專利名稱：：用于治療性干預(yù)的y2選擇性受體激動(dòng)劑的制作方法用于治療性干預(yù)的Y2選擇性受體激動(dòng)劑發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及相對(duì)于Yl和Y4受體而言，可作為Y2選擇性激動(dòng)劑的肽或肽化合物，和它們?cè)谥委熞験2受體激活所致疾病中的應(yīng)用，例如治療肥胖和超重以及認(rèn)為這些是致病因素的和誘導(dǎo)血管生成的疾病。發(fā)明背景PP-折疊肽家族一NPY(神經(jīng)肽Y)(人序列-SEQID.No:1)、PYY(肽YY)(人序列-SEQID.No:2)和PP(胰腺多肽)(人序列-SEQID.No:3)是天然分泌的同源性、36個(gè)氨基酸的C-末端酰胺化的肽，這些肽的特征是含有共同的三維結(jié)構(gòu)一PP-折疊，該結(jié)構(gòu)即使在稀釋的水溶液中也出人意料地穩(wěn)定并且對(duì)這些肽的受體識(shí)別至關(guān)重要。NPY是在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)各部分中具有多種作用的分布極廣的神經(jīng)肽，通過人體中一些不同的受體亞型，Yl、Y2、Y4和Y5起作用。主要的NPY受體是Yl受體和Y2受體，Yl受體一般是傳輸NPY神經(jīng)元"沖動(dòng)"的突觸后受體，Y2受體一般是突觸前抑制性受體。該情況也見于下丘腦，下丘腦中也表達(dá)黑皮素受體拮抗劑/反向激動(dòng)劑AgRP(野灰相關(guān)肽)的NPY神經(jīng)元在弓形核的刺激(傳入)支中起基礎(chǔ)"傳感"神經(jīng)元作用。因此，在該控制食欲和能量消耗的"傳感核"中，NPY/AgRP神經(jīng)元與抑制性POMC/CART神經(jīng)元一起監(jiān)控機(jī)體的激素和營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)，因?yàn)檫@些神經(jīng)元是長(zhǎng)期調(diào)節(jié)劑如瘦蛋白和胰島素，和短期調(diào)節(jié)劑如生長(zhǎng)素釋放肽和PYY(見下文)的靶點(diǎn)。刺激性NPY/AgRP神經(jīng)元也凸入例如下丘腦的室旁核中，認(rèn)為該處其突觸后靶受體是Y1和Y5受體。就增進(jìn)食物攝入而言，NPY是已知最強(qiáng)效化合物，因?yàn)閲X類動(dòng)物經(jīng)腦室內(nèi)(ICV)注射NPY后將不斷進(jìn)食直至飽撐。NPY/AgRP神經(jīng)元的AgRP作用主要是作為4型黑皮素受體(MC-4)的拮抗劑，能阻斷POMC衍生肽(主要是aMSH)對(duì)該受體的作用。由于MC4受體信號(hào)起到進(jìn)食抑制劑作用，AgRP的作用與NPY的一樣是一種進(jìn)食刺激信號(hào)(目卩，對(duì)抑制作用的抑制)。在NPY/AGRP神經(jīng)元上發(fā)現(xiàn)了抑制性突觸前Y2受體，該受體是局部釋放的NPY以及腸激素PYY(另一種PP-折疊肽)二者的靶點(diǎn)。PYY在進(jìn)食期間從小腸遠(yuǎn)端和結(jié)腸部位的腸道-內(nèi)分泌細(xì)胞釋放(與食物中的卡路里含量成比例)，作用于胃腸道的外周(神經(jīng))功能和中樞(神經(jīng))，是一種飽食信號(hào)。就外周(神經(jīng))而言，認(rèn)為PYY的功能是上胃腸道蠕動(dòng)、胃酸和胰腺外分泌的抑制劑(回腸中斷(illealbreak))。就中樞(神經(jīng))而言，認(rèn)為PYY主要作用于弓形核NPY/AgRP神經(jīng)元的突觸前抑制性Y2受體，認(rèn)為其可通過血液接近該受體(Batterham等，2002iWm^e418:650-4)。該肽釋放為PYYl-36，但其進(jìn)入血循環(huán)的部分(約50%)為PYY3-36，PYY3-36是二肽基肽酶-IV的降解產(chǎn)物，該酶能切除此肽的N-末端二肽，前提是如所有三種PP-折疊肽一PP、PYY和NPY那樣，其二位為Pro或Ala(Eberlein等，1989Peptides10:797-803)。因此，血循環(huán)中的PYY是作用于Yl和Y2受體的PYY1-36和對(duì)Yl、Y4和Y5受體的親和力低于Y2受體的PYY3-36的混合物。PP是一種胰島內(nèi)分泌細(xì)胞釋放的激素，幾乎完全受(特別是)食物攝入引起的迷走神經(jīng)膽堿能刺激的控制(Schwartz1983GaWrae"&ro/ogy85:1411-25)。PP對(duì)胃腸道有各種作用，但是在大多數(shù)分離的細(xì)胞和器官中未觀察到PP的作用，其作用似乎依賴于完整的迷走神經(jīng)供應(yīng)(supply)(Schwartz1983Gfiw&oeWero/ogv85:1411-25)。鑒于此，稱為Y4受體的PP受體位于腦干中，在迷走神經(jīng)運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元(vagalmotorneurones)(其激活導(dǎo)致PP的外周作用)和單生核束(NTS)(其激活導(dǎo)致PP作為飽食激素的作用)中有強(qiáng)烈表達(dá)(Whitecomb等，199(MmJ.尸;^/0/.259:G687-91，Larsen&Kristensen19975ra/"H/.5m/"7^y48:1-6)。應(yīng)理解，由于血腦屏障的此區(qū)域?qū)ν庵芨杏X性(神經(jīng))產(chǎn)生的各種激素是"可滲入的"，故血液中的PP可進(jìn)入大腦的該區(qū)域。近年來，有爭(zhēng)論說PP對(duì)食物攝入的作用部分是通過對(duì)神經(jīng)元，特別是弓形核中POMC/CRAT神經(jīng)元的作用所介導(dǎo)的(Batterham等，"Coimbra國(guó)際NPY研討會(huì)2004摘要3.3"(2004Abstract3.3InternationalNPYSymposiuminCoimbra)，葡萄牙)。PP通過Y4受體起作用，PYY和NPY對(duì)Y4受體的親和力為納摩爾(nanomolar)級(jí)，PP對(duì)該受體的親和力為亞納摩爾(subnanomolar)級(jí)(Michel等，1998尸/zarmaco/.7ev.50:143-150)。PP對(duì)Y5受體也具有相應(yīng)的親和力，但由于無法接近CNS中專門表達(dá)該受體的細(xì)胞和(該受體)對(duì)PP的親和力較低，PP的生理學(xué)重要性不可能與循環(huán)PP相關(guān)。PP-折疊肽受體熟知人體中有四種類型以相似親和力識(shí)別NPY和PYY的PP-折疊肽受體Yl、Y2、Y4禾nY5。曾提出過對(duì)NPY的親和力優(yōu)于PYY的Y3受體類型，但現(xiàn)在不接受其為真正的受體亞型(Michel等，1998尸/zww"co/./ev.50:143-150)。Y6受體亞型己得到克隆，然而它在人體內(nèi)表達(dá)為缺乏TM-VII以及受體尾部的截短形式，因此看來至少其本身不能形成功能性受體分子。Yl受體-親和力研究提示Yl能同樣良好地結(jié)合NPY和PYY，但基本上不結(jié)合PP。Y2受體-親和力研究提示Y2受體能同樣良好地結(jié)合NPY和PYY，但基本上不結(jié)合PP。Y4受體-親和力研究提示對(duì)應(yīng)于血漿中發(fā)現(xiàn)的濃度，Y4以亞納摩爾親和力結(jié)合PP，而以低得多的親和力結(jié)合NPY和PYY。Y5受體-親和力研究提示Y5能同樣良好地結(jié)合NPY和PYY，也以較低的親和力結(jié)合PP，然而親和力低于該激素的正常血循環(huán)水平。Y5受體也能良好地識(shí)別PYY3-36，然而該受體在CNS中也有很大程度的表達(dá)，當(dāng)將PYY3-36施用于外周(神經(jīng))中時(shí)，不易接近CNS中的此受體。根據(jù)這些肽中的某些在動(dòng)物模型和人體中所顯示的作用和肥胖人的PYY和PP基礎(chǔ)水平低以及對(duì)這些肽的進(jìn)食反應(yīng)較低，已提出PP-折疊肽及其類似物可用于治療肥胖和相關(guān)疾病，包括例如普-韋綜合征(HolstJJ等，1983/W.J06w.7:529-38;Batterham等，1990Atow)。給普-韋綜合征患者輸注PP早已顯示能減少食物攝入(Bemtson等，1993尸甲We14:497-503)，此種作用通過給正常人輸注PP得到證實(shí)(Batterham等，C//".￡c/ocr/"o/.MetoZ.88:3989-92)。也有人提出PP-折疊肽可用于例如治療新血管生成疾病(Zukowska等，20037>e"<iyCgW/ovwc13:86-92)和炎性腸病(參見，例如WO03/105763)。為治療對(duì)Y受體調(diào)節(jié)起反應(yīng)的疾病，需要采用Y受體PP-折疊肽或PP-折疊肽模擬物，這些肽或模擬物對(duì)選作靶點(diǎn)的Y受體應(yīng)具有特異性并穩(wěn)定地保留了對(duì)受體結(jié)合至關(guān)重要的PP-折疊結(jié)構(gòu)元件。特別是更需要釆用對(duì)Y2受體的選擇性超過Yl和Y4受體的這類藥物。Y2受體是用于治療肥胖、代謝綜合征等對(duì)例如食物攝入和能量消耗具有有益作用的受體，并且Y2受體對(duì)諸如外周血管疾病或冠狀血管疾病患者獲得治療性血管生成也具有有益作用。然而，用作Y2受體激動(dòng)劑的藥物并非都適用于這種治療，除非它對(duì)Y2受體的選擇性優(yōu)于Yl和Y4受體。例如，對(duì)Yl受體的激動(dòng)作用在心血管系統(tǒng)(血壓升高)以及腎臟系統(tǒng)(尿鈉排泄)有可能誘導(dǎo)嚴(yán)重的副作用。類似地，需要對(duì)Y2的選擇性優(yōu)于Y4受體，因?yàn)閮煞N天然的Y2和Y4激動(dòng)劑，PYY和PP各自對(duì)例如胃腸道具有許多類似的作用，其中一些作用有益而一些可能導(dǎo)致有害副作用。例如，Y2和Y4受體分別通過對(duì)神經(jīng)元和直接對(duì)上皮作用的方式促進(jìn)小腸和大腸的抗分泌作用(Cox等，20025rJ尸/zam^co/.135:1505-12)。因此，通過Y2和Y4受體聯(lián)合刺激可能獲得疊加的或者甚至可能協(xié)同的抗分泌作用，這可能導(dǎo)致便秘。我們共同待批的國(guó)際專利申請(qǐng)PCT/EP2005/002981(其內(nèi)容結(jié)合于此作為參考)涉及一類對(duì)Y2受體的選擇性超過Yl和Y4受體的Y受體激動(dòng)劑，并涉及該類物質(zhì)中的一些成員。本發(fā)明涉及對(duì)Y2受體的選擇性大大超過Yl和Y4受體的特定肽。發(fā)明詳述根據(jù)本發(fā)明，提供了選自下組的肽(i)[Lys4，Leul7,Ser30,Gln34]hPP(SEQIDNo:4)，(ii)[Lys4,Leul7,Thr30,Gln34]hPP(SEQIDNo:5);(iii)[Lys4,Leul7,氧化的Met30，Gln34]hPP(SEQIDNo:6);以及(i)、(ii)或(iii)的類似物，它們(a)在除4、17、30和34位外的一個(gè)或多個(gè)位置上有保守性取代和/或(b)N-末端酰化、PEG化或共價(jià)結(jié)合于血清白蛋白結(jié)合基序、糖胺聚糖結(jié)合基序或螺旋誘導(dǎo)基序，所述共價(jià)結(jié)合在肽(i)、(ii)或(iii)的殘基上或提供這種共價(jià)結(jié)合官能團(tuán)的肽(i)、(ii)或(iii)的取代殘基上。本文所用術(shù)語hPP是指人PP序列，SEQIDNo:3。因此，肽[Lys4，Leul7,Ser30，Gln34]hPP具有人PP序列SEQIDNo:3，但在4位賴氨酸取代，17位亮氨酸取代，30位絲氨酸取代，34位谷氨酰胺取代。術(shù)語"氧化的Met"是指?jìng)?cè)鏈甲硫基上的硫原子氧化形成亞砜(一個(gè)氧)或砜(兩個(gè)氧)的甲硫氨酸殘基。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的肽(iii)中氧化的Met30是亞砜。本發(fā)明三種肽及其類似物是Y受體激動(dòng)劑，通過本文所述的親和力和/或效價(jià)分析測(cè)定，它們對(duì)Y2受體的選擇性大大超過Yl和Y4受體。在本說明書中，提及氨基酸時(shí)可用其通用名或縮寫，例如纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ue)、甲硫氨酸(Met)、苯丙氨酸(Phe)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、組氨酸(His)、賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、天冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)、半胱氨酸(Cys)和脯氨酸(Pro)。當(dāng)用通用名或縮寫提到氨基酸而未明確說明其立體異構(gòu)形式時(shí)，應(yīng)理解所述氨基酸是L-型。在提到D-形時(shí)會(huì)特別指明D-形氨基酸。有時(shí)，在本文想要這樣做時(shí)，特指L-型而非推斷。保守取代的類似物本文所用的術(shù)語"保守取代"表示一個(gè)或多個(gè)氨基酸被另一個(gè)生物學(xué)類似的殘基取代。例子包括用性質(zhì)相似的氨基酸殘基，例如小氨基酸、酸性氨基酸、極性氨基酸、堿性氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸取代。適用于本發(fā)明的保守氨基酸取代的非限制性例子包括用下表中性質(zhì)相似的非天然a氨基酸的原來殘基進(jìn)行類似取代。用通常在哺乳動(dòng)物內(nèi)源性肽和蛋白質(zhì)中未發(fā)現(xiàn)的殘基進(jìn)行保守性取代的一個(gè)例子是用例如鳥氨酸、刀豆氨酸、氨基乙基半胱氨酸或其它堿性氨基酸保守性取代Arg或Lys。關(guān)于肽和蛋白質(zhì)中表型沉默取代的其它信息可參見，例如Bowie等，Sc/e"ce247，1306-1310，1990。原來殘基保守取代<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>本發(fā)明的保守取代類似物(例如)最多可具有IO個(gè)保守取代基，或者在另一實(shí)施方式中最多5個(gè)，或在另一實(shí)施方式中最多3個(gè)或更少的保守性取代基。N-酰化類似物本發(fā)明考慮的所有Y2選擇性激動(dòng)劑可在其N-末端?；再x予對(duì)氨肽酶活性的抗性。例如，可用2-24個(gè)碳原子的碳鏈?；?，具體的例子是N-末端乙酰化。含共價(jià)結(jié)合功能基序的類似物對(duì)本發(fā)明的三種激動(dòng)劑進(jìn)行了各種修飾，以改善其藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)和代謝性能。這種修飾可涉及將該激動(dòng)劑與肽或蛋白質(zhì)藥物領(lǐng)域本身已知的功能基團(tuán)(也稱為基序)相連。在本發(fā)明考慮的激動(dòng)劑的情況下，尤其有益的三種特定修飾是與血清白蛋白結(jié)合基序或糖胺聚糖(GAG)結(jié)合基序相連，或PEG化。血清白蛋白結(jié)合基序血清白蛋白結(jié)合基序一般是親脂性基團(tuán)，將其引入能延長(zhǎng)給藥后(藥物)在體內(nèi)的駐留時(shí)間，或出于其它原因可用各種已知的方法將其與肽或蛋白質(zhì)分子偶聯(lián)，例如i)通過共價(jià)鍵，例如側(cè)鏈氨基酸殘上的功能基團(tuán)，ii)通過插入該肽中的或適當(dāng)衍生肽中的功能基團(tuán)，iii)作為該肽的一種整合部分。例如，WO96/29344(NovoNordiskA/S)、P.Kurtzhals等，1995BiochemicalJ.312:725-31禾卩L.B.Knudsen等，2000J.Med.Chem.43:1664-69描述了許多可用于本發(fā)明所考慮激動(dòng)劑的合適親脂性修飾。合適的親脂性基團(tuán)包括任選取代的、飽和或不飽和的、直鏈或支鏈的10-24個(gè)碳原子的烴基團(tuán)。這種基團(tuán)可形成該激動(dòng)劑骨架的側(cè)鏈或其一部分，例如通過醚、硫醚、氨基、酯或酰胺鍵與骨架中氨基酸殘基的側(cè)鏈相連，或與PP-折疊模擬激動(dòng)劑骨架中的非肽接頭基團(tuán)的骨架碳或骨架碳的支鏈相連。連接親脂性基團(tuán)的化學(xué)方法不是關(guān)鍵性的，但包含親脂性基團(tuán)的以下側(cè)鏈?zhǔn)强膳c該激動(dòng)劑的骨架碳相連的例子，或是其合適的支鏈CH3(CH2)nCH(COOH)NH-CO(CH2)2CONH-，其中n是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)rCO-NHCH(COOH)(CH2)2CONH-，其中r是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)sCO-NHCH((CH2)2COOH)CONH-，其中s是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)mCONH-，其中m是8-18的一個(gè)整數(shù)，-NHCOCH((CH2)2COOH)NH-CO(CH2)pCH3，其中p是10-16之間的一個(gè)整數(shù)，-NHCO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)qCH3，其中q是10-16的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)nCH(COOH)NHCO-，其中n是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)pNHCO-，其中p是10-18的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)mCH3，其中m是8-18的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-COCH((CH2)2COOH)NH-CO(CH2)pCH3，其中p是10-16的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)qCH3，其中q是10-16的一個(gè)整數(shù)，和部分或完全氫化的環(huán)戊菲(cyclopentan叩henanthrene)骨架。在一個(gè)化學(xué)合成方案中，含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈?zhǔn)酋；嬖谟诩?dòng)劑骨架殘基的側(cè)鏈中的氨基的d2、C14、d6或C,8?；?，例如十四烷?；?。如上所述，利用對(duì)激動(dòng)劑的修飾來改善其血清結(jié)合特性是一種通用方案，特別適用于以上列出的具體激動(dòng)劑。因此，經(jīng)適當(dāng)修飾的激動(dòng)劑包括[Lys4，N-(N，-十四烷?；?-y谷氨酰基-Lysl3，Leul7，Ser30，Gln34]PP或[Lys4,N-(N，-十六垸?；?-Y谷氨酰基-Lysl3,Leul7，Thr30,Gln34]PP以及它們的保守取代類似物。GAG結(jié)合在上述親脂性血清結(jié)合基序例子中，可通過加入GAG結(jié)合基序作為該激動(dòng)劑骨架側(cè)鏈(或其一部分)來修飾本發(fā)明考慮的激動(dòng)劑。已知可以該方式加入的GAG-結(jié)合基序包括氨基酸序列XBBXBX和/或XBBBXXBX，其中B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基?？蓪⒍鄺l，例如3條這種序列以串聯(lián)體(直鏈)或枝狀體(支鏈)的方式加入。具體的串聯(lián)體GAG基序包括Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala,禾口Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala，二者可以通過，例如串聯(lián)體GAG-結(jié)合基序的C-末端與激動(dòng)劑骨架氨基酸側(cè)鏈的氨基之間形成酰胺鍵相偶聯(lián)，所述氨基例如激動(dòng)劑[Lys4，Lysl3，Leul7，Ser30，Gln34]PP或[Lys4，Lysl3，Leul7，Thr30，Gln34〗PP中Lysl3的s氨基。GAG基序可直接或經(jīng)接頭基團(tuán)與激動(dòng)劑的C-或N-末端(優(yōu)選)共價(jià)連接，而不是與激動(dòng)劑相連或作為骨架殘基側(cè)鏈的一部分。GAG結(jié)合基序也可含有氨基酸序歹ijXBBXBX禾口/或XBBBXXBX，其中B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基，例如序列[XBBBXXBX]n，其中n是l-5，B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基。本發(fā)明考慮的Y2選擇性激動(dòng)劑特別適用于治療性血管生成(疾病)。就該具體用途而言，該激動(dòng)劑優(yōu)選包含上述糖胺聚糖(GAG)結(jié)合基序。這種基序能確保該激動(dòng)劑在胞外基質(zhì)中與GAG結(jié)合，從而確保Y2受體在該組織中的局部接觸時(shí)間延長(zhǎng)。生長(zhǎng)因子，趨化因子等可通過能與GAG的酸性糖相互作用的堿性氨基酸斑點(diǎn)(patch)與GAG結(jié)合。生長(zhǎng)因子上這些帶正電荷表位(斑點(diǎn))通常由堿性殘基的側(cè)鏈構(gòu)成，這些殘基不一定是該序列中的毗連殘基而是往往通過二級(jí)結(jié)構(gòu)元件，例如a-螺旋或轉(zhuǎn)角或通過該蛋白質(zhì)的整個(gè)三維結(jié)構(gòu)存在于毗鄰區(qū)域。某些上述GAG-結(jié)合性線形序列已有描述，例如XBBXBX和XBBBXXBX，其中B代表堿性殘基(Hileman等，Bioassays1998，20:156-67)。圓二色性分析顯示這些區(qū)段與GAG結(jié)合后形成oc-螺旋(Verrecehio等，J.Biol.Chem.2000，275(11):7701-7707)。當(dāng)存在例如三條這樣的序列(例如每條是ARRRAARA序列)時(shí)，如果使這種序列位于例如串聯(lián)體或枝狀體構(gòu)建物中，得到的24-聚肽，例如ARRRAARA-ARRRAARA-ARRRAARA可確保其在胞外基質(zhì)中的保留(時(shí)間)類似于高分子量聚賴氨酸，即在4小時(shí)輸注期間不會(huì)被洗掉(Sakharov等，F(xiàn)EBSLett2003，27:6-10)。因此天然構(gòu)建的生長(zhǎng)因子和趨化因子含有兩類結(jié)合基序一類是受體的結(jié)合基序，通過它實(shí)現(xiàn)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，一類是GAG的結(jié)合基序，通過它實(shí)現(xiàn)結(jié)合與持久的局部活性。諸如PYY和NPY等肽是神經(jīng)肽和神經(jīng)激素，它們可從組織中相當(dāng)快速地洗掉，這對(duì)持久的局部作用而言不是最佳的。使GAG-結(jié)合基序與本發(fā)明的Y2選擇性激動(dòng)劑結(jié)合，構(gòu)建了一種具有PP-折疊肽部分的受體結(jié)合表位和GAG-結(jié)合基序的類似于生長(zhǎng)因子和趨化因子的雙功能分子。這種激動(dòng)劑的一個(gè)例子是[Lys4,N-{(Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Ala)3}-Lys13,Leul7,Ser30,Gln34]PP。PEG化在PEG化過程中，將一個(gè)或多個(gè)聚環(huán)氧烷基團(tuán)共價(jià)偶聯(lián)于肽或蛋白質(zhì)藥物以提高給藥后在體內(nèi)的有效半衰期和降低免疫原性、增強(qiáng)可溶性等。該術(shù)語得自該方法所用的優(yōu)選聚環(huán)氧烷，即得自乙二醇-聚乙二醇或"PEG"。合適的PEG基團(tuán)可通過任何方便的化學(xué)方法與激動(dòng)劑相連，例如通過激動(dòng)劑的骨架氨基酸殘基，也可引入易解離的連接基團(tuán)(FEBSLett.2005Apr25;579(11):2439-44)。例如，就PEG樣的分子而言，常用的連接基團(tuán)是賴氨酸的￡-氨基或N-末端氨基。其它連接基團(tuán)包括游離羧基(例如，C-末端氨基酸殘基或天冬氨酸或谷氨酸殘基的羧基)、適當(dāng)活化的羰基、巰基(例如，半胱氨酸的巰基)、芳香族氨基酸殘基(例如，Phe、Tyr、Trp)、羥基(例如，Ser、Thr或OH-Lys的羥基)、胍基(例如，Arg)、咪唑基(例如，His)和氧化的糖部分。當(dāng)激動(dòng)劑PEG化后，它通常包含l-5個(gè)聚乙二醇(PEG)分子，例如1、2或3個(gè)PEG分子。每個(gè)PEG分子的分子量可以是約5kDa(千道爾頓)-lOOkDa，例如約10kDa-40kDa的分子量，如約12kDa或優(yōu)選不超過約20kDa。在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，采用PEG40kDa作為PEG化試劑。合適的PEG分子可購自SP公司(ShearwaterPolymers,Inc.)和恩佐公司(Enzon，Inc.)，并且可選自SS隱PEG、NPC-PEG、醛-PEG、mPEG-SPA、mPEG-SCM、mPEG-BTC、SC-PEG、分枝mPEG(US5,880,255)，或氧基羰基-氧基-N-二羧基酰亞胺-PEG(US5,122,614)。本發(fā)明PEG化激動(dòng)齊lj的例子是[Lys4,N-PEG5000-Lys13，Leul7，Ser30,Gln34〗PP和Lys4，N-PEG5000-Lysl3，Leul7,Thr30,Gln34]PP。血清白蛋白、GAG和PEG無論對(duì)激動(dòng)劑的修飾是與某基團(tuán)連接以促進(jìn)血清結(jié)合、GAG結(jié)合還是通過PEG化提高其穩(wěn)定性，血清白蛋白結(jié)合基序或GAG結(jié)合基序或PEG基團(tuán)可以是，或者可以形成激動(dòng)劑碳骨架側(cè)鏈的一部分，對(duì)應(yīng)于以下任一位置1、3、4、6、7、10、11、12、13、15、16、17、18、19、21、22、23、25、26、28、29、30和32。與生物大分子的偶聯(lián)選擇性Y2受體激動(dòng)劑可作為與例如白蛋白或另一種蛋白質(zhì)或運(yùn)載體分子相連的融合蛋白使用，從而提供有益的藥代動(dòng)力學(xué)或其它類型性能,例如減少腎排除。如同可采用多種蛋白質(zhì)或運(yùn)載體那樣，本領(lǐng)域已知這種共價(jià)結(jié)合可采用多種化學(xué)修飾基團(tuán)和接頭。具體地說，優(yōu)選選擇性Y2肽激動(dòng)劑與白蛋白共價(jià)連接，肽中本文其它地方已指出的可用各種基序修飾的有關(guān)位置。在本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案中，肽與生物大分子(例如白蛋白)的C-末端融合。這種融合蛋白可以通過各種半合成技術(shù)產(chǎn)生，其中肽可通過本文所述的肽合成技術(shù)制備，或通過重組技術(shù)來制備生物分子。該融合蛋白也可作為整體表達(dá)的重組分子來制備，例如含有延伸序列Gly-Lys-Arg的前體分子，當(dāng)該分子在真核細(xì)胞中表達(dá)為分泌型蛋白時(shí)被生物合成酶切割，C-末端Y2受體識(shí)別序列的C端Tyr殘基上的Gly轉(zhuǎn)變?yōu)轸弱０?。媒旋誘導(dǎo)肽已提及本發(fā)明考慮該激動(dòng)劑N-末端的酰化可作為穩(wěn)定該激動(dòng)劑抵抗氨肽酶作用的一種方法。另一種穩(wěn)定性修飾包括將4-20個(gè)氨基酸殘基的穩(wěn)定性肽序列共價(jià)連接于N-和/或C-末端，優(yōu)選N-末端。此穩(wěn)定性肽中的氨基酸殘基選自Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met等。在一令人感興趣的實(shí)施方案中，N-末端肽連接包含4、5或6個(gè)Lys殘基，例如Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-[Lys4，Leul7，Ser30,Gln34]PP。它們可連接于該肽激動(dòng)劑的N-末端。這種穩(wěn)定性肽延伸序列的一般描述參見WO99/46283(ZealandPharmaceuticals),其內(nèi)容納入本文作為參考。本發(fā)明考慮的受體激動(dòng)劑可用熟知的方法制備，例如合成、半合成和/或重組方法。這些方法包括標(biāo)準(zhǔn)肽制備技術(shù)，例如液相合成和固相合成。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本領(lǐng)域的教材和常規(guī)知識(shí)知曉如何獲得激動(dòng)劑和它們的衍生物或修飾物。臨床適應(yīng)癥本發(fā)明考慮的Y2-特異性激動(dòng)劑可用于治療對(duì)Y2受體激活起反應(yīng)的疾病。這種疾病包括顯示需要調(diào)節(jié)能量攝入或能量代謝或誘導(dǎo)血管生成的疾病。就這種用途而言，該激動(dòng)劑可包含能賦予抵抗肽酶的穩(wěn)定性、血清蛋白質(zhì)結(jié)合性能或PEG化以延長(zhǎng)血清和/或組織半衰期的修飾或基序。特別是誘導(dǎo)血管生成，該激動(dòng)劑可包含GAG-結(jié)合基序以延長(zhǎng)組織半衰期和Y受體接觸(時(shí)間)。誘導(dǎo)血管生成的疾病或病癥適應(yīng)癥包括外周血管疾病、冠狀血管疾病、心肌梗塞、中風(fēng)和認(rèn)為上述任一情況是致病因素的病癥、創(chuàng)傷愈合與組織修復(fù)。顯示需要調(diào)節(jié)能量攝入或能量代謝的疾病或病癥適應(yīng)癥包括肥胖和超重，認(rèn)為肥胖和超重是致病因素的疾病，例如食欲過度旺盛、神經(jīng)性貪食、X綜合征(新陳代謝綜合征)、糖尿病、2型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)、高血糖、胰島素耐受、葡萄糖耐受不良、心血管疾病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈病、心肌梗塞、外周血管病、中風(fēng)、血栓栓塞性疾病、高膽固醇血癥、高脂血癥、膽囊疾病、骨關(guān)節(jié)炎、睡眠呼吸暫停、生殖性疾病如多囊性卵巢綜合征，或乳腺癌、前列腺癌或結(jié)腸癌。l.肥胖和超重已證明PYY3-36能降低各種嚙齒類動(dòng)物的食欲、食物攝入和體重(Batterham等，胸訓(xùn)2002'418:595-7;Challis等，朋iC腸.2003，311:915-9)以及降低人的食欲和食物攝入(Batterham等，2002)。包括受體敲除動(dòng)物研究的動(dòng)物數(shù)據(jù)強(qiáng)烈表明PYY3-36的這種作用是通過Y2受體和弓形核中的NPY/AgRP和POMC神經(jīng)元介導(dǎo)的。令人感興趣的是，這種作用持續(xù)時(shí)間很長(zhǎng)，例如腹膜內(nèi)注射一次PYY3-36后直至24小時(shí)仍可觀察到該作用。也熟知腦室內(nèi)注射特別是AgRP對(duì)食欲等有這種長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)作用。肥胖者的PYY水平和PYY食物應(yīng)答反應(yīng)較低并與他們的BMI逆相關(guān)。重要的是，肥胖者不耐受PYY的作用，因?yàn)镻YY3-36輸液90分鐘以相似的持久方式減少了食物攝入(Batterham等，2003，AE/M349:941-48)。因此，為調(diào)節(jié)能量攝入，本發(fā)明考慮Y2選擇性激動(dòng)劑適用于包括人的哺乳動(dòng)物對(duì)象。所以，本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)能量攝入、食物攝入、食欲和能量消耗的方法。本文公開的一種方法是通過給予對(duì)象美容或治療有效量的本發(fā)明激動(dòng)劑來減少能量或食物攝入。在另一實(shí)施方案中，本文公開了改變對(duì)象的能量代謝的方法。該方法包括給予對(duì)象治療有效量的本發(fā)明激動(dòng)劑來改變能量消耗。所有生理活動(dòng)均消耗能量。機(jī)體可通過直接調(diào)節(jié)那些活動(dòng)的效率或者改變正發(fā)生活動(dòng)的數(shù)量和性質(zhì)來改變能量消耗率。例如，在消化期間，機(jī)體消耗能量使食物在腸道內(nèi)移動(dòng)并消化食物，在細(xì)胞中，細(xì)胞代謝效率的改變會(huì)產(chǎn)生或多或少的熱量。在其它實(shí)施方案中，本文公開了本申請(qǐng)所述對(duì)弓形核回路(arcuatecircuitry)的所有調(diào)節(jié)方法，該方法協(xié)同改變了食物攝入并回應(yīng)性改變能量消耗。能量消耗是細(xì)胞代謝、蛋白質(zhì)合成、代謝速率和利用卡路里的結(jié)果。因此，在該實(shí)施方案中，外周給藥導(dǎo)致能量消耗增加和卡路里利用率降低。在一個(gè)實(shí)施方案中，給予對(duì)象治療有效量的本發(fā)明受體激動(dòng)劑從而增加了能量消耗。在治療應(yīng)用和美容應(yīng)用相關(guān)的幾個(gè)實(shí)施方案中，可用Y2選擇性激動(dòng)劑控制體重和治療、減輕或預(yù)防肥胖，具體是以下一種或多種用途預(yù)防和減輕體重增加；誘導(dǎo)和促進(jìn)體重降低；減輕體重指數(shù)所測(cè)定的肥胖癥。如上所述，本發(fā)明還涉及Y2選擇性激動(dòng)劑在控制食欲、飽脹和饑餓中的應(yīng)用，具體是以下一種或多種應(yīng)用降低、壓制和抑制食欲；誘導(dǎo)、增加、提高或促進(jìn)飽脹和飽脹感；降低、抑制和壓制饑餓和饑餓感。該內(nèi)容還涉及Y2選擇性激動(dòng)劑的以下一種或多種應(yīng)用維持所需體重、所需體重指數(shù)、所需外貌和良好的健康狀況。在另一方面，本發(fā)明涉及治療和/或預(yù)防能量代謝降低、進(jìn)食障礙(feedingdisorder)、食欲紊亂、超重、肥胖、食欲過度旺盛、神經(jīng)性貪食、X綜合征(新陳代謝綜合征)或與它們相關(guān)的并發(fā)癥或風(fēng)險(xiǎn)，包括糖尿病、2型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)、高血糖、胰島素耐受、葡萄糖耐受不良、心血管疾病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、充血性心力衰竭、中風(fēng)、心肌梗塞、血栓栓塞性疾病、高膽固醇血癥、高脂血癥、膽囊疾病、骨關(guān)節(jié)炎、睡眠呼吸暫停、生殖性疾病如多囊性卵巢綜合征，乳腺癌、前列腺癌或結(jié)腸癌的方法，該方法包括給予對(duì)象，例如包括人的哺乳動(dòng)物有效劑量的一種或多種本文所述Y2選擇性激動(dòng)劑。2.治療性血管生成對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的生長(zhǎng)、心室心肌細(xì)胞肥厚以及內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移作用的許多體外研究表明NPY可能具有血管生成因子的作用(Zukowska-Grojec等，1998C/rc.i仏83:187-95)。重要的是，利用小鼠角膜微袋(micropocket)模型和雛雞絨毛尿囊膜(CAM)試驗(yàn)的體內(nèi)研究證實(shí)NPY是一種強(qiáng)效血管生成因子，它可導(dǎo)致只用成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(FGF-2)時(shí)觀察到的呈現(xiàn)血管舒張(作用)的血管樹樣結(jié)構(gòu)而不是例如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)所致的血管生成結(jié)構(gòu)(Ekstrand等，2003尸A^S100:6033-38)。在發(fā)育期間，雛雞胚胎中NPY能誘導(dǎo)己存在的血管產(chǎn)生血管萌芽。在Y2受體敲除動(dòng)物中未觀察到NPY的這種作用，表明Y2受體負(fù)責(zé)NPY的血管生成作用(Ekstrand等，2003)。以下觀察結(jié)果也支持該觀點(diǎn)Y2受體在局部缺血血管中高度上調(diào)和產(chǎn)生內(nèi)源性、選擇性Y2配體PYY3-36的酶即二肽基肽酶-IV也高度上調(diào)。在各種心血管疾病如動(dòng)脈粥樣硬化中，認(rèn)為誘導(dǎo)外周血管以及冠狀血管的血管生成將是有益的。認(rèn)為誘導(dǎo)血管生成也有利于確保心肌梗塞后的再灌注。特別提出了FGF-2是誘導(dǎo)心血管疾病患者的血管生成的有效藥物。然而，與大多數(shù)其它血管生成因子一樣，F(xiàn)GF-2是一種生長(zhǎng)因子，也可能通過提供血管生成而剌激腫瘤生長(zhǎng)。如上所述，通過Y2受體起作用的NPY的方式誘導(dǎo)新血管生成與FGF-2的誘導(dǎo)形式相似，然而NPY是神經(jīng)肽，不是典型的生長(zhǎng)因子，因而不涉及誘導(dǎo)腫瘤生長(zhǎng)。因此，Y2激動(dòng)劑是治療性血管生成的一種有用藥物。然而，對(duì)該用途特別重要的是，該激動(dòng)劑不顯示具有Y1受體激動(dòng)作用，因?yàn)檫@種作用對(duì)心血管有害。這意味著所有本發(fā)明關(guān)注的肽，無論是選擇性Y2iiai激動(dòng)劑或是特別有用的治療藥物均與誘導(dǎo)血管生成有關(guān)。如上所述，這些肽用GAG-結(jié)合基序修飾后特別有用。為進(jìn)一步描述與大多數(shù)其它典型的生長(zhǎng)因子一樣，F(xiàn)GF-2的作用部分是通過與胞外基質(zhì)中的糖胺聚糖(GAG)結(jié)合而介導(dǎo)或受其控制。與GAG的這種結(jié)合確保了該血管生成因子以合適的空間和瞬時(shí)方式起作用而不會(huì)從組織中被快速洗掉。對(duì)于本發(fā)明所述的小肽和肽模擬物在治療性血管生成中的應(yīng)用，這點(diǎn)尤其重要。因此，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，為在給藥后誘導(dǎo)最佳的血管生成，給這些肽摻入一個(gè)或多個(gè)GAG-結(jié)合基序以確保它們與胞外基質(zhì)中的GAG結(jié)合。例如可靜脈內(nèi)或動(dòng)脈內(nèi)給藥或直接注入冠狀動(dòng)脈，以誘導(dǎo)冠狀動(dòng)脈疾病和/或急性心肌梗塞后心臟血管的生成。類似地，這種化合物可通過股動(dòng)脈內(nèi)注射給藥來治療外周血管疾病。也可以對(duì)皮膚損傷處局部給藥以促進(jìn)傷口愈合。也可用含血清白蛋白結(jié)合基序修飾的本發(fā)明肽來獲得延長(zhǎng)時(shí)間的Y受體接觸而有效誘導(dǎo)血管生成。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，Y2選擇性激動(dòng)劑包含的GAG-結(jié)合基序位于不會(huì)損傷此肽的穩(wěn)定性或不會(huì)損傷此肽的效力和選擇性的位置上。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及Y2選擇性受體激動(dòng)劑在改善血管生成系統(tǒng)紊亂，特別是誘導(dǎo)血管生成，例如與疾病或病癥相關(guān)的血管生成中的應(yīng)用，所述疾病例如有心血管疾病，包括具有分支間歇性(cladicatiointermitten)癥狀的外周血管疾病、冠狀動(dòng)脈疾病和心肌梗死；組織修復(fù)過程，包括皮膚傷口愈合；炎性疾病，包括胃腸道炎性疾病，例如潰瘍、結(jié)腸炎、炎性腸病、克羅恩病等。一個(gè)具體的實(shí)施方案是利用該受體激動(dòng)劑誘導(dǎo)心臟或血管，或組織，例如包括胃腸道粘膜等粘膜組織和皮膚的血管生成。3.傷口愈合在通過刪除Y2受體基因來選擇性去除了Y2受體的動(dòng)物中，據(jù)報(bào)道其傷口愈合受損和相關(guān)的新血管生成受損(Ekstmnd等，2003尸A^S100:6033-38)。因此，本發(fā)明的選擇性Y2激動(dòng)劑可用于改善傷口愈合。對(duì)于該適應(yīng)癥，可以各種方式包括胃腸外給藥給予這些肽。然而優(yōu)選的給藥途徑是局部應(yīng)用，例如以溶液、分散液、粉末、藥棒(stick)、精華液(cr6me)、軟膏、洗液、凝膠、水凝膠形式應(yīng)用、包括貼片和膏劑等透皮遞送系統(tǒng)。對(duì)于局部給藥，它們可如此使用。然而，在本發(fā)明一優(yōu)選的實(shí)施方案中，用一個(gè)或多個(gè)本文所述GAG-結(jié)合基序修飾這些肽以通過該肽與組織中的GAG結(jié)合而確保其持久的局部作用。4.炎性腸病PYY先前已描述可用于預(yù)防和/或治療炎性腸??；參見納入本文作為參考的AmylinPharmaceuticals,Inc的WO03/105763。因此，本發(fā)明關(guān)注的激動(dòng)劑也能有效治療或預(yù)防炎性腸病。所以，本發(fā)明也涉及本文所述激動(dòng)劑在這種醫(yī)學(xué)應(yīng)用中的用途。在一令人感興趣的實(shí)施方案中，這些肽含有一個(gè)或多個(gè)上述GAG-結(jié)合基序。5.骨質(zhì)疏松癥幾項(xiàng)研究顯示動(dòng)物中Y2敲除對(duì)骨小梁形成具有極強(qiáng)的作用(例如Sainsbury等，Mol.Cell.Biol.2003，23:5225-33)。Y2受體也參與骨形成。Baldock等，2002J.Clin.Invest109:915-21。因此，本發(fā)明的Y2選擇性激動(dòng)劑可用于治療骨質(zhì)疏松癥。特別考慮含有一個(gè)或多個(gè)GAG-結(jié)合基序的這些肽適合用于骨質(zhì)疏松癥或相關(guān)疾病。在該激動(dòng)劑群體的一個(gè)亞組中，Y2激動(dòng)劑因遺傳變異，例如Y2基因中的多態(tài)性而可能不具有所期望的作用。這些受體中喪失功能的突變可能與肥胖相關(guān)。因此，在本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施方案中，為檢測(cè)這些基因中的多態(tài)性/突變和鑒定這種多態(tài)性，對(duì)待治療對(duì)象進(jìn)行了Y2基因分析。根據(jù)這種分析可得到這些對(duì)象的最佳治療方案。例如，只有具有不影響Y2激動(dòng)劑功能的正常基因型或多態(tài)性的對(duì)象應(yīng)該應(yīng)用這種激動(dòng)劑治療。為確保此藥物的最佳效果，另一種可能是提高表達(dá)受損傷受體對(duì)象的Y2激動(dòng)劑用量。在Y2受體功能受損導(dǎo)致對(duì)象肥胖的情況中，例如在雜合子患者(前提是至少保留了一些相關(guān)受體功能)中用替代療法形式的Y2激動(dòng)劑(例如大劑量)治療可能有爭(zhēng)議。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在長(zhǎng)期治療開始前可進(jìn)行給予Y2激動(dòng)劑的急性測(cè)試以確保這些化合物在待治療對(duì)象中具有所期望作用。通過這些方法確保了只有對(duì)用Y2激動(dòng)劑治療敏感的對(duì)象才可用這些化合物治療。劑量本發(fā)明Y2受體激動(dòng)劑的治療有效量取決于所用的具體激動(dòng)劑、所治療對(duì)象的年齡、體重和狀況、所治療病癥或疾病的嚴(yán)重性和類型、給藥方式和所用組合物的強(qiáng)度。例如，Y2受體激動(dòng)劑的治療有效量可在約0.01微克/公斤體重-約1克/公斤體重范圍內(nèi)變動(dòng)，例如約l微克到約5毫克/公斤體重，或約5微克到約l毫克/公斤體重。在另一實(shí)施方案中，給予對(duì)象0.5-135皮摩爾(pmol)/公斤體重，或約72皮摩爾/公斤體重的受體激動(dòng)劑。在一具體的非限制性例子中，皮下注射給予約5到約50nmo1，例如約2到約20nmo1，或者皮下注射給予約1.0nmol。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所用具體化合物(如該受體激動(dòng)劑)的效力、對(duì)象的年齡、體重、性別和生理情況不難確定精確的劑量。這些用量可分為一次或數(shù)次劑量，以每日、每?jī)扇?、每周、每?jī)芍?、每月或以任何其它適當(dāng)?shù)念l率給藥。給藥一般是每日一次或每日兩次。給藥方法本發(fā)明的Y2激動(dòng)劑及其美容或藥物組合物可經(jīng)任何途徑給予，包括腸內(nèi)(例如，口服給藥)或胃腸外途徑。在一具體實(shí)施方案中，優(yōu)選胃腸外途徑，包括靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)、胸骨內(nèi)注射和輸液，以及通過舌下、透皮、局部、經(jīng)粘膜(包括鼻部途徑)給藥，或者通過吸入，例如肺部吸入給藥。在具體實(shí)施方案中，優(yōu)選皮下和/或鼻部給藥。這些受體激動(dòng)劑可以分散在合適的運(yùn)載體中給藥，或者它們可以合適的藥物或化妝品組合物形式給藥。這種組合物也屬于本發(fā)明的范圍內(nèi)。下文描述了合適的藥物組合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知這種組合物也適用于美容用途，或者知道通過利用合適的美容上可接受的輔料將這些組合物調(diào)整為化妝品組合物。藥物組合物用于藥品或化妝品中的本發(fā)明受體激動(dòng)劑(也稱為"化合物")通常以藥物組合物形式存在，所述藥物組合物含有特定的化合物或其衍生物和一種或多種生理學(xué)或藥學(xué)上可接受的輔料。這些化合物可通過任何常規(guī)給藥途徑，例如口服、頰部、鼻部、眼部、肺部、局部經(jīng)皮、陰道、直腸、眼部、胃腸外(包括上述皮下、肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi)等)途徑以各個(gè)體有效的劑量給予動(dòng)物，包括哺乳動(dòng)物，例如人。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何選擇合適的給藥途徑。如上所述，優(yōu)選胃腸外給藥途徑。在一具體實(shí)施方案中，這些受體激動(dòng)劑皮下給藥和/或鼻部給藥。本領(lǐng)域熟知皮下注射易于自行實(shí)施。醫(yī)生不難為每位患者單獨(dú)確定適合具體給藥途徑的組合物。標(biāo)準(zhǔn)制劑的專題論文描述了各種藥學(xué)上可接受的運(yùn)載體及它們的制劑，例如E.W.Martin的《雷明頓藥物科學(xué)》(Remington'sPharmaceuticalSciences)。含有本發(fā)明化合物的藥物組合物可以是固體、半固體或液體組合物形式。就胃腸外應(yīng)用而言，這些組合物通常是液體組合物形式或是用于植入的半固體或固體形式?？赏ㄟ^靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、鞘內(nèi)、硬膜外、腹膜內(nèi)或皮下注射或輸液給予作為無菌溶液或分散體的液體組合物?？蓪⑦@些化合物制備成無菌固體組合物，在給藥前或給藥時(shí)用無菌水、鹽水或其它合適的無菌可注射介質(zhì)溶解或分散。組合物的液體形式可以是溶液、乳液(包括納米乳液)、懸液、分散液、脂質(zhì)體組合物、混合物、噴霧劑或氣溶膠(后兩種類型特別適用于鼻部給藥)。溶液或分散液的合適的介質(zhì)通常是水或藥學(xué)上可接受的溶劑，例如油(如芝麻油或花生油)或有機(jī)溶劑，例如丙醇或異丙醇。本發(fā)明的組合物可含有其它藥學(xué)上可接受的輔料，例如pH調(diào)節(jié)劑、滲透壓活性物質(zhì)(例如為了將組合物的等滲性調(diào)節(jié)到生理上可接受的水平)、粘度調(diào)節(jié)劑、懸浮劑、乳化劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、抗氧化劑等。優(yōu)選的介質(zhì)是水。鼻部給藥的組合物也可含有本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的合適的無刺激性運(yùn)載體，例如聚乙二醇、糖基糠醛(glycofurol)等以及吸收增強(qiáng)劑(例如參見《雷明頓藥物科學(xué)》)。就胃腸外給藥而言，在一個(gè)實(shí)施方案中，一般通過將所需純度、單位劑量可注射形式(溶液、懸液或乳液)的受體激動(dòng)劑與藥學(xué)上可接受的賦形劑或運(yùn)載體混合，即所用劑量和濃度對(duì)接受者無毒并且與該組合物的其它成分相容的物質(zhì)相混合來配制?？傮w上，通過使受體激動(dòng)劑與液體運(yùn)載體或精細(xì)分級(jí)的固體運(yùn)載體或二者均勻緊密地接觸來制備制劑。然后視需要將產(chǎn)品做成所需劑型。運(yùn)載體優(yōu)選胃腸外運(yùn)載體，更優(yōu)選與受者血液等滲的溶液。這種運(yùn)載體的例子包括水、鹽水、林格溶液和葡萄糖溶液。非水性運(yùn)載體，例如非揮發(fā)油和油酸乙酯以及脂質(zhì)體也可用于本發(fā)明。由于本文所述肽具有兩親性質(zhì)，合適的劑型也包括膠束制劑、脂質(zhì)體和包含一種或多種合適脂質(zhì)如磷脂的其它類型制劑。優(yōu)選將這些受體激動(dòng)劑懸浮在水性運(yùn)載體中，例如pH約3.0到約8.0、優(yōu)選pH約3.5到約7.4、3.5到6.0或3.5到約5的等滲緩沖溶液。有用的緩沖物質(zhì)包括乙酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽、硼酸鹽、碳酸鹽，例如檸檬酸鈉-檸檬酸緩沖液。這些組合物也可設(shè)計(jì)為在給藥后受控遞送或持續(xù)遞送所述受體激動(dòng)劑以獲得頻率更低的給藥方案。通常認(rèn)為每日1-2次的劑量方案可接受，但是本發(fā)明也包括例如頻率較高或較低的其它給藥方案。為實(shí)現(xiàn)持續(xù)遞送該受體激動(dòng)劑，可采用含有例如脂質(zhì)或油的合適運(yùn)載體以在給藥部位形成貯存而將受體激動(dòng)劑緩慢釋放入循環(huán)系統(tǒng)，或者可采用植入物。該方面合適的組合物包括摻有受體激動(dòng)劑的脂質(zhì)體和生物可降解顆粒。在需要固體組合物的情況中，該固體組合物可以是片劑形式，例如常規(guī)藥片、泡騰片、包衣片、融解片或舌下片、藥丸、粉末、粒劑、顆粒、顆粒材料、固體分散體或固體溶液。該組合物的半固體形式可以是咀嚼膠、軟膏、乳膏、涂抹劑、糊劑、凝膠或水凝膠。本發(fā)明的藥物組合物的其它合適劑型可以是陰道栓(vagitories)、栓劑、膏齊U、貼片、片劑、膠囊、小囊、錠劑、裝置等。劑型可設(shè)計(jì)為能以自由或受控方式釋放該化合物，例如帶有合適包衣的片劑。該藥物組合物可含有治療有效量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明組合物中本發(fā)明化合物的含量是，例如占該藥物組合物的約0.1-100%w/w。藥物制劑配制的技術(shù)人員可用熟知的方法制備這些藥物組合物。在這些藥物組合物中，所述化合物通常與藥學(xué)輔料，即治療上惰性物質(zhì)或運(yùn)載體相混合。所述運(yùn)載體根據(jù)所需劑型和給藥途徑可采取各種形式。藥學(xué)上可接受的輔料可以是，例如填充劑、粘合劑、崩解劑、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、溶劑、乳化劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、增強(qiáng)劑、調(diào)味劑、色素、pH調(diào)節(jié)劑、滯留劑、潤(rùn)濕劑、表面活性劑、防腐劑、抗氧化劑等。詳見藥物手冊(cè)，例如《雷明頓藥物科學(xué)》或《藥物輔料手冊(cè)》(PharmaceuticalExcipientHandbook)。以下實(shí)施例描述了本發(fā)明一些具體激動(dòng)劑的制備方法與活性。合成采用應(yīng)用生物有限公司(AppliedBiosystemInc.(ABI))的433型自動(dòng)合成儀，使用Fmoc化學(xué)方法，基于固相肽合成(SPPS)技術(shù)來合成所述肽。ABI合成儀的所有試劑購自ABI(除了哌啶購自Aldrich公司)。Fmoc氨基酸購自ABI。RinkAmideMBHA樹脂購自諾氏化學(xué)公司(Novabiochem)。使用標(biāo)準(zhǔn)0.25mmoleFastMoc化學(xué)方法。SPPS的通用Fmoc化學(xué)合成方法包括l)用20%哌啶切除Fmoc保護(hù)基團(tuán)；2)活化氨基酸的羧基；和3)使活化的氨基酸與樹脂結(jié)合肽鏈的氨基末端偶聯(lián)形成肽鍵。用六氟磷酸2-(lH-苯并三唑-l-基)-l,l,3,3-四甲基脲鎿(HBTU)活化氨基酸。將藥筒中l(wèi).O毫摩爾保護(hù)的干氨基酸溶解在HBTLUN，N-二異丙基乙胺(DIEA)和l-羥基苯并三唑(HOBt)的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，再加入N-甲基吡咯垸酮(NMP)。幾乎立即形成活化的Fmoc氨基酸，將溶液直接轉(zhuǎn)移到反應(yīng)器中。Fmoc脫保護(hù)的步驟由電導(dǎo)率測(cè)定監(jiān)測(cè)和控制。最終合成產(chǎn)物用NMP和二氯甲烷(DCM)充分洗滌。脫保護(hù):從合成儀中取出含合成肽的樹脂并簡(jiǎn)單空氣干燥。用5-10毫升的切割混合液(95。/。三氟乙酸(TFA)，2.5。/。三異丙醇硅垸(TIS)的水溶液)室溫下處理4.0小時(shí)，將肽從樹脂上切下來，同時(shí)在脫保護(hù)條件下除去側(cè)鏈保護(hù)基團(tuán)[Asp、Glu、Tyr、Thr和Ser上的O-t-丁基(OtBu);Arg上的五甲基色原烷-6-磺?；?Pmc)，Lys上的叔丁氧基羰基(Boc);Asn和Gln上的三苯甲基]。通過過濾從樹脂分離肽溶液，并在40毫升冷乙醚中沉淀。離心回收肽，并用2x40毫升的冷乙醚洗漆。肽經(jīng)凍干后在-20。C下儲(chǔ)存，然后純化。純化與表征:將肽粉末溶解在50%的醋酸溶液中并注入到半制備型反相HPLC柱上進(jìn)行純化。采用帶雙波長(zhǎng)(220nm和280nm)紫外檢測(cè)器的HPLC系統(tǒng)。乙腈的線性梯度進(jìn)行編程并引入此柱，以分離肽產(chǎn)物與其它物質(zhì)。通過流分收集器收集洗脫液，對(duì)各分離流分作分析型HPLC和MALDI-TOFMS測(cè)定表征來確定其身份和純度。實(shí)施例l合成Lys4，Leul7,Thr30，Gln34hPP(SEQIDNo:5);[M+H+:4162.2基于RinkAmideMBHA樹脂(諾氏生物化學(xué)公司(Novabiochem))0.70毫摩爾/克的取代率，稱取0.357克樹脂進(jìn)行0.25毫摩爾規(guī)模的合成。運(yùn)行各種流速試驗(yàn)之前檢查PE-ABD433肽合成儀的性能以確保準(zhǔn)確的試劑遞送。購買的Fmoc氨基酸Asp-OtBu、Tyr-OtBu、Thr-OtBu、Arg-Pmc、Trp-Boc、Lys-Boc、Glu-OtBu、Asn-Trt、Gln-Trt、Val、Leu、Ile、Ala、Pro和Gly為毫摩爾小瓶。購買其它合成試劑和溶劑按儀器說明書加載到儀器上。用稱為0.25毫摩爾MonPrePk的化學(xué)程序合成此肽。進(jìn)行一次四個(gè)N-末端氨基酸(Ala-Pro-Leu-Lys)雙偶聯(lián)來以提高合成效率。由電導(dǎo)率測(cè)試來監(jiān)測(cè)和控制Fmoc脫保護(hù)，設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)為相對(duì)于前一輪脫保護(hù)電導(dǎo)率的5%或更低。分析型HPLC測(cè)定，該系列(線性)肽的總合成產(chǎn)率高于60%。樹脂經(jīng)空氣干燥并轉(zhuǎn)移至玻璃管中，加入IO毫升新鮮制備的切割試劑(95。/。三氟乙酸(TFA)，2.5。/Q三異丙醇硅烷(TIS)的水溶液)。恒速攪拌，室溫下進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)4小時(shí)。然后過濾樹脂分離上清液。用40毫升冰冷乙醚沉淀肽，然后離心(3,500rpm下6分鐘)回收。用冷乙醚將沉淀的肽洗滌兩次。肽溶液凍干過夜。將肽重新溶解到50%乙酸中，在VydacC8反相HPLC柱(直徑l.Ocm，長(zhǎng)25cm，粒徑5pm，孔徑300A)上，用0-70%線性梯度溶劑B與溶劑A在70分鐘內(nèi)以3毫升/分鐘的流速進(jìn)行純化。溶劑A和溶劑B的組成如下A:0.1%TFA，2%乙腈的水溶液；B:0.1%TFA的95%乙腈水溶液中。每隔0.1分鐘收集流分。通過MS和分析型RP-HPLC測(cè)定各流分的等分試樣。合并含有220nm單一紫外吸收峰和該肽的預(yù)期質(zhì)量單位([M+H]+:4162.2)的流分并凍干。對(duì)合并的流分進(jìn)行RP-HPLC分析，確定肽最終純度為95%。根據(jù)實(shí)施例1相同的方法分析以下所列的肽，僅指出處有所修改。實(shí)施例2合成[Lys4，Leul7，Ser30，Gln34hPP(SEQIDNo:4)[M+H+:4148.2根據(jù)實(shí)施例1制備，只是使用Fmoc-Ser-OtBu而不是Fmoc-Thr-CHBu。實(shí)施例3合成[Lys4，Leu17，Met-sulfoxide30，Gln34hPP(SEQIDNo:6)[M+H4207.2根據(jù)實(shí)施例l制備[Lys4，Leul7，Met30，Gln34]hPP，但是使用Fmoc-Met而不是Fmoc-Thr-OtBu。然后，在0.14。/。過氧化氫中氧化純化的[Lys4，Leul7，Met30，Gln34]hPP肽，得到[Lys4，Leul7，Met-亞砜30，Gln34]hPP，過程如下將0.65毫克[Lys4,Leul7，Met30，Gln34]hPP溶解在1.5毫升磷酸鹽緩沖液中。然后在肽溶液中加入75微升3%過氧化氫。黑暗中進(jìn)行氧化反應(yīng)12小時(shí)。分析型反相HPLC和MALDI-TOFMS分析肽的等分試樣。[M+H]從4191.2([Lys4，Leul7，Met30，Gln34]hPP)位移至4207.2表明，30位的Met氧化為Met-亞砜([Lys4，Leul7，Met-亞砜30，Gln34]hPP)。220nm處紫外檢測(cè)，未氧化的母體肽不超過4%。生物試驗(yàn)和結(jié)果I.測(cè)定肽親和力和效力的體外試驗(yàn)獼猴Y受體的克隆與表達(dá)將獼猴NPY-受體(Yl,Y2，Y4)的編碼區(qū)亞克隆入含有HA-信號(hào)序列-FlagTag的pcDNA3.1/Zeo載體的氨基末端，如Z,MGwa"箏，J.Biol.Chem.267(31):21995-21998(1992)所述，用于表達(dá)、結(jié)合和功能研究以鑒定Y2選擇性肽。rhY1與基因庫(Genbank)序列AF303089相同。rhY2與基因庫序列AF303090相同。rhY4與基因庫序列AY149475.1相同。獼猴Y2受體親和力試驗(yàn)在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)中利用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有獼猴Y2受體的CHO細(xì)胞中的人125I-PYY結(jié)合來測(cè)定測(cè)試化合物對(duì)獼猴Y2受體的親和力。試驗(yàn)前一天，將穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞以2，500個(gè)細(xì)胞/孔的密度轉(zhuǎn)移到48-孔培養(yǎng)板中，目標(biāo)為5-8%的放射性配體結(jié)合。第二天，用12pM的人125I-PYY(Amersham，LittleChalfont，UK)在4"C下進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)3小時(shí)。結(jié)合試驗(yàn)在0.5毫升補(bǔ)充了以下成分的50毫摩爾Hepes緩沖液，pH7.4中進(jìn)行1mMCaCl2、5mMMgCl2禾卩0.1%(w/v)牛血清白蛋白和100lig/ml桿菌肽。由于是在含有1nM未標(biāo)記的PYY時(shí)(進(jìn)行)結(jié)合，測(cè)定了非特異性結(jié)合。細(xì)胞用0.5毫升冰冷的緩沖液洗滌兩次，加入0.5-1毫升裂解緩沖液(8M脲，3M乙酸配制的2。/oNP40)，用Y計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)結(jié)合的放射性。測(cè)定按一式三份進(jìn)行。放射性配體在這些條件下達(dá)到穩(wěn)態(tài)結(jié)合。用標(biāo)準(zhǔn)的藥理學(xué)數(shù)據(jù)處理軟件，Prism3.0(graphPadSofware，圣地亞哥，美國(guó))計(jì)算IC50值。根據(jù)Cheng-Prusoff方程(ChengY，PrusoffWH.，BiochemPharmacol.1973)計(jì)算Ki值:Ki=[IC50/(l+[L]/Kd)]，其中，Ki是冷配基的平衡抑制常數(shù)，Kd是放射標(biāo)記(熱)配基的平衡常數(shù)，L是所用放射標(biāo)記配基的濃度。獼猴Y4受體親和力試驗(yàn)其方案同Y2親和力試驗(yàn)一樣，只是使用穩(wěn)定表達(dá)獼猴Y4的CHO細(xì)胞，并將細(xì)胞以125,000個(gè)細(xì)胞/孔的密度轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)板中。競(jìng)爭(zhēng)性試驗(yàn)采用125I-PP，而人PP用于非特異性結(jié)合的測(cè)定。獼猴Yl受體親和力試驗(yàn)其方案同Y2親和力試驗(yàn)一樣，只是使用穩(wěn)定表達(dá)獼猴Yl的CHO細(xì)胞并將細(xì)胞以23,000細(xì)胞/孔的密度轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)板。競(jìng)爭(zhēng)性試驗(yàn)采用125I-PYY，而人PYY用于非特異性結(jié)合的測(cè)定。在以上親和力試驗(yàn)中測(cè)試NPY、PYY、PYY3-36、PP和本發(fā)明激動(dòng)劑對(duì)Y2受體的結(jié)果見表1:表l<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>括號(hào)中的值表示獨(dú)立試驗(yàn)的次數(shù)在上述親和力試驗(yàn)中，SEQIDNo.4-6的肽相對(duì)于Yl受體的選擇性2100倍，相對(duì)于Y4受體的選擇性^20倍。獼猴Y2受體效力試驗(yàn)在COS-7細(xì)胞中進(jìn)行劑量-反應(yīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定測(cè)試化合物對(duì)獼猴Y2受體的效力，COS-7細(xì)胞用獼猴Y2受體以及能確保Y2受體通過Gq途徑導(dǎo)致磷酸肌醇酯轉(zhuǎn)化增加的嵌合型G蛋白，Gqi5瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。^^^^^JT存眾一轉(zhuǎn)染一天后，將COS-7細(xì)胞以30,000的個(gè)細(xì)胞/孔的密度轉(zhuǎn)移到96孔培養(yǎng)板中，與5pCi的[3H]-肌醇(Amersham，PT6-271)在每孔補(bǔ)充了10%胎牛血清、2mM谷氨酰胺和0.01毫克/毫升慶大霉素的100微升培養(yǎng)基中培育24小時(shí)。細(xì)胞用補(bǔ)充了140mMNaCl、5mMKCl、1mMMgS04、1mMCaC12、10mM葡萄糖、0.05%(w/v)牛血清的20mMHEPES，pH7.4的緩沖液洗滌兩次；用補(bǔ)充了10mMLiCl的100微升緩沖液37。C培育30分鐘。在37。C用各種濃度的肽刺激45分鐘后，用50微升10%冰冷的高氯酸提取細(xì)胞，然后在冰上培育30分鐘。將20微升高氯酸細(xì)胞溶液轉(zhuǎn)移到固體白色96孔板中。加入80微升SPAYSI珠(12.5毫克/毫升)(=1毫克/L)，將板密封并震搖直到30分鐘。將板在1500rpm下離心5分鐘后，在PackardTopcounter上讀數(shù)。測(cè)定按一式兩份進(jìn)行。利用標(biāo)準(zhǔn)的藥理學(xué)數(shù)據(jù)處理軟件，Prism3.0(graphPadSofWare，圣地亞哥，美國(guó))計(jì)算EC50值。獼猴Y4受體效力試驗(yàn)其方案同Y2效力試驗(yàn)一樣，只是采用了獼猴Y4-轉(zhuǎn)化的COS-7細(xì)胞。稱猴Yl受體效力試驗(yàn)其方案同Y2效力試驗(yàn)一樣，只是釆用獼猴Yl-轉(zhuǎn)化的COS-7細(xì)胞。NPY、PYY、PYY3-36、PP和本發(fā)明激動(dòng)劑的測(cè)定結(jié)果見表2:表2化合物IP3對(duì)Y2<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>括號(hào)中的值表示獨(dú)立試驗(yàn)的次數(shù)在上述效力試驗(yàn)中，SEQIDNo.4-6的肽相對(duì)于Yl受體的選擇性2100倍，相對(duì)于Y4受體的選擇性^20倍。II.測(cè)定糖胺聚糖(GAG)結(jié)合的體外試驗(yàn)在體外試驗(yàn)中利用固定的肝素，即例如HiTrap肝素-瓊脂糖柱(AmershamPharmaciaBiotech,Uppsala,Sweden)或肝素HPLC柱監(jiān)測(cè)測(cè)試化合物結(jié)合GAG的能力，用含2mMDTT和1mMMgEDTA的50mM磷酸鈉(pH7.3)配制的0-0.5M線性梯度NaCl液洗脫50分鐘，流速1毫升/分鐘。用緩沖液A配制的1MNaCl洗滌此柱51-55分鐘以再生。為了初步分析目的，可以采用分步-梯度的NaCl。權(quán)利要求1.選自下組的肽(i)[Lys4，Leu17，Ser30，Gln34]hPP(SEQIDNo4)，(ii)[Lys4，Leu17，Thr30，Gln34]hPP(SEQIDNo5)；(iii)[Lys4，Leu17，氧化的Met30，Gln34]hPP(SEQIDNo6)；以及(i)、(ii)或(iii)的類似物，它們(a)在除4、17、30和34位外的一個(gè)或多個(gè)位置有保守性取代和/或(b)N-末端?；EG化或共價(jià)結(jié)合于血清白蛋白結(jié)合基序、糖胺聚糖結(jié)合基序或螺旋誘導(dǎo)基序，所述共價(jià)結(jié)合在肽(i)、(ii)或(iii)的殘基上或所述肽(i)、(ii)或(iii)中為這種共價(jià)結(jié)合提供官能團(tuán)的的取代殘基上。2.如權(quán)利要求l所述的肽，其特征在于，氧化的Met30是亞砜。3.如權(quán)利要求1或2所述的肽，其特征在于，所述肽在其N-末端酰化。4.如權(quán)利要求3所述的肽，其特征在于，所述肽在其N-末端被具有2-24個(gè)碳原子的碳鏈?；鏝-末端N-(N'-十四烷?；?-y谷氨?；?。5.如權(quán)利要求3所述的肽，其特征在于，所述肽在其N-末端?；?.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的肽，其特征在于，所述肽包含血清白蛋白結(jié)合基序、或糖胺聚糖(GAG)結(jié)合基序、或螺旋誘導(dǎo)基序、或是PEG化的。7.如權(quán)利要求6所述的肽，所述肽包含血清白蛋白結(jié)合基序，所述結(jié)合基序?yàn)橛H脂性基團(tuán)。8.如權(quán)利要求7所述的肽，其特征在于，所述親脂性基團(tuán)包括任選取代的、飽和或不飽和的、直鏈或支鏈的10-24個(gè)碳原子的烴基團(tuán)。9.如權(quán)利要求7或8所述的肽，其特征在于，所述親脂性基團(tuán)是肽骨架側(cè)鏈或使其一部分。10.如權(quán)利要求9所述的肽，其特征在于，所述含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈通過醚、硫醚、氨基、酯或酰胺鍵與骨架中的殘基相連。11.如權(quán)利要求10所述的肽，其特征在于，所述含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈選自CH3(CH2)nCH(COOH)NH-CO(CH2)2CONH-，其中n是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)rCO-NHCH(COOH)(CH2)2CONH-，其中r是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)sCO-NHCH((CH2)2COOH)CONH-，其中s是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)mCONH-，其中m是8-18的一個(gè)整數(shù)，-NHCOCH((CH2)2COOH)NH-CO(CH2)pCH3，其中p是10-16的一個(gè)整數(shù)，和-NHCO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)qCH3，其中q是10-16的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)nCH(COOH)NHCO-，其中n是9-15的一個(gè)整數(shù)，CH3(CH2)pNHCO-，其中p是10-18的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)mCH3，其中m是8-18的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-COCH((CH2)2COOH)NH-CO(CH2)pCH3，其中p是10-16的一個(gè)整數(shù)，-CONHCH(COOH)(CH2)4NH-CO(CH2)2CH(COOH)NH-CO(CH2)qCH3，其中q是10-16的一個(gè)整數(shù)，和部分或完全氫化的環(huán)戊菲骨架。12.如權(quán)利要求9所述的肽，其特征在于，所述含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈?zhǔn)酋；鲭墓羌軞埢鶄?cè)鏈氨基的C12、C14、C,6或d8酰基。13.如權(quán)利要求IO所述的肽，其特征在于，所述含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈?zhǔn)酋；鲭墓羌軞埢鶄?cè)鏈氨基的十四烷?；?。14.如權(quán)利要求8所述的肽，其特征在于，所述含親脂性基團(tuán)的側(cè)鏈通過肽中Lysl3取代基的s氨基?；纬?。15.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述GAG結(jié)合基序是所述肽骨架側(cè)鏈的氨基酸序列，或者是其一部分。16.如權(quán)利要求15所述的肽，其特征在于，所述GAG-結(jié)合基序包含氨基酸序歹UXBBXBX和/或XBBBXXBX，其中B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基。17.如權(quán)利要求15或16所述的肽，其特征在于，所述GAG-結(jié)合基序是串聯(lián)體或枝狀體。18.如權(quán)利要求15-17中任一項(xiàng)所述的肽，其特征在于，所述GAG-結(jié)合基序是通過酰胺鍵偶聯(lián)的Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala，所述酰胺鍵形成在串聯(lián)體GAG-結(jié)合基序的C-末端與肽中Lysl3取代基的s氨基之間。19.權(quán)利要求15-17中任一項(xiàng)所述肽的用途，其特征在于，所述GAG-結(jié)合基序是通過酰胺鍵偶聯(lián)的Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Arg-Ala，所述酰胺鍵形成在串聯(lián)體GAG-結(jié)合基序的C-末端與肽中Lysl3取代基的s氨基之間。20.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述GAG結(jié)合基序直接或通過接頭基團(tuán)共價(jià)連接于所述肽的C-或N-末端。21.如權(quán)利要求20所述的肽，其特征在于，所述GAG結(jié)合基序直接或通過接頭基團(tuán)共價(jià)連接于所述肽的N-末端。22.如權(quán)利要求20或21所述的肽，其特征在于，所述GAG-結(jié)合基序包含氨基酸序列XBBXBX禾口/或XBBBXXBX，其中B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基。23.如權(quán)利要求20或21所述的肽，其特征在于，在激動(dòng)劑中，GAG-結(jié)合基序包含氨基酸序列[XBBBXXBX]n，其中n是l-5，B是堿性氨基酸殘基，X是任何氨基酸殘基。24.如權(quán)利要求15所述的肽，其特征在于，所述GAG結(jié)合基序是所述肽中Lysl3取代基e氨基的(Ala-Arg-Arg-Arg-Ala-Ala-Ala-Arg-Ala)3?；?5.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述PEG是分子量最高約20kDa的聚環(huán)氧乙垸或聚乙二醇。26.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述肽是肽中Lysl3取代基的s氨基上的PEG加成物。27.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述螺旋誘導(dǎo)肽直接或通過接頭基團(tuán)共價(jià)連接于該激動(dòng)劑的C-或N-末端。28.如權(quán)利要求6所述的肽，其特征在于，所述螺旋誘導(dǎo)肽直接或通過接頭基團(tuán)共價(jià)連接于該激動(dòng)劑的N-末端。29.如權(quán)利要求27或28所述的肽，其特征在于，所述螺旋誘導(dǎo)肽具有4-20個(gè)選自以下的氨基酸殘基Ala、Leu、Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、His、Met、Orn以及式-NH-C(Rl)(R2)-CO-的氨基酸殘基，其中Rl是氫，R2是任選取代的Cl-C6烷基、苯基或苯基甲基，或者R1和R2與和它們相連的C原子結(jié)合在一起形成環(huán)戊基、環(huán)己基或環(huán)庚基環(huán)。30.如權(quán)利要求27或28所述的肽，其特征在于，所述螺旋誘導(dǎo)肽含有4、5或6個(gè)Lys殘基。31.如權(quán)利要求27所述的肽，其特征在于，所述肽具有N-末端Lys-Lys-Lys-Lys陽Lys-Lys-Lys序歹[J。32.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的肽在制備用于治療Y2受體活化所致疾病的藥物中的用途。33.—種治療Y2受體活化所致疾病的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者有效量的如權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所述的肽。34.如權(quán)利要求32所述的用途或如權(quán)利要求33所述的方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要調(diào)節(jié)能量攝入或能量代謝，或誘導(dǎo)血管生成的疾病。35.如權(quán)利要求34所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要誘導(dǎo)血管生成的疾病，所述肽含有GAG-結(jié)合基序。36.如權(quán)利要求34所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要誘導(dǎo)血管生成的疾病，所述肽含有血清-結(jié)合基序。37.如權(quán)利要求34所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要誘導(dǎo)血管生成的疾病，所述肽是PEG化的。38.如權(quán)利要求34-37中任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所治療的疾病是外周血管疾病、冠狀血管疾病、心肌梗塞、中風(fēng)、認(rèn)為任一上述情況是致病因素的疾病、傷口愈合或組織修復(fù)。39.如權(quán)利要求34所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是肥胖癥或超重，和認(rèn)為肥胖或超重是致病因素的疾病。40.如權(quán)利要求39所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要誘導(dǎo)血管生成的疾病，所述肽含有血清結(jié)合基序。41.如權(quán)利要求39所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是顯示需要誘導(dǎo)血管生成的疾病，所述肽激動(dòng)劑是PEG化的。42.如權(quán)利要求39-41中任一項(xiàng)所述的用途或方法，其特征在于，所治療的疾病是食欲過度旺盛、神經(jīng)性貪食、X綜合征(代謝綜合征)、或與上述選自糖尿病、2型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)、高血糖、胰島素耐受、葡萄糖耐受不良、心血管疾病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈病、心肌梗塞、外周血管病、中風(fēng)、血栓栓塞性疾病、高膽固醇血癥、高脂血癥、膽囊疾病、骨關(guān)節(jié)炎、睡眠呼吸暫停、生殖性疾病如多囊性卵巢綜合征，或乳腺癌、前列腺癌或結(jié)腸癌有關(guān)或這些疾病所致疾病。43.如權(quán)利要求39-42中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，將所述肽給予禁食狀態(tài)的患者。44.如權(quán)利要求34-42中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述肽通過胃腸外途徑給予患者，所述途徑包括皮下、肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、鼻部、透皮或頰部給藥。45.含有一種或多種權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所定義的肽與藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。46.含有一種或多種權(quán)利要求1-31中任一項(xiàng)所定義的肽與美容學(xué)上可接受的賦形劑的化妝品組合物。全文摘要本說明書中指出的修飾的人PP肽(i)[Lys4，Leu17，Ser30，Gln34]hPP，(ii)Lys4，Leu17，Thr30，Gln34]hPP和(iii)[Lys4，Leu17，氧化的Met30，Gln34]hPP，其中“氧化的Met”可以是亞砜或砜，以及它們的一些類似物和衍生物是相對(duì)于Y1和Y4受體的Y2受體選擇性激動(dòng)劑，可用于(例如)控制食欲和治療性血管生成。文檔編號(hào)A61P9/00GK101268096SQ200580051631公開日2008年9月17日申請(qǐng)日期2005年9月21日優(yōu)先權(quán)日2005年9月21日發(fā)明者F·王,T·施瓦茨申請(qǐng)人:7Tm制藥聯(lián)合股份有限公司