專利名稱：包括亞甲藍(mtc)在內的二氨基吩噻嗪化合物的化學合成和純化方法
技術領域：
本發(fā)明一般涉及化學合成和純化領域，更具體涉及合成和純化某些3，7-二氨基-吩噻嗪-5-_化合物(本文稱為“二氨基吩噻嗪_化合物”)、包括亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍)的方法。本發(fā)明也涉及所得(高純度)化合物、包含它們的組合物(例如片劑、膠囊)和它們在滅活病原體的方法和醫(yī)學治療與診斷方法等中的用途，例如用于τ蛋白病(tauopathy)、阿爾茨海默氏病(AD)、皮膚癌癥、黑素瘤、病毒疾病、細菌疾病或原生動物疾病。
背景除非上下文另有要求，遍及本說明書、包括任意所附的權利要求中的措辭“包含”和變化形式如“包含有”和“包含著”將被理解為隱含包括所規(guī)定的整數(shù)或步驟或者整數(shù)或步驟組，但是不排除任意其他整數(shù)或步驟或者整數(shù)或步驟組。
必須注意，正如說明書和任意所附權利要求中所使用，單數(shù)形式“一種”、“一個”和“該”包括復數(shù)指示物，上下文另有明確指令除外。因而例如，對于“藥物載體”的稱謂包括兩種或多種這類載體的混合物，等等。
范圍經(jīng)常在本文中表示為從“約”一個特定數(shù)值和/或至“約”另一特定數(shù)值。在表示這樣一種范圍時，另一種實施方式包括從一個特定數(shù)值和/或至另一個特定數(shù)值。與之相似，在利用先行詞“約”表示近似的數(shù)值時，將被理解為該特定數(shù)值構成另一種實施方式。
亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍)亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍(MB)、甲基硫堇氯(methylthioninechloride)、四甲基硫堇氯、3，7-雙(二甲氨基)吩噻嗪-5-_氯化物、C.I.堿性藍9、四甲基硫堇氯、3，7-雙(二甲氨基)吩噻嗪_氯化物、瑞士藍(Swiss blue)、C.I.52015、C.I.溶劑藍(Solvent blue)8、苯胺紫和Urolene Blue_)是一種低分子量(319.86)、水溶性、三環(huán)有機化合物，具有下式 亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍)也許是最熟知的吩噻嗪染劑和氧化還原指示劑，已經(jīng)用作生物物理系統(tǒng)的光學探針、納米孔材料的插層劑、氧化還原介體和用在光電致變色(photoelectrochromic)成像中。
例如參見Colour Index(Vol.4，第三版，1971)和Lillie等人，1979和其中引用的參考文獻。
MTC首先被描述在1877年的一份德國專利中(Badische Anilin-undSoda-Fabrik，1877)。在該專利中，MTC如下合成將二甲基苯胺亞硝基化，隨后還原，生成N，N-二甲基-1，4-二氨基苯，隨后在硫化氫(H2S)和氯化鐵(III)(FeCl3)存在下氧化性偶聯(lián)。
Bernthsen描述了隨后關于MTC和其合成方法的研究(參見Bernthsen，1885a，1885b，1889)。
Fierz-David和Blangley于1949也描述了從二甲基苯胺合成MTC的方法，如下流程所述。
流程1 在步驟(a)中，將二甲基苯胺用亞硝酸鹽(NaNO2)在酸(HCl)水溶液中處理，制備亞硝基二甲基苯胺。在步驟(b)中，使用鋅粉溶液，在酸(HCl)水溶液中還原亞硝基化合物，生成對-氨基二甲基苯胺。在步驟(c)、(d)和(e)中，在酸水溶液中用另一分子二甲基苯胺氧化對-氨基二甲基苯胺，同時引入硫代磺酸基團；然后使用二氧化錳和硫酸銅使環(huán)閉合。更具體地，酸化(H2SO4)對-氨基二甲基苯胺的澄清中性溶液，加入非還原性氯化鋅溶液(ZnCl2與Na2Cr2O7)。加入硫代硫酸鋁(Al2(S2O3)3)和硫代硫酸鈉(Na2S2O3)。加入重鉻酸鈉(Na2Cr2O7)。將混合物加熱，充氣。加入二甲基苯胺。加入重鉻酸鈉(Na2Cr2O7)。將混合物加熱，由于Bindschedler Green硫代磺酸鹽的生成，顏色變?yōu)樯罹G-藍色。加入二氧化錳或硫酸銅，將混合物加熱，染劑從濃氯化鋅溶液中沉淀出來。
非常相似的合成方法描述在Colour Index(Vol.4，第三版，1971)，4470頁中。
Masuya等人1992描述了某些吩噻嗪衍生物和它們的制備方法以及在癌癥的光動力療法和采用化學發(fā)光的免疫測定法中的用途。這些化合物借助與如上所討論的那些相似的途徑制備。
Leventis等人1997描述了某些MTC類似物的合成方法，其采用吩噻嗪作為原料，并且借助鹵化作用、繼之以胺化加成所需的3，7-取代基。作者宣稱MTC在商業(yè)上如下合成在Na2S2O3存在下用Na2Cr2O7氧化N，N-二甲基-對-苯二胺，繼之以在N，N-二甲基胺存在下進一步氧化。
Marshall和Lewis于1975a描述了通過溶劑萃取和結晶純化商品MTC和天青B(Azure B)。他們宣稱緩沖pH9.5的MTC/天青B混合物水溶液能夠用四氯化碳萃取分離。四氯化碳除去天青B，同時在水層中留下MTC。他們進一步宣稱濃度0.25N的MTC與鹽酸的低溫結晶除去金屬污染物。不過，其中所報道的有機純度分析基于薄層色譜，它不適合于量化。而且，硫酸化灰分的微量分析不表明是無金屬樣品(在1975年優(yōu)選的技術是原子吸收)。
Marshall和Lewis于1975b描述了商品噻嗪染劑中金屬污染物的原子吸收分光光度分析。他們報道了38份樣品，個體樣品的金屬濃度在0.02％與25.35％之間不等；所檢查的金屬是鐵、鉀、鈉和鋅。他們也報道了可能存在其他沒有分析的金屬。鋁、鉻、錳和銅都牽涉在MTC的合成工藝中，幾乎肯定是存在的。重要的是，他們報道了商品MTC樣品的金屬含量有巨大差異。
Lohr等人1975描述了天青B的柱色譜純化，具體為通過分離分出所需產物，繼之以離子交換回氯化物。他們宣稱其他陽離子染劑如MTC也能用這種方法純化。不過，柱色譜不是適合于大規(guī)模純化MTC的方法。
Fierz-David等人1949描述了MTC的氯化鋅復鹽的合成和如下除去鋅的方法與碳酸鈉螯合，繼之以過濾，生成不含鋅的亞甲基藍。不過，作者承認這種技術不能大規(guī)模使用，因為收率低。
MTC目前用于治療高鐵血紅蛋白血癥(一種發(fā)生于血液不能遞送氧至機體需要部位時發(fā)生的病癥)。MTC也被用作醫(yī)學染劑(例如在手術之前或期間染色機體的某些部分)；診斷劑(例如作為檢測存在于尿液中的某些化合物的指示染劑)；溫和的泌尿系抗菌劑；粘膜表面刺激劑；腎結石的治療和預防劑；和用在黑素瘤的診斷和治療中。
MTC已經(jīng)用于治療瘧疾，單獨(Guttmann & Ehrlich，1891)或者與氯喹組合(Schirmer等人，2003；Rengelhausen等人，2004)。人類瘧疾由如下瘧原蟲屬四種原生動物之一所導致惡性瘧原蟲(P.falciparum)、間日瘧原蟲(P.vivax)、卵形瘧原蟲(P.ovale)或三日瘧原蟲(P.malariae)。所有這些都是通過被感染的雌按蚊叮咬傳播。有時候，傳播發(fā)生于輸血、器官移植、針頭共享或者先天從母親傳給胎兒。瘧疾導致世界上三至五億例感染，每年大約一百萬例死亡。不過，藥物耐受性是主要問題，在惡性瘧原蟲中最多，該品種是幾乎所有瘧疾-相關性死亡的原因。目前推薦用于瘧疾預防的藥物或藥物組合包括氯喹/鹽酸氯胍、氟甲喹羥哌啶、多西環(huán)素和伯胺喹。
MTC(名為Virostat，來自Bioenvision Inc.，紐約)已經(jīng)顯示強大的體外殺病毒活性。具體而言，Virostat在實驗室試驗中有效對抗HIV和西尼羅病毒。西尼羅病毒(WNV)是一種影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的潛在嚴重的疾病。大多數(shù)被感染者將顯示沒有可見的癥狀或輕微的流感樣癥狀如發(fā)熱和頭痛。約一百五十分之一將發(fā)展為嚴重的癥狀，包括震顫、驚厥、肌肉虛弱、視力喪失、麻木、麻痹或昏迷。一般而言，WNV通過被感染蚊子叮咬傳播，但是也能通過輸血、器官移植、哺乳或者在妊娠期間從母親傳給孩子。Virostat目前也臨床試用于治療慢性丙型肝炎。丙型肝炎是肝臟病毒感染。HCV病毒是急性肝炎和慢性肝疾病、包括肝硬化和肝癌的主要原因。HCV主要通過直接與人血液接觸傳播。世界上HCV感染的主要原因是未經(jīng)篩選的輸血的使用和未經(jīng)充分消毒的針頭和注射器的再使用。世界衛(wèi)生組織已經(jīng)宣布丙型肝炎是全球性健康問題，大約3％的世界人口感染有HCV，因地區(qū)而大不相同。美國的流行率據(jù)估計為1.3％或者大約三百五十萬人。埃及具有大約六千二百萬的人口，丙型肝炎的流行率世界最高，據(jù)估計超過全國大約六千二百萬人的20％。
MTC在與光線組合時，能夠防止核酸(DNA或RNA)的復制。血漿、血小板和血紅細胞不合有核DNA或RNA。在向血液組分引入MTC時，它穿越細菌細胞壁或病毒膜，然后移動至核酸結構的內部。在用光線活化時，該化合物與病毒或細菌病原體的核酸結合，防止DNA或RNA的復制。因為MTC被設計用于滅活病原體，它具有減少檢測不到的病原體傳播危險的潛力。
MTC及其衍生物(例如“二氨基吩噻嗪_化合物”)已被發(fā)現(xiàn)可用于治療τ蛋白病(例如阿爾茨海默氏病)(例如參見Wischik，CM.等人，1996，2002)。
MTC的口服和腸胃外制劑在美國已有市售商品，通常名為UroleneBlue_。不過，這些制劑含有相當量的金屬雜質。這些雜質是非常不可取的，很多(例如包括Al、Cr、Fe、Cu)超出由歐洲健康機構所設置的安全限度。
所以，迫切需要較高純度(例如藥物級純度，例如人用安全的純度，例如金屬含量低或者減低)的二氨基吩噻嗪_化合物，包括MTC。
本發(fā)明人已經(jīng)開發(fā)了合成二氨基吩噻嗪_化合物(包括MTC)的方法，得到具有極高純度的產物，特別是具有極低水平的不需要(有機和金屬)雜質的產物，滿足(并且經(jīng)常超出)由歐洲健康機構(例如歐洲藥典)所設置的安全限度。
不夸張地講，由本文所述方法制備的MTC是世界上最純的。
發(fā)明概述本發(fā)明的一個方面涉及合成二氨基吩噻嗪_化合物、包括高純度二氨基吩噻嗪_化合物的方法。
本發(fā)明的另一方面涉及純化二氨基吩噻嗪_化合物的方法。
本發(fā)明的另一方面涉及由或者可由本文所述方法得到的高純度二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及組合物(例如藥物組合物，例如片劑、膠囊)，包含本文所述的高純度二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及用在人或動物體治療方法、例如關于任意如本文所討論的疾病或適應癥的治療方法中的本文所述高純度二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及用在滅活病原體的方法中的本文所述高純度二氨基吩噻嗪輸化合物。
本發(fā)明的另一方面涉及本文所述高純度二氨基吩噻嗪嗡化合物在制備用于治療例如τ蛋白病(例如阿爾茨海默氏病)的藥物中的用途。
本發(fā)明的另一方面涉及本文所述合成高純度二氨基吩噻嗪_化合物的方法的用途，作為制備用于治療例如τ蛋白病(例如阿爾茨海默氏病)的藥物的方法的一部分。
本發(fā)明的另一方面涉及治療患者例如τ蛋白病(例如阿爾茨海默氏病)的方法，包括對所述患者給予治療有效量的本文所述高純度二氨基吩噻嗪_化合物。
正如將為本領域技術人員所領會的，發(fā)明一方面的特性和優(yōu)選實施方式也將涉及發(fā)明其他方面。
詳細說明化合物一般而言，本發(fā)明涉及制備某些下式3，7-二氨基-吩噻嗪-5-嗡化合物的方法，本文統(tǒng)稱為“二氨基吩噻嗪_化合物” 其中每個R1和R9獨立地選自-H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R3NA和R3NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R7NA和R7NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；和X是一個或多個陰離子抗衡離子以達到電中性。
上述結構僅僅是很多等價共振結構之一，其中一些如下所示，所有它們都應為上述結構所涵蓋
在一種實施方式中，C1-4烷基選自直鏈C1-4烷基，例如-甲基、-乙基、-正丙基、-異丙基和-正丁基；支鏈C3-4烷基，例如-異丙基、-異丁基、-仲丁基和-叔丁基；和環(huán)狀C3-4烷基，例如-環(huán)丙基和-環(huán)丁基。
在一種實施方式中，C2-4鏈烯基選自直鏈C1-4鏈烯基，例如-CH＝CH2(乙烯基)和-CH2-CH＝CH2(烯丙基)。
在一種實施方式中，鹵代C1-4烷基選自-CF3、-CH2CF3和-CF2CF3。
在一種實施方式中，每個R1和R9獨立地是-H、-甲基、-乙基或-CF3。
在一種實施方式中，每個R1和R9獨立地是-H、-甲基或-乙基。
在一種實施方式中，每個R1和R9獨立地是-H。
在一種實施方式中，每個R1和R9獨立地是-甲基。
在一種實施方式中，每個R1和R9獨立地是-乙基。
在一種實施方式中，R1和R9是相同的。
在一種實施方式中，R1和R9是不同的。
在一種實施方式中，每個R3NA和R3NB獨立地是-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-CH2-CH＝CH2或-CF3。
在一種實施方式中，每個R3NA和R3NB獨立地是-甲基或-乙基。
在一種實施方式中，每個R3NA和R3NB獨立地是-甲基。
在一種實施方式中，每個R3NA和R3NB獨立地是-乙基。
在一種實施方式中，R3NA和R3NB是相同的。
在一種實施方式中，R3NA和R3NB是不同的。
在一種實施方式中，每個R7NA和R7NB獨立地是-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-CH2-CH＝CH2或-CF3。
在一種實施方式中，每個R7NA和R7NB獨立地是-甲基或-乙基。
在一種實施方式中，每個R7NA和R7NB獨立地是-甲基。
在一種實施方式中，每個R7NA和R7NB獨立地是-乙基。
在一種實施方式中，R7NA和R7NB是相同的。
在一種實施方式中，R7NA和R7NB是不同的。
在一種實施方式中，R3NA和R3NB和R7NA和R7NB是相同的。
在一種實施方式中，基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)是相同的。
在一種實施方式中，基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)是相同的，選自-NMe2、-NEt2、-N(nPr)2、-N(Bu)2、-NMeEt、-NMe(nPr)和-N(CH2CH＝CH2)2。
在一種實施方式中，基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(F7NB)是相同的，選自-NMe2和-NEt2。
在一種實施方式中，基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)不是-NMe2。
在一種實施方式中，一個或多個碳原子是11C或13C。
在一種實施方式中，一個或多個碳原子是11C。
在一種實施方式中，一個或多個碳原子是13C。
在一種實施方式中，一個或多個氮原子是15N。
在一種實施方式中，一個或多個或所有基團R3NA、R3NB、R7NA和R7NB的一個或多個或所有碳原子是13C。
在一種實施方式中，每個基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)是-N(13CH3)2。
在一種實施方式中，每個R1和R9是-H；每個基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)是-N(13CH3)2。
在一種實施方式中，每個R1和R9是-H；每個基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)是-N(13CH3)2；X-是Cl-。
在一種實施方式中，X-獨立地是鹵素陰離子(即鹵化物)。
在一種實施方式中，X-獨立地是Cl-、Br-或I-。
在一種實施方式中，X-獨立地是Cl-。
在一種實施方式中，該化合物是混鹽的形式，例如ZnCl2混鹽。
這類化合物的實例包括如下




合成方法A已知方法與當前所要求保護的方法A之間的一個重要區(qū)別是兩性離子中間體6的分離和純化步驟(IAPOZI)。這種分離和純化步驟使得后續(xù)環(huán)閉合步驟的收率提高(原因尤其是提高兩性離子中間體的穩(wěn)定性和減少副反應)，以及最終二氨基吩噻嗪_化合物的純度提高。在常規(guī)方法中，不分離兩性離子中間體，在后續(xù)步驟中使用未經(jīng)改變的反應混合物。
已知方法與當前所要求保護的方法A之間的另一重要區(qū)別是Cr(VI)還原步驟。(至少)在氧化性偶聯(lián)步驟中使用Cr(VI)。殘留的Cr(VI)帶來若干嚴重的問題。首先，高水平的高度毒性污染物如殘留Cr(VI)在預定藥用的產品中是不可接受的。通過還原殘留Cr(VI)為毒性低得多的Cr(III)形式，更容易滿足藥學標準。其次，殘留Cr(VI)使兩性離子中間體不穩(wěn)定并阻礙后續(xù)環(huán)閉合(RC)步驟，從而減少最終二氨基吩噻嗪_化合物的收率。通過還原殘留Cr(VI)為Cr(III)，大大增加了最終二氨基吩噻嗪_化合物的收率。
另外，Cr(III)形式的鉻比Cr(VI)形式的鉻更容易除去。通過還原殘留Cr(VI)為Cr(III)，有可能得到具有非常低水平的殘留鉻的產物。
已知方法與當前所要求保護的方法A之間的另一重要區(qū)別是處理步驟，也就是將氯化物鹽用硫化物(ST)、二甲基二硫代氨基甲酸鹽(DT)、碳酸鹽(CT)、乙二胺四乙酸(EDTAT)或有機溶劑(OE)中的一步或多步處理。這種附加步驟(或者這些附加步驟)大大提高了二氨基吩噻嗪_化合物的純度。
在一種實施方式中，該合成方法包括如下順序的步驟氧化性偶聯(lián)(OC)；兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)；環(huán)閉合(RC)。
在一種實施方式中，該合成方法包括如下順序的步驟氧化性偶聯(lián)(OC)；Cr(VI)還原(CR)；
兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)；環(huán)閉合(RC)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下初始步驟硫代磺酸生成(TSAF)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下初始步驟亞硝酰還原(NR)；硫代磺酸生成(TSAF)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下初始步驟亞硝基化(NOS)；亞硝酰還原(NR)；硫代磺酸生成(TSAF)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下后續(xù)步驟氯化物鹽生成(CSF)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括選自如下的后續(xù)步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括選自如下的后續(xù)步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括選自如下的后續(xù)步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；繼之以如下后續(xù)步驟有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括選自如下的后續(xù)步驟硫化物處理(ST)；繼之以如下后續(xù)步驟有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下后續(xù)步驟有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該合成方法另外包括如下后續(xù)步驟重結晶(RX)。
因而，在一種實施方式中，該合成方法包括如下順序的步驟亞硝基化(NOS)；亞硝酰還原(NR)；硫代磺酸生成(TSAF)；氧化性偶聯(lián)(OC)；Cr(VI)還原(CR)；兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)；環(huán)閉合(RC)；氯化物鹽生成(CSF)；以下一步或多步硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；有機萃取(OE)；重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該合成方法是2-罐法。
在一種實施方式中，該合成方法是3-罐法。
這些方法完全適合于合成其中R1和R9是-H的二氨基吩噻嗪_化合物。
這些方法尤其完全適合于合成亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍)。
純化方法本發(fā)明的另一方面涉及純化某些3，7-二氨基-吩噻嗪-5-_化合物的方法，具體為上文“化合物”下所述“二氨基吩噻嗪_化合物”。
在一種實施方式中，該純化方法是純化MTC的方法。
在一種實施方式中，該純化方法一般應用于二氨基吩噻嗪_化合物(例如MTC)，也就是說它可以是或者可以不是按照本文所述合成方法制備的。
例如，該純化方法可以應用于商業(yè)上可獲得的二氨基吩噻嗪_化合物(例如MTC)，例如它是相對不純的或者含有不需要或高得不可接受的水平的某些雜質(例如有機雜質、金屬等)。
例如，在一種實施方式中，該純化方法應用于商業(yè)上可獲得的MedexTM(例如MTC，最初由Medex Medical Export Co.Ltd.提供)。
例如，在一種實施方式中，該純化方法應用于商業(yè)上可獲得的UroleneBlue_(例如MTC，最初作為Urolene Blue_提供)。
在一種實施方式中，該純化方法應用于按照本文所述合成方法制備的二氨基吩噻嗪_化合物(例如MTC)(例如最初作為本文所述合成方法產物提供的MTC)。
在一種實施方式中，該純化方法包括一個或多個按順序選自如下的步驟重結晶(RX)；有機萃取(OE)；重結晶(RX)；選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；
碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；重結晶(RX)；有機萃取(OE)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)。
在一種實施方式中，該純化方法另外包括如下步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下步驟硫化物處理(ST)。
在一種實施方式中，該純化方法另外包括如下步驟硫化物處理(ST)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下步驟有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法另外包括如下步驟有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下步驟重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法另外包括如下步驟
重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟有機萃取(OE)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；
碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；有機萃取(OE)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)；有機萃取(OE)；和重結晶(RX)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟重結晶(RX)；和選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟重結晶(RX)；和硫化物處理(ST)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟重結晶(RX)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟重結晶(RX)；選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟重結晶(RX)；硫化物處理(ST)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)；碳酸鹽處理(CT)；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)；重結晶(RX)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，該純化方法包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)；重結晶(RX)；和有機萃取(OE)。
在一種實施方式中，有機萃取(OE)采用二氯甲烷(DCM，CH2Cl2)。
在一種實施方式中，重結晶(RX)步驟是冷酸性重結晶(RX-CAR)步驟。
亞硝基化(NOS)在該步驟中，N，N-二取代的-3-可選被取代的苯胺1被4-亞硝基化，得到N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?，如下流程所述 在一種實施方式中，N，N-二甲基苯胺1’被4-亞硝基化，得到N，N-二甲基-4-亞硝?；桨?’，如下流程所述
在一種實施方式中，該亞硝基化用亞硝酸鹽進行。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含NO2-。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含堿金屬亞硝酸鹽。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含亞硝酸鈉或亞硝酸鉀。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是亞硝酸鈉(NaNO2)。
在一種實施方式中，亞硝酸鹽與苯胺1的摩爾比為0.8至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.3。
在一種實施方式中，該亞硝基化在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該亞硝基化在pH 1或以下進行。
在一種實施方式中，該亞硝基化在pH 1至-1進行。
在一種實施方式中，該亞硝基化在pH 1至0進行。
(除非另有指定，所有pH值都在室溫測量。)在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用HCl(它具有一個強酸質子)獲得。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺1的摩爾比為1至4。
在一種實施方式中，該范圍為2至4。
在一種實施方式中，該范圍為3至4。
在一種實施方式中，該比例為約3.2。
在一種實施方式中，該范圍為2至3。
在一種實施方式中，該范圍為2.25至2.75。
在一種實施方式中，該比例為約2.5。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至10℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為10至240分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為30至120分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為約60分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
亞硝酰還原(NR)在該步驟中，N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?被還原，生成N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3，如下流程所述 在一種實施方式中，N，N-二甲基-4-亞硝?；桨?’被還原，生成N，N-二甲基-1，4-二氨基-苯3’，如下流程所述 在一種實施方式中，該還原是與還原劑反應。
在一種實施方式中，該還原劑是或者包含F(xiàn)e(0)。
在一種實施方式中，該還原劑是或者包含金屬鐵。
在一種實施方式中，該還原劑是金屬鐵。
金屬鐵可以在商業(yè)上獲得，例如金屬屑。
在一種實施方式中，F(xiàn)e(0)與苯胺1的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至3.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至3.5。
在一種實施方式中，該范圍為2.0至3.0。
在一種實施方式中，該比例為約2.4。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1或以下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至-1進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至0進行。
在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用HCl(它具有一個強酸質子)獲得。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺1的摩爾比為1至4。
在一種實施方式中，該范圍為2至4。
在一種實施方式中，該范圍為3至4。
在一種實施方式中，該比例為約3.2。
在一種實施方式中，該范圍為2至3。
在一種實施方式中，該范圍為2.25至2.75。
在一種實施方式中，該比例為約2.5。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應在2至35℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應在10至30℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應在約10℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應進行10至240分鐘。
在一種實施方式中，反應進行30至180分鐘。
在一種實施方式中，反應進行約120分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，當還原劑是金屬鐵時，在反應完成之后、例如通過過濾從反應混合物中除去過量金屬鐵。
硫代磺酸生成(TSAF)
在該步驟中，在硫代硫酸鹽存在下氧化N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3，得到硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4，如下流程所述 在一種實施方式中，在硫代硫酸鹽存在下氧化N，N-二甲基-1，4-二氨基苯3’，得到硫代硫酸S-{2-(氨基)-5-(二甲氨基)-苯基}酯4’，如下流程所述 該硫代硫酸鹽是或者包含S2O3-2。
在一種實施方式中，該硫代硫酸鹽是或者包含Na2S2O3。
在一種實施方式中，該硫代硫酸鹽是Na2S2O3或其水合物。
Na2S2O3可以在商業(yè)上獲得，例如無水鹽或五水合物。
在一種實施方式中，硫代硫酸鹽與二胺3的摩爾比為0.8至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.3。
在一種實施方式中，該氧化是與氧化劑反應。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr(VI)。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr2O7-2。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，該氧化劑是Na2Cr2O7或其水合物。
Na2Cr2O7可以在商業(yè)上獲得，例如二水合物。
在一種實施方式中，Cr(VI)與二胺3的摩爾比為0.2至2.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至1.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至0.8。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.3至0.7。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至10℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為10至240分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為30至120分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為約60分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
氧化性偶聯(lián)(OC)在該步驟中，使用是或者包含Cr(VI)的氧化劑將硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4與N，N-二取代的-3-可選被取代的-苯胺5氧化性偶聯(lián)，得到[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6，如下流程所述 在一種實施方式中，使用是或者包含Cr(VI)的氧化劑將硫代硫酸S-{2-(氨基)-5-(二甲氨基)-苯基}酯4’與N，N-二甲基-苯胺5’氧化性偶聯(lián)，得到[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二甲氨基)-苯基-亞氨基}-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二甲基銨6’，如下流程所述
在一種實施方式中，先加入酯4，然后加入苯胺5。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr2O7-2。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，該氧化劑是Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，酯4與苯胺5的摩爾比為0.5至1.5。
在一種實施方式中，該范圍為0.8至1.2。
在一種實施方式中，該范圍為約1.0。
在一種實施方式中，Cr(VI)與苯胺5的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.6至3.0。
在一種實施方式中，該范圍為2.0至3.0。
在一種實施方式中，該范圍為約2.2。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1或以下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至-1進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至0進行。
在一種實施方式中，反應步驟結束時的pH為2至6。
在一種實施方式中，反應步驟結束時的pH為3至5。
在一種實施方式中，反應步驟結束時的pH為約4。
在一種實施方式中，反應步驟結束時的pH為約3.94。
在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用H2SO4獲得(它具有兩個強酸質子)。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺5的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該范圍為約2.0。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至20℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為10分鐘至12小時。
在一種實施方式中，反應時間為30分鐘至4小時。
在一種實施方式中，反應時間為約2小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，苯胺5與苯胺1相同。
Cr(VI)還原(CR)在該步驟中，處理氧化性偶聯(lián)(OC)步驟的產物，以轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)。
在一種實施方式中，至少25％的殘留Cr(VI)被轉化為Cr(III)。
在一種實施方式中，該范圍為至少35％(即35至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少50％(即50至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少60％(即60至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少70％(即70至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少80％(即80至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少90％(即90至100％)。
在一種實施方式中，該范圍為至少95％(即95至100％)。
在一種實施方式中，基本上所有的殘留Cr(VI)被轉化為Cr(III)。
反應時間的選擇使適合比例的Cr(VI)轉化為Cr(III)。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，該處理用還原劑處理。
連二亞硫酸鹽(hydrosulfite)在一種實施方式中，該還原劑是連二亞硫酸鹽。
該連二亞硫酸鹽是或者包含S2O4-2。
在一種實施方式中，該連二亞硫酸鹽是金屬連二亞硫酸鹽。
在一種實施方式中，該連二亞硫酸鹽是堿金屬連二亞硫酸鹽。
在一種實施方式中，該連二亞硫酸鹽是或者包含Na2S2O4(也稱為連二亞硫酸鈉)。
在一種實施方式中，該連二亞硫酸鹽是Na2S2O4或其水合物。
不希望受任何特定理論所局限，相信Cr(VI)與連二亞硫酸鹽反應生成Cr(III)和硫酸鈉(例如Na2Cr2O7+Na2S2O4→Cr2O3+2Na2SO4)。
在一種實施方式中，連二亞硫酸鹽的摩爾量為0.02至1.0倍于用在硫代磺酸生成(TSAF)步驟(如果進行的話，并且如果使用Cr(VI)進行的話)和氧化性偶聯(lián)(OC)步驟中的Cr(VI)總摩爾量。
在一種實施方式中，該范圍為0.03至0.7。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.5。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.3。
在一種實施方式中，該范圍為0.1至0.2。
在一種實施方式中，該摩爾量為約0.16倍。
在一種實施方式中，該連二亞硫酸鹽是連二亞硫酸鹽水溶液。
在一種實施方式中，反應時間為1分鐘至6小時。
在一種實施方式中，反應時間為2分鐘至1小時。
在一種實施方式中，反應時間為約10分鐘。
在一種實施方式中，反應溫度為2至50℃。
在一種實施方式中，反應溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，反應溫度為10至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為室溫。
鏈烷醇在一種實施方式中，該還原劑是鏈烷醇。
在一種實施方式中，該鏈烷醇是或者包含C1-6鏈烷醇。
在一種實施方式中，該C1-6鏈烷醇是飽和脂族C1-6鏈烷醇。
在一種實施方式中，該C1-6鏈烷醇是乙醇。
不希望受任何特定理論所局限，相信Cr(VI)與鏈烷醇(例如乙醇)反應生成Cr(III)和相應的醛，即鏈烷醛(例如乙醛)，它能夠容易地被蒸發(fā)除去。
在一種實施方式中，鏈烷醇(例如乙醇)的摩爾量為0.02至1.0倍于用在硫代磺酸生成(TSAF)步驟(如果進行的話，并且如果使用Cr(VI)進行的話)和氧化性偶聯(lián)(OC)步驟中的Cr(VI)總摩爾量。
在一種實施方式中，該范圍為0.03至0.7。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.5。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.3。
在一種實施方式中，該范圍為0.1至0.2。
在一種實施方式中，該摩爾量為約0.12倍。
在一種實施方式中，反應時間為1小時至48小時。
在一種實施方式中，反應時間為2小時至24小時。
在一種實施方式中，反應時間為約16小時。
在一種實施方式中，反應溫度為2至50℃。
在一種實施方式中，反應溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，反應溫度為10至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為室溫。
碘化物在一種實施方式中，該還原劑是碘化物。
不希望受任何特定理論所局限，相信Cr(VI)與碘化物反應生成Cr(III)和碘。
在一種實施方式中，該碘化物是或者包含堿金屬碘化物。
在一種實施方式中，該碘化物是或者包含碘化鈉或碘化鉀。
在一種實施方式中，該碘化物是或者包含碘化鉀。
在一種實施方式中，該碘化物是碘化鉀。
在一種實施方式中，碘化物的摩爾量為0.02至1.0倍于用在硫代磺酸生成(TSAF)步驟(如果進行的話，并且如果使用Cr(VI)進行的話)和氧化性偶聯(lián)(OC)步驟中的Cr(VI)總摩爾量。
在一種實施方式中，該范圍為0.03至0.7。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.5。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.3。
在一種實施方式中，該范圍為0.1至0.3。
在一種實施方式中，該摩爾量為約0.18倍。
在一種實施方式中，該碘化物是碘化物水溶液(例如碘化鈉水溶液)。
在一種實施方式中，反應時間為1小時至24小時。
在一種實施方式中，反應時間為2小時至18小時。
在一種實施方式中，反應時間為約12小時。
在一種實施方式中，反應溫度為2至50℃。
在一種實施方式中，反應溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，反應溫度為10至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為25℃或以下。
在一種實施方式中，反應溫度為15℃或以下。
在一種實施方式中，反應溫度為2至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
pH調節(jié)在一種實施方式中，該處理用酸或堿(例如強酸或強堿)處理，以達到5.70至6.35的pH(在室溫測量)。
不希望受任何特定理論所局限，相信pH在該范圍內，Cr(VI)反應生成Cr(III)。
在一種實施方式中，pH范圍為5.80至6.25。
在一種實施方式中，pH范圍為5.90至6.15。
在一種實施方式中，pH范圍為5.95至6.10。
在一種實施方式中，pH為約6.02。
在一種實施方式中，用強酸或強堿處理。
在一種實施方式中，用強堿處理。
在一種實施方式中，用NaOH水溶液(例如10％)處理。
在一種實施方式中，反應時間為1小時至48小時。
在一種實施方式中，反應時間為2小時至24小時。
在一種實施方式中，反應時間為約16小時。
在一種實施方式中，反應溫度為2至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
在一種實施方式中，反應溫度為5至10℃。
兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)在該步驟中，分離和純化兩性離子中間體6。
在一種實施方式中，該分離和純化是過濾。
在一種實施方式中，該分離和純化是過濾繼之以洗滌。
在一種實施方式中，該洗滌用H2O洗滌。
在一種實施方式中，該洗滌用H2O和四氫呋喃(THF)洗滌。
在一種實施方式中，H2O與THF的體積比為1∶1至10∶1，優(yōu)選4∶1。
在一種實施方式中，該分離和純化是過濾繼之以洗滌和干燥。
在一種實施方式中，該干燥是風干。
在一種實施方式中，該干燥是風干2至72小時。
在一種實施方式中，該干燥是風干2至48小時。
在一種實施方式中，該干燥是風干2至24小時。
在一種實施方式中，該干燥是烘箱干燥。
在一種實施方式中，該干燥是烘箱干燥2至72小時。
在一種實施方式中，該干燥是烘箱干燥2至48小時。
在一種實施方式中，該干燥是烘箱干燥2至24小時。
在一種實施方式中，該干燥在30至60℃烘箱干燥2至48小時。
例如，在一種實施方式中，將反應混合物過濾，殘余物(例如～100mmol粗產物)用H2O(例如4×250cm3)和THF(例如100cm3)洗滌，然后風干過夜。
例如，在一種實施方式中，將反應混合物過濾(例如在真空下通過布氏濾器)，除去固體，加入到含有新鮮水的另一容器中，劇烈攪拌混合物，再次過濾。“過濾-回收-再懸浮”過程可以重復多次。最終得到的固體可以用在后續(xù)步驟中。
環(huán)閉合(RC)在該步驟中，使[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6進行環(huán)閉合，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7，如下流程所述 在一種實施方式中，使[{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二甲氨基)-苯基-亞氨基}-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二甲基銨6′進行環(huán)閉合，得到3，7-雙(二甲氨基)-吩噻嗪-5-_鹽7’，如下流程所述 在一種實施方式中，環(huán)閉合用氧化劑處理實現(xiàn)。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cu(II)。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含硫酸Cu(II)。
在一種實施方式中，該氧化劑是硫酸Cu(II)或其水合物。
硫酸Cu(II)可以在商業(yè)上獲得，例如五水合物。
不希望受任何特定理論所局限，相信Cu(II)在反應中轉化為Cu(I)，沉淀出不溶性Cu2O。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在1至5的pH進行。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在2至5的pH進行。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在3至4.5的pH進行。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在3.5至4.1的pH進行。
在一種實施方式中，環(huán)閉合在約3.8的pH進行。
在一種實施方式中，所需pH通過加入強酸獲得。
在一種實施方式中，所需pH通過加入HCl獲得。
在一種實施方式中，Cu(II)與銨6的摩爾比為0.02至0.10。
在一種實施方式中，該范圍為0.03至0.07。
在一種實施方式中，該范圍為約0.05。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為30至95℃。
在一種實施方式中，反應溫度為50至90℃。
在一種實施方式中，反應溫度為60至90℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約85℃。
在一種實施方式中，反應時間為10至120分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為20至90分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為約60分鐘。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物變色，例如變?yōu)樯钏{色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，在該反應之后過濾反應混合物，收集濾液。(濾液含有所需產物的溶液。)在一種實施方式中，在接近反應溫度的溫度進行過濾，得到“熱”濾液。
在一種實施方式中，先冷卻反應混合物，在約室溫進行過濾，得到“冷”濾液。
氯化物鹽生成(CSF)在該步驟中，3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7與氯化物反應，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8，如下流程所述 在一種實施方式中，3，7-雙(二甲氨基)-吩噻嗪-5-_鹽7′與氯化物反應，得到3，7-雙(二甲氨基)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8′(即MTC)，如下流程所述 用鹽酸作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是鹽酸。
在一種實施方式中，該反應在相對低的pH進行。
在一種實施方式中，該相對低的pH為-1至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至2。
在一種實施方式中，該相對低的pH為約1。
在一種實施方式中，緩慢調節(jié)pH至相對低的pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至120分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至60分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，該反應在相對冷的溫度進行。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至40℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為10至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為15至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為20至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為約25℃。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物(最初例如深藍色)變?yōu)闇\藍色至無色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
用氯化物鹽作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是氯化物鹽。
在一種實施方式中，該氯化物是堿金屬氯化物。
在一種實施方式中，該氯化物是氯化鈉。
在一種實施方式中，存在大為摩爾過量的(鈉)氯化物。
在一種實施方式中，氯化物與鹽7的摩爾比為5至100。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至80。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至50。
在一種實施方式中，該摩爾比為約20。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為20至95℃。
在一種實施方式中，反應溫度為30至95℃。
在一種實施方式中，反應溫度為50至80℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約65℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約室溫。
在一種實施方式中，反應時間為10至30分鐘。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物(最初例如深藍色)變?yōu)闇\藍色至無色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，在加入氯化物后使反應混合物冷卻，得到產物的沉淀。
附加處理在氯化物鹽生成(CSF)步驟之后，可以進行一個或多個附加處理步驟(即ST、DT、CT、EDTAT、OE)，如下所述。如果進行兩個或多個這些處理步驟，可以按照任意順序進行它們。這些處理步驟提高純度，尤其減少金屬含量和減少有機雜質含量。
在一種實施方式中，進行一個或多個選自ST、DT、CT和EDTAT的附加處理步驟繼之以OE。
硫化物處理(ST)在該步驟中，將3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或者3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用硫化物處理。
在一種實施方式中，將鹽7用硫化物處理。
在一種實施方式中，將氯化物鹽8用硫化物處理。
該硫化物是或者包含S2-。
在一種實施方式中，該硫化物是金屬硫化物。
在一種實施方式中，該硫化物是堿金屬硫化物。
在一種實施方式中，該硫化物是或者包含Na2S。
在一種實施方式中，該硫化物是Na2S。
在一種實施方式中，該硫化物是過渡金屬硫化物。
在一種實施方式中，該硫化物是或者包含ZnS。
在一種實施方式中，該硫化物是ZnS。
在一種實施方式中，硫化物的量為0.01至0.20當量。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.15當量。
在一種實施方式中，該范圍為約0.1當量。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.005至0.25M。
在一種實施方式中，該范圍為0.02至0.30M。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.20M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.10M。
在一種實施方式中，該處理是用硫化物和氯化物處理。
在一種實施方式中，該氯化物是或者包含NaCl。
在一種實施方式中，該氯化物是NaCl。
在一種實施方式中，存在摩爾過量的氯化物。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至300當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至40當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至30當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為約20當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為約200當量。
在一種實施方式中，處理在2至20℃的溫度進行。
在一種實施方式中，該溫度范圍為2至15℃。
在一種實施方式中，該溫度范圍為5至15℃。
在一種實施方式中，該溫度為約10℃(例如10±2℃)。
在一種實施方式中，該處理在水性介質中進行。
在一種實施方式中，該處理在堿性條件下進行。
在一種實施方式中，該處理在pH 9至12進行。
在一種實施方式中，該處理在pH 10至11進行。
在一種實施方式中，該處理在pH約10.5進行。
在一種實施方式中，該處理的進行使得反應混合物的pH達到至少9至12。
在一種實施方式中，該處理的進行使得反應混合物的pH達到至少10至11。
在一種實施方式中，該處理的進行使得反應混合物的pH達到至少約10.5。
在一種實施方式中，該處理在約10℃(例如10±2℃)的溫度、在pH約10.5進行，或者其進行使得反應混合物的pH達到至少約10.5。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
例如，在一種實施方式中，在約65℃的溫度，將粗MTC產物完全溶于水，濃度約0.1M。冷卻該溶液。可選地過濾該經(jīng)冷卻的溶液。將該溶液用約0.1當量的硫化鈉水溶液處理，或者足以達到pH約10.5(例如10.5±0.5)的量。將所得混合物攪拌(例如約10分鐘)，過濾，收集濾液。
在一種實施方式中，向濾液加入大為過量的氯化鈉(例如約23當量)，同時攪拌，收集所得沉淀。作為替代選擇，在另一種實施方式中，將冷(例如約20℃)溶液的pH用HCl調節(jié)至約pH1，收集所得沉淀。
在一種實施方式中，在用硫化物處理之后(例如在用氯化物處理之前)，將產物(例如溶液)另外用有機溶劑洗滌。
在一種實施方式中，該有機溶劑選自二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二乙醚、氯苯、石油醚(例如40∶60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。
在一種實施方式中，該有機溶劑是二氯甲烷。
在一種實施方式中，例如在用有機溶劑洗滌之后，調節(jié)經(jīng)洗滌產物的溶液的pH至約4.5至約5.5，或者約5.0。
在一種實施方式中，將溶液(例如另外)加熱/冷卻至大約20℃，然后進行冷酸重結晶(例如用HCl調節(jié)pH至約1，收集所得沉淀)。在可供替代的實施方式中，將溶液(例如另外)加熱至大約65℃，進行熱鹽析。
例如，在一種實施方式中，在約60℃的溫度，將粗MTC產物完全溶于水，濃度約0.06M。冷卻該溶液?？蛇x地過濾該經(jīng)冷卻的溶液。將該溶液用約0.07當量的硫化鈉水溶液處理。將所得混合物攪拌(例如約15分鐘)，過濾，收集濾液。將濾液用二氯甲烷洗滌(例如若干次)。
在一種實施方式中，將經(jīng)洗滌的濾液加熱至約60℃，向該(熱)濾液加入大為過量的氯化鈉(例如約260當量)，同時攪拌。使熱溶液非常緩慢地冷卻，收集(高度結晶性)沉淀(例如“熱鹽析”)。作為替代選擇，在另一種實施方式中，將冷(例如約20℃)的經(jīng)洗滌濾液的pH用HCl調節(jié)至pH1，收集所得沉淀。
二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)在該步驟中，將3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理。
在一種實施方式中，將鹽7用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理。
在一種實施方式中，將氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理。
該二甲基二硫代氨基甲酸鹽是或者包含(CH3)2NCS2-。
在一種實施方式中，該二甲基二硫代氨基甲酸鹽是或者包含(CH3)2NCS2Na。
在一種實施方式中，該二甲基二硫代氨基甲酸鹽是(CH3)2NCS2Na。
在一種實施方式中，二甲基二硫代氨基甲酸鹽的量為0.01至0.20當量。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.15當量。
在一種實施方式中，該范圍為約0.1當量。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.005至0.25M。
在一種實施方式中，該范圍為0.02至0.30M。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.20M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.10M。
在一種實施方式中，該處理是用二甲基二硫代氨基甲酸鹽和氯化物處理。
在一種實施方式中，該氯化物是或者包含NaCl。
在一種實施方式中，該氯化物是NaCl。
在一種實施方式中，存在摩爾過量的氯化物。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至40當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至30當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為約20當量。
在一種實施方式中，該處理在水性介質中進行。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
例如，在一種實施方式中，在約65℃的溫度，將粗MTC產物完全溶于水，濃度約0.1M。冷卻該溶液?？蛇x地過濾該經(jīng)冷卻的溶液。將該溶液用約0.1當量的二甲基二硫代氨基甲酸鈉鹽水溶液處理。將所得混合物攪拌(例如約10分鐘)，過濾，收集濾液。向該濾液加入大為過量的氯化鈉(例如約23當量)，同時攪拌，收集所得沉淀。
在一種實施方式中，在用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理之后(例如在用氯化物處理之前)，將產物(例如溶液)另外用有機溶劑洗滌，如上關于硫化物處理所述。
在一種實施方式中，例如在用有機溶劑洗滌之后，調節(jié)經(jīng)洗滌產物的溶液的pH至約4.5至約5.5，或者約5.0，如上關于硫化物處理所述。
碳酸鹽處理(CT)在該步驟中，將3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用碳酸鹽處理。
在一種實施方式中，將鹽7用碳酸鹽處理。
在一種實施方式中，將氯化物鹽8用碳酸鹽處理。
該碳酸鹽是或者包含CO32-。
在一種實施方式中，該碳酸鹽是或者包含堿金屬碳酸鹽。
在一種實施方式中，該碳酸鹽是或者包含碳酸鈉。
在一種實施方式中，該碳酸鹽是碳酸鈉。
在一種實施方式中，碳酸鈉的量為0.01至0.20當量。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.15當量。
在一種實施方式中，該量為約0.1當量。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.005至0.25M。
在一種實施方式中，該范圍為0.02至0.30M。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.20M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.10M。
在一種實施方式中，該處理是用碳酸鹽和氯化物處理。
在一種實施方式中，該氯化物是或者包含NaCl。
在一種實施方式中，該氯化物是NaCl。
在一種實施方式中，存在摩爾過量的氯化物。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至40當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至30當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為約20當量。
在一種實施方式中，該處理在水性介質中進行。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
例如，在一種實施方式中，在約65℃的溫度，將粗MTC產物完全溶于水，濃度約0.1M。冷卻該溶液?？蛇x地過濾該經(jīng)冷卻的溶液。將該溶液用約0.1當量的碳酸鈉水溶液處理。將所得混合物攪拌(例如約10分鐘)，過濾，收集濾液。向該濾液加入大為過量的氯化鈉(例如約23當量)，同時攪拌，收集所得沉淀。
在一種實施方式中，在用碳酸鹽處理之后(例如在用氯化物處理之前)，將產物(例如溶液)另外用有機溶劑洗滌，如上關于硫化物處理所述。
在一種實施方式中，例如在用有機溶劑洗滌之后，調節(jié)經(jīng)洗滌產物的溶液的pH至約4.5至約5.5，或者約5.0，如上關于硫化物處理所述。
乙二胺四乙酸處理(EDTAT)在該步驟中，將3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理。
在一種實施方式中，將鹽7用EDTA或EDTA鹽處理。
在一種實施方式中，將氯化物鹽8用EDTA或EDTA鹽處理。
在一種實施方式中，該EDTA鹽是或者包含EDTA堿金屬鹽。
在一種實施方式中，該EDTA鹽是或者包含EDTA二鈉鹽。
在一種實施方式中，該EDTA鹽是EDTA二鈉鹽。
在一種實施方式中，EDTA的量為0.01至0.20當量。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.15當量。
在一種實施方式中，該量為約0.1當量。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.005至0.25M。
在一種實施方式中，該范圍為0.02至0.30M。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.20M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.10M。
在一種實施方式中，該處理是用EDTA或EDTA鹽和氯化物處理。
在一種實施方式中，該氯化物是或者包含NaCl。
在一種實施方式中，該氯化物是NaCl。
在一種實施方式中，存在摩爾過量的氯化物。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至40當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為5至30當量。
在一種實施方式中，氯化物的量為約10當量。
在一種實施方式中，該處理在水性介質中進行。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
例如，在一種實施方式中，在約65℃的溫度，將粗MTC產物完全溶于水，濃度約0.1M。將該溶液冷卻至室溫，然后用約0.1當量的EDTA二鈉鹽水溶液處理溶液。將所得混合物攪拌(例如約1小時)，過濾，收集濾液。向該濾液加入大為過量的氯化鈉(例如約10當量)，同時攪拌，收集所得沉淀。
在一種實施方式中，在用EDTA處理之后(例如在用氯化物處理之前)，將產物(例如溶液)另外用有機溶劑洗滌，如上關于硫化物處理所述。
在一種實施方式中，例如在用有機溶劑洗滌之后，調節(jié)經(jīng)洗滌產物的溶液的pH至約4.5至約5.5，或者約5.0，如上關于硫化物處理所述。
有機萃取(OE)在該步驟中，將3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
在一種實施方式中，將鹽7的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
在一種實施方式中，將氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
在一種實施方式中，該有機溶劑是二氯甲烷(CH2Cl2，DCM)。
DCM是“2類”化學品，允許每日暴露量(PDE)為6mg/天。
在一種實施方式中，鹽7或8的水溶液或懸液與有機溶劑(例如DCM)的體積比為0.1至10。
在一種實施方式中，該比例為0.5至5。
在一種實施方式中，該比例為0.5至2。
在一種實施方式中，該處理(例如洗滌)用多份等量有機溶劑(例如DCM)重復進行。
例如，在一種實施方式中，將250mL鹽7或8的水溶液用50mL DCM洗滌五次，總體積為250mL DCM，體積比為1。
在一種實施方式中，鹽7或8的水溶液或懸液的pH為8至12。
在一種實施方式中，該pH范圍為9至12。
在一種實施方式中，該pH范圍為9至11。
在一種實施方式中，該pH范圍為約10.8。
在一種實施方式中，處理(例如洗滌)在2至20℃的溫度進行。
在一種實施方式中，該溫度范圍為2至15℃。
在一種實施方式中，該溫度為約10℃。
處理(例如洗滌)可以例如利用反應容器進行，該容器裝配有與帶槳的軸連接的液上機械攪拌器以及燒瓶底物的排放龍頭。將鹽7或8的水溶液或懸液置于該容器中，加入一份有機溶劑(例如DCM)等分試液，將該異相混合物攪拌適合的時間。使各層分離，經(jīng)由排放龍頭棄去下部(有機溶劑)層。加入另一有機溶劑(例如DCM)等分試液，重復該過程，例如若干次。
有機萃取(OE)特別有效地大大減少最終所得固體(例如結晶性)產物的有機雜質水平。
在一種實施方式中，先進行一個或多個選自ST、DT、CT和EDTAT的附加處理步驟，繼之以有機萃取(OE)。
重結晶(RX)在該步驟中，使3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7或3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8重結晶。
在一種實施方式中，使鹽7重結晶。
在一種實施方式中，使氯化物鹽8重結晶。
重結晶步驟進一步提高純度，也提供具有適合粒徑的產物，例如適合用在后續(xù)藥物制劑中的粒徑。
為了避免疑問，注意“結晶”和“重結晶”在本文中可互換使用，表示從溶液或懸液中生成固體沉淀(例如晶體)，術語“重結晶”中的“重-”不要求新結晶出來的產物以前是固體或結晶形式。
冷酸性重結晶(RX-CAR)在一種實施方式中，該重結晶是在相對冷的溫度、通過調節(jié)pH至相對低的pH從水(例如水溶液或水懸液)中重結晶(例如“冷酸性結晶”)。
在一種實施方式中，使用HCl調節(jié)pH。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至40℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為10至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為15至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為20至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為約25℃。
在一種實施方式中，該相對低的pH為-1至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至2。
在一種實施方式中，該相對低的pH為約1。
在一種實施方式中，緩慢地調節(jié)pH至相對低的pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至120分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至60分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
冷酸性重結晶(RX-CAR)特別有效地大大減少所得固體(例如結晶性)產物的金屬含量。
熱鹽析(RX-HSO)在一種實施方式中，該重結晶是在初始升高的溫度、在氯化物如氯化鈉存在下從水(例如水溶液或水懸液)中重結晶(例如“熱鹽析”)。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.002至0.05M。
在一種實施方式中，該范圍為0.005至0.04M。
在一種實施方式中，該范圍為0.01至0.04M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.03M。
在一種實施方式中，該初始升高的溫度為30至90℃。
在一種實施方式中，該范圍為40至80℃。
在一種實施方式中，該范圍為50至80℃。
在一種實施方式中，該初始升高的溫度為約65℃。
在一種實施方式中，氯化物(氯化鈉)的(初始)濃度為0.1至3.0M。
在一種實施方式中，該范圍為0.5至2.5M。
在一種實施方式中，該范圍為1.0至2.2M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約2.0M。
在一種實施方式中，存在大為摩爾過量的氯化物(氯化鈉)。
在一種實施方式中，氯化物(氯化鈉)與鹽7或8的摩爾比為5至100。
在一種實施方式中，該摩爾比為20至80。
在一種實施方式中，該摩爾比為50至80。
在一種實施方式中，該摩爾比為約65。
在一種實施方式中，該重結晶包括隨后干燥經(jīng)過重結晶的(高度結晶性)沉淀，例如在烘箱中，在適合的溫度(例如50至120℃)達適合的時間(例如1至24小時)。
例如，在一種實施方式中，在大約65℃，將粗MTC產物或經(jīng)過處理的粗MTC產物溶于H2O，濃度為約0.03M?？蛇x地，過濾該溶液。加入氯化鈉。緩慢地使混合物冷卻，例如至約室溫，例如歷經(jīng)1至10小時。收集所得(高度結晶性)沉淀，可選地干燥，例如在烘箱中(例如在約75℃)達適當?shù)臅r間(例如約16小時)。
研制(RX-TRIT)在一種實施方式中，該重結晶是在初始升高的溫度、在四氫呋喃(THF)存在下從水(例如水溶液或水懸液)中重結晶(例如研制)。
在一種實施方式中，鹽7或8的(初始)濃度為0.002至0.20M。
在一種實施方式中，該范圍為0.01至0.20M。
在一種實施方式中，該范圍為0.05至0.15M。
在一種實施方式中，該(初始)濃度為約0.13M。
在一種實施方式中，該初始升高的溫度為30至90℃。
在一種實施方式中，該范圍為40至80℃。
在一種實施方式中，該范圍為50至80℃。
在一種實施方式中，該初始升高的溫度為約65℃。
在一種實施方式中，水與THF的比例為20∶1至2∶1，按體積計。
在一種實施方式中，該范圍為10∶1至2∶1。
在一種實施方式中，該范圍為7∶1至3∶1。
在一種實施方式中，該比例為約5∶1。
在一種實施方式中，該重結晶包括隨后干燥經(jīng)過重結晶的(高度結晶性)沉淀，例如在烘箱中，在適合的溫度(例如50至120℃)達適合的時間(例如1至24小時)。
例如，在一種實施方式中，在大約65℃，將粗MTC產物或經(jīng)過處理的粗MTC產物溶于水，濃度為約0.13M。可選地，過濾該溶液。緩慢地使混合物冷卻，當溫度達到約25℃時加入THF，水∶THF體積比為約5∶1。再次緩慢地使混合物冷卻，例如至約5℃，例如歷經(jīng)1至10小時。收集所得(高度結晶性)沉淀，可選地干燥，例如在烘箱中(例如在約100℃)達適當?shù)臅r間(例如約2小時)。
合成方法B已知方法與當前所要求保護的方法B之間的一個重要區(qū)別是在環(huán)融合(RF-2)步驟中使用硫化鈉(Na2S)代替其他硫化物，例如硫化氫(H2S)。例如參見Michaelis等人，1940。不過，硫化氫極其危險，在工業(yè)過程中使用既困難又昂貴。通過使用硫化鈉，克服了這些缺點。另外，硫化鈉是固體，容易操作，能夠更容易和精確地稱量；這允許更好地控制反應。
在一種實施方式中，該方法包括如下步驟環(huán)融合(RF-2)。
在一種實施方式中，該方法另外包括如下后續(xù)步驟氯化物鹽生成(CSF-2)。
在一種實施方式中，該方法另外包括如下初始步驟亞硝酰還原(NR-2)。
在一種實施方式中，該方法另外包括如下初始步驟亞硝基化(NOS-2)；亞硝酰還原(NR-2)。
在一種實施方式中，該方法另外包括如下初始步驟N，N-二取代(NNDS-2)；亞硝基化(NOS-2)；亞硝酰還原(NR-2)。
因而，在一種實施方式中，該方法包括如下順序的步驟N，N-二取代(NNDS-2)；亞硝基化(NOS-2)；亞硝酰還原(NR-2)；環(huán)融合(RF-2)；氯化物鹽生成(CSF-2)。
這種方法特別完全適合于合成其中R1和R9不是-H的二氨基吩噻嗪_化合物，例如1，9-二乙基亞甲藍(DEMTC)。
N，N-二取代(NNDS-2)在該步驟中，將3-可選被取代的-苯胺9用烷基鹵化物、鏈烯基鹵化物或鹵代烷基鹵化物N，N-二取代，得到N，N-二取代的-3-可選被取代的-苯胺10，如下流程所述 在一種實施方式中，將3-乙基-苯胺9用甲基鹵N，N-二甲基化，得到N，N-二甲基-3-乙基-苯胺10，如下流程所述 在一種實施方式中，該反應使用烷基鹵化物。
在一種實施方式中，該反應使用鏈烯基鹵化物。
在一種實施方式中，該反應使用鹵代烷基鹵化物。
在一種實施方式中，該鹵化物是氯化物、溴化物或碘化物。
在一種實施方式中，該鹵化物是溴化物或碘化物。
在一種實施方式中，該鹵化物是碘化物。
在一種實施方式中，該反應使用甲基碘。
在一種實施方式中，烷基鹵化物、鏈烯基鹵化物或鹵代烷基鹵化物與苯胺9的摩爾比為2.0至4.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為2.5至3.5。
在一種實施方式中，該反應在堿性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH 8或以上進行。
在一種實施方式中，該反應在pH 8至14進行。
在一種實施方式中，該反應在pH 8至12進行。
在一種實施方式中，該反應在pH 8至10進行。
在一種實施方式中，該堿性條件用碳酸鈉獲得。
在一種實施方式中，烷基鹵化物、鏈烯基鹵化物或鹵代烷基鹵化物與堿(例如碳酸鈉)的摩爾比為約2.0。
在一種實施方式中，反應溫度為25至65℃。
在一種實施方式中，反應溫度為35至55℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約45℃。
在一種實施方式中，反應時間為1至24小時。
在一種實施方式中，反應時間為2至18小時。
在一種實施方式中，反應時間為約10小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，加入水終止該反應。
亞硝基化(NOS-2)在該步驟中，N，N-二取代的-3-可選被取代的苯胺10被4-亞硝基化，得到相應的N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?1，如下流程所述 在一種實施方式中，N，N-二甲基-3-乙基-苯胺10′被4-亞硝基化，生成相應的N，N-二甲基-3-乙基-4-亞硝?；桨?1′，如下流程所述 在一種實施方式中，該亞硝基化用亞硝酸鹽進行。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含NO2-。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含堿金屬亞硝酸鹽。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含亞硝酸鈉或亞硝酸鉀。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是或者包含亞硝酸鈉。
在一種實施方式中，該亞硝酸鹽是亞硝酸鈉。
在一種實施方式中，亞硝酸鹽與苯胺9的摩爾比為0.8至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.3。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.1。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.3。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1或以下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至-1進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至0進行。
在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用HCl(它具有一個強酸質子)獲得。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺9的摩爾比為1至4。
在一種實施方式中，該范圍為2至4。
在一種實施方式中，該范圍為3至4。
在一種實施方式中，該比例為約3.2。
在一種實施方式中，該范圍為2至3。
在一種實施方式中，該范圍為2.25至2.75。
在一種實施方式中，該比例為約2.5。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至25℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至15℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至10℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為10至240分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為30至120分鐘。
在一種實施方式中，反應時間為約60分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
亞硝酰還原(NR-2)在該步驟中，還原N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?1，得到N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯12，如下流程所述 在一種實施方式中，還原N，N-二甲基-3-乙基-4-亞硝?；?苯胺11′，得到N，N-二甲基-1，4-二氨基-3-乙基-苯12′，如下流程所述 在一種實施方式中，該還原是與還原劑反應。
在一種實施方式中，該還原劑是或者包含F(xiàn)e(0)。
在一種實施方式中，該還原劑是或者包含金屬鐵。
在一種實施方式中，該還原劑是金屬鐵。
金屬鐵可以在商業(yè)上獲得，例如鐵屑。
在一種實施方式中，F(xiàn)e(0)與苯胺9的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.5至4.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.5至3.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1或以下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至-1進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至0進行。
在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用HCl(它具有一個強酸質子)獲得。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺9的摩爾比為1至4。
在一種實施方式中，該范圍為2至4。
在一種實施方式中，該范圍為3至4。
在一種實施方式中，該比例為約3.2。
在一種實施方式中，該范圍為2至3。
在一種實施方式中，該范圍為2.25至2.75。
在一種實施方式中，該比例為約2.5。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應在2至35℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應在10至30℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應進行時間為10分鐘至12小時。
在一種實施方式中，反應進行時間為30分鐘至6小時。
在一種實施方式中，反應進行時間為約3小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
環(huán)融合(RF-2)在該步驟中，在堿金屬硫化物和鐵(III)存在下，在pH0.6至2.6，融合兩分子的N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯12，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽13，如下流程所述 在一種實施方式中，在堿金屬硫化物和鐵(III)存在下，在pH 0.6至2.6，融合兩分子的N，N-二甲基-1，4-二氨基-5-乙基-苯12，得到3，7-雙(二甲基-氨基)-1，9-(二乙基)-吩噻嗪-5-_鹽13，如下流程所述 在一種實施方式中，該堿金屬硫化物是或者包含硫化鈉或硫化鉀。
在一種實施方式中，該堿金屬硫化物是或者包含硫化鈉。
在一種實施方式中，該堿金屬硫化物是硫化鈉。
在一種實施方式中，該鐵(III)是或者包含鹵化鐵(III)。
在一種實施方式中，該鐵(III)是或者包含氯化鐵(III)。
在一種實施方式中，該鐵(III)是氯化鐵(III)或其水合物。
氯化鐵(III)可以在商業(yè)上獲得，例如無水鹽或六水合物。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH0.8至2.4進行。
在一種實施方式中，該范圍為1.0至2.2。
在一種實施方式中，該范圍為1.2至2.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.4至1.8。
在一種實施方式中，pH為約1.6。
在一種實施方式中，硫化物與苯胺12的摩爾比為0.5至2.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.8至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為約1.0。
在一種實施方式中，F(xiàn)e(III)與苯胺12的摩爾比為2.0至6.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為2.6至4.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為約3.0。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，加入多份大約等量的Fe(III)試劑。
在一種實施方式中，加入兩份大約等量的Fe(III)試劑。
在一種實施方式中，調節(jié)pH至所需值(例如加入強酸或強堿)，加入堿金屬硫化物，加入一半的Fe(III)試劑。然后向混合物充氣(例如約1小時)，然后加入其余的Fe(III)試劑。
在一種實施方式中，反應在2至35℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應在10至30℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應進行時間為10分鐘至12小時。
在一種實施方式中，反應進行時間為30分鐘至6小時。
在一種實施方式中，反應進行時間為約3小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，在反應后過濾反應混合物，收集濾液。
在一種實施方式中，在接近反應溫度的溫度進行過濾，得到“熱”濾液。
在一種實施方式中，先冷卻反應混合物，在約室溫進行過濾，得到“冷”濾液。
氯化物鹽生成(CSF-2)在該步驟中，3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽13與氯化物反應，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽14，如下流程所述 在一種實施方式中，3，7-雙(二甲氨基)-吩噻嗪-5-_鹽13′與氯化物反應，得到3，7-雙(二甲氨基)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽14′(即DEMTC)，如下流程所述
用鹽酸作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是鹽酸。
在一種實施方式中，該反應在相對低的pH進行。
在一種實施方式中，該相對低的pH為-1至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至2。
在一種實施方式中，該相對低的pH為約1。
在一種實施方式中，緩慢調節(jié)pH至相對低的pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至120分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至60分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，該反應在相對冷的溫度進行。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至40℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為10至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為15至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為20至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為約25℃。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物(最初例如深藍色)變?yōu)闇\藍色至無色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
用氯化物鹽作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是氯化物鹽。
在一種實施方式中，該氯化物是堿金屬氯化物。
在一種實施方式中，該氯化物是氯化鈉。
在一種實施方式中，存在大為摩爾過量的氯化物(氯化鈉)。
在一種實施方式中，氯化物與鹽13的摩爾比為5至100。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至80。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至50。
在一種實施方式中，該摩爾比為約20。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至20℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為5至30分鐘。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物變色，例如隨著產物沉淀出來變?yōu)榧t色/紫色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
如果需要，可以另外進行上述一個或多個處理步驟(ST、DT、CT、EDTAT、OE)。
如果需要，可以另外進行上述重結晶步驟(RX)。
合成方法C這種方法特別完全適合于合成其中基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)不是-N(CH3)2的二氨基吩噻嗪_化合物，例如其中基團-N(R3NA)(R3NB)和-N(R7NA)(R7NB)相同，是-N(CH3CH2)2。
在一種實施方式中，該方法包括如下順序的步驟硫代磺酸生成(TSAF-3)；氧化性偶聯(lián)(OC-3)；環(huán)閉合(RC-3)。
在一種實施方式中，該方法另外包括如下后續(xù)步驟氯化物鹽生成(CSF-3)。
因而，在一種實施方式中，該方法包括如下順序的步驟硫代磺酸生成(TSAF-3)；氧化性偶聯(lián)(OC-3)；環(huán)閉合(RC-3)；氯化物鹽生成(CSF-3)。
硫代磺酸生成(TSAF-3)在該步驟中，在硫代硫酸鹽存在下氧化N，N-二乙基-1，4-二氨基-苯15，得到硫代硫酸S-(2-氨基-5-二乙基氨基-苯基)酯16，如下流程所述 該硫代硫酸鹽是或者包含S2O3-2。
在一種實施方式中，該硫代硫酸鹽是或者包含Na2S2O3。
在一種實施方式中，該硫代硫酸鹽是Na2S2O3。
Na2S2O3可以在商業(yè)上獲得，例如無水鹽或五水合物。
在一種實施方式中，硫代硫酸鹽與二胺15的摩爾比為0.8至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.0至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.1至1.3。
在一種實施方式中，該氧化是與氧化劑反應。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr(VI)。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr2O7-2。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，該氧化劑是Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，Cr(VI)與二胺15的摩爾比為0.2至2.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至1.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至0.8。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.3至0.7。
在一種實施方式中，該氧化劑另外包含Al(III)。
在一種實施方式中，該氧化劑另外包含Al2(SO4)3。
在一種實施方式中，Al(III)與二胺15的摩爾比為0.2至2.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至1.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.2至0.8。
在一種實施方式中，該摩爾比為0.3至0.7。
在一種實施方式中，該氧化劑進一步包含強酸。
在一種實施方式中，該氧化劑進一步包含硫酸(H2SO4)(它具有兩個強酸質子)。
在一種實施方式中，酸質子與二胺15的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該范圍為約2.0。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應在15至50℃的溫度進行。
在一種實施方式中，反應進行時間為10分鐘至2小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，在反應后過濾反應混合物，收集濾液。
在一種實施方式中，該過濾在接近反應溫度的溫度進行。
在一種實施方式中，先冷卻反應混合物，在約室溫進行過濾。
氧化性偶聯(lián)(OC-3)在該步驟中，將硫代硫酸S-(2-氨基-5-二乙基氨基-苯基)酯16與N，N-二乙基-苯胺17氧化性偶聯(lián)，得到[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二乙基氨基)-苯基-亞氨基}-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二乙基銨18，如下流程所述
在一種實施方式中，該氧化用氧化劑進行。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr(VI)。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Cr2O7-2。
在一種實施方式中，該氧化劑是或者包含Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，該氧化劑是Na2Cr2O7。
在一種實施方式中，酯16與苯胺17的摩爾比為0.5至1.5。
在一種實施方式中，該范圍為0.8至1.2。
在一種實施方式中，該范圍為約1.0。
在一種實施方式中，Cr(VI)與苯胺17的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.6至3.0。
在一種實施方式中，該范圍為2.0至3.0。
在一種實施方式中，該范圍為約2.2。
在一種實施方式中，該反應在酸性條件下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1或以下進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至-1進行。
在一種實施方式中，該反應在pH1至0進行。
在一種實施方式中，該酸性條件用強酸獲得。
在一種實施方式中，該酸性條件用HCl(它具有一個強酸質子)獲得。
在一種實施方式中，酸質子與苯胺17的摩爾比為1.0至4.0。
在一種實施方式中，該范圍為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該范圍為約2.0。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為20至95℃。
在一種實施方式中，反應溫度為30至80℃。
在一種實施方式中，反應時間為10分鐘至12小時。
在一種實施方式中，反應時間為10分鐘至4小時。
在一種實施方式中，反應時間為約30分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
環(huán)閉合(RC-3)在該步驟中，使[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二乙基氨基)-苯基-亞氨基}-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二乙基銨18與活化二氧化錳(MnO2)反應以實現(xiàn)環(huán)閉合，得到3，7-雙(二乙基氨基)-吩噻嗪-5-_鹽19，如下流程所述 在一種實施方式中，MnO2與銨18的摩爾比為1.0至3.0。
在一種實施方式中，該摩爾比為1.5至2.5。
在一種實施方式中，該摩爾比為約2.0。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為30至95℃。
在一種實施方式中，反應溫度為60至90℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約85℃。
在一種實施方式中，反應時間為10分鐘至12小時。
在一種實施方式中，反應時間為10分鐘至4小時。
在一種實施方式中，反應時間為約30分鐘。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
在一種實施方式中，在反應完成后(觀察到藍色溶液和沉淀)，加入強酸(例如濃H2SO4)。
不希望受任何特定理論所局限，相信強酸溶解錳鹽和氧化鉻(和其他鹽，如果存在的話)。
在一種實施方式中，在反應后過濾反應混合物，收集濾液。
在一種實施方式中，在接近反應溫度的溫度進行過濾，得到“熱”濾液。
在一種實施方式中，先冷卻反應混合物，在約室溫進行過濾，得到“冷”濾液。
氯化物鹽生成(CSF-3)在該步驟中，使3，7-雙(二乙基氨基)-吩噻嗪-5-_鹽19與氯化物反應，得到3，7-雙(二乙氨基)-吩噻嗪-5-_氯化物氯化鋅混鹽20，如下流程所述 用鹽酸作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是鹽酸。
在一種實施方式中，該反應在相對低的pH進行。
在一種實施方式中，該相對低的pH為-1至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至3。
在一種實施方式中，該相對低的pH為0至2。
在一種實施方式中，該相對低的pH為約1。
在一種實施方式中，緩慢調節(jié)pH至相對低的pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至120分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至60分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
在一種實施方式中，該反應在相對冷的溫度進行。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至40℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為5至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為10至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為15至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為20至30℃。
在一種實施方式中，該相對冷的溫度為約25℃。
在一種實施方式中，該反應進行直至反應混合物(最初例如深藍色)變?yōu)闇\藍色至無色。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
用氯化物鹽作為氯化物源的處理在一種實施方式中，該氯化物是氯化物鹽。
在一種實施方式中，該氯化物是堿金屬氯化物。
在一種實施方式中，該氯化物是氯化鈉。
在一種實施方式中，該氯化物是堿金屬氯化物和氯化鋅。
在一種實施方式中，該氯化物是氯化鈉和氯化鋅。
在一種實施方式中，存在大為摩爾過量的氯化物(氯化鈉和氯化鋅)。
在一種實施方式中，氯化物與鹽19的摩爾比為5至100。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至80。
在一種實施方式中，該摩爾比為10至50。
在一種實施方式中，該摩爾比為約20。
在一種實施方式中，該反應在水性介質中進行。
在一種實施方式中，反應溫度為2至30℃。
在一種實施方式中，反應溫度為2至20℃。
在一種實施方式中，反應溫度為約5℃。
在一種實施方式中，反應時間為30分鐘至24小時。
在一種實施方式中，在該反應步驟期間攪拌反應混合物。
如果需要，可以另外進行上述一個或多個處理步驟(ST、DT、CT、EDTAT、OE)。
如果需要，可以另外進行上述重結晶步驟(RX)。
化合物本文所述方法得到二氨基吩噻嗪_化合物，純度迄今是世界上不可獲得的。
例如，很多本文所述方法得到非常高純度的MTC，有機雜質(例如天青B和亞甲紫Bernthsen(MVB))和金屬雜質的水平極低(例如滿足或超出歐洲藥典的限度)。
因而，本發(fā)明在一方面涉及由或者可由本文所述方法得到的本文所述二氨基吩噻嗪_化合物。
在一種實施方式中，本發(fā)明涉及由或者可由本文所述方法得到的MTC。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的純度大于98％。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的純度大于97％。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的純度大于96％。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的純度大于95％。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的純度大于94％。
在一種實施方式中，該化合物含有少于2％的天青B雜質。
在一種實施方式中，該化合物含有少于3％的天青B雜質。
在一種實施方式中，該化合物含有少于4％的天青B雜質。
在一種實施方式中，該化合物含有少于0.13％的MVB雜質。
在一種實施方式中，該化合物含有少于0.14％的MVB雜質。
在一種實施方式中，該化合物含有少于0.15％的MVB雜質。
(本文引用的所有百分比純度都按重量計，另有指定除外。)在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的元素純度(例如Al、Cr、Zn、Cu、Fe、Mn、Ni、Mo、Cd、Sn和Pb)好于歐洲藥典(EP)限度。
本文提到的術語“元素純度”涉及由歐洲藥典指定的十一種(11)金屬的量Al、Cr、Zn、Cu、Fe、Mn、Ni、Mo、Cd、Sn和Pb。
本文提到的歐洲藥典限度如下表所述

在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的元素純度好于歐洲藥典(EP)限度的0.9倍。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的元素純度好于歐洲藥典(EP)限度的0.5倍。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的元素純度好于歐洲藥典(EP)限度的0.2倍。
在一種實施方式中，該化合物(例如MTC)的元素純度好于歐洲藥典(EP)限度的0.1倍。
(例如，歐洲藥典(EP)限度的0.5倍是50μg/g Al、5μg/g Cr、5μg/g Zn等。)本文公開上述純度級別的所有似然和相容組合，如同具體和明確引用每種個別組合。
組合物本發(fā)明在一方面涉及組合物，包含本文所述二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明在一方面涉及組合物，包含由或者可由本文所述方法得到的二氨基吩噻嗪_化合物。
在一種實施方式中，該組合物進一步包含藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
滅活病原體的方法本發(fā)明在一方面涉及本文所述二氨基吩噻嗪_化合物在滅活樣品(例如血液或血漿樣品)中病原體的方法中的用途，該方法包括向該樣品引入該化合物，再使該樣品暴露于光。
本發(fā)明在一方面涉及由或者可由本文所述方法得到的二氨基吩噻嗪_化合物在滅活樣品(例如血液或血漿樣品)中病原體的方法中的用途，該方法包括向該樣品引入該化合物，再使該樣品暴露于光。
醫(yī)學治療方法本發(fā)明在一方面涉及用在人或動物體治療方法中的本文所述二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明在一方面涉及用在人或動物體(例如疾病狀況)治療方法中的由或者可由本文所述方法得到的二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明在一方面涉及本文所述二氨基吩噻嗪_化合物在制備用于治療疾病狀況的藥物中的用途。
本發(fā)明在一方面涉及由或者可由本文所述方法得到的二氨基吩噻嗪_化合物在制備用于治療疾病狀況的藥物中的用途。
本發(fā)明在一方面涉及治療患者疾病狀況的方法，包括對所述患者給予治療有效量的本文所述二氨基吩噻嗪_化合物。
本發(fā)明在一方面涉及治療患者疾病狀況的方法，包括對所述患者給予治療有效量的由或者可由本文所述方法得到的二氨基吩噻嗪_化合物。
疾病狀況在一種實施方式中，該疾病狀況是τ蛋白病。
“τ蛋白病”是τ蛋白(及其異常功能或加工)在其中扮演角色的病癥。阿爾茨海默氏病是τ蛋白病的一個實例。神經(jīng)變性疾患如皮克氏病(Pick’sdisease)和進行性核上麻痹(PSP)的發(fā)病機理似乎與病理性截短的τ聚集物分別在新皮質的齒狀回和星狀錐體細胞中的蓄積有關。其他癡呆包括額顳癡呆(FTD)、與染色體17有關的帕金森綜合征(FTDP-17)、抑制解除-癡呆-帕金森綜合征-肌萎縮復合征(DDPAC)、蒼白體-腦橋-黑質變性(PPND)、Guam-ALS綜合征、蒼白體-黑質-呂伊斯體變性(pallido-nigro-luysiandegeneration，PNLD)、皮質-基底變性(CBD)和其他(例如參見Wischik等人，2000，尤其其中的表5.1)。每種這些疾病都主要或部分地以異常τ聚集為特征，本文稱為“τ蛋白病”。
在一種實施方式中，該疾病狀況是阿爾茨海默氏病(AD)。
在一種實施方式中，該疾病狀況是皮膚癌癥。
在一種實施方式中，該疾病狀況是黑素瘤。
在一種實施方式中，該疾病狀況是病毒、細菌或原生動物疾病。
在一種實施方式中，該原生動物疾病狀況是瘧疾。在這種實施方式中，治療可以與另一種抗微生物劑組合，例如與氯喹或阿托夸酮組合。
在一種實施方式中，該病毒疾病狀況由丙型肝炎、HIV或西尼羅病毒所導致。
治療本文在治療病癥上下文中所使用的術語“治療”一般涉及治療和療法，無論人或動物(例如在獸醫(yī)應用中)，其中實現(xiàn)一定的所需治療效果，例如病癥進展的抑制，包括進展速率的降低、進展速率的停止、病癥的消退、病癥的改善和病癥的治愈。也包括作為預防性措施的治療(即預防、防止)。
本文所用的術語“治療有效量”涉及活性化合物或者包含活性化合物的材料、組合物或劑型在按照所需治療方案給藥時有效產生一定的所需治療效果、與合理的利益/風險比相稱的量。
術語“治療”包括組合治療和療法，其中組合有兩種或多種治療或療法，例如先后或同時。治療和療法的實例包括但不限于化學療法(活性成分的給藥，例如包括藥物、抗體(例如在免疫療法中)、前體藥物(例如在光動力療法、GDEPT、ADEPT等中))、手術、放射療法和基因療法。
給藥途徑二氨基吩噻嗪_化合物或者包含它的藥物組合物可以借助任何適宜的給藥途徑對受治療者/患者給藥，無論全身/外周還是局部(即在所需作用部位)。
給藥的途徑包括但不限于口服(例如攝食)、口腔、舌下、透皮(例如包括貼劑、硬膏劑等)、透粘膜(例如包括貼劑、硬膏劑等)、鼻內(例如鼻噴霧劑)、眼(例如滴眼劑)、肺(例如吸入或吹入療法，例如利用氣霧劑，例如通過口或鼻)、直腸(例如栓劑或灌腸劑)、陰道(例如陰道栓)、腸胃外(例如注射，包括皮下、真皮內、肌內、靜脈內、動脈內、心內、鞘內、脊柱內、囊內、囊下、眼眶內、腹膜內、氣管內、表皮下、關節(jié)內、蛛網(wǎng)膜下和胸骨內(例如包括導管內注射至腦內))、藥庫或儲庫植入(例如皮下或肌內)。
受治療者/患者受治療者/患者可以是動物、哺乳動物、有胎盤動物、有袋動物(例如袋鼠、袋熊)、單孔目動物(例如鴨嘴獸)、嚙齒動物(例如豚鼠、倉鼠、大鼠、小鼠)、鼠類(例如小鼠)、兔形目動物(例如兔子)、鳥類(例如鳥)、犬類(例如狗)、貓類(例如貓)、馬類(例如馬)、豬類(例如豬)、綿羊類(例如綿羊)、牛類(例如母牛)、靈長類、猿類(例如猴或無尾猿)、猴類(例如狨、狒狒)、無尾猿類(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、長臂猿)或人類。
此外，受治療者/患者可以是任意其發(fā)育形式，例如胚胎。
在一種優(yōu)選的實施方式中，受治療者/患者是人。
制劑盡管二氨基吩噻嗪_化合物有可能單獨使用(例如給藥)，不過經(jīng)常優(yōu)選作為組合物或制劑呈遞。
在一種實施方式中，該組合物是藥物組合物(例如制劑、制備物、藥劑)，包含本文所述二氨基吩噻嗪_化合物和藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
在一種實施方式中，該組合物是藥物組合物，包含至少一種本文所述二氨基吩噻嗪_化合物以及一種或多種本領域技術人員熟知的其他藥學上可接受的成分，包括但不限于藥學上可接受的載體、稀釋劑、賦形劑、助劑、填充劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤滑劑、穩(wěn)定劑、增溶劑、表面活性劑(例如濕潤劑)、掩蔽劑、著色劑、矯味劑和甜味劑。
在一種實施方式中，該組合物進一步包含其他活性成分，例如其他治療或預防劑。
適合的載體、稀釋劑、賦形劑等可以在標準藥學文獻中找到。例如參見Handbook of Pharmaceutical Additives，第2版(eds.M.Ash和I.Ash)，2001(Synapse Information Resources，Inc.，Endicott，紐約，USA)，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第20版，pub.Lippincott，Williams& Wilkins，2000；和Handbook of Pharmaceutical Excipients，第2版，1994。
本發(fā)明的另一方面涉及制備藥物組合物的方法，包括混合至少一種[11C]-放射性標記的本文所述吩噻嗪或吩噻嗪樣化合物以及一種或多種本領域技術人員熟知的其他藥學上可接受的成分，例如載體、稀釋劑、賦形劑等。如果配制成離散的單元(例如片劑等)，每一單元含有預定量(劑量)的活性化合物。
本文所用的術語“藥學上可接受的”涉及化合物、成分、材料、組合物、劑型等，它們在合理的醫(yī)學判斷范圍內，適合用于與有關受治療者(例如人)的組織接觸，沒有過度的毒性、刺激性、變態(tài)反應或者其他問題或并發(fā)癥，與合理的利益/風險比相稱。每一載體、稀釋劑、賦形劑等在與制劑其他成分相容的意義上也必須是“可接受的”。
制劑可以借助藥學領域任意熟知的方法制備。這類方法包括使活性化合物與載體締合的步驟，該載體構成一種或多種輔助成分。一般而言，制劑如下制備使活性化合物與載體(例如液體載體、微細粉碎的固體載體等)均勻和緊密地締合，然后如果必要使產物成形。
制劑經(jīng)過制備，可以提供迅速或緩慢釋放；即時、延遲、定時或持續(xù)釋放；或者它們的組合。
適合于腸胃外給藥(例如注射)的制劑包括水性或非水性、等滲、無熱原、無菌的液體(例如溶液、懸液)，其中溶解、懸浮或者以其他方式提供(例如在脂質體或其他微粒中)活性成分。這類液體可以另外含有藥學上可接受的成分，例如抗氧化劑、緩沖劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、制菌劑、懸浮劑、增稠劑和賦予制劑與接受者血液(或其他有關體液)等滲的溶質。賦形劑的實例包括例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。適合用在這類制劑中的等滲載體的實例包括氯化鈉注射液、林格氏溶液或乳酸化林格氏溶液。通常，活性成分在液體中的濃度為約1ng/mL至約10μg/mL，例如約10ng/mL至約1μg/mL。制劑可以呈遞在單劑量或多劑量密封容器中，例如安瓿和小瓶，并且可以貯存在冷凍干燥(凍干)條件中，在使用前不久僅需加入無菌液體載體，例如注射用水。臨時注射溶液和懸液可以從無菌粉末、顆粒和藥片制備。
優(yōu)選制劑的實例本發(fā)明在一方面涉及劑量單元(例如藥片或膠囊)，包含20至300mg本文所述二氨基吩噻嗪_化合物(例如由或者可由本文所述方法得到；純度如本文所述；等等)和藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
在一種實施方式中，該劑量單元是片劑。
在一種實施方式中，該劑量單元是膠囊。
在一種實施方式中，該量為30至200mg。
在一種實施方式中，該量為約30mg。
在一種實施方式中，該量為約60mg。
在一種實施方式中，該量為約100mg。
在一種實施方式中，該量為約150mg。
在一種實施方式中，該量為約200mg。
在一種實施方式中，藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑是或者包含甘油酯(例如Gelucire 44/14_；月桂酰聚乙二醇-32甘油酯PhEur，USP)和膠態(tài)二氧化硅(例如2％Aerosil 200_；膠態(tài)二氧化硅PhEur，USP)的一種或兩種。
劑量將為本領域技術人員所領會的是，二氨基吩噻嗪_化合物和包含二氨基吩噻嗪_化合物的組合物的適當劑量可以因患者而異。確定最佳劑量一般將牽涉治療益處水平與任意危險或有害副作用的權衡。所選擇的劑量水平將依賴于多種因素，包括但不限于特定化合物的活性、給藥的途徑、給藥的時間、化合物的排泄速率、治療的持續(xù)時間、組合使用的其他藥物、化合物和/或材料、病癥的嚴重性和患者的種屬、性別、年齡、體重、條件、一般健康狀況和既往病史?；衔锏牧亢徒o藥的途徑將最終取決于主治醫(yī)師、獸醫(yī)或臨床醫(yī)師，不過一般將選擇劑量以達到在作用部位的局部濃度，該濃度實現(xiàn)所需效果而不導致實質性傷害或有害副作用。
給藥可以在一次劑量中實現(xiàn)，連續(xù)或間歇地(例如以適當間隔在分開的劑量中)遍及治療過程。確定最有效的給藥手段和劑量的方法是本領域技術人員熟知的，將因用于療法的制劑、療法的目的、所治療的靶細胞和受治療者而異。以主治醫(yī)師、獸醫(yī)或臨床醫(yī)師所選擇的劑量水平和方式，可以進行單次或多次給藥。
一般而言，適合的活性化合物劑量在約100ng至約25mg(更典型為約1μg至約10mg)每千克受治療者體重每天的范圍內。若活性化合物是鹽、酯、酰胺、前體藥物等，在母體化合物的基礎上計算給藥量，因此成比例地增加所要使用的實際重量。
在一種實施方式中，按照下列劑量方案對人類患者給予活性化合物(例如MTC)約100mg，每日3次。
在一種實施方式中，按照下列劑量方案對人類患者給予活性化合物(例如MTC)約150mg，每日2次。
在一種實施方式中，按照下列劑量方案對人類患者給予活性化合物(例如MTC)約200mg，每日2次。
實施例下列實施例僅供闡述本發(fā)明，不旨在限制本文所述發(fā)明的范圍。
實施例1使用連二亞硫酸鹽并分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，20g，0.165mol)、水(100cm3)和HCl(37％，44cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，12.6g，0.183mol)的水(100cm3)溶液。將所得懸液在低溫(5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，22.0g，0.40mol)和HCl(37％，44cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，45.0g，0.181mol)的水(50cm3)溶液處理。歷經(jīng)40分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，20.0g，67.1mmol)的水(40cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，20g，0.165mol)、水(20cm3)與H2SO4(98％，16g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)90分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，52.0g，0.174mmol)的水(140cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時。向混合物加入連二亞硫酸鈉(Na2S2O4，MW 174.1，15.2g，87.2mmol)的H2O(20cm3)溶液。將混合物攪拌另外10分鐘(在約5℃)。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(4×250cm3)和四氫呋喃(THF)(200cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)的HCl水溶液(900cm3，pH2)中。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×200cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，200g，3.45mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(18.1g，35％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例2使用乙醇并分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(約5℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(35cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時。向混合物加入乙醇(C2H5OH，MW 46.07，1cm3，2.4g，52mmol)。將混合物攪拌另外16小時(在5-10℃)。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(4×250cm3)和四氫呋喃(THF)(100cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)的HCl水溶液(450cm3，pH 2)中。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，100g，1.73mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例3使用碘化物并分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(約5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(25cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時。向混合物加入碘化鉀(KI，MW 166.01，7.3g，43.6mmol)的H2O(10cm3)溶液。將混合物攪拌另外12小時(在室溫)。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(4×250cm3)和四氫呋喃(THF)(100cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)的HCl水溶液(450cm3，pH 2)中。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，100g，1.73mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(9.1g)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例4使用pH調節(jié)并分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(約5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(25cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時(最終pH 4.02，18℃)。將反應混合物的pH用NaOH水溶液(10％)調節(jié)至6.0(8.6℃)，同時保持溫度低于10℃。將混合物在室溫攪拌另外16小時。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(4×250cm3)和四氫呋喃(THF)(100cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)的HCl水溶液(450cm3，pH 2)中。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，100g，1.73mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(30％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例5
使用pH調節(jié)、無需中間體分離的亞甲藍(MTC)2-罐合成向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(約5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(25cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌1小時(最終pH 4.51)。將反應混合物的pH用NaOH水溶液(10％)調節(jié)至6.02(8.6℃)，同時保持溫度低于10℃。將混合物在該溫度(8.6℃)攪拌另外10分鐘，然后用10％HCl水溶液再調節(jié)pH至3.80。加入硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW249.7，2.06g，8.25mmol)。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至65℃。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，120g，2.07mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(7.48g，29％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例6使用連二亞硫酸鈉、無需中間體分離的亞甲藍(MTC)2-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(約5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(25cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌1小時。將濾液用連二亞硫酸鈉(Na2S2O4，MW 174.11，～83％，9.2g，43.9mmol)的水(10cm3)溶液處理。將混合物在～5℃攪拌10分鐘(最終pH＝3.05)。將pH用氫氧化鈉水溶液(NaOH，10％)調節(jié)至3.85。加入硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW249.7，2.06g，8.25mmol)。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至65℃。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，120g，2.07mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(7.48g，29％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例7使用連二亞硫酸鹽并分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，20g，0.165mol)和水(100cm3)，形成不均勻混合物。將混合物冷卻至～5℃。歷經(jīng)10-15分鐘向經(jīng)過冷卻的混合物加入HCl(37％，44cm3)。歷經(jīng)20-30分鐘向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，12.6g，0.183mol)的水(100cm3)溶液。將所得懸液在低溫(～5℃)攪拌1小時。維持混合物在～5℃，歷經(jīng)5-10分鐘加入HCl(37％，44cm3)。攪拌另外5分鐘后，歷經(jīng)15-20分鐘加入鐵屑(Fe，MW 55.85，22.0g，0.40mol)，目的是在加入期間維持反應溫度低于30℃。將混合物在～10℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物。將固體殘余物用水(20cm3)洗滌，收集濾液。
將濾液在10-15分鐘內冷卻至大約5℃。將濾液用一次性快速加入的硫代硫酸鈉(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，45.0g，0.181mol)的水(50cm3)溶液處理。歷經(jīng)40分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，20.0g，67.1mmol)的水(80cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后立即向該冷卻的溶液一次性加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW121.2，20g，0.165mol)、水(20cm3)與H2SO4(98％，16g)的冷卻(～5℃)均勻溶液。(在加入之前溶液的制備將N，N-二甲基苯胺和水在冰浴中冷卻至大約5℃，然后歷經(jīng)15-25分鐘緩慢加入濃硫酸，目的是防止放熱反應的熱失控)。然后，歷經(jīng)90分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW298.0，52.0g，0.174mmol)的水(140cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時。向混合物一次性快速加入連二亞硫酸鈉(Na2S2O4，MW 174.1，15.2g，87.2mmol)的H2O(20cm3)溶液。將混合物攪拌另外10分鐘(在約5℃)。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(2×250cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到HCl水溶液(900cm3，pH 2)中，形成懸液。一次性快速加入硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，4.12g，16.5mmol)。歷經(jīng)15-20分鐘增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物歷經(jīng)30分鐘冷卻至室溫，過濾混合物。(在可供替代的實例中，在約60℃過濾混合物；不過，濾液可能在減壓真空下暴沸)。將殘余物用水洗滌(2×200cm3)。收集濾液。將濾液歷經(jīng)25-30分鐘加熱至65℃。將(熱)濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，200g，3.45mol)處理，歷經(jīng)3.5小時冷卻至22℃。在約2.5小時后和約40℃先觀察到結晶性產物。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(在這種規(guī)模上18-24g或35％；在5L規(guī)模上60-65g或＞30％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例8分離中間體的亞甲藍(MTC)3-罐合成法向圓底燒瓶(RBF)加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(100cm3)和HCl(37％，22cm3)。將混合物冷卻至～5℃。向該混合物滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW 69.0，6.3g，90.8mmol)的水(50cm3)溶液。將所得懸液在低溫(5-10℃)攪拌1小時。將混合物冷卻至大約5℃。一次性加入鐵屑(Fe，MW 55.85，11.0g，197mmol)和HCl(37％，22cm3)。將混合物在低于30℃的溫度攪拌2小時。過濾混合物，收集濾液。
將濾液冷卻至大約5℃。將濾液用硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.2，22.52g，90.75mmol)的水(25cm3)溶液處理。歷經(jīng)20分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，10.0g，33.6mmol)的水(20cm3)溶液。然后將溶液在低溫(約5℃)攪拌1小時。然后向該冷卻的溶液加入N，N-二甲基苯胺(C6H5N(CH3)2，MW 121.2，10g，82.15mmol)、水(10cm3)與H2SO4(98％，8g)的均勻溶液。然后，歷經(jīng)25分鐘滴加重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.0，26.15g，87.7mmol)的水(35cm3)溶液。將混合物在大約5℃攪拌2小時。過濾所得綠色-褐色懸液。將殘余物用水(4×250cm3)和四氫呋喃(THF)(100cm3)洗滌，得到綠色固體。使固體風干過夜。
將固體加入到硫酸銅(II)五水合物(CuSO4-5H2O，MW 249.7，2.06g，8.25mmol)的HCl水溶液(455cm3，pH 2)中。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌1小時。生成深藍色。將混合物冷卻至室溫。過濾混合物。將殘余物用水洗滌(4×100cm3)。收集濾液。將濾液用氯化鈉(NaCl，MW 57.96，100g，1.73mol)處理。攪拌混合物直至深藍色消失。過濾混合物，得到粗的亞甲藍(MTC)，為固體(15.3g，58％)。
對粗產物可選地進行進一步處理(例如用硫化鈉等)，如實施例9至13所述，然后可選地(進一步)經(jīng)過重結晶純化，如實施例14和15所述。
實施例9用硫化鈉處理粗產物在65℃，將粗MTC產物(MW 373.90，4.5g，～12.0mmol)完全溶于H2O(125cm3)。將該溶液冷卻至室溫。過濾澄清該冷卻的溶液，以確保完全溶解。將該溶液用硫化鈉(Na2S，MW 78.04，＞60％，200mg，1.54mmol，0.1當量)的H2O(10cm3)溶液處理。將所得混合物攪拌10分鐘。真空過濾混合物。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，16g，0.276mol)，同時攪拌。真空過濾收集所得沉淀。
實施例10用硫化鈉處理粗產物在60℃，將粗MTC產物(MW 373.90，5g，～13.3mmol)完全溶于H2O(230cm3)。將該溶液冷卻至室溫。將該溶液用硫化鈉(Na2S，MW 78.04，＞60％，135mg，～1.00mmol，～0.07當量)的H2O(20cm3)溶液處理。將所得混合物攪拌15分鐘。真空過濾混合物。收集濾液。濾液的pH為10.5±0.5。將濾液用二氯甲烷(DCM)洗滌(5×100cm3)。將經(jīng)過洗滌的濾液的pH從～9.5-10.2調節(jié)至5.0。然后將溶液加熱至60℃。向(熱)溶液緩慢加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，200g，3.45mol)。(必須加以小心，因為殘留的DCM可能導致溶液暴沸)。緩慢冷卻(超過3.5小時)，導致亞甲藍(MTC)以高度結晶形式沉淀。真空過濾收集沉淀，在60℃烘箱中干燥。
實施例11
用二甲基二硫代氨基甲酸鈉鹽處理粗產物在65℃，將粗MTC產物(MW 373.90，4.5g，～12.0mmol)完全溶于H2O(125cm3)。將該溶液冷卻至室溫。過濾澄清該冷卻的溶液，以確保完全溶解。將該溶液用二甲基二硫代氨基甲酸鈉鹽((CH3)2NCS2Na，MW 143.21，550mg，3.84mmol，0.1當量)的H2O(10cm3)溶液處理。將所得混合物攪拌10分鐘。真空過濾混合物。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，16g，0.276mol)，同時攪拌。真空過濾收集所得沉淀。
實施例12用碳酸鈉處理粗產物在65℃，將粗MTC產物(MW 373.90，4.5g，～12.0mmol)完全溶于H2O(125cm3)。將該溶液冷卻至室溫。過濾澄清該冷卻的溶液，以確保完全溶解。將該溶液用碳酸鈉(Na2CO3，MW 105.99，163mg，0.154mmol，0.1當量)的H2O(10cm3)溶液處理。將所得混合物攪拌10分鐘。真空過濾混合物。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，16g，0.276mol)，同時攪拌。真空過濾收集所得沉淀。
實施例13用EDTA二鈉鹽處理粗產物將粗MTC產物(MW 373.90，10.0g，～26.7mmol)完全溶于H2O(270cm3)。加入乙二胺四乙酸(EDTA)二鈉鹽二水合物(MW 372.24，1g，2.68mmol，0.1當量)。將混合物在65℃攪拌大約1小時。真空過濾混合物。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，16g，0.276mol，10當量)，同時攪拌。真空過濾收集所得沉淀。
實施例14冷酸性重結晶法重結晶在65℃，將粗MTC產物或經(jīng)過處理的粗MTC產物(MW 373.90，20g，～53.4mmol)溶于H2O(1700cm3)。使混合物冷卻至22℃。用HCl水溶液調節(jié)pH至pH 1，生成懸液，過濾。真空過濾收集所得高度結晶性產物，在75℃烘箱中干燥16小時。
實施例15熱鹽析法重結晶在65℃，將粗MTC產物或經(jīng)過處理的粗MTC產物(MW 373.90，20g，～53.4mmol)溶于H2O(1700cm3)。加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，200g，3.45mol)。歷經(jīng)3.5小時使混合物緩慢冷卻至22℃。真空過濾收集所得高度結晶性產物，在75℃烘箱中干燥16小時。
實施例16使用THF/H2O重結晶在65℃，將粗MTC產物或經(jīng)過處理的粗MTC產物(MW 373.90，10g，～26.7mmol)溶于H2O(200cm3)。將溶液冷卻至大約22℃。加入四氫呋喃(THF)(40cm3)。在冰浴中歷經(jīng)若干小時使溶液緩慢冷卻至大約5℃。真空過濾收集所得高度結晶性產物，在100℃烘箱中干燥2小時。
實施例17亞甲藍(MTC)的合成、處理和重結晶將N，N-二甲基苯胺(20.0g，165mmol)置于反應容器[V1]中，攪拌。歷經(jīng)1分鐘向該容器一次性加入H2O(200cm3)，利用冰/水浴歷經(jīng)15分鐘(±5分鐘)將該不均勻混合物冷卻至5℃(±2℃)。歷經(jīng)5分鐘(±2分鐘)加入37％鹽酸(44cm3)，可觀察到溫度從4℃上升至8℃(±2℃)。(注意放熱反應)。維持反應容器在5℃(±2℃)達另外5分鐘(±2分鐘)，以確保完全均勻的混合物。該過程中全程持續(xù)攪拌。
單獨制備NaNO2溶液。歷經(jīng)1分鐘將NaNO2(12.6g，182.6mmol)快速加入到含有攪拌著的H2O(100cm3)的單獨燒瓶中。所致溶解過程是吸熱的，觀察到溫度從20℃降至17℃(±2℃)。完全溶解花費5分鐘(±2分鐘)。總體積大約110cm3。
歷經(jīng)20分鐘(±5分鐘)向反應容器[V1]緩慢滴加亞硝酸鈉溶液，在加入期間觀察到反應溫度從5℃上升至9℃。(注意放熱反應)。一旦加入開始，即觀察到橙色。將反應混合物攪拌另外60分鐘(±5分鐘)，同時利用冰/水浴維持溫度在5℃(±2℃)。在反應的該階段中，觀察到橙色溶液含有淺色沉淀。也生成少量泡沫。
歷經(jīng)5分鐘(±2分鐘)向反應混合物[V1]加入37％鹽酸(44cm3)，可觀察到反應溫度從5℃上升至8℃。(注意放熱反應)。一旦加入完全，將反應混合物攪拌另外5分鐘(±2分鐘)。歷經(jīng)15分鐘(±5分鐘)向反應容器加入大約2g每份的鐵屑(22.0g，0.394mol)。在鐵加入期間觀察到溫度從8℃上升至12℃。(注意放熱反應)(注意生成橙色煙霧；放出氣體)。將反應混合物攪拌另外120分鐘(±10分鐘)，同時利用冰/水浴維持反應溫度大約10℃(±2℃)。
歷經(jīng)5分鐘(±2分鐘)通過硅藻土真空過濾收集過量鐵屑，過濾漏斗中的剩余固體用H2O(20cm3)洗滌。
保留濾液(澄清褐色液體)，含有所需的N，N-二甲基-對-苯二胺二鹽酸鹽。濾液的總體積為大約400cm3。在這階段，溶液在20℃的pH為2.59。在反應全程利用紫外分光光度法監(jiān)測溶液，目的是確認反應完全和計算N，N-二甲基-對-苯二胺的最終濃度。典型的轉化率為82％±2％。
將濾液置于另一反應容器[V2]中，利用冰/水浴歷經(jīng)15分鐘(±5分鐘)冷卻至5℃(±2℃)。
單獨制備Na2S2O3-5H2O溶液。歷經(jīng)1分鐘向攪拌著的H2O(50cm3)一次性加入Na2S2O3-5H2O(45.0g，181.4mmol)。所致溶解是吸熱的，觀察到溫度從22℃下降至10℃。然后將混合物攪拌15分鐘(±5分鐘)，以確保完全溶解。總體積為76cm3。
歷經(jīng)1分鐘向[V2]中的反應混合物一次性加入Na2S2O3-5H2O溶液。將反應混合物攪拌另外5分鐘(±2分鐘)，同時維持反應溫度在5℃(±2℃)。單獨制備Na2Cr2O7-2H2O溶液。歷經(jīng)1分鐘向攪拌著的H2O(80cm3)一次性加入Na2Cr2O7-2H2O(20.0g，67.2mmol)。所致溶解是吸熱的，溫度從22℃下降至15℃。然后將混合物攪拌15分鐘(±5分鐘)，以確保完全溶解。歷經(jīng)30分鐘(±5分鐘)向[V2]中的反應混合物緩慢加入Na2Cr2O7-2H2O溶液，目的是維持反應溫度為5℃至8℃(±2℃)。(注意放熱反應)。然后將反應混合物攪拌60分鐘，同時利用冰/水浴維持反應溫度在5℃(±2℃)。
單獨制備N，N-二甲基苯胺溶液。歷經(jīng)1分鐘向含有攪拌著的H2O(20cm3)的燒瓶一次性加入N，N-二甲基苯胺(20.0g，165mmol)。歷經(jīng)15分鐘(±5分鐘)將不均勻混合物用冰/水浴冷卻至5℃(±2℃)，歷經(jīng)25分鐘(±5分鐘)緩慢加入濃(98％)硫酸(16.0g)，以防止溫度迅速上升。觀察到溫度從3℃上升至21℃。(注意放熱反應)。酸加入完全后，將混合物攪拌另外10分鐘(±5分鐘)，以確保完全均勻的混合物。維持該混合物在5℃(±2℃)，直至加入到主反應容器[V2]中?？傮w積為大約48cm3。
歷經(jīng)1分鐘向[V2]中的反應混合物一次性加入在5℃(±2℃)的冷卻酸化含水N，N-二甲基苯胺混合物。然后將反應混合物攪拌另外5分鐘(±2分鐘)，同時維持在5℃(±2℃)。觀察到這次向主反應混合物的加入操作沒有溫度變化。
單獨制備Na2Cr2O7-2H2O溶液。歷經(jīng)1分鐘向含有攪拌著的H2O(140cm3)的燒瓶加入Na2Cr2O7-2H2O(52.0g，174.4mmol)。歷經(jīng)90分鐘(±2分鐘)向[V2]中的反應混合物滴加Na2Cr2O7-2H2O溶液，導致反應中的溫度從5℃上升至10℃(±2℃)。(注意放熱反應)。在加入Na2Cr2O7-2H2O溶液后生成綠色沉淀。將反應混合物攪拌120分鐘，同時維持在5℃(±2℃)。反應混合物現(xiàn)在近似于深綠色漿液。Bindschedler Green硫代磺酸鹽是這階段溶液中的綠色沉淀。此時監(jiān)測廢棄的排放液(濾液)，以測定鉻(VI)的水平。在高氯酸和硫酸存在下用硫酸鐵(II)銨(0.1M)滴定，可以計算Cr(VI)的水平，以便適當處理排放液。
單獨制備Na2S2O4溶液。歷經(jīng)1分鐘向含有攪拌著的H2O(20cm3)的燒瓶一次性加入Na2S2O4(15.2g，87.2mmol)。將該混合物攪拌另外30分鐘(±5分鐘)，以確保完全溶解。
歷經(jīng)1分鐘向反應混合物[V2]一次性加入Na2S2O4溶液，在此期間觀察到?jīng)]有溫度變化。這次加入完全后，將反應混合物攪拌5分鐘(±2分鐘)。
然后歷經(jīng)30分鐘(±5分鐘)在真空下通過布氏漏斗過濾[V2]中的反應混合物。從過濾漏斗中除去固體，置于加入有新鮮水(250cm3)的新容器中。將該混合物劇烈攪拌15分鐘，過濾。再次從過濾漏斗中除去固體，置于含有新鮮水(250cm3)的單獨容器中，攪拌，過濾。棄去所有洗液。
將在過濾漏斗中收集的固體Bindschedler Green硫代磺酸鹽打碎成小塊，置于新的潔凈的反應容器[V3]中。
單獨用5cm3(±1cm3)5M鹽酸調節(jié)H2O(900cm3)的pH至pH 2.0(±0.2)。然后歷經(jīng)1分鐘向含有Bindschedler Green硫代磺酸鹽的反應容器[V3]加入這種經(jīng)過酸化的水。然后攪拌該容器[V3]的內容物。將Bindschedler Green硫代磺酸鹽懸浮在酸化水[V3]中。歷經(jīng)1分鐘向該懸液[V3]一次性加入CuSO4.5H2O(4.0g，16.0mmol)。在這種規(guī)模上觀察到?jīng)]有放熱反應。然后歷經(jīng)25分鐘(±5分鐘)將反應容器[V3]加熱至85℃(±2℃)。首先在40℃(±2℃)觀察到藍色。反應容器[V3]一旦達到85℃(±2℃)，繼續(xù)在該溫度攪拌60分鐘。然后歷經(jīng)20分鐘(±5分鐘)將容器[V3]冷卻至60℃(±2℃)，歷經(jīng)20分鐘(±5分鐘)在真空下通過布氏漏斗過濾內容物。然后將固體用新鮮的水(200cm3)洗滌。安全地棄去固體廢氣物。因為在10g規(guī)模上觀察到大約68g廢棄固體(固體廢棄物的干重)，預計有大約146g廢棄固體。合并水洗液和濾液，以備純化。濾液和洗液含有所需的MTC溶液。
歷經(jīng)25分鐘(±5分鐘)將含有MTC的深藍色含水濾液加熱至65℃(±2℃)，歷經(jīng)10分鐘(±2分鐘)加入氯化鈉(200g，342mmol)。歷經(jīng)360分鐘(±5分鐘)將溶液冷卻至25℃(±2℃)，得到產物，為藍綠色固體。(總粗產物質量24.1g，大約40％)。
作為替代選擇歷經(jīng)10分鐘(±2分鐘)向當前為25℃的含有MTC的深藍色含水濾液加入鹽酸(15cm3，5M)，目的是達到pH 1；這形成懸液。歷經(jīng)25分鐘(±5分鐘)將懸液加熱至65℃(±2℃)，歷經(jīng)360分鐘(±5分鐘)冷卻至20℃(±2℃)，得到產物，為藍綠色固體。(總粗產物質量24.1g，大約40％)。即使這種相對粗的產物通常也具有比商業(yè)上可獲得的MTC更低的金屬含量。
作為替代選擇然后緩慢加入鹽酸(1M)至達到pH 1，使MTC從溶液中結晶出來。過濾收集固體MTC。加入NaCl可以回收濾液中的任何殘留MTC。
然后對產物進行處理和有機萃取。
將MTC(5g，從上述工藝得到)置于含有水(230cm3)的容器中，歷經(jīng)20分鐘(±5分鐘)加熱至65℃(±5℃)，同時攪拌。繼續(xù)在該溫度攪拌1小時(±10分鐘)，然后歷經(jīng)30分鐘(±5分鐘)將反應混合物冷卻至10℃(±2℃)。
單獨制備Na2S溶液。歷經(jīng)10分鐘(±5分鐘)將硫化鈉(135mg)完全溶于水(20cm3)，同時攪拌。(硫化鈉具有強烈的令人厭惡的氣味)。
立即將在10℃(±2℃)的冷卻MTC溶液用所制備的硫化鈉溶液一次性處理。將所合并的溶液攪拌15分鐘(±5分鐘)，同時維持溫度為10℃(±2℃)，然后過濾除去所得沉淀。(這除去所絡合的金屬)。無金屬的MTC現(xiàn)在存在于濾液中的溶液中。
MTC濾液的pH為大約10.8，如果不是，用Na2S水溶液調節(jié)pH為大約10.8。將10℃(±2℃)的冷MTC溶液置于反應容器中，該容器裝配有與帶槳的軸連接的液上機械攪拌器以及燒瓶底部的排放龍頭。一旦MTC溶液(濾液)處于容器中，也向同一容器加入二氯甲烷(50cm3)(注意不可燃，揮發(fā)性)，將不均勻的混合物攪拌10分鐘。(二氯甲烷在水中不可混溶，在含有MTC的水層下形成單獨的一層)。一旦從含MTC水層分離，排放下部二氯甲烷層。(界面是不可能看到的；不過，DCM層是紫色，一旦從龍頭中出來，在其與深藍色/黑色含MTC水層之間可以進行明顯的區(qū)分)。這種二氯甲烷加入、10分鐘攪拌和排放下層重復四次，在這種萃取過程全程維持溫度在10℃(±2℃)。(用DCM除去天青B)。二氯甲烷的總體積為250cm3。
深藍色頂部MTC水層現(xiàn)在用10％鹽酸調節(jié)pH從9.9到5.0。然后歷經(jīng)20分鐘(±5分鐘)將MTC溶液加熱至65℃(±5℃)，同時攪拌。向MTC溶液加入氯化鈉(42g)，立即繼之以歷經(jīng)360分鐘(±5分鐘)冷卻至25℃(±2℃)。無金屬的高純MTC從溶液中沉淀出來，過濾回收，得到藍綠色固體(4.7-4.9g，96％±2％)。
作為替代選擇歷經(jīng)10分鐘(±2分鐘)向深藍色頂部MTC水層加入鹽酸(15cm3，5M)，目的是達到pH 1；這形成懸液。歷經(jīng)25分鐘(±5分鐘)將懸液加熱至65℃(±2℃)，歷經(jīng)360分鐘(±5分鐘)冷卻至20℃(±2℃)，得到無金屬的高純MTC，為藍綠色固體。
作為替代選擇調節(jié)深藍色頂部MTC水層的pH在pH 3.5-4.5之間，使溫度上升至25℃。然后緩慢加入鹽酸(1M)以達到pH 1，使MTC從溶液中結晶出來。過濾收集固體MTC，得到無金屬的高純MTC，為藍綠色固體。加入NaCl可以回收濾液中任何殘留的MTC。
利用實施例1所述方法制備MTC樣品。然后利用實施例17所述冷酸重結晶結晶出粗產物(CM-pd-378)。產物然后進一步經(jīng)過有機萃取和25℃HCl重結晶純化，也如實施例17所述。這得到高度純的MTC，基于HPLC分析的有機純度為98.53％。純度數(shù)據(jù)總結在下表中。

注MedexTM從Medex Medical Export Co.Ltd.獲得，供對比。
CM-pd-378按照實施例1制備的粗MTC，然后從H2O/HCl(pH 1)中沉淀；T＝25℃。
CM-pd-378b從粗MTC制備的純MTC(將CM-pd-378用Na2S處理，在10℃用DCM處理/洗滌/萃取，然后使用HCl(pH 1)使MTC從水層中重結晶；T＝10-25℃)。
實施例18使用硫化鈉和氯化鐵(III)的Ethylthioninium Chloride(ETC)合成法將N，N-二乙基-對-苯二胺(H2NC6H4N(CH2CH3)2，MW 164.25，40g，244mmol)溶于二乙醚(200cm3)。加入鹽酸(40cm3，37％)。旋轉蒸發(fā)濃縮所得溶液，得到N，N-二乙基-對-苯二胺二鹽酸鹽，為淺褐色固體(57.76g，100％)。δH(250 MHz；D2O)7.68(2H，m，ArH)，3.45(4H，q，7.25，NCH2)，1.19(6H，t，7.25，CH3)。
將N，N-二乙基-對-苯二胺二鹽酸鹽(H2NC6H4N(CH2CH3)2-2HCl，MW237.17，57.76g，244mmol)溶于水(1200cm3)。使用10％HCl水溶液調節(jié)pH至pH 1.6。生成粉紅色。加入硫化鈉(Na2S，MW 78.04，32g，＞60％，244mmol)。生成淺黃色溶液，含有綠色沉淀。向混合物加入氯化鐵(III)六水合物(FeCl3-6H2O，MW 270.30，98.75g，365mmol)的水(400cm3)溶液。顏色立即變?yōu)樗{色。然后使混合物充氣1小時。向混合物加入第二份氯化鐵(III)六水合物(FeCl3-6H2O，MW 270.30，98.75g，365mmol)的水(400cm3)溶液。將溶液冷卻至5℃。過濾混合物。將殘余物用水洗滌。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，400g，6.9mol)。將混合物攪拌10分鐘。隨著有沉淀生成，顏色變?yōu)榧t色/紫色。過濾混合物，收集固體殘余物。將固體溶于二氯甲烷(CH2Cl2，1000cm3)和甲醇(CH3OH，100cm3)，經(jīng)硫酸鎂(MgSO4)干燥。過濾混合物，濃縮濾液，得到產物Ethylthioninium Chloride(ETC)(MW 375.96，4.28g，11.4mmol，9.3％)，為綠色固體。
δH(250MHz；D2O)7.35(2H，d，ArH)，7.04(2H，d，ArH)，6.86(2H，s，ArH)，3.45(8H，q，7.25，NCH2)，1.19(12H，t，7.25，CH3).
可以進行快速柱色譜，目的是除去殘留的氯化鐵，例如使用10％甲醇∶90％二氯甲烷洗脫液和二氧化硅40-63μm 60A。
實施例19使用硫化鈉和氯化鐵(III)的1，9-二乙基亞甲藍(DEMTC)合成法向100cm3圓底燒瓶加入3-乙基苯胺(H2NC6H4CH2CH3，MW 121.18，10g，82.5mmol)、乙醇(15cm3)和碳酸鈉(Na2CO3，MW 105.99，11.81g，111.4mmol)。滴加甲基碘(CH3I，MW 141.94，31.63g，222mmol)。然后將混合物在45℃加熱10小時。然后將混合物冷卻至室溫。加入水(100cm3)。將混合物萃取到二乙醚中(3×100cm3)，萃取液經(jīng)硫酸鎂(MgSO4)干燥。過濾混合物，濃縮濾液，得到產物N，N-二甲基-間-乙基苯胺((CH3)2NC6H4CH2CH3，MW 149.23，4.68g，31.3mmol，38％)，為淺黃色油。
δH(250MHz；CDCl3)7.22(1H，t，7.75，ArH)，6.63(3H，m，ArH)，2.97(6H，s，NCH3)，2.63(2H，q，7.5，CH2)，1.27(3H，t，7.5，CH3)；δc(62.9MHz；CDCl3)15.8(CH3)，29.5(NCH2)，40.8(NCH3)，110.3(ArC)，112.4(ArC)，116.5(ArC)，129.1(ArC)，145.3(ArC)，150.9(ArC).
向250cm3圓底燒瓶加入N，N-二甲基-間-乙基苯胺((CH3)2NC6H4CH2CH3，MW 149.23，4.68g，31.3mmol)、水(100cm3)和鹽酸(HCl，8.5cm3，37％)。將溶液冷卻至5℃。然后滴加亞硝酸鈉(NaNO2，MW69.0，2.46g，35.7mmol)的水(80cm3)溶液。將混合物在室溫攪拌3小時。加入鐵屑(Fe，MW 55.85，5.24g，94mmol)和鹽酸(HCl，8.5cm3，37％)。將混合物在室溫攪拌3小時。過濾混合物，收集濾液。將濾液的pH用碳酸氫鈉(NaHCO3)溶液調節(jié)至pH 7，萃取到乙酸乙酯中(3×50cm3)。合并萃取液，經(jīng)硫酸鎂(MgSO4)干燥。過濾混合物，濃縮濾液，得到褐色的油。將該油溶于二乙醚/乙醇(1∶1)(175cm3)。加入鹽酸(HCl，5cm3，37％)。過濾溶液，得到產物N，N-二甲基-間-乙基-對-苯二胺二鹽酸鹽((CH3)2NC6H4(CH2CH3)NH2-2HCl，MW 237.17，4.44g，1.87mmol，60％)，為淺褐色固體。
δH(250MHz；D2O)7.66(1H，s，ArH)，7.56(2H，s，ArH)，3.29(6H，s，NCH3)，2.74(2H，q，7.5，CH2)，1.25(3H，t，7.5，CH3)；δc(62.9 MHz；CDCl3)15.5(CH3)25.6(NCH2)，48.9(NCH3)，122.1(ArC)，124.6(ArC)，128.1(ArC)，132.6(ArC)，143.3(ArC)，144.9(ArC).
將N，N-二甲基-間-乙基-對-苯二胺二鹽酸鹽((CH3)2NC6H4(CH2CH3)NH2-2HCl，MW 237.17，1.3g，5.5mmol)溶于水(50cm3)。用10％HCl水溶液調節(jié)pH至pH 1.6。生成粉紅色。逐份加入硫化鈉(Na2S，MW 78.04，0.71g，＞60％，5.5mmol)。向混合物加入氯化鐵(III)六水合物(FeCl3-6H2O，MW 270.30，2.23g，8.2mmol)的水(50cm3)溶液。顏色立即變?yōu)樽仙?。然后使混合物充?小時。向混合物加入第二份氯化鐵(III)六水合物(FeCl3-6H2O，MW 270.30，2.23g，8.2mmol)的水(50cm3)溶液。將溶液冷卻至5℃。過濾混合物。將殘余物用水洗滌。收集濾液。向濾液加入氯化鈉(NaCl，MW 57.96，50g，0.86mol)。將混合物攪拌10分鐘。隨著有沉淀生成，顏色變?yōu)榧t色/紫色。過濾混合物，收集固體殘余物。將固體溶于二氯甲烷(CH2Cl2，100cm3)和甲醇(CH3OH，10cm3)，經(jīng)硫酸鎂(MgSO4)干燥。過濾混合物，濃縮濾液，得到產物1，9-二乙基亞甲藍(DEMTC)(MW375.96，0.15g，0.40mmol，15％)，為綠色固體。
δH(250MHz；D2O)6.55(2H，s，ArH)，6.23(2H，s，ArH)，2.92(12H，s，NCH3)，2.56(4H，q，7.5，CH2)，0.99(6H，t，7.5，CH3).
可以進行快速柱色譜，目的是除去殘留的氯化鐵，例如使用10％甲醇90％二氯甲烷洗脫液和二氧化硅40-63μm 60A。
實施例20使用二氧化錳的Ethylthioninium Chloride(ETC)氯化鋅(復鹽)合成法將攪拌著的N，N-二乙基-對-苯二胺((CH3CH2)NC6H4NH2，MW 164.25，5.0g，30.4mmol)在H2O(100cm3)與硫酸(H2SO4，濃，“98％”，1cm3)中的混合物用非還原性氯化鋅溶液(ZnCl2，MW 136.29，7.60g，55mmol，在15cm3H2O中含有Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.00，100mg，0.3mmol)處理，得到紅色反應混合物。
加入Al2(SO4)3.16H2O(5.80g，9.2mmol)的H2O(10cm3)溶液；硫代硫酸鈉五水合物(Na2S2O3-5H2O，MW 248.18，8.0g，32.2mmol)的H2O(10cm3)溶液；和三分之一的重鉻酸鈉二水合物(Na2Cr2O7-2H2O，MW 298.00，8.7g，29.2mmol)的H2O(15cm3)溶液，繼之以溫度迅速上升至40℃。
加入N，N-二乙基苯胺((CH3CH2)2NC6H5，MW 149.24，3.0g，20.1mmol)的濃HCl(4cm3)溶液，繼之以加入其余重鉻酸鈉二水合物溶液。生成深綠色沉淀。迅速增加溫度至75℃。加入活化二氧化錳(MnO2，MW 86.94，3.80g，43.7mmol)的H2O(5cm3)漿液。增加溫度至85℃。將混合物在該溫度攪拌30分鐘。觀察到藍色溶液，含有沉淀。
將混合物冷卻至50℃，緩慢加入濃硫酸(H2SO4，11cm3)。將混合物冷卻至20℃。真空過濾混合物。收集殘余物，用鹽水(飽和氯化鈉水溶液，NaCl)洗滌。在100℃將黑色殘余物重新溶于H2O(250cm3)，冷卻至室溫，真空過濾除去不溶物。將濾液用氯化鋅(ZnCl2，MW 136.28，4g，29mmol)和氯化鈉(NaCl，MW 58.44，23g，0.4mol)處理，在冰箱中放置16小時。真空過濾回收所得沉淀，用鹽水(飽和氯化鈉水溶液，NaCl，30cm3)洗滌，在真空烘箱中干燥3小時，得到產物Ethylthioninium Chloride(ETC)氯化鋅(復鹽)(MW 547.70，5.7g，10mmol，71％)，為銹紅色粉末。
δH(250MHz，D2O)1.20(12H，br t，CH3)，3.50(8H，br q，CH2)，6.80(2H，s，Ph)，7.05(2H，br d，Ph)和7.30(2H，br d，Ph).
實施例21所得產物與Urolene Blue_的金屬對比定量分析對商業(yè)上可獲得的Urolene Blue_樣品以及利用本文所述方法得到的高純度MTC產物樣品進行定量分析。通過N，N-二甲基苯胺的亞硝基化，繼之以亞硝酰還原、硫代磺酸生成、氧化性偶聯(lián)、使用連二亞硫酸鹽的Cr(VI)還原、環(huán)閉合和使用冷NaCl的氯化物鹽生成，得到MTC(“所得產物”)。這得到粗的MTC，進一步經(jīng)過硫化鈉處理、繼之以使用冷NaCl的氯化物鹽生成進行純化。利用感應偶合等離子體-質譜(ICP-MS)進行分析(使用Agilent 7500_儀器，采用和不用反應池模式(H2))。按照標準樣品制備方案制備樣品。使用10ppb銠作為內標。數(shù)據(jù)總結在下表中。

另外，在Urolene Blue_中檢測到、但是在利用本文所述方法所得高純度MTC產物中沒有檢測到下列元素鈧、溴、釔、鈮、鈀、鑭、釹、釤、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥、鉿、鉭、釷。
從數(shù)據(jù)可以看到，Urolene Blue_超出(在有些情況下大大超出)就若干金屬而言的歐洲安全性限度，包括Al、Cr、Fe、Cu，而利用本文所述方法所得高純度MTC產物不僅滿足這些標準，而且具有實質性更低水平的這些和其他金屬。
實施例22所合成和純化的MTC的分析按照本文所述方法合成和純化MTC。分析所得產物的有機和金屬雜質。結果總結在下表中。

注(1)MedexTM從Medex Medical Export Co.Ltd.獲得。
(2)Urolene Blue_(配制成糖衣片的MTC)從Star Pharmaceuticals，F(xiàn)lorida，USA獲得。
(3)NTP是來自National Toxicology Program的MTC樣品。
(4)DJPS12a & DJPS13a是如下所得到的MTCN，N-二甲基苯胺的亞硝基化繼之以亞硝酰還原、硫代磺酸生成、氧化性偶聯(lián)、使用連二亞硫酸鹽的Cr(VI)還原、環(huán)閉合和使用熱NaCl的氯化物鹽生成。這得到粗的MTC，進一步經(jīng)過冷硫化鈉處理、繼之以DCM洗滌、然后冷酸性重結晶進行純化。就樣品DJPS12a和DJPS13a而言，沒有殘留的MTC被NaCl鹽析出來。


注意“＜”表示進行分析當天儀器的檢測限度。
注意，不象商業(yè)產品，按照本文所述方法合成和純化的MTC具有實質性減少的有機雜質水平，金屬水平小于11種EP金屬的EP限度。
實施例23商業(yè)上可獲得的MTC產品的分析一些從商業(yè)來源獲得的MTC產品的純度數(shù)據(jù)如下表所示。即使化學參照物質，盡管是相對有機純的，就金屬而言也是相對不純的，不能滿足歐洲藥典(EP)關于銅和鉻的標準。



注意“＜”表示進行分析當天儀器的檢測限度。
注意，所有商業(yè)產品不能滿足歐洲藥典(EP)關于銅的限度。大多數(shù)不能滿足鉻的標準。很多不能滿足鋁、鋅和鐵的標準。若干不能滿足其他金屬的標準，例如鎳、錫和鉛。很多僅滿足EP關于鐵和錳的限度。UroleneBlue_不能滿足EP關于銅、鉻、鋁和鐵的限度。
另外注意，MedexTM含有在檢測限度以上的碘和溴；Urolene Blue_也含有高水平的鎂、鈦和鍶以及如下元素的水平在檢測限度以上鈾、鈧、溴、釔、鈮、鈀、碘、銫、鑭、鈰、釹、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、銩、鐿、镥、鉿、鉭、鎢和釷。
關于商業(yè)來源MTC樣品的細節(jié)如下表所述。


實施例24膠囊的制備制備包含MTC和適合于藥用的明膠膠囊。
藥物產品為1號藍/藍明膠膠囊，含有綠/藍蠟狀材料，它是活性物質亞甲藍(MTC)在蠟狀懸液中的混合物，以Gelucire 44/14_(月桂酰聚乙二醇-32甘油酯PhEur，USP)作為懸液載體，2％Aerosil 200_(膠體二氧化硅PhEur，USP)作為觸變懸浮劑。
制備三種強度的膠囊，目標強度為30、60和100mg。制備25％MTC(在無水基礎上)、73％Gelucire與2％Aerosil 200的大量混合物，借助填充重量的變化控制劑量，每一劑量的制劑組成是恒定的。

*標稱。
由MW Encap Ltd(也稱為Encap Drug Delivery)，West Lothian，UK按照cGMP制備膠囊。典型的配方如下表所示。

在大約65℃融化Gelucire，在混合容器中保持在65℃。加入MTC(通過600μm篩)和Aerosil 200_，混合直至混合物均勻。施加真空達約15分鐘使混合物脫氣，然后轉移至膠囊填充機的料斗(溫度設置在55℃)。填充硬明膠膠囊(Capsugel)，以頻繁的間隔(大約30分鐘間隔)檢查目標填充重量。然后將膠囊轉移至封裝機。制備膠囊封裝溶液(明膠的純凈水溶液)。在封裝機上封裝膠囊，在線檢查氣泡和不完全的密封。然后使膠囊通過25至30℃的干燥烘箱。
上文已經(jīng)描述了本發(fā)明的原理、優(yōu)選實施方式和操作模式。不過，本發(fā)明不應被解釋為限于所討論的特定實施方式。相反，上述實施方式應被視為闡述性的而非限制性的，應當領會到，本領域技術人員在這些實施方式中可以進行變化，而不背離本文所述本發(fā)明的范圍。
本發(fā)明不限于由附后權利要求所涵蓋的那些實施方式，這些權利要求僅涉及很多優(yōu)選的發(fā)明方面和實施方式中的一些。
參考文獻上文引用一些專利和出版物，目的是更充分地描述和公開發(fā)明和發(fā)明所涉及的技術現(xiàn)狀。下面提供這些參考文獻的完整引用。每一這些參考文獻都全文結合在本文中作為參考，如同每一個別參考文獻被具體和個別結合作為參考。
Badische Anilin-und Soda-Fabrik，1877，“Verfahren Zur DarstellungBlauer Farbstoffe Aus Dimethyl-Anilin Und Anderen TertiarenAromatischen Monaminen，”德國專利No.1886，1877年12月15日公開。
Bernthsen，August，1885a，“Studien in der Methylenblaugruppe，”JustusLiebig’s Annalen der Chemie，Band 230，73-136頁。
Bernthsen，August，1885b，“Studien in der Methylenblaugruppe，”JustusLiebig′s Annalen der Chemie，Band 230，137-211頁。
Bernthsen，1889年8月，“Studien in der Methylenblaugruppe，”JustusLiebig’s Annalen der Chemie，Band 251，1-96頁。
Colour Index，Vol.4(第3版，1971)，4470頁，Entry Number 52015。
Fierz-David and Blangley，1949，“F.Oxazine and Thiazine Dyes，”inFundamental Processes of Dye Chemistry，由Interscience出版(倫敦，UK)，308-314頁。
Guttmann P，Ehrlich P._ber die Wirkung des Methylenblau bei Malaria.Berl Klin Wochenschr 1891；28953-956。
Leventis，N.等人，1997，“Synthesis of Substituted PhenothiazinesAnalogous to Methylene Blue by Electrophilic and Nucleophilic AromaticSubstitutions in Tandem.A Mechanistic PerspectiVe，”Tetrahedron，Vol.53，No.29，10083-10092頁。
Lillie，R.D.等人，1979，“Zinc Chloride Methylene Blue，I.Biological StainHistory，Physical Characteristics and Approximation of Azure B Contentof Commercial Samples，”Stain Technology，Vol.54，No.1，33-39頁。Lohr，W.，Grubhoffer，N.，Sohmer，I.，Wittekind，D.，1975，“The azuredyestheir purification and physiochemical properties.Purification ofAzure B，”Stain Technology，Vol.50(3)，149-156頁。
Marshall，P.N.，Lewis，S.M.，1975a，“The purification of Methylene Blueand Azure B by solvent extraction and crystallisation，”Stain Technology，Vol.50(6)，375-381。
Marshall，P.N.，Lewis，S.M.，1975b，“Metal contaminants in commercialdyes，”Stain Techoology，Vol.50(3)，143-147頁。
Masuya，Hirotomo，1992，“Phenothiazine Derivatives，Their Productionand Use，”歐洲專利公開No 0 510 668 A2，1992年10月28日公開。
Michaelis，L.等人，1940，“Semiquinone Radicals of the Thiazines，”Journalof the Americal Chemical Society，Vol.62，204-211頁。
Rengelshausen，J.，Burhenne，J.，F(xiàn)rohlich，M.，Tayrouz，Y.，Singh，S.K.，Riedel，K.-D.，Muller，O.，Hoppe-Tichy，T.，Haefeli，W.E.，Mikus，G.&Walter-Sack，I.(2004)Pharmacokinetic interaction of chloroquine andmethylene blue combination against malaria.European Journal of ClinicalPharmacology 60，709-715。
Schirmer，H.，Coulibaly，B.，Stich，A.，Scheiwein，M.，Merkle，H.，Eubel，J.，Becker，K.，Becher，H.，M_iler，O.，Zich，T.，Schiek，W.& Kouyaté，B.(2003)Methylene blue as an antimalarial agent.Redox Report 8，272-275。
Wischik，C.M.等人，1996，“Inhibition of Tau-Tau-Association，”公布的國際專利申請(PCT)申請?zhí)朩O 96/30766，1996年10月3日公開。
Wischik，C.M.等人，2002，“Materials and Methods Relating to ProteinAggregation in Neurodegenerative Disease，”公布的國際專利申請(PCT)申請?zhí)朩O 02/055720，2002年7月18日公開。
權利要求
1.合成方法，包括如下順序的步驟氧化性偶聯(lián)(OC)，其中使用是或者包含Cr(VI)的氧化劑將硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4與N，N-二取代的-3-可選被取代的-苯胺5氧化性偶聯(lián)，得到[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6 兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)，其中分離和純化所述[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6；環(huán)閉合(RC)，其中使所述經(jīng)過分離和純化的[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6進行環(huán)閉合，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7 其中每個R1和R9獨立地選自-H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R3NA和R3NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R7NA和R7NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；且X是一個或多個陰離子抗衡離子以達到電中性。
2.根據(jù)權利要求1的合成方法，其中所述氧化性偶聯(lián)(OC)步驟的所述氧化劑是Na2Cr2O7。
3.根據(jù)權利要求1或2的合成方法，其中所述氧化性偶聯(lián)(OC)步驟在酸性條件下進行。
4.根據(jù)權利要求1至3任意一項的合成方法，其中所述分離和純化是過濾。
5.根據(jù)權利要求1至3任意一項的合成方法，其中所述分離和純化是過濾繼之以洗滌。
6.根據(jù)權利要求1至3任意一項的合成方法，其中所述分離和純化是過濾繼之以洗滌和干燥。
7.根據(jù)權利要求1至6任意一項的合成方法，其中所述環(huán)閉合(RC)步驟通過用硫酸Cu(II)處理來實現(xiàn)。
8.根據(jù)權利要求1至7任意一項的合成方法，其中所述環(huán)閉合(RC)步驟在酸性條件下進行。
9.根據(jù)權利要求1至8任意一項的合成方法，進一步包括在所述氧化性偶聯(lián)(OC)步驟之后和所述兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)步驟之前的如下附加步驟Cr(VI)還原(CR)，其中處理氧化性偶聯(lián)(OC)步驟的產物，以轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)。
10.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用還原劑處理。
11.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用連二亞硫酸鹽處理。
12.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用連二亞硫酸鈉處理。
13.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用鏈烷醇處理。
14.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用乙醇處理。
15.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用碘化物處理。
16.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用碘化鈉處理。
17.根據(jù)權利要求9的合成方法，其中轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)的所述處理是用酸或堿處理，以達到pH5.70至6.35。
18.根據(jù)權利要求1至17任意一項的合成方法，進一步包括在所述氧化性偶聯(lián)(OC)步驟之前的如下附加步驟硫代磺酸生成(TSAF)，其中在硫代硫酸鹽存在下氧化N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3，得到所述硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4
19.根據(jù)權利要求18的合成方法，其中所述硫代硫酸鹽是或者包含Na2S2O3。
20.根據(jù)權利要求18或19的合成方法，其中所述硫代磺酸生成(TSAF)步驟中的所述氧化作用是與是或者包含Cr(VI)的氧化劑反應。
21.根據(jù)權利要求18或19的合成方法，其中所述硫代磺酸生成(TSAF)步驟中的所述氧化作用是與是或者包含Na2Cr2O7的氧化劑反應。
22.根據(jù)權利要求18至21任意一項的合成方法，進一步包括在所述硫代磺酸生成(TSAF)步驟之前的如下附加步驟亞硝酰還原(NR)，其中還原N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?，生成所述N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3
23.根據(jù)權利要求22的合成方法，其中所述亞硝酰還原(NR)步驟中的所述還原作用是與是或者包含F(xiàn)e(0)的還原劑反應。
24.根據(jù)權利要求22的方法，其中所述亞硝酰還原(NR)步驟中的所述還原作用是與是或者包含金屬鐵的還原劑反應。
25.根據(jù)權利要求22至24任意一項的合成方法，其中所述亞硝酰還原(NR)步驟中的所述還原作用在酸性條件下進行。
26.根據(jù)權利要求22至25任意一項的合成方法，進一步包括在所述亞硝酰還原(NR)步驟之前的如下附加步驟亞硝基化(NOS)，其中N，N-二取代的-3-可選被取代的苯胺1被4-亞硝基化，得到所述N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝酰苯胺2
27.根據(jù)權利要求26的方法，其中所述亞硝基化作用使用亞硝酸鹽進行。
28.根據(jù)權利要求26的合成方法，其中所述亞硝基化作用使用亞硝酸鈉進行。
29.根據(jù)權利要求26至28任意一項的合成方法，其中所述亞硝基化作用在酸性條件下進行。
30.根據(jù)權利要求1至29任意一項的合成方法，進一步包括在所述環(huán)閉合(RC)步驟之后的如下附加步驟氯化物鹽生成(CSF)，其中所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7與氯化物反應，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8
31.根據(jù)權利要求30的合成方法，其中該氯化物是鹽酸。
32.根據(jù)權利要求31的合成方法，其中氯化物鹽生成(CSF)在相對低的pH0至2進行。
33.根據(jù)權利要求31的合成方法，其中氯化物鹽生成(CSF)在相對低的pH約1進行。
34.根據(jù)權利要求31或32的合成方法，其中氯化物鹽生成(CSF)在相對冷的溫度20至30℃進行。
35.根據(jù)權利要求31或32的合成方法，其中氯化物鹽生成(CSF)在相對冷的溫度約25℃進行。
36.根據(jù)權利要求30的合成方法，其中所述氯化物是氯化鈉。
37.根據(jù)權利要求30至36任意一項的合成方法，進一步包括在所述氯化物鹽生成(CSF)步驟之后的如下附加步驟硫化物處理(ST)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用硫化物處理。
38.根據(jù)權利要求37的合成方法，其中所述硫化物是金屬硫化物。
39.根據(jù)權利要求38的合成方法，其中所述硫化物是硫化鈉。
40.根據(jù)權利要求37至39任意一項的合成方法，其中硫化物處理(ST)在5至15℃的溫度進行。
41.根據(jù)權利要求37至39任意一項的合成方法，其中硫化物處理(ST)在約10℃的溫度進行。
42.根據(jù)權利要求37至41任意一項的合成方法，其中硫化物處理(ST)在pH9至12進行。
43.根據(jù)權利要求37至41任意一項的合成方法，其中硫化物處理(ST)在pH約10.5進行。
44.根據(jù)權利要求37至43任意一項的合成方法，其中所述硫化物處理是用硫化物和氯化物處理。
45.根據(jù)權利要求44的合成方法，其中所述氯化物是氯化鈉。
46.根據(jù)權利要求37至43任意一項的合成方法，其中所述硫化物處理是用硫化物處理，繼之以用有機溶劑洗滌。
47.根據(jù)權利要求37至43任意一項的合成方法，其中所述硫化物處理是用硫化物處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以用氯化物處理。
48.根據(jù)權利要求37至43任意一項的合成方法，其中所述硫化物處理是用硫化物處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以調節(jié)pH至約4.5至約5.5，繼之以用氯化物處理。
49.根據(jù)權利要求46、47或48的合成方法，其中所述有機溶劑選自二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二乙醚、氯苯、石油醚(例如40:60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。
50.根據(jù)權利要求30至36任意一項的合成方法，進一步包括在所述氯化物鹽生成(CSF)步驟之后的如下附加步驟二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理。
51.根據(jù)權利要求50的合成方法，其中所述二甲基二硫代氨基甲酸鹽是二甲基二硫代氨基甲酸鈉。
52.根據(jù)權利要求50或51的合成方法，其中所述二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理是用二甲基二硫代氨基甲酸鹽和氯化物處理。
53.根據(jù)權利要求52的合成方法，其中所述氯化物是氯化鈉。
54.根據(jù)權利要求50至53任意一項的合成方法，其中所述二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理是用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌。
55.根據(jù)權利要求50至53任意一項的合成方法，其中所述二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理是用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以用氯化物處理。
56.根據(jù)權利要求50至53任意一項的合成方法，其中所述二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理是用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以調節(jié)pH至約4.5至約5.5，繼之以用氯化物處理。
57.根據(jù)權利要求54、55或56的合成方法，其中所述有機溶劑選自二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二乙醚、氯苯、石油醚(例如40:60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。
58.根據(jù)權利要求30至36任意一項的合成方法，進一步包括在所述氯化物鹽生成(CSF)步驟之后的如下附加步驟碳酸鹽處理(CT)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用碳酸鹽處理。
59.根據(jù)權利要求58的合成方法，其中所述碳酸鹽是碳酸鈉。
60.根據(jù)權利要求58或59的合成方法，其中所述碳酸鹽處理是用碳酸鹽和氯化物處理。
61.根據(jù)權利要求60的合成方法，其中所述氯化物是氯化鈉。
62.根據(jù)權利要求58至61任意一項的合成方法，其中所述碳酸鹽處理是用碳酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌。
63.根據(jù)權利要求58至61任意一項的合成方法，其中所述碳酸鹽處理是用碳酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以用氯化物處理。
64.根據(jù)權利要求58至61任意一項的合成方法，其中所述碳酸鹽處理是用碳酸鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以調節(jié)pH至約4.5至約5.5，繼之以用氯化物處理。
65.根據(jù)權利要求62、63或64的合成方法，其中所述有機溶劑選自二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二乙醚、氯苯、石油醚(例如40:60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。
66.根據(jù)權利要求30至36任意一項的合成方法，進一步包括在所述氯化物鹽生成(CSF)步驟之后的如下附加步驟乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理。
67.根據(jù)權利要求66的合成方法，其中所述EDTA或EDTA鹽是EDTA二鈉鹽。
68.根據(jù)權利要求66或67的合成方法，其中所述EDTA或EDTA鹽處理是用EDTA或EDTA鹽和氯化物處理。
69.根據(jù)權利要求68的合成方法，其中所述氯化物是氯化鈉。
70.根據(jù)權利要求66至69任意一項的合成方法，其中所述EDTA或EDTA鹽處理是用EDTA或EDTA鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌。
71.根據(jù)權利要求66至69任意一項的合成方法，其中所述EDTA或EDTA鹽處理是用EDTA或EDTA鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以用氯化物處理。
72.根據(jù)權利要求66至69任意一項的合成方法，其中所述EDTA或EDTA鹽處理是用EDTA或EDTA鹽處理，繼之以用有機溶劑洗滌，繼之以調節(jié)pH至約4.5至約5.5，繼之以用氯化物處理。
73.根據(jù)權利要求70、71或72的合成方法，其中所述有機溶劑選自二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二乙醚、氯苯、石油醚(例如40:60)、苯、甲苯和乙酸甲酯。
74.根據(jù)權利要求30至73任意一項的合成方法，進一步包括如下后續(xù)附加步驟有機萃取(OE)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
75.根據(jù)權利要求74的合成方法，其中所述有機溶劑是二氯甲烷(CH2Cl2，DCM)。
76.根據(jù)權利要求74或75的合成方法，其中氯化物鹽8的水溶液或懸液與有機溶劑的體積比為0.5至5。
77.根據(jù)權利要求74至76任意一項的合成方法，其中用有機溶劑處理是用多份有機溶劑等分試樣反復進行。
78.根據(jù)權利要求74至77任意一項的合成方法，其中鹽8的水溶液或懸液的pH為9至12。
79.根據(jù)權利要求74至78任意一項的合成方法，其中用有機溶劑處理在5至15℃的溫度進行。
80.根據(jù)權利要求30至79任意一項的合成方法，進一步包括如下附加最終步驟重結晶(RX)，其中使所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8重結晶。
81.根據(jù)權利要求80的合成方法，其中所述重結晶在相對冷的溫度2至40℃、通過調節(jié)pH至相對低的pH-1至3從水中重結晶。
82.根據(jù)權利要求81的合成方法，其中該相對冷的溫度為10至30℃。
83.根據(jù)權利要求81的合成方法，其中該相對冷的溫度為約25℃。
84.根據(jù)權利要求81至83任意一項的合成方法，其中該相對低的pH為0至2。
85.根據(jù)權利要求81至83任意一項的合成方法，其中該相對低的pH為約1。
86.根據(jù)權利要求81至85任意一項的合成方法，其中歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
87.根據(jù)權利要求81至85任意一項的合成方法，其中歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
88.根據(jù)權利要求80的合成方法，其中所述重結晶在初始升高的溫度、在氯化物存在下從水中重結晶。
89.根據(jù)權利要求80的合成方法，其中所述重結晶在升高的溫度、在四氫呋喃(THF)存在下從水中重結晶。
90.合成方法，包括如下順序的步驟亞硝基化(NOS)，其中N，N-二取代的-3-可選被取代的苯胺1被4-亞硝基化，得到所述N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨? 亞硝酰還原(NR)，其中還原N，N-二取代的-3-可選被取代的-4-亞硝?；桨?，生成所述N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3 硫代磺酸生成(TSAF)，其中在硫代硫酸鹽存在下氧化N，N-二取代的-1，4-二氨基-5-可選被取代的苯3，得到所述硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4 氧化性偶聯(lián)(OC)，其中使用是或者包含Cr(VI)的氧化劑將硫代硫酸S-{2-(氨基)-3-(可選被取代的)-5-(二取代的氨基)-苯基}酯4與N，N-二取代的-3-可選被取代的-苯胺5氧化性偶聯(lián)，得到[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6 Cr(VI)還原(CR)，其中處理氧化性偶聯(lián)(OC)步驟的產物，以轉化殘留Cr(VI)為Cr(III)；兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)，其中分離和純化所述[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6；環(huán)閉合(RC)，其中使所述經(jīng)過分離和純化的[4-{2-(硫代硫酸鹽)-4-(二取代的氨基)-6-(可選被取代的)-苯基-亞氨基}-3-(可選被取代的)-亞環(huán)己-2，5-二烯基]-N，N-二取代的銨6進行環(huán)閉合，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7 氯化物鹽生成(CSF)，其中所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_鹽7與氯化物反應，得到3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8 硫化物處理(ST)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8用硫化物處理；有機萃取(OE)，其中將所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；重結晶(RX)，其中使所述3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8重結晶；其中每個R1和R9獨立地選自-H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R3NA和R3NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R7NA和R7NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；且X是一個或多個陰離子抗衡離子以達到電中性。
91.根據(jù)權利要求90的合成方法，其中所述有機溶劑是二氯甲烷(CH2Cl2，DCM)。
92.根據(jù)權利要求90或91的合成方法，其中所述重結晶在相對冷的溫度10至30℃、通過調節(jié)pH至相對低的pH0至2從水中重結晶。
93.根據(jù)權利要求80至93任意一項的合成方法，其中所述重結晶包括隨后干燥經(jīng)過重結晶的沉淀。
94.純化3，7-雙(二取代的-氨基)-1，9-(可選被取代的)-吩噻嗪-5-_氯化物鹽8的方法，包括選自如下順序的一個或多個步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
95.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理。
96.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理。
97.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下步驟有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
98.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
99.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
100.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
101.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
102.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
103.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
104.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
105.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)；和重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶。
106.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；和選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理。
107.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；和硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理。
108.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
109.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
110.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
111.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟選自如下的處理步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)，其中將所述氯化物鹽8用二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理；碳酸鹽處理(CT)，其中將所述氯化物鹽8用碳酸鹽處理；和乙二胺四乙酸處理(EDTAT)，其中將所述氯化物鹽8用乙二胺四乙酸(EDTA)或EDTA鹽處理；重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
112.根據(jù)權利要求94的純化方法，包括如下順序的步驟硫化物處理(ST)，其中將所述氯化物鹽8用硫化物處理；重結晶(RX)，其中使所述氯化物鹽8重結晶；和有機萃取(OE)，其中將所述氯化物鹽8的水溶液或懸液用有機溶劑處理(例如洗滌)。
113.根據(jù)權利要求94至112任意一項的純化方法，其中所述有機溶劑如果存在的話是二氯甲烷(DCM，CH2Cl2)。
114.根據(jù)權利要求94至113任意一項的純化方法，其中所述重結晶是在相對冷的溫度2至40℃、通過調節(jié)pH至相對低的pH-1至3從水中重結晶。
115.根據(jù)權利要求114的純化方法，其中相對冷的溫度為10至30℃。
116.根據(jù)權利要求114的純化方法，其中相對冷的溫度為約251℃。
117.根據(jù)權利要求114至116任意一項的純化方法，其中相對低的pH為0至2。
118.根據(jù)權利要求114至116任意一項的純化方法，其中相對低的pH為約1。
119.根據(jù)權利要求114至118任意一項的純化方法，其中歷經(jīng)5至30分鐘調節(jié)pH。
120.根據(jù)權利要求114至118任意一項的純化方法，其中歷經(jīng)約10分鐘調節(jié)pH。
121.根據(jù)權利要求94至120任意一項的純化方法，其中所述氯化物鹽8是MTC。
122.根據(jù)權利要求94至120任意一項的純化方法，其中所述氯化物鹽8是最初作為MedexTM提供的MTC。
123.根據(jù)權利要求94至120任意一項的純化方法，其中所述氯化物鹽8是最初作為Urolene Blue_提供的MTC。
124.根據(jù)權利要求94至120任意一項的純化方法，其中所述氯化物鹽8是最初作為根據(jù)權利要求1至93任意一項的合成方法的產物提供的MTC。
125.下式的二氨基吩噻嗪鎓化合物 其中每個R1和R9獨立地選自-H、C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R3NA和R3NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；每個R7NA和R7NB獨立地選自C1-4烷基、C2-4鏈烯基和鹵代C1-4烷基；和X是一個或多個陰離子抗衡離子以獲得電中性；通過根據(jù)權利要求1至93任意一項的合成方法獲得；或通過根據(jù)權利要求94至124任意一項的純化方法獲得。
126.下式的二氨基吩噻嗪鎓化合物(MTC)，通過根據(jù)權利要求1至93任意一項的合成方法獲得，或通過根據(jù)權利要求94至124任意一項的純化方法獲得
127.根據(jù)權利要求125或126的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有大于98％的純度。
128.根據(jù)權利要求125或126的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有大于97％的純度。
129.根據(jù)權利要求125或126的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有大于96％的純度。
130.根據(jù)權利要求125或126的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有大于95％的純度。
131.根據(jù)權利要求125至130任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于2％的天青B雜質。
132.根據(jù)權利要求125至130任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于3％的天青B雜質。
133.根據(jù)權利要求125至130任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于4％的天青B雜質。
134.根據(jù)權利要求125至133任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于0.13％的MBV雜質。
135.根據(jù)權利要求125至133任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于0.14％的MBV雜質。
136.根據(jù)權利要求125至133任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有低于0.15％的MBV雜質。
137.根據(jù)權利要求125至136任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有好于歐洲藥典(EP)限度的元素純度。
138.根據(jù)權利要求125至136任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，具有好于歐洲藥典(EP)限度0.5倍的元素純度。
139.藥物片劑或膠囊，包含20至300mg根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，以及藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
140.藥物片劑或膠囊，包含30至200mg根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，以及藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
141.根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，用于治療人或動物體的方法中。
142.根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，用于治療人或動物體的病毒、細菌或原生動物疾病的方法中。
143.根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，用于治療人或動物體的τ蛋白病、阿爾茨海默氏病(AD)、皮膚癌癥、黑素瘤、丙型肝炎、HIV或西羅尼病毒的方法中。
144.根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物在制備用于治療病毒、細菌或原生動物疾病的藥物中的用途。
145.根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物在制備用于治療τ蛋白病、阿爾茨海默氏病(AD)、皮膚癌癥、黑素瘤、丙型肝炎、HIV或西羅尼病毒的藥物中的用途。
146.治療病毒、細菌或原生動物疾病的方法，包括對所述患者給予治療有效量的根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物。
147.治療患者的τ蛋白病、阿爾茨海默氏病(AD)、皮膚癌癥、黑素瘤、丙型肝炎、HIV或西羅尼病毒的方法，包括對所述患者給予治療有效量的根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物。
148.滅活樣品中病原體的方法，包括向樣品中引入根據(jù)權利要求125至138任意一項的二氨基吩噻嗪鎓化合物，并使樣品暴露于光。
149.根據(jù)權利要求148的方法，其中的樣品是血液或血漿樣品。
全文摘要
本發(fā)明一般涉及化學合成和純化領域，更具體涉及合成和純化某些3，7－二氨基－吩噻嗪－5－嗡化合物(本文稱為“二氨基吩噻嗪嗡化合物”)、包括亞甲藍(MTC)(也稱為亞甲基藍)的方法。在一種實施方式中，該方法包括如下順序的步驟亞硝基化(NOS)；亞硝酰還原(NR)；硫代磺酸生成(TSAF)；氧化性偶聯(lián)(OC)；Cr(VI)還原(CR)；兩性離子中間體的分離和純化(IAPOZI)；環(huán)閉合(RC)；氯化物鹽生成(CSF)；硫化物處理(ST)、二甲基二硫代氨基甲酸鹽處理(DT)、碳酸鹽處理(CT)、乙二胺四乙酸處理(EDTAT)之一；有機萃取(OE)；和重結晶(RX)。本發(fā)明也涉及所得(高純度)化合物、包含它們的組合物(例如片劑、膠囊)和它們在滅活病原體的方法和醫(yī)學治療與診斷方法等中的用途，例如用于τ蛋白病、阿爾茨海默氏病(AD)、皮膚癌癥、黑素瘤、病毒疾病、細菌疾病或原生動物疾病。其中每個R
文檔編號A61P35/00GK101084204SQ200580040090
公開日2007年12月5日 申請日期2005年9月21日 優(yōu)先權日2004年9月23日
發(fā)明者J·M·D·斯托雷, J·P·辛克萊, C·馬沙爾, 陳行云, C·M·維施克 申請人:衛(wèi)思道制藥有限公司