專利名稱：藥學(xué)活性尿苷酯的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是申請(qǐng)日為2002年4月29日的中國(guó)專利申請(qǐng)02809160.4的分案申請(qǐng)。原申請(qǐng)的發(fā)明名稱為“藥學(xué)活性尿苷酯”。
說(shuō)明本發(fā)明涉及新的尿苷酯，它們作為抗多種疾病的藥學(xué)活性試劑的用途，用于制備該尿苷酯的方法和含有至少一種尿苷酯作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還涉及一種包含游離脂肪酸和/或脂肪酸酯和尿苷、脫氧尿苷尿苷酸和/或脫氧尿苷酸的藥物組合，還涉及這種藥物組合的用途。
背景技術(shù)：
脂肪酸羧酸以多種分子形式存在。首先必須認(rèn)識(shí)到如果脂質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的主要脂肪酸為單羧酸，則這些脂肪酸中的某些為二羧酸，并構(gòu)成前述脂肪酸的重要代謝產(chǎn)物。
為了準(zhǔn)確地描述脂肪酸分子的結(jié)構(gòu)，必須給出碳鏈的長(zhǎng)度(碳原子數(shù))、雙鍵的數(shù)目和這些雙鍵的確切位置。這將確定脂肪酸分子的生物活性。
大部分的脂肪酸為直鏈化合物，并在大部分情況下具有偶數(shù)個(gè)碳原子。鏈長(zhǎng)度范圍為2-80個(gè)碳原子，但常見(jiàn)為12-24個(gè)碳原子。鏈長(zhǎng)度為2-4個(gè)碳原子的脂肪酸稱為短鏈脂肪酸，鏈長(zhǎng)度為6-10個(gè)碳原子的脂肪酸稱為中等鏈脂肪酸，而鏈長(zhǎng)度為12-24個(gè)碳原子的脂肪酸稱為長(zhǎng)鏈脂肪酸。它們的物理和生物性能與此三類劃分有關(guān)。
還可以根據(jù)它們的結(jié)構(gòu)將脂肪酸細(xì)分為清楚定義的種類a)飽和脂肪酸b)單烯脂肪酸c)多烯脂肪酸-亞甲基間隔
-多亞甲基間隔-共軛-分離d)單和多支化的脂肪酸e)含有脂肪酸的環(huán)環(huán)丙烷酸呋喃酸環(huán)氧酸硫辛酸f)炔屬脂肪酸g)羥基脂肪酸h)含硫脂肪酸i)二羧酸j)脂肪酸酰胺k)酮脂肪酸。
最簡(jiǎn)單的脂肪酸稱為飽和脂肪酸。它們不具有不飽和鍵并不可能由于氫化或鹵化而改變。當(dāng)存在雙鍵時(shí)，脂肪酸是該不飽和脂肪酸；如果只存在一個(gè)雙鍵則它們是單一不飽和脂肪酸(MUFA)；如果它們具有兩個(gè)或更多個(gè)通常被單一亞甲基分隔的雙鍵(亞甲基間隔的不飽和)，則它們是多不飽和脂肪酸(PUFA)。
為了描述這些不飽和脂肪酸，提供兩種方法化學(xué)家的方法根據(jù)羧基計(jì)算碳原子，其重點(diǎn)在于與此基團(tuán)最為接近的雙鍵。例如18:2 Δ9，12-十八碳二烯酸或順-9，順-12-十八碳二烯酸，俗名亞油酸。雙鍵通常具有Z(順式)構(gòu)型，但它也可以具有E(反式)構(gòu)型。
生物化學(xué)家和生理學(xué)家的方法
根據(jù)確定代謝家族的甲基計(jì)算雙鍵，記為n-x(n為總碳原子數(shù)，x為最后的雙鍵的位置)。其它雙鍵根據(jù)第一個(gè)雙鍵加上3來(lái)推算(這是最常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)，非共軛脂肪，但有時(shí)加上2，這些雙鍵是共軛的)。
因此，亞油酸(參見(jiàn)

圖1)或順-9，順-12-十八碳二烯酸還以速記命名法命名18:2(n-6)。此化合物的具有18個(gè)碳原子、2個(gè)雙鍵和6個(gè)來(lái)自與末端甲基連接的最后雙鍵的碳原子。在舊文獻(xiàn)中它稱為18:2ω6。18-6＝12，12-3＝9因而為D9，12。
飽和脂肪酸通常具有直鏈和偶數(shù)個(gè)碳數(shù)(n＝4-30)。它們具有通式CH3(CH2)nCOOH。表1總結(jié)了某些飽和酸和它們的對(duì)應(yīng)的俗名。
表1最常見(jiàn)的飽和脂肪酸
單烯脂肪酸是廣泛存在于生物界的單一不飽和的正脂肪酸，其中它們大部分作為其順式異構(gòu)體出現(xiàn)。它們具有通式結(jié)構(gòu)CH3(CH2)xCH＝CH(CH2)yCOOH。它們可以具有在不同的位置的獨(dú)特的雙鍵，但最常見(jiàn)的是n-9系列，作為來(lái)自橄欖油(順-9-十八碳烯酸)和幾乎所有種子油的油酸。某些重要的單烯酸如以下所列表2單烯脂肪酸
油酸可能是最常見(jiàn)的脂肪酸(占橄欖油的60-70％)。存在幾種油酸的位置異構(gòu)體，其中除反式異構(gòu)體之外的(n-12)或(n-7)位的順式雙鍵是已知的其中在反芻動(dòng)物的瘤胃和脂質(zhì)中發(fā)現(xiàn)反油酸(t9-十八碳烯酸)和t-異油酸(t11-十八碳烯酸)。
不常見(jiàn)的反式脂肪酸，t3-十六碳烯酸(反-16:1n-13)存在于來(lái)自高等植物和綠藻的真核生物光合膜中。
多烯脂肪酸也稱為多不飽和脂肪酸(PUFA)。這些脂肪酸具有2個(gè)或更多個(gè)順式雙鍵，最常見(jiàn)的是它們彼此被單一亞甲基分離(亞甲基-間隔的多烯)。
亞油酸是這組的一種典型的成員。某些其它多不飽和脂肪酸中的一個(gè)雙鍵經(jīng)歷了移動(dòng)，它們不再被亞甲基間隔，并已知為共軛脂肪酸。某些不常見(jiàn)的脂肪酸不具有在兩個(gè)雙鍵之間存在亞甲基的規(guī)則結(jié)構(gòu)，而是多亞甲基間隔的多烯。已在某類植物、海生無(wú)脊椎動(dòng)物和昆蟲中發(fā)現(xiàn)它們。已從原始的海生動(dòng)物如海綿動(dòng)物的磷脂中分離出溴化的長(zhǎng)鏈脂肪酸。
最重要的多烯脂肪酸可以分成具有常規(guī)結(jié)構(gòu)特征的2類CH3(CH2)xC＝CH-，其中對(duì)于(n-6)種類x＝4，而對(duì)于(n-3)種類x＝1。二十碳五烯酸是一種在5、8、11、14和17位具有雙鍵的(n-3)種類的常見(jiàn)多烯。表3總結(jié)了最常見(jiàn)的多烯脂肪酸。
表3最常見(jiàn)的多烯脂肪酸如以下列出
最常見(jiàn)的多烯酸為十八碳三烯酸(已知7種)。油硬脂酸(9c11t13t)在tong油中發(fā)現(xiàn)，并具有工業(yè)重要性，十八碳三烯酸(8t10t12c)在金盞花中發(fā)現(xiàn)，而梓樹(shù)酸(9c11t13c)在梓樹(shù)中發(fā)現(xiàn)。
最近，新的具有不同鏈長(zhǎng)度和不同飽和度的多烯脂肪酸描述為16:5、18:4、20:5、20:6，意外地為22:7。所有這些種類都具有4個(gè)共軛的全順式雙鍵，以18:4形式存在，其位置在6、8、10和12，在4、7、9、11、13、16和19位具有雙鍵的新的共軛的二十二碳七烯酸(docosaheptadecanoic acid)其名稱為stellaheptaenoicacid。
在植物王國(guó)中發(fā)現(xiàn)的不飽和多甲基間隔的脂肪酸中，在不同的來(lái)源中存在具有順-5-烯鍵的脂肪酸。具有此結(jié)構(gòu)的三種最常見(jiàn)的脂肪酸為taxoleic酸(all-順-5，9-18:2)、在針葉樹(shù)、香料(Teucrium)和妥爾油中發(fā)現(xiàn)的皮諾斂酸(全部-順-5，9，12-18:3)和sciadonic酸(全-順-5，11，14-20:3)。這些脂肪酸在種子油中存在的水平為大約1％-25％。還描述了類似的具有4個(gè)雙鍵的種類。
某些類異戊二烯脂肪酸是已知的。在這組中，最有用的是視黃酸(參見(jiàn)圖1)，它是由視黃醇衍生的，并具有重要的細(xì)胞調(diào)節(jié)功能。
單和多支化的脂肪酸，優(yōu)選單甲基支化的脂肪酸發(fā)現(xiàn)于動(dòng)物和微生物脂質(zhì)，如分枝桿菌。關(guān)于烴，它們一般具有異或反異結(jié)構(gòu)。例如，14-甲基十五烷酸(異棕櫚酸)屬于異-種類，而13-甲基十五烷酸對(duì)應(yīng)于反異-種類。關(guān)于支化的脂肪酸的其它實(shí)例為降植烷酸和植烷酸，如圖1所示。
某些脂肪酸包含在其鏈上的環(huán)丙烷環(huán)(存在于細(xì)菌脂質(zhì))或環(huán)丙烯環(huán)(存在于某些種子油)或者在其鏈末端的環(huán)丙烯環(huán)(種子油)。在環(huán)丙烷酸中，主要在革蘭氏陰性菌中發(fā)現(xiàn)乳桿酸(11，12-亞甲基十八烷酸)。最近表明另一種環(huán)丙烷脂肪酸(9，10-亞甲基十六烷酸)存在于心和肝線粒體的磷脂中。
環(huán)丙烯酸發(fā)現(xiàn)于Malvales種子油和Baobab、Kapok和Mowrah種子油。在環(huán)戊烯基酸中，在來(lái)自大風(fēng)子(Hydnocarpus)的種子的大風(fēng)子油中發(fā)現(xiàn)大風(fēng)子油酸，它在民間醫(yī)藥中用于治療麻瘋病。
環(huán)氧酸存在于多種種子油中。天然種類的為所有C18化合物，它是飽和或不飽和的。例如在向日葵種子(菊花)中發(fā)現(xiàn)9，10-環(huán)氧硬脂酸和9，10-環(huán)氧十八碳-12-烯酸(coronaric酸)。
硫辛酸(參見(jiàn)圖1)最初被認(rèn)為是一種細(xì)菌生長(zhǎng)因子，但它不僅發(fā)現(xiàn)存在于酵母，還存在于牛肝，它最初從牛肝中分離成純形式。硫辛酸還稱為硫辛酸(thioctic acid)或1，2-二硫戊環(huán)-3-戊酸。這種酸在吸收之后在各種組織中被NADH或NADPH酶促還原為二氫硫辛酸(或6，8-二噻烷辛酸)。
硫辛酸首先表現(xiàn)為細(xì)菌的必需物，證明它是一種甘氨酸裂解系統(tǒng)和脫氫酶復(fù)合物中的輔酶?，F(xiàn)在，考慮硫辛酸為一種有效的抗氧化劑，因?yàn)樗倪€原形式通過(guò)調(diào)節(jié)NADH/NAD比率而形成氧化還原電子對(duì)(redox couple)。因此，硫辛酸已成為特定的有用的治療劑。它可以清除羥基和過(guò)氧基，還螯合過(guò)渡金屬。還認(rèn)為硫辛酸可能在所有抗氧化劑中是最有效的，它可以提供有效的抗多種心臟病的保護(hù)，目前它用于緩解糖尿病并發(fā)癥。
炔屬脂肪酸，還稱為乙炔酸(ethynoic acid)，包括含有叁鍵和最終一個(gè)或兩個(gè)雙鍵的脂肪酸。例如，在來(lái)自Picramnia sow，一種危地馬拉本土植物的tariri種子中發(fā)現(xiàn)塔里酸(6-十八碳炔酸)。表4還顯示了炔屬脂肪酸的實(shí)例。
表4炔屬脂肪酸
在羥基脂肪酸中，羥基可以出現(xiàn)在碳鏈的不同位置，所述碳鏈可以是飽和的或單烯。某些多羥基脂肪酸是已知的，它最常見(jiàn)通過(guò)脂肪氧合酶活性產(chǎn)生。2-羥基酸(或α-羥基酸)發(fā)現(xiàn)于植物(12-24個(gè)碳原子的鏈)和動(dòng)物羊毛蠟、皮膚脂質(zhì)和專門的組織，主要在腦中。2-羥基二十四酸(腦酮酸)和2-羥基-15-二十四碳烯酸(羥基神經(jīng)酸)是腦苷脂類的神經(jīng)酰胺部分的組分，而3-羥基酸(或β-羥基酸)存在于某些細(xì)菌脂質(zhì)中。其它實(shí)例為蓖麻油酸(12-羥基-9-十八碳烯酸)，它表征蓖麻子油和lesquerolic酸，蓖麻油酸(14-羥基-11-二十烯酸)的C20同系物。
雖然二羧酸不以可評(píng)價(jià)量的動(dòng)物或植物脂質(zhì)的組分出現(xiàn)，但它們一般是脂肪酸的重要代謝產(chǎn)物，因?yàn)樗鼈兺ㄟ^(guò)氧化產(chǎn)生。它們具有通式HOOC-(CH2)n-COOH。短鏈二羧酸的非常重要之處是一般代謝和至多n＝3，它們不可能被認(rèn)為是脂質(zhì)，因?yàn)樗鼈兊乃芙舛仁侵匾?。這些中間產(chǎn)物中最簡(jiǎn)單的是草酸(n＝O)，其它為丙二酸(n＝1)、琥珀酸(n＝2)和戊二酸(n＝3)。在天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)或通過(guò)合成得到的這組的其它脂質(zhì)成員具有4-21的“n”值。它們的實(shí)例為己二酸(n＝4)、庚二酸(n＝5)、辛二酸(n＝6)、壬二酸(n＝7)、癸二酸(n＝8)、十三烷二酸(n＝11)和十六碳二酸(n＝14)。
核糖和脫氧核糖核糖和脫氧核糖是戊糖。核糖還稱為呋喃核糖，因?yàn)樗慕Y(jié)構(gòu)與呋喃有關(guān)。核糖和脫氧核糖之間僅有的結(jié)構(gòu)差別是在雜環(huán)的2’C位缺少羥基。圖2表示核糖和脫氧核糖的結(jié)構(gòu)。
核苷和核苷酸在這些化合物中，嘌呤或嘧啶堿基與糖共價(jià)結(jié)合。如果該堿基與核糖結(jié)合，則結(jié)果為核糖核苷(堿基+糖＝核苷)，如果該堿基與脫氧核糖結(jié)合，則該核苷為脫氧核糖核苷。在脫氧核糖中，2’C的OH-基被氫取代，因而變?yōu)槊撗酢?br> 堿基和糖之間的結(jié)合包括糖的1’COH-基團(tuán)和嘌呤的N9或在N-β-糖苷鍵的嘧啶的N1。包含脫氧核糖的核苷具有相同類型的核苷鍵。
圖2表示三種嘌呤堿基尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶。
表5命名
為了區(qū)別糖環(huán)的編號(hào)和堿基的編號(hào)，糖編號(hào)加上撇號(hào)，如3’5’。因此，5’指糖環(huán)的5’C。
這些是核苷的磷酸酯，且它們是相當(dāng)強(qiáng)的酸。通常將磷酸酯化成糖基(堿基+糖+磷酸酯＝核苷酸)。磷酸可以位于糖殘基的2’、3’或5’C。但是，天然核糖核苷酸和脫氧核糖核苷酸具有在5’C位的磷酸。
磷酸可以經(jīng)進(jìn)一步的磷酸化產(chǎn)生二磷酸酯和三磷酸酯，如ADP和ATP。關(guān)于每一個(gè)核苷酸一磷酸酯，還存在核苷酸二磷酸酯和核苷酸三磷酸酯。DNA或RNA中不存在二和三核苷酸，僅存在一磷酸酯核苷酸。二和三磷酸酯核苷酸天然存在，并在許多生物化學(xué)代謝方面起非常重要的作用。
本發(fā)明的目的是提供新的化合物和新的藥物組合物，它們可以用于預(yù)防和/或治療包括以下的多種疾病和病癥I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)，本發(fā)明同時(shí)提供該治療方法和該方法中所用的藥物組合物。
這個(gè)目的通過(guò)獨(dú)立權(quán)利要求的公開(kāi)而解決。本發(fā)明的其它優(yōu)越特征、方面和細(xì)節(jié)根據(jù)本申請(qǐng)的獨(dú)立權(quán)利要求、說(shuō)明書、實(shí)施例和圖是顯而易見(jiàn)的。
發(fā)明描述本發(fā)明涉及具有通式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R代表R″-COO；R’代表氫或羥基；R″代表具有8-30個(gè)碳原子的烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的單支化或多支化烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的單烯烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的單烯支化的烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的多烯烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的多烯支化的烷基鏈、包含碳環(huán)或雜環(huán)的具有8-30個(gè)碳原子的支化或非支化的烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的單炔(monoinoic)烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的單炔(monoinoic)支化烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的多炔(polyinoic)烷基鏈、具有8-30個(gè)碳原子的多炔(polyinoic)支化烷基鏈、包含至少一個(gè)雙鍵或一個(gè)叁鍵的具有8-30個(gè)碳原子的烷基鏈、包含至少一個(gè)雙鍵或一個(gè)叁鍵的具有8-30個(gè)碳原子的支化烷基鏈、包含羥基或硫醇基的支化或非支化和/或飽和或不飽和的具有8-30個(gè)碳原子的烷基鏈。
通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽表現(xiàn)出抗多種疾病和病癥的優(yōu)良活性，因而用作藥學(xué)活性試劑。
根據(jù)式(I)的化合物可從羥基保護(hù)的核苷或脫氧核苷為原料合成。作為位于3和4位的兩種核苷羥基的保護(hù)基，通常優(yōu)選使用乙縮醛和縮酮。作為位于3位的脫氧核苷羥基的保護(hù)基，優(yōu)選使用仲醇的酸敏感性O(shè)H-保護(hù)基。這些OH-保護(hù)的核苷或脫氧核苷用作原料，并與羧酸、羧酸鹵化物、羧酸氰化物、羧酸疊氮化物和/或羧酸酐反應(yīng)。在這種情況下，需要使用非活化羧酸，試劑如二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)以支持酯形成。
在這種情況下，使用羧酸氯化物、溴化物、氰化物或疊氮化物，可以將堿基，優(yōu)選有機(jī)堿基如吡啶、二甲基氨基吡啶(DMAP)、三乙基胺、咪唑等加到反應(yīng)混合物。
通常在此方法中使用等摩爾的(脫氧)核苷和羧酸或羧酸衍生物(羧酸鹵化物，-氰化物、-疊氮化物、-酐)，但也可以使用大大過(guò)量的一種反應(yīng)物。優(yōu)選的溶劑包括極性非質(zhì)子溶劑，如二氯甲烷、氯仿、DMF或醚(THF、二烷、二乙醚、TBDME等)。
在此方法的最后步驟，優(yōu)選在平穩(wěn)的酸性條件下，任選在80-100℃的高溫下除去OH保護(hù)基。溶劑如乙酸或水和乙酸或醇如甲醇或乙醇的混合物得到良好的結(jié)果?？梢允褂么呋康亩喾N有機(jī)酸如苯磺酸、檸檬酸、甲磺酸、草酸等進(jìn)行縮酮和乙縮醛裂解。
而且，在避光的條件下完成所有的步驟的結(jié)果是有利的。根據(jù)本技術(shù)中已知的標(biāo)準(zhǔn)方法完成產(chǎn)物的純化。
本發(fā)明的化合物是堿性的，并與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸形成藥學(xué)上可接受的鹽。用于這種酸加成鹽形成的適宜的酸的實(shí)例為本技術(shù)領(lǐng)域中已知的氫氯酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、檸檬酸、草酸、丙二酸、水楊酸、對(duì)氨基水楊酸、蘋果酸、富馬酸、琥珀酸、抗壞血酸、馬來(lái)酸、磺酸、磷酸、高氯酸、硝酸、甲酸、丙酸、葡糖酸、乳酸、酒石酸、羥基馬來(lái)酸、丙酮酸、苯乙酸、苯甲酸、對(duì)氨基苯甲酸、對(duì)羥基苯甲酸、甲磺酸、乙磺酸、亞硝酸、羥基乙磺酸、乙烯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、萘磺酸、磺胺酸、樟腦磺酸、china酸、扁桃酸、鄰甲基扁桃酸、氫-苯磺酸、苦味酸、己二酸、d-鄰甲苯基酒石酸、丙醇二酸、α-甲苯酸、(鄰、間、對(duì))-甲苯酸、萘胺磺酸和其它礦物酸或羧酸。以常規(guī)的方式通過(guò)游離堿形式與足量的目標(biāo)酸接觸制備鹽。
游離堿形式可以通過(guò)用適宜的稀堿水溶液如稀氫氧化鈉液、碳酸鉀、氨水和碳酸氫鈉水溶液處理鹽而再生。游離堿形式不同于它們的鹽形式之處在于某些特理性能，如在極性溶劑中的溶解度，但對(duì)于本發(fā)明的目的來(lái)說(shuō)鹽等同于它們對(duì)應(yīng)的游離堿。
本發(fā)明的通式(I)的化合物由于其尿嘧啶部分還表現(xiàn)出酸性性能，除此之外根據(jù)用于酯形成的試劑，例如在使用二羧酸進(jìn)行酯形成時(shí)，存在其它的酸性基團(tuán)且本發(fā)明的化合物能夠與有機(jī)或無(wú)機(jī)堿都形成鹽。因此，例如，如果在分子中存在羧酸取代基，則可以用無(wú)機(jī)和有機(jī)堿，如NaOH、KOH、NH4OH、四烷基氫氧化銨等形成鹽。
因此，本發(fā)明的化合物的適宜的藥學(xué)上可接受的鹽包括用有機(jī)或無(wú)機(jī)堿形成的加成鹽。源自這些堿的成鹽離子可以是金屬離子，例如鋁、堿金屬離子如鈉或鉀、堿土金屬離子如鈣或鎂或者胺鹽離子，其中大量的堿已知用于此目的。實(shí)例包括堿或堿土氫氧化物、堿或堿土烷氧化物、堿或堿土碳酸鹽或碳酸氫鹽，和/或有機(jī)堿如氨水、伯、仲和叔胺如乙醇胺、葡糖胺、N-甲基和N，N-二甲基葡糖胺、芳基烷基胺如二芐基胺和N，N-二芐基乙二胺、低級(jí)烷基胺如甲基胺、叔丁基胺、普魯卡因、低級(jí)烷基哌啶如N-乙基哌啶、環(huán)烷基胺如環(huán)己烷基、二環(huán)己基胺、嗎啉、1-金剛烷基胺、芐星青霉素，或者源自氨基酸如精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸的鹽，或者來(lái)自中性或酸性氨基酸的酰胺。生理學(xué)上可接受的鹽如鈉或鉀鹽和氨基酸也可以如以下藥用，并且是優(yōu)選的。
本發(fā)明的化合物和/或它們的藥學(xué)上可接受的鹽用于預(yù)防和/或治療I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛、哮喘和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)，包括機(jī)會(huì)感染。
而且，通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽可以用于制備用作興奮藥和/或用于預(yù)防和/或治療以下疾病的藥物制劑I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)、包括機(jī)會(huì)感染。
而且，本發(fā)明的化合物用作興奮藥或興奮劑。本文所用的術(shù)語(yǔ)“興奮藥”或“興奮劑”指暫時(shí)增加身體功能的速率的藥學(xué)活性化合物。興奮藥的主要藥理學(xué)作用是刺激身體的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周系統(tǒng)。某些興奮劑僅影響特定的器官如心臟、肺、腦或神經(jīng)系統(tǒng)。興奮劑包含的物質(zhì)如阿米庚酸、阿米苯唑、苯丙胺、bromantan、咖啡因、carphedon、可卡因、麻黃素、芬坎法明、mesocarb、戊四唑(pentylentetrazol)、哌苯甲醇、沙丁胺醇、沙美特羅、特布他林和相關(guān)的物質(zhì)。影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮劑包括methcathione、替苯丙胺、MDMA、苯丙胺、甲基苯丙胺、芬乙茶堿、哌甲酯、芬美曲嗪、安非拉酮、mesocarb、匹莫林、芬特明等。
苯丙胺類型興奮劑可以用于治療注意力不集中癥、發(fā)作性睡眠癥和肥胖。除了興奮劑的使用以外，這些對(duì)神經(jīng)起顯著作用的興奮藥的主要治療應(yīng)用為焦慮、抑郁、癲癇癥、精神病和睡眠異常。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“刺激機(jī)體”指根據(jù)本發(fā)明式(I)的化合物對(duì)特定的器官，尤其是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，從而導(dǎo)致類似于通過(guò)使用上述現(xiàn)有技術(shù)中的興奮劑而獲得的治療作用。因此，本發(fā)明的化合物可以用于治療注意力不集中癥、發(fā)作性睡眠、肥胖、焦慮、抑郁、癲癇癥、精神病預(yù)防和疲勞逆轉(zhuǎn)、哮喘和睡眠異常，并可以代替常用的興奮劑。
本發(fā)明通式(I)的尿苷和脫氧尿苷化合物包含由在核糖或脫氧核糖的5’C位的對(duì)應(yīng)的脂肪酸衍生的羧酸酯。該脂肪酸的烷基鏈包含8-30個(gè)碳原子。優(yōu)選這些烷基鏈具有8或10至24個(gè)碳原子，更優(yōu)選具有14-22個(gè)碳原子，進(jìn)一步更優(yōu)選具有8-22個(gè)碳原子，最優(yōu)選具有18、20或22個(gè)碳原子。
因此，優(yōu)選這些化合物其中，R″代表具有8-24個(gè)碳原子的烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的單支化或多支化烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的單烯烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的單烯支化烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的多烯烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的多烯支化烷基鏈、包含碳環(huán)或雜環(huán)的具有8-24個(gè)碳原子的支化或非支化烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的單炔(monoinoic)烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的單炔(monoinoic)支化烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的多炔(polyinoic)烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的多炔支化烷基鏈、具有8-24個(gè)碳原子的包含羥基或硫醇基的支化或非支化和/或飽和或不飽和烷基鏈和更優(yōu)選其中R″代表具有10-24個(gè)碳原子的單烯烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的單烯支化烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的多烯烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的多烯支化烷基鏈、包含碳環(huán)或雜環(huán)的具有8-20個(gè)碳原子的支化或非支化烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的單烯烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的單烯支化烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的多烯烷基鏈、具有10-24個(gè)碳原子的多烯支化烷基鏈的化合物。
還優(yōu)選具有偶數(shù)個(gè)碳原子的碳鏈。
可以用于形成羧酸酯的適宜的脂肪酸公開(kāi)在說(shuō)明書的脂肪酸部分，特別是在本申請(qǐng)的表1、2、3和4中。
如表1所列的長(zhǎng)鏈羧酸、表2總結(jié)的可以用于合成的支化或多支化羧酸如異棕櫚酸、降植烷酸或植烷酸和單烯酸是本發(fā)明的通式(I)的化合物。優(yōu)選使用如表4所示的炔屬酸和含羥基的酸如腦酮酸、羥基神經(jīng)酸、蓖麻油酸和lesquerolic酸。更優(yōu)選不飽和羧酸。最常見(jiàn)的不飽和羧酸的實(shí)例如說(shuō)明書的表3給出。其它實(shí)施例為油硬脂酸、梓樹(shù)酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮諾斂酸、sciadonic酸和視黃酸。
還優(yōu)選包含碳環(huán)或雜環(huán)的羧酸。含有環(huán)的羧酸的實(shí)例為11，12-亞甲基十八烷酸，9，10-亞甲基十六烷酸，還已知為硫辛酸或它的還原形式的coronaric酸、還已知為6，8-二噻烷辛酸的二氫硫辛酸。
在不飽和和含環(huán)羧酸中，更優(yōu)選亞油酸、γ-亞麻酸、二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸、α-亞麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17-二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、油硬脂酸、梓樹(shù)酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮諾斂酸、sciadonic酸和視黃酸。
最優(yōu)選以下羧酸γ-亞麻酸、α-亞麻酸、EPA、DHA、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸和(R)-硫辛酸。
因此，優(yōu)選以下本發(fā)明的化合物其中R″代表十二烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、順-9-十四烯基、順-9-十六烯基、順-6-十八烯基、順-9-十八烯基、順-11十八烯基、順-9-二十烯基、順-11-二十烯基、順-13-二十二烯基、順-15-二十四烯基、9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14-二十碳四烯基、7，10，13，16-二十二碳四烯基、4，7，10，13，16二十二碳五烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2二硫戊環(huán)-3-戊基、6，8-二噻烷辛基、二十二碳十七烷基、油硬脂?；⑹颂既┗?、catalpyl、taxoleyl、pinolenyl、sciadonyl、視黃基、14-甲基十五烷基、姥鮫烷基、植烷基、11，12-亞甲基十八烷基、9，10亞甲基十六烷基、9，10-環(huán)氧硬脂酰基、9，10-環(huán)氧十八碳-12-烯基、6-十八炔基、t11-十八碳烯-9-炔基、9-十八炔基、6-十八碳烯-9-炔基、t10-十七碳烯-8-炔基、9-十八碳烯-12-炔基、t7、t11-十八碳二烯-9-炔基、t8，t10-十八碳二烯-12-炔基、5，8，11，14-二十碳四炔基、2-羥基二十四烷基、2-羥基-15-二十四烯基、12-羥基-9-十八烯基和14-羥基-11二十烯基。
更優(yōu)選這些本發(fā)明的化合物其中R″代表9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14二十碳四烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2-二硫戊環(huán)-3-戊基和6，8-二噻烷辛基。
最優(yōu)選以下通式(I)的化合物化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳(lcosa)-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物5(2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物S5(2’R，3S，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物R5(2’R，3R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巰基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，和這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-10000mg，優(yōu)選范圍為1-5000mg，更優(yōu)選的范圍為10-1000mg，最優(yōu)選的范圍為100-800mg。
本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案涉及至少一種通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽與其它治療藥物、試劑或化合物的組合。該其它治療化合物選自包括以下的組維生素和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。適宜的維生素為維生素A、B1、B2、B6、B12、C、E、及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的另一方面涉及一種用于預(yù)防和/或治療哺乳動(dòng)物，包括人的以下疾病的方法I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)，包括機(jī)會(huì)感染，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用一定量的至少一種通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽，以有效地治療該疾病。本發(fā)明還公開(kāi)了一種用于刺激哺乳動(dòng)物，特別是人的機(jī)體，特別是特定器官和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的方法，所述方法包括步驟給該哺乳動(dòng)物施用一定量的至少一種本發(fā)明的化合物和/或其鹽，以有效地刺激該哺乳動(dòng)物的身體功能。
優(yōu)選將如下的本發(fā)明的尿苷或脫氧尿苷化合物用于該方法其中R″代表十二烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、順-9-十四烯基、順-9-十六烯基、順-6十八烯基、順-9-十八烯基、順-11-十八烯基、順-9-二十烯基、順-11二十烯基、順-13-二十二烯基、順-15-二十四烯基、9，12-十八碳烯基、6，9，12十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，11，14-二十碳四烯基、7，lO，13，16二十二碳四烯基、4，7，lO，13，16-二十二碳五烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17二十碳五烯基、7，10，13，16，19-二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2-二硫戊環(huán)-3-戊基、6，8-二噻烷辛基、二十二碳十七烷基、油硬脂酰基、十八碳三烯基、catalpyl、taxoleyl、pinolenyl、sciadonyl、視黃基、14-甲基十五烷基、姥鮫烷基、植烷基、11，12-亞甲基十八烷基、9，10-亞甲基十六烷基、9，lO-環(huán)氧硬脂?；?、9，10-環(huán)氧十八碳-12一烯基、6-十八炔基、t11-十八碳烯-9-炔基、9-十八炔基、6-十八碳烯-9-炔基、tlO-十七碳烯-8-炔基、9-十八碳烯-12-炔基、t7、t11-十八碳二烯-9-炔基、t8，t10-十八碳二烯-12-炔基、5，8，11，14-二十碳四炔基、2-羥基二十四烷基、2-羥基-15-二十四烯基、12-羥基-9-十八烯基和14-羥基-11-二十烯基。
更優(yōu)選這些化合物其中R″代表9，12-十八碳烯基、6，9，12-十八碳三烯基、8，11，14-二十碳三烯基、5，8，ll，14二十碳四烯基、9，12，15-十八碳三烯基、6，9，12，15-十八碳四烯基、8，11，14，17-二十碳四烯基、5，8，11，14，17-二十碳五烯基、7，10，13，16，19二十二碳五烯基、4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯基、5，8，11-二十碳三烯基、1，2二硫戊環(huán)-3-戊基和6，8-二噻烷辛基。
該方法中最優(yōu)選的化合物為以下化合物化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4二氧代3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物5 (2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物S5(2’R，3S，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4二氧代3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物R5(2’R，3R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4二氧代3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巰基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’基甲酯，和這些化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。
在該發(fā)明的方法中，通式(I)的化合物的給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-10000mg，優(yōu)選范圍為1-5000mg，更優(yōu)選范圍為10-1000mg，最優(yōu)選范圍為100-800mg。
而且，施用至少一種本發(fā)明的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽與其它治療藥物、試劑或化合物的組合也是有利的。該其它治療化合物選自包括以下的組維生素和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。適宜的維生素為維生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明其它方面涉及包含至少一種通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分和藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、助劑和/或稀釋劑的藥物組合物。該藥物組合物還可以包含附加的藥學(xué)活性化合物，所述化合物選自包括以下的組維生素和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。尤其是還可以加入維生素如維生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其藥學(xué)上可接受的鹽。
通式(I)的化合物和本發(fā)明的藥物組合物還可以它們的藥學(xué)活性鹽的形式施用，任選使用基本上無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、助劑或稀釋劑。本發(fā)明的藥物在常規(guī)固體或液體載體或稀釋劑和常規(guī)的藥學(xué)制備助劑中，以已知的適宜的劑量水平制備。優(yōu)選的制劑和配方是適于口用的給藥形式。例如，這些給藥形式包括丸劑、片劑、薄膜片劑、包衣片、膠囊、粉末和沉積物。除了口用之外的給藥形式也是可能的。含有該化合物的本發(fā)明的尿苷和脫氧尿苷化合物或藥物制劑和配方可以通過(guò)適宜的方法給藥，所述方法包括但不限于注射(靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下)；通過(guò)上皮或粘膜與皮膚襯料(口粘膜、直腸和陰道上皮襯料，鼻咽粘膜、腸粘膜)吸收；通過(guò)口，直腸，透皮，局部，真皮內(nèi)，胃內(nèi)，皮內(nèi)，陰道內(nèi)，血管內(nèi)，鼻內(nèi)，頰內(nèi)，經(jīng)皮舌下或吸入給藥，或者任何其它藥學(xué)技術(shù)中可獲得的方法在所公開(kāi)的方法中，包含至少一種本發(fā)明的通式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分的本發(fā)明的藥物組合物一般以含有根據(jù)以下目標(biāo)給藥形式適宜地選擇的適宜的載體材料的混合物給藥片劑、膠囊(固體填充、半固體填充或液體填充)、用于組合的粉末、口凝膠、酏劑、可分散顆粒劑、糖漿、懸浮劑等，并遵循常規(guī)藥學(xué)實(shí)踐。例如，關(guān)于片劑或膠囊形式的口服給藥，可以將活性成分與任何口服無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的惰性載體，如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸鈣、硫酸鈣、滑石、甘露糖醇、乙醇(液體形式)等組合。而且，在需要的時(shí)候，還可以在混合物中加入適宜的粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑和著色劑。粉末和片劑可以包含大約5％至大約95％的本發(fā)明組合物。
適宜的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖、玉米增甜劑、天然和合成樹(shù)膠如阿拉伯膠、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟。在這些潤(rùn)滑劑中，可以提及的是在這些劑型中使用硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜爾膠等。如果需要還可以包括甜味劑和調(diào)味劑和防腐劑。以下更詳細(xì)地討論上述的某些術(shù)語(yǔ)，即崩解劑、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑等。
此外，本發(fā)明的組合物可以制成持續(xù)釋放形式，以提供任何一種或多種組分或活性成分的速率控制的釋放，以最優(yōu)化治療效果。用于持續(xù)釋放的適宜的劑型包括含有不同崩解速率的層的分層片劑或者浸漬有活性化合物的控釋聚合物基質(zhì)，并成形為含有這種浸漬或包囊的多孔性聚合物基質(zhì)的片劑或膠囊。
液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳液。例如可以提及水或水-丙二醇溶液，用于腸胃外注射或加入甜味劑和乳濁劑作為口服溶液、懸浮液和乳液。液體形式制劑還可以包括鼻內(nèi)給藥溶液。
適于吸入和鼻內(nèi)給藥的氣霧劑可以包括溶液和粉末形式的固體，它可以與藥學(xué)上可接受的載體如惰性壓縮氣體如氮組合。除了口服之外，吸入是用于應(yīng)用本發(fā)明的化合物的一種優(yōu)選的形式。
關(guān)于制備栓劑，首先將低熔點(diǎn)蠟如脂肪酸甘油酯如可可油的混合物熔化，并通過(guò)攪拌或類似的混合將活性成分均勻分散于其中。然后將熔化的均勻的混合物傾入適宜尺寸的模子，使其冷卻，從而固化。
本發(fā)明的還包括欲在使用前立即轉(zhuǎn)化為用于口服或腸胃外給藥的液體劑型的固體劑型。這些液體形式包括溶液、懸浮液和乳液。
本發(fā)明的尿苷和脫氧尿苷化合物還可以是可經(jīng)皮遞送的。經(jīng)皮組合物可以采用乳膏、洗液、氣霧劑和/或乳液的形式，并可以包括在基質(zhì)經(jīng)皮貼片中或本領(lǐng)域中常規(guī)地用于此目的的儲(chǔ)藏類型中。
術(shù)語(yǔ)膠囊指一種由甲基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或淀粉制成的特定的容器或外殼，用于保持或包含含有活性成分的組合物。硬殼膠囊一般由較高凝膠強(qiáng)度骨架和豬皮膚明膠的混合物制成。膠囊本身可能包含少量的染料、不透明劑、增塑劑和防腐劑。
片劑意指含有活性成分和適宜的稀釋劑的壓制或模制固體劑型。片劑可以通過(guò)壓制混合物或通過(guò)濕制粒、干制粒得到的顆?；蛘弑绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的壓制法而制備。
口服凝膠指分散或溶解在親水半固體基質(zhì)中的活性成分。
用于組合的粉末指含有活性成分和適宜的稀釋劑的粉末混合物，它可以懸浮在水或汁中。
適宜的稀釋劑是通常構(gòu)成組合物或劑型的主要部分的物質(zhì)。適宜的稀釋劑包括糖如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨醇、源自小麥、玉米和馬鈴薯的淀粉和纖維素如微晶纖維素。組合物中稀釋劑的數(shù)量范圍為全部組合物的大約5wt％至大約95wt％，優(yōu)選大約25wt％至大約75wt％，更優(yōu)選為大約30wt％至大約60wt％，最優(yōu)選為大約40-50wt％。
術(shù)語(yǔ)“崩解劑”指加到組合物中以幫助分裂(崩解)并釋放藥物的物質(zhì)。適宜的崩解劑包括淀粉、“冷水溶解的”改性淀粉如羧甲基淀粉鈉、天然和合成樹(shù)膠如槐豆、梧桐膠、瓜爾豆、黃芪膠和瓊脂、微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素如微晶纖維素鈉、藻酸鹽如藻酸和藻酸鈉、粘土如膨潤(rùn)土和泡騰混合物。組合物中崩解劑的數(shù)量范圍可以為組合物的大約1至大約40wt％，優(yōu)選組合物的2至大約30wt％，更優(yōu)選組合物的大約3至20wt％，最優(yōu)選大約5至大約10wt％。
粘合劑表征這樣的物質(zhì)它們將粉末粘或“粘合”在一起并通過(guò)形成顆粒而使它們內(nèi)聚，從而用作配方中的“粘合劑”。粘合劑加大已可以在稀釋劑或填充劑中獲得的粘合強(qiáng)度。適宜的粘合劑包括源自蔗糖、源自小麥、玉米和馬鈴薯的糖、淀粉；天然樹(shù)膠如阿拉伯膠、明膠和黃芪膠；海藻的衍生物如海藻酸、海藻酸鈉和海藻酸銨鈣；纖維素材料如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉和羧丙基甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；和無(wú)機(jī)物如硅酸鎂鋁。組合物中粘合劑的數(shù)量范圍為組合物的大約1-30wt％，優(yōu)選為組合物的大約2wt％至大約20wt％，更優(yōu)選為組合物的大約3％至大約10％，進(jìn)一步更優(yōu)選為大約3wt％至大約6wt％。
潤(rùn)滑劑指加到該劑型中以使片劑、顆粒等在被壓制以后能夠通過(guò)減少摩擦或磨損而從模子或沖模中釋放。適宜的潤(rùn)滑劑包括金屬硬脂酸鹽如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；嵩熔點(diǎn)蠟和水溶性潤(rùn)滑劑如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d’1-亮氨酸。通過(guò)在壓制前的最后步驟入潤(rùn)滑劑，因?yàn)樗鼈儽仨毚嬖谟陬w粒表面、顆粒之間和片劑受壓部分。組合中潤(rùn)滑劑的數(shù)量范圍可以為組合物的大約0.05至大約15wt％，優(yōu)選為組合物的0.2至大約5wt％，更優(yōu)選為大約0.3至大約3％，最優(yōu)選為組合物的大約0.3至大約1.5wt％。
助流劑是防止結(jié)塊和改善的流動(dòng)特征，從而使流動(dòng)平滑和均勻的物質(zhì)。適宜的助流劑包二氧化硅和滑石。組合物中助流劑的數(shù)量范圍可以為組合物的大約0.01-10wt％，優(yōu)選為全部組合物的0.1％至大約7wt％，更優(yōu)選為大約0.2-5wt％，最優(yōu)選為大約0.5至大約2wt％。
著色劑是將組合物或劑型著色的賦形劑。這些賦形劑可包括食物等級(jí)染和吸附在適宜的吸附劑如粘土或二氧化鋁上的食物等級(jí)染料。著色劑的數(shù)量范圍可以為組合物的大約0.01-0wt％，優(yōu)選大約0.05-6wt％，更選為組合物的大約0.1至大約4wt％，最優(yōu)選為大約0.1至大約1wt％。
用于制備和施用發(fā)明的化合物的技術(shù)見(jiàn)于″Remington’sPharmaceutical Sciences″Mack Publishing Co.，Easton PA。包含至少一種本發(fā)明的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的適宜的組合物可以是在適宜液體藥物載體中的化合物的溶液或者任何其它制劑如片劑、丸劑、薄膜片劑、包衣片、糖衣丸、膠囊、散劑沉積物、凝膠、糖漿、漿、懸浮液、乳液等等。
可以通過(guò)用于測(cè)定LD50(50％群體致死的劑量)和ED50(對(duì)50％群體有療效的劑量)的細(xì)胞培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)方法來(lái)確定本發(fā)明化合物的毒性和療效。毒性和療效之間的劑量比是治療指數(shù)，它可以表示為L(zhǎng)D50和ED50之間比率。本發(fā)明的化合物劑量?jī)?yōu)選在包括具有少量或無(wú)毒性的ED50的循環(huán)濃度范圍之內(nèi)。給藥組合物的實(shí)際數(shù)量將取決于治療的受試者、受試者的體重、疾病的嚴(yán)重程度、給藥方式和處方醫(yī)師的判斷。
本發(fā)明的另一方面還涉及包含至少一種選自包括以下的組的脂肪酸和/或脂肪酸烷基酯的藥物組合亞油酸、γ-亞麻酸、二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16二十二碳五烯酸、α-亞麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、油硬脂酸、十八碳三烯酸、梓樹(shù)酸、二十二碳七烯酸、taxoleic酸、皮諾斂酸(pinolenic acid)、sciadonic酸、視黃酸、異棕櫚酸、降植烷酸、植烷酸、11，12-亞甲基十八烷酸、9，10-亞甲基十六烷酸、coronaric酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、塔里酸、santalbic酸、硬脂炔酸、6，9-十八碳炔酸、三聚氰酸、還陽(yáng)參油酸、heisteric酸、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸、ETYA、腦酮酸、羥基神經(jīng)酸、蓖麻油酸、lesquerolic酸、十三烷二酸、十六碳二酸、和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或亞油酸C1-C7烷基酯、γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亞麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DPA C1-C7烷基酯、DHA C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、梓樹(shù)酸C1-C7烷基酯、二十二碳七烯酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮諾斂酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯、視黃酸C1-C7烷基酯、異棕櫚酸C1-C7烷基酯、降植烷酸C1-C7烷基酯、植烷酸C1-C7烷基酯、11，12-亞甲基十八烷酸C1-C7烷基酯、9，10-亞甲基十六烷酸C1-C7烷基酯、coronaric酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、塔里酸C1-C7烷基酯、santalbic酸C1-C7烷基酯、硬脂炔酸C1-C7烷基酯、6，9-十八碳炔酸C1-C7烷基酯、三聚氰酸C1-C7烷基酯、還陽(yáng)參油酸C1-C7烷基酯、heisteric酸C1-C7烷基酯、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸C1-C7烷基酯、ETYAC1-C7烷基酯、腦酮酸C1-C7烷基酯、羥基神經(jīng)酸C1-C7烷基酯、蓖麻油酸C1-C7烷基酯、lesquerolic酸C1-C7烷基酯、十三烷二酸C1-C7烷基酯、十六碳二酸C1-C7烷基酯、以及至少一種選自下列的核苷和/或核苷酸化合物尿苷、脫氧尿苷、尿苷一磷酸、脫氧尿苷一磷酸和/或其藥學(xué)上可接受的鹽。
優(yōu)選尿苷、脫氧尿苷、尿苷一磷酸或脫氧尿苷一磷酸與以下物質(zhì)的組合亞油酸、γ-亞麻酸、二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16二十二碳五烯酸、α-亞麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、油硬脂酸、梓樹(shù)酸、十八碳三烯酸、二十二碳十七烷酸、taxoleic酸、皮諾斂酸、sciadonic酸、視黃酸和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、和/或亞油酸C1-C7烷基酯、γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亞麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17-二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DPAC1-C7烷基酯、DHA1 C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、梓樹(shù)酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、二十二碳十七烷酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮諾斂酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯和/或視黃酸C1-C7烷基酯。
更優(yōu)選包含尿苷、脫氧尿苷、尿苷一磷酸或脫氧尿苷一磷酸和以下物質(zhì)的藥物組合γ-亞麻酸，α-亞麻酸、EPA、DHA、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)6，8-二噻烷辛酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、和/或(R)-硫辛酸、和/或其藥學(xué)上可接受的鹽、和/或y-亞麻酸C1-C7烷基酯、a-亞麻酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯、DHAC1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、和/或(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯。
最優(yōu)選以下物質(zhì)的藥物組合(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、和/或(S)6，8-二噻烷辛酸、和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯與尿苷、脫氧尿苷、尿苷酸或脫氧尿苷酸和/或其藥學(xué)上可接受的鹽。
用于形成上述脂肪酸的C1-C7烷基酯的適宜的醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、仲丁醇、叔丁醇、異丁醇、戊醇、異戊醇、環(huán)戊醇、己醇、環(huán)己醇、庚醇。
該藥物組合還可以包含如以上詳述的適宜的藥學(xué)上接受的載體、賦形劑、助劑和稀釋劑。
本發(fā)明的另一方面涉及該藥物組合用于預(yù)防和/或治療以下疾病的用途I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)、包括機(jī)會(huì)感染。而且，包含至少一種通式(I)的化合物和/或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合可以用作興奮藥，特別用于治療注意力不集癥、發(fā)作性睡眠癥、肥胖、焦慮、抑郁、癲癇、精神病和睡眠異常，并用于刺激特定的身體功能，尤其是中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能。
該藥物組合還可以用制備用于預(yù)防和/或治療以下疾病的藥劑或制劑I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)、包括機(jī)會(huì)感染。包含該藥物組合物的該藥劑還可以作興奮劑，以治療注意力不集癥、發(fā)作性睡眠、肥胖、焦慮、抑郁、癲癇、精神病和睡眠異常，并用于刺激特定的身體功能，尤其是中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能。
該藥劑或制劑可以制成適于靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、口、直腸、上皮、腸、透皮、局部、真皮內(nèi)、胃內(nèi)、膠膜內(nèi)、陰道內(nèi)、血管內(nèi)、鼻內(nèi)、頰內(nèi)、經(jīng)皮、舌下或任何其它應(yīng)用的形式。而且，該藥劑還可以包含至少一種如以上詳述的基本無(wú)毒的藥學(xué)上接受的載體、賦形劑、助劑或稀釋劑。
本發(fā)明的藥物組合的給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-15000mg，優(yōu)選1-8000mg，更優(yōu)選1-5000mg，進(jìn)一步更優(yōu)選范圍為10-2000mg，最優(yōu)選的范圍為100-1000mg。
本發(fā)明的另一個(gè)有利的方面涉及還包含另一種治療劑或化合物的藥物組合，其中該其它的治療化合物選自包括以下的組維生素和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。適宜的維生素為維生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明還第一次公開(kāi)了用于預(yù)防和/或治療哺乳動(dòng)物，包括人的以下疾病的方法I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)，包括機(jī)會(huì)感染，所述方法包括給該哺乳動(dòng)物施用一定量的該藥物組合的，以有效地治療該疾病或功能異常。除此之外，本發(fā)明還公開(kāi)了一種用于刺激哺乳動(dòng)物的機(jī)體和特定身體功能的方法，所述方法包給該哺乳動(dòng)物施用一定量的該藥物組合物，以有效地刺激機(jī)體和該特定的身體功能。
在本發(fā)明的方法中，給藥的藥物組合的劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-30000mg，優(yōu)選范圍為10-20000mg，更優(yōu)選范圍為50-15000mg，進(jìn)一步更優(yōu)選范圍為100-10000mg，最優(yōu)選的范圍為1000-6000mg。
圖的說(shuō)明圖1顯示一組選擇的脂肪酸；圖2顯示核糖、脫氧核糖和核苷尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶，通式(I)的化合物的堿基；圖3公開(kāi)了六種高度活性的通式(I)的化合物的結(jié)構(gòu)化合物1(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-6，9，12-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物2(2’R，3’S，4’R，5’R)-十八碳-9，12，15-三烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物3(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十碳(lcosa)-5，8，11，14，17-五烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物4(2’R，3’S，4’R，5’R)-二十二碳-4，7，10，13，16，19-六烯酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，化合物5(2’R，3’S，4’R，5’R)-5-[1，2]二硫戊環(huán)-3-基-戊酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯，和化合物5’(2’R，3’S，4’R，5’R)-6，8-二巰基-辛酸5’-(2，4-二氧代-3，4-二氫-2H-嘧啶-1-基)-3’，4’-二羥基-四氫呋喃-2’-基甲酯。
圖4顯示化合物5’對(duì)大鼠紋狀體中多巴胺濃度的作用。通過(guò)施用較低濃度的化合物5’使有害的丙二酸鹽引起的大鼠紋狀體中的多巴胺消耗幾乎得到補(bǔ)償；圖5a表明化合物5’能夠顯著地增加大鼠黑質(zhì)中的5-HT濃度；圖5b表明化合物5’能夠顯著地增加大鼠黑質(zhì)中的5-HIAA水平。
實(shí)施例實(shí)施例1一般酯化方法將1mol當(dāng)量的脂肪酸溶于極性非質(zhì)子溶劑。優(yōu)選的溶劑為二氯甲烷、氯仿或醚如THF。一次性加入優(yōu)選溶于反應(yīng)溶劑中的0.1-2.0mol當(dāng)量、優(yōu)選0.5-1.2mol當(dāng)量的二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC)。
在數(shù)分鐘之后，將1.0mol當(dāng)量的受保護(hù)的核苷或脫氧核苷加到溶液中，并在數(shù)分鐘之后加入催化或半催化量的二甲基氨基吡啶(DMAP)。將反應(yīng)混合物在無(wú)光的條件下攪拌10-20小時(shí)。根據(jù)本技術(shù)領(lǐng)域中已知的標(biāo)準(zhǔn)方法完成所得產(chǎn)物的純化。
實(shí)施例2一般縮酮裂解方法在酸性條件下完成縮酮裂解。例如，使用溶于有機(jī)溶劑的芐基磺酸或其它有機(jī)酸。用乙酸，最優(yōu)選用80％乙酸獲得最佳結(jié)果。反應(yīng)一般在高溫下進(jìn)行，優(yōu)選在80-100℃下進(jìn)行數(shù)小時(shí)，優(yōu)選進(jìn)行2-6小時(shí)，這取決于反應(yīng)物的穩(wěn)定性。在中和之后，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法完成通式(I)的化合物的純化。
實(shí)施例3化合物3合成
步驟1酯化在氮?dú)夥障聦?.00g(6.61mmol)EPA溶于10ml二氯甲烷。加入溶于20ml氯甲烷的1.38g(1.16mmol)DCC，并在5分鐘之后入根據(jù)實(shí)施例5的步驟1得到的縮酮保護(hù)的尿苷。再過(guò)5分鐘后，將25mg DMAP加到此溶液。在室溫下在暗處攪拌反應(yīng)物。將所得的溶液用30ml MTBE(甲基叔丁醚)稀釋、過(guò)濾并濃縮。通過(guò)柱色譜法，使用己烷∶異丙醇(5∶1)作為洗脫劑純化棕色和油狀殘余物。得到無(wú)色油。
產(chǎn)率3.42g(6.01mmol，91％th.)步驟2縮酮裂解將3.10g(5.45mmol)得自步驟1的縮酮保護(hù)的化合物3溶于40ml80％乙酸，并在至高大約95℃下加熱4.5小時(shí)。減壓下除去乙酸，并將殘余溶于50ml乙酸乙酯，用飽和NaHCO3溶液洗滌，用鹽水洗滌兩次，用Na2SO4干燥并濃縮。得到褐色固體，用柱色譜法將其純化，使用二氯甲烷∶甲醇(10∶1)作為洗脫劑。得到淺黃色和高粘性油。
產(chǎn)率1.52g(2.88mmol，53％th.)
化合物3MS(m/z(％))528(2，37)M+；113(100)1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ＝0.98(t，3H)，1.69-1.76(m，2H)，2.05-2.16(m，4H)，2.35-2.39(m，2H)，2.79-2.87(m，8H)，4.12-4.14(m，1H)，4.25-4.32(m，2H)，4.35-4.44(m，2H)，5.28-5.46(m，10H)，5.75(d，1H)，5.82(d，1H)，7.62(d，1H)，10.15(s，1H)13C-NMR(100.6MHz；CDCl3)δ＝14.24，20.54，24.67，24.82，25.55，25.63，26.45，32.12，33.45，63.20，70.22，75.01，82.23，91.27，102.48，127.03，127.89，128.05，128.34，128.57，128.61，128.72，128.76，129.24，132.05，139.71，151.18，163.63，173.92已根據(jù)上述方法合成化合物1和2，其中用γ-亞麻酸或α-亞麻酸代替EPA。
步驟1的產(chǎn)率超過(guò)90％，而步驟2的產(chǎn)率為大約50％。
實(shí)施例4化合物4的合成
步驟1酯化在氮?dú)夥障聦?.20g(6.70mmol)DHA溶于20ml二氯甲烷。加溶于20ml二氯甲烷的1.40g(6.78mmol)DCC，并在5分鐘后加入1.90g(6.69mmol)得自根據(jù)實(shí)施例5的步驟1的縮酮保護(hù)的尿苷。再過(guò)5分鐘后，將40mg DMAP加到此溶液。在無(wú)光的條件下完成反應(yīng)。用20ml MTBE稀釋所得的溶液，過(guò)濾，用10ml MTBE洗滌并濃縮。用柱色譜法純化殘余，使用己烷∶乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫劑。得一種無(wú)色油。
產(chǎn)率3.15g(5.30mmol，79％th.)步驟2縮酮裂解將3.10g(5.21mmol)得自步驟1的縮酮保護(hù)的化合物4溶于125ml 80％乙酸，并加熱至大約95℃。用TLC或HPLC法檢測(cè)反應(yīng)物。95℃下2小時(shí)后，大約90％的原料轉(zhuǎn)化成化合物4。減壓下除去乙酸，并將殘余物溶于20ml乙酸乙酯，用飽和NaHCO3溶液洗滌，用鹽水洗滌兩次，用Na2SO4干燥并濃縮。得到一種褐色油，通過(guò)柱色譜法將其純化，使用二氯甲烷∶異丙醇(10∶1)作為洗脫劑。得到一種淺黃色和高粘性油。
產(chǎn)率1.20g(2.17mmol，42％th.)化合物4MS(m/z(％))555(2，37)M+；113(100)1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ＝0.98(t，3H)，2.05-2.12(m，2H)，2.40-2.45(m，4H)，2.80-2.89(m，1H)，3.52(d，1H)，4.13-4.16(m，1H)，4.25-4.32(m，2H)，4.36-4.44(m，2H)，5.15(d，1H)，5.29-5.47(m，12H)，5.75(d，1H)，5.82(d，1H)，7.62(d，1H)，10.10(s，1H)13C-NMR(100.6MHz；CDCl3)δ＝14.24，20.55，22.12，22.62，25.32，25.55，25.61，25.65，34.00，63.24，70.23，75.04，82.26，91.13，102.47，127.03，127.40，127.88，128.05，128.07，128.33，128.49，128.60，129.86，132.05，139.67，151.19，163.56，172.61實(shí)施例5化合物5的合成 步驟1縮酮化在氮?dú)夥障聦?7.7g尿苷溶于250ml無(wú)水丙酮和11.8g 2，2-二甲氧基丙烷。加入0.3ml濃硫酸后，室溫下將反應(yīng)混合物攪拌大約20小時(shí)。在此期間形成大量的細(xì)沉淀。過(guò)濾后用在80ml二氯甲烷中的2ml三乙胺處理殘余溶，然后進(jìn)行充分洗滌。
產(chǎn)率21.9g(77.0mmol，68％th)熔點(diǎn)159-160℃還可通過(guò)以下方法增加產(chǎn)率將丙酮的體積減少大約三分之一，加入庚烷作為抗溶劑(anti-solvent)，并在過(guò)濾前將混合物冷卻至0-5℃?？梢垣@得80-85％的產(chǎn)率范圍。
由于成本的原因，已證明可以用水含量為0.1％(w/w)的大量丙酮代替無(wú)水丙酮同時(shí)不影響產(chǎn)率。
步驟2酯化在氮?dú)夥障聦?.00g DL-α-硫辛酸溶于50ml二氯甲烷，并加入溶于70ml二氯甲烷中的4.00g DCC(二環(huán)己基碳化二亞胺)。5分鐘后，將得自步驟1的5.51g縮酮加到溶液，并經(jīng)另外5分鐘后加入150mg DMAP(二甲基氨基吡啶)。室溫下將溶液攪拌過(guò)夜，用100mlMTBE(甲基叔丁基醚)稀釋并過(guò)濾。真空下除去溶劑，并用硅膠柱色譜法純化殘余的油，使用己烷∶乙酸乙酯(1∶2)作為洗脫劑。到一種黃色粘油。
產(chǎn)率8.06g(17.1mmol，88％th)步驟2反應(yīng)還可以在乙酸乙酯中完成，它的優(yōu)點(diǎn)在于反應(yīng)產(chǎn)物可以不經(jīng)純化而直接經(jīng)歷步驟3的反應(yīng)條件。將反應(yīng)物于室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，然后用含水的10％檸檬酸洗液將微過(guò)量的DCC水解成DCU(二環(huán)己基脲)，并用NaHCO3水溶液洗滌而容易地除去過(guò)量的DL-α-硫辛酸。在過(guò)濾處理過(guò)程中除去DCU。產(chǎn)率根據(jù)規(guī)模和溶劑而在50和90％之間。
除了DCC/DMP之外，還已試驗(yàn)新戊酰氯/DMAP作為有效的偶聯(lián)劑?？梢允褂萌軇┤缂妆交蛎讶鏣HF或二烷代替二氯甲烷?？梢允褂肗，N’-羰基二咪唑或氯甲酸異丁酯代替DCC。
步驟3脫保護(hù)在300ml乙酸中在大約95℃的溫度下將11.7g得自步驟2的縮酮保護(hù)的化合物5攪拌5.5小時(shí)。然后在真空下除去乙酸，并將殘余物再溶于150ml乙酸乙酯。每次用70ml飽和NaHCO3將該溶液洗滌兩次，然后每次用100ml飽和NaCl溶液洗滌兩次。用Na2SO4干燥溶液，并使溶劑幾乎被完全除去(應(yīng)該避免濃縮至干)。將灰色殘余物再溶于150ml乙酸乙酯，并任選用超聲波處理2-3分鐘，同時(shí)形成黃色沉淀。過(guò)濾分離沉淀(化合物5)，用乙酸乙酯洗滌并干燥。除了乙酸乙酯之外，還已試驗(yàn)n-BuOH、甲苯、1-戊醇、乙腈或這些溶劑的混合物作為可選擇的沉淀溶劑。
產(chǎn)率7.42g(17.2mmol，69％th)化合物5熔點(diǎn)95-97℃純度＞98％(HPLC)MS(m/z(％))432(7.9)M+，113(100)1H-NMR(400MHz，d4-甲醇)δ＝1.41-1.50(m，2H)，1.57-1.72(m，4H)，1.82-1.90(m，1H)，2.37-2.47(m，3H)，3.04-3.18(m，2H)，3.51-3.57(m，1H)，4.06-4.19(m，3H)，4.29-4.37(m，2H)，5.71(d，1H)，5.80(d，1H)，7.66(d，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，d4-甲醇)δ＝25.7，29.7，34.7，35.7，39.3，41.3，57.5，64.6，71.2，75.2，82.9，91.8，102.9，142.3，152.2，166.0，174.8實(shí)施例6化合物S-5的合成根據(jù)實(shí)施例5所列的反應(yīng)方法合成化合物S-5。使用對(duì)映異構(gòu)物純的S-α-硫辛酸代替DL-α-硫辛酸。
化合物S-5
熔點(diǎn)109-110℃1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.40(m，2H)，1.47-1.56(m，3H)，1.59-1.68(m，1H)，1.77-1.87(m，1H)，2.30-2.40(m，3H)，3.04-3.18(m，2H)，3.53-3.60(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.02-4.06(m，1H)，4.13-4.23(m，2H)，5.21(d，1H)，5.40(d，1H)，5.62(d，1H)，5.71(d，1H)，7.57(d，1H)。
實(shí)施例7化合物R-5的合成根據(jù)如實(shí)施例5所列的反應(yīng)方法合成化合物R-5。使用對(duì)映異構(gòu)純R-α-硫辛酸代替DL-α-硫辛酸。
化合物R-5熔點(diǎn)88-89℃1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.40(m，2H)，1.47-1.56(m，3H)，1.59-1.68(m，1H)，1.79-1.86(m，1H)，2.30-2.41(m，3H)，3.04-3.17(m，2H)，3.53-3.60(m，1H)，3.88-3.97(m，2H)，4.02-4.06(m，1H)，4.13-4.24(m，2H)，5.21(d，1H)，5.40(d，1H)，5.62(d，1H)，5.71(d，1H)，7.58(d，1H)，11.27(s，1H)。
實(shí)施例8化合物5’的合成 在惰性下將2.28g(5.27mmol)化合物5溶于40ml甲醇。將溶液冷卻至0℃，并在15分鐘內(nèi)分小部分加入2.50g(66.1mmol)硼氫化鈉。在NaBH4加入期間，黃色溶液變成無(wú)色。在完成硼氫化鈉的加入之后，將溶液攪拌45分鐘，用50ml水稀釋，并用濃HCl酸化至pH＝1。加入50ml氯仿并分離有機(jī)層，用10ml鹽水洗滌二次，用Na2SO4干燥并濃縮。純化后得到化合物5’，為無(wú)色油。
產(chǎn)率1.63g(3.75mmol，71％th.)化合物5MS(m/z(％))401(18.0)M+-H2S；113(100)1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)δ＝1.30-1.79(m，7H)，1.32-1.43(m，2H)，1.85-1.94(m，1H)，2.33-2.40(m，2H)，2.61-2.76(m，2H)，2.88-2.96(m，1H)，4.15(s，br.，1H)，4.26(s，br.，2H)，4.32-4.42(m，2H)，5.75(d，1H)，5.83(d，1H)，7.58(d，1H)，10.32(s，br.，1H)。
13C-NMR(100.6MHz，d6-DMSO)δ＝25.7，29.7，34.7，35.7，39.3，41.3，57.5，64.6，71.2，75.2，82.9，91.8，102.9，142.3，152.2，166.0，174.8實(shí)施例9糖尿病和多神經(jīng)病用于測(cè)定本發(fā)明合物對(duì)治療糖尿病和/或多神經(jīng)病的效果的模型括用體外海馬切片檢測(cè)由于葡萄糖濃度升高引起的錐體細(xì)胞的過(guò)敏性?？赏ㄟ^(guò)使用通式(I)的化合物劑量依賴地對(duì)抗該過(guò)敏性。
大鼠的海馬切片提供一種用于測(cè)定與神經(jīng)組織直接接觸的藥物之間相互作用的有效模型?？梢灾苯訙y(cè)定藥學(xué)活性化合物和腦組織之間的相互作用，因?yàn)樵隗w外海馬切片內(nèi)保留了三維組織結(jié)構(gòu)。該化合物作用于特定的神經(jīng)細(xì)胞群，海馬的錐體細(xì)胞。已知錐體細(xì)胞和Schaffer側(cè)支(其可以被電刺激)之間的突觸將神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸鹽用于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過(guò)程。電刺激的結(jié)果，所謂的群峰，代表活化的錐體細(xì)胞的數(shù)量。其它已知的模型允許僅在至多8小時(shí)的時(shí)間范圍內(nèi)測(cè)定神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)。這種模型的優(yōu)點(diǎn)是可以在化學(xué)或電刺激細(xì)胞之后更長(zhǎng)時(shí)間體外分析神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)。給細(xì)胞帶來(lái)高刺激水平，從而允許在病理-生理?xiàng)l件下對(duì)藥理學(xué)活性化合物進(jìn)行長(zhǎng)期測(cè)定(W.Dimpfel等人，Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1991，1142-1146；W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)。
材料和方法在本發(fā)明的方法中，利用在超熔融介質(zhì)中的高濃度葡萄糖提高刺激水平，以測(cè)定本發(fā)明化合物對(duì)抗效果。由于事實(shí)上α-硫辛酸已被應(yīng)用于此方法(W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)，選擇化合物5’作為密切相關(guān)的化合物，以在將α-硫辛酸和尿苷與化合物5’比較時(shí)產(chǎn)生合理的結(jié)果。因此，將α硫辛酸和尿苷選作參考。
在本研究中使用21只成年雄性CD大鼠。在將試驗(yàn)動(dòng)物麻醉和放血之后分離海馬。通過(guò)在磷酸鹽緩沖的鹽水(NaCl124mM，KCl5mM，CaCl22mM，MgSO42mM，NaH2PO41.25mM，NaHCO326mM，葡萄糖10mM；對(duì)照溶液ACSF；Carl Roth，卡爾斯魯厄，德國(guó))中的膠水固定海馬的中間部分。然后通過(guò)振動(dòng)球磨機(jī)(RhemaLabortechnik)將海馬切成400μM的切片。將海馬切片保存至少1小時(shí)，然后在溫育室中在碳合氣(carbogen)下進(jìn)行試驗(yàn)(S.J.SchiffG.G.Somjen，Brain Research1985，345，279-284)。
本實(shí)驗(yàn)在所謂的“含Haas Top的堿性單元”(Medical SystemCorporation，U.S.A.)中，在35℃的溫度下，根據(jù)H.L.Haas和R.W.Greene的方案完成實(shí)驗(yàn)(Neurotransmitter and corticalfunction；ed.M.Avoli，T.A.Reader，R.W.Dykes and P.Gloor，pp.483-494，Plenum Publishing Corp.)。將海馬切片放置在一片紗布上，并通過(guò)蠕動(dòng)泵進(jìn)行灌注。用碳合氣(carbogen)沖洗試驗(yàn)容器(流速200ml/小時(shí))以保持必需的氧供應(yīng)。
通過(guò)刺激發(fā)生器(laboratory computer，Pro Science)和雙極性同心鋼電極(Rhodes Medical Systems，U.S.A.)刺激CA2-區(qū)域。使用200μs的脈沖寬度，并將安培數(shù)恒定地保持在200μA。刺激發(fā)生器釋放四種間隔20秒的單一刺激信號(hào)，從而釋放總共為4個(gè)海馬切片的群峰。計(jì)算四個(gè)峰振幅的平均值。
結(jié)果前述關(guān)于α-硫辛酸能夠?qū)褂善咸烟菨舛仍黾右鸬倪^(guò)敏的發(fā)現(xiàn)是可以再現(xiàn)的(W.Dimpfel等人，Eur.J.Med.Res.1996，1，523-527)。而且，尿苷用作第二參考物。與大約1mV的最初值相比，群峰形式的海馬錐體細(xì)胞的電響應(yīng)在30mM葡萄糖存在期間增加大約160％。所有這些物質(zhì)，α-硫辛酸、尿苷和化合物5’能夠劑量依賴地降低升高的刺激水平。
可以理解化合物5’的活性范圍在1-25μM，而對(duì)于尿苷該濃度范圍延伸至大約100μM。α-硫辛酸在最高400μM的濃度下表現(xiàn)出接近線性的效果。因此，化合物5’的計(jì)算的IC50值為5μM，尿苷為40μM，而α-硫辛酸的IC50值大約為200μM。
化合物5’與α-硫辛酸和尿苷對(duì)葡萄糖誘導(dǎo)的過(guò)敏性的提高的作用的直接比較可以通過(guò)使用上述的模型來(lái)完成。海馬錐體細(xì)胞過(guò)敏水平的提高可能被化合物5’最有效地治療，而尿苷和α-硫辛酸僅表現(xiàn)出較弱的效果。
因此，可以強(qiáng)調(diào)化合物5’能夠顯著地降低升高的過(guò)敏性，因而通式(I)的化合物可以用作治療糖尿病和多神經(jīng)病的藥學(xué)上有效的試劑。
實(shí)施例10糖尿病和多神經(jīng)病根據(jù)實(shí)施例9所列的方法和模型，還測(cè)試了S-5和R-5，并將試驗(yàn)結(jié)果與尿苷和α-硫辛酸的結(jié)果比較。
作為對(duì)電刺激的響應(yīng)，測(cè)定了活化的錐體細(xì)胞的群峰。群峰的振幅代表活化的錐體細(xì)胞的數(shù)量。與大約1mV的最初值相比，群峰形式的海馬錐體細(xì)胞的電響應(yīng)在30mM葡萄糖存在期間增加大約160％-170％。以μV為單位測(cè)定群峰的振幅并計(jì)算至少三個(gè)測(cè)定的振幅的平均值。
可以理解，化合物R-5的活性范圍為1-15μM，而化合物S-5的活性范圍為1-10μM。如上述，尿苷在1-100μM的濃度范圍內(nèi)表現(xiàn)出活性，而α-硫辛酸在最高400μM的濃度下表現(xiàn)出接近線性的效果?；衔颯-5的IC50的計(jì)算值為4μM，R-5的IC50的計(jì)算值為8μM，尿苷的IC50的計(jì)算值為40μM，而α-硫辛酸的IC50的計(jì)算值大約為200μM。
IC50值的范圍為4-8μM的化合物5’、S-5和R-5的效果與α-硫辛酸(IC50值＝200uM)和尿苷(IC50值＝40uM)對(duì)葡萄糖導(dǎo)致的過(guò)敏性的提高的效果的比較可以使用上述模型完成。該比較證明本發(fā)明的化合物能夠以非常類似的方式降低海馬錐體細(xì)胞的升高的過(guò)敏水平，而尿苷和α-硫辛酸表現(xiàn)出非常弱的效果。
因此，可以認(rèn)為本發(fā)明的化合物能夠顯著地降低錐體細(xì)胞的過(guò)敏性，因而是治療糖尿病和多神經(jīng)病的藥學(xué)有效試劑。
實(shí)施例11神經(jīng)保護(hù)作用本實(shí)施例證明，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出神經(jīng)保護(hù)效力。α-硫辛酸的神經(jīng)保護(hù)作用和二氫硫辛酸的更為顯著的神經(jīng)保護(hù)作用是已知的(P.Wolz，J.Krieglstein，Lipoic acid in Health and Disease，NewYork，Basel，Hong Kong，Marcel Dekker Inc.，1997，pp.205-225)。因此，由于對(duì)照的原因選擇二氫硫辛酸作為陽(yáng)性對(duì)照。與本發(fā)明的二氫硫辛酸最類似的化合物是化合物5’。使用下述的小鼠模型以檢驗(yàn)化合物5’與二氫硫辛酸和未處理的小鼠，即僅用載體但不用任何活性成分處理的小鼠相比的劑量依賴的神經(jīng)保護(hù)作用。
材料和方法小鼠的永久性病灶大腦缺血根據(jù)Welsh等人所述的方法用雄性NMRI小鼠(12-17只動(dòng)物/組)完成永久性中腦動(dòng)脈閉塞(J.Neurochem.1987，846-851)。簡(jiǎn)言之，在用三溴乙醇(600mg/kg腹膜內(nèi))麻醉后，在頭顱上鉆小洞以暴露中腦動(dòng)脈。中腦動(dòng)脈的莖和兩側(cè)支被電凝法永久性地閉塞。在外科手術(shù)過(guò)程中用加熱燈將體溫保持在37℃±1℃。然后，將小鼠在30℃的環(huán)境溫度下保持2小時(shí)，然后進(jìn)行MCA閉塞。
關(guān)于組織學(xué)評(píng)價(jià)，在中腦動(dòng)脈閉塞之后2天再次用三溴乙醇麻醉小鼠，并用1.5％的中性紅溶液(0.5ml)進(jìn)行腹膜內(nèi)灌注。移出腦并將其在固定劑(4％在磷酸鹽緩沖液中的福爾馬林，pH7.4)中保持24小時(shí)。
在這個(gè)小鼠病灶性大腦局部缺血模型中，僅發(fā)現(xiàn)皮質(zhì)組織梗塞，而且梗塞體積與梗塞表面相關(guān)(C.BackhauR等人，J.Pharmacol.Methods 1992，27，27-32)。根據(jù)C.BackhauR的公開(kāi)，通過(guò)成像分析系統(tǒng)(Kontron，Eching，Germany)確定不被中性紅染色的腦表面組織(以平方毫米為單位)為梗塞表面積。
在MCA閉塞前1小時(shí)在腹膜內(nèi)完成化合物5’、二氫硫辛酸和僅有的載體的注射。將化合物5’和二氫硫辛酸溶于25％macrogol 400(載體)。注射體積總是0.25-0.30ml/小鼠。使用劑量為100、150和500mg/kg的化合物5’和150mg/kg的二氫硫辛酸。對(duì)照組只接受載體(0.25-0.30ml 25％macrogol 400/小鼠)。
結(jié)果結(jié)果表示為平均值±SD(標(biāo)準(zhǔn)偏差)。根據(jù)ANOVA和DUNCAN檢驗(yàn)對(duì)化合物5’處理、二氫硫辛酸處理和載體處理的動(dòng)物之間的差別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)評(píng)價(jià)。
在第一系列的實(shí)驗(yàn)中，可以證明當(dāng)給藥濃度為在0.25-0.30ml的載體中的100mg時(shí)，化合物5’顯著降低小鼠腦表面的梗塞面積(參見(jiàn)表6)。
表6化合物5’和二氫硫辛酸對(duì)NMRI小鼠的永久性MCA閉塞之后的梗塞面積的影響
這種作用并不是清楚地是劑量依賴的，因?yàn)樗坪蹼S著化合物5’劑量的增大作用減小。因此，預(yù)計(jì)20mg/kg-100mg/kg化合物5’/小鼠之間的某濃度達(dá)到最大神經(jīng)保護(hù)作用。這種結(jié)果表明低劑量的本發(fā)明化合物可以用于實(shí)現(xiàn)腦梗塞面積的顯著減小。
與對(duì)照組相比，用500mg/kg化合物5’處理的小鼠而得到的梗塞面積的平均值不再發(fā)生統(tǒng)計(jì)學(xué)上的減小。最低劑量的化合物5’的作用似乎是最顯著的，并在較高濃度的化合物5’處觀察到神經(jīng)保護(hù)作用的減小。濃度為500mg/kg的化合物5’僅檢測(cè)到輕微的神經(jīng)保護(hù)作用，而二氫硫辛酸根本不表現(xiàn)出效果，并在此研究中沒(méi)有減小梗塞面積。
上述的結(jié)果清楚地證明化合物5’的神經(jīng)保護(hù)作用。此外，本發(fā)明描述了在低濃度下獲得最大神經(jīng)保護(hù)作用的有利發(fā)現(xiàn)。因此，已證明本發(fā)明的化合物可以用作抗局部缺血藥，以用于治療中風(fēng)。而且，在應(yīng)用于上述方法的小鼠中沒(méi)有檢測(cè)到毒性作用。
實(shí)施例12神經(jīng)保護(hù)作用選擇本實(shí)施例以測(cè)定本發(fā)明的化合物對(duì)Wistar大鼠的黑質(zhì)和紋狀體中的多巴胺、它的代謝產(chǎn)物3，4-二羥基苯基乙酸(DOPAC)和5-羥基色胺(5-HT或血清素)和它的代謝產(chǎn)物5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)的濃度的影響(Charles River，Sulzbach Rosenberg)。
選擇所述的兩個(gè)腦區(qū)域以檢查多巴胺能神經(jīng)元，因?yàn)橐阎撋窠?jīng)元對(duì)可能導(dǎo)致帕金森氏病、阿耳茨海默氏病和亨廷頓氏舞蹈病的神經(jīng)毒素敏感。下述的方法用于確定變性過(guò)程。丙二酸鈉用作該方法中的神經(jīng)毒性物質(zhì)。
材料和方法已知丙二酸鈉增加試驗(yàn)動(dòng)物的紋狀體中的von多巴胺。六只Wistar大鼠的小組中的每組已被用作試驗(yàn)動(dòng)物。因此，可以將多巴胺濃度用作指示劑，以確定神經(jīng)毒素的有害作用。
將100mg化合物5’溶于5ml 50％丙烷-1，2-二醇(Merck，Da0rmstadt)。將四份5ml份化合物5’腹膜內(nèi)施用于試驗(yàn)動(dòng)物。第一部分在第一天試驗(yàn)的晚上施用，第二部分在第二天早上施用，第三部在第二次試驗(yàn)日的晚上施用，而最后部分在第三試驗(yàn)日的早上施用。在最后應(yīng)用化合物5’之后30分鐘，在麻醉大鼠之后(Ketamin80mg/kg和Xylasin6-10mg/kg)通過(guò)精密泵(流速0.5μl/分)將溶于生理氯化鈉溶液的2μmol丙二酸鈉注射到左紋狀體。
在應(yīng)用丙二酸鈉后4天，分別切除紋狀體和黑質(zhì)的處理與未處理的部分，稱重、與高氯酸一起均化，并離心。然后使等分試樣的上清液經(jīng)歷HPLC，并通過(guò)HPLC-ELCD比色測(cè)定多巴胺、DOPAC，5-HT，5-HIAA和3-甲氧基酪胺的數(shù)量。
結(jié)果應(yīng)用丙二酸鈉導(dǎo)致多巴胺和它的代謝產(chǎn)物HVA和DOPAC減少。丙二酸神經(jīng)毒素降低多巴胺(-44％，p＜0.001)和DOPAC(-30％，p＜0.001)的濃度。
化合物5’能夠增加紋狀體中的多巴胺(+18％，p＜0.05)和DOPAC(+10％，p＜0.05)的濃度。而且，可以證明將丙二酸鹽與化合物5’一起應(yīng)用不導(dǎo)致多巴胺和DOPAC濃度的顯著降低?；衔?’的其它應(yīng)用補(bǔ)償丙二酸鹽作用(+44％更多的多巴胺，與僅應(yīng)用丙二酸鹽相比)(參見(jiàn)圖4)。
而且，可以表明化合物5’的給藥大大增加5-HT和它的代謝產(chǎn)物5-HIAA的水平(參見(jiàn)圖5a和5b)。在5-HT和5-HIAA水平降低的情況下，施用化合物5’能夠顯著地將5-HT和5-HIAA水平增加至正常值。因此，施用化合物5’補(bǔ)償或超補(bǔ)償對(duì)5-HT和5-HIAA水平的減小作用。
以上展示的結(jié)果證明化合物5’的神經(jīng)保護(hù)作用。有用的發(fā)現(xiàn)表明化合物5’能夠補(bǔ)償神經(jīng)毒素的有害作用，并能夠增加5-HT和5-HIAA水平。因此，已證明本發(fā)明的化合物可以用作藥物，以治療帕金森氏病、阿耳茨海默氏病、亨廷頓氏舞蹈病或抑郁。
權(quán)利要求
1.包含以下組分的藥物組合至少一種選自包括以下的組的脂肪酸亞油酸、γ-亞麻酸、二高-γ-亞麻酸、花生四烯酸、7，10，13，16-二十二碳四烯酸、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸、α-亞麻酸、十八碳四烯酸、8，11，14，17-二十碳四烯酸、EPA、DPA、DHA、Mead酸、油硬脂酸、十八碳三烯酸、梓樹(shù)酸、二十二碳七烯酸、taxoleic酸、皮諾斂酸、sciadonic酸、視黃酸、異棕櫚酸、降植烷酸、植烷酸、11，12-亞甲基十八烷酸、9，10-亞甲基十六烷酸、coronaric酸、(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、塔里酸、santalbic酸、硬脂炔酸、6，9-十八碳炔酸、三聚氰酸、還陽(yáng)參油酸、heisteric酸、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸、ETYA、腦酮酸、羥基神經(jīng)酸、蓖麻油酸、lesquerolic酸、十三烷二酸、十六碳二酸和/或亞油酸C1-C7烷基酯、γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、二高-γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、花生四烯酸C1-C7烷基酯、7，10，13，16-二十二碳四烯酸C1-C7烷基酯、4，7，10，13，16-二十二碳五烯酸C1-C7烷基酯、α-亞麻酸C1-C7烷基酯、十八碳四烯酸C1-C7烷基酯、8，11，14，17-二十碳四烯酸C1-C7烷基酯、EPAC1-C7烷基酯、DPA C1-C7烷基酯、DHA C1-C7烷基酯、Mead酸C1-C7烷基酯、油硬脂酸C1-C7烷基酯、十八碳三烯酸C1-C7烷基酯、梓樹(shù)酸C1-C7烷基酯、二十二碳七烯酸C1-C7烷基酯、taxoleic酸C1-C7烷基酯、皮諾斂酸C1-C7烷基酯、sciadonic酸C1-C7烷基酯、視黃酸C1-C7烷基酯、異棕櫚酸C1-C7烷基酯、降植烷酸C1-C7烷基酯、植烷酸C1-C7烷基酯、11，12亞甲基十八烷酸C1-C7烷基酯、9，10亞甲基十六烷酸C1-C7烷基酯、coronaric酸C1-C7烷基酯、(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6、8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、塔里酸C1-C7烷基酯、santalbic酸C1-C7烷基酯、硬脂炔酸C1-C7烷基酯、6，9-十八碳炔酸C1-C7烷基酯、三聚氰酸C1-C7烷基酯、還陽(yáng)參油酸C1-C7烷基酯、heisteric酸C1-C7烷基酯、t8，t10-十八碳二烯-12-炔酸C1-C7烷基酯、ETYA C1-C7烷基酯、腦酮酸C1-C7烷基酯、羥基神經(jīng)酸C1-C7烷基酯、蓖麻油酸C1-C7烷基酯、lesquerolic酸C1-C7烷基酯、十三烷二酸C1-C7烷基酯、十六碳二酸C1-C7烷基酯，和至少一種選自包括以下的組的核苷和/或核苷酸化合物尿苷、脫氧尿苷、尿苷一磷酸、脫氧尿苷一磷酸和/或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合，所述組合物還包含適宜的藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、助劑和/或稀釋劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的藥物組合，其中所述脂肪酸選自包括以下的組(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)硫辛酸、(R，S)-6、8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸、(S)-6，8-二噻烷辛酸、γ-亞麻酸、α-亞麻酸、EPA、DHA和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、γ-亞麻酸C1-C7烷基酯、α-亞麻酸C1-C7烷基酯、EPA C1-C7烷基酯和/或DHA C1-C7烷基酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的藥物組合，其中所述肪肪酸為(R，S)-硫辛酸、(S)-硫辛酸、(R)-硫辛酸、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸、(R)-6，8-二噻烷辛酸和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸和/或其藥學(xué)上可接受的鹽和/或(R，S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(S)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R)-硫辛酸C1-C7烷基酯、(R，S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯、(R)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯和/或(S)-6，8-二噻烷辛酸C1-C7烷基酯。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之任一項(xiàng)的藥物組合，其中該藥物組合適于通過(guò)靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、粘膜與皮膚、口、直腸、透皮、局部、真皮內(nèi)、胃內(nèi)、皮內(nèi)、陰道內(nèi)、血管內(nèi)、鼻內(nèi)、頰內(nèi)、經(jīng)皮、舌下或吸入給藥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的藥物組合用作興奮藥和/或用于預(yù)防和/或治療以下疾病的用途I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛、和/或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)，包括機(jī)會(huì)感染。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的藥物組合用于制備用作興奮藥和/或用于預(yù)防和/或治療以下疾病的藥劑的用途I型和II型糖尿病、炎癥、癌、壞死、胃潰瘍、神經(jīng)變性疾病(阿耳茨海默氏病、帕金森氏病)、神經(jīng)病、神經(jīng)性疼痛和多神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)病、外周和/或中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化、重金屬中毒、局部缺血病和局部缺血性心臟病、肝病和肝功能異常、變態(tài)反應(yīng)、心血管疾病、衣原體肺炎、抑郁、肥胖、中風(fēng)、疼痛、和/或逆轉(zhuǎn)錄病毒感染(HIV，AIDS)、包括機(jī)會(huì)感染。
8.包含權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的藥物組合的藥物組合物，其中各藥學(xué)活性化合物的日給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-15000mg。
9.包含權(quán)利要求8的藥物組合的藥物組合物，其中各藥學(xué)活性化合物的日給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為1-5000mg。
10.包含權(quán)利要求9的藥物組合的藥物組合物，其中備藥學(xué)活性化合物的日給藥劑量所對(duì)應(yīng)的有效濃度范圍為100-1000mg。
11.包含權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的藥物組合的藥物組合物，其中該藥物組合與其它治療化合物聯(lián)合給藥。
12.包含權(quán)利要求11的藥物組合的藥物組合物，其中該其它治療化合物選自包括以下的組維生素和抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物。
13.包含權(quán)利要求12的藥物組合的藥物組合物，其中該維生素為維生素A、B1、B2、B6、B12、C、E及其藥學(xué)上可接受的鹽。
14.包含權(quán)利要求1-5之任一項(xiàng)的藥物組合的藥物組合物，其中所述藥物組合物通過(guò)靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、粘膜與皮膚、口、直腸、透皮、局部、真皮內(nèi)、胃內(nèi)、皮內(nèi)、陰道內(nèi)、血管內(nèi)、鼻內(nèi)、頰內(nèi)、經(jīng)皮、舌下或吸入給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的通式(I)的尿苷酯，其中R代表羧酸殘基，優(yōu)選脂肪酸殘基，而R’代表氫或羥基，它們作為抗各種疾病的藥學(xué)活性試劑的用途，該尿苷酯的制備方法和含有至少一種尿苷酯作為活性成分的藥物組合物。本發(fā)明還涉及一種包含游離脂肪酸和/或脂肪酸酯和尿苷、脫氧尿苷、尿苷一磷酸和/或脫氧尿苷一磷酸的藥物組合，并涉及這種藥物組合的用途。
文檔編號(hào)A61P25/16GK1839873SQ200610007050
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2002年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月30日
發(fā)明者R·蘇斯羅 申請(qǐng)人:特羅姆斯多弗藥劑股份有限公司及兩合公司