專利名稱：海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于聚合物生物材料領(lǐng)域，也屬于藥物新制劑領(lǐng)域；具體涉及一種作為可生物降解藥物載體—海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法。
背景技術(shù)：
海藻酸鈉是目前研究較為廣泛的天然多糖，憑借其優(yōu)良的生物黏附性、生物相容性以及無毒副作用，被認為是一種優(yōu)良的藥物載體的原料。此外，海藻酸鈉因含有羧酸根離子和氨基而表現(xiàn)出pH敏感性能，通常被用于pH敏感的緩控釋載藥體系。大豆分離蛋白具有保養(yǎng)胃腸道、緩解慢性腎病、預防和治療骨質(zhì)疏松癥及癌癥的作用(J.Agric.Food.Chem.2001，49，1029)，而且因含有類雌性激素揚的物質(zhì)等大大降低了女性患更年期熱潮癥、冠狀動脈疾病和雌性激素有關(guān)的癌癥的幾率(Int.Cong.Series.2002，1229，189)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有pH敏感性兼具大豆分離蛋白的生理功能的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，該制備方法安全、簡單。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于它包括如下步驟1).按質(zhì)量百分比為5-95海藻酸鈉和5-95大豆分離蛋白，海藻酸鈉和大豆分離蛋白所占質(zhì)量百分比之和為100％，選取海藻酸鈉和大豆分離蛋白；將海藻酸鈉在室溫下機械攪拌使其溶解在水中形成均一透明的質(zhì)量濃度為1-4％的海藻酸鈉溶液；將大豆分離蛋白室溫下在水中攪拌均勻形成質(zhì)量濃度為1-4％的大豆分離蛋白溶液；2).將海藻酸鈉溶液與大豆分離蛋白溶液混合，得混合溶膠；3).利用注射器，將步驟2)所述混合溶膠滴入二價金屬離子交聯(lián)劑中，二價金屬離子交聯(lián)劑的質(zhì)量濃度為8-12％，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒；4).將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒經(jīng)蒸餾水潤洗，真空干燥，干燥后成粒徑為500-2000μm之間的微球——即得到粒徑分布均一的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的尺寸由注射器針頭的直徑控制，微球內(nèi)有載孔。
將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒在質(zhì)量濃度為3-7％的氫氧化鈉水溶液中處理12-36小時，通過大豆分離蛋白的降解釋出，得到大孔(微球內(nèi)載孔的孔徑為40-150μm)海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
所述的步驟1)中大豆分離蛋白溶液進行堿化處理，利用氫氧化鈉水溶液堿化大豆分離蛋白溶液，調(diào)節(jié)pH值至9-10，得堿化的大豆分離蛋白溶液。
所述的二價金屬離子交聯(lián)劑最佳為氯化鈣、硫酸鋅或硫酸鋇水溶液。
所述的海藻酸鈉和大豆分離蛋白的最佳質(zhì)量百分比為海藻酸鈉25-75，大豆分離蛋白25-75。
在步驟1)溶解海藻酸鈉或大豆分離蛋白之前，將模型藥物—雷尼替丁溶解在水中，形成質(zhì)量濃度為0.1-0.5％的藥物溶液，其余步驟不變，制得載藥海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
本發(fā)明采用上述方法制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒，經(jīng)二價金屬離子交聯(lián)后，在酸性條件下體系穩(wěn)定、不易吸水；當pH值與腸液條件相當時，該凝膠粒吸水溶脹，可作為緩釋藥物載體；當pH值為7.4(與結(jié)腸部位的pH值相當)時，羧酸—金屬離子的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，導致凝膠粒在5-9小時內(nèi)不同程度的崩解，因此該凝膠?？稍诮Y(jié)腸部位迅速釋藥。同時，隨著共混凝膠粒的溶脹或崩解，大豆分離蛋白溶出，可發(fā)揮其對人體的生理功能。由此可見，本發(fā)明的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒具有pH敏感性兼具大豆分離蛋白的生理功能的特點，可作為具有輔助治療和保健功能的pH敏感藥物載體。此外，利用堿對大豆分離蛋白分子降解作用，堿處理共混凝膠后可制備出大孔海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
本發(fā)明提供的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備工藝安全、簡單有效、符合環(huán)保要求。本發(fā)明所制備凝膠粒不僅繼承了海藻酸鈉經(jīng)金屬離子交聯(lián)后結(jié)構(gòu)的pH敏感性，還融入了大豆分離蛋白的生理功能，可制備出功能集成化的載藥體系。本發(fā)明所制備凝膠粒的粒徑、孔徑及微觀結(jié)構(gòu)可調(diào)節(jié)，特別是堿處理后可得到大孔海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。


圖1為實施例1的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒表面的電鏡照片圖，有很多可見皺折。
圖2為實施例1的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒截面的電鏡照片圖，有較多片層網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。
圖3為實施例5的堿處理的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒表面的電鏡照片圖，表面光滑且球發(fā)生塌陷。
圖4為實施例5的堿處理的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒截面電鏡照片圖，可觀測到大孔的形成。
比較圖1和圖3，發(fā)現(xiàn)凝膠粒經(jīng)堿處理后發(fā)生塌陷，并且凝膠粒表面變的光滑；比較圖2和圖4，發(fā)現(xiàn)凝膠粒內(nèi)部孔徑變大，片層狀結(jié)構(gòu)消失，僅殘留網(wǎng)絡(luò)支架結(jié)構(gòu)。這是由于大豆分離蛋白在堿性環(huán)境下發(fā)生降解、溶出，導致凝膠粒塌陷，原先附著有絮狀大豆分離蛋白的表面變得光滑，內(nèi)部孔徑變大。同時，還存在鈣離子與溶液中的鈉離子發(fā)生置換的可能性，此時鈣離子交聯(lián)海藻酸結(jié)構(gòu)解體，部分海藻酸溶出。這也是凝膠粒塌陷和內(nèi)部孔徑增大的原因之一。
具體實施例方式
為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合實施例進一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容局限于下面的實施例。
實施例1稱取大豆分離蛋白，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為3％的溶液，并用質(zhì)量濃度為10％的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH值為9-10；稱取海藻酸鈉，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為3％的溶液。按大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為25∶75、50∶50或75∶25混合溶液制得混合溶膠。用帶有9#針頭的注射器將混合溶膠注入質(zhì)量濃度為10％的氯化鈣溶液中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒，并后處理用蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。其中大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為25∶75的表面和截面的掃描電鏡照片分別示于圖1和圖2。測得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的平均粒徑為950±65μm。
按照上述制備方法，在步驟1)溶解大豆分離蛋白之前，取雷尼替丁溶解在水中，形成質(zhì)量濃度為0.1-0.5％的藥物溶液，其余步驟不變，制得載藥海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
實施例2稱取大豆分離蛋白，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為3％的溶液；稱取海藻酸鈉，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為3％的溶液。按大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為25∶75、50∶50或75∶25混合溶液制得混合溶膠。用帶有9#針頭的注射器將混合溶膠注入質(zhì)量濃度為10％的氯化鈣溶液中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒，用蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。測得其平均尺寸為950±65μm。
按照上述制備方法，在步驟1)溶解大豆分離蛋白之前，取雷尼替丁溶解在水中，形成質(zhì)量濃度為0.1-0.5％的藥物溶液，其余步驟不變，制得載藥海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
實施例3稱取大豆分離蛋白，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為1％的溶液；稱取海藻酸鈉，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為4％的溶液。按大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為5∶95混合溶液制得混合溶膠。用帶有16#針頭的注射器將混合溶膠注入質(zhì)量濃度為8％的氯化鈣溶液中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒，用蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。測得其平均粒徑為1800±120μm。
實施例4稱取大豆分離蛋白，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為4％的溶液；稱取海藻酸鈉，于20℃下溶于蒸餾水中，攪拌溶解配成質(zhì)量濃度為2％的溶液。按大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為85∶15混合溶液制得混合溶膠。用帶有12#針頭的注射器將混合溶膠注入質(zhì)量濃度為12％的硫酸鋇溶液中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒，用蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。測得其平均粒徑為1250±110μm。
實施例5凝膠粒的制備方法同實施例1，大豆分離蛋白與海藻酸鈉的質(zhì)量比為25∶75。將離子交聯(lián)凝膠粒分別于質(zhì)量濃度為3％、5％和7％的氫氧化鈉水溶液中分別浸泡38、18、12小時。在質(zhì)量濃度為5％氫氧化鈉水溶液中分別浸泡18小時的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的表面和截面的電鏡照片示于圖3和圖4。
實施例6海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，它包括如下步驟1).按質(zhì)量百分比為5海藻酸鈉和95大豆分離蛋白，選取海藻酸鈉和大豆分離蛋白；將海藻酸鈉在室溫下機械攪拌使其溶解在水中形成均一透明的質(zhì)量濃度為1％的海藻酸鈉溶液；將大豆分離蛋白室溫下在水中攪拌均勻形成質(zhì)量濃度為4％的大豆分離蛋白溶液，大豆分離蛋白溶液進行堿化處理，利用質(zhì)量濃度為8-15％的氫氧化鈉水溶液堿化大豆分離蛋白溶液，調(diào)節(jié)pH值至9-10，得堿化的大豆分離蛋白溶液；2).將海藻酸鈉溶液與堿化的大豆分離蛋白溶液混合，得混合溶膠；3).利用9#針頭的注射器，將步驟2)所述混合溶膠滴入質(zhì)量濃度為8％的硫酸鋇水溶液(二價金屬離子交聯(lián)劑)中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒；4).將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒在質(zhì)量濃度為3-7％的氫氧化鈉水溶液中處理12-36小時，5).將步驟4)處理后的離子交聯(lián)凝膠粒經(jīng)蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。干燥后成粒徑在1000±25μm之間的微球，在未干燥前測得微球內(nèi)的載孔的孔徑為80±25μm。
實施例7海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，它包括如下步驟1).按質(zhì)量百分比為25海藻酸鈉和75大豆分離蛋白，選取海藻酸鈉和大豆分離蛋白；將海藻酸鈉在室溫下機械攪拌使其溶解在水中形成均一透明的質(zhì)量濃度為1％的海藻酸鈉溶液；將大豆分離蛋白室溫下在水中攪拌均勻形成質(zhì)量濃度為4％的大豆分離蛋白溶液，大豆分離蛋白溶液進行堿化處理，利用質(zhì)量濃度為8-15％的氫氧化鈉水溶液堿化大豆分離蛋白溶液，調(diào)節(jié)pH值至9-10，得堿化的大豆分離蛋白溶液；2).將海藻酸鈉溶液與堿化的大豆分離蛋白溶液混合，得混合溶膠；3).利用9#針頭的注射器，將步驟2)所述混合溶膠滴入質(zhì)量濃度為8％的硫酸鋅水溶液(二價金屬離子交聯(lián)劑)中，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒；4).將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒在質(zhì)量濃度為3-7％的氫氧化鈉水溶液中處理12-36小時，5).將步驟4)處理后的離子交聯(lián)凝膠粒經(jīng)蒸餾水潤洗，真空干燥，得海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
權(quán)利要求
1.海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于它包括如下步驟1).按質(zhì)量百分比為5-95海藻酸鈉和5-95大豆分離蛋白，海藻酸鈉和大豆分離蛋白所占質(zhì)量百分比之和為100％，選取海藻酸鈉和大豆分離蛋白；將海藻酸鈉在室溫下機械攪拌使其溶解在水中形成質(zhì)量濃度為1-4％的海藻酸鈉溶液；將大豆分離蛋白室溫下在水中攪拌均勻形成質(zhì)量濃度為1-4％的大豆分離蛋白溶液；2).將海藻酸鈉溶液與大豆分離蛋白溶液混合，得混合溶膠；3).利用注射器，將步驟2)所述混合溶膠滴入二價金屬離子交聯(lián)劑中，二價金屬離子交聯(lián)劑的質(zhì)量濃度為8-12％，制得海藻酸鈉/大豆分離蛋白的離子交聯(lián)凝膠粒；4).將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒經(jīng)蒸餾水潤洗，真空干燥，干燥后得粒徑為500-2000μm的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒在質(zhì)量濃度為3-7％的氫氧化鈉水溶液中處理12-36小時。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于所述的步驟1)中大豆分離蛋白溶液進行堿化處理，利用氫氧化鈉水溶液堿化大豆分離蛋白溶液，調(diào)節(jié)pH值至9-10，得堿化的大豆分離蛋白溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于所述的二價金屬離子交聯(lián)劑為氯化鈣、硫酸鋅或硫酸鋇水溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于所述的海藻酸鈉和大豆分離蛋白的質(zhì)量百分比為海藻酸鈉25-75，大豆分離蛋白25-75。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于在步驟1)溶解海藻酸鈉或大豆分離蛋白之前，將雷尼替丁溶解在水中，形成質(zhì)量濃度為0.1-0.5％的藥物溶液，其余步驟不變，制得載藥海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種作為可生物降解藥物載體—海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法。海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒的制備方法，其特征在于它包括如下步驟1).按質(zhì)量百分比為5－95海藻酸鈉和5－95大豆分離蛋白，分別配成質(zhì)量濃度為1－4％的海藻酸鈉溶液、大豆分離蛋白溶液；2).將海藻酸鈉溶液與大豆分離蛋白溶液混合，得混合溶膠；3).利用注射器，將步驟2)所述混合溶膠滴入二價金屬離子交聯(lián)劑中，二價金屬離子交聯(lián)劑的質(zhì)量濃度為8－12％；4).將步驟3)制得的離子交聯(lián)凝膠粒經(jīng)蒸餾水潤洗，得到的海藻酸鈉/大豆分離蛋白共混凝膠粒。本發(fā)明兼具pH敏感特征和大豆分離蛋白的生理功能，制備工藝安全、簡單有效、重復操作性強，符合環(huán)保要求。
文檔編號A61P15/00GK1879886SQ20061001898
公開日2006年12月20日 申請日期2006年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月29日
發(fā)明者黃進, 周紫燕, 鄭化, 范紅蕾 申請人:武漢理工大學