專利名稱：具有hm74a受體活性的黃嘌呤衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及為黃嘌呤衍生物的治療活性化合物，制備所述衍生物的方法，含有所述活性化合物的藥物制劑以及所述化合物在治療、特別是在治療由HM74A受體激活不足(under-activation)所引起的疾病或者受益于激活HM74A受體的疾病中的用途。
血脂異常(dyslipidemia)是用于描述個體脂蛋白異常的統(tǒng)稱。在臨床上，用于治療患有血脂異常以及由此引發(fā)的心血管疾病高危患者的主要化合物類型是斯特汀(statins)、氯貝特類(fibrates)、膽汁酸結合樹脂(bile acid bindingresin)以及煙酸。煙酸(Niacin，維生素B)在臨床上用于治療患有不同形式的血脂異常的患者已超過40余年。煙酸的主要作用模式是通過抑制對激素敏感的甘油三酯脂肪酶(HSL)，使得血漿非酯化脂肪酸(NEFA)減少，進一步降低了肝臟脂肪代謝，從而減少LDL和VLDL(低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白)輸出。據信VLDL水平降低可以降低膽固醇脂轉移蛋白(CETP)活性，導致HDL(高密度脂蛋白)水平升高，這可能是觀察到心血管受益的原因。因此，煙酸對脂蛋白產生了非常令人滿意的改變；降低了VLDL和LDL水平而同時升高了HDL水平。另外還證實煙酸具有調節(jié)疾病的優(yōu)勢，可以減輕動脈粥樣硬化病變的惡化并促進其復原，以及在多個試驗中還減少了引發(fā)心血管事件的次數(shù)。
采用煙酸治療所觀察到的HSL抑制作用是通過細胞內環(huán)磷腺苷(cAMP)減少來調節(jié)，而細胞內環(huán)磷腺苷(cAMP)減少是由G-蛋白介導的腺苷酸環(huán)化酶抑制作用引起的。最近，已經鑒定G-蛋白偶聯(lián)的受體HM74和HM74A是煙酸的受體(PCT專利申請WO02/84298；Wise等人.J Biol Chem.，2003，278(11)，9869-9874)。人HM74A的DNA序列可在Genbank中找到；登錄號AY148884。其它兩篇論文支持了上述發(fā)現(xiàn)(Tunaru等人.Nature Medicine，2003，9(3)，352-255和Soga等人.Biochem Biophys Res Commun.，2003，303(1)364-369)，但是其中所用術語有細微差異。在Tunaru的論文中，所稱人HM74實際上是HM74A，而在Soga的論文中，HM74b就是HM74A。轉染表達HM74A和/或HM74的細胞在曝露于煙酸之后，獲得了引發(fā)GiG-蛋白介導響應的能力。在缺乏HM74A(m-PUMA-G)同系物的小鼠中，煙酸不能降低血漿NEFA水平。
目前我們發(fā)現(xiàn)一類黃嘌呤衍生物，它是煙酸受體HM74A的選擇性激動劑，因而其在治療、預防和抑制由該受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活該受體的疾病中是有益的。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了治療活性的黃嘌呤衍生物以及所述衍生物在治療、特別是在治療由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活該受體的疾病中的用途，所述疾病特別是脂類代謝疾病包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常(mixed dyslipidaemia)，心力衰竭，血膽固醇過多癥(hypercholesteraemia)，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥。本發(fā)明化合物同樣還可以用作冠狀動脈疾病，血栓形成，心絞痛，慢性腎衰竭，周圍血管疾病和中風，以及與II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素耐受性、高脂血癥、神經性厭食癥、肥胖癥有關的心血管適應癥的治療劑。本發(fā)明化合物還可用于治療如下面所述的各種炎性疾病或病癥。
本文所述的各種中間體、制劑、方法以及步驟構成了本發(fā)明另一方面。
發(fā)明詳述根據本發(fā)明一方面，我們提供了選自式(I)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體。
其中R1代表選自下列的基團氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基和-(亞烷基(alk))m-X-(亞烷基)n-Y，其中X代表A、A1、A2或直接的鍵；
A代表選自下列的基團亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-CH2-OC(O)-；A1 代表選自下列的基團-CH2-O-(CH2)q芳基-O-、-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-、-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-、-CH2-NR5-S(O)2-、CH2-S(O)2NR5-、-CH2-C(O)O-、-O-、-NR5-、-S-；A2代表-CH(OH)-；當X為A、A1或A2時，Y代表選自下列的基團雜芳基、雜環(huán)基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-O(CH2)n-芳基、-C(O)O-芳基、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-C1-6鹵代烷基、-C(O)R4、-NR5R7、-C(O)NR5R7、-NR5C(O)R7、-NR5C(O)OR7、-C(O)(CH2)qOR4、鹵素、氰基、-N(R5)C(O)OR7、-OC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-OC(O)R4；當X為A1時，Y選自-O(CH2)n-芳基、-O-雜芳基、-OR5、-OC(O)R5、-NH-芳基、-OC(O)NR5R6，n為選自2、3、4和5的整數(shù)；當X為A1時，Y為-CF3，或當X為A2時，n為選自1、2、3、4和5的整數(shù)；當X為直接的鍵時，Y代表選自下列的基團-C(O)(CH2)qOR5、-C(O)-芳基、-C(O)-雜芳基、-C(O)-雜環(huán)基、-雜芳基、-雜環(huán)基、-芳基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-C1-6鹵代烷基、-鹵素、-氰基、3或4環(huán)稠合體系、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-OR5、-NR5R7、-NCOOR8、-(O)pC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-(O)pC(O)R4；當Y含有環(huán)時，該環(huán)可任選被一個或多個下列基團所取代C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素、-NH2、(CH2)q-NR5R7、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8、-(CH2)q-N(R5)C(O)R8、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6、-(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6、-(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5、-(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8、-CH2-S(O)2N(R5)R6、-C1-6鹵代烷基、-OCF3、-OCH(F)2、-OCH2F、-COOR5、-OR5、-(R8)pCN，-S(O2)R9、-(CH2)n雜芳基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n芳基；R2選自氫；或C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR4、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)pCONR5R6、-OCONR5R7和-NHC(O)OR7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)t環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)t雜環(huán)基、-(CH2)t芳基和-(CH2)t雜芳基；R8選自C1-4烷基；R9選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基、CN；m代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；p代表選自下列的整數(shù)0和1；q代表選自下列的整數(shù)0、1和2；t代表選自下列的整數(shù)1和2；w代表選自下列的整數(shù)2、3和4。
條件是i)當R1代表氫或C1-3烷基時，R2不同于R1；ii)當R1代表乙基，且R3代表CF3時，R2不是CH2-CH＝CH2；和iii)當R1代表甲基，且R3代表CF3時，R2不是異丁基。
在本發(fā)明的一個實施方案中，我們提供了選自式(I)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體 其中
R1代表氫或選自下列的基團C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基、-(CH2)n雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR4、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R7、-(NH)mCONR5R7、-OCONR5R7和-NHCO2R7；R2選自C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR4、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)mCONR5R6、-OCONR5R7和-NHCO2R7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6獨立地選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)p環(huán)烷基、-(CH2)p雜環(huán)基、-(CH2)p芳基和-(CH2)p雜芳基；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3和4；m代表選自下列的整數(shù)0和1；p代表選自下列的整數(shù)1和2。
條件是i)當R1代表H或C1-3烷基時，R2不同于R1；ii)當R1代表乙基，且R3代表CF3時，R2不是CH2-CH＝CH2；和iii)當R1代表甲基，且R3代表CF3時，R2不是異丁基。
本說明書和權利要求書中通篇使用的措辭“含有”和“包括”及其各種變型是指包含在內的意思。也就是說，在上下文允許的情形下，這些措辭意味著可以含有其它沒有明確指明的元素或整數(shù)。
本文所使用的術語“鹵素”或“鹵代”是指氟、氯、溴和碘。
本文所使用的術語“烷基”(當被用作基團或基團中的一部分使用時)是指直鏈或支鏈烴鏈，除非另有限定，是指含有指定數(shù)目的碳原子的直鏈或支鏈烴鏈。例如，C3-C10烷基是指含有至少3個、至多10個碳原子的直鏈或支鏈烴鏈。本文所使用的烷基實例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基和異丙基。
本文所使用的術語“鏈烯基”是指含有指定數(shù)目的碳原子、含一個或多個雙鍵的直鏈或支鏈烴鏈。合適的實例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基、3-己烯基等。
本文所使用的術語“炔基”是指含有指定數(shù)目的碳原子、含一個或多個三鍵的直鏈或支鏈烴鏈。合適的實例包括但不限于乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、1-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基等。
本文所使用的術語‘C1-6鹵代烷基’是指如文中所定義的C1-6烷基，其中至少一個氫原子被鹵素取代。這種基團的實例包括氟代乙基、三氟甲基或三氟乙基等。
本文所使用的術語“環(huán)烷基”是指含有3-6個碳原子、不含雜原子或共軛雙鍵的烴環(huán)。本文所使用的環(huán)烷基的實例包括但不限于環(huán)丙基和環(huán)己基。
本文所使用的術語‘亞環(huán)烷基’是指3-8個碳連接基的飽和的單環(huán)烴環(huán)。這種基團的實例包括亞環(huán)丙基、亞環(huán)丁基、亞環(huán)戊基、亞環(huán)己基、亞環(huán)庚基或亞環(huán)辛基等。
本文所使用的術語‘環(huán)烯基’是指含一個或多個碳-碳雙鍵的3至8個碳原子的不飽和非芳香的單環(huán)烴環(huán)。這種基團的實例包括環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基或環(huán)辛烯基等。
本文所使用的術語‘亞環(huán)烯基’是指含一個或多個碳-碳雙鍵的3至8個碳連接基團的不飽和非芳香的單環(huán)烴環(huán)。這種基團的實例包括亞環(huán)丙烯基、亞環(huán)丁烯基、亞環(huán)戊烯基、亞環(huán)己烯基、亞環(huán)庚烯基或亞環(huán)辛烯基等。
本文所使用的術語″芳基″是指5或6員單環(huán)芳香基團，或稠合的8-10員二環(huán)芳香基團，其中至少一個環(huán)具有共軛的π電子系統(tǒng)，含高達兩個共軛或稠合的環(huán)系?！宸蓟灏ㄌ辑h(huán)芳基和聯(lián)芳基。合適的實例包括但不限于苯基、萘基等。
本文中所使用的術語″雜芳基″是指含有1-3個獨立地選自氧、氮和硫雜原子的5或6員單環(huán)芳族基團或稠合的8-10員二環(huán)芳族基團，其具有至少一個含共軛的π電子系統(tǒng)的環(huán)，含高達兩個共軛或稠合的環(huán)系。這種單環(huán)芳族環(huán)的合適實例包括但不限于噻吩基、呋喃基、吡咯基、三唑基、咪唑基、唑基、噻唑基、二唑基、異噻唑基、異唑基、噻二唑基、吡唑基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基和吡啶基。這種稠合芳族環(huán)的合適實例包括但不限于苯并稠合的芳族環(huán)例如喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、噌啉基、1，5-二氮雜萘基(naphthyridinyl)、吲哚基、吲唑基、吡咯并吡啶基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并二唑基、苯并噻二唑基等。
本文所使用的術語“雜環(huán)基”是指5或6員飽和的環(huán)狀烴基，其含有1至3個獨立地選自氧、氮和硫的雜原子。合適的實例包括但不限于吡咯烷基、嗎啉基、咪唑烷基和哌嗪基。
本文所使用的術語‘3或4環(huán)稠合體系’是指稠合的12-18員三環(huán)或四環(huán)，其含有1至4個N的雜原子，并且其中至少一個環(huán)為芳環(huán)。在環(huán)碳原子上可具有一個或多個任選的氧取代基。這種稠合的芳環(huán)的實例包括咔唑基、苊基、萘噻唑基等。
在本文中，當某基團被稱作被另一基團“取代”或者具有“一個或多個取代基”時，除非明確指出了所述取代基的具體位置，應該理解所述取代基可以存在于該基團的任意位置上。
本文所使用的術語“藥學上可接受的衍生物”是指本發(fā)明化合物的任意藥學上可接受的衍生物，例如鹽、溶劑合物或酯，其在給藥于哺乳動物如人后，能夠(直接或間接地)提供式(I)化合物或其活性代謝物或殘余物。這些衍生物對本領域熟練技術人員來說是顯而易見的，不需要過度的實驗，并且參考Burger’s Medicinal Chemistry And Drug Discovery，5thEdition，Vol 1Principles and Practice的教導，其在此引入作為參考。
本領域普通技術人員應該理解的是，可將本發(fā)明的化合物在化合物的任意功能基團上對其進行修飾以得到其藥學上可接受的衍生物，并且本發(fā)明的化合物可以在不止一個位置上進行上述修飾。
在一個實施方案中，“藥學上可接受的衍生物”是指鹽或溶劑合物。
在本文中，與可包含在向患者給藥的藥物制劑中的成分(活性成分或賦形劑)關聯(lián)使用的術語“藥學上可接受的”，是指在與該藥物制劑中任意其它成分配伍方面可以接受、并且對其接受者無毒的成分。
本文所使用的術語“溶劑合物”是指由溶質(在本發(fā)明中為式(I)化合物、其鹽或其藥學上可接受的衍生物)與溶劑形成的具有可變化學計量的絡合物。滿足本發(fā)明目的的這類溶劑不會干擾所述溶質的生物活性。所用溶劑可以是藥學上可接受的溶劑。適宜的藥學上可接受的溶劑的實例包括水、乙醇和乙酸?？墒褂玫娜軇┑膶嵗撬?，在該情形中，所述溶劑合物可稱作被討論溶質的水合物。
對于藥學應用應該理解，上述“鹽或溶劑合物”可為藥學上可接受的鹽或溶劑合物。然而，其它的鹽或溶劑合物可用于例如式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑合物的制備中。
藥學上可接受的鹽包括Berge，Bighley和Monkhouse，J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中所述的鹽。合適的藥學上可接受的鹽包括由加入堿金屬堿例如堿金屬氫氧化物形成的堿金屬鹽。適宜的堿金屬鹽的實例是鈉鹽或鉀鹽。其它適宜的藥學上可接受的鹽包括堿土金屬鹽，例如鈣鹽或鎂鹽、銨鹽；或與有機堿例如乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺、三乙胺、膽堿和葡甲胺形成的鹽；或者與氨基酸例如精氨酸、賴氨酸和組氨酸形成的鹽。
化合物在治療由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活HM74A受體的疾病中的用途，所述疾病特別是脂類代謝疾病包括血脂異常或高脂蛋白血癥例如糖尿病血脂異常(diabetic dyslipidemia)和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥。還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物同樣也可用作冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、周圍血管疾病和中風，以及與II型糖尿病、I型糖尿病、胰島素耐受性、高脂血癥、神經性厭食癥、肥胖癥有關的心血管適應癥的治療劑。發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物同樣可用作HM74A的激動劑或部分激動劑。
本發(fā)明化合物在治療和緩解諸多脂類代謝疾病癥狀中具有潛在的治療效果，所述疾病包括血脂異常或高脂蛋白血癥例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥。還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物同樣也可用作冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、周圍血管疾病和中風的治療劑。
此外，還據信HM74和HM74A受體與炎癥有關。炎癥代表了對于創(chuàng)傷的一系列血管、細胞和神經響應?？梢詫⒀装Y描述為炎癥細胞例如單核細胞、嗜中性粒細胞和粒性白細胞向組織內的移動。這通常伴隨著內皮屏障作用降低和組織內水腫。與疾病相關的炎癥通常被稱作慢性炎癥，甚至可以持續(xù)終生。這類慢性炎癥可以通過疾病癥狀表現(xiàn)出來。因此，抗炎治療的目的在于減輕慢性炎癥，使得愈合和組織修復的生理步驟得以進行。
本發(fā)明化合物所適用的炎性疾病或病癥的實例包括關節(jié)炎性疾病或病癥，特別是關節(jié)炎(例如類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、假關節(jié)失靈(prostheticjoint failure))、或者胃腸道炎癥(例如潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病、以及其它炎性腸病和胃腸疾病、由感染引起的胃炎和粘膜炎癥、由非甾體消炎藥物引起的腸病)、肺部發(fā)炎(例如成人呼吸窘迫綜合征、哮喘、囊性纖維化病、或慢性阻塞性肺疾患)、心臟發(fā)炎(例如心肌炎)、神經組織炎癥(例如多發(fā)性硬化)、胰腺炎癥(例如與糖尿病及其并發(fā)癥相關的炎癥、腎臟發(fā)炎(例如腎小球腎炎)、皮膚發(fā)炎(例如皮炎、銀屑病、濕疹、蕁麻疹、燒傷)、眼部發(fā)炎(例如青光眼)、以及移植器官(例如排異反應)和多器官疾病(例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、膿毒癥)炎癥、和病毒或細菌感染的炎性后遺癥、以及與動脈粥樣硬化相關的炎癥和接下來出現(xiàn)在例如大腦或缺血性心臟病中的含氧量低的或缺血性(ischaemic)創(chuàng)傷(包括或不包括再灌注)。
應該理解的是，本文中的治療延伸包括預防、防止癥狀的復發(fā)和抑制以及對已確診病癥的治療。
煙酸具有明顯的副作用，這可能是由于其按照高水平(每日的克數(shù)量(gram quantities))給藥的緣故。最常見的副作用是強烈的皮膚發(fā)紅。在本發(fā)明的某些實施方案中，本發(fā)明化合物顯示出相對于煙酸而言更低的副作用。已經鑒定HM74A是煙酸的高親和力受體，而HM74是低親和力受體。發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物可用作選擇性的HM74A激動劑或部分激動劑；在這樣的情形下，本發(fā)明化合物對HM74A顯示出比對HM74更高的親和力。
式(I)化合物活化HM74A的效能可以采用下述體外全細胞測定加以證實體外測試為了進行瞬時轉染，將HEK293T細胞(穩(wěn)定表達SV40大T-抗原的HEK293細胞)保持在含有10％胎兒小牛血清和2mM谷氨酰胺的DMEM中。細胞接種在90mm培養(yǎng)皿中，在轉染前生長至60-80％融合(confluence)(18-24小時)。將人HM74A(GenBankTM登錄號AY148884)亞克隆在哺乳動物表達載體(pcDNA3；Invitrogen)中，使用Lipofectamine試劑進行轉染。為了進行轉染，將9μg DNA與30μl Lipofectamine混和在0.6ml Opti-MEM(LifeTechnologies Inc.)中，在室溫下培養(yǎng)30分鐘，然后加入1.6ml Opti-MEM。將細胞曝露于Lipofectamine/DNA混合物下5小時，然后加入6ml 20％(v/v)胎兒小牛血清的DMEM溶液。細胞在轉染后48小時收獲(harvested)。通過以50ngml-1向培養(yǎng)基中補充16小時，進行百日咳毒素治療。全部瞬時轉染研究涉及受體與Gi/oG蛋白，Go1α的共轉染。
為了生成穩(wěn)定的細胞系，上述方法被用于轉染接種在六孔皿中、且生長至30％融合的CHO-K1細胞。將這些細胞保持在含有10％胎兒小牛血清和2mM谷氨酰胺的DMEM F-12 HAM培養(yǎng)基中。轉染48小時后，將培養(yǎng)基用400μg/ml遺傳霉素(G418，Gibco)補充，進行抗菌素耐受性細胞選擇。在加入煙酸之后，穩(wěn)定表達HM74A的克隆CHO-K1細胞系通過[35S]-GTPγS結合測量加以確認。
P2膜制備-由收獲(harvest)后冷凍于-80℃下的細胞團(cell paste)制備得到含有P2顆粒部分的質膜(plasma membrane)。全部步驟在4℃下進行。將細胞沉淀(pellet)再次懸浮于1ml的10mM Tris-HCl和0.1 mM EDTA，pH7.5(緩沖液A)中，使用Ultra Turrax勻化20秒鐘，接著通過(5次)25-號針。將細胞裂解物(lysates)在微量離心機中、在1,000g下離心10分鐘，使胞核和未破損細胞沉淀，P2顆粒部分通過在16,000g下微量離心30分鐘進行回收。將P2顆粒部分再次懸浮于緩沖液A中，儲存在-80℃下直到被需要時。-GTPγS結合-根據先前所述的方法(Wieland，T.和Jakobs，K.H.(1994)Methods Enzymol.237，3-13)在室溫下的384-孔板中進行測定。簡單地說，制備標準或測試化合物的稀釋液，然后以體積為10μl加入至384-孔板中。將膜(HM74A或HM74烯釋在測試緩沖液(20mM HEPES，100mM NaCL，10mM MgCl2，pH7.4)中，其用皂苷(60μg/ml)、Leadseeker WGA珠(Amersham；250μg/孔)和10μM GDP補充，使得加入至各孔中的20μl體積含有5μg膜。將[35S]-GTPγS(1170 Ci/mmoL，Amersham)稀釋(1∶1500)在測試緩沖液中，向每個孔中加入20μl。加入放射性配體之后，將板密封，脈沖旋轉(pulse spun)，并在室溫下溫育4小時。在溫育期結束時，在Leadseeker機器(VIEWLUXPLUS；Perkin-Elmer)上讀板，測定特異性結合水平。
通過減少最終測試體積至10μl來改進這些測試。對于此10μl的測試，使用修改的方案。這包括使用在384-孔板的每個孔中僅為100nl的標準樣品或測試化合物，以及1.5μg膜和100μg Leadseeker WGA珠。對于低體積方案，將膜、珠和[35S]-GTPγS混合到一起，并然后將10μl的該混合物分配到每個孔中。溫育和讀板與10μl和50μl的試驗相同。
將所有示例性化合物在一個或兩個上述[35S]-GTPγS結合試驗(即10μl和50μl的試驗)中進行測試。
使用XC50軟件包，用四參數(shù)邏輯方程進行曲線擬合(從任一條曲線中刪除最大的2個點)來分析數(shù)據。用相對于煙酸結合的最大響應的pEC50和％效力來表示特異性結合。
體內試驗在研究前已禁食至少12小時的雄性Spague-Dawley大鼠(200-250 g)中測試HM74A激動劑。化合物通過靜脈內以1mg/kg或3mg/kg(5ml/kg)的劑量或經口飼法以1-30mg/kg(10ml/kg)的劑量給藥。在給藥前以及給藥后的三個時間點(從給藥后15分鐘至8小時的時間段)采集血樣(0.3ml尾部靜脈血)。將每個血樣轉移至肝素試管(Becton Dickinson Microtainer,PST LH)中，離心(10,000g，5分鐘)得到血漿樣本。使用商購的試劑盒(Randox)測定該血漿樣本的非酯化脂肪酸(NEFA)水平。采用對血漿NEFA水平的抑制(相對于給藥前的水平而言)表示HM74A激動劑活性。
為了確定HM74A化合物是否顯示出與煙酸相關的發(fā)紅響應，可將其給藥于清醒的豚鼠。在進行試驗前使雄性Dunkin Hartley豚鼠(300-600g；n＝10-20只/組)禁食12小時，但不超過24小時。在恢復性麻醉(含有另外的O2的異氟烷3.5％(1L/min))下，通過心臟穿刺由每只動物中采集研究前的血樣(0.5ml)。在每只動物的左耳處放置紅外溫度傳感器來進行耳溫測定。在給藥前5分鐘至給藥后30分鐘的時間間隔，每一分鐘記錄一次溫度測量結果。然后直至給藥后2小時，間隔15分鐘記錄一次溫度測量結果。動物通過口飼法接受測試化合物(5ml/kg)。在致死性(terminal)麻醉下，通過心臟穿刺采集血樣(0.5ml)。在給藥后0.5、1、2、3和4小時從各個動物中采集血樣以提供數(shù)據。將所有的血樣置于血液滾筒(roller)上5分鐘，然后在冰上保存直至研究結束。離心分離(12000g，5min)后，將血漿轉移到新的試管中，并在-20℃下保存直至測定NEFA濃度。
合成根據式(I)的化合物(參見下面的合成實施例)，并在上述[35S]-GTPγS結合試驗中進行測試。所有的實施例化合物均具有4.3或更高的pEC50以及30％或更高的效力(相對于煙酸)。
發(fā)現(xiàn)式(I)化合物可用于人藥或獸藥，特別是作為HM74A激活劑用于控制血脂異常和高脂蛋白血癥。
根據本發(fā)明的另一方面，提供了選自式(II)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體， 其中R1代表選自下列的基團氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y，其中X代表A、A1、A2或直接的鍵；A代表選自下列的基團亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-CH2-OC(O)-；A1 代表選自下列的基團-CH2-O-(CH2)q芳基-O-、-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-、-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-、-CH2-NR5-S(O)2-、CH2-S(O)2NR5-、-CH2-C(O)O-、-O-、-NR5-、-S-；A2代表-CH(OH)-；當X為A、A1或A2時，Y代表選自下列的基團雜芳基、雜環(huán)基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-O(CH2)n-芳基、-C(O)O-芳基、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-C1-6鹵代烷基、-C(O)R4、-NR5R7、-C(O)NR5R7、-NR5C(O)R7、-NR5C(O)OR7、-C(O)(CH2)qOR4、鹵素、氰基、-N(R5)C(O)OR7、-OC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-OC(O)R4；當X為A1時，Y選自-O(CH2)n-芳基、-O-雜芳基、-OR5、-OC(O)R5、-NH-芳基、-OC(O)NR5R6，n為選自2、3、4和5的整數(shù)；
當X為A1時，Y為-CF3，或當X為A2時，n為選自1、2、3、4和5的整數(shù)；當X為直接的鍵時，Y代表選自下列的基團-C(O)(CH2)qOR5、-C(O)-芳基、-C(O)-雜芳基、-C(O)-雜環(huán)基、-雜芳基、-雜環(huán)基、-芳基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-C1-6鹵代烷基、-鹵素、-氰基、3或4環(huán)稠合體系、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-OR5、-NR5R7、-NCOOR8、-(O)pC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-(O)pC(O)R4；當Y含有環(huán)時，該環(huán)可任選被一個或多個下列基團所取代C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素、-NH2、(CH2)q-NR5R7、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8、-(CH2)q-N(R5)C(O)R8、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6、-(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6、-(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5、-(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8、-CH2-S(O)2N(R5)R6、-C1-6鹵代烷基、-OCF3、-OCH(F)2、-OCH2F、-COOR5、-OR5、-(R8)pCN，-S(O2)R9、-(CH2)n雜芳基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n芳基；R2選自氫；或C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR4、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)pCONR5R6、-OCONR5R7和-NHC(O)OR7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)t環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)t雜環(huán)基、-(CH2)t芳基和-(CH2)t雜芳基；R8選自C1-4烷基；R9選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基、CN；m代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；
p代表選自下列的整數(shù)0和1；q代表選自下列的整數(shù)0、1和2；t代表選自下列的整數(shù)1和2；w代表選自下列的整數(shù)2、3和4；在制備用于治療脂類代謝障礙包括血脂異常或高脂蛋白血癥的藥物中的用途。特別地，提供了式(II)化合物在制備用于治療糖尿病血脂異?；蚧旌涎惓?，心力衰竭，血膽固醇過多癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥、冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、中風和心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥的藥物中的用途。
在本發(fā)明的一個具體實施方案中，提供了式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物用于治療脂類代謝障礙包括血脂異常或高脂蛋白血癥。在另一個具體實施方案中，提供了式(I)或(II)化合物在制備用于治療糖尿病血脂異?；蚧旌涎惓?，心力衰竭，血膽固醇過多癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥、冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、中風和心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥的藥物中的用途。
因此，本發(fā)明另一方面提供了式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物用于人藥或獸藥，特別是用于治療脂類代謝障礙包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥。本發(fā)明化合物同樣被提供用于治療冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、周圍血管疾病和中風。
本發(fā)明另一方面提供了式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物用于制備治療脂類代謝障礙包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥的藥物。本發(fā)明化合物同樣被提供用于治療冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、周圍血管疾病和中風。
在本發(fā)明的另一個具體實施方案中，提供了式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物在制備用于治療關節(jié)的炎性疾病或病癥，特別是關節(jié)炎(例如類風濕性關節(jié)炎、骨關節(jié)炎、假關節(jié)失靈)、或者胃腸道炎癥(例如潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病、以及其它炎性腸病和胃腸疾病、由感染引起的胃炎和粘膜炎癥、由非甾體消炎藥物引起的腸病)、肺部發(fā)炎(例如成人呼吸窘迫綜合征、哮喘、囊性纖維化病、或慢性阻塞性肺疾患)、心臟發(fā)炎(例如心肌炎)、神經組織炎癥(例如多發(fā)性硬化)、胰腺炎癥(例如與糖尿病及其并發(fā)癥相關的炎癥、腎臟發(fā)炎(例如腎小球腎炎)、皮膚發(fā)炎(例如皮炎、銀屑病、濕疹、蕁麻疹、燒傷)、眼部發(fā)炎(例如青光眼)、以及移植器官的炎癥(例如排異反應)和多器官疾病(例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、膿毒癥)、和病毒或細菌感染的炎癥性后遺癥、以及與動脈粥樣硬化相關的炎癥和接下來出現(xiàn)在例如大腦或缺血性心臟病中的含氧量低的或缺血性創(chuàng)傷(包括或不包括再灌注)的藥物中的用途。
在一個實施方案中，式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物用于治療或預防炎癥、糖尿病以及包括動脈粥樣硬化、動脈硬化、高甘油三酯血癥和混合血脂異常的心血管疾病或病癥。
在其它或另外的方面，本發(fā)明提供了治療人或動物患者由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活該受體的疾病的方法，所述方法包括給藥于所述人或動物患者有效量的式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物。
在一個具體實施方案中，本發(fā)明提供了治療脂類代謝障礙包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥的方法，所述方法包括給藥于所述人或動物患者有效量的式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物。同樣還發(fā)現(xiàn)這些化合物在治療冠狀動脈疾病、血栓形成、心絞痛、慢性腎衰竭、周圍血管疾病和中風的方法中是有利的，所述方法包括給藥于所述人或動物患者有效量的式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的衍生物。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R1選自氫、C1-10烷基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，X代表A或A1。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，A選自雜芳基、雜環(huán)基，并且A1選自CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-例如CH2O(CH2)2NHC(O)O-，CH2-N(R5)C(O)O-例如CH2-NHC(O)O，CH2-N(R5)C(O)-例如CH2-NHC(O)-，CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-例如CH2C(O)NCH3-，CH2-N(R5)C(O)N(R5)-例如CH2-NHC(O)NCH3-，CH2-C(O)N((CH2)wOH)-例如CH2-C(O)N((CH2)2OH)-，CH2-NR5-S(O)2-例如CH2-NH-S(O)2-，CH2-S(O)2NR5-例如CH2-S(O)2NCH3-和CH2-C(O)O-。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，X代表A，并且A代表雜芳基。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，A代表含氮雜原子的雜芳基，例如三唑基、呋咱基、二唑基、四唑基、咪唑基或吡唑基。
在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，X代表A，例如雜芳基或雜環(huán)基，或直接的鍵。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，Y代表選自下列的任選取代的基團芳基，例如苯基或萘基，雜芳基，例如吡啶基、噻唑基、噻吩基、苯并呋喃基或吲哚基，以及O-芳基，例如O-苯基。
在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，Y被一個或多個選自下列的基團所取代OR5例如OH或OCH3，鹵素例如F或Cl，芳基例如苯基，C1-6鹵代烷基例如CF3或CH2CF3，OCF3，(R8)pCN例如CN，(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8例如NHS(O)2CH3和S(O)2R9例如S(O)2CH3。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，當X代表A或A1，且A代表環(huán)烷基、環(huán)烯基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，且A1代表-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-或-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-時，則Y代表環(huán)，例如當X代表二唑基、四唑基或吡唑基時，則Y代表苯基、吡啶基或噻吩基，m為選自3和4的整數(shù)，且n為選自0和1的整數(shù)，例如m為4且n為0，或m為3且n為1；在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R1選自氫；和C1-10烷基，其可任選被一個或多個下列基團所取代環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR5、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R7和-(NH)mCONR5R7。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R1選自氫；和C1-10烷基，其可任選被一個或多個下列基團所取代鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR4、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6和-(NH)mCONR5R6。
在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R1選自氫和任選被-OH所取代的C1-6烷基，例如甲基、丁基或CH2CH2OH。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R1選自氫和C1-6烷基，例如甲基或丁基。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R2選自C4-10烷基和C2-10鏈烯基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR5、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6和-(NH)mCONR5R6。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R2可代表C4-10烷基，其可任選被一個或多個下列基團所取代環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素，氰基、-OR4、-(CH2)nCOR4、-CO2R4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6和-(NH)mCONR5R6。在另一個具體實施方案中，R2選自C4-6烷基例如丁基或戊基。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R2代表C1-10烷基，其可任選被一個或多個下列基團所取代環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR5、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6和-(NH)pCONR5R6。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R2選自C3-6烷基例如丁基或戊基。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R3選自氟代C1-6烷基。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R3選自氟代C1-4烷基例如CF3、CHF2或CF2CF3。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基。在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，R4選自氫和C1-4烷基。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R1選自氫和任選被-OH所取代的C1-6烷基，R2選自C4-6烷基，且R3選自氟代C1-4烷基，條件是當R1代表甲基且R3代表CF3時，R2不能為異丁基。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R5為氫。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R7選自氫和C1-4烷基。
在式(I)或(II)的另一個具體實施方案中，條件是當X為A1，A1為-O-且Y為被芳基或雜芳基取代的環(huán)時，則m為選自3、4和5的整數(shù)。
在式(I)或(II)的一個具體實施方案中，R1和R2是不同的。
應該理解的是，本發(fā)明包括這些具體實施方案的任何組合，并且包括上述式(I)或(II)化合物的具體取代基的所有組合。
具體的本發(fā)明化合物包括3-丁基-1-甲基-8-(三氟甲基)-3，7--二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，1，3-二丁基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，3-丁基-1-甲基-8-(五氟乙基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，8-(二氟甲基)-1-甲基-3-戊基-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，1-(2-羥基乙基)-3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，3-丁基-1-{3-[3-(苯基甲基)-1，2，4-二唑-5-基]丙基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，4-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]丁酸，3-丁基-1-[4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)丁基]-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸，3-丁基-1-{4-[3-(2-氟苯基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1 H-嘌呤-2，6-二酮，3-丁基-1-{4-[3-(4-氟苯基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮，3-丁基-1-{4-[3-(2-吡啶基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二-酮，3-丁基-8-(三氟甲基)-1-(3-{3-[(2，4，6-三氟苯基)甲基]-1，2，4-二唑-5-基}丙基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6二酮，1-甲基-3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮。
為了獲得理想生物效應所需的HM74A調節(jié)劑的量當然取決于各種因素，例如給藥模式和接受者具體的臨床病癥。一般來說，日劑量可以為0.1mg-1g/kg，典型地為0.1-100mg/kg。靜脈內給藥劑量可以例如為0.01mg-0.1g/kg，典型地為0.01mg-10mg/kg，其可以方便地通過0.1μg-1mg/分鐘的輸注給藥。適合上述目的的輸注液體可以含有例如0.01μg-0.1mg/毫升。單位劑量中可以含有例如0.01μg-1g的HM74A調節(jié)劑。因此，注射安瓿中可以含有例如0.01μg-0.1g，口服給藥的單位劑量制劑例如片劑或膠囊劑中可以含有例如0.1mg-1g。當本發(fā)明化合物以上述劑量范圍給藥時，未發(fā)現(xiàn)/預期到毒理學效應。
本發(fā)明化合物本身可用于治療由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活該受體的疾病，其實例是將本發(fā)明化合物與可接受載體以藥物制劑的形式存在。當然，所述載體在能與制劑中其它成分配伍方面必須是可接受的，同時對接受者必須無毒。所述載體可以是固體或液體、或者兩者兼有，可以將HM74A調節(jié)劑制備成單位劑量制劑形式，例如片劑，其中可含有0.05重量％-95重量％的HM74A調節(jié)劑。
所述制劑包括那些適合口服、直腸、局部、口腔(例如舌下)和腸胃外(例如皮下、肌內、皮內或靜脈內)給藥的制劑。
根據本發(fā)明還提供了制備這類藥物組合物的方法，所述方法包括將各種成分進行混和。
適合口服給藥的制劑可以以個別的單位形式存在，例如各自含有預定量的HM74A調節(jié)劑的膠囊劑、扁囊劑、錠劑或片劑；粉劑或顆粒劑形式；在水或非水液體中的溶液劑或混懸劑形式；或者水包油或油包水乳劑形式。一般來說，通過將活性HM74A調節(jié)劑與液體或細分的固體載體、或者兩者兼有進行均勻且致密的混和，然后如果需要的話，使產品成型，這樣可以制備得到上述制劑。例如，片劑可以通過將HM74A調節(jié)劑的粉末或顆粒任選與一種或多種輔助成分壓制或成型而制備得到。壓制片劑可以通過在適宜的機器中將自由流動(free-flowing)形式的本發(fā)明化合物例如任選與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑和/或表面活性劑/分散劑混合的粉末或顆粒進行壓制而制備得到。模制(Moulded)片劑可以通過在適宜的機器中將用惰性液體稀釋劑潤濕的粉狀化合物進行模制而制備得到。
口服給藥的片劑和膠囊劑中可以含有常規(guī)賦形劑，例如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、西黃蓍膠、淀粉粘液或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，如乳糖、微晶纖維素、糖、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨糖醇；潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，如馬鈴薯淀粉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉或淀粉羥乙酸鈉；或者潤濕劑，如十二烷基硫酸鈉。片劑可以按照本領域熟知的方法包衣?？诜后w制劑可以是例如水性或油性混懸劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或酏劑形式，或者也可以是在使用前與水或其它適宜載體重構(constitution)的干燥產品形式。這種液體制劑可以含有常規(guī)添加劑例如助懸劑，如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/食用糖糖漿、明膠、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或者氫化食用脂；乳化劑，如卵磷脂、脫水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水載體(其中可以含有食用油)，如杏仁油、分餾椰子油(fractionated coconut oil)、油性酯、丙二醇或乙醇；或者防腐劑，如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或者山梨酸。如果適合的話，制劑中還可以含有緩沖鹽、調味劑、著色劑和/或甜味劑(例如甘露醇)。
適合口腔(舌下)給藥的制劑包括在調味基質(通常為蔗糖和阿拉伯膠或西黃蓍膠)中含有HM74A調節(jié)劑的錠劑、以及在惰性基質例如明膠和甘油或者蔗糖和阿拉伯膠中含有HM74A調節(jié)劑的軟錠劑。
可合適地配制口服給藥的制劑，獲得活性化合物的控制釋放/延長釋放。
適合腸胃外給藥的本發(fā)明制劑通常包括HM74A調節(jié)劑的無菌含水制劑，所述制劑可與預期接受者體內的血液等滲。這些制劑可以通過靜脈內給藥，當然還可以通過皮下、肌內、或皮內注射實現(xiàn)。這類制劑通?？梢酝ㄟ^將HM74A調節(jié)劑與水進行混和，然后將所得到的溶液滅菌并使其與血液等滲而方便地制備得到。根據本發(fā)明的可注射組合物通常含有0.1-5％w/wHM74A調節(jié)劑。
因此，可以將含有本發(fā)明化合物的適合腸胃外給藥的本發(fā)明制劑配制成通過快速濃注(bolus injection)或連續(xù)輸注進行腸胃外給藥的形式，并且可以以單位劑量形式存在，例如安瓿、小瓶(vials)、小體積輸液或者預裝注射器形式，或者以具有添加的防腐劑的多劑量容器形式存在。所述組合物可以采取例如在水或非水載體(vehicles)中的溶液劑、混懸劑、或乳劑形式，并且可以含有各種配制制劑例如抗氧化劑、緩沖劑、抗微生物劑和/或毒性調節(jié)劑。或者，所述活性成分可以為在使用之前與適宜載體例如無菌無熱原的水重構的粉末形式。所述干燥固體形式可以通過將無菌粉末無菌填入單獨的無菌容器中制備得到，或者通過將無菌溶液無菌填入各容器中，然后再凍干而制備得到。
適合直腸給藥的制劑可以以單位劑量栓劑形式存在。所述單位劑量栓劑可以通過將HM74A調節(jié)劑與一種或多種常規(guī)固體載體例如可可豆脂或甘油酯混和，然后再使所得到的混合物成型而制備得到。
適合局部應用至皮膚的制劑可以采取軟膏劑、乳劑、洗劑、糊劑、凝膠劑、噴霧劑、氣霧劑、或油劑形式?？墒褂玫妮d體包括凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類、以及其中的兩種或多種的混合物。所述HM74A調節(jié)劑通常以占組合物0.1-15％w/w、例如0.5-2％w/w的濃度存在。
本文所使用的局部給藥包括吹入和吸入給藥。用于局部給藥的各種類型的制劑實例包括軟膏劑、乳劑、洗劑、粉劑、陰道栓劑、噴霧劑、氣霧劑、膠囊劑、用于吸入器或吹入器中的藥筒或者滴劑(例如滴眼劑或滴鼻劑)。
軟膏劑和乳劑可以通過例如使用水性或油性基質，同時加入適宜的增稠劑和/或膠凝劑和/或溶劑配制得到。因此，這類基質可以例如包括水和/或油例如液體凡士林或者植物油例如花生油或蓖麻油或者溶劑例如聚乙二醇?？墒褂玫脑龀韯┌ㄜ浭灐⒂仓徜X、十八醇十六醇混合物(cetostearylalcohol)、聚乙二醇、微晶蠟和蜂蠟。
洗劑可以使用水性或油性基質配制得到，并且一般來說，還可以含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、助懸劑或增稠劑。
用于外敷的粉劑可以借助于任何適宜的粉末基質例如滑石、乳糖或淀粉形成。滴劑可以使用水性或非水性基質配制得到，并且還可以含有一種或多種分散劑、增溶劑或助懸劑。
噴霧組合物可以被配制成例如水溶液劑或混懸劑形式或者由加壓包裝中借助適宜的推進劑遞送的氣霧劑，其中推進劑例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷、1，1，1，2-四氟乙烷、二氧化碳或其它適宜的氣體。
可以將用于吸入器或吹入器中的膠囊劑和藥筒(cartridges)(例如明膠)配制成包含本發(fā)明化合物與適宜的粉末基質例如乳糖或淀粉的粉末的混合物。
根據本發(fā)明的藥物組合物還可以與其它的治療劑組合(combination)使用，例如與其它類型的血脂異常藥物(例如斯特汀、氯貝特類(fibrates)、膽汁酸結合樹脂或煙酸)組合使用。
本發(fā)明化合物可以與一種或多種其它治療劑組合使用，例如與其它類型的血脂異常藥物組合使用，如3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑(斯特汀)或氯貝特類或膽汁酸結合樹脂或者煙酸。因此本發(fā)明另一方面提供了所述組合(combination)在治療由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活該受體的疾病中的用途，以及式(I)或(II)化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或生理學功能的衍生物在制備用于聯(lián)合治療(combinationtherapy)脂類代謝障礙包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y例如糖尿病血脂異常和混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥或肥胖癥的藥物中的用途。
當本發(fā)明化合物與其它治療劑組合使用時，這些化合物可以通過任何常規(guī)途徑依次或者同時給藥。
前面所稱的組合可以方便地通過使用藥物制劑的形式存在，因此含有上述組合以及任選的藥學上可接受的載體或賦形劑的藥物制劑構成了本發(fā)明另一方面。這類組合中的單獨組分可以以單獨或合并的藥物制劑形式依次或同時給藥。
當被組合在同一制劑中時，應該理解這兩種組分必須是穩(wěn)定的，并且能夠彼此配伍以及與制劑中的其它組分同樣能夠配伍，并且還可以配制用于給藥。當分別配制時，它們可以以任意的常規(guī)制劑形式(通常是本領域針對這類化合物已知的方式)提供。
當與對抗相同疾病的第二治療劑組合時，每種組分的劑量可以與化合物單獨使用的劑量不同。適宜的劑量本領域技術人員可以很容易地理解。
因此，本發(fā)明另一方面提供了含有式(I)化合物或其藥學上可接受的衍生物與其它治療活性劑一起的組合。
前面所稱組合可以方便地通過使用藥物制劑的形式存在，因此含有上述組合及其藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體的藥物制劑代表了本發(fā)明另一方面。例如，包括化合物或其藥學上可接受的衍生物以及一種或多種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體的藥物制劑。
本發(fā)明化合物具有有益的作用持續(xù)時間。本發(fā)明化合物及其鹽和溶劑化物可以按照下文中所述的方法制備，這構成了本發(fā)明的另一方面。
一般純化和分析方法質譜(MS)是在使用電噴射正離子化(positive ionization)作用[(ES+ve得到MH+和M(NH4)+分子離子]或者電噴射正離子化(negative ionization)作用[(ES-ve得到(M-H)-分子離子]模式的Fisons VG Platform質譜儀上記錄的。
1H NMR譜使用Bruker DPX 400MHz譜儀記錄，使用四甲基甲硅烷作為外標。
BiotageTM色譜法是指使用由Dyax Corporation銷售的儀器(Flash 40i或Flash 150i)和預先用KPSil裝填的柱進行純化。
質量定向自動化制備方法(Mass directed autoprep)是指這樣一種方法其中物質通過高效液相色譜法、在HPLCABZ+5μm柱(5cmx10mm i.d.)上使用0.1％HCO2H的水溶液以及95％MeCN、5％水(0.5％HCO2H)進行純化，采用下述梯度洗脫條件0-1.0分鐘5％B，1.0-8.0分鐘5→30％B，8.0-8.9分鐘30％B，8.9-9.0分鐘30→95％B，9.0-9.9分鐘95％B，9.9-10分鐘95→0％B，流速為8ml分鐘-1(體系2)。Gilson 202-級分收集器在檢測感興趣的質量時由VG Platform質譜儀啟動。
制備性h.p.l.c.是指這樣一種方法其中物質通過高效液相色譜法、在HPLCABZ+5μm柱(10cmx21.2mm i.d.)上使用0.1％HCO2H的水溶液(A)和MeCN(0.5％HCO2H)(B)，采用具有下述梯度體系表示為“x至y”的一般梯度洗脫條件進行純化0-1.45分鐘x％B，1.45-20分鐘x→y％B，20-24分鐘y→95％B，24-30分鐘95％B，32-34分鐘95→x％B，流速為8ml分鐘-1。Gilson 233級分收集器由UV(254 nm)啟動。
SPE(固相萃取)是指采用由International Sorbent Technology Ltd銷售的柱。
Strata Phenyl SPE是指使用由Phenomenex銷售的柱。將化合物裝填在預先經MeCN調節(jié)(conditioned)、然后用5％MeCN的水溶液平衡的柱上。將化合物用0.1％HCO2H的水溶液和MeCN(0.5％HCO2H)，以適宜的梯度在Combiflash Optix 10上洗脫。
本發(fā)明化合物及其藥學上可接受衍生物可以按照下文中所述的方法制備，這構成了本發(fā)明的另一方面。
方法A根據本發(fā)明的用于制備其中R1為H或烷基，其中R1和R2可相同或不同的式(I)或式(II)化合物的方法，所述方法包括
i)嘧啶二酮形成ii)烷基化作用iii)亞硝基化作用iv)還原v)黃嘌呤形成方法B根據本發(fā)明的用于制備其中R1和R2可相同或不同的式(I)或式(II)化合物的方法，所述方法包括 i)在N3位選擇性烷基化ii)在N1位烷基化iii)C8的甲?；饔胕v)羰基的氟化作用v)鈀介導的脫保護如果需要或者必要的話，作為任意一種上述合成方法中的最后步驟，可以將所得到的式(I)或式(II)化合物轉化為藥學上可接受的鹽形式，或者反之亦然，或者將一種鹽形式轉化為另一種藥學上可接受的鹽形式。
縮寫AcOH 乙酸br 寬(NMR)CDI羰基二咪唑d 雙重峰(NMR)DBAD 偶氮二羧酸二叔丁基酯DCM二氯甲烷DIPEA 二異丙基乙胺DMSO 二甲亞砜DMFN，N-二甲基甲酰胺EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇h 小時IPA異丙醇m 多重峰(NMR)MDAP 質量定向自動化制備方法(Mass directed autoprep)MeCN 乙腈MeOH 甲醇min分鐘NCSN-氯琥珀酰亞胺PFPA 五氟丙酸酐q 四重峰(NMR)rt 室溫RT 保留時間s 單峰(NMR)SPE固相萃取柱t 三重峰(NMR)TFA三氟乙酸TFAA 三氟乙酸酐THF四氫呋喃
DMEM Dulbecco改進的Eagle培養(yǎng)基HEPES4-(2-羥基乙基)哌嗪-1-乙磺酸LiHMDS 六甲基二甲硅烷基氨基化鋰利用下述非限制性實施例對本發(fā)明進行示例性說明合成實施例實施例13-丁基-1-甲基-8-(三氟甲基)-，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5，6-二氨基-1-丁基-3-甲基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(European Journal ofMedicinal Chemistry(1990)，25(8)，653-8)(290mg)和TFAA(6ml)的紫色的混合物加熱回流1小時，然后真空濃縮。將生成的殘余物用2N NaOH(水溶液)(7ml)處理，并將混合物加熱回流30分鐘。在冷卻至環(huán)境溫度后，將混合物用3MHCl(水溶液)酸化至大約pH為4。過濾收集該沉淀物，并用水∶EtOH(2∶1)的溶液然后用水∶EtOH(1∶1)的溶液洗。將生成的米色固體真空干燥(100mg，25％)。NMR；δH(400MHz，d6-DMSO)0.90(t，3H，J＝7.5Hz)，1.25-1.36(m，2H)，1.59-1.69(m，2H)，3.25(s，3H)，3.97(t，2H，J＝7Hz)，在δH15沒有觀察到NH；m/z 291.2[MH+]。
實施例21，3-二丁基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5，6-二氨基-1，3-二丁基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(Joumal of MedicinalChemistry(1991)，34(1)，466-9)(207mg)和TFAA(4ml)的紫色的混合物加熱回流1小時，然后真空濃縮。將生成的殘余物用2N NaOH(水溶液)(5ml)處理，并將混合物加熱回流30分鐘。在冷卻至環(huán)境溫度后，將混合物用3M HCl(水溶液)酸化至大約pH為4。過濾收集該沉淀物，并通過用水∶EtOH(2∶1)的溶液重結晶來純化。將淡褐色/橙色固體在50℃下真空干燥48小時，得到米黃色固體形式的標題化合物(35mg，13％)。δH(400MHz，d6-DMSO)0.90(t，6H，J＝7Hz)，1.26-1.34(m，4H)，1.48-1.68(重疊的m，4H)，3.89(t，2H，J＝7Hz)，3.97(t，2H，J＝7Hz)，在δH15沒有觀察到NH；m/z 333.2[MH+]。
實施例33-丁基-1-甲基-8-(五氟乙基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5，6-二氨基-1-丁基-3-甲基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(European Journal ofMedicinal Chemistry(1990)，25(8)，653-8)(300mg，1.41mmol)和五氟丙酸酐(PFPA)(6ml)的紫色的混合物在60℃下加熱1小時，然后真空濃縮。將生成的殘余物用2N NaOH(水溶液)(7ml)處理，并將混合物在90℃下加熱30分鐘。冷卻至室溫后，將混合物用3M HCl(水溶液)酸化至大約pH為4。過濾收集該沉淀物，用水洗，并真空干燥，得到淡綠色/褐色松散狀固體的標題化合物(163mg，34％)。δH(400MHz，d6-DMSO)0.89(t，3H，J＝7.5Hz)，1.24-1.35(m，2H)，1.60-1.69(m，2H)，3.25(s，3H)，3.98(t，2H，J＝7Hz)，在δH15沒有觀察到NH；m/z 358.4[MNH4+]。
實施例48-(二氟甲基)-1-甲基-3-戊基-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將8-(二氟甲基)-1-甲基-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮在無水THF(3ml)和無水DMSO(0.3ml)中的溶液在溫和的真空下除氣，并通入氮氣。將該過程重復兩次。加入Pd(PPh3)4(74mg，0.064mmol)，并將混合物再除氣一次。加入嗎啉(374uL，4.3mmol)，并在室溫下攪拌4小時。將混合物在2M HCl(水溶液)和EtOAC之間分配。分離有機層，用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮。將殘余物溶于MeOH中，并通過氨基-丙基SPE柱(5g)，用MeOH、隨后用5％AcOH/MeOH洗脫。濃縮該產物級分，得到灰白色固體的標題化合物(98mg，80％)。δH(400MHz，d6-DMSO)0.85(t，3H，J＝7Hz)，1.23-1.35(m，4H)，1.61-1.71(m，2H)，3.25(s，3H)，3.96(t，2H，J＝7.5Hz)，7.12(t，1H，J＝53Hz)，14.59(br.s，1H)；m/z 287.2[MH+]。
8-(二氟甲基)-1-甲基-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 在氮氣氛下，將1-甲基-2，6-二氧代-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-8-甲醛(133mg，0.44mmol)加入到預先干燥的燒瓶中。加入無水DCM(3ml)，隨后加入Deoxofluor(雙-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫)(161uL，0.87mmol)，并最后加入EtOH(1滴，大約0.09mmol)。將混合物在室溫下攪拌4小時，然后在飽和的NaHCO3(水溶液)和DCM之間分配。分離有機層，用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮，得到黃色油狀的標題化合物(145mg)。m/z327.4[MH+]。
1-甲基-2，6-二氧代-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-8-甲醛 在-78℃下，用10 min的時間向1-甲基-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮(1.05g，3.8mmol)的THF(15ml)溶液中加入六甲基二甲硅烷基疊氮化鋰(1M的己烷溶液，4mL，4mmol)。將溶液攪拌0.5小時，然后加入DMF(0.5mL，6.5mmol)，并將溶液在-78℃下再攪拌0.5小時，隨后用2小時的時間將其溫熱至室溫。將該反應用2N HCl溶液終止，然后在EtOAc/鹽水之間分離。經硅膠色譜法(用DCM至5∶1的DCM/EtOAc梯度洗脫)純化，得到標題化合物(0.35g，30％)。m/z 305[MH+]。
1-甲基-3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 向3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮(0.20g，0.76mmol)和碘甲烷(0.5mL，4.9mmol)的DMF(5ml)溶液中加入碳酸鉀(0.4g，2.9mmol)，并將混合物在50℃下加熱3小時，冷卻并將混合物在EtOAc/鹽水之間分離。分離有機物，干燥(MgSO4)并濃縮，生成所需的產物(0.21g，100％)。m/z277[MH+]。
3-戊基-7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 向7-(2-丙烯-1-基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮(0.61g，3.2mmol)和戊基碘(0.64g，3.2mmol)的DMF(7ml)溶液中加入碳酸鈉(0.60g，5.7mmol)，并將混合物在50℃下加熱18小時。冷卻后并將混合物在EtOAc/鹽水之間分離。分離有機物，干燥(MgSO4)并濃縮，生成粗產物，將其經硅膠色譜法(用DCM至5∶1的DCM/EtOAc梯度洗脫)純化，得到標題化合物(0.47g，56％)。m/z263[MH+]。
實施例53-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮
將6-氨基-5-亞硝基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(500mg，2.21mmol)、10％Pd/C(100mg)和EtOH(100ml)的混合物在氫氣氛下劇烈攪拌4小時。將混合物通過Celite過濾，并真空濃縮濾液，得到淡綠色固體的5，6-二氨基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(62mg)和未知產物的混合物(2∶1)。加入三氟乙酸酐(5ml)，并加熱回流1小時，然后真空濃縮。將2M NaOH(水溶液)(1 5ml)加入到粗的殘余物中，并于100℃加熱30分鐘。冷卻至室溫后，將混合物用2M HCl(水溶液)酸化至大約pH為5。過濾收集生成的沉淀，并然后在加熱下溶于MeOH中，并然后通過氨基丙基柱(5g)，用2％AcOH/MeOH、5％AcOH/MeOH、10％AcOH/MeOH和15％AcOH/MeOH洗脫。濃縮該產物級分，得到灰白色固體的標題化合物(52mg)。NMR；(400MHz，d6-DMSO)δH0.85(t，3H，J＝7Hz)，1.22-1.31(m，4H)，1.61-1.66(五重峰，2H，J＝7Hz)，3.89(t，2H，J＝7Hz)，11.39(s，1H)，15.3(br.s，1H).m/z 291.2[MH+]。
6-氨基-5-亞硝基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮 將6-氨基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(3.0g，15.2mmol)、AcOH(6ml)和6M HCl(水溶液)的混合物冷卻至0℃，然后滴加NaNO2(1.2g，16.7mmol)的水(4mL)溶液來處理。將混合物攪拌45分鐘，并加入水(大約200mL)。過濾生成的紫色固體，用水(大約200ml)洗，并在60℃下高真空干燥1 8小時。得到紫色固體的標題化合物(2.08g，60％)。m/z 227.3[MH+]。
6-氨基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮
將2-氰基-N-[(戊基氨基)羰基]乙酰胺(17.9g，0.091mol)、EtOH(70ml)和水(40ml)的混合物加熱至85℃，并然后滴加10％NaOH(水溶液)(10ml)。將該反應攪拌1小時，隨后冷卻至室溫，然后用水稀釋，并使用2M HCl(水溶液)酸化至大約pH為6。冷卻該混合物(冰浴)，然后過濾，并將生成的固體用水洗，然后在40℃下真空干燥。由此得到白色固體的標題化合物(11.0g，61％)。m/z 198.2[MH+]。
2-氰基-N-[(戊基氨基)羰基]乙酰胺 將戊基脲(16.4g，0.13mol)、氰基乙酸(11.8g，0.14mol)和乙酸酐(30ml)的混合物在80℃下加熱2小時。將混合物冷卻至室溫，并與Et2O(大約100ml)攪拌1小時。將混合物冷卻至0℃(冰浴)，并過濾收集固體，得到白色固體的標題化合物(17.9g，72％)。m/z 196.1[MH+]。
實施例5(b)3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮(另一種方法) 向6-氨基-5-亞硝基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮0.227g，1mmol)在無水二氯甲烷(5ml)中的懸浮液中加入三氟乙酸酐(0.35mL，2.5mmol)。將生成的淡黃色懸浮液在室溫下攪拌40min，并然后將溶液真空濃縮。
將殘余物溶于二烷(25ml)中，并加入10％鈀/碳(0.5g)并氫化1小時。濾出催化劑，用二烷洗，并將濾液真空濃縮。仍然剩下一些起始物，所以重復該氫化步驟。再1.5小時后，濾出該催化劑，用二烷洗，并將濾液真空濃縮。
將殘余物溶于四氫呋喃(10ml)中，并加入2N NaOH(5ml)。將溶液在60℃下攪拌2小時。將粗的反應混合物用乙酸乙酯和水稀釋，并然后用2N HCl酸化。將有機相用鹽水洗，干燥(MgSO4)，并在真空中濃縮，得到橙色固體的標題化合物(140mg，48％)。
LC/MSm/z 291[MH]+，RT 3.00min1H NMR(DMSO-d6)δH 0.85(3H，t，J＝7Hz)，1.28(4H，m)，1.64(2H，m)，3.88(2H，t，J＝7Hz)，11.22(1H，br s).
實施例61-(2-羥基乙基)-3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將6-氨基-1-戊基-3-[2-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)乙基]-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(970mg)的AcOH(10ml)溶液用6M HCl(水溶液)(8ml)處理，并然后加入NaNO2(247mg)的水(3ml)溶液。15分鐘后，將混合物在水和EtOAC之間分配。分離有機層，并將水層用EtOAc(x7)萃取。將合并的萃取液用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮，得到紫色油狀物(446mg)。將此油狀物在DCM(12ml)中的懸浮液通過滴加TFAA(12mL)處理。10分鐘后，濃縮該混合物，得到黃色/褐色油狀物(798mg)。在氫氣氛下，將一部分油狀物質(150mg)在THF(15ml)中反應2.5小時。將混合物通過Celite過濾，并通過用THF洗滌。濃縮該濾液，并用TFAA(5ml)處理一次，然后真空濃縮。將2MNaOH(水溶液)(4ml)加入到殘余物中，并將混合物在50℃下加熱30分鐘。冷卻后，將混合物酸化至大約pH為5，并將產物用EtOAC萃取。分離有機層，用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮。將生成的殘余物通過auotoprep hplc，得到標題化合物(32mg，17％)。NMR；(400MHz，d6-DMSO)δH 0.85(t，3H，J＝7Hz)，1.23-1.36(m，4H)，1.62-1.70(m，2H)，3.52(t，2H，J＝6.5Hz)，3.97(m，4H)，15.5(br.S，1H).m/z335.3[MH+]。
6-氨基-1-戊基-3-[2-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)乙基]-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮 將6-氨基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(300mg，1.5mmol)、Cs2CO3(595mg，1.8mmol)、2-(2-溴乙氧基)四氫-2H-吡喃(276uL，1.8mmol)和無水DMF(5ml)的混合物在40℃下加熱18小時。將混合物在水和EtOAC之間分配。分離有機層，用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮，得到淡褐色膠狀物(198mg，40％)。m/z 326.3[MH+]。
實施例7(a)3-丁基-1-{3-[3-(苯基甲基)-1，2，4-二唑-5-基]丙基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮實施例7(b)4-[3-丁基-2，6-二氫代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]丁酸a)3-丁基-1-{3-[3-(苯基甲基)-1，2，4-二唑-5-基]丙基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將4-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]丁酸(0.181g，0.5mmol)和CDI(0.089g，0.55mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(6mL)中。在氮氣氛下，在室溫下將溶液攪拌3小時后，加入芐偕胺肟(0.083g，0.55mmol)，并將溶液在90℃下加熱20小時，然后在110℃下加熱4小時。將該反應混合物真空濃縮，得到黃色油狀物。將其在Teledyne IscoCombiFlashCompanion上，使用40g RediSep二氧化硅柱(用氯仿/乙醇0-15％梯度洗脫)純化。真空蒸發(fā)合適的級分，然后由二烷冷凍干燥，得到白色親液(lyophilate)的標題化合物(142mg，59％)LC/MSm/z 477[MH]+，RT 3.57 min1H NMR(CDCl3)δH.0.98(3H，t，J＝7Hz)，1.41(2H，m)，1.76(2H，m)，2.23(2H，m)，2.95(2H，t，J＝8Hz)，4.00(2H，s)，4.14(2H，t，J＝8Hz)，4.22(2H，t，J＝7Hz)，7.27(5H，s)b)4-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]丁酸 將無水二氯甲烷(50ml)加入到4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯(3.26g，10mmol)中，隨后加入三氟乙酸酐(3.53mL，25mmol)。將黃色溶液在室溫下在氮氣氛下攪拌15min，然后真空濃縮。將殘余物溶于二烷(150ml)中，并加入10％鈀/碳(0.5g)，并氫化2小時。濾出催化劑，用二烷洗，并真空濃縮濾液。
將殘余物溶于四氫呋喃(100ml)中，并加入2N NaOH(50ml)。將溶液在60℃下攪拌1.5小時，冷卻并用乙酸乙酯(100ml)和水(30mL)稀釋。將有機相用水(2x30mL)萃取。將合并的含水萃取液用2N HCl酸化至pH為4。過濾生成的固體，并用水洗，得到淡米色固體的標題化合物2.17g(60％)。
LC/MSm/z 363[MH]+，RT 2.84min1H NMR(DMSO-d6)δH0.90(3H，t，J＝7Hz)，1.31(2H，m)，1.64(2H，m)，1.80(2H，m)，2.24(2H，t，J＝7Hz)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，3.95(4H，m)，12.01，(1H，br s)，15.36，(1H，br s)c)4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯
將4-(4-氨基-3-丁基-2，6-二氧代-3，6二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯8.5g，29.8mmol)溶于冰醋酸(45ml)和6M鹽酸(24mL)的混合物中。將溶液冷卻至-1℃，并滴加亞硝酸鈉(2.26g，32.7mmol)的水(20ml)溶液。在加入完成后，除去冰浴，并將紫色溶液攪拌1小時。將溶液用水(140ml)稀釋，將幾分鐘后分離出來的產物過濾，用水(總共350ml)洗，并在50℃下真空干燥，得到鮮粉紅色固體的標題化合物(6.61g)。在靜置后，分離出另一批產物(0.53g)，然后將母液用2N氫氧化鈉堿化為pH為6，并萃取到乙酸乙酯(2x250mL)中。將合并的萃取液真空濃縮，得到第三批的標題化合物(1.23g)?？偖a量8.37g，86％。
LC/MSm/z 327[MH]+，RT 2.58mind)4-(4-氨基-3-丁基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯 在氮氣氛下，將6-氨基-1-丁基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(5.9g，32.2mmol)和碳酸銫(11.54g，35.4mmol)加入到無水二甲基甲酰胺中。加入4-溴丁酸乙酯(5.07mL，35.4mmol)，并將混合物在室溫下攪拌22小時。將反應混合物用乙酸乙酯(350ml)稀釋，并用飽和的氯化鈉溶液(2x50mL)洗。將合并的水相用乙酸乙酯反萃取。將合并的有機相用飽和的氯化鈉溶液洗，干燥(MgSO4)，并在真空中濃縮。將粗產物在Teledyne Isco CombiFlashCompanion上，使用80g RediSep二氧化硅柱(用氯仿/乙醇0-40％梯度洗脫)純化。將合適的級分真空蒸發(fā)，得到黃色油狀的標題化合物，其靜置后結晶(5.36g，56％)。
LC/MSm/z 298[MH]+，RT 2.49min實施例8(a)3-丁基-1-[4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)丁基]-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮實施例8(b)5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸a)3-丁基-1-[4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)丁基]-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸甲酯(0.1 56g，0.4mmol)、芐偕胺肟(60mg，0.44mmol)、2 1％NaOEt的EtOH溶液(0.22mL，0.6mmol)和無水EtOH(1ml)的混合物在微波下在140℃下加熱10min。將混合物用EtOAc(30ml)稀釋，并用水(20ml)、2NHCl(20ml)和鹽水(5mL)洗。干燥有機層(Na2SO4)，并在真空中濃縮，得到黃色油狀物，并然后由二烷冷凍干燥，得到膏狀親液的標題化合物(95mg，50％)。
LC/MSm/z 476[MH]+，RT 3.73 min1H NMR(CDCl3)δH. 0.97(3H，t，J＝7Hz)，1.41(2H，m)，1.77(2H，m)，1.87(2H，m)，1.97(2H，m)，3.02(2H，t，J＝7Hz)，4.17(4H，m)，7.47(3H，m)，8.04(2H，m)b)5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸 和5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸甲酯 將無水二氯甲烷(70ml)加入到4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)戊酸甲酯(5.06g，15.5mmol)中，隨后加入三氟乙酸酐(22mL，10當量)。將該黃色溶液在氮氣氛下在室溫下攪拌25min，并然后真空濃縮。
將殘余物溶于二烷(250ml)中，并加入到10％鈀/碳(0.85g)中，并氫化2.25小時。濾出催化劑，用二烷洗，并真空濃縮濾液。將殘余物溶于四氫呋喃(100ml)中，并加入2N NaOH(15.5ml)。將溶液在室溫下攪拌3.5小時。加入另外8ml的2N NaOH，并將該反應混合物在60℃下加熱1.5小時。將該反應混合物冷卻，并在真空中濃縮至小體積，并在乙酸乙酯和水之間分配。將有機相用水(2x)和鹽水洗。將合并的含水萃取液用2NHCL酸化，萃取到乙酸乙酯(5x40ml)中，并然后用飽和的NaHCO3(3x30ml)和鹽水(30mL)反萃取。將合并的水相用2N HCl酸化至pH為4.5，并過濾生成的固體，并用水洗，得到米色固體的5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸2.19g(38％)。
經MgSO4干燥有機相，并在真空中濃縮成黃色膠狀物，其靜置后固化，得到桃紅色固體的5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸甲酯(0.9g，15％)。
5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸的數(shù)據LC/MSm/z 377[MH]+，RT 2.91min1H NMR(DMSO-d6)δH.0.90(3H，t，J＝7Hz)，1.30(2H，t，J＝7Hz)，1.45-1.68(6H，m)，2.24(2H，t，J＝7Hz)，3.89(2H，t，J＝7Hz)，3.97(2H，t，J＝7Hz)，12.00(1H，br s)5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸甲酯的數(shù)據LC/MSm/z 391[MH]+，RT 3.15 min.
1H NMR(CDCl3)δH0.95(3H，t，J＝7Hz)，1.27(2H，t，J＝7Hz)，1.38(2H，m)1.75(2H，m)，2.06(2H，s)，2.36(2H，t，J＝7Hz)，3.62(3H，s)，4.03(2H，br)，4.14(2H，m)
c)4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)戊酸甲酯 按照與4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯類似的方法進行制備。
LC/MSm/z 327[MH]+，RT 2.54 mind)5-(4-氨基-3-丁基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)戊酸甲酯 按照與4-(4-氨基-3-丁基-2，6-二氧代-3，6-二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯相同的方法進行制備。
LC/MSm/z 298[MH]+，RT 2.47 min實施例93-丁基-1-{4-[3-(2-氟苯基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸(0.301g，0.8mmol)和CDI(0.153g，0.94mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(10mL)中。將溶液在氮氣氛下在室溫下攪拌4小時后，加入2-氟芐偕胺肟(0.135g，0.88mmol)，并將溶液在85℃下加熱19小時。將反應混合物真空濃縮，并在10g氨基丙基SPE(10g)上用甲醇洗脫來純化。蒸發(fā)該甲醇洗脫液，得到油狀物，將其進一步通過MDAP純化。合并相關的級分(fractions)，并在真空中濃縮，將殘余物由二烷冷凍干燥，得到白色親液的標題化合物(0.037g，9％)。LC/MSm/z 495[MH]+，RT 3.68min1H NMR(CDCl3)δH.0.97(3H，t，J＝7Hz)，1.40(2H，m)，1.77(2H，m)，1.88(2H，m)，1.97(2H，m)，3.05(2H，t，J＝7Hz)，4.17(2H，q，J＝7Hz)，7.19-7.29(2H，m)7.45-7.48(1H，m)8.02，(1H，dt，J＝8 and 2Hz)實施例103-丁基-1-{4-[3-(4-氟苯基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸(0.301g，0.8mmol)和CDI(0.153g，0.94mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(10mL)中。將溶液在氮氣氛下在室溫下攪拌4小時后，加入4-氟芐偕胺肟(0-135g，0.88mmol)，并將溶液在85℃下加熱22小時。將反應混合物真空濃縮，溶于乙酸乙酯中，并用鹽水(2x20ml)和0.1N HCl洗。干燥有機相(MgSO4)，并在真空中濃縮，得到淡黃色油狀的所需的產物，將其靜置后結晶。將該物質由二烷冷凍干燥，得到膏狀親液的標題化合物(0.225g，57％)。
LC/MSm/z 495[MH]+，RT 3.77min1H NMR(CDCl3)δH. 0.97(3H，t，J＝7Hz)，1.27(2H，m)，1.77(2H，m)，1.87(2H，m，)，1.97(2H，m)，3.02(2H，t，J＝7Hz)，4.17(4H，m，)，7.1 5(2H，m，J＝9Hz)，8.04(2H，m).
實施例113-丁基-1-{4-[3-(2-吡啶基)-1，2，4-二唑-5-基]丁基}-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮
將5-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]戊酸0.15g，0.4mmol)和CDI(0.078g，0.48mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(5mL)中。將溶液在氮氣氛下在室溫下攪拌1.5小時后，加入2-吡啶基偕氨肟(0.06g，0.44mmol)，并將溶液在90℃下加熱16.5小時。將反應混合物真空濃縮，并通過MDAP純化。蒸發(fā)相關的級分，得到黃褐色固體的標題化合物(0.017g，9％)。
LC/MSm/z 478[MH]+，RT 3.28 min1H NMR(CDCl3)δH0.95(3H，t，J＝7Hz)，1.39(2H，m，J＝7Hz)，1.75(2H，m)，1.84(2H，m)，1.96(2H，m)，3.07(2H，t，J＝7Hz)，4.14(4H，m)，7.41(1H，m)7.84(1H，dt，J＝8 and 2Hz)，8.10(1H，d，J＝8Hz)，8.75(1H，d，J＝4Hz)實施例123-丁基-8-(三氟甲基)-1-(3-{3-[(2，4，6-三氟苯基)甲基]-1，2，4-二唑-5-基}丙基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將4-[3-丁基-2，6-二氧代-8-(三氟甲基)-2，3，6，7-四氫-1H-嘌呤-1-基]丁酸(0.181g，0.5mmol)和CDI(0.089g，0.55mmol)溶于無水二甲基甲酰胺(6mL)中。將溶液在氮氣氛下在室溫下攪拌3小時后，加入2，4，6-三氟芐偕胺肟(0.112g，0.55mmol)，并將溶液在90℃下加熱20小時，然后在110℃下加熱6小時。將反應混合物真空濃縮為黃色油狀物。將其在Teledyne IscoCombiFlashCompanion上，使用35g RediSep silica柱(梯度洗脫氯仿/乙醇0-15％)進行純化。真空蒸發(fā)合適的級分，由二烷冷凍干燥后，得到白色固體的標題化合物(0.122g，46％)。
LC/MSm/z 531[MH]+，RT 3.61min1H NMR(CDCl3)δH.0.97(3H，t，J＝7Hz)，1.41(2H，m)，1.76(2H，m)，2.23(2H，m)，2.95(2H，t，J＝8Hz)，4.00(2H，s)，4.14(2H，t，J＝8Hz)，4.22(2H，t，J＝7Hz)，6.67(2H，t，J＝7Hz).
實施例131-甲基-3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮
a)1-甲基-3-戊基-8-(三氟甲基)-3，7-二氫-1H-嘌呤-2，6-二酮 將6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮(0.042g，0.18mmol)的無水DCM(2ml)溶液用三氟乙酸酐(1ml)處理，并在室溫下攪拌10mins。真空濃縮該溶液，并將殘余物溶于1，4-二烷(15ml)中，并在氫氣氛下用10％Pd/C(70mg)和三氟乙酸酐(0.1ml)反應6小時。將混合物通過Celite過濾，并濃縮濾液，得到紅色油狀物。加入THF(2ml)，隨后加入2M NaOH(水溶液)溶液。將混合物在50℃下加熱10 mins。冷卻后，將混合物在2M HCl(水溶液)和EtOAC之間分配。分離有機層，用鹽水洗，干燥(MgSO4)并濃縮。將標題產物通過MDAP純化，得到白色固體的標題化合物(10mg，19％)。
LC/MS m/z 305[MH+]，RT 3.2mins.
1H NMR；(d6-DMSO)δH0.92(3H，t，J＝7Hz)，1.38(4H，m)，1.80(2H，m)，3.51(3H，s)，4.17(2H，t，J＝8Hz)，13.5(1H，br s).
b)6-氨基-3-甲基-5-亞硝基-1-戊基-2，4(1H，3H)-嘧啶二酮 按照與4-(4-氨基-3-丁基-5-亞硝基-2，6-二氧代-3，6--二氫-1(2H)-嘧啶基)丁酸乙酯相類似的方法進行制備。
在此將本說明書中所引用的全部出版物，包括但并不限于各種專利和專利申請引入作為參考，就好像每篇獨立出版物中的全部內容被具體和獨立引入作為參考一樣。
權利要求
1.選自式(I)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體， 其中R1代表選自下列的基團氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y，其中X代表A、A1、A2或直接的鍵；A代表選自下列的基團亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-CH2-OC(O)-；A1代表選自下列的基團-CH2-O-(CH2)q芳基-O-、-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-、-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-、-CH2-NR5-S(O)2-、CH2-S(O)2NR5-、-CH2-C(O)O-、-O-、-NR5-、-S-；A2代表-CH(OH)-；當X為A、A1或A2時，Y代表選自下列的基團雜芳基、雜環(huán)基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-O(CH2)n-芳基、-C(O)O-芳基、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-C1-6鹵代烷基、-C(O)R4、-NR5R7、-C(O)NR5R7、-NR5C(O)R7、-NR5C(O)OR7、-C(O)(CH2)qOR4、鹵素、氰基、-N(R5)C(O)OR7、-OC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-OC(O)R4；當X為A1時，Y選自-O(CH2)n-芳基、-O-雜芳基、-OR5、-OC(O)R5、-NH-芳基、-OC(O)NR5R6，n為選自2、3、4和5的整數(shù)；當X為A1時，Y為-CF3，或當X為A2時，n為選自1、2、3、4和5的整數(shù)；當X為直接的鍵時，Y代表選自下列的基團-C(O)(CH2)qOR5、-C(O)-芳基、-C(O)-雜芳基、-C(O)-雜環(huán)基、-雜芳基、-雜環(huán)基、-芳基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-C1-6鹵代烷基、-鹵素、-氰基、3或4環(huán)稠合體系、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-OR5、-NR5R7、-NCOOR8、-(O)pC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-(O)pC(O)R4；當Y含有環(huán)時，該環(huán)可任選被一個或多個下列基團所取代C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素、-NH2、(CH2)q-NR5R7、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8、-(CH2)q-N(R5)C(O)R8、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6、-(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6、-(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5、-(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8、-CH2-S(O)2N(R5)R6、-C1-6鹵代烷基、-OCF3、-OCH(F)2、-OCH2F、-COOR5、-OR5、-(R8)pCN，-S(O2)R9、-(CH2)n雜芳基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n芳基；R2選自氫；或C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR4、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)pCONR5R6、-OCONR5R7和-NHC(O)OR7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)t環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)t雜環(huán)基、-(CH2)t芳基和-(CH2)t雜芳基；R8選自C1-4烷基；R9選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基、CN；m代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；p代表選自下列的整數(shù)0和1；q代表選自下列的整數(shù)0、1和2；t代表選自下列的整數(shù)1和2；w代表選自下列的整數(shù)2、3和4；條件是i)當R1代表氫或C1-3烷基時，R2不同于R1；ii)當R1代表乙基，且R3代表CF3時，R2不是CH2-CH＝CH2；和iii)當R1代表甲基，且R3代表CF3時，R2不是異丁基。
2.根據權利要求1的至少一種化學個體，其中R1選自氫、C1-10烷基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y。
3.根據權利要求1或2的至少一種化學個體，其中X代表A或直接的鍵。
4.根據權利要求1或2的至少一種化學個體，其中R1選自氫和C1-6烷基。
5.根據前述權利要求中任一項的至少一種化學個體，其中R2選自C4-6烷基。
6.根據前述權利要求中任一項的至少一種化學個體，其中R3選自氟代C1-6烷基。
7.根據前述權利要求中任一項的至少一種化學個體，其中R3代表CF3。
8.用于人藥或獸藥的根據前述權利要求中任一項的至少一種化學個體。
9.根據權利要求1-7中任一項的至少一種化學個體，其用于治療脂類代謝障礙包括血脂異常和高脂蛋白血癥和/或炎性疾病或病癥。
10.根據權利要求1-7中任一項的至少一種化學個體，其用于治療糖尿病血脂異常，混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥，冠狀動脈疾病，血栓形成，心絞痛，慢性腎衰竭，周圍血管疾病或者中風。
11.選自式(I)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體， 其中R1代表選自下列的基團氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y，其中X代表A、A1、A2或直接的鍵；A代表選自下列的基團亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-CH2-OC(O)-；A1代表選自下列的基團-CH2-O-(CH2)q芳基-O-、-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-、-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-、-CH2-NR5-S(O)2-、CH2-S(O)2NR5-、-CH2-C(O)O-、-O-、-NR5-、-S-；A2代表-CH(OH)-；當X為A、A1或A2時，Y代表選自下列的基團雜芳基、雜環(huán)基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-O(CH2)n-芳基、-C(O)O-芳基、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-C1-6鹵代烷基、-C(O)R4、-NR5R7、-C(O)NR5R7、-NR5C(O)R7、-NR5C(O)OR7、-C(O)(CH2)qOR4、鹵素、氰基、-N(R5)C(O)OR7、-OC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-OC(O)R4；當X為A1時，Y選自-O(CH2)n-芳基、-O-雜芳基、-OR5、-OC(O)R5、-NH-芳基、-OC(O)NR5R6，n為選自2、3、4和5的整數(shù)；當X為A1時，Y為-CF3，或當X為A2時，n為選自1、2、3、4和5的整數(shù)；當X為直接的鍵時，Y代表選自下列的基團-C(O)(CH2)qOR5、-C(O)-芳基、-C(O)-雜芳基、-C(O)-雜環(huán)基、-雜芳基、-雜環(huán)基、-芳基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-C1-6鹵代烷基、-鹵素、-氰基、3或4環(huán)稠合體系、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-OR5、-NR5R7、-NCOOR8、-(O)pC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-(O)pC(O)R4；當Y含有環(huán)時，該環(huán)可任選被一個或多個下列基團所取代C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素、-NH2、(CH2)q-NR5R7、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8、-(CH2)q-N(R5)C(O)R8、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6、-(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6、-(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5、-(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8、-CH2-S(O)2N(R5)R6、-C1-6鹵代烷基、-OCF3、-OCH(F)2、-OCH2F、-COOR5、-OR5、-(R8)pCN，-S(O2)R9、-(CH2)n雜芳基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n芳基；R2選自氫；或C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR4、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)pCONR5R6、-OCONR5R7和-NHC(O)OR7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)t環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)t雜環(huán)基、-(CH2)t芳基和-(CH2)t雜芳基；R8選自C1-4烷基；R9選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基、CN；m代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；p代表選自下列的整數(shù)0和1；q代表選自下列的整數(shù)0、1和2；t代表選自下列的整數(shù)1和2；w代表選自下列的整數(shù)2、3和4；其用于制備治療糖尿病血脂異常，混合血脂異常，心力衰竭，血膽固醇過多癥，心血管疾病包括動脈粥樣硬化、動脈硬化和高甘油三酯血癥，II型糖尿病，I型糖尿病，胰島素耐受性，高脂血癥，神經性厭食癥，肥胖癥，冠狀動脈疾病，血栓形成，心絞痛，慢性腎衰竭或者中風的藥物。
12.治療具有由HM74A受體激活不足所引起的病癥或者受益于激活HM74A受體的病癥的人或動物患者的方法，所述方法包括向所述人或動物患者給藥有效量的選自式(II)化合物及其藥學上可接受的衍生物中的至少一種化學個體， 其中R1代表選自下列的基團氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基和-(亞烷基)m-X-(亞烷基)n-Y，其中X代表A、A1、A2或直接的鍵；A代表選自下列的基團亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-CH2-OC(O)-；A1代表選自下列的基團-CH2-O-(CH2)q芳基-O-、-CH2-O-(CH2)wN(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)O-、-CH2-N(R5)C(O)-、-CH2-(O)p-(CH2)qC(O)NR5-、-CH2-N(R5)C(O)N(R5)-、-CH2-C(O)N((CH2)wOH)-、-CH2-NR5-S(O)2-、CH2-S(O)2NR5-、-CH2-C(O)O-、-O-、-NR5-、-S-；A2代表-CH(OH)-；當X為A、A1或A2時，Y代表選自下列的基團雜芳基、雜環(huán)基、芳基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、-O(CH2)n-芳基、-C(O)O-芳基、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-C1-6鹵代烷基、-C(O)R4、-NR5R7、-C(O)NR5R7、-NR5C(O)R7、-NR5C(O)OR7、-C(O)(CH2)qOR4、鹵素、氰基、-N(R5)C(O)OR7、-OC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-OC(O)R4；當X為A1時，Y選自-O(CH2)n-芳基、-O-雜芳基、-OR5、-OC(O)R5、-NH-芳基、-OC(O)NR5R6，n為選自2、3、4和5的整數(shù)；當X為A1時，Y為-CF3，或當X為A2時，n為選自1、2、3、4和5的整數(shù)；當X為直接的鍵時，Y代表選自下列的基團-C(O)(CH2)qOR5、-C(O)-芳基、-C(O)-雜芳基、-C(O)-雜環(huán)基、-雜芳基、-雜環(huán)基、-芳基、-環(huán)烷基、-環(huán)烯基、-C1-6鹵代烷基、-鹵素、-氰基、3或4環(huán)稠合體系、-CH(芳基)2、-CH(雜芳基)2、-OR5、-NR5R7、-NCOOR8、-(O)pC(O)NR5R6、-NR5C(O)R8、-OR5、-(O)pC(O)R4；當Y含有環(huán)時，該環(huán)可任選被一個或多個下列基團所取代C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、鹵素、-NH2、(CH2)q-NR5R7、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-N(R5)C(O)OR8、-(CH2)q-N(R5)C(O)R8、-(CH2)q-(O)p-(CH2)q-C(O)NR5R6、-(CH2)q-N(R5)C(O)N(R5)R6、-(CH2)q-C(O)N((CH2)mOH)R5、-(CH2)q-N(R5)-S(O)2R8、-CH2-S(O)2N(R5)R6、-C1-6鹵代烷基、-OCF3、-OCH(F)2、-OCH2F、-COOR5、-OR5、-(R8)pCN，-S(O2)R9、-(CH2)n雜芳基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n芳基；R2選自氫；或C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其每個可任選被一個或多個下列基團所取代C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C2-10炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、C1-6鹵代烷基、鹵素、-CN，-OR4、-(CH2)nCOR4、-C(O)OR4、-OCOR4、-(CH2)nNR5R6、-(NH)pCONR5R6、-OCONR5R7和-NHC(O)OR7；R3選自鹵代的C1-6烷基；R4選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基；R5和R6選自氫和C1-4烷基；R7選自氫、C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)t環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)t雜環(huán)基、-(CH2)t芳基和-(CH2)t雜芳基；R8選自C1-4烷基；R9選自C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-(CH2)n環(huán)烷基、-(CH2)n環(huán)烯基、-(CH2)n雜環(huán)基、-(CH2)n芳基和-(CH2)n雜芳基、CN；m代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；n代表選自下列的整數(shù)0、1、2、3、4和5；p代表選自下列的整數(shù)0和1；q代表選自下列的整數(shù)0、1和2；t代表選自下列的整數(shù)1和2；w代表選自下列的整數(shù)2、3和4。
13.根據權利要求12的方法，其中所述人或動物患者患有脂類代謝障礙包括血脂異?；蚋咧鞍籽Y或者炎性疾病或病癥。
14.藥物制劑，其含有根據權利要求1-7中任一項的至少一種化學個體和一種或多種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體。
15.以單獨或組合的藥物制劑形式用于一起或單獨、依次或同時給藥的組合，所述組合包括根據權利要求1-7中任一項的至少一種化學個體以及其它治療活性劑。
16.藥物制劑，其含有(i)根據權利要求1-7中任一項的至少一種化學個體；(ii)一種或多種選自斯特汀、氯貝特類、膽汁酸結合樹脂和煙酸中的活性成分；以及(iii)一種或多種藥學上可接受的稀釋劑、賦形劑或載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及為黃嘌呤衍生物的式(I)的治療活性化合物，制備所述衍生物的方法，含有所述活性化合物的藥物制劑以及所述化合物在治療、特別是在治療由HM74A受體激活不足所引起的疾病或者受益于激活HM74A受體的疾病中的用途。
文檔編號A61K31/522GK101087790SQ200580044356
公開日2007年12月12日 申請日期2005年10月20日 優(yōu)先權日2004年10月22日
發(fā)明者理查德·J·D·哈特利, 伊萬·L·平托 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司