專利名稱：：化合物s2在制備抗癌藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及細胞生物學領域，提供了化合物s2在制備抗癌藥物中的應用。
背景技術：
：腫瘤是嚴重危害人類健康的疾病。近年來腫瘤的發(fā)病率日見增長，目前全世界每年有600多萬人死于癌癥，新發(fā)病例800萬，這數(shù)字還在逐年增加。我國13億人口中每年有百萬新發(fā)癌癥病人，待治療病人約200萬，死亡約130萬。預計到2006年年底，我國將有170萬人死于癌癥，癌癥已成為第一位死因。惡性腫瘤俗稱癌癥，是人體的器官和組織細胞發(fā)生變異后引起的無限制生長的和擴散的腫塊。它可以破壞人體的器官和組織功能，消耗體內(nèi)有限能量，而使人的生命活動受到損害，甚至導致死亡。有絲分裂是細胞周期過程中很重要的一個階段。腫瘤與正常細胞的區(qū)別就是無限制增生，即有絲分裂失去正常調(diào)控。大多數(shù)的腫瘤其發(fā)生原因是有絲分裂所致的基因組的不穩(wěn)定性，基因組的不穩(wěn)定又來源于染色體的不穩(wěn)定，染色體的不穩(wěn)定是癌癥的特征性標志。染色體的分離、中心粒的復制和分離發(fā)生異常，會導致每個細胞染色體數(shù)目的異常，既非整倍體，增加雜合性缺失的機會，抑癌基因的缺失或原癌基因的數(shù)目增加都會使細胞生命代謝和信號傳導發(fā)生紊亂，增加癌變的機會。激酶在完成有絲分裂和細胞周期調(diào)控中起著重要作用，從而成為目前分子生物學的研究熱點。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供化合物s2在制備抗癌藥物中的應用。本發(fā)明提供了結構如所示的化合物在制備抗癌藥物中的應用。上述化合物的名稱為(3Z)-3-(1W-pyrrol-2-ylmethylene)-1,3-dihydro-2H-indol-2-one，簡稱為s2，分子量為210，可通過市售獲得。本發(fā)明還包括對該化合物進行常規(guī)替代所得到的化合物。本發(fā)明中，化合物s2可用于制備抗癌藥物。本發(fā)明按標準MTS實驗檢測了化合物s2對于腫瘤細胞和癌細胞的作用情況，結果顯示，本發(fā)明的s2對多種腫瘤細胞和癌細胞，例如肝癌細胞、結腸癌細胞、胃癌細胞和肺癌細胞等，都有殺傷或者抑制效果。進一步研究顯示，本發(fā)明的化合物s2對磷酸激酶Aurora-B有抑制作用。這進一步證實了本發(fā)明的化合物s2具有抑制惡性腫瘤的作用。惡性腫瘤俗稱癌癥，是人體的器官和組織細胞發(fā)生變異后引起的無限制生長的和擴散的腫塊。激酶在完成有絲分裂和細胞周期調(diào)控中起著重要作用，從而成為目前分子生物學的研究熱點。AIK(Aurora/lpllKinase)是目前已知的五大調(diào)節(jié)性激酶家族之一。到目前為止，人類Aiks家族共發(fā)現(xiàn)三個成員Aikl、Aik2(Aurora-B)和Aik3。其中，Aik2主要在細胞有絲分裂期起作用。它作為染色體伴隨蛋白參與調(diào)節(jié)著絲粒與紡錘體微管的相互作用，在中期至后期這一瞬時，Aik2由著絲粒遷移至細胞中間區(qū)帶[Bischoff,J.R.,Anderson,L.,Wa/.(1998)￡MB6>J17,3052-3065]，末期分布于細胞盤和后有絲分裂橋，參與后有絲分裂事件，故與染色體的分離和胞質(zhì)分裂有關。Aik2的突變使分裂溝的形成被抑制，并導致形成多核細胞。Aik2定位于17q13，這一區(qū)域在人類多種癌細胞中出現(xiàn)異常，而在異常倍性的結腸癌細胞株中Aik2高表達。因此，科研人員紛紛尋找與Aik2作用的分子，并將其作為抗腫瘤藥物來研究。本發(fā)明還建立了移植瘤小鼠模型，用于檢測s2對體內(nèi)腫瘤和癌細胞的作用。結果也顯示s2可以抑制體內(nèi)腫瘤生長。本發(fā)明中，由化合物s2制備的抗癌藥物是由含有效治療量的化合物s2和藥學上的載體或者賦形劑組成的藥物組合物。本發(fā)明中，所述的有效應用量為每天O.l毫克/千克至20毫克/千克體重。本發(fā)明中，所制備的抗腫瘤藥物可以是針劑或片劑等。本發(fā)明s2及其類似物等，當在治療上進行施用(給藥)時，可提供不同的效果。通常，可將這些物質(zhì)配制于無毒的、惰性的和藥學上可接受的水性載體介質(zhì)中，其中pH通常約為5-8，較佳地pH約為6-8，盡管pH值可隨被配制物質(zhì)的性質(zhì)以及待治療的病癥而有所變化。配制好的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑進行給藥，其中包括(但并不限于)肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、皮內(nèi)、或局部給藥。以本發(fā)明的s2為例，可以將其與合適的藥學上可接受的載體聯(lián)用。這類藥物組合物含有治療有效量的蛋白質(zhì)和藥學上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括(但并不限于)鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。藥物制劑應與給藥方式相匹配。本發(fā)明的S2可以被制成針劑形式，例如用生理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液通過常規(guī)方法進行制備。諸如片劑和膠囊之類的藥物組合物，可通過常規(guī)方法進行制備。藥物組合物如針劑、溶液、片劑和膠囊宜在無菌條件下制造。活性成分的給藥量是治療有效量，例如每天約1微克/千克體重-約5毫克/千克體重。此外，本發(fā)明的s2還可與其他治療劑一起使用。當本發(fā)明的s2多肽被用作藥物時，可將治療有效劑量的該多肽施用于哺乳動物，其中該治療有效劑量通常至少約10微克/千克體重，而且在大多數(shù)情況下不超過約80毫克/千克體重，較佳地該劑量是約500微克/千克體重-約2毫克/千克體重。當然，具體劑量還應考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi)的。癌癥已成為第一位死因，殺傷腫瘤和癌細胞生長的物質(zhì)也由此成為了目前生物醫(yī)藥界的研究熱點。本發(fā)明的s2對多種腫瘤細胞和癌細胞都有殺傷或者抑制效果；同時，本發(fā)明的化合物s2對磷酸激酶Aurora-B有抑制作用。這都證明了本發(fā)明的化合物s2具有抑制惡性腫瘤的作用。將本發(fā)明的化合物s2可用于與合適的藥學上可接受的載體聯(lián)用制備抗癌藥物，以抑制腫瘤繼續(xù)生長。圖l為s2對HepG2細胞抑制結果圖?？梢姡景l(fā)明的s2對人類肝癌細胞株(HepG2)的IC50(半數(shù)致死)為約0.75uM。具體實施例方式實施例l體外酶活抑制實驗應用大腸桿菌表達系統(tǒng)，克隆、表達并純化得到了人源Aurora-B蛋白激酶(NCBI登陸號為NP—004208),用于高通量篩選篩選實驗。采用放射性同位素技術，AURORAB磷酸化底物MBP(UPSTATE公司，CAT#13-110，lot#27845),將溶液中[y-33P]-ATP上的y-^P轉移共價結合到底物，使其Ser磷酸化，產(chǎn)生具有同位素標記的底物WP—MBP。最后加入閃爍液通過液體閃爍計數(shù)儀計數(shù)來檢測該酶活性，可以觀察不同化合物對其活性的抑制情況，以初步評價化合物的活性。平行實驗結果顯示，本發(fā)明的化合物s2對Aurora-B蛋白激酶活性抑制的IC50為5.54nM。實施例2癌細胞抑制實驗按照標準MTS實驗進行，其中具體參數(shù)如下種板1000個細胞/孔化合物S2培養(yǎng)時間96h加藥品后處理時間3h化合物濃度梯度單位:uM重復實驗6組數(shù)據(jù)給出形式平均值士標準差細胞株人類肝癌細胞株(HepG2)結果顯示，本發(fā)明的化合物s2對HepG2抑制的IC50約為0.75uM。具體見下表<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權利要求1.結構如所示的化合物在制備抗癌藥物中的應用。2.如權利要求l所述的應用，其特征在于，將權利要求1所示化合物用于制備抗癌藥物。3.如權利要求1所述應用，其特征在于，該抗癌藥物是由含有效應用量的如權利要求1所示化合物和藥學上的載體或者賦形劑組成的藥物組合物。4.如權利要求3所述應用，其特征在于，所述的有效應用量為每天O.l毫克/千克至20毫克/千克體重。5.如權利要求l所述應用，其特征在于，該抗癌藥物是針劑或片劑。全文摘要本發(fā)明涉及細胞生物學領域，提供了化合物s2在制備抗癌藥物中的應用。癌癥已成為第一位死因，殺傷腫瘤和癌細胞生長的物質(zhì)也由此成為了目前生物醫(yī)藥界的研究熱點。本發(fā)明的s2對多種腫瘤細胞和癌細胞都有殺傷或者抑制效果；同時，本發(fā)明的化合物s2對磷酸激酶Aurora-B有抑制作用。這都證明了本發(fā)明的化合物s2具有抑制惡性腫瘤的作用。將本發(fā)明的化合物s2可用于與合適的藥學上可接受的載體聯(lián)用制備抗癌藥物，以抑制腫瘤繼續(xù)生長。文檔編號A61K9/08GK101112371SQ20061003091公開日2008年1月30日申請日期2006年9月7日優(yōu)先權日2006年9月7日發(fā)明者龍余,唐麗莎,張昊星,佳李,郎慶宇申請人:復旦大學