專利名稱：：一種川芎嗪類化合物乳劑及其制備方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種川芎嗪類化合物乳劑及其制備方法，屬藥物領褲。技術背景心腦血管疾病是嚴重危害著人類健康的常見病、多發(fā)病。資料表明，因心腦血管疾病所造成的死亡已超過人口總死因的50%,世界衛(wèi)生組織把心腦血管疾病列為"世界公共衛(wèi)生的頭號敵人"。研發(fā)心腦血管藥物己成為全球醫(yī)療衛(wèi)生工作的重要戰(zhàn)略之一。川芎嗪(Ligustrazine，Lig;Tetramethylpyrazine，TMP)是從中藥傘形科植物川芎ai^s"c咖C/M;朋;f/o/w)的根莖中提取的有效成分，化學結構為2，3，5，6—四甲基吡嗪，結構式如下據報道，川芎嗪具有抑制血小板凝集、引起負性變力作用、抑制血管收縮等多種藥理活性，可作為擴血管藥、自由基清除劑、抗血栓和抗髙血壓藥物，在中國廣泛的用于治療冠狀動脈粥樣硬化性疾病和缺血性心腦血管疾病。然而，川莓嗪的藥代動力學研究表明川芎嗪生物利用度低，代謝快，半衰期短(詳見試驗例9),因此霈頻繁給藥以保班血藥濃度在有效范圍內，而頻繁給藥易導致積蓄中毒。因此，創(chuàng)造出一種新的髙效、低毒的川芎嗪制劑具有重要意義[1]。川芎嗪水榕性較差，因此通常將其制成鹽，增大其水溶性。目前臨床上常用的川芎嗪制劑有兩種，一種是川芎嗪磷酸鹽，另一種是川芎嗪鹽酸鹽。而這兩種給藥形式均未能有效解決其半衰期短、生物利用度低的問題。乳劑作為藥物載體具有以下優(yōu)點l.作為油相的大豆油及作為乳化劑的卵磷脂，對機體的安全性已被確認。大豆油和卵磷脂作為注射用輔料已被我國和世界其他多國藥典所收載。2.乳劑中液滴的分散度很大，生物利用度高。3.乳劑中的液滴能夠起到控制擴散的作用，可使藥物緩釋化，延長半衰期。4.能夠^藥物對靶組織的靶向性，達到高效、低毒的效果。目前已有多種藥物被制備成1^劑供臨床使用，如前列地爾乳劑、地塞米松棕櫚酸酯乳劑、魚肝油乳劑、J3旨溶性維生素乳劑、新霉素^^劑等。但是，使用乳劑作為藥物載體有兩個關鍵問題需要解決1.能否將藥物制備成乳劑取決于藥物本身的理化特性及其臨床適應癥，并非任何原料藥均適合制備成乳劑，也沒有任何一-個載藥乳劑的處方和制備工藝是能夠直接套用己有技術簡單獲得。2.將藥物制備成乳劑后能否達到預期的效果是無法簡單推知的，必須進行試驗加以驗證。迄今為止，閨內外尚未見任何有關川芎嗪乳劑的文獻及專利報道。
發(fā)明內容本發(fā)明提供了一種川芎嗪類化合物乳劑及其制備方法，它是以川芎嗪或川芎嗪親脂性衍生物中的一種為主要活性成分，加上藥學上常用的甘油三酯類化合物、乳化劑、注射用水或制藥用水，經乳化技術制備而得到。體外研究發(fā)現，脂質乳劑可被激活的巨噬細胞、中性粒細胞、血管內皮細胞所攝取。靜脈注射乳劑后，由于在炎癥、動脈粥樣硬化損傷血管及血栓部位存在有較正常組織更多的大量蓄積的單核巨噬細胞，可攝取和淸除血循環(huán)中的脂質，從而使乳劑載體可選擇性地在炎癥、血管損傷部位蓄積，使其成為抗炎及部分心血管疾病治療藥物的理想載體。在通常的藥物治療中，能夠達到病變部位的藥物僅為給藥量的1%甚至更少；在各種缺血性疾病的病變區(qū)域，能夠達到病變部位的藥量更是微乎其微。而利用乳劑與病變血管的特殊親和性，可使病變部位藥物量高于正常部位的數十倍至數百倍，從而顯著提高藥物治療指數"—5]。由此可見，藥物是否適宜制成乳劑，應考慮藥物本身的藥理活性。研究表明川芎嗪有抗血小板聚集，擴張小動脈，改養(yǎng)微循環(huán)活血化淤作用，并對已聚集的血小板有解聚作用。此外，還具有顯著的抗炎作用[-~7。因此，將川芎嗪制成乳劑，可以將川芎嗪的療效與靶向給藥技術理想結合。也就是說，川芎嗪本身具有的心腦血管療效與抗炎作用，使其成為乳劑這一靶向載體的理想原料藥。在確定川芎嗪適合制成乳劑后，進而應考慮其能否制成乳劑。一般而自'，藥物能否制成乳劑，主要取決于其在甘油三酯類化合物中及水中的溶解行為。因此，首先應對川芎嗪在各種藥用溶劑中的溶解行為進行研究，進而優(yōu)選處方。發(fā)明人經過實驗研究發(fā)現川芎嗪在甘油三酯類化合物(如大豆油)中的溶解度和在水中的溶解度基本相等，但對其油水分配行為的研究表明，川芎嗪在等體積的油水兩相中的含量比例約為5:16:1。此溶解特性表明川芎嗪親脂性明顯大于親水性，可以被制備成乳劑?；谝陨涎芯拷Y果，我們對川芎嗪乳劑的處方和制備工藝進行了研究。采用藥學中常用的均勻設計法分別對每100ml中甘油三醮量、川芎嗪量、乳化劑量按照3因素7水平進行了考察，考察范圍為甘油三酯550g、川芎嗪0.055g、乳化劑0.55g。以所得乳劑的粒徑及其在離溫(45iC)、低溫(5iC)及室溫(25iC)條件下的穩(wěn)定性為考察指標，優(yōu)選處方。結果意外的發(fā)現當制備的乳劑中川芎嗪含量遠大于川芎嗪油中溶解度時，仍具有良好的穩(wěn)定性，說明我們優(yōu)選的處方突破了川芎嗪大豆油中溶解度的限制，能大幅度提高乳劑的載藥量。結果顯示當制備的乳劑每100g中含川芎嗪0.1lg、甘油三酯類化合物10~25g、乳化劑11.5克時，所得乳劑樣品的粒徑分布范圍在0.1微米1微米，平均粒徑為0.2微米~0.4微米。在高溫(45C)、低溫(5TC)及室溫(25^C)條件下考察6個月，樣品的物理外觀、pH值、含量、平均粒徑及Zeta電位均無明顯變化，說明按照該處方制備的乳劑穩(wěn)定性良好，粒徑分布符合注射用乳劑的要求，可用于靜脈給藥或口服給藥?；谏鲜鲅芯拷Y果，本發(fā)明的技術方案提供了一種川芎嗪乳劑，本發(fā)明的另一技術方案是提供了一種川芎嗪親脂性衍生物乳劑。川芎嗪在人體內迅速被代謝成2—羥甲基一3,5,6—三甲基吡嗪，對改代謝物的研究表明，2—羥甲基一3，5，6—三甲基吡嗪具有較強的生理活性，是川芎嗪在人體內的活性代謝產物。有研究者以川芎嗪為陽性對照，觀察2—羥甲基一3，5，6—三甲基吡嗪對血液流變性的影響，發(fā)現二者都顯著降低全血高切變黏度、全血低切變黏度、血漿高切變黏度，降低血.小板黏附率，對紅細胞壓積無明顯作用，二者之間無顯著性差異。進—歩研究發(fā)現，2—羥甲基一3,5，6—三甲基吡嗪能明顯延長小鼠心電消失時間和血液凝固時間，明顯降低大鼠主動脈血壓，但對大鼠心率無明顯影響，這說明該化合物有改善心肌耐缺氧能力、降壓和抗凝等作用。該化合物與川芎嗪相比毒性更低，說明2—羥甲基一3，5，6—三甲基吡嗪是一種優(yōu)良的治療心血管疾病的藥物w。由此可見，2—羥甲基一3，5,6—三甲基吡嗪也適宜制備成乳劑。發(fā)明人經過研究發(fā)現2—羥甲基—3,5,6—三甲基吡嗪在甘油三酯類化合物(如大豆油)中的溶解度不大，因此如要將其制備成乳劑，須對其進行親脂性化學修飾，以期增大其在甘油三酯類化合物中的溶解度。因此，我們首次釆用內源性脂肪酸(硬脂酸、軟脂酸、月桂酸)與2—羥甲基—3,5，6_三甲基吡嗪成酯，顯著增加了其在甘油三酯類化合物中的溶解度，進而將親脂性修飾后的衍生物制備成乳劑?；谝陨夏康模覀兪状魏铣闪巳缦禄衔?。2—羥甲基一3，5,6—三甲基吡嗪硬脂酸酯，結構式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>2—羥甲基一3，5,6—三甲基吡嗪軟脂酸酯，結構式如下:'(CH2)14CH3An八2—羥甲基一3，5,6—三甲基吡嗪月桂酸酯，結構式如下'(CH2)10CH3對上述三種化合物的研究表明，其油溶性遠大于水溶性，因此將其通稱為川芎嗪親脂性衍生物，其結構通式如下其中R為一(CH2)16CH3、——(CH2)14CH3、——(CH2)，0CH3。乳劑具有緩釋、靶向作用，因此將上述三種化合物制備成乳劑能進一歩提高其治療效果。對川芎嗪親脂性衍生物乳劑的處方篩選采用與川芎嗪乳劑處方篩選類似方法，得到的優(yōu)選處方為每100g乳劑中含川芎嗪親脂性衍生0.5g4g、甘油三酯類化合物10g25g、乳化劑lg1.5g,其余為注射用水或制藥用水。基于上述研究結果，本發(fā)明的技術方案提供了一種以川彎嗪類化合物為主要活性成分的乳劑，本發(fā)明的另一項技術方案是提供了該乳劑的制備方法。本發(fā)明提供的乳劑是以川芎嗪類化合物為主要活性成分，加上藥學上常用的甘油三酯類化合物、乳化劑、注射用水/制劑用水制備而成，其組成按重量百分比計，包括川芎嗪類化合物0.05~5%、甘油三酯類化合物1030%、乳化劑0.55%、附加劑010%、其余為注射用水或制藥用水。其粒徑分布范圍在0.1微米1微米，平均粒徑為0.2微米~0.4微米，因此可用于靜脈注射或口服給藥。其中，所述的甘油三酯類化合物為符合中國藥典規(guī)定的長鏈甘油三酯和/或中鏈甘油三酯的一種或二種，其中長鏈甘油三酯為符合中國藥典規(guī)定的大豆油、玉米油、麻油、椰子油、紅花油、綿子油、茶油中的一種；所述的乳化劑為符合中國藥典規(guī)定的豆磷脂、卵磷脂、帕洛沙姆188(F-68)中的一種或二種。本發(fā)明提供的乳劑中還可加入附加劑。附加劑可以是符合中國藥典規(guī)定的pH調節(jié)劑、穩(wěn)定劑、等滲調節(jié)劑、抗氧劑中的一種或幾種，其含量為每100ml乳劑010;其屮pH調節(jié)劑為鹽酸或敏氧化鈉穩(wěn)定劑為油酸和/或油酸鈉；等滲調節(jié)劑為甘油或甘露醇；抗氧劑為維生素E和/或維生素C棕櫚酸醮。本發(fā)明提供的乳劑還可制備成無水乳液的形式。在本發(fā)明提供的乳劑中加入一種或幾種藥學上可接受的冷凍保護劑和/或一種或幾種骨架形成劑，進行冷凍千燥處理，即可得到無水乳液組合物，該組合物加水又可再分散而形成具有相應粒徑大小及分布的液態(tài)乳劑。本發(fā)明提供的乳劑的制備方法如下a、稱取處方量的川芎嗪類化合物、甘油三酯類化合物、乳化劑、附加劑、注射用水或制藥用水備用；b、將川芎嗪類化合物、油溶性附加劑與甘油三酯類化合物混合形成油相，預熱備用；C、將乳化劑、水溶性附加劑與注射用水或制藥用水混合形成水相，預熱備用；d、在髙速攪拌條件下滴加油相入水相，至油相均勻分散于水相中，得乳白色初乳；d、取上述初乳轉移至髙壓乳勻機內，勻化至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑。采用本發(fā)明所提供的制備方法制備的乳劑，粒徑分布范圍在O.l微米1微米，平均粒徑為0.2微米0.4微米，符合注射用乳劑的要求，可用于靜脈給藥或口服給藥。在不同條件下(高溫、低溫、室溫〉進行6個月的考察，樣品的物理外觀、pH值及含量均無明顯變化，說明按照該制備方法制備的乳劑穩(wěn)定性良好，可推廣應用于工業(yè)化大生產。以本發(fā)明制備的乳劑為試驗藥物，將其與市售磷酸川芎嗪注射液、鹽酸川芎嗪注射液進行對比研究，結果表明本發(fā)明制備的乳劑比市售制劑生物利用度提高了2倍，半衰期延長了3倍；藥效學研究顯示本發(fā)明制備的乳劑給藥劑量為市售制劑一半的情況下即能達到與市售制劑相同的療效，說明本發(fā)明制備的乳劑達到了減低劑量、提高藥效的效果。綜上所述，按本發(fā)明技術方案制備的川芎嗪類化合物乳劑突破了川芎嗪在油中溶解度的限制，即使在大于川芎嗪油中溶解度的情況下，仍能出人意料的保持長期穩(wěn)定，顯著增加r乳劑的載藥量與藥物濃度，有利于降低生產成本和方便臨床用藥。同時，本發(fā)明制備的乳劑與現有的市售磷酸川芎嗪注射液、鹽酸川芎嗪注射液相比，顯著提高了藥物的生物利甩度和半衰期；并且顯著增強了藥物療效。顯然，根據本發(fā)明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內容所實現的技術均屬于本發(fā)明的范圍。參考文獻[l]程先超，劉新泳，徐文方.川芎嗪心腦血管藥理學研究進展.中國醫(yī)院藥學雜志.2005,25(7):661663[2]Igarashi,R.，Takenaga,M.,Matsuda，T.Distributionoflipidmicrospherepreparations.Zte2_z>.AW.1996，20s147154[3]Yukihiro.C.,ToshiyaM.，Yoshiro.K.，etal.UptakebyvascularsmoothmuscleeelIsplaysanimportantroleintargetingoflipidmicrospheresincorporatingprostaglandinintoathickenedintima."/"e5"ci朋ce2001，68s933~942[4]Mizushi腦，Y..，Hamano,T.，Haramoto，S.，etal.Distributionoflipidmicrospher()sincorporatingprostaglandinEitovascularlesions.Zro"艱丄Zew/rof/*.￡we"《.^zlc油1990，41:269272[5]Kiyokawa，S.，Igarashi,R.,Iwayama,T.,etal.""Tc-labeled1ipidmicrospheres(LM)wouldbeusefulforanimagingstudyofthosediseases.7>/7afflia1987，7:551557[6]范治云,劉五蘭.川彎嗪對急性炎癥的抗炎作用.中藥藥理與臨床.1999，15(6):13M[7]吳海云，王士雯等.川芎嗪在急性冠狀動脈綜合癥中抗炎作用的研究.中國中西醫(yī)結合急救雜志.2004,11(4):196~198[8]陳學敏，窗永孝等.2—羥甲基一3，5,6—三甲基吡嗪對心血管系統的藥理作用.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志.1998,29(6):258260附圖l川芎嗪靜脈乳劑的粒徑及其分布附圖2川芎嗪靜脈乳劑的Zeta電位測定結果具體實施方式實施例l:將12g注射用卵癬脂和22g注射用甘油置髙速組織搗碎機中，加入700m預熱的注射用水，攪拌使磷脂均勻分散在水相中；另取2克川芎嗪加入200g預熱的注射用大豆油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入髙速攪拌的水相中，保溫攪拌5分鐘(10000轉/分鐘)，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置高壓乳勻機內反復勻化3次，至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑。該乳劑可供靜脈注射。實施例2:將15g注射用豆磷脂、10g帕洛沙姆188(F-68)與20g注射用甘露醇溶解分散于650ml預熱的注射用水中，制備成均勻分散的水相；另取4g川芎嗪加入250g預熱的注射用油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入髙速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘(IOOOO轉/分鐘)，制備得乳白色初乳。將初乳加注射用水至1000毫升，置高壓乳勻機內勻化3次，至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，滅菌，即得成品乳劑，該乳劑可供靜脈注射。實施例3:將15g注射用豆磷脂和25g注射用甘油溶解分散于適量預熱的注射用水中，制備得到均勻分散的水相；另取2克川芎嗪加入150g預熱的注射用油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入高速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘，制備得乳白色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置高壓乳勻機內反復勻化至平均粒徑達0,5微米以下，充氮灌裝，滅菌，即得成品乳劑，該乳劑可供靜脈注射。實施例4:將5g豆磷脂溶解分散于800ral預熱的制藥用水中，制備得到均勻分散的水相；另取0.5克川芎嗪和0.5g油酸加入100g預熱的綿子油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入離速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘(10000轉/分鐘)，制備得乳白色初乳。將初乳加制藥用水至1000毫升，用氫氧化鈉試液調pH值至7.5,置高壓乳勻機內反復勻化3次，充氮灌裝，滅菌，即得成品乳劑，該乳劑可供口服給藥。實施例5:將30g豆磷脂和20g帕洛沙姆188(F-68)溶解分散于600ml預熱的制藥用水中，制備得到均勻分散的水相；另取150g麻油和150g茶油混合預熱，投入15g川芎嗪和lg維生素E，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入高速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘(10000轉/分鐘)，制備得乳白色初乳。將初乳加制藥用水至1000毫升，置高壓乳勻機內反復勻化3次，充氣灌裝，滅菌，即得成品乳劑，該乳劑可供口服給藥。實施例6:將15g注射用卵磷脂和25g注射用甘油溶解分散于650ml預熱的注射用水，制備得到均勻分散的水相；另取50克2—羥甲基一3，5，6—三甲基吡嗪硬脂酸酯加入250g預熱的注射用大豆油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入高速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘(10000轉/分鐘)，得乳白色初乳，將初乳加注射用水至iooo毫升，置高壓乳勻機內反復勻化至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑。該乳劑可供靜脈注射。實施例7:將10g注射用豆磷脂、5g帕洛沙姆188(F-68)和20g注射用甘露醉溶解分散于700ml預熱的注射用水，制備得到均勻分散的水相；另取20克2—羥甲基一3，5，6—三甲基吡嗪軟脂酸酯加入200g預熱的注射用大豆油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入W速攪拌的水相中，保溫攪拌5分鐘(10000轉/分鐘)，得乳白色初乳，將初乳加注射用水全:1000毫升，覽高壓乳勻機內反復勻化至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑。該乳劑可供靜脈注射。實施例8:將4g卵磷脂和lg帕洛沙姆188(F-68)溶解分散于800ml預熱的制藥用水，制備得到均勻分散的水相；另取1.5克2—羥甲基一3,5,6—三甲基吡嗪月杜酸酯加入10()g預熱的紅花油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入高速攏拌的水相中，保溫攪拌5分鐘(10000轉/分鐘)，得乳白色初乳，將初乳加制藥用水至1000毫升，置高壓乳勻機內反復勻化3次，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑。該乳劑可供口服給藥。實施例9:將15g注射用卵磷脂和50g注射用甘露醇溶解分散于700rd預熱的注射用水，制備得到均勻分散的水相；另取3克川芎嗪加入200g預熱的注射用大豆油中，溶解完全后得油相。將油相緩慢加入高速攪拌的水相中，保溫攪拌10分鐘(10000轉/分鐘)，得乳向色初乳，將初乳加注射用水至1000毫升，置高壓乳勻機內反復勻化至平均粒徑達0.5微米以F，灌裝，低溫急速預凍，冷凍干燥，即得成品凍干乳劑。該乳劑加水后可再次分散成具有相應粒徑分布的含水乳劑，可供靜脈注射。試驗例1本發(fā)明藥物粒徑分布與Zeta電位檢査我們對本發(fā)明實施例1制備的乳劑的粒徑分布與Zeta電位進行了測定，粒徑分布測定結果見附圖1,Zeta電位測定結果見附圖2(儀器Malvern—3000型粒徑分布及Zeta電位測定儀)。由附圖l可知，本發(fā)明實施例l制備的乳劑粒徑分布均勻，PDI為0.089，呈正態(tài)分布，平均粒徑283.5nm:由附圖2可知，本發(fā)明實施例1制備的乳劑Zeta電位為-25.97mV。粒徑分布與Zeta電位測定結果表明該乳劑粒徑分布均勻，穩(wěn)定性良好，符合靜脈注射乳劑要求。試驗例2本發(fā)明藥物氌定性檢査我們對本發(fā)明實施例1制備的乳劑進行了為期6個月的穩(wěn)定性考察，分別置于室溫(25D、低溫OT)、高溫(45t:)條件下，于0、1、2、3、6月取樣考察性狀、pH值、含ft、平均粒徑及Zeta電位，結果見表l。表1本發(fā)明實施例1制備的乳劑穩(wěn)定性考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>由表1可知，本發(fā)明實施例1制備的乳劑在室溫(251C)、低溫(5"C)、高溫(451C)條件保存6個月，各項指標無明顯變化，預計其有效期可達2年，表明本發(fā)明實施例1制備的乳劑穩(wěn)定性良好.試驗例3本發(fā)明藥物無菌檢査取本發(fā)明實施例1制備的乳劑，按照中國藥典2005年版中的規(guī)定，采用直接接種法進行無菌檢査，以金黃色葡萄球菌、生孢梭菌、白色念珠菌為陽性對照，結果表明本發(fā)明實施例1制備的乳劑無菌檢査合格，可用于靜脈給藥或口服給藥。試驗例4本發(fā)明藥物細菌內毒素檢査取本發(fā)明實施例1制備的乳劑，按照中國藥典2005年版中的規(guī)定，用鱟試劑進行細菌內毒素檢査，以中國藥品生物制品檢定所提供的細菌內毒素工作標準品為陽性對照，結果表明本發(fā)明實施例1制備的乳劑細菌內毒素檢査合格，可用于靜脈給藥或口服給藥。試驗例5本發(fā)明藥物過敏性檢査方法將豚鼠按體重隨機分為3組，每組6只。第l組各豚鼠間日一次，連續(xù)四次腹腔注射本發(fā)明實施例1制備的乳劑0.5ml/只致敏，然后于末次致敏后的第10大，豚鼠足趾靜脈注射本發(fā)明實施例l制備的乳劑1.0ml/只激發(fā)；第2組各豚鼠間U—次，連續(xù)四次腹腔注射生理鹽水0.5m]/只致敏，然后于末次致敏后的第10天，豚鼠足趾靜脈注射生理鹽水1.Oml/只激發(fā)；第3組各豚鼠間日一次，連續(xù)四次腹腔注射15M雞蛋清液0.5ml/只致敏，然后于末次致敏后的第10天，豚鼠足趾靜脈注射15M雞蛋清液1.0ml/只激發(fā)。三組均在激發(fā)注射后立刻至30分鐘觀察每只動物的反應。結果第l、2組豚鼠激發(fā)注射后30分鐘內，無一只出現豎毛、呼吸困難、噴嚏、搔畀、咳嗽、對販、痙攣、旋轉及死亡；第3組豚鼠激發(fā)注射后2分鐘內，全部發(fā)生呼吸困難跳躍、痙攣及死亡。結論本發(fā)明實施例l制備的乳劑無致敏作用，可用于靜脈注射。試驗例6本發(fā)明藥物溶血性檢査方法取21只洗凈并經生理鹽水注射液淌過的干燥試管，分成平行三組，每組7只試骨，編號為17。每組由一人負責試驗及結果觀察。每組各試管分別加入2%紅細胞懸液2.5111],其中15號試管分別加入本發(fā)明實施例l制備的乳劑0.5ml、0.4ml、0.3ml、0.2ml、0.lml及生理鹽水注射液2.Oml、2.lml、2.2ml、2.3ml、2.4ml;6號試管加入生理鹽水注射液2.5ml;7號試管加入蒸餾水2.5ml，全部搖勻后，置37"C恒溫水箱中溫孵，開始時每15分鐘觀察一次，1小時后每隔1小時觀察一次，連續(xù)觀察4小時。結果各組16號試管4小時內均未見溶血，紅細胞沉入管底，上層液體無色澄明，振搖紅細胞能分散；7號試管15分鐘內溶血，上層液體顯紅色。結論本發(fā)明實施例l制備的乳劑無溶血作用，可用于靜脈注射。試驗例7本發(fā)明藥物剌激性檢査方法:取鍵康新西^兔3只,均于左耳耳緣靜脈滴注本發(fā)明實施例1制備的乳劑25m]/kg，右耳耳緣靜脈滴注生理鹽水25ml/kg，每R—次，連續(xù)靜滴三天，于靜滴第—天開始，每天給藥前、給藥3小時、24小時觀察注射部位有無水腫、紅斑，木次注射后24小時，頸動脈放血，處死動物，從耳根剪下耳朵置10%甲醆溶液中固定，石蠟包埋切片，H.E染色，作組織病理學鏡檢。結果兔耳緣靜脈注射部位未見有水腫和紅斑組織病理學觀察兔耳緣靜脈附近表皮和真皮組織結*^完好，禾見變性、壞死、缺失和過度角化，耳錄靜脈血管結構正常，未見血栓，血管無變性、壞死。結論本發(fā)明實施例1制備的乳劑無刺激性，可用于靜脈注射。試驗例8本發(fā)明藥物配伍租定性檢査取本發(fā)明實施例1制備的乳劑，分別以5。/^葡萄糖注射液及0.9%拔化鈉注射液稀釋10倍，于室溫(25'C)下放置12小時，考察性狀、pH值及含量，結果見表2。表2本發(fā)明實施例1制備的乳劑配伍穩(wěn)定性考察結果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>由表2可知，本發(fā)明實施例1制備的乳劑與5%葡萄糖注射液及0.9%氯叫fc鈉注射液配伍穩(wěn)定性良好。試驗例9本發(fā)明藥物生物利用度與藥代動力學試驗以本發(fā)明實施例'1藥物為試驗藥物，市售磷酸川芎嗪注射液(生產廠家甘肅蘭藥藥業(yè)集團有限貴任公司)為對照藥物A、市售鹽酸川芎嗪注射液(生產廠家南寧楓葉藥業(yè)有限公司)為對照藥物B,給藥劑量均為12mg/kg，比較三種制劑在正常犬體內的藥代動力學指標，結果見表3。表3三種制劑在正常犬體內的藥代動力學試驗結果(n-6)組別試驗藥物組對照藥物A組對照藥物B組t1/2(rain)64.41±4.3924.67±3.5917.62±3.21AUC(jig/ml■min)841.72±69.63390.39±44.55402.48±39.22結果表明在相同,給藥劑量下，本發(fā)明實施例1制備的乳劑與市售瞵酸川芎嗪注射液和鹽酸川芎嗪注射液相比，生物利用度有明顯提髙，半衰期延長(P〈0.01)。試lft例io本發(fā)明藥物藥理試驗以本發(fā)明實施例1制備的乳劑為試驗藥物，市售鹽酸川考嗪注射液性產廠家南寧楓葉藥業(yè)有隈公司)為對照藥物，以大鼠心肌缺血預處理的整體動物模型為試驗模型，以心率失常發(fā)生率及持續(xù)時間、心肌梗塞面積、乳黢脫氫酶(LDH)和雜酸肌酸激酶(CPK)活性為考察指標,比較二者對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用，結果見表4。表4兩種制劑對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用試驗結果(n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結果顯示同等劑量下本發(fā)明實施例1制備的乳劑對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用明顯優(yōu)于市售鹽酸川芎嗪注射液，二者之間具有顯著性差異(P〈0.05),而本發(fā)明實施例l制備的乳劑中等劑量組(20mg/kg)對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用與市售鹽酸川芎嗪注射液離劑量組(40mg/kg)的作用效果相當，二者之間無顯著性差異(P〉0.05)，說明本發(fā)明實施例1制備的乳劑達到了減低劑量、提高藥效的效果。權利要求1、一種川芎嗪類化合物乳劑，其組成按重量百分比計，包括川芎嗪類化合物0.05～5％、甘油三酯類化合物10～30％、乳化劑0.5～5％、附加劑0～10％、其余為注射用水或制藥用水。其中所述的川芎嗪類化合物是川芎嗪或川芎嗪親脂性衍生物中的一種，具有如下的結構通式其中R為-H、中的一種。2、根據權利要求l所述的乳劑，其特征在于其組成按重量百分比計，含川芎嗪0.053%、甘油三,類化合物1025%、乳化劑0.52%、附加劑0~5%，其余為注射用水或制藥用水。3、根據權利要求1所述的乳劑，其特征在于其組成按重量百分比計，含川芎嗪親脂性衍生物0;35%、甘油三酶類化合物1025%、乳化劑0.5~2%、附加劑05%,其余為注射用水或制藥用水.。4、根據權利要求2或3所述的乳劑，其特征在于乳化劑選自豆磷脂、卵磷脂、泊洛沙姆188(F-68)中的一種或二種；甘油三酯類化合物選,長鏈甘油三酯和/或中鏈甘油三酯的一種或二種。5、根據權利要求4所述的乳劑，其特征在于所述的長鏈甘油三酯選自大豆油、玉米油、麻油、椰子油、紅花油、綿子油、茶油中的一種。6、根據權利要求2或3所述的乳劑，其特征在于所述的附加劑為pH調節(jié)劑、穩(wěn)定劑、等滲調節(jié)劑、抗氧劑中的一種或幾種，其中所述pH調節(jié)劑為鹽酸或氫氧化鈉；所述穩(wěn)定劑為油酸和/或油黢鈉；所述等滲調節(jié)劑為甘油或甘露酵；所述抗氧劑為維生素E和/或維生素C7、根據權利要求2或3所述的乳劑，其形式還可以是無水乳液組合物，其特征在于所述的無水乳液組合物屮含有至少一種藥學上可接受的冷凍保護劑和/或至少--種骨架形成劑，該組合物加水又可再分散而形成具有相應粒徑大小及分布的液態(tài)乳劑。8、根據權利要求1所述的乳劑的制備方法，包括如下歩驟a、稱取處方量的川芎嗪類化合物、甘油三酯類化合物、乳化劑、附加劑、注射用水或制藥用水備用b、將川芎嗪類化合物、油溶性附加劑與甘油三酯類化合物混合形成油相，預熱備用；c、將乳化劑、水溶性附加劑與注射用水或制藥用水混合形成水相，預熱備用；d、在高速攪拌條件下滴加油相入水相，至油相均勻分散于水相中，得乳白色初乳；e、取上述初乳轉移至髙壓乳勻機內，勻化至平均粒徑達0.5微米以下，充氮灌裝，熱壓滅菌，即得成品乳劑e全文摘要本發(fā)明涉及一種川芎嗪類化合物乳劑及其制備方法，屬于醫(yī)藥
技術領域：
。該乳劑處方組成按重量百分比計，包括川芎嗪類化合物0.05～5％、甘油三酯類化合物10～30％、乳化劑0.5～5％、附加劑0～10％，其余為注射用水或制藥用水。本發(fā)明川芎嗪類化合物乳劑的制備工藝包括初乳制備、高壓均質與濕熱滅菌等步驟，該乳劑可用于治療閉塞性血管疾病、冠心病、心絞痛等心腦血管疾病。本發(fā)明川芎嗪類化合物乳劑可顯著增強藥物療效，具有緩釋、靶向、毒副作用低等特點。本發(fā)明制備的川芎嗪類化合物乳劑穩(wěn)定性良好，安全性試驗檢查合格，符合臨床藥用要求，可用于靜脈注射和口服給藥。文檔編號A61K9/107GK101152147SQ200610021978公開日2008年4月2日申請日期2006年9月29日優(yōu)先權日2006年9月29日發(fā)明者宇吳,臻梁,毛聲俊,輝金申請人:四川思達康藥業(yè)有限公司