專利名稱：掛金燈甾類化合物的提取方法及其藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物成分的提取方法及其藥物組合物。
背景技術(shù)：
目前市場(chǎng)上治療心腦血管疾病的藥物多為西藥，容易產(chǎn)生耐藥性和較強(qiáng)的毒副作用，而且在治療心律失常的同時(shí)西藥本身又導(dǎo)致心律失常的產(chǎn)生。中藥在治療心腦血管疾病方面近幾年取得了可喜的進(jìn)步，但多以中醫(yī)成方為研究對(duì)象，新中藥方劑的研究很少。掛金燈甾類化合物來源于掛金燈(錦燈籠)，中醫(yī)認(rèn)為掛金燈性味微苦，歸肺經(jīng)，具有清熱解毒，利咽化痰，利尿的功效；用于治骨蒸勞熱，痰熱咳嗽，咽喉腫痛，喑啞，黃疸，水腫，小便不利，天泡濕瘡。所以，目前尚沒有用掛金燈甾類化合物治療心腦血管疾病的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明人在掛金燈的研究中發(fā)現(xiàn)掛金燈甾類化合物對(duì)心律失常、心肌缺血、心腦血管硬化、心腦血管栓塞和高血壓等心腦血管疾病有預(yù)防和治療的作用。掛金燈甾類化合物按以下方法提取(一)將掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)過濾收集的提取液，再依次通過甲殼素和大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附純化；(三)用濃度為50％～90％的醇對(duì)大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，在減壓或常壓條件下濃縮成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用濃度為60％～90％的醇溶解，過濾，濾液經(jīng)減壓干燥即得到掛金燈甾類化合物。含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由65～75％的掛金燈甾類化合物、15～25％的苦參堿和5～15％的大黃制成。含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由45～55％的掛金燈甾類化合物、25～35％的苦參堿和15～25％的小檗堿制成。含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由55～65％的掛金燈甾類化合物、30～40％的苦參堿和1～10％的麝香制成。本發(fā)明提取掛金燈甾類化合物的方法簡(jiǎn)單，掛金燈甾類化合物純度高達(dá)50％以上。本發(fā)明中含掛金燈甾類化合物的藥物組合物可用于治療心律失?；蛐募∪毖?，有效率分別為85％、90％和85％。
具體實(shí)施例方式
具體實(shí)施例方式
一本實(shí)施方式掛金燈甾類化合物按以下方法提取(一)將掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提?。?二)過濾收集的提取液，再依次通過甲殼素和大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附純化；(三)用濃度為50％～90％的醇對(duì)大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，在減壓或常壓條件下濃縮成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用濃度為60％～90％的醇溶解，過濾，濾液經(jīng)減壓干燥即得到掛金燈甾類化合物。
用本實(shí)施方式提取的掛金燈甾類化合物進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)(本試驗(yàn)使用的掛金燈甾類化合物的純度相同純度為70％；試驗(yàn)中掛金燈甾類化合物都溶解于濃度為5％的葡萄糖后再注射，注射劑量均為10mL)(1)缺氧存活試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)分4組進(jìn)行，每組10只、體重為18～22g的昆明種小鼠，第1組小鼠按體重每千克靜脈注射10mL生理鹽水；第2組小鼠按體重每千克靜脈注射5mg掛金燈甾類化合物；第3組小鼠按體重每千克靜脈注射15mg掛金燈甾類化合物；第4組小鼠按體重每千克靜脈注射75mg掛金燈甾類化合物；注射30min后將小鼠放入含3g鈉石灰的500mL磨口瓶里，瓶口途凡士林后改瓶蓋，記錄小鼠死亡時(shí)間。各組小鼠死亡時(shí)間如表1所示。
表1

第2、3和4組與第1組相比具有顯著差異P＜0.05。試驗(yàn)結(jié)果說明掛金燈甾類化合物可以延長(zhǎng)完全密閉小鼠存活時(shí)間，并增加抗缺氧能力。
(2)掛金燈甾類化合物對(duì)烏頭堿誘發(fā)的心律失常的影響本實(shí)驗(yàn)分4組進(jìn)行，每組10只、體重為200～230g的健康雌性Wistar大鼠，第1組雌性Wistar大鼠按體重每千克靜脈注射10mL生理鹽水；第2組雌性Wistar大鼠按體重每千克靜脈注射5mg掛金燈甾類化合物；第3組雌性Wistar大鼠按體重每千克靜脈注射15mg掛金燈甾類化合物；第4組雌性Wistar大鼠按體重每千克靜脈注射75mg掛金燈甾類化合物；30min后按體重每千克腹腔注射5mg、20％的烏拉坦進(jìn)行麻醉；然后將大鼠仰位固定并與BL-420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)相連掃描心電，待大鼠心電顯示穩(wěn)定后在第1組大鼠舌下靜脈注射生理鹽水，在第2、3和4組大鼠按體重每千克舌下靜脈注射1mL、0.04％的烏頭堿，注射5s內(nèi)完滴制。
滴丸所采用的主藥可以為穿山龍、槐米、雪膽提取浸膏；也可以采用穿山龍、槐米、雪膽提取浸膏的β-環(huán)糊精包合物。采用穿山龍、槐米、雪膽提取浸膏的β-環(huán)糊精包合物的優(yōu)點(diǎn)在于其對(duì)味道苦的穿山龍、槐米、雪膽提取物進(jìn)行包合后，使其口感好，患者容易接受。
滴丸完成后，可以采用素丸直接使用；或采用了薄膜包衣技術(shù)對(duì)素丸進(jìn)行包衣，可有效掩蓋藥物的苦味并防止主藥的引濕性而導(dǎo)致的滴丸吸濕，溶解粘連現(xiàn)象，保證滴丸在保存中不干丸、裂丸，也保證滴丸在儲(chǔ)存當(dāng)中的穩(wěn)定性。所述包衣材料包括例如常規(guī)包衣材料或歐巴代包衣材料。
另外，本發(fā)明滴丸中部分示例性組分及其制劑工藝參數(shù)選擇如下表所列

本發(fā)明金槐冠心滴丸表面光滑、硬度適當(dāng)且圓整度好，粒徑可以為2-5mm，適于容易地、沒有任何不適地給藥。
下表為金槐冠心滴丸與市售片劑的比較數(shù)據(jù)。
表4

a表示與第1組相比具有顯著差異P＜0.05；b表示與第2組比具有顯著差異P＜0.05；c表示與第3組相比具有顯著差異P＜0.05；d表示與第4組相比具有顯著差異P＜0.05；e表示與第5組相比具有顯著差異P＜0.05。試驗(yàn)結(jié)果說明掛金燈甾類化合物具有抗心肌缺血作用。
具體實(shí)施例方式
二本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是醇為乙醇、丙醇或丁醇。其它與實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施例方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(一)中醇或水的重量是掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼總重量的4～10倍。其它步驟與
具體實(shí)施例方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(三)中用大孔吸附樹脂柱體積4～5倍、溫度為50～70℃的醇回流洗脫1.8～2.2h。其它步驟與實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施例方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(三)中減壓或常壓濃縮溫度始終低于70℃；減壓濃縮壓力小于10-3Pa。其它步驟與
具體實(shí)施例方式
六本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(四)中減壓干燥壓力小于10-3Pa，溫度低于70℃。其它步驟與實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施例方式
七本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一、三或四的不同點(diǎn)是醇是體積濃度為70％的乙醇。其它與實(shí)施方式一、三或四相同。
具體實(shí)施例方式
八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(一)中用重量是掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼總重量的5～9倍的水加熱煮沸掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼3次，每次35～45min。其它步驟與實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施例方式
九本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一的不同點(diǎn)是步驟(二)中大孔吸附樹脂柱為DM130大孔吸附樹脂柱。其它步驟與實(shí)施方式一相同。
具體實(shí)施例方式
十本實(shí)施方式掛金燈甾類化合物按以下方法提取(一)將掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提??；(二)過濾收集的提取液，再進(jìn)行甲殼素吸附；(三)收集吸附液，在減壓或常壓條件下濃縮成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用濃度為60％～90％的醇溶解，過濾，濾液經(jīng)減壓干燥即得到掛金燈甾類化合物。
具體實(shí)施例方式
十一本實(shí)施方式含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由65～75％的掛金燈甾類化合物、15～25％的苦參堿和5～15％的大黃制成。
本實(shí)施方式制成的藥物組合物用于治療心律失常。表5是本實(shí)施方式藥物組合物治療心律失常的臨床藥效學(xué)報(bào)告。
用法用量每日服三次，每次按病人體重每千克服用本實(shí)施方式藥物組合物45mg。
對(duì)30例年齡55～60歲的男性心律失?；颊哌M(jìn)行10～20天治療，患者病情明顯好轉(zhuǎn)的占55％(室性早搏消失、室性心動(dòng)過速消失、竇性節(jié)律恢復(fù))，患者病情輕度改善的占30％(室性早搏次數(shù)減少、室性心動(dòng)過速次數(shù)減少)，治療無效患者的占15％。本實(shí)施方式藥物治療心律失常的效果如表5所示，其中病情診斷采信正規(guī)醫(yī)院出具心電圖。
表5

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圖10A-10型精裝治療箱托架示意11A-10型精裝治療箱自蓄熱功能復(fù)合體尺寸規(guī)格5 自蓄熱功能復(fù)合體圖12A-10型精裝治療箱岫玉錐尺寸規(guī)格6 岫玉錐圖13B-05型精裝治療箱底箱示意14B-05型精裝治療箱托盤示意15B-05型精裝治療箱鋁合金箱箱體示意圖具體實(shí)施方式
以下根據(jù)實(shí)例例詳細(xì)地說明本發(fā)明。但本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例等。
實(shí)施例1、簡(jiǎn)裝治療盒

實(shí)施例2、B-05精裝治療箱

對(duì)30例年齡55～60歲的男性心律失常患者進(jìn)行10～20天治療，患者病情明顯好轉(zhuǎn)的占60％(室性早搏消失、室性心動(dòng)過速消失、竇性節(jié)律恢復(fù))，患者病情輕度改善的占30％(室性早搏次數(shù)減少、室性心動(dòng)過速次數(shù)減少)，治療無效患者的占10％。本實(shí)施方式藥物治療心律失常的效果如表6所示，其中病情診斷采信正規(guī)醫(yī)院出具心電圖。
表6

具體實(shí)施方式
十五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
十四的不同點(diǎn)是含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由46～54％的掛金燈甾類化合物、<p>上述步驟A中使用乙酸乙酯萃取的次數(shù)優(yōu)選為4次。
按上述方法取苦碟子藥材乙醇熱回流提取液，濃縮至1ml相當(dāng)于原生藥4g，加1∶1(體積/體積)乙酸乙酯萃取，反復(fù)幾次，合并各次乙酸乙酯層，加熱回收乙酸乙酯后，測(cè)定溶液中總黃酮、內(nèi)酯A含量，以萃取次數(shù)、總黃酮保留率、內(nèi)酯A保留率為指標(biāo)，檢查水相中的有效成分的殘留，結(jié)果如下

保留率＝乙酸乙酯萃取后藥液含量/乙酸乙酯萃取前藥液含量×100％試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明萃取次數(shù)提高，水層內(nèi)酯A保留率降低，萃取四次以后，水層內(nèi)酯A的含量降低已不明顯，繼續(xù)萃取效果不佳，而且會(huì)出現(xiàn)水層與酯層難以分離的現(xiàn)象，故決定優(yōu)選4次萃取。
乙酸乙酯萃取后的萃取液中含有大量的乙酸乙酯，因此對(duì)乙酸乙酯進(jìn)行回收，既可重復(fù)利用以降低生產(chǎn)成本，減少環(huán)境污染，又可減少乙酸乙酯對(duì)產(chǎn)品的影響。采用普通回收工藝，待濃縮液已無明顯的乙酸乙酯味，且濃縮操作難于進(jìn)行時(shí)，停止?jié)饪s操作，此時(shí)檢查濃縮液的相對(duì)密度為1.20～1.30(80℃)，所得濃縮液即為所需的酯相。
苦碟子內(nèi)的總黃酮由多種黃酮組成，其中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷等主要有效成分在酸性條件下容易沉淀從而與其它雜質(zhì)分離。
傳統(tǒng)小針的酸沉條件中采用50％的硫酸做沉淀劑，部分原因在于在先操作中使用了氧化鈣乳做沉淀劑，使用硫酸可將溶液中殘留的氧化鈣進(jìn)一步沉淀完全，減少由于純化操作引入新雜質(zhì)的量；本發(fā)明對(duì)此工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化，不采用氧化鈣乳沉淀劑，一方面可避免引入新的雜質(zhì)，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成影響，另一方面可避免由于使用氧化鈣乳沉淀劑所造成的環(huán)境污染。
傳統(tǒng)小針的酸沉法純化，收取的是上清液，棄去沉淀。由于有效成分主要在沉淀中，因此收得率很低。又由于本發(fā)明只是考慮不同pH值條件下，純化工藝的效果，因此，采用注射劑生產(chǎn)中常用的鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液做為pH調(diào)節(jié)劑，可滿足工

具體實(shí)施方式
十八本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
十七的不同點(diǎn)是含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由56～64％的掛金燈甾類化合物、31～39％的苦參堿和2～9％的麝香制成。
具體實(shí)施例方式
十九本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
十七的不同點(diǎn)是含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由60％的掛金燈甾類化合物、35％的苦參堿和5％的麝香制成。
權(quán)利要求
1.掛金燈甾類化合物的提取方法，其特征在于掛金燈甾類化合物按以下方法提取(一)將掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼清洗、粉碎后用醇或水提取；(二)過濾收集的提取液，再依次通過甲殼素和大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附純化；(三)用濃度為50％～90％的醇對(duì)大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，在減壓或常壓條件下濃縮成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用濃度為60％～90％的醇溶解，過濾，濾液經(jīng)減壓干燥即得到掛金燈甾類化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的掛金燈甾類化合物的提取方法，其特征在于醇為乙醇、丙醇或丁醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的掛金燈甾類化合物的提取方法，其特征在于步驟(一)中醇或水的重量是掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼總重量的4～10倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的掛金燈甾類化合物的提取方法，其特征在于步驟(三)中用大孔吸附樹脂柱體積4～5倍、溫度為50～70℃的醇回流洗脫1.8～2.2h。
5.含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由65～75％的掛金燈甾類化合物、15～25％的苦參堿和5～15％的大黃制成。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由66～74％的掛金燈甾類化合物、16～24％的苦參堿和6～14％的大黃制成。
7.含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由45～55％的掛金燈甾類化合物、25～35％的苦參堿和15～25％的小檗堿制成。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由46～54％的掛金燈甾類化合物、26～34％的苦參堿和16～24％的小檗堿制成。
9.含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由55～65％的掛金燈甾類化合物、30～40％的苦參堿和1～10％的麝香制成。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的含掛金燈甾類化合物的藥物組合物，其特征在于含掛金燈甾類化合物的藥物組合物按重量百分比由56～64％的掛金燈甾類化合物、31～39％的苦參堿和2～9％的麝香制成。
全文摘要
掛金燈甾類化合物的提取方法及其藥物組合物，它涉及一種藥物成分的提取方法及其藥物組合物。掛金燈甾類化合物的提取方法(一)用醇或水提取掛金燈果實(shí)、根莖和/或宿萼；(二)提取液純化；(三)進(jìn)行洗脫，將洗脫液濃縮成浸膏或干粉；(四)浸膏或干粉再用醇溶解，過濾，濾液經(jīng)干燥即得到掛金燈甾類化合物。掛金燈甾類化合物用于制備治療心腦血管疾病的藥物組合物。本發(fā)明提取掛金燈甾類化合物的方法簡(jiǎn)單，掛金燈甾類化合物純度高達(dá)50％以上。本發(fā)明中含掛金燈甾類化合物的藥物組合物可用于治療心律失?；蛐募∪毖行史謩e為85％、90％和85％。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1864717SQ20061001015
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2006年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月14日
發(fā)明者楊寶峰, 初文峰, 方志偉, 董陸陸 申請(qǐng)人:哈爾濱醫(yī)科大學(xué)