專利名稱：用于關(guān)節(jié)內(nèi)粘彈性補(bǔ)充的方案的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及風(fēng)濕病學(xué)和整形外科。更具體而言，本發(fā)明涉及通過粘彈性補(bǔ)充(viscosupplementation)治療軟骨組織病癥(例如骨關(guān)節(jié)炎)。
背景技術(shù)：
骨關(guān)節(jié)炎(OA)為漸進(jìn)性退化性疾病，特征為關(guān)節(jié)內(nèi)軟骨破壞、關(guān)節(jié)連接中存在的滑液變質(zhì)和伴有骨贅形成的軟骨下骨質(zhì)硬化?；加蠴A的患者通常表現(xiàn)出嚴(yán)重的疼痛，其影響了它們?nèi)粘Ｉ畹脑S多方面。OA的流行隨著年齡而增加，超過60％的60歲或更年長的那些人可能患有某些軟骨異常(Bjelle(1982)Scand.J.Rheumatol.Suppl.，4335-48)。OA已經(jīng)成為關(guān)節(jié)炎中花費(fèi)最高的形式，總計(jì)占西方國家國民生產(chǎn)總值達(dá)1-2.5％(Reginster(2002)Rheumatology，41(Suppl.1)3-6)。
滑液潤滑和保護(hù)關(guān)節(jié)內(nèi)的關(guān)節(jié)面。該液體主要由高分子量的多糖透明質(zhì)烷(HA，透明質(zhì)酸的鈉鹽，也稱為透明質(zhì)酸鈉)。在正常人滑膜關(guān)節(jié)液體中HA的濃度為約3mg/ml。HA由N-乙酰葡糖胺和葡萄糖醛酸鈉的重復(fù)二糖單元組成(圖1)。在正常的關(guān)節(jié)滑液中的HA包含12,500個(gè)二糖單元，總分子量(MW)為5MDa(Balazs等(1993)J.Rheumatol.Suppl.，393-9)。在OA患者中，滑液中HA的濃度和MW降低，導(dǎo)致保護(hù)軟骨的液體的能力的減少。
已經(jīng)表明，關(guān)節(jié)內(nèi)注射包含高分子量HA的彈粘性溶液可恢復(fù)患病關(guān)節(jié)的正常內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。這一過程，稱為粘彈性補(bǔ)充，已證實(shí)可有效地減少疼痛和增加關(guān)節(jié)功能(參見，例如Balazs等(1993)J.Rheumatol.Suppl.，393-9；Wobig(1998)Clin.Ther.，20(3)410-423).
許多基于HA粘彈性補(bǔ)充劑為市售的，且新產(chǎn)品正在研究中。粘彈性補(bǔ)充劑在許多特性方面不同，若有的話，包括，例如，HA的來源(動(dòng)物-衍生的或細(xì)菌)，HA的濃度和MW，使用的類型和化學(xué)交聯(lián)度。通常，大部分粘彈性補(bǔ)充劑包含5-15mg/ml HA，一旦注射具有的存留半衰期為幾小時(shí)至幾天。將這樣的粘彈性補(bǔ)充劑以2-3ml單位容積注射到膝中，每隔一周分別注射三至五次。在某些情況下，疼痛緩解可發(fā)生在幾天內(nèi)，連續(xù)持續(xù)幾周，通常持續(xù)幾個(gè)月，甚至達(dá)到一年。例如，已經(jīng)證實(shí)，在每周給藥，三次(每次2ml)Synvisc(hylan G-F 20；Genzyme Corp.，Cambridge，MA)的膝粘彈性補(bǔ)充比在6個(gè)月內(nèi)用非甾體抗炎藥(NSAIDs)的連續(xù)口服加關(guān)節(jié)穿刺術(shù)的治療(Adams等(1995)Osteoarthritis and Cartilage，3213-225)至少要好，或較好，且比生理鹽水安慰劑或關(guān)節(jié)穿刺術(shù)對(duì)照更有效(Moreland(1993)Am.Coll.Rheumatol.(57th Ann.Sci.Meeting，Nov.7-11，San Antonio，TX)，165；Wobig(1998)Clin.Ther.，20(3)410-423)。
連續(xù)多次注射被認(rèn)為對(duì)于延長治療骨關(guān)節(jié)炎疼痛的(六個(gè)月或一年)效果是必需的，主要是因?yàn)榇蟛糠终硰椥匝a(bǔ)充劑的存留半衰期短(Peyron(1993)J.Rheumatol.，20(Suppl.39)10-15)。例如，如在兔子中測(cè)定時(shí)，1％具有平均MW為1.7-2.6MDa的HA的關(guān)節(jié)內(nèi)存留半衰期為11小時(shí)。當(dāng)HA的MW增加時(shí)，存留半衰期也延長(例如，其中HA的平均MW為6MDa的1％hylan A具有的半衰期為1.2±1天)。然而，即使是不溶性凝膠，例如包含0.4％HA的hylan B，具有7.7±1天的相對(duì)短的存留半衰期。按照半衰期數(shù)據(jù)，對(duì)于減少OA疼痛而言，與二次2ml注射相比，將三次2ml的Synvisc注射入OA膝中證實(shí)可顯著地更有效(Scale等(1994)Curr.Ther.Res.，55(3)220-232)。
對(duì)于用Synvisc治療患有髖部OA的患者，推薦劑量為一次2ml注射，如果沒有感受到足夠的疼痛緩解，可在一至三月內(nèi)進(jìn)行第二次任選的注射給藥(Chevalier(2000)Am.Coll.Rheumatol.(64th AnnualScientific Meeting，Oct.30-Nov.3，Philadelphia，PA))。在髖部OA患者中，截止三個(gè)月(研究的持續(xù)時(shí)間)內(nèi)，在大多數(shù)登記得患者中，以2ml單次關(guān)節(jié)內(nèi)注射Synvisc顯示出即刻的和持續(xù)的癥狀療效。還沒有研究與多次注射2-3ml或單次注射2ml相比，用更少次注射較大體積的粘彈性補(bǔ)充劑例如Synvisc(例如4、6ml或更多)是否可提供相等的或較好的功效。就目前已知的而言，使用較大體積可造成局部副作用例如疼痛、腫脹和滲出的危險(xiǎn)。
DurolaneTM(Q-Med AB，Uppsala，Sweden)為被推薦以3ml注射一次的唯一粘彈性補(bǔ)充劑。其為環(huán)氧交聯(lián)的粘彈性補(bǔ)充劑，具有較長報(bào)告的半衰期(4周)和較高的HA(20mg/ml)。延長的保留時(shí)間被認(rèn)為使注射次數(shù)減少。然而，單次注射DurolaneTM沒有證實(shí)高于安慰劑的統(tǒng)計(jì)學(xué)益處(Altman等(2004)Osteoarthritis and Cart.，12642-649)。
這樣，在本發(fā)明之前，還不知道單次注射基于HA的粘彈性補(bǔ)充劑，尤其是一種具有短保留期的，是否可產(chǎn)生想要的長期治療效果。
利用較少次注射提供了高于多次注射明顯的優(yōu)點(diǎn)，包括避免了副作用、降低了成本和較好的患者順應(yīng)性。仍舊存在研究新的粘彈性補(bǔ)充治療的需要，其能提供對(duì)OA患者的有效緩解，而不需要多次注射。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供用于治療關(guān)節(jié)病癥和用于減少與此病癥有關(guān)的疼痛和不適的的方法和組合物。這種病癥的實(shí)例包括骨關(guān)節(jié)炎和關(guān)節(jié)損傷。
本發(fā)明是，至少部分是，基于發(fā)現(xiàn)了單次關(guān)節(jié)內(nèi)注射較大體積的粘彈性補(bǔ)充劑可提供相當(dāng)于小體積連續(xù)注射產(chǎn)生的長期治療益處。在進(jìn)行與本發(fā)明有關(guān)的研究中，一組膝OA患者接受如下標(biāo)準(zhǔn)順序的治療在三周期間內(nèi)，在膝部，注射Synvisc三次，每次2ml；而另一組接受在同等條件下的6ml的單次注射。出人意外地是，如在治療后26周評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)治療效果在兩組中是相當(dāng)?shù)?。因此，單次注射較大體積的粘彈性補(bǔ)充例如Synvisc可以和幾次小體積注射同樣有效，而保持了良好的安全特性。
因此，本發(fā)明提供用基于HA的粘彈性補(bǔ)充劑用于關(guān)節(jié)內(nèi)粘彈性補(bǔ)充的方案，所述粘彈性補(bǔ)充劑特別是具有關(guān)節(jié)內(nèi)存留半衰期(T1/2)短于3周的粘彈性補(bǔ)充劑。在本發(fā)明中使用的粘彈性補(bǔ)充劑可進(jìn)一步表征為其中它們包含小于20mg/ml HA(衍生的和/或非衍生的)，其中至少5％為凝膠形式，比如例如hylan B。在一個(gè)說明性的實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑為hylan G-F 20(Synvisc)，其包含8±2mg/ml HA，其中10％重量為凝膠形式。
在某些實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑以足量單次注射給藥，在注射后，所述劑量提供了達(dá)6個(gè)月的治療效果。在某些實(shí)施方案中，大體積單次注射的治療效果基本上與在治療過程內(nèi)三次注射給藥(每次大體積的1/3)獲得的相同。在一個(gè)說明性的實(shí)施方案中，在三周期間內(nèi)，Synvisc以6ml單次注射給藥，而不是三次2ml注射。
也提供給藥的方法、組合物和在本發(fā)明的方法中使用的裝置。
上述簡(jiǎn)述及其后的說明并不是限制要求保護(hù)的本發(fā)明。


圖1圖解了透明質(zhì)烷(透明質(zhì)酸鈉)的結(jié)構(gòu)。
具體實(shí)施例方式
定義術(shù)語“關(guān)節(jié)內(nèi)半衰期”、“存留半衰期”和它們的同源詞指如下時(shí)間，其為適于將給定的粘彈性補(bǔ)充劑注射入關(guān)節(jié)內(nèi)區(qū)域的任何時(shí)間中較大(的時(shí)間)(a)清除50％注射的HA凝膠組分需要的時(shí)間；(b)清除50％注射的HA液體組分需要的時(shí)間；和(c)清除50％HA需要的時(shí)間，無論其是否為液體、凝膠或另一種形式。用于計(jì)算存留半衰期的目的，除非另有說明，注射被認(rèn)為是給藥進(jìn)入成年人的膝關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)內(nèi)區(qū)域。用于測(cè)定存留半衰期的方法是本領(lǐng)域已知的，說明性的方法為在實(shí)施例中描述的。
術(shù)語“HA液體”、“HA液體相”、“HA液體組分”、“可溶性HA”和它們的同源詞指具有小于20MDa的平均MW的非交聯(lián)的或微交聯(lián)的(lightly crosslinked)水溶性HA。
術(shù)語“HA凝膠”、“HA凝膠相”、“HA凝膠組分”和它們的同源詞指HA凝膠，其為不包含可溶性HA或包含小于10％(w/w)可溶性HA的基于HA的組合物的水不溶性部分。典型地，給定基于HA的組合物中凝膠的含量可以通過從HA液體中分離HA凝膠來測(cè)定，所述組合物包含HA凝膠和HA液體的混合。分離可通過例如45μ過濾器過濾組合物來實(shí)現(xiàn)，所述過濾器使可溶性HA穿過，而保留不溶相。為了使更粘性組合物中的可溶性HA從HA凝膠中的釋放達(dá)到最大，需要在過濾前用幾體積有或沒有使其達(dá)到平衡的溶劑稀釋組合物。而且，通常，基于它們的流變學(xué)性質(zhì)，純凝膠可與純液體區(qū)分，所述流變學(xué)性質(zhì)例如儲(chǔ)能(彈性的)模量(storage(elastic)modulus(G′)和損耗(粘性的)模量(loss(viscous)modulus)(G″)，其分別表示隨著變形速率(測(cè)試頻率)的改變，物質(zhì)可以回收(彈性應(yīng)答(elasticresponse))或流動(dòng)(粘性應(yīng)答(viscous response))的相對(duì)程度。這兩個(gè)模量都為頻率的線性函數(shù)。它們已被證明是聚合物溶液和凝膠結(jié)構(gòu)的靈敏的探針。G′和G″隨著頻率的增加而增加，但是一個(gè)比另一個(gè)增加的更快。在其中G′＝G″時(shí)，該頻率被稱為交叉頻率(fc)。交叉頻率隨著聚合物分子量或濃度的增加而降低。對(duì)于在低頻率的聚合物溶液，彈性應(yīng)力松弛和粘應(yīng)應(yīng)力占主導(dǎo)，因此，在頻率低于fc時(shí)，G″大于G′。相反，對(duì)于凝膠，不會(huì)存在G′和G″交叉，在頻帶中G′大于G″。除非另有說明，測(cè)試頻率為0.04-7Hz。對(duì)于粘彈性材料的物理性能和測(cè)定這些性質(zhì)的方法的綜述，參見，例如“Polymers as RheologyModifiers”，由Schulz和Glass編輯，ACS Symposium Series 462，1991；“An Introduction to Rheology，”H.A.Bames，J.F.Hutton和K.Walters，Elsevier，1989；和Bohlin Rheometer Application NotesMRK544-01，MRK556-01和MRK573-01。
術(shù)語“HA”、“透明質(zhì)酸鹽”、“透明質(zhì)烷”可交換使用，除非另有說明，指任意HA，而不考慮來源(細(xì)菌發(fā)酵的或動(dòng)物衍生的)、分子量、其物理形式(例如凝膠或液體)，或存在或不存在化學(xué)改性(例如交聯(lián)的或其它衍生化的)或制備方法。
方案本發(fā)明提供粘彈性補(bǔ)充方法和相關(guān)的方法。根據(jù)本發(fā)明，粘彈性補(bǔ)充方法包括在3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26周內(nèi)單次關(guān)節(jié)內(nèi)注射給藥粘彈性補(bǔ)充劑，給藥量足以在注射后提供達(dá)4、5或6個(gè)月的治療效果。在某些實(shí)施方案中，大體積單次注射的治療效果基本上與在治療過程內(nèi)三次注射給藥(每次為大體積的1/3)獲得的相同。在某些實(shí)施方案中，單次注射方案提供在注射后關(guān)節(jié)痛減少直至4、5或6個(gè)月。
治療效果可以通過任意適宜的方法(參見，例如，Altman等(1996)Osteoarth.Cart.，4217-243)評(píng)價(jià)。例如，治療效果可通過測(cè)定關(guān)節(jié)痛的減少來評(píng)價(jià)。關(guān)節(jié)痛的程度可以根據(jù)五點(diǎn)Likert分類(例如沒有、輕度、中度、嚴(yán)重、非常嚴(yán)重)，或者按如在實(shí)施例中描述的100mm直觀類比尺(scale)(VAS)分類。其它適宜的疼痛指數(shù)包括健康狀態(tài)評(píng)估調(diào)查表(HAQ)(Fries等(1980)Arthritis Rheumatol.，23137-145)和關(guān)節(jié)炎影響檢測(cè)尺(Arthritis Impact Measurement Scale)(AIMS)(Meenan等(1980)Arthritis Rheumatol.，23146-154。
治療效果也可通過測(cè)定功能缺損程度的改善來評(píng)價(jià)。功能缺損可使用分離有效的多維指數(shù)(segregated validated multidimensionalindex)(SMI)，例如用于髖部和膝OA的Western Ontario和McMaster′s大學(xué)(WOMACTM)OA指數(shù)(Bellamy等人(1988)J.Rheumatol.341833-1840；也參見實(shí)施例)；或聚集的多維指數(shù)(aggregatedmultidimensional index)(AMI)，例如用于髖部或膝的痛-函數(shù)指數(shù)(Algo-Functional Index)(AFI)(Lequesne等人(1987)Scand.J.Rheumatol.Suppl.，6585-89)。
治療效果也可由患者或醫(yī)師通過總體狀況評(píng)估來評(píng)價(jià)。總體狀況可利用Likert或VAS尺來評(píng)價(jià)，例如在實(shí)施例中描述的。
治療效果的其它標(biāo)記可包括關(guān)節(jié)檢查(參見，例如Theiler等人(1994)Osteoarth.Cart.，21-24)，基于性能測(cè)定(performance basedmeasures)(參見，例如Rejeski等人(1995)Osteoarth.Cart.，3157-168)等。
在某些實(shí)施方案中，給藥進(jìn)入膝關(guān)節(jié)的粘彈性補(bǔ)充劑的量為6±2ml或更高，例如4、4.25、4.5、4.75、5、5.25、5.5、5.75、6、6.25、6.5、6.75、7、7.25、7.5、7.75、8ml或更高。
粘彈性補(bǔ)充劑在本發(fā)明的方法中使用的基于HA的粘彈性補(bǔ)充劑具有下述任一項(xiàng)、任兩項(xiàng)或所有的特征(i)粘彈性補(bǔ)充劑具有小于3周的存留半衰期。
(ii)粘彈性補(bǔ)充劑包含小于20mg/ml HA；
(iii)在粘彈性補(bǔ)充劑中5％(w/w)或更高的HA為凝膠形式。
在一個(gè)說明性的實(shí)施方案中，在本發(fā)明中使用的粘彈性補(bǔ)充劑為Synvisc。Synvisc包含兩種形式的8±2mg/ml HA可溶性形式，hylan A(平均MW 6,000kDa)和在生理學(xué)可接受的溶液中的水合凝膠形式，hylan B。按HA的重量計(jì)，在Synvisc中的hylan A/hylan B比例為9∶1。Hylan A為通過用少量醛共價(jià)交聯(lián)來化學(xué)改性的水溶性透明質(zhì)烷，所述醛典型地為甲醛，而hylan B為用二乙烯砜進(jìn)一步交聯(lián)的hylan A。Hylan液體為水合的hylan A，用少量交聯(lián)進(jìn)行的改性形式的透明質(zhì)烷，所述交聯(lián)增加了其平均分子量和增加了其粘彈性性質(zhì)。Hylan凝膠為hylan B的水合形式，其為使用二乙烯砜作為雙功能的交聯(lián)劑通過將hylan A交聯(lián)成連續(xù)聚合的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)制備的。
通常，在本發(fā)明提供的方案中使用的粘彈性補(bǔ)充劑包括具有關(guān)節(jié)內(nèi)存留半衰期短于22天例如21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4和3天的基于HA的粘彈性補(bǔ)充劑。在某些實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑的存留半衰期大于2、3、4、5、6或7天。
在本發(fā)明中使用的粘彈性補(bǔ)充劑可進(jìn)一步表征為其中它們包含小于20mg/ml HA，例如在1-15、1-10、1-5、5-15、5-10、10-15、6-10和7-9mg/ml的范圍。在給定組合物中的HA的含量可通過任意適宜的方法測(cè)定，如例如在實(shí)施例中描述的方法。
在本發(fā)明中使用的粘彈性補(bǔ)充劑組合物可進(jìn)一步表征為其中在粘彈性補(bǔ)充劑中至少10％重量的HA為凝膠形式。例如，在某些實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑包含至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更高的HA凝膠。在某些實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑包含10-90％、10-75％、10-50％、10-40％、10-25％HA凝膠。在某些實(shí)施方案中，在粘彈性補(bǔ)充劑中HA凝膠/HA液體的比例包含1∶50-10∶1(w/w)，例如1∶50、1∶25、1∶15、1∶10、1∶9、1∶8、1∶7、1∶6、1∶5、1∶4、1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1、8∶1、9∶1和10∶1。
在本發(fā)明的方法中使用的粘彈性補(bǔ)充劑可進(jìn)一步在液體相中包含水溶性的HA，其具有HA的MW為500-20,000kDa，例如500-1,000；500-1,500、500-3,000；500-5,000；500-7,000；500-10,000；500-15,000；1,000-1,500；1,000-3,000；1,000-5,000；1,000-7,000；1,000-10,000；1,000-15,000；5,000-10,000；和10,000-15,000kDa。
HA可以是動(dòng)物源的，例如來源于公雞冠或臍帶或非動(dòng)物源，例如細(xì)菌發(fā)酵的。細(xì)菌發(fā)酵的HA可以如在例如Cooney等人(1999)Biotechnol.Prog.，15898-910中描述的。細(xì)菌發(fā)酵的HA也可以為市售的(例如Shiseido，Japan；Sigma-Aldrich，USA)。
HA可以是衍生的(例如交聯(lián)的或另外改性的或穩(wěn)定的)或非衍生的。交聯(lián)劑的實(shí)例包括醛、環(huán)氧化物、polyaziril、縮水甘油醚(例如1，4-丁二醇二縮水甘油醚)和二乙烯砜。
在本發(fā)明的方法中使用的粘彈性補(bǔ)充劑的特定實(shí)例包括AdantTM、ArthreaseTM、ArthrumTM、FermathronTM、GoonTM、HyalartTM/HyalganTM、Hy-GAGTM、Hya-jectTM、HyalubrixTM、NeoViscTM、SupartzTM/ArtzTM、Synvisc、OrthoviscTM、OstenilTM、SinovialTM、SuplasynTM和SynochromTM、ViscornealTM(參見，例如Physicians′Desk ReferenceTM，2004)。其它適宜在本發(fā)明的方法中使用的產(chǎn)物包括在美國專利Nos.5,143,724；4,713,448；5,099,013；5,399,351；6,521,223；5,827,937；美國專利申請(qǐng) No.60/533,429中描述的粘彈性補(bǔ)充劑。
包括hylan A和hylan B的hylans和粘彈性補(bǔ)充劑的制備為在例如美國專利Nos.5,143,724；4,713,448；5,099,013和5,399,351中描述的。
在某些實(shí)施方案中，粘彈性補(bǔ)充劑不包括DurolaneTM和/或其它的具有存留半衰期比21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50天長的粘彈性補(bǔ)充劑。
粘彈性補(bǔ)充劑也可包含另外的活性或無活性化合物，包括例如非甾體抗炎藥(NSAIDs)，例如IbuprofenTM、DiclofenacTM和PiroxicamTM；麻醉劑例如，LidocaineTM和BupivacaineTM；麻醉性鎮(zhèn)痛劑，例如，可待因和嗎啡；皮質(zhì)類固醇，例如，地塞米松和潑尼松；抗腫瘤劑例如MethotrexateTM，5-氟尿嘧啶和PaclitaxelTM和抗病毒劑，例如，AcyclovirTM和VidarabineTM。粘彈性補(bǔ)充劑也可包含組分例如細(xì)胞(例如軟骨細(xì)胞或間充質(zhì)干細(xì)胞)、蛋白質(zhì)、DNA、維生素或其它想要的生物學(xué)活性物質(zhì)。
用途和給藥本發(fā)明提供用于治療患有關(guān)節(jié)病癥的患者和用于減少與這種病癥有關(guān)的疼痛和不適的方法和組合物。這種病癥的實(shí)例包括骨關(guān)節(jié)炎(原發(fā)性(自發(fā)性)或繼發(fā)性)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)損傷(例如重復(fù)性的運(yùn)動(dòng)損傷)、軟骨組織病癥(軟骨軟化)和關(guān)節(jié)炎前狀況。本發(fā)明進(jìn)一步提供減少與這種病癥有關(guān)的疼痛的方法。該方法可在需要用于關(guān)節(jié)病癥治療的人類中或在非人類患者中實(shí)施。
給藥部位的實(shí)例包括膝的、肩膀的、顳下頜的和腕掌的關(guān)節(jié)、肘、髖部、腕、踝和在脊柱中腰椎關(guān)節(jié)突(小平面)的關(guān)節(jié)。注射到任一個(gè)這些關(guān)節(jié)中的體積將至少為用于那些關(guān)節(jié)的目前推薦劑量的雙倍。
本發(fā)明進(jìn)一步提供粘彈性補(bǔ)充裝置，包括前灌注的、單次使用的注射器，其包含6±2ml的單次單元?jiǎng)┝康腟ynvisc，例如4、4.25、4.5、4.75、5、5.25、5.5、5.75、6、6.25、6.5、6.75、7、7.25、7.5、7.75、8、8.25、8.5、8.75、9、9.25、9.5、9.75、10ml或更多。盡管其優(yōu)選地提供使用本文中提供的單次注射器的單次給藥劑量，但是需要的劑量可以由兩個(gè)或多個(gè)注射器提供。例如，單次給藥6ml可以使用每個(gè)包含2ml的3個(gè)注射器完成。
下述實(shí)施例提供說明性的實(shí)施方案。所述實(shí)施例不以任何方式限制本發(fā)明。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到在本發(fā)明的范圍內(nèi)可進(jìn)行多種修飾和改變。因此，這樣的修飾和改變包括在本發(fā)明內(nèi)。
實(shí)施例實(shí)施例1在患有OA的患者中Synvisc的關(guān)節(jié)內(nèi)注射進(jìn)行預(yù)期的、開放標(biāo)記的研究用于評(píng)價(jià)在患有有癥狀的脛腿節(jié)OA(在研究的膝中的總體OA疼痛，在100mm VAS尺上為50-80)的非臥床病人中進(jìn)行關(guān)節(jié)內(nèi)注射4ml或6ml Synvisc的安全和功效(包括作用的持續(xù)時(shí)間)，所述關(guān)節(jié)內(nèi)注射4ml或6ml Synvisc與目前三次關(guān)節(jié)內(nèi)注射2ml Synvisc的配藥方案相反。包含的其它條件為年齡在40歲以上；最近的3個(gè)月內(nèi)通過X射線測(cè)定的Kellgren-Lawrence等級(jí)為II-III；沒有壓力滲出液(tense effusion)、機(jī)能損耗(mechanicaldeficit)或最近(＜2年)的創(chuàng)傷。將100名患者(從59到66歲，平均年齡61年，55％女性)隨機(jī)分為五組第1組一次注射6ml；第2組一次注射4ml；第3組隔兩周注射4ml兩次；第4組隔一周注射4ml三次；和第5組標(biāo)準(zhǔn)方案隔一周注射2ml三次然后，隨訪患者6個(gè)月(在第2、3、8、16和24周)。使用的第一和第二評(píng)價(jià)點(diǎn)為如下所述的A.OA疼痛的患者自我評(píng)價(jià)該研究的基本功效點(diǎn)用于評(píng)價(jià)在患有膝OA的患者中用Synvisc粘彈性補(bǔ)充對(duì)研究膝OA疼痛緩解的功效。這點(diǎn)可在過去的48小時(shí)內(nèi)患者自我評(píng)價(jià)的100mm VAS上測(cè)定，沒有疼痛的點(diǎn)(0mm)至極度疼痛(100mm)；在第一次注射后的24周進(jìn)行。
B.患者總體自我評(píng)價(jià)患者在100-mm VAS上估計(jì)它們的靶標(biāo)膝的整體狀況，100-mmVAS其從很好(0mm)至很差(100mm)，考慮48小時(shí)內(nèi)所有相關(guān)的體征和癥狀。呈給患者的準(zhǔn)確說明為下述的“請(qǐng)利用下面的垂直線指出你的(研究)膝在這次探訪時(shí)的整體一般狀況左側(cè)或‘0’分表示‘非常好’，而‘100’分表示‘非常差’”。
C.WOMACTM患者完成了WOMACTM的VAS模型(version)，如在Bellamy等的(1988)J.Rheumatol.，15(12)1833-40中描述的。該尺為三維的、疾病特異性、自己管理的、健康狀態(tài)測(cè)定方法。其探查疼痛區(qū)域內(nèi)、四肢強(qiáng)直和軀體功能總共24個(gè)問題的臨床重要的患者相關(guān)的癥狀。將WOMACTM以當(dāng)?shù)卣Z言提供給患者，通常在小于5分鐘內(nèi)完成。
WOMACTM的分部為下述的。
WOMACTM部分A包括有關(guān)活動(dòng)期間疼痛水平的詢問，用沒有疼痛(0mm)至極疼痛(100mm)的VAS對(duì)回答評(píng)分(由患者)。疼痛的評(píng)價(jià)采用下述方案1.在平面上行走？[走]2.上樓或下樓？[爬樓梯]3.在晚上在躺床上時(shí)？[夜間的]4.坐著或躺著？[靜止]5.站直？[負(fù)重]WOMAC部分A的平均得分是基于每人對(duì)部分A問題的回答。
WOMACTM部分B(四肢強(qiáng)直評(píng)分)包括有關(guān)活動(dòng)期間強(qiáng)直嚴(yán)重性的詢問，用沒有四肢強(qiáng)直(0mm)至極端四肢強(qiáng)直(100mm)的VAS對(duì)回答評(píng)分(由患者)。四肢強(qiáng)直的評(píng)價(jià)采用下述方案1.在早晨蘇醒后？[早晨四肢強(qiáng)直]2.在白天剩余的后來時(shí)間(duing rest later in the day)？[在白天晚些存在的四肢強(qiáng)直]部分B的平均得分是基于每人對(duì)部分B問題的回答。
WOMCCTM部分C包括有關(guān)活動(dòng)期間功能缺損的詢問，用沒有困難(0mm)至極困難(100mm)的VAS對(duì)回答評(píng)分(由患者)。功能缺損的評(píng)價(jià)采用下述方案1.下樓梯？[早晨四肢強(qiáng)直]2.上樓梯？[在白天晚些存在的四肢強(qiáng)直]3.從坐著站立？[起立]4.站？[站]5.彎向地板？[彎曲]6.在平面上行走？[平走]7.上下車？[汽車]
8.上街？[購物]9.穿短襪/長襪[脫短襪/長襪]10.臥床[臥床]11.進(jìn)入/出浴池[進(jìn)/出浴池]12.坐[坐]13.上/下洗手間[上/下洗手間]14.重的家庭工作[重的家務(wù)]15.輕的家庭工作[輕的家務(wù)]部分C的平均得分是基于每人對(duì)部分C問題的回答。
從總WOMACTM得分基線上的改變來自分析在第一次注射后作為第二端點(diǎn)的所有時(shí)間點(diǎn)的3個(gè)WOMACTM部分(A、B和C)。
D.醫(yī)師OA總體評(píng)價(jià)在患者完成總體評(píng)價(jià)和WOMACTM后，研究者用從很好(0mm)至很差(100mm)的100-mm VAS評(píng)價(jià)探訪時(shí)患者膝的整體狀況。這一評(píng)價(jià)是基于患者的病征、功能能力和身體檢查。醫(yī)師被要求指出在這次探訪時(shí)患者膝的整體一般狀況，利用具有如下特征呈現(xiàn)的線(line)線的左側(cè)(“0”)端指“很好”，右端(“100”)指“非常差”。
E.結(jié)果在第一次注射后24周，與基線相比表現(xiàn)出疼痛減少的結(jié)果(在過去48小時(shí)內(nèi)的VAS；0相當(dāng)于沒有疼痛，100相當(dāng)于極疼)顯示在表1中。與在3×2ml組中的36.7mm相比，在1×6ml組中疼痛按34.9mm減少，其得分是最好的。在用1×4或2×4ml治療組中，這一減少相當(dāng)少(僅24mm減少)。
表1.OA疼痛的患者自我評(píng)價(jià)(自基線的變化)


包括疼痛、四肢強(qiáng)直和功能缺損改善的第二功效點(diǎn)，如通過Western Ontario和McMaster Universities Osteoarthritis指數(shù)(WOMACTM)(表2為WOMACTMA)、患者(表3)和醫(yī)師(表4)總體膝OA評(píng)價(jià)測(cè)定的，顯示出相同的趨勢(shì)。按照功效和結(jié)果排序的處理組顯示在表5中。在第1組中觀察的效果的延長持續(xù)時(shí)間是令人驚奇的。依據(jù)安全性，在每個(gè)組(1×6ml和3×2ml)中10％的患者報(bào)告了最少強(qiáng)度或中等強(qiáng)度的相關(guān)局部膝副作用(adverse events)(疼痛、腫脹或滲出)。
表2.WOMACTMA疼痛得分(自基線的變化)

表3.患者總體評(píng)價(jià)(自基線的變化)

表4.醫(yī)師總體評(píng)價(jià)(自基線的變化)

表5處理組排列

關(guān)于安全性，在處理組之間沒有觀察到大的差異，一般而言，僅僅第1組(1×6ml)具有最小副作用。這些結(jié)果也建議比2ml大的Synvisc體積可安全地給藥，以減少患有膝骨關(guān)節(jié)炎的患者的疼痛。
實(shí)施例2Synvisc存留半衰期的測(cè)定A.將14C-乙酸酯加入到公雞冠的器官培養(yǎng)物的透明質(zhì)烷中用頸脫位法處死幼公雞(3-6個(gè)月齡)。用(80％)乙醇徹底地清洗雞冠，然后，利用解剖刀在基部切除。將過量的血從雞冠中擠出，將其放置在無菌鹽溶液中，轉(zhuǎn)移到層流凈化罩中，用另外體積的無菌鹽溶液清洗三次。然后，沿著血管中線解剖雞冠，切除長方形的粉紅色皮組織部分。用解剖刀將雞冠組織部分切成切片，放置在Ventrex培養(yǎng)基HL-1(Ventrex Labs)中5mg/ml丙酸睪丸酮(Belmar Laboratories，Inwood，NY)、20μ Ci/ml的14C-醋酸(ICN Radiochemicals，Irvine，CA1mCi/ml)、0.1mg/ml青霉素、0.1mg/ml鏈霉素和0.1mg/ml兩性霉素B(Hazelton，Lenexa，KS)。將單獨(dú)培養(yǎng)物置入60mm塑料陪替培養(yǎng)皿中，其包含約1.5g的雞冠組織和15ml的培養(yǎng)基。在5％CO2環(huán)境中培養(yǎng)培養(yǎng)物72小時(shí)，之后，通過在10,000g離心10分鐘將組織從培養(yǎng)基中分離。將組織片冷凍在30mm陪替培養(yǎng)皿中。典型地，在繼續(xù)制備hylan的過程前，將冷凍的雞冠組織保存在冰箱中1-72小時(shí)。
B.放射標(biāo)記的hylan液體的制備Hylan A纖維為如下制備的。將冷凍的放射標(biāo)記的雞冠組織的切片以0.75 g組織每1g反應(yīng)培養(yǎng)基的比例放置在反應(yīng)培養(yǎng)基中，所述反應(yīng)培養(yǎng)基包含丙酮、福爾馬林(37％甲醛溶液)、氯仿和醋酸鈉。允許反應(yīng)進(jìn)行18-20小時(shí)，之后采集組織切片，在丙酮中洗滌三次，然后在層流凈化罩中干燥。然后，將四體積的蒸餾水加入到干的組織切片中，以便提取放射標(biāo)記的hylan。該水溶液提取在4-6℃下進(jìn)行，之后，除去水提物，加入同樣體積的水，進(jìn)行第二次提取。將固體醋酸鈉溶解在含水提取物中至濃度為1％，通過緩慢加入四體積的95％乙醇沉淀hylan纖維。在丙酮中洗滌放射標(biāo)記的hylan纖維兩次，將其儲(chǔ)存在冷的丙酮下。
集中放射標(biāo)記的hylan A纖維(40.3mg)，通過在4℃緩慢的翻滾式混合(end-over-end mixing)3天，將其溶解在3.0ml無菌、無熱原的磷酸鹽緩沖鹽水溶液(Biotrics Inc.，Ridgefield， NJ，Iot 122-1)中。在完成溶解后，用未標(biāo)記的hylan液體稀釋放射性hylan液體五倍。將混合物在4℃以翻滾式混合保存另外5天。
C.放射標(biāo)記的凝膠的制備將氚化水(New England Nuclear，100mCi/ml)混入用于將hylan液體(hylan A)交聯(lián)成hylan凝膠(hylan B)的反應(yīng)混合物中。按如下進(jìn)行交聯(lián)反應(yīng)。將Hylan A纖維在氚化水中膨脹約三小時(shí)。加入濃縮氫氧化鈉，強(qiáng)力攪拌混合物直到溶液為均相的(約15分鐘)。在水中，將二乙烯砜稀釋至50％的濃度，在強(qiáng)力攪拌下，將其加入反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)混合物保存在在室溫下(22℃)另外55分鐘，期間，通過二乙烯砜將多糖鏈交聯(lián)成連續(xù)聚合的凝膠(hylan凝膠)。通過在氚化水中進(jìn)行該反應(yīng)，氚共價(jià)附著在二乙烯基磺酰基交聯(lián)內(nèi)的碳上。通過加入十體積的無菌無熱原的鹽溶液以降低pH低于12來終止該反應(yīng)。生理鹽水洗滌也引起hylan凝膠腫脹至其飽和水合(equilibrium hydration)。用生理鹽水洗滌hylan凝膠以除去未反應(yīng)的二乙烯砜、未反應(yīng)的氚及其它反應(yīng)產(chǎn)物，并使pH降至7。通過過濾從凝膠中分離過量的生理鹽水，之后，使凝膠穿過25g針5次，使固體凝膠分裂成易于可注射的形式。在這種形式中，用無菌無熱原的生理鹽水徹底地滲析氚化的凝膠以除去任意非共價(jià)結(jié)合的氚。
D.hylan凝膠-hylan液體混合物的制備將氚化的hylan凝膠(3.04g)直接加入到11.63g的14C-hylan液體中，將混合物置于Glen粉碎混合機(jī)中48小時(shí)。然后，使混合物連續(xù)穿過18g、21g和25g針10次，以確保均勻性和易于注射。
E.HA濃度和放射性標(biāo)記量的測(cè)定混合物的凝膠和液體組分中hylan多糖的濃度為通過用于試驗(yàn)其重復(fù)葡糖醛酸單體(3)的自動(dòng)化卡唑法來測(cè)定，并乘以(2.07)以計(jì)算多糖鏈的其余部分的濃度。在葡糖醛酸測(cè)定之前，通過在緊密密封的頂部有羅紋的管中(tightly capped screw top tubes)將稱重的0.1g凝膠樣品加入到0.2ml 1N H2SO4中水解hylan凝膠，在100℃進(jìn)行酸性水解2小時(shí)。在通過用卡唑法分析HA之前，用0.2ml的1N NaOH中和在該過程中完全地溶解的樣品。
卡唑法包括測(cè)定樣品中己糖醛酸(葡糖醛酸)的含量。Dische等人(1947)，在J.Biol.Chem.，167189-198中報(bào)道了通過比色法測(cè)定己糖醛酸濃度的方法。該方法是基于用硫酸和卡唑?qū)禾侨┧徇M(jìn)行顯色反應(yīng)。Balazs等人在(1965)Anal.Biochem.，12547-558中報(bào)道了用于測(cè)定己糖醛酸的最新的自動(dòng)化方法。在硫酸/硼酸酯介質(zhì)中加熱樣品，并與卡唑反應(yīng)?？ㄟ蚺c己糖醛酸反應(yīng)形成具有在530nm有最大吸光率的粉紅色復(fù)合物。對(duì)于自動(dòng)化方法，通過使用蠕動(dòng)泵抽吸樣品和標(biāo)準(zhǔn)品穿過連續(xù)流量分析器。將試劑(酸和卡唑)加入反應(yīng)室并加熱，通過連續(xù)流量比色計(jì)在530nm讀取吸光率。
試驗(yàn)產(chǎn)品的放射性含量可在ISOCAP 300液體閃爍計(jì)數(shù)器(Nuclear Chicago)中使用Scintiverse Bio HP(Fisher Scientific)作為閃爍劑通過閃爍計(jì)數(shù)來測(cè)定。使用ISOCAP 300的外標(biāo)比例程序?qū)⒃糃PM數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化成DPM，所述程序相對(duì)于氚液體閃爍淬滅標(biāo)準(zhǔn)(TritiumLiquid Scintillation Quench Standards)或碳-14液體閃爍淬滅標(biāo)準(zhǔn)(Carbon-14 Liquid Scintillation Quench Standards)(Amergham，Arlington Heights，II)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。
F.Synvisc存留半衰期的測(cè)定在稱重為2.5至3.5kg的新西蘭白兔中測(cè)定來自膝關(guān)節(jié)的Synvisc和其凝膠和液體組分的清除。將兔子分別在24小時(shí)、3、7和28天處死。給藥基本上如上所述制備的放射性物質(zhì)，如關(guān)節(jié)內(nèi)注射0.3ml(0.086ml/kg體重)。該劑量水平預(yù)期相當(dāng)于單次6ml給藥Synvisc至70kg的人。同樣地，在其它動(dòng)物中給藥的相應(yīng)量與動(dòng)物的重量成正比。
DPMs為如上述的每個(gè)組織中獲得的，當(dāng)適宜時(shí)，直接計(jì)算DPM/mg。分別對(duì)每種動(dòng)物計(jì)算每個(gè)關(guān)節(jié)組織回收的總DPMs以及和DPMs和DPM/mg。然后，在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，平均這些值，表示為平均值±平均標(biāo)準(zhǔn)誤差。計(jì)算的平均數(shù)以至少二位有效數(shù)字來報(bào)道，即使在其中值很小并且動(dòng)物與動(dòng)物差別很大的情況下。通過均分獨(dú)立的動(dòng)物總數(shù)計(jì)算在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)關(guān)節(jié)恢復(fù)的總的平均DPM。
通過將每次的平均數(shù)擬合成指數(shù)函數(shù)(Y＝Aekx)進(jìn)行半衰期的確定。估計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)誤差是從曲線擬合獲得的，除以A以獲得預(yù)期的誤差百分?jǐn)?shù)。其可乘以半衰期獲得半衰期的預(yù)計(jì)誤差。
G.結(jié)果
Synvisc的凝膠組分(hylan B)為具有較長半衰期的部分。根據(jù)放射性物質(zhì)的清除率，測(cè)定凝膠組分的存留半衰期為7.7-8.8天。這樣，在30天，超過95％的凝膠將被清除。根據(jù)實(shí)驗(yàn)測(cè)定的凝膠的半衰期，進(jìn)行理論計(jì)算以估計(jì)預(yù)期在單次6ml注射后人類關(guān)節(jié)中的凝膠含量。假設(shè)將約6mg的凝膠注入人類患者的膝中，在注射后第21天，剩余凝膠的含量將為約0.9mg。
Synvisc的液體組分(hylan A)比凝膠組分清除的更快。液體組分的半衰期確定為1.2-1.5天。在第7天，99％注射的物質(zhì)從兔子的膝關(guān)節(jié)中清除。
也進(jìn)行兔子肌肉植入物研究。在植入后第7和30天的顯微鏡檢查沒有檢測(cè)出任意剩余試驗(yàn)材料，其與關(guān)節(jié)內(nèi)清除率的研究一致。
根據(jù)在說明書內(nèi)引用的參考的教導(dǎo)，說明書可被最徹底地理解。在說明書內(nèi)的實(shí)施方案提供了本發(fā)明實(shí)施方案的說明，其將不會(huì)被解釋為限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域技術(shù)人員易于認(rèn)識(shí)到許多其它的實(shí)施方案包括在本發(fā)明內(nèi)。在該公開的內(nèi)容中引用的所有出版物和專利以其全部引入作為參考。至此，通過參考被人本申請(qǐng)的材料與本說明書矛盾或不一致時(shí)，以本說明書內(nèi)容為準(zhǔn)。在本文中任意參考的引證都是允許的，這樣的參考都是本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。
除非另有說明，在包括權(quán)利要求的說明中使用的所有的表示成分量、細(xì)胞培養(yǎng)和處理?xiàng)l件等的數(shù)字應(yīng)當(dāng)理解為在所有條件下可通過術(shù)語“約”來修改。因此，除非另有相反說明，數(shù)字參數(shù)為近似值，可根據(jù)尋求通過本發(fā)明獲得想要的性質(zhì)進(jìn)行改變。除非另有說明，在一組成分前的術(shù)語“至少”應(yīng)當(dāng)理解為指組中的每個(gè)成分。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到或能僅僅使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)來確定，許多本文中描述的本發(fā)明特定實(shí)施方案的同等方案。這樣的同等方案指下述權(quán)利要求書包括的。
權(quán)利要求
1.用于治療患者膝關(guān)節(jié)的粘彈性補(bǔ)充方法，所述方法包括關(guān)節(jié)內(nèi)單次給藥4ml或更多。
2.權(quán)利要求1的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包含小于20mg/ml HA。
3.權(quán)利要求1的方法，其中患者為人。
4.權(quán)利要求3的方法，其中在單次給藥中粘彈性補(bǔ)充劑的總量為6±2ml或更多。
5.權(quán)利要求4的方法，其中所述量為6ml。
6.權(quán)利要求1的方法，其中將粘彈性補(bǔ)充劑給藥需要治療關(guān)節(jié)痛的患者。
7.權(quán)利要求1的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑的單次給藥的治療效果至少為4個(gè)月。
8.權(quán)利要求1的方法，其中該粘彈性補(bǔ)充劑的特征在于具有一種或多種如下特征(i)粘彈性補(bǔ)充劑具有小于3周的存留半衰期；(ii)粘彈性補(bǔ)充劑包含小于20mg/ml HA；(iii)在粘彈性補(bǔ)充劑中5％(w/w)或更多的HA為凝膠形式。
9.權(quán)利要求8的方法，其中存留半衰期大于3天。
10.權(quán)利要求1的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包含8±2mg/ml HA。
11.權(quán)利要求1的方法，其中在粘彈性補(bǔ)充劑中的HA來源自動(dòng)物。
12.權(quán)利要求11的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑為由公雞冠生成的。
13.權(quán)利要求1的方法，其中在粘彈性補(bǔ)充劑中的HA來源自細(xì)菌。
14.權(quán)利要求1的方法，其中至少粘彈性補(bǔ)充劑的一部分已經(jīng)是交聯(lián)的。
15.權(quán)利要求14的方法，其中交聯(lián)劑為甲醛。
16.權(quán)利要求15的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包括hylan A。
17.權(quán)利要求16的方法，其中在hylan A中的HA的平均分子量為6,000kDa。
18.權(quán)利要求14的方法，其中交聯(lián)劑為二乙烯砜。
19.權(quán)利要求18的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包括hylan B。
20.權(quán)利要求14的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包括hylan A和hylanB。
21.權(quán)利要求20的方法，其中以HA的重量計(jì)，hylan A/hylan B的比例為9∶1。
22.權(quán)利要求1的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑包含8±2mg/ml HA，其中10％重量為凝膠形式。
23.權(quán)利要求1的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑為Synvisc。
24.權(quán)利要求23的方法，其中粘彈性補(bǔ)充劑進(jìn)一步包括選自下述的組分非甾體抗炎藥、麻醉劑、麻醉性鎮(zhèn)痛劑、皮質(zhì)類固醇、抗腫瘤劑或抗病毒劑。
25.用于治療人類患者的膝關(guān)節(jié)的粘彈性補(bǔ)充方法，所述方法由關(guān)節(jié)內(nèi)單次給藥6±2ml Synvisc組成。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述給藥量為6ml。
27.治療關(guān)節(jié)病癥的方法，包括權(quán)利要求1的粘彈性補(bǔ)充方法。
28.權(quán)利要求27的方法，其中關(guān)節(jié)病癥與骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)。
29.用于治療人類患者膝關(guān)節(jié)的骨關(guān)節(jié)炎疼痛的方法，所述方法包括關(guān)節(jié)內(nèi)單次注射給藥6±2ml Synvisc。
30.權(quán)利要求31的方法，其中所述量為6ml。
31.粘彈性補(bǔ)充裝置，包括包含4ml或更多的Synvisc的注射器。
32.權(quán)利要求31的裝置，其為無菌的。
33.權(quán)利要求31的裝置，其中注射器包含6±2ml的Synvisc。
34.權(quán)利要求31的裝置，其中在注射器中Synvisc的量為6ml。
35.權(quán)利要求31的裝置，其中Synvisc進(jìn)一步包括選自下述的組分非甾體抗炎藥、麻醉劑、麻醉性鎮(zhèn)痛劑、皮質(zhì)類固醇、抗腫瘤劑、抗病毒劑或細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明提供用基于HA粘彈性補(bǔ)充劑特別是關(guān)節(jié)內(nèi)存留半衰期(T
文檔編號(hào)A61P19/02GK101094680SQ200580045353
公開日2007年12月26日 申請(qǐng)日期2005年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月30日
發(fā)明者F·巴約爾 申請(qǐng)人:建新公司