shí)，所述脂質(zhì)體制劑可以與克帕松或者倍泰龍組合。下述為可使用本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑治療或防治的醫(yī)學(xué)癥狀的非限制性列表，其他已知可受益于GC治療的癥狀也包括在本發(fā)明的范圍之中內(nèi)分泌失調(diào)，包括原發(fā)性或繼發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能不全；先天性腎上腺增生、與癌癥相關(guān)的高鈣血綜合征、非化膿性甲狀腺炎。膠原疾病，包括例如在以下選定案例中用于加重期或者作為維持療法。皮膚病，包括例如天皰瘡、大皰皮炎、嚴(yán)重紅斑多皰疹樣形狀(斯蒂文斯-約翰遜嚴(yán)重皮脂溢綜合征)皮炎、剝脫性皮炎、嚴(yán)重牛皮癬、蕈樣真菌病。過(guò)敏狀態(tài)，包括例如控制如下對(duì)常規(guī)治療的充分試驗(yàn)不響應(yīng)的嚴(yán)重或失能性過(guò)敏癥狀支氣管哮喘、藥物超敏接觸性皮炎反應(yīng)、特應(yīng)性皮炎、蕁麻疹性輸血反應(yīng)、血清病反應(yīng)、季節(jié)性或常年性急性非傳染性過(guò)敏性鼻炎喉水腫。眼部疾病，包括例如累及眼睛的嚴(yán)重急慢性過(guò)敏性和炎性過(guò)程，例如眼帶狀皰疹、交感性眼炎、虹膜炎、虹膜睫狀體炎、前段脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜炎、炎癥擴(kuò)散性后色素層炎、過(guò)敏性結(jié)膜炎和脈絡(luò)膜炎、過(guò)敏性角膜邊緣、視神經(jīng)炎潰瘍、角膜炎。呼吸性疾病，包括例如癥狀性結(jié)節(jié)病、呂弗勒氏綜合征非鈹中毒(可受其他爆發(fā)性或傳播性控制，不受其他方法控制)，吸入性肺炎、肺結(jié)核(可選地與合適的抗肺結(jié)核化學(xué)治療法同時(shí)使用)。血液疾病，包括獲得性(自體免疫性)溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、繼發(fā)性血小板減少癥、成紅細(xì)胞減少癥(RBC貧血)、先天性(紅細(xì)胞)再生不良性貧血。腫瘤病，包括例如，用于控制白血病和淋巴瘤、骨髓瘤、乳癌和前列腺癌。水腫狀態(tài)，包括例如，在特發(fā)型或紅斑狼瘡引起的腎病綜合征(沒(méi)有尿毒癥)中誘導(dǎo)利尿或緩解蛋白尿。神經(jīng)系統(tǒng)，包括例如多發(fā)性硬化(MS)的急性加重期。以及其他癥狀，例如具有蛛網(wǎng)膜下腔阻滯或者趨于阻滯的結(jié)核性腦膜炎(當(dāng)與合適的抗結(jié)核性化學(xué)治療同時(shí)使用時(shí))；累及神經(jīng)系統(tǒng)或心肌的旋毛蟲病。因此，本發(fā)明也涉及一種用于治療或防治疾病或病理癥狀的方法，所述方法包括向需要所述治療的受試對(duì)象施用一定量的本發(fā)明的脂質(zhì)體制劑，所述量為有效地治療或防治所述疾病和病理癥狀的量(下文中為“有效量”)。由本發(fā)明治療的優(yōu)選癥狀是癌癥和神經(jīng)變性癥狀。此處使用的術(shù)語(yǔ)“治療”指施用一定量的包封在脂質(zhì)體中的GC或GC衍生物(所述量對(duì)減輕與疾病相關(guān)的不希望的癥狀有效)以在所述癥狀出現(xiàn)前防止所述癥狀的顯現(xiàn)，減緩疾病的進(jìn)程、減緩與所述疾病相關(guān)的癥狀的惡化、加速疾病緩解期的出現(xiàn)、減緩所述疾病的進(jìn)行性慢性期導(dǎo)致的不可逆損傷、延緩所述進(jìn)行性階段的出現(xiàn)、緩解嚴(yán)重性或治愈所述疾病、提高存活率或從如此疾病中更快的恢復(fù)、防止疾病的發(fā)生，或者上述作用中的兩種以上的組合。例如，當(dāng)指神經(jīng)變性癥狀時(shí)，治療指抑制或減緩神經(jīng)系統(tǒng)的異常惡化以及在具有發(fā)展神經(jīng)變性癥狀的高易感性(如同通過(guò)精通藥物的技術(shù)人員已知的考慮因素所確定的)的受試對(duì)象中進(jìn)行預(yù)防，或者用于防止慢性病受試對(duì)象的神經(jīng)變性癥狀急性階段的復(fù)發(fā)。在后一種情況中，所述含有脂質(zhì)體GC衍生物的藥物組合物可施用于不具有神經(jīng)變性癥狀但具有發(fā)展這些癥狀的高風(fēng)險(xiǎn)的受試對(duì)象，例如作為接觸已知可導(dǎo)致異常生成反應(yīng)性氧化性物種的試劑的結(jié)果，或者具有家族疾病史的受試對(duì)象(即遺傳易感性)。此外，例如，當(dāng)所述疾病是癌癥時(shí)，治療尤其是指抑制或減少腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖包括阻止原發(fā)性腫瘤的生長(zhǎng)，或降低與癌癥相關(guān)的死亡速率，或延緩與癌癥相關(guān)的死亡率，這可導(dǎo)致減小腫瘤尺寸或者從個(gè)體體內(nèi)將其完全清除，或者降低轉(zhuǎn)移性腫瘤的發(fā)生率，或者減少在個(gè)體中轉(zhuǎn)移性腫瘤出現(xiàn)的數(shù)目。所述脂質(zhì)體GC衍生物可以以單劑形式提供，然而優(yōu)選為向需要治療的受試個(gè)體以每日一劑、每日多劑或多日一劑等在較長(zhǎng)時(shí)期或時(shí)間內(nèi)施用(例如為產(chǎn)生累計(jì)有效量)。所述治療策略和將施用的具體制劑取決于待治療的疾病的類型并通過(guò)醫(yī)療領(lǐng)域里技術(shù)人員，例如主治醫(yī)師等已知的多種考慮因素確定。此處使用的術(shù)語(yǔ)“有效量”或“治療有效量”指當(dāng)在指定治療策略中裝載于脂質(zhì)體中時(shí)，足以實(shí)現(xiàn)所需效果的GC衍生物的量，所述所需效果例如抑制或減少腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，或者抑制或減少神經(jīng)細(xì)胞的退化以及因此導(dǎo)致的神經(jīng)系統(tǒng)的退化。所述量通過(guò)本領(lǐng)域內(nèi)可已知的那些考慮因素決定并取決于待治療的病癥的類型和嚴(yán)重性以及治療策略。通常在恰當(dāng)設(shè)計(jì)的臨床試驗(yàn)(劑量范圍研究)中確定有效量并且本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何正確地進(jìn)行這樣的試驗(yàn)以確定有效量。正如通常已知，有效量取決于各種因素，包括施用模式、負(fù)載所述兩親弱酸/堿的載體的類型、所述GC衍生物的反應(yīng)性、所述脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布概況、諸如從脂質(zhì)體中釋放后在體內(nèi)的半衰期等各種藥物參數(shù)，取決于(如果有的話)不期望的副作用，取決于被治療受試對(duì)象的諸如年齡和性別等因素，等等。此處使用的“施用”用以指通過(guò)任何合適的用于輸送脂質(zhì)體制劑到受試對(duì)象中所期望的部位的途徑而接觸或分散、輸送或應(yīng)用所述脂質(zhì)體制劑，所述途徑包括口服、胃腸外(包括皮下、肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi))和鼻內(nèi)施用以及通過(guò)鞘內(nèi)或輸注技術(shù)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明使用的制劑是適用于注射的形式。用于注射制劑的有效藥物載體的要求對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員是公知的，參見(jiàn)PharmaceuticsandPharmacyPractice，J.B.LippincottCo.，Philadelphia，Pa.，Banker和Chalmers，編輯，第238-250頁(yè)(1982)，和ASHPHandbookonInjectableDrugs，Toissel，第四版，第622-630頁(yè)(1986)。應(yīng)當(dāng)注意的是對(duì)人類的治療通常長(zhǎng)于在此處舉例的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，所述治療的時(shí)間長(zhǎng)短與疾病過(guò)程和活性劑效率成比例。所述劑量可以在幾天的時(shí)間里施用的單劑或多劑。雖然下列公開(kāi)內(nèi)容提供了使用動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，但有多種用于將動(dòng)物模型的劑量換算為人類用的劑量的可接受方法。例如，近似體表面積(BSA)方法的計(jì)算利用基于體重(BW)的簡(jiǎn)單異速生長(zhǎng)關(guān)系，從而B(niǎo)SA等于體重(BW)的0.67次方[FreireichE.J.等，CancerChemother.Reports1966，50(4)219-244；和Mordenti，J在如DosageRegimenDesignforPharmaceuticalStudiesConductedinAnimals中所分析的，J.Pharm.Sci.，75852-57，1986]。此外，也已建立BSA數(shù)據(jù)的異速生長(zhǎng)和表格[ExtrapolationofToxicologicalandPharmacologicalDatafromAnimalstoHumans，ChappellW&MordentiJ，AdvancesinDrugResearch，卷20，1-116，1991(AcademicPressLtd出版)]。另一個(gè)換算劑量的方法是使用濃度時(shí)間曲線下面積(AUC)的基于藥物代謝動(dòng)力學(xué)的方法或者是以下所描述的基于生理學(xué)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)(PBPK)方法[VoisinE.M.等RegulToxicolPharmacol.12(2)107-116.(1990)]?，F(xiàn)在通過(guò)顯示出SSL-MPS對(duì)EAE和淋巴細(xì)胞的作用的非限制性實(shí)施例的方式描述本發(fā)明。實(shí)施例概況材料氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)獲自LipoidKG(Ludwigshafen，德國(guó))。N-氨基甲酰基-聚-(乙二醇甲基醚)-1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺三乙基銨鹽(PEG-DSPE)(該磷脂的聚乙烯部分具有2000Da的分子量)獲自GenzymeLiestale，瑞士。膽固醇(＞99％純度)獲自Sigma(St.Louis，MO，USA)。膽固醇基十六烷基醚(每mmol45Ci)來(lái)自NENLifeScienceProducts(Boston，MA，USA)。叔丁醇(99％純)購(gòu)自BDH，Poole，UK。弱酸性類固醇、藥物前體甲潑尼龍半琥珀酸鈉(MPS)和氫化可的松半琥珀酸鈉(HYD)獲自Pfeizer，Belgium。所有其他化學(xué)試劑，包括緩沖劑都是分析級(jí)以上，并獲自Sigma。純化水獲自WaterProPSHPLC/UltrafilterHybrid型，(Labconco，KansasCity，Mo.，USA)。方法脂質(zhì)體的制備將摩爾比為55∶40∶5的HSPC/膽固醇/PEG-DSPE-2000儲(chǔ)備溶液溶解在70℃乙醇中至62.5％(w/v)的最終凝膠脂質(zhì)濃度。然后將所述溶液在70℃溫育直到所有脂質(zhì)溶解為清澈溶液。隨后將所述儲(chǔ)備溶液加入到70℃的200mM乙酸鈣溶液中以得到10％脂質(zhì)濃度(w/v)并因此達(dá)到16％(w/v)的最終乙醇濃度。將混合物在70℃持續(xù)攪拌得到奶狀分散液，在此階段脂質(zhì)水合形成多層脂質(zhì)體(MLV)分散液。通過(guò)具有開(kāi)始于400nm并結(jié)束于50nm孔徑濾孔的特定孔徑的聚碳酸酯過(guò)濾器擠出已形成的泡囊而使之尺寸變小，最后的擠出步驟在低壓至中壓下進(jìn)行。該過(guò)程形成80±15nm的脂質(zhì)體。在整個(gè)過(guò)程中將所述擠出裝置(NorthernLipids，加拿大)保持在70℃恒溫。通過(guò)在4℃對(duì)5％蔗糖或0.9的生理鹽水進(jìn)行透析(4次交換×每次100體積，最后一次過(guò)夜)獲得脂質(zhì)體外(extraliposomal)乙酸鈣的移除以產(chǎn)生乙酸鈣梯度{脂質(zhì)體中[乙酸鈣]＞＞介質(zhì)中[乙酸鈣]}。通過(guò)改進(jìn)的Bartlet程序[Shmeeda，H.，等，在MethodsinEnzymology“Liposomes”中，(Düzgünes，N.，編輯)，367272-292(2003)]由有機(jī)磷濃度確定脂質(zhì)體磷脂濃度。在所得脂質(zhì)體儲(chǔ)備溶液中的脂質(zhì)濃度為約40mM。通過(guò)使用原子吸收光譜法(AAS)測(cè)定脂質(zhì)體內(nèi)部的鈣量。放射性SSL的制備和表征如上所述制備由HSPC∶Chol∶2000PEG-DSPE(55∶40∶5摩爾比)和痕量的[3H]膽固醇基十六烷基醚(0.125μCi/μmolPL)構(gòu)成的[3H]膽固醇醚標(biāo)記的空間穩(wěn)定脂質(zhì)體(SSL)。所述脂質(zhì)體尺寸由動(dòng)態(tài)光散射(DLS)測(cè)量為87±15nm。將GC衍生物裝載入脂質(zhì)體將甲潑尼龍半琥珀酸鈉鹽(MPS，所述GC衍生物)的儲(chǔ)備溶液溶解在5％葡萄糖(pH7.2)中得到約9mg/ml的濃度并在建立乙酸鈣梯度后加入到預(yù)形成的SSL分散液中。MPS濃度為約9mg/ml而磷脂濃度為約32mM磷酸酯。通過(guò)將上述成分在62℃(高于基質(zhì)脂質(zhì)Tm)溫育所需時(shí)間實(shí)現(xiàn)所述裝載。然后將脂質(zhì)體冷卻至4℃和在4℃對(duì)5％葡萄糖透析以去除裝載時(shí)釋放的乙酸鹽和去除未裝載的藥物，或者作為另外一種選擇通過(guò)離子交換器Dowex1×400目(Cl-形式)去除未裝載的藥物。MPS的聚集態(tài)、分配系數(shù)和表面張力1.MPS的聚集態(tài)使用分光熒光計(jì)在MPS沒(méi)有吸收的條件下(激發(fā)和發(fā)射在相同波長(zhǎng)Ex＝600nm，Em＝600nm)以與激發(fā)光束成90°時(shí)的光散射的強(qiáng)度作為所測(cè)定的濁度，通過(guò)濁度變化來(lái)判定MPS的聚集。由于聚集的形成，MPS溶液/分散液的光散射有很大提高。散射光的強(qiáng)度(與激發(fā)成90°)也定義為濁度，與聚集體的濃度和尺寸成比例[Zuidam，N.J.和Barenholz，Y.，Biochim.Biophys.Acta1368115-128(1998)]。按照如下方式測(cè)試MPS的聚集態(tài)向石英比色杯中加入MPS濃度為約6.5mg/ml的MPS(2ml)。然后用HCl(1.756M)滴定所述溶液并使用都在600nm具有1％衰減的激發(fā)光和發(fā)射光散射并監(jiān)測(cè)溶液的pH。2.分配系數(shù)通過(guò)如[Samuni，A.M.和Barenholz，Y.，F(xiàn)reeRadicalsBiol.Med.221165-1174(1997)]描述的“搖晃燒瓶(shakeflask)”測(cè)定一些GC衍生物(兩親弱酸)的分配系數(shù)(logD)。3.表面張力通過(guò)使用μtrougeS(KibronInc.，Helsinki，芬蘭)測(cè)量表面張力。將含有GC衍生物的溶液(300μl)在使用純水和空氣將傳感器校準(zhǔn)和歸零后放置在井中。在26℃進(jìn)行測(cè)量。SSL內(nèi)MPS的沉淀如[Lasic，D.D.，F(xiàn)rederik，P.M.，Stuart，M.C.A.，Barenholz，Y.和McIntosh，T.J.，Gelationofliposomeinterior.Anovelmethodfordrugencapsulation.FEBSLett.312，255-258(1992)；Lasic，D.D.，等Biochim.Biophys.Acta1239，145-156(1995)]所述使用CryoTEM使泡囊的脂質(zhì)體內(nèi)水相中的MPS沉淀可視化。沉淀研究在63℃，在不同pH點(diǎn)下向600mOsm的乙酸鈣溶液中加入MPS使最終濃度為5mg/ml，然后將所得混合溶液溫育40分鐘，然后離心所述溶液并使用HPLC分析上清液。裝載效率裝載效率是裝載后和裝載前的MPS/磷脂濃度間的比例。如Anderson，和Taphouse1981[AndersonB.D.和Taphouse.V.JPharmSci，70181-6(1981)]所描述在HPLC裝置中完成MPS的定量，通過(guò)改進(jìn)的Bartlet程序[Shmeeda，H.，等在MethodsinEnzymology“Liposomes”中，(Düzgünes，N.編輯)，367272-292(2003)]完成磷脂的定量。穩(wěn)定性測(cè)定MPS從脂質(zhì)體中釋放的測(cè)定通過(guò)使用凝膠排阻色譜法在瓊脂糖交聯(lián)CL-4B柱上首先從游離MPS中分離出脂質(zhì)體來(lái)測(cè)定從SSL-MPS釋放的MPS的水平。脂質(zhì)體在外水體積中洗脫而游離MPS在隨后的洗脫級(jí)分中(圖3A-3B)。保存在4℃的穩(wěn)定性和在37℃的80％血漿中的釋放動(dòng)力學(xué)通過(guò)上述的凝膠排阻色譜法測(cè)定。然后如上所述對(duì)不同的柱級(jí)分進(jìn)行分析以確定在外水體積級(jí)分中的MPS、磷脂和Ca。另外，在37℃，SSL-MPS與80％的人發(fā)炎滑液在80％血漿的比例下溫育。然后在不同的時(shí)間點(diǎn)將樣品與陰離子交換樹(shù)脂(DOWEX，1×400目(Cl-形式))渦旋，所述樹(shù)脂只與游離MPS結(jié)合。分析所述樣品以確定脂質(zhì)體包封的MPS和脂質(zhì)體磷脂含量。結(jié)果下列表1提供了所測(cè)試的GC衍生物的logD和pKa，其使用AdvancedChemistryDevelopment(ACD/Labs)[SoftwareSolarisV4.67(&#61651；1994-2005ACD/Labs)SciFinderSCHOLARVersion2004.2AmericanChemicalSociety2004]進(jìn)行計(jì)算。表1不同GC衍生物的logD和pKaMPS的濁度、分配系數(shù)和表面張力測(cè)定MPS的濁度(指示聚集度)。圖1A中顯示的結(jié)果指出在pH7.2所述兩親弱酸衍生物(藥物前體)是非聚集水溶性的，而在酸性pH其則聚集，因此表現(xiàn)出濁度的增加。在很低的pH觀察到濁度的降低，這是由于形成非常大的沉淀的聚集體。點(diǎn)狀線箭頭指出從使用HCl(μmolH+，箭頭左側(cè))滴定到使用NaOH(μmolOH-，箭頭右側(cè))滴定的轉(zhuǎn)換點(diǎn)。在不同pH點(diǎn)測(cè)定MPS的分配系數(shù)。如圖1B所示，MPS實(shí)際是兩親物質(zhì)。另外，測(cè)定了MPS的表面張力并在圖3C中明顯示出，MPS在使用的所有濃度(0.785mM～30mM)具有表面活性并在約5mM具有CAC(臨界離解/聚集濃度)點(diǎn)，而諸如磷酸地塞米松等具有磷酸酯基團(tuán)(強(qiáng)酸性基團(tuán))的GC在至少高至50mM的濃度下沒(méi)有表面活性且并不自離解形成膠束和/或其他有規(guī)裝配體。通過(guò)鈣離子的MPS的沉淀如上所述測(cè)定了在存在乙酸鈣溶液時(shí)MPS的沉淀。表2顯示了存在鈣離子時(shí)，即在不同pH時(shí)沉淀的MPS的百分比。如所示，在pH6.8時(shí)已發(fā)生沉淀。在pH位于GC的pKa(pH4.5)附近時(shí)沉淀增加到極大程度(97％的MPS)。表2MPS的沉淀不同脂質(zhì)體制劑的普通裝載效率1.脂質(zhì)體裝載效率使用三個(gè)單獨(dú)批次(由日期進(jìn)行區(qū)別)以測(cè)定藥物裝載入脂質(zhì)體的效率(HSPC∶Chol∶2000PEG-DSPE(55∶40∶5摩爾比))，總結(jié)在表3中。表3裝載入脂質(zhì)體的效率(a)脂質(zhì)體中的MPS+脂質(zhì)體外介質(zhì)中的MPS(b)僅在脂質(zhì)體中的MPS2.不同脂質(zhì)體制劑的MPS裝載效率已確定用于有效裝載的最佳條件包括約600mOsm的乙酸鈣。在使用初始藥物前體濃度為5mg/ml～10mg/ml，優(yōu)選為9mg/ml時(shí)，獲得MPS在HSPC∶Chol∶2000PEG-DSPE(55∶40∶5摩爾比)的脂質(zhì)體中具有該MPS/磷脂比例的裝載效率。藥物前體在最終制劑中的濃度為約6.5mg/ml，其用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)(下文中稱為SSL-MPS制劑或簡(jiǎn)稱為SSL-MPS)。圖2A-2B是在裝載前(圖2A)和裝載后(圖2B)脂質(zhì)體的Cryo-TEM圖像，清晰地顯示出沉淀在脂質(zhì)體內(nèi)部水相空間中的位置。脂質(zhì)體制劑的穩(wěn)定性如上所述測(cè)定14個(gè)月期間在SSL-MPS(即完整的脂質(zhì)體制劑)中MPS的濃度。圖3A顯示在14個(gè)月以后約80％的MPS保留在脂質(zhì)體中。部分游離MPS水解為其活性形式甲潑尼龍(MP)。圖3B提供了在4℃保存14個(gè)月以后的脂質(zhì)體制劑的瓊脂糖4B尺寸排阻色譜圖，以及該色譜圖在級(jí)分8～17處的放大圖(圖3C)，顯示出游離MPS以及游離MP的存在。此外，測(cè)定了在臨床相關(guān)環(huán)境中SSL-MPS的穩(wěn)定性。圖4顯示了脂質(zhì)體制劑在人類血漿中的穩(wěn)定性。在MPS被釋放(在脂質(zhì)體中的半衰期為50小時(shí))的條件下100％的包封鈣保留在包封脂質(zhì)體中，這說(shuō)明所述脂質(zhì)體可以在血漿中完整保留至少66個(gè)小時(shí)。這表明MPS的釋放是由于其兩親性。MPS釋放的半衰期是與SSL經(jīng)i.v.(靜脈內(nèi))注射后在血漿中的半衰期相似的值。實(shí)施例1-多發(fā)性硬化(MS)使用蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)來(lái)誘導(dǎo)急性EAE實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型通過(guò)皮下注射含有蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)139-151肽和完全弗氏佐劑(CFA)，含有150μg肽和200μg結(jié)核分枝桿菌(Mycobacteriumtuberculosis)的乳劑對(duì)6～7周齡的SJL雌性小鼠進(jìn)行免疫。為了增強(qiáng)免疫系統(tǒng)，在第一天和48小時(shí)后向小鼠腹膜內(nèi)(i.p.)注射150ng百日咳毒素(PT)。每日使用下表4檢查每只小鼠的EAE臨床征兆表4臨床征兆評(píng)分合計(jì)各動(dòng)物組中發(fā)病(患病)小鼠的數(shù)目并計(jì)算其百分比。此外，平均最大評(píng)分(MMS)可如下獲得通過(guò)合計(jì)所述組中10只小鼠中每一只的最大評(píng)分并在此基礎(chǔ)上根據(jù)如下等式計(jì)算該組的平均最大評(píng)分∑每只小鼠的最大評(píng)分/該組中小鼠的數(shù)目另外，以天數(shù)表示的疾病平均持續(xù)時(shí)間(MDD)根據(jù)如下等式計(jì)算∑每只小鼠的疾病持續(xù)時(shí)間/該組中小鼠的數(shù)目另外，通過(guò)合計(jì)所述組中10只小鼠中的每一只的評(píng)分并根據(jù)如下等式計(jì)算每天的平均評(píng)分來(lái)確定每組的平均評(píng)分(GMS)(疾病負(fù)荷)∑每只小鼠每天的總評(píng)分/該組中小鼠的數(shù)目使用SSL-MPS治療EAE根據(jù)下表5將EAE誘導(dǎo)小鼠分為治療組。表5治療設(shè)計(jì)在三周的時(shí)間里進(jìn)行隨查，并在不同時(shí)間點(diǎn)判定EAE臨床征兆。對(duì)于每一組，確定發(fā)病率、MMS＝平均最大評(píng)分；MDD＝平均疾病持續(xù)時(shí)間(天數(shù))；MDO＝平均發(fā)作日和平均評(píng)分(表6)。此外，確定了每一組在各時(shí)間點(diǎn)的平均臨床評(píng)分(圖5)。表6觀察到的臨床征兆嚴(yán)重疾病負(fù)荷的治療對(duì)于表現(xiàn)出嚴(yán)重疾病負(fù)荷的小鼠(通過(guò)合計(jì)所述組中10只小鼠中每一只的評(píng)分并根據(jù)下述等式計(jì)算每天的平均評(píng)分∑每只小鼠每天的總評(píng)分/該組中小鼠的數(shù)目來(lái)確定)采用不同的治療方案。具體地說(shuō)，在上述免疫后，使用50mg/kgBWSSL-MPS(第10日、14日和18日)或者使用游離MPS50mg/kgBW(第10日、14日和18日)或葡萄糖5％(第10日、14日和18日)對(duì)小鼠進(jìn)行治療。對(duì)于每一組，確定發(fā)病率、MMS＝平均最大評(píng)分；MDD＝平均疾病持續(xù)時(shí)間(天數(shù))；MDO＝平均發(fā)作日和平均評(píng)分(表7)。此外，確定了每一組在各時(shí)間點(diǎn)的平均臨床評(píng)分(圖6B)以及存活曲線(圖6A)。表7觀察到的臨床征兆在對(duì)照組(未治療)中9只小鼠中6只死亡和對(duì)照組的較高平均臨床評(píng)分的事實(shí)證實(shí)產(chǎn)生的疾病是嚴(yán)重的(與其中顯示了在產(chǎn)生輕微疾病的動(dòng)物中的效果的表6相比，在表6中沒(méi)有小鼠死亡并且未治療對(duì)照組的疾病平均評(píng)分小于2。)。存活曲線(圖6A)，和平均臨床評(píng)分(圖6B)，也都顯示出產(chǎn)生了疾病并具有嚴(yán)重的平均評(píng)分。關(guān)于產(chǎn)生了疾病嚴(yán)重負(fù)荷的動(dòng)物，應(yīng)當(dāng)對(duì)下述觀察予以特別重視1.當(dāng)在對(duì)照組和游離MPS組中出現(xiàn)死亡時(shí)，SSL-MPS治療組中的所有動(dòng)物均存活；2.在第19日(圖6B)與游離MPS治療組或?qū)φ战M的平均臨床評(píng)分分別為約3和約4.8相比，使用SSL-MPS治療使得平均臨床評(píng)分接近于0。3.所述SSL-MPS治療組的平均疾病評(píng)分(表5)比對(duì)照組的平均疾病評(píng)分低4倍，比游離MPS治療組的平均疾病評(píng)分低約2倍。因此，可以得出結(jié)論與游離MPS相比，在疾病的嚴(yán)重狀態(tài)，SSL-MPS具有有益的治療效果。在急性EAE模型中與常規(guī)MS藥物的對(duì)比如上所述對(duì)SJL雌性小鼠(6～7周齡)進(jìn)行免疫。將所述已免疫的小鼠分組并且在免疫后的第8日、11日和14日按照如下治療制劑對(duì)各組進(jìn)行治療組I50mg/kgBWSSL-MPS；組II游離MPS50mg/kgBW；組III葡萄糖5％；組IV克帕松250μg/0.1cc；組VI倍泰龍人2000ui/0.1cc。對(duì)于每一組，確定發(fā)病率、MMS＝平均最大評(píng)分；MDD＝平均疾病持續(xù)時(shí)間(天數(shù))；MDO＝平均發(fā)作日和平均評(píng)分(表8)。此外，確定了每一組在各時(shí)間點(diǎn)的平均臨床評(píng)分(圖7)。表8觀察到的臨床征兆圖7表示在隨查期不同時(shí)間點(diǎn)的臨床評(píng)分。如所觀察到的，SSL-MPS對(duì)疾病平均負(fù)荷的總體效果低于游離MPS治療組對(duì)照的3倍。此外，SSL-MPS有效地使平均臨床評(píng)分從早期癱瘓的嚴(yán)重水平降低到尾末端無(wú)力。在SSL-MPS治療組中僅有一只小鼠死亡，而相比在其它組中為3例和5例死亡。因此，可以得出結(jié)論當(dāng)前SSL-MPS具有比當(dāng)前臨床可用藥優(yōu)異得多的有益效果并且該制劑具有將平均臨床評(píng)分從早期癱瘓的嚴(yán)重狀態(tài)降低到輕微狀態(tài)的能力。使用MOG(鞘磷脂少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白)誘導(dǎo)急性EAE按照[OffenD等，JMolNeurosci.15(3)167-76(2000)]所描述的，使用MOG35-55肽進(jìn)行慢性EAE的誘導(dǎo)。通常，用致腦炎乳劑(MOG加上富含MT(結(jié)核分枝桿菌)的CFA)對(duì)雌性C57B1/6小鼠進(jìn)行接種(在右脅腹皮下(s.c.)注射)。在接種當(dāng)天和48小時(shí)后i.p.(腹膜內(nèi))注射百日咳毒素(250ng/小鼠)。在首次注射后一周在右脅腹中皮下注射MOG乳劑加強(qiáng)針。在上述免疫后，使用50mg/kgBWSSL-MPS治療(第12日、14日和16日)小鼠。確定各時(shí)間點(diǎn)的平均臨床評(píng)分(圖8)。如所示，SSL-MPS有效地緩解急性EAE的臨床征兆。實(shí)施例2癌癥已證實(shí)皮質(zhì)類固醇對(duì)多種癌癥類型具有治療效果并廣泛用于癌癥治療中，特別用于血液學(xué)惡性腫瘤(白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)和激素響應(yīng)性癌癥(乳癌和前列腺癌)。通常，皮質(zhì)類固醇在包括化學(xué)療法的治療手段的框架中使用。[LorraineI.McKay和JohnA.Cidlowski，corticosteroidsCancerMedicinee.5B.C.DeckerInc.，SBN1-55009-113-12000，BCDeckerInc出版，1981年第一次出版，第五版2000，0102QP9876543在加拿大印刷]。在實(shí)驗(yàn)的第1日，給BALB/C小鼠i.p.(腹膜內(nèi))注射1百萬(wàn)J6456淋巴瘤細(xì)胞(小鼠T-細(xì)胞淋巴瘤)，然后將小鼠分組并按照下述治療日程(表9)通過(guò)i.v.(靜脈內(nèi))注射游離MPS或SSL-MPS進(jìn)行治療。在治療第14日確定存活中值并同樣顯示在表9中表9治療日程上述結(jié)果顯示SSL-MPS治療以劑量依賴方式延長(zhǎng)存活時(shí)間中值。在其他試驗(yàn)中，測(cè)定了攜帶BCL-1(小鼠B細(xì)胞淋巴系白血病)腫瘤的小鼠的存活情況。根據(jù)該試驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)的第1日，給BALB/C小鼠i.p.(腹膜內(nèi))注射1百萬(wàn)BCL-1淋巴瘤細(xì)胞(B細(xì)胞系，MPS的IC50在納摩爾范圍)，然后將小鼠分組并使用如下治療制劑在第5日、9日、12日、16日通過(guò)i.v.(靜脈內(nèi))注射進(jìn)行治療組I5mg/kgBW游離MPS；組II25mg/kgBW游離MPS；組III5mg/kgBWSSL-MPS；組IV50mg/kgBWSSL-MPS。確定不同組的存活中值并總結(jié)在表10中。表10存活中值圖9所示的存活曲線表現(xiàn)出SSL-MPS與游離MPS或?qū)φ战M相比的有益效果。非常重要的是應(yīng)當(dāng)注意到該細(xì)胞系對(duì)MPS高度敏感?，F(xiàn)有技術(shù)列表以下列出了被認(rèn)為與描述本發(fā)明領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)狀況相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)列表。Gonzalez-Rothi，RicardoJ等，PharmaceuticalResearch13(11)1699-1703(1996)；SchmidtJ等，Brain126(8)1895-1904(2003)；FildesFJ等，JPharm.Pharmacol.30(6)337-42(1978)；MishinaEV等，PharmRes13(1)141-5(1996)；Gonzalez-Rothi，RicardoJ等，PharmaceuticalResearch13(11)1699-1703(1996)；AlmawiWY和MelemedjianOK，JLeukocBiol719-15(2002)；ColemanREBiotherapy437-44(1992)；FolkmanJ等，Science221719-725(1983)；SwainS.M.，Endocrinetherapiesofcancer，CancerChemotherapyandBiotherapy，第二版，ChabnerBA和LongoDL編輯，Lippincott-Raven，Philadelphia，1996，(第59-108頁(yè))；HaskellCM.，CancerTreatment，第四版，HaskellCM和BerekJS.編輯，WBSaundersCo，Philadelphia，1995(第78-80頁(yè)，第105-106頁(yè)，第151-152頁(yè))；JosbertM.Metselaar，Liposomaltargetingofglucocorticoids.Anoveltreatmentapproachforinflammatorydisorders.第6章，第91-106頁(yè)，第7章，第107-122頁(yè)，2003，博士論文，UtrechtUniversity，F(xiàn)acultyofPharmaceuticalSciences，F(xiàn)acultyofVeterinaryMedicineISBN90-393-3285-1。權(quán)利要求1.一種含有包封在脂質(zhì)體中的糖皮質(zhì)激素(GC)或GC衍生物的藥物組合物，其中，所述GC或GC衍生物基本上保留在所述脂質(zhì)體中6個(gè)月，所述GC或GC衍生物選自i)具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為-2.5～1.5的兩親弱堿性GC或GC衍生物；ii)具有pKa大于3且在pH7時(shí)logD為-2.5～1.5的兩親弱酸性GC或GC衍生物。2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中所述GC或GC衍生物選自具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為-1.5～1.0的兩親弱堿；或者具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為-1.5～1.0的兩親弱酸性GC或GC衍生物。3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中所述GC衍生物是從所述脂質(zhì)體釋放進(jìn)入體液后轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚訥C的藥物前體。4.如權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述GC衍生物是酸性糖皮質(zhì)激素。5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中所述酸性GC選自甲潑尼龍半琥珀酸鈉(MPS)、氫化可的松半琥珀酸鈉(HYD)、半琥珀酸地塞米松、半琥珀酸潑尼松龍。6.如權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述脂質(zhì)體包含磷脂。7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其中所述脂質(zhì)體包含磷脂、脂聚合物和膽固醇的組合。8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其中所述脂質(zhì)體包含氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)、聚乙二醇包覆的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)和膽固醇的組合。9.如權(quán)利要求1～8中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述脂質(zhì)體是空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體(SSL)。10.如權(quán)利要求6～9中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述GC或GC衍生物與所述磷脂間的摩爾比為0.01～2.0。11.如權(quán)利要求10所述的藥物組合物，其中所述GC或GC衍生物與所述磷脂間的摩爾比為0.04～0.25。12.如權(quán)利要求1～11中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，所述藥物組合物用于神經(jīng)變性失調(diào)的治療。13.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，所述藥物組合物用于多發(fā)性硬化的治療。14.如權(quán)利要求1～11中任一項(xiàng)所述的藥物組合物，所述藥物組合物用于癌癥的治療。15.GC或GC衍生物在制備含有包封在脂質(zhì)體中的所述GC或GC衍生物的藥物組合物中的應(yīng)用，其中，所述GC或GC衍生物基本上保留在所述脂質(zhì)體中6個(gè)月，所述GC或GC衍生物選自i)具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為-2.5～1.5的兩親弱堿性GC或GC衍生物；ii)具有pKa大于3且在pH7時(shí)logD為-2.5～1.5的兩親弱酸性GC或GC衍生物。16.如權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其中所述GC或GC衍生物選自具有pKa等于或低于11且在pH7時(shí)logD為-1.5～1.0的兩親弱堿性GC或GC衍生物；或者具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為-1.5～1.0的兩親弱酸性GC或GC衍生物。17.如權(quán)利要求14或15所述的應(yīng)用，其中所述GC衍生物是從所述脂質(zhì)體釋放進(jìn)入體液后轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚訥C的藥物前體。18.如權(quán)利要求15～17中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述GC衍生物是酸性GC。19.如權(quán)利要求18所述的應(yīng)用，其中所述酸性GC選自甲潑尼龍半琥珀酸鈉(MPS)、氫化可的松半琥珀酸鈉(HYD)、半琥珀酸地塞米松、半琥珀酸潑尼松龍。20.如權(quán)利要求15～19中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述GC或GC衍生物包封在包含磷脂的脂質(zhì)體中。21.如權(quán)利要求20所述的應(yīng)用，其中所述GC或GC衍生物包封在包含磷脂、脂聚合物和膽固醇的組合的脂質(zhì)體中。22.如權(quán)利要求21所述的應(yīng)用，其中所述脂質(zhì)體包含氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)、聚乙二醇包覆的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)和膽固醇的組合。23.如權(quán)利要求15～22中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述GC或GC衍生物包封在空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體(SSL)中。24.如權(quán)利要求20～23中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述GC或GC衍生物與所述磷脂間的摩爾比為0.01～2.0。25.如權(quán)利要求18～22中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中所述糖皮質(zhì)激素衍生物與所述磷脂間的摩爾比為0.04～0.25。26.如權(quán)利要求15～25中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其用于制備用于治療神經(jīng)變性失調(diào)的藥物組合物。27.如權(quán)利要求26所述的應(yīng)用，其中所述神經(jīng)變性失調(diào)是多發(fā)性硬化。28.如權(quán)利要求15～25中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其用于制備用于治療癌癥的藥物組合物。29.一種用于將糖皮質(zhì)激素(GC)輸送至體內(nèi)靶位點(diǎn)的方法，所述方法包括化學(xué)修飾所述GC為如權(quán)利要求1～14中任一項(xiàng)所述的兩親弱酸性衍生物或兩親弱堿性衍生物，以及將所述兩親弱酸性衍生物或兩親弱堿性衍生物裝載入脂質(zhì)體中。30.如權(quán)利要求29所述的方法，其中所述GC是不與水混溶的GC。31.如權(quán)利要求29或30所述的方法，其中所述脂質(zhì)體是空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體。32.如權(quán)利要求29～31中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述GC衍生物通過(guò)跨脂質(zhì)體膜的離子或pH梯度的形成而裝載入所述脂質(zhì)體中。33.一種用于治療疾病或失調(diào)的方法，所述方法包括向需要所述治療的受試對(duì)象施用如權(quán)利要求1～14中任一項(xiàng)所述的藥物組合物。34.如權(quán)利要求32所述的方法，該方法用于神經(jīng)變性失調(diào)的治療。35.如權(quán)利要求34所述的方法，該方法用于多發(fā)性硬化的治療。36.如權(quán)利要求33所述的方法，該方法用于癌癥的治療。全文摘要本發(fā)明提供了糖皮質(zhì)激素和糖皮質(zhì)激素衍生物的脂質(zhì)體組合物，具體是，含有穩(wěn)定包封在脂質(zhì)體中的糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素衍生物的藥物組合物。所述糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素衍生物選自具有pKa等于或小于11且在pH7時(shí)logD為－2.5～1.5的兩親弱堿性糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素衍生物；或者具有pKa大于3.5且在pH7時(shí)logD為－2.5～1.5的兩親弱酸性糖皮質(zhì)激素或糖皮質(zhì)激素衍生物。使用多發(fā)性硬化和癌癥的合適模型，本發(fā)明的藥物組合物在體內(nèi)表現(xiàn)出治療效果。文檔編號(hào)A61K31/573GK101043875SQ200580035942公開(kāi)日2007年9月26日申請(qǐng)日期2005年9月11日優(yōu)先權(quán)日2004年9月9日發(fā)明者葉切科爾·巴倫霍茨,阿爾伯托·A·加比宗,尤瓦爾·阿夫尼埃爾申請(qǐng)人:耶路撒冷希伯來(lái)大學(xué)伊薩姆研發(fā)公司