專利名稱：銀杏葉提取物的制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植物提取物特指制備銀杏葉提取物的工藝方法。
背景技術：
銀杏葉(Trifolium pratense L.)是銀杏科銀杏屬植物銀杏(Ginkgo biloba L.)的葉。銀杏葉提取物含有黃酮類、萜內酯類、多酚類、有機酸、聚異戊烯醇多種微量元素等有效成分，具有抗氧化作用、抗血小板激活因子作用、降血脂、血糖作用、改善心、腦血液循環(huán)作用、對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的保護作用等藥理臨床作用。以銀杏葉和銀杏葉提取物為原料制成的藥品、保健品、化妝品及其他相關產品風靡全球，銀杏葉提取物多年穩(wěn)居的全球銷售額前列。銀杏是我國的特產植物之一，也是我國大宗出口植物原料藥品種之一，資源豐富，約占世界總量70％以上，具有廣闊的市場前景。
國內外銀杏葉提取物的提取方法主要有水或有機溶劑法水或有機溶劑提取，結合樹脂精制的方法，如CN116532A；超臨界流體提取法，如CN172669；高速逆流色譜提取法；酶法等方法。
用水提法提取銀杏葉，近年來也有相關的專利或報道。以水提法工藝生產的銀杏葉提取物(EGB)，現(xiàn)在提的最多的是在水中添加HB一96添加劑的水提工藝，以添加HB一96特殊添加劑的水作溶劑，將銀杏葉中有效成份充分浸提出來。
這些方法存在一定的不足如有機溶劑法生產成本高，環(huán)境影響大；結合樹脂精制的方法生產成仍然高，且產品水溶性不好；超臨界流體提取法和高速逆流色譜提取法等在用于工業(yè)生產時，在設備上需要投入比較多的資金，生產成本高。
用新鮮銀杏葉為原料提取，近年來也有相關的專利或報道。
CN1436784A(生產高活性銀杏葉提取物的萃取劑及其提取與分析方法)，該發(fā)明采用亞硫酸鹽或亞硫酸氫鹽0.001-0.5水補充至100，pH值為2.0-5.5的萃取劑，用這種萃取劑提取后，提取液過濾，濾液過樹脂吸附柱，用低級醇洗脫，洗脫液濃縮，干燥得到銀杏葉提取物。在該專利中，有關原料可以是銀杏鮮葉，或是經(jīng)過干燥的銀杏葉，所述的葉不需要經(jīng)過粉碎。該發(fā)明在水中添加了硫酸鹽或亞硫酸氫鹽添加劑，對原料沒有作相關處理而是直接進行水進行浸提，因而容易影響后續(xù)收率和提取率，其相應的生產成本也較高。
CN1481793(一種銀杏葉提取物及含有它的注射液)，該發(fā)明涉及一種銀杏葉提取物，該提取物通過以下方法制備鮮銀杏葉清洗打漿，稠厚漿液用乙醇提取，醇提液用堿調pH8-10，過濾，濾液用酸調pH3-8，優(yōu)選5-6，過濾，濾液回收乙醇，獲得黑棕色粘稠物，熱水提取，水提液冷藏過濾，濾液上大孔樹脂柱脫鹽，梯度乙醇洗脫，回收乙醇，任選檢測濃銀杏葉提取液總黃酮含量。該發(fā)明還涉及銀杏葉注射液，其制備包括進一步將上述提取物制成注射液。該發(fā)明主要采用的是醇提取，工藝步驟也較多也較為復雜，不利于實際生產操作，生產成本也會相應增加。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的為提供一種成本低、工藝相對簡單、又能提高提取率、產物雜質少、且環(huán)境污染少的銀杏葉提取物的制備方法。
本發(fā)明中提取物的制備是通過下述方式實現(xiàn)的本發(fā)明采用新鮮銀杏葉為原料，將新鮮銀杏葉加水打漿，壓榨，得壓榨液和壓榨渣，將壓榨液提取分離制成銀杏葉提取物。
本發(fā)明中通過壓榨得到的壓榨液可得到原料中大部分生物活性成分，直接用壓榨液提取分離，就可得到具有大部分活性成分的銀杏葉提取物。
所述的壓榨液通過如下方式提取分離將壓榨液，過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱，用水和乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后得壓榨液的粗提物用90％以上的乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
由于壓榨渣中還有一小部分活性成分，針對壓榨渣部分，發(fā)明人用水提法，再將壓榨渣進行提取分離，這樣可進一步綜合利用了新鮮銀杏葉原料，也同時提高了提取率和收率。
所述的壓榨渣通過如下方式提取分離將壓榨渣用熱水提取，過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱，用水和乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后得壓榨渣的粗提物用90％以上的乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
或是將干燥后得到的壓榨渣的粗提物和壓榨液的粗提物合并用90％以上乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
所述的加水打漿是用重量比為2-10∶1的水與鮮銀杏葉混合勻漿。
所述的銀杏葉提取物的原料采用的是新鮮狀態(tài)的，4-10月份采摘的銀杏綠葉，最佳采收季節(jié)是6-7月。最佳采收樹齡為3-5年。
發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明中按下述工藝生產的銀杏葉的提取物為最優(yōu)的工藝路線。首先用新鮮銀杏葉加水打漿，壓榨后得到壓榨液和壓榨渣，壓榨液過大孔吸附樹脂柱，用水和乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后用90％以上的乙醇提取精制得銀杏葉提取物。這一部分壓榨液所得到的提取物的含量(銀杏葉總黃酮醇苷大于30％，總萜內酯大于10％)。壓榨渣用熱水提取，過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱，用水和乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后經(jīng)90％以上的乙醇提取精制得銀杏葉提取物，這一部分由壓榨渣所得的提取物的含量(銀杏葉總黃酮醇苷大于24％，總萜內酯大于6％)。這種工藝方法最簡便、成本低、雜質量少，環(huán)境污染小。
由本發(fā)明所得的銀杏葉提取物活性物質黃酮醇苷不小于24％，總萜內酯不小于6％，屬于“綠色工藝”，溶劑殘留少，生物活性高，可作為銀杏葉膠囊、片劑、膠丸、滴丸等，尤其是銀杏葉注射液、健康飲料、化妝品等的優(yōu)質原料，進行深加工，制成相應的產品。
在發(fā)明公開號CN1481793中采用新鮮銀杏葉打漿，漿液則直接用醇提取，與本發(fā)明中壓榨液和壓榨渣分別處理方法不同，這種分別處理使得本發(fā)明其后的工藝程序更有針對性，有利于提高提取率、減少雜質等，且本發(fā)明中壓榨渣也用水提取，不是用醇提取。本發(fā)明由壓榨液制得提取物為收率最大部分，這種分開處理是根據(jù)壓榨液已經(jīng)將大部分活性成分提取出來，壓榨渣部分用水再次進入細胞內部進行提取，在抓住重點的同時綜合利用了新鮮銀杏葉原料，也在同時提高了提取率和收率。
本發(fā)明采用采取水提法，先進行壓榨處理，有機溶劑用量大大減少，由于是新鮮銀杏葉體內生物活性成分為均態(tài)存在，細胞液系統(tǒng)穩(wěn)定，而其細胞壁比較脆弱，這時進行勻漿壓榨，可使細胞壁破壞，活性成分被快速提取出來。而現(xiàn)有技術在多用干葉進行有機溶劑提取，而干葉的細胞壁的角質化，水難以進入細胞內部，細胞液系統(tǒng)環(huán)境發(fā)生改變，只能用有機溶劑提取。這種提取的原理是有機溶劑由于擴散、滲透作用逐漸通過細胞壁透入到細胞內，溶解了活性物質，而造成細胞內外的濃度差，于是細胞內的濃溶液不斷向外擴散，有機溶劑又不斷進入細胞中，如此多次往返，直至細胞內外溶液濃度達到動態(tài)平衡時，將此飽和溶液濾出，繼續(xù)多次加入新溶劑，才盡最大可能將活性成分溶出。而這樣的提取不但提高了生產成本，而有機溶劑在提取過程中也增加了分離的難度。本發(fā)明由壓榨后所得的壓榨液獲得的銀杏葉提取物的收率超過3％，活性成分含量黃酮醇苷大于30％，總萜內酯大于10％，足以證明其優(yōu)勢，用榨汁液過柱，醇洗脫液濃縮干燥，后用90％以上乙醇精制，這是現(xiàn)在所有專利和報道中都未從涉及過的工藝。
而壓榨后的壓榨渣，雖然活性成分含量沒有壓榨液高，用水提取，水易于進入細胞內部，獲得的提取物活性成分含量黃酮醇苷大于24％，總萜內酯大于6％。
采用本發(fā)明的工藝，有機溶劑用量大大減少，而得到具有較高的收率和高含量的成品，尤其體現(xiàn)在由壓榨液部分的優(yōu)化處理所制得的提取物上，表明本發(fā)明是低成本，高收率，高含量的環(huán)保工藝方法，為以銀杏葉提取物深加工成藥品、保健品、化妝品等提供基礎技術支持，有利于順利開發(fā)相關產品。
發(fā)明人通過對銀杏葉不同的處理方式對銀杏葉中黃酮醇苷和萜內酯的含量的分析，發(fā)現(xiàn)常用的干燥銀杏葉(烘干或是曬干)的黃酮醇苷和萜內酯類含量與鮮品相比，差距相當明顯，鮮銀杏葉中黃酮醇苷和萜內酯類含量最高?，F(xiàn)有的銀杏葉提取工藝多用銀杏葉干品為原料提取，而根據(jù)對干、鮮成分的對比得知鮮葉中有效成分含量高于干葉，且隨貯存時間的增長而含量漸低。因此本發(fā)明中采用新鮮狀態(tài)的銀杏葉為原料。具體數(shù)據(jù)見下表表1不同原藥材處理方式的銀杏葉的黃酮醇苷和萜內酯的含量

發(fā)明人通過對新鮮藥材的整個生長周期的考察，發(fā)現(xiàn)有效成分生物量最高的時期，以此階段銀杏葉為原料，能大大降低工業(yè)化生產成本，提高產品得率。結果發(fā)現(xiàn)樹齡為3-5年，6-7月的銀杏葉的新鮮藥材為最佳原料狀態(tài)方式。具體數(shù)據(jù)見下表，表2，6月12-16日間收集不同樹齡的新鮮銀杏葉，進行含量測定的所得到的數(shù)據(jù)表，表3，對4年生樹齡的不同時間新鮮銀杏葉的含量測定。
表2 6月12-16日間收集不同樹齡的新鮮銀杏葉的黃酮醇苷和萜內酯的含量

發(fā)明人沒有對樹齡為三年以下的銀杏葉作處理，一方面因為一年和兩年生的銀杏，植株小，樹葉少，也就是說銀杏葉生物總量不多，另一方面，在這一階段的采摘不利于銀杏的生長。因此，發(fā)明人僅對樹齡在3年以上的銀杏作研究分析。
在對樹齡對銀杏葉的黃酮醇苷和萜內酯的含量分析中，發(fā)現(xiàn)3-5年生的銀杏葉黃酮醇苷和萜內酯的含量最高，是最佳的采收樹齡。但是考慮到銀杏葉的生產商綜合利益，結合對銀杏葉的含量分析，3-10年生的銀杏葉都可用，只是，隨著樹齡的增長，原料中黃酮醇苷和萜內酯的含量降低，會影響提取率和收率。
表3 4年生樹齡的不同時間的新鮮銀杏葉的黃酮醇苷和萜內酯的含量

銀杏葉在秋末會變黃，一般為綠葉狀態(tài)時間在4-10月，4月到5月下旬位于銀杏葉的展葉期，銀杏葉生物量少，且銀杏葉采摘期過早會對銀杏的生長產生不利影響，因此本發(fā)明中，原料為4-10月采摘的銀杏綠葉，而6-7月為原料最佳采收期。
發(fā)明人考慮到銀杏葉在次生代謝過程中其黃酮醇苷和萜內酯等有效成分在生長期的高水平積累的特征，結合優(yōu)化的工藝方法，提高了原料的有效成分的提取率，有利于后期的高純度提取物制備以及提高產品得率，降低成本；以此提取物為原料深加工，開發(fā)藥品、化妝品、保健品等具有更優(yōu)的品質。
本發(fā)明中將新鮮銀杏葉加水打漿，壓榨后得壓榨液和壓榨渣，將壓榨液和壓榨渣分別提取分離，制成銀杏葉提取物。經(jīng)壓榨所得的壓榨液和壓榨渣的提取分離方法也可用其它現(xiàn)有方法進行制備，如有機溶劑法例如對壓榨渣采用乙醇提法，將壓榨渣用乙醇回流提取，提取液濃縮，熱水提取，過濾，濾液過柱，用水和乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥得銀杏葉提取物；如超臨界流體提取法，例如采用超臨界二氧化碳提取法、酶法、高速逆流色譜提取法等。
具體實施例方式
以下實施例旨在說明本發(fā)明而不是對本發(fā)明的進一步限定。
實施例1選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于7月采摘的樹齡為3年的鮮銀杏葉1kg，加2kg水破碎成勻漿，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物，將壓榨液粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得8.2g提取物，測得含量為黃酮醇苷34.4％，萜內酯14.1％。
原料折干計總收率為2.79％。
實施例2選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于7月采摘的樹齡為4年的鮮銀杏葉1kg，加2kg水破碎成勻漿，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物，將壓榨液粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得6.0g提取物，測得含量為黃酮醇苷32.6％，萜內酯14.1％。
壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物，將壓榨渣粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得3.4g提取物，測得含量為黃酮醇苷26.8％，萜內酯8.3％。
原料折干計總收率為3.10％。
實施例3選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于7月采摘的樹齡為4年的鮮銀杏葉1kg，加2kg水破碎成勻漿，再加1kg的水攪拌1小時，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物。
壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物。
將壓榨液粗提物和壓榨渣粗提物合并，用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得9.8g提取物，測得含量為黃酮醇苷28.9％，萜內酯11.2％。
原料折干計總收率為3.23％。
實施例4選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為3年的鮮銀杏葉1kg，加4kg水破碎成勻漿，再加4kg的水攪拌1小時，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物。將壓榨液粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得8.1g提取物，測得含量為黃酮醇苷34.9％，萜內酯14.4％。
壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物，將壓榨渣粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得3.5g提取物，測得含量為黃酮醇苷27.2％，萜內酯7.8％。
原料折干計總收率為3.89％實施例5選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為3年的鮮銀杏葉1kg，加2kg水破碎成勻漿，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物，壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物。
將壓榨液粗提物和壓榨渣粗提物合并，用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得12g提取物，測得含量為黃酮醇苷32.3％，萜內酯12.1％。
原料折干計總收率為4.02％實施例6選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為7年的鮮銀杏葉1kg，加4kg水破碎成勻漿，再加6kg的水攪拌1小時，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物，將壓榨液粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得5.4g提取物，測得含量為黃酮醇苷26.9％，萜內酯13.2％。
壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物，將壓榨渣粗提物用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得3.6g提取物，測得含量為黃酮醇苷26.5％，萜內酯7.3％。
原料折干計總收率為3.06％。
實施例7選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為7年的鮮銀杏葉1kg，加5kg水破碎成勻漿，再加2kg的水攪拌1小時，壓榨。壓榨液用濾紙抽濾后過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨液粗提物。
壓榨渣用5倍量熱水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集70％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到壓榨渣粗提物。
將壓榨液粗提物和壓榨渣粗提物合并，用90％乙醇回流提取，提取液經(jīng)醇回收、提取液濃縮、干燥后得9.3g提取物，測得含量為黃酮醇苷26.1％，萜內酯10.6％。
原料折干計總收率為3.16％。
實施例8選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為3年的鮮銀杏葉600kg，加入2000kg水，破碎成漿，再加水1000kg，攪拌1小時，稀釋液過板框壓濾機制成澄清透明的壓濾液，濾液過D101大孔吸附樹脂柱，用水洗脫后，用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至10-15波美，真空干燥得壓濾液粗提物，壓濾液粗提物以90％乙醇回流提取1小時，過濾，干燥得銀杏葉提取物4.02kg，測得含量為黃酮醇苷34.6％，萜內酯14.7％。
壓濾渣以5倍量水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥得壓濾渣粗提物，壓濾渣粗提物以90％乙醇回流提取1小時，過濾，干燥得銀杏葉提取物1.9kg，測得含量為黃酮醇苷25.7％，萜內酯7.6％。
原料折干計總收率為3.46％。
實施例9選取新鮮狀態(tài)的、無腐壞、于6月采摘的樹齡為3年的鮮銀杏葉600kg，加入2400kg水，破碎成漿，再加水3000kg，攪拌1小時，稀釋液過板框壓濾機制成澄清透明的壓濾液，濾液過D101大孔吸附樹脂柱，用水洗脫后，用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮至10-15波美，真空干燥得壓濾液粗提物。
壓濾渣以5倍量水提取2小時，過濾，濾液過D101大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，后用70％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥得壓濾渣粗提物。
將壓濾液粗提物和壓濾渣粗提物合并，以90％乙醇回流提取1小時，過濾，干燥得銀杏葉提取物7.03kg，測得含量為黃酮醇苷30.6％，萜內酯12.2％。
原料折干計總收率為3.71％。
權利要求
1.銀杏葉提取物的制備方法，將新鮮銀杏葉加水打漿，壓榨，得壓榨液和壓榨渣，將壓榨液進行提取分離，制成銀杏葉提取物。
2.根據(jù)權利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，所述的壓榨液通過如下方式提取分離將壓榨液過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱，先用水，然后用乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后得壓榨液的粗提物用90％以上乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
3.根據(jù)權利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，再將壓榨渣進行提取分離，制成銀杏葉提取物。
4.根據(jù)權利要求3所述的銀杏葉提取物的制備方法，所得的壓榨渣通過如下方式提取分離用熱水提取，過濾，濾液過大孔吸附樹脂柱，先用水，然后用乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮、干燥后得壓榨渣的粗提物用90％以上乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
5.根據(jù)權利要求2或4所述的銀杏葉提取物的制備方法，將壓榨渣的粗提物和壓榨液的粗提物合并用90％以上乙醇提取精制得銀杏葉提取物。
6.根據(jù)權利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，所述的新鮮銀杏葉加水打漿是用重量比為2-10∶1的水與鮮銀杏葉混合打漿。
7.根據(jù)權利要求1所述的銀杏葉提取物的制備方法，所述的新鮮銀杏葉是4-10月采摘的銀杏綠葉。
8.根據(jù)權利要求7所述的銀杏葉提取物的制備方法，所述的新鮮銀杏葉是由樹齡為3-5年銀杏樹，于6-7月采摘的銀杏綠葉。
全文摘要
銀杏葉提取物的制備方法，將新鮮銀杏葉加水打漿，壓榨后得壓榨液和壓榨渣，將壓榨液提取分離，制成銀杏葉提取物。本發(fā)明基于原料選擇的優(yōu)勢基礎和對工藝的優(yōu)化，尤其是針對壓榨液部分的優(yōu)化處理和不使用有機溶劑提取，使得本發(fā)明為成本低、工藝相對簡單、又能提高收率和提取率、減少雜質和環(huán)境污染的方法。
文檔編號A61P9/10GK1957958SQ20061003207
公開日2007年5月9日 申請日期2006年8月9日 優(yōu)先權日2006年8月9日
發(fā)明者曾建國, 繆建榮, 歐陽勇, 羅琪, 袁莉 申請人:湖南九匯現(xiàn)代中藥有限公司